Name: determination of reproductive competence by confirming pubertal onset and performing a fertility assay in mice and rats
Uploaded: 2018-10-13T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Determination of Reproductive Competence by Confirming Pubertal Onset and Performing a Fertility Assay in Mice and Rats at JoVE.com

Bu yayın temeli olan ilk iş için Katılımcı Yazarlar teşekkür ederiz. Aitor Aguirre, Genevieve E. Ryan ve Erica L. Schoeller el yazması hazırlama yardım için teşekkürler. Jessica Sora Lee ve Austin Chin el yazması ile teknik destek için teşekkürler. H.M.H. Eunice Kennedy Shriver Ulusal Enstitüsü Çocuk Sağlığı ve insan geliştirme Ödülü numarası R00HD084759 altında Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından desteklenmiştir.

Tüm yöntem tanımlamak burada kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi Michigan State University tarafından onaylanmış ve bakım ve Laboratuvar hayvanlarının kullanım kılavuzu uygun olarak yürütülen.
1. belirlemek Pubertal başlangıçlı
<ol><li>Giyim, en azından kurumsal yönergeleri izleyin, temiz bir önlük ve temiz eldiven giymek gereklidir. Her zaman temiz eldiven giymiş fareler başa.</li>
	<li>Çalışma alanının masaya bir yastık koyarak hazırlamak.<ol>
<li>Bi...

<ol>
	<li>Schneider, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Energy+balance+and+reproduction.">Energy balance and reproduction.</a> Physiology and Behavior. 81 (2), 289-317 (2004).</li><li>Walton, J. C., Weil, Z. M., Nelson, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+photoperiod+on+hormones,+behavior,+and+immune+function.">Influence of photoperiod on hormones, behavior, and immune function.</a> Frontiers Neuroendocrinology. 32 (3), 303-319 (2012).</li><li>Hoffmann, H. M., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+small+population+of+hypothalamic+neurons+govern+fertility:+the+critical+role+of+VAX1+in+GnRH+neuron+development+and+fertility+maintenance.">A small population of hypothalamic neurons govern fertility: the critical role of VAX1 in GnRH neuron development and fertility maintenance.</a> Neuroscience communications. 2, (2016).</li><li>Kauffman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+differentiation+and+the+Kiss1+system:+Hormonal+and+developmental+considerations.">Sexual differentiation and the Kiss1 system: Hormonal and developmental considerations.</a> Peptides. , (2009).</li><li>Bronson, F. H., Dagg, C. P., Snell, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Reproduction. , (1966).</li><li>Chehab, F. F., Mounzih, K., Lu, R., Lim, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+onset+of+reproductive+function+in+normal+female+mice+treated+with+leptin.">Early onset of reproductive function in normal female mice treated with leptin.</a> Science. , (1997).</li><li>Yoshimura, S., Yamaguchi, H., Konno, K., Ohsawa, N., Noguchi, S., Chisaka, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observation+of+Preputial+Separation+is+a+Useful+Tool+for+Evaluating+Endocrine+Active+Chemicals.">Observation of Preputial Separation is a Useful Tool for Evaluating Endocrine Active Chemicals.</a> J Toxicologic Pathology. 18, 141-157 (2005).</li><li>Ahima, R. S., Dushay, J., Flier, S. N., Prabakaran, D., Flier, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leptin+accelerates+the+onset+of+puberty+in+normal+female+mice.">Leptin accelerates the onset of puberty in normal female mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 99 (3), 391-395 (1997).</li><li>Bohlen, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+short-day+photoperiod+delays+the+timing+of+puberty+in+female+mice+via+changes+in+the+kisspeptin+system.">A short-day photoperiod delays the timing of puberty in female mice via changes in the kisspeptin system.</a> Frontiers in Endocrinology. 9 (FEB), 1-9 (2018).</li><li>Shahab, M., Mastronardi, C., Seminara, S. B., Crowley, W. F., Ojeda, S. R., Plant, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+hypothalamic+GPR54+signaling:+A+potential+mechanism+for+initiation+of+puberty+in+primates.">Increased hypothalamic GPR54 signaling: A potential mechanism for initiation of puberty in primates.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. , (2005).</li><li>Hoffmann, H. M., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+small+population+of+hypothalamic+neurons+govern+fertility:+the+critical+role+of+VAX1+in+GnRH+neuron+development+and+fertility+maintenance.">A small population of hypothalamic neurons govern fertility: the critical role of VAX1 in GnRH neuron development and fertility maintenance.</a> Neuroscience communications. 2, 5-9 (2016).</li><li>Navarro, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+Neurokinin+B+in+the+Control+of+Female+Puberty+and+Its+Modulation+by+Metabolic+Status.">Role of Neurokinin B in the Control of Female Puberty and Its Modulation by Metabolic Status.</a> Journal of Neuroscience. 32 (7), 2388-2397 (2012).</li><li>Hoffmann, H. M., Tamrazian, A., Xie, H., P&#233;rez-Mill&#225;n, M. I., Kauffman, A. S., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterozygous+deletion+of+ventral+anterior+homeobox+(Vax1)+causes+subfertility+in+mice.">Heterozygous deletion of ventral anterior homeobox (Vax1) causes subfertility in mice.</a> Endocrinology. 155 (10), 4043-4053 (2014).</li><li>Kauffman, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Kisspeptin+Receptor+GPR54+Is+Required+for+Sexual+Differentiation+of+the+Brain+and+Behavior.">The Kisspeptin Receptor GPR54 Is Required for Sexual Differentiation of the Brain and Behavior.</a> Journal of Neuroscience. 27 (33), 8826-8835 (2007).</li><li>Teles, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brief+report:+A+GPR54-activating+mutation+in+a+patient+with+central+precocious+puberty.">Brief report: A GPR54-activating mutation in a patient with central precocious puberty.</a> New England Journal of Medicine. , (2008).</li><li>Korenbrot, C. C., Huhtaniemi, I. T., Weiner, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preputial+separation+as+an+external+sign+of+pubertal+development+in+the+male+rat.">Preputial separation as an external sign of pubertal development in the male rat.</a> Biology of reproduction. , (1977).</li><li>Gaytan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+validation+of+a+method+for+precise+dating+of+female+puberty+in+laboratory+rodents:+The+puberty+ovarian+maturation+score+(Pub-Score).">Development and validation of a method for precise dating of female puberty in laboratory rodents: The puberty ovarian maturation score (Pub-Score).</a> Scientific Reports. 7 (March), 1-11 (2017).</li><li>Caligioni, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+reproductive+status/stages+in+mice.">Assessing reproductive status/stages in mice.</a> Current Protocols in Neuroscience. , 1-11 (2010).</li><li>Mayer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Timing+and+completion+of+puberty+in+female+mice+depend+on+estrogen+receptor+-signaling+in+kisspeptin+neurons.">Timing and completion of puberty in female mice depend on estrogen receptor -signaling in kisspeptin neurons.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (52), 22693-22698 (2010).</li><li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performing+Vaginal+Lavage,+Crystal+Violet+Staining,+and+Vaginal+Cytological+Evaluation+for+Mouse+Estrous+Cycle+Staging+Identification.">Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification.</a> Journal of Visualized Experiments. (67), 4-9 (2012).</li><li>Hedrich, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Laboratory Mouse. , (2012).</li><li>Hoffmann, H. M., Trang, C., Gong, P., Kimura, I., Pandolfi, E. C., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+Vax1+from+Gonadotropin-Releasing+Hormone+(GnRH)+Neurons+Abolishes+GnRH+Expression+and+Leads+to+Hypogonadism+and+Infertility.">Deletion of Vax1 from Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH) Neurons Abolishes GnRH Expression and Leads to Hypogonadism and Infertility.</a> Journal of Neuroscience. 36 (12), 3506-3518 (2016).</li><li>Sloboda, D. M., Howie, G. J., Pleasants, A., Gluckman, P. D., Vickers, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-+and+postnatal+nutritional+histories+influence+reproductive+maturation+and+ovarian+function+in+the+rat.">Pre- and postnatal nutritional histories influence reproductive maturation and ovarian function in the rat.</a> PLoS ONE. , (2009).</li><li>Manual, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breeding+Strategies+for+Maintaining+Colonies+of+Laboratory+Mice.">Breeding Strategies for Maintaining Colonies of Laboratory Mice.</a> Management. , (2007).</li><li>Kennedy, G. C., Mitra, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+weight+and+food+intake+as+initiating+factors+for+puberty+in+the+rat.">Body weight and food intake as initiating factors for puberty in the rat.</a> The Journal of Physiology. , (1963).</li><li>Sisk, C. L., Foster, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neural+basis+of+puberty+and+adolescence.">The neural basis of puberty and adolescence.</a> Nature Neuroscience. 7 (10), 1040-1047 (2004).</li><li>Nelson, J. F., Karelus, K., Felicio, L. S., Johnson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+influences+on+the+timing+of+puberty+in+mice.">Genetic influences on the timing of puberty in mice.</a> Biology of reproduction. , (1990).</li><li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL/6J+mice:+I.+Cycle+frequency,+length+and+vaginal+cytology.">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biology of reproduction. , (1982).</li><li>Falconer, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weight+and+age+at+puberty+in+female+and+male+mice+of+strains+selected+for+large+and+small+body+size.">Weight and age at puberty in female and male mice of strains selected for large and small body size.</a> Genetical Research. , (1984).</li><li>Rodriguez, I., Araki, K., Khatib, K., Martinou, J. C., Vassalli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+vaginal+opening+is+an+apoptosis-dependent+process+which+can+be+prevented+by+the+overexpression+of+Bcl2.">Mouse vaginal opening is an apoptosis-dependent process which can be prevented by the overexpression of Bcl2.</a> Developmental Biology. , (1997).</li><li>Lomniczi, A., Wright, H., Ojeda, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+regulation+of+female+puberty.">Epigenetic regulation of female puberty.</a> Frontiers in Neuroendocrinology. 36, 90-107 (2015).</li><li>Selmanoff, M. K., Goldman, B. D., Ginsburg, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+serum+luteinizing+hormone,+follicle+stimulating+hormone+and+androgen+levels+in+males+of+two+inbred+mouse+strains.">Developmental changes in serum luteinizing hormone, follicle stimulating hormone and androgen levels in males of two inbred mouse strains.</a> Endocrinology. 100 (1), 122-127 (1977).</li><li>Larder, R., Clark, D. D., Miller, N. L. G., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothalamic+Dysregulation+and+Infertility+in+Mice+Lacking+the+Homeodomain+Protein+Six6.">Hypothalamic Dysregulation and Infertility in Mice Lacking the Homeodomain Protein Six6.</a> Journal of Neuroscience. 31 (2), 426-438 (2011).</li><li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Milk+yield+and+composition+in+mice:+Effects+of+litter+size+and+lactation+number.">Milk yield and composition in mice: Effects of litter size and lactation number.</a> Comparative Biochemistry and Physiology -- Part A: Physiology. 84 (1), 127-133 (1986).</li><li>Chahoud, I., Paumgartten, F. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+litter+size+on+the+postnatal+growth+of+rat+pups:+is+there+a+rationale+for+litter-size+standardization+in+toxicity+studies.">Influence of litter size on the postnatal growth of rat pups: is there a rationale for litter-size standardization in toxicity studies.</a> Environmental research. 109 (8), 1021-1027 (2009).</li><li>Pandolfi, E. C., Hoffmann, H. M., Schoeller, E. L., Gorman, M. R., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Haploinsufficiency+of+SIX3+Abolishes+Male+Reproductive+Behavior+Through+Disrupted+Olfactory+Development,+and+Impairs+Female+Fertility+Through+Disrupted+GnRH+Neuron+Migration.">Haploinsufficiency of SIX3 Abolishes Male Reproductive Behavior Through Disrupted Olfactory Development, and Impairs Female Fertility Through Disrupted GnRH Neuron Migration.</a> Molecular Neurobiology. , (2018).</li></ol>

Farelerin genel refah bir başarılı doğurganlık tahlil21için önemlidir. Doğurganlık tahlil yaparken bu stres neden olabilir gibi fiziksel olarak fareler üzerinde her gün kontrol etmek önemlidir. Bu aynı zamanda stresli olarak daha sık kafes değişiklikleri, kaçının. İdeal olarak kafes değişiklikleri haftada en fazla 1 - 2 kez yapılır. Karanlık aşamasında ışığa maruz üreme gece Rodents olumsuz etkiler. Üreme odasında ışıkları karanlık saatlerinde kapatmayın. Od...

Ergenliğe geçiş cinsel olgunluk ve üreme yeterlilik ulaşmak için gereklidir. Pubertal geçiş ve bakım doğurganlık erişkin dönemde de hipofiz gonad hipotalamik eksen (Şekil 1) olarak adlandırdığı üreme eksen tarafından düzenlenir. Pubertal başlangıçlı zamanlaması ve bakım doğurganlık yavru ve anne1,2yaşama şansını artırmak için iç hem de çevresel faktörler tarafından sıkı bir şekilde düzenlenir. Bu iletişim kuralı fare ve sıçanlar üreme yetki değerlendirmek için bir doğurganlık çalışma ayarı önce cinsel olgunluğa onaylamak için pubertal başlangıçlı belirlemek için non-invaziv bir yaklaşım sağlar.
Bir doğurganlık çalışma cinsel olgun hayvanlarda gerçekleştirilir ve sonra hayvanlar ergenlik gitti başlatılabilir. Pubertal başlangıçlı önce üreme eksen durgun olduğunu ve cinsel olgunlaşma, gonadotropin - releasing hormon (GnRH), anahtar sürücü ergenlik (Şekil 1) başlatmak için yeterli miktarda hipofiz üzerine serbest bırakılır. Pubertal başlangıçlı medyan Hazretleri, artan GnRH sürümdeki sonuçları karmaşık bir süreçtir. GnRH luteinizan hormon (LH) ve hormon (FSH) salgılanması hipofiz, üzerinden iki hormon gonad olgunlaşma ve üreme işlevi (Şekil 1)3,4,5 için gerekli uyarıcı folikül teşvik .
Hakaret üreme eksenine düşük doğurganlık neden ve ayrıca peşin veya gecikme pubertal başlangıçlı. Pubertal başlangıçlı ve üreme yetkinlik zamanlaması etkilemek için bilinen koşullar kimyasallar6,7, artış/azalma vücut ağırlığı1,8, değişimler engellemeden endokrin maruz yer gün uzunluğu2,9 ve genetik mutasyonlar10,11,12,13,14,15.
Cinsel olgunluğa başlangıçlı bir doğurganlık tahlil ayarlama önce tamamlanması gereken kritik bir adımdır. Prepusyal ayırma, vajinal açılış ve ilk estrus pubertal başlangıçlı belirleme avantajları vardır bu yordamları, non-invaziv özellikleri kanı toplama ve fedakarlık hayvan16, gerekmez 17.
Pubertal başlangıçlı belirlenir sonra düzgün bir doğurganlık çalışma ayarı üreme eksen bütünlüğü hakkında önemli bilgiler sağlar ve genellikle daha fazla çalışmalar (arıtma) deneysel hayvan üreten ikinci bir avantaja sahiptir 18. bu protokol için açıklanan doğurganlık çalışma Kur hem küçük ve büyük açıkları ve erkeklerde üreme yeterlilik algılayabilir. Anahtar değerlendirilen parametreler yer 1) zaman ilk çöp, 2) belirli bir zaman dilimi ve 3) çöp boyutu oluşturulan çöp sayısı için. Son olarak, doğurganlık bozulma nedenini belirlemek için yapılan çalışmalar takip türü için öneriler yer almaktadır.
Açıklanan protokol fareler için başvurur ve transgenik Farelerde yapılan işler temsilcisi verileri yansıtacak. Ancak, dahil tüm iletişim kuralları fareler aynı derecede geçerlidir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1092">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Sterile Cotton Balls</td>
			<td style="width:167px;">Fisher</td>
			<td style="width:280px;">22456885</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Surface protector</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>1420637</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Light meter</td>
			<td>VWR</td>
			<td>21800-014</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Methylene blue&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M9140</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Microscope Slides</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>29-101</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Optimouse rack with cages</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C89100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Water Bottle Basket&#160;</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C61011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Filtered Cage Tops</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C78210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Optimice Standard Feeder</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C40100SG</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cage Card Holder</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C43251</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cage Cards</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>M52010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Bottle Assambley</td>
			<td>AnimalCare systems</td>
			<td>C79122P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Bed R&#39;Nest Nesting</td>
			<td style="width:167px;">The Andersons</td>
			<td style="width:280px;">BRN4WSR</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">1/8&#34; Corn Cob bedding&#160;</td>
			<td style="width:167px;">The Andersons</td>
			<td style="width:280px;">8B</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Standard mouse chow</td>
			<td>Teklad</td>
			<td style="width:280px;">7904 (7004)</td>
			<td style="width:429px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Scale</td>
			<td>VWR</td>
			<td style="width:280px;">10205-004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Polypropylene Beaker</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-955-111F</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

determination of reproductive competence by confirming pubertal onset and performing a fertility assay in mice and rats

Üreme yeterlilik değerlendirmesi bir tedavi veya genetik manipülasyon Ayrıca hipofiz gonad hipotalamik eksen olarak adlandırdığı üreme ekseninde etkisini anlamak için önemlidir. Bir anahtar ıntegrator çevre ve iç giriş koşulları için üreme doğurganlık adapte üreme eksendir. Fare ve sıçanlar doğurganlık çalışmada üzerine başlamadan önce cinsel olgunluğa gözlenen üreme fenotipleri neden olduğu olasılığını dışlamak için değerlendirilir Gecikmeli veya pubertal başlangıçlı yok. Bu iletişim kuralı pubertal başlangıçlı Prepusyal ayrılık belirlenmesi ile erkek ve kadın vajinal açılış ve ilk estrus değerlendirmek için non-invaziv bir yaklaşımı açıklar. Ergenlik tamamlanması ve cinsel olgunluğa başarı onay alındıktan sonra bir doğurganlık çalışma başlatılabilir. Yordamı fareler ve sıçanlar, nasıl bir doğurganlık çalışma ve değerlendirmek ve tedavi veya gen silme etkisi doğurganlık üzerinde olup olmadığını belirlemek için hangi parametreler için optimum üreme koşulları açıklar.

İki farklı transgenik fare modelleri nerede transkripsiyon faktörü Ventral ön homeobox 1 (Vax1) burada heterozygote fareler (HET)13veya Vax1 olarak başvurulan bir alleli üzerinde tüm vücuttaki silinmiş üzerinden sunulan sonuçlarıdır burada koşullu KO (cKO) olarak adlandırdığı GnRH nöronlar22içinde koşullu olarak silindi. Doğurganlık çalışma ayarlamadan önce tüm farelerde pubertal başlangıçlı...

Watch this Scientific Journal Video about Determination of Reproductive Competence by Confirming Pubertal Onset and Performing a Fertility Assay in Mice and Rats at JoVE.com

Determination of Reproductive Competence by Confirming Pubertal Onset and Performing a Fertility Assay in Mice and Rats

Pubertal başlangıçlı teyit ve doğurganlık tahlil fare ve sıçanlar üreme yetkinlik belirlenmesi

Birçok tedaviler ve genetik mutasyonlar cinsel olgunluk ve doğurganlık zamanlaması etkisi. Bu iletişim kuralı fare ve sıçanlar cinsel olgun hayvanlar doğurganlık çalışmada kurma önce pubertal başlangıçlı değerlendirmek için non-invaziv bir yöntem açıklanır.

Assessment of reproductive competence is critical for understanding the impact of a treatment or genetic manipulation on the reproductive axis, also ...

Bu yöntem üreme alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir, nasıl preputial ayırma yoluyla fareler ve sıçanlarda pubertal başlangıç belirlemek için, vajinal açılış, ve bir doğurganlık çalışması gerçekleştirmeden önce ilk estrus kurulması gibi. Bu tekniğin en büyük avantajı, gösterdi non-invaziv yaklaşım kullanarak pubertal başlangıç kurarak, cinsel olgun hayvanlarda takip ve doğurganlık çalışması yapmak mümkün olmasıdır. Bu tekniğin etkileri, genetik mutasyonlar veya endokrin bozucu kimyasallar gibi üreme yeterliliğini etkilemeye duyarlı tedavilerin neden olduğu üreme açıklarının tanısına kadar uzanır.Bu yöntem farelerde üreme yeterliliği hakkında bilgi sağlasa da, fare ve hamster gibi diğer model sistemlerine de uygulanabilir. Bu yöntemin görsel gösteri önemlidir, iyi ve hassas hayvan işleme becerileri gerektirir gibi. Özellikle preputial ayırma ve vajinal açıklık aşağıdaki görsel tanımlama için farelerdoğru tutmak önemlidir.Çalışma alanını hazırlamak için masaya bir ped yerleştirin. Sonra ızgara yukarı bakacak şekilde temiz bir fare kafesi üst yerleştirin, pad üzerinde. Ardından, çalışma alanında bir ölçek ayarlayın.Ölçekte temiz bir 500 ila 1000 mililitrelik bir beher yerleştirin ve tare. Ardından, verileri kaydetmek için çalışma alanının yanına bir sayfa yerleştirin. Bundan sonra, çalışma alanına fare kafesi yerleştirin.Kafesi açın ve kapağı, su şişesini ve yemek tutucuyu masaya kaldırın. Fareyi kuyruğundan tutarken, temiz fare kafesinin üst üstüne yerleştirin. Kuyruğu tutarken, farekafes üst ızgara keşfetmek için izin verin.Kuyruğu yavaşça geriye çekin ve diğer elinizi boynuna ve kulaklarına yakın bir cilde yaklaştırın. Başparmak ve işaret parmağı ile omuzlar ve boyun arasındaki gevşek deri kavramak. Sonra kalan parmakları ile arka deri kapmak ve hafifçe ele bastırarak fare tutun.Serbest el ile, yavaşça geri penis etrafında deri itin. Preputial ayırma, preputial deri geriye doğru slaytlar, glans penis açığa. Muayeneden sonra, preputial ayırmanın varlığını veya yokluğunu kaydedin.Bundan sonra, faretartın ve ağırlığını kaydedin. Daha sonra kabı kafes zemininüzerinde tutarak fareyi kendi başına çıkararak kafese yeniden tanıyın. Çalışma alanına bir pamuk topu, büyük bir kabı ve bir şişe steril suyu yerleştirin.Kabın içine steril su dökün. Daha sonra, kabın içinde steril su ile pamuk topu nemlenir ve temiz kafes üst yanına yerleştirin. Fare kafesini çalışma alanına yerleştirin.Daha sonra fareyi kuyruğunun tabanındatarak kafesin tepesine aktarın. Farenin ileri hareketini teşvik etmek için farenin kuyruğunu yavaşça çekin. Bundan sonra, üç parmak ile kalça desteklerken kuyruk kaldırın.Yavaşça nemlendirilmiş pamuk topu ile vulva temizleyin, sonra vajina tamamen açık olup olmadığını belirlemek için vulva inceleyin. Vajinal açıklık meydana geldiyse kaydedin. Sonra faretartın ve ev kafesi geri dönün.Kapak, su, gıda, yatak ve farelerin her üreme çifti için yuvalama malzeme ile temiz bir fare kafesi hazırlayın. Daha sonra gerekli bilgilerle kafes kartlarını doldurun. Temiz bir masa üzerinde hazırlanan yatak kafesi yerleştirin, sonra yavaş yavaş fare kafesi içine eldivenli bir el tanıtmak ve kısa bir süre için kafeste bırakın.Eldivenli el ile farelere yavaşça yaklaşın. Fareler elin üzerinden geçtiğinde, başparmak ve işaret parmağı arasında bir farenin kuyruğunu yakalayın ve fareyi kuyruktan kaldırın. Fare, gövdedesteği olmadan kuyruk tarafından 2-3 saniye kadar tutulabilir.Hazırlanan üreme kafesi içinde fare yerleştirin, sonra erkek ve dişi fareler yiyecek, su ve yuvalama malzeme olduğundan emin olduktan sonra kafesi kapatın. Sunulan yöntem kullanılarak iki farklı transgenik fare modeli incelenmiştir. Vajinal açıklık ve preputial ayırma hem heterozigot farelerde hem de kontrol farelerinde aynı yaş ve ağırlıkta meydana geldi.Tersine, vajinal açılış ve preputial ayırma önemli ölçüde koşullu nakavt kadın ve erkeklerde gecikti, ve artan vücut ağırlığı ile ilişkili. 4.5 haftalıkken, kadın kontrolleri ve koşullu nakavt farelerin vücut ağırlığı karşılaştırılabilirken, koşullu nakavt erkekler kontrollerden biraz daha ağırdı. Bu, koşullu nakavt farelerin vajinal açılış ve preputial ayrılmasındaki gecikmenin kilo alımındaki gecikmeyle ilişkili olmadığını gösterir.Ergenlik başlangıcının tamamlanmasından sonra doğurganlık çalışmasına 10-16 haftalıkken başlandı. Hem erkek hem de dişi heterozigot fareler alt doğurgandı. Heterozigot dişiler üç aylık çalışmada daha az çöp ürettiler ve hem erkek hem de dişi heterozigot fareler daha küçük yavrular ürettiler.Doğurganlık teşrisi oluşturmadan önce ergenlik başlangıcını doğrulamanın önemini göstermek için, üreme yeterliliği koşullu nakavt farelerde değerlendirildi. 70 günlük doğurganlık çalışması sırasında, ne koşullu nakavt erkek ne de kadın herhangi bir çöp üretti. Bu prosedürü denerken, fareleri dikkatli bir şekilde idare etmeyi ve hayvanlara yaklaşırken ve onlarla ilgilenirken sakin kalmayı unutmamak önemlidir.Bu prosedürü takiben, dolaşımdaki seks hormonu düzeylerini ölçmek gibi diğer yöntemler ek soruları cevaplamak için yapılabilir, kısırlık veya diğer subfertilite anormal testosteron neden olup olmadığı gibi, östrojen, folikül uyarıcı hormon, ve luteinizing hormon düzeyleri. Farelerle çalışmanın, ısırma ve alerji gelişimi riski nedeniyle tehlikeli olabileceğini unutmayın. Maruziyeti azaltmak için, eldiven ve laboratuvar önlüğü ve farelerin dikkatli kullanımı gibi önlemler bu işlemi gerçekleştirirken her zaman alınmalıdır.

Research

JoVE Journal

Biology

Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats

Manuel Tutucu ve Fare ve Sıçanlarda Ortak Bileşik İdaresi Rotalar

Being able to safely and effectively restrain mice and rats is an important part of conducting research.  Working confidently and humanely with mice and ...

Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice

Tanı Otopsi ve Sıçanlar ve Fareler Seçilmiş Doku ve Örnek Toplama

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal ...

Ovariectomy and 17&beta;-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration

Ovariectomy and 17ÃƒÅ½Ã‚Â²-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration

Sıçan ve Farelerde Ovariektomi ve 17β-östradiol Değiştirme: Görsel Gösteri

Estrogens are a family of female sexual hormones with an exceptionally wide spectrum of effects. When rats and mice are used in estrogen research they are ...

A Rapid and Specific Microplate Assay for the Determination of Intra- and Extracellular Ascorbate in Cultured Cells

Kültür Hücrelerinin Intra-ve Ekstrasellüler Askorbat Belirlenmesi için hızlı ve spesifik bir Mikroplate Deneyi

Vitamin C (ascorbate) plays numerous important roles in cellular metabolism, many of which have only come to light in recent years. For instance, within ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

Yetişkin Fare Kalvaryal Kemik İliği içinde Hematopoietik kök hücrelerin Vivo 4-Boyutlu Takip

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

Fare Testis İn Vivo Mikroenjeksiyon ve Elektroporasyon

This video and article contribution gives a comprehensive description of microinjection and electroporation of mouse testis in vivo. This particular ...

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

Bozulmamış Arterlerin endotel katmanı Nitrik Oksit ve Süperoksit En Yüz Algılama

Endothelium-derived nitric oxide (NO) produced from endothelial NO-synthase (eNOS) is one of the most important vasoprotective molecules in cardiovascular ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

Fare İzole perfüze Böbrek Tekniği

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

Karaciğer ve Süt örneklerinde vahşi tipli ve sialik asitler tayini ve<em&gt; CMAH</em&gt; Knock-out Fare.

CMAH (cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase) is responsible for the oxidation of cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acids in ...

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

Anbürlerde Ovaryalı Izleme ve kontrol için üreme teknikleri

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...