Name: clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration
Uploaded: 2018-09-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration at JoVE.com

ويسلم مقدم البلاغ الدعم من موظفي "العيادة الطبية ميبرو" وتصميم الشكل بجبيل/ديفيد "لي". هذا العمل كان يدعمها المنح البحثية من الحيوية وبرنامج تطوير التكنولوجيا الطبية من جبهة الخلاص الوطني تموله مست (رقم 2017M3A9E4078014-جبهة الخلاص الوطني)؛ والوطنية بحوث مؤسسة من كوريا (جبهة الخلاص الوطني) الممولة من وزارة العلوم وتكنولوجيا المعلومات والاتصالات (أرقام 2017R1A2B4002315 جبهة الخلاص الوطني وجبهة الخلاص الوطني-2016R1C1B2010308).

تم التنازل عن الموافقة والموافقة على تقرير عقب تقارير عن حالة اللجنة "المجلس الاستعراض المؤسسي جامعة ميونججي" (مجويرب). علاوة على ذلك، كان هذا البروتوكول السريرية امتثالا للمبادئ التوجيهية "إعلان هلسنكي" والتنظيم لمستخلصات. للإجراءات، تم الحصول على الموافقات المستنيرة من المرضى.
<p class="...

<ol>
	<li>Arnoczky, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Building+a+meniscus.+Biologic+considerations.">Building a meniscus. Biologic considerations.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (367 Suppl), S244-S253 (1999).</li><li>Barry, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell+therapy+in+joint+disease.">Mesenchymal stem cell therapy in joint disease.</a> Novartis Foundation Symposium. 249, 86-241 (2003).</li><li>Usuelli, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cells+in+orthopaedic+pathologies.">Adipose-derived stem cells in orthopaedic pathologies.</a> British Medical Bulletin. 124 (1), 31-54 (2017).</li><li>Zhang, H. N., Li, L., Leng, P., Wang, Y. Z., Lv, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uninduced+adipose-derived+stem+cells+repair+the+defect+of+full-thickness+hyaline+cartilage.">Uninduced adipose-derived stem cells repair the defect of full-thickness hyaline cartilage.</a> Chinese Journal of Traumatology. 12 (2), 92-97 (2009).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adipose+tissue+is+a+source+of+multipotent+stem+cells.">Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells.</a> Molecular Biology of the Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multilineage+cells+from+human+adipose+tissue:+implications+for+cell-based+therapies.">Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies.</a> Tissue Engineering. 7 (2), 211-228 (2001).</li><li>Baer, P. C., Geiger, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+mesenchymal+stromal/stem+cells:+tissue+localization,+characterization,+and+heterogeneity.">Adipose-derived mesenchymal stromal/stem cells: tissue localization, characterization, and heterogeneity.</a> Stem Cells International. 2012, 812693 (2012).</li><li>Zhu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cell:+a+better+stem+cell+than+BMSC.">Adipose-derived stem cell: a better stem cell than BMSC.</a> Cell Biochemistry and Function. 26 (6), 664-675 (2008).</li><li>Bellei, B., Migliano, E., Tedesco, M., Caputo, S., Picardo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maximizing+non-enzymatic+methods+for+harvesting+adipose-derived+stem+from+lipoaspirate:+technical+considerations+and+clinical+implications+for+regenerative+surgery.">Maximizing non-enzymatic methods for harvesting adipose-derived stem from lipoaspirate: technical considerations and clinical implications for regenerative surgery.</a> Scientific Reports. 7 (1), 10015 (2017).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Park, K. S., Jeong, B. C., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+Cartilage+in+Human+Knee+Osteoarthritis+with+Autologous+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells+and+Autologous+Extracellular+Matrix.">Regeneration of Cartilage in Human Knee Osteoarthritis with Autologous Adipose Tissue-Derived Stem Cells and Autologous Extracellular Matrix.</a> BioResearch Open Access. 5 (1), 192-200 (2016).</li><li>Alexander, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+Adipose-derived+Stromal+Vascular+Fraction+(AD-SVF)+Cell+Biology+and+Use+on+the+Basis+of+Cellular,+Chemical,+Structural+and+Paracrine+Components:+A+Concise+Review.">Understanding Adipose-derived Stromal Vascular Fraction (AD-SVF) Cell Biology and Use on the Basis of Cellular, Chemical, Structural and Paracrine Components: A Concise Review.</a> Journal of Prolotherapy. 4, e855-e869 (2012).</li><li>Benders, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+scaffolds+for+cartilage+and+bone+regeneration.">Extracellular matrix scaffolds for cartilage and bone regeneration.</a> Trends in Biotechnology. 31 (3), 169-176 (2013).</li><li>Korean Food and Drug Administration (KFDA). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+therapy:+Rules+and+Regulations.">Cell therapy: Rules and Regulations.</a> KFDA. , (2009).</li><li>Pak, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+human+bones+in+hip+osteonecrosis+and+human+cartilage+in+knee+osteoarthritis+with+autologous+adipose-tissue-derived+stem+cells:+a+case+series.">Regeneration of human bones in hip osteonecrosis and human cartilage in knee osteoarthritis with autologous adipose-tissue-derived stem cells: a case series.</a> Journal of Medical Case Reports. 5, 296 (2011).</li><li>Pak, J., Chang, J. J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+reporting+on+implantation+of+autologous+adipose+tissue-derived+stem+cells+with+platelet-rich+plasma+into+human+articular+joints.">Safety reporting on implantation of autologous adipose tissue-derived stem cells with platelet-rich plasma into human articular joints.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 14, 337 (2013).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Kartolo, W. A., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cartilage+Regeneration+in+Human+with+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells:+Current+Status+in+Clinical+Implications.">Cartilage Regeneration in Human with Adipose Tissue-Derived Stem Cells: Current Status in Clinical Implications.</a> BioMed Research International. 2016, 4702674 (2016).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+biological+approach+to+treat+chondromalacia+patellae.">A novel biological approach to treat chondromalacia patellae.</a> PLoS One. 8 (5), e64569 (2013).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+repair+of+damaged+meniscus+with+autologous+adipose+tissue-derived+stem+cells.">Regenerative repair of damaged meniscus with autologous adipose tissue-derived stem cells.</a> BioMed Research International. 2014, 436029 (2014).</li><li>Aust, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yield+of+human+adipose-derived+adult+stem+cells+from+liposuction+aspirates.">Yield of human adipose-derived adult stem cells from liposuction aspirates.</a> Cytotherapy. 6 (1), 7-14 (2004).</li><li>De Ugarte, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+multi-lineage+cells+from+human+adipose+tissue+and+bone+marrow.">Comparison of multi-lineage cells from human adipose tissue and bone marrow.</a> Cells Tissues Organs. 174 (3), 101-109 (2003).</li><li>Guilak, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonal+analysis+of+the+differentiation+potential+of+human+adipose-derived+adult+stem+cells.">Clonal analysis of the differentiation potential of human adipose-derived adult stem cells.</a> Journal of Cellular Physiology. 206 (1), 229-237 (2006).</li><li>Mitchell, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunophenotype+of+human+adipose-derived+cells:+temporal+changes+in+stromal-associated+and+stem+cell-associated+markers.">Immunophenotype of human adipose-derived cells: temporal changes in stromal-associated and stem cell-associated markers.</a> Stem Cells. 24 (2), 376-385 (2006).</li><li>Oedayrajsingh-Varma, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue-derived+mesenchymal+stem+cell+yield+and+growth+characteristics+are+affected+by+the+tissue-harvesting+procedure.">Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell yield and growth characteristics are affected by the tissue-harvesting procedure.</a> Cytotherapy. 8 (2), 166-177 (2006).</li><li>. Liberase TL information available from Sigma Millipore online Available from: <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/05401020001?lang=en&amp;region=US">https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/05401020001?lang=en&amp;region=US</a> (2018)</li><li>. Liberase TM information available from Sigma Millipore online Available from: <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/Libtmro?lang=en&amp;region=US">https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/Libtmro?lang=en&amp;region=US</a> (2018)</li><li>Childs, J. D., Piva, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychometric+properties+of+the+functional+rating+index+in+patients+with+low+back+pain.">Psychometric properties of the functional rating index in patients with low back pain.</a> European Spine Journal. 14 (10), 1008-1012 (2005).</li><li>Price, D. D., McGrath, P. A., Rafii, A., Buckingham, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+validation+of+visual+analogue+scales+as+ratio+scale+measures+for+chronic+and+experimental+pain.">The validation of visual analogue scales as ratio scale measures for chronic and experimental pain.</a> Pain. 17 (1), 45-56 (1983).</li><li>Pilgaard, L., Lund, P., Rasmussen, J. G., Fink, T., Zachar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+highly+defined+proteases+for+the+isolation+of+adipose+tissue-derived+stem+cells.">Comparative analysis of highly defined proteases for the isolation of adipose tissue-derived stem cells.</a> Regenerative Medicine. 3 (5), 705-715 (2008).</li><li>D'Ambrosi, R., Indino, C., Maccario, C., Manzi, L., Usuelli, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+Microfractured+and+Purified+Adipose+Tissue+for+Arthroscopic+Management+of+Osteochondral+Lesions+of+the+Talus.">Autologous Microfractured and Purified Adipose Tissue for Arthroscopic Management of Osteochondral Lesions of the Talus.</a> Journal of Visualized Experiments. (131), e56395 (2018).</li><li>Packer, J. D., Chang, W. T., Dragoo, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+vibrational+energy+to+isolate+adipose-derived+stem+cells.">The use of vibrational energy to isolate adipose-derived stem cells.</a> Plastic Reconstructive Surgery-Global Open. 6 (1), e1620 (2018).</li><li>Hanke, C. W., Bernstein, G., Bullock, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+of+tumescent+liposuction+in+15,336+patients.+National+survey+results.">Safety of tumescent liposuction in 15,336 patients. National survey results.</a> Dermatologic Surgery. 21 (5), 459-462 (1995).</li><li>Illouz, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+of+liposuction.">Complications of liposuction.</a> Clinics in Plastic Surgery. 33 (1), 129-163 (2006).</li><li>Dixit, V. V., Wagh, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unfavourable+outcomes+of+liposuction+and+their+management.">Unfavourable outcomes of liposuction and their management.</a> Indian Journal of Plastic Surgery. 46 (2), 377-392 (2013).</li><li>Lehnhardt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Major+and+lethal+complications+of+liposuction:+a+review+of+72+cases+in+Germany+between+1998+and+2002.">Major and lethal complications of liposuction: a review of 72 cases in Germany between 1998 and 2002.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (6), 396e-403e (2008).</li><li>Iyer, S. S., Rojas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+mesenchymal+stem+cells:+novel+concept+for+future+therapies.">Anti-inflammatory effects of mesenchymal stem cells: novel concept for future therapies.</a> Expert Opinion on Biological Therapy. 8 (5), 569-581 (2008).</li><li>Zhang, J., Middleton, K. K., Fu, F. H., Im, H. J., Wang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HGF+mediates+the+anti-inflammatory+effects+of+PRP+on+injured+tendons.">HGF mediates the anti-inflammatory effects of PRP on injured tendons.</a> PLoS One. 8 (6), e67303 (2013).</li><li>Li, N. Y., Yuan, R. T., Chen, T., Chen, L. Q., Jin, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+platelet-rich+plasma+and+latissimus+dorsi+muscle+flap+on+osteogenesis+and+vascularization+of+tissue-engineered+bone+in+dogs.">Effect of platelet-rich plasma and latissimus dorsi muscle flap on osteogenesis and vascularization of tissue-engineered bone in dogs.</a> Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 67 (9), 1850-1858 (2009).</li><li>Parsons, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biological+effect+of+platelet+rich-plasma+on+the+fracture+healing+process.">The biological effect of platelet rich-plasma on the fracture healing process.</a> The Journal of bone and joint surgery. British volume. 91-B, 293 (2009).</li><li>Wu, W., Chen, F., Liu, Y., Ma, Q., Mao, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+injectable+tissue-engineered+cartilage+by+using+platelet-rich+plasma:+experimental+study+in+a+rabbit+model.">Autologous injectable tissue-engineered cartilage by using platelet-rich plasma: experimental study in a rabbit model.</a> Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 65 (10), 1951-1957 (2007).</li><li>Cooper, T. W., Eisen, A. Z., Stricklin, G. P., Welgus, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+collagenase+inhibitor:+characterization+and+subcellular+localization.">Platelet-derived collagenase inhibitor: characterization and subcellular localization.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 82 (9), 2779-2783 (1985).</li><li>Uzuki, M., Sawai, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+affinity+of+sodium+hyaluronate+of+various+molecular+weights+for+degenerated+cartilage:+a+histochemical+study+using+hyaluronic+acid+binding+protein.">A comparison of the affinity of sodium hyaluronate of various molecular weights for degenerated cartilage: a histochemical study using hyaluronic acid binding protein.</a> International Congress Series. 1223, 279-284 (2001).</li><li>Pagano, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+morphometric+description+of+adipose+tissue+during+weight+changes:+a+quantitative+tool+for+assessment+of+tissue+texture.">Molecular and morphometric description of adipose tissue during weight changes: a quantitative tool for assessment of tissue texture.</a> International Journal of Molecular Medicine. 14 (5), 897-902 (2004).</li></ol>

وفي عام 2001، زاك وآخرون. عزل الخلايا الجذعية من الأنسجة الدهنية عن طريق تحطيم المصفوفة الكولاجين كولاجيناز6. بعد ذلك، أظهر الفريق أنه يمكن تحويل هذه الخلايا الجذعية المعزولة من الأنسجة الدهنية إلى الغضاريف والأنسجة الأخرى من ميسوديرم في الأصل، تثبت أن هذه الخلايا الجذعي?...

الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs) من المعروف أن لديها القدرة على تجديد غضروف1،2،3،4،،من56. يمكن الحصول عليها بسهولة من مصادر مختلفة: دم الحبل السري، نخاع العظام والأنسجة الدهنية بين العديد من الآخرين. من بين هذه المصادر، هو الأنسجة الدهنية المصدر الوحيد حيث يمكن الحصول على عدد كاف من MSCs دون أي توسع الثقافة تجديد غضروف في إعدادات السريرية7،8. نخاع العظم ذاتي كسر الأوعية الدموية stromal (SVF) يمكن بسهولة الحصول عليها كذلك. عدد الخلايا الجذعية الواردة في نخاع الموسعة غير الثقافة غير منخفضة جداً7،8. قد يحتوي دم الحبل السري على عدد كاف من MSCs. ومع ذلك، دم الحبل السري ليس مصدرا متاحة بسهولة من صندوق التبرعات الخاص الذاتي.
تتوفر أساليب عديدة لمعالجة الأنسجة الدهنية للحصول على التبرعات للتطبيقات السريرية. ومن بين هذه الطريقة الحصول على MSCs من الأنسجة الدهنية باستخدام كولاجيناز، وضعت وأكده زاك et al. 5 , 6، يتم قبول جيد جداً. لقد تم تعديل هذا الأسلوب لاستخدام كولاجيناز للتطبيقات السريرية في قسم جراحة العظام. لتطبيق إعدادات السريرية، يجب أن يكون النظام نظام مغلق الاحتفاظ العقم مع الحفاظ على الراحة. تعديل معين واحد المعروضة في هذا المقال ينطوي على تجانس ليبواسبيراتيس. يتم هضمها ليبواسبيراتيس صغيرة الحجم نسبيا أسرع من الأكبر حجماً التي تسفر عن انهيار متفاوتاً من الأنسجة الدهنية. وعلاوة على ذلك، قد تنتج هذه ليبواسبيراتيس الحجم الأكبر الأنسجة الليفية التي يمكن أن تسد المحاقن والإبر أثناء إجراء حقن مشتركة9،10. بغية منع هذه القضايا، قد تجانس في ليبواسبيراتيس بالقطع وتنميق ليبواسبيراتيس قبل الحضانة مع كولاجيناز. التبرعات المستمدة من الأنسجة الدهنية الناتجة عن ذلك قد تتضمن المصفوفة خارج الخلية أكثر توحيدا (ECM) بالمقارنة مع ليبواسبيراتيس غير المتجانس11. قد يعمل ECM المعطلة الواردة في صندوق التبرعات الخاص ك سقالة12.
في عام 2009، سمح ذاتي من صندوق التبرعات الخاص المستمدة من الأنسجة الدهنية "الأغذية الكورية" وإدارة المخدرات (مستخلصات) عند معالجتها داخل مرفق طبي مع الحد الأدنى من المعالجة بواسطة طبيب13. وبعد ذلك، وقد استخدمت ذاتي المستمدة من الأنسجة الدهنية لصندوق التبرعات الخاص كعامل محتمل لتحسين وظائف الركبة في مرضى هشاشة العظام (الزراعة العضوية) التي يحتمل أن تجديد الأنسجة مثل الغضاريف10،،من1415 , 16 , 17 , 18 . 
في عام 2011، أظهرت باك لأول مرة أن الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية (الخزفية) الواردة في صندوق التبرعات الخاص المستمدة من الأنسجة الدهنية يمكن تحسين وظائف الركبة احتمال تجديد الأنسجة مثل الغضاريف في مرضى الزراعة العضوية البشرية عندما حقنت مع الصفيحات الغنية البلازما (PRP) 14. وباﻹضافة إلى ذلك، سجلت باك et al. سلامة البيانات في عام 2013 التي تشمل 91 مريضا. وكان معدل كفاءة يعني ذكرت في سلامة هذه البيانات 67%15. وفي وقت لاحق، أظهرت دراسات إضافية قبل باك et al. الركبة تحسين وظائف يحتمل أن تكون بسبب تجديد الأنسجة مثل الغضاريف في المرضى الذين يعانون غضروف المسيل للدموع وتلين الغضروف10،16،17 ،18. استناداً إلى المواد التي ذكرت، فمن المعروف أن عدد الخلايا الجذعية الموجودة في 100 غرام أنسجة الدهنية لمعالجتها بواسطة البروتوكول الواردة في هذه المادة قد تتراوح من 40000000 1,000,000 تبعاً لخصائص المرضى8، 19 , 20 , 21 , 22 , 23.
نقدم هنا، على بروتوكول سريرية للركبة البشرية الزراعة العضوية باستخدام التبرعات ذاتي المستمدة من الأنسجة الدهنية مع ها والحزب الثوري المنشط مع كلوريد الكالسيوم. النسخة الأولى من هذا البروتوكول السريرية، التي تشمل نظام مغلق، ودليل للحفاظ على العقم، أفيد في 201114. البروتوكول متطابقة الأمثل، الحفاظ على العقم، وأفادت التقارير في عام 2013 و 201610،15. ويرد هنا، البروتوكول الأمثل. ويرد في الشكل 1التخطيطي نظرة عامة على البروتوكول.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58363/58363fig1.jpg"> رقم 1: نظرة عامة التخطيطي للبروتوكول. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58363/58363fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:941px;" width="941">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Material</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5% Betadine (povidone-iodine)&#160;</td>
			<td>Firson Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">657400260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2% Lidocaine&#160;</td>
			<td>Daehan Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">670603480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Tumescent solution&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Myungmoon Pharm. Co. Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">N01BB01</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 500 mL normal saline, 40 mL 2% lidocaine, 20 mL 0.5% marcaine, and 0.5 mL epinephrine 1:1000.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Liberase TL and TM research grade&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Roche Applied Science</td>
			<td style="width:156px;">5401020001</td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">D5LR</td>
			<td>Dahan Pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645101072</td>
			<td>Dextrose 5% in lactated Ringer&#39;s solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Anticoagulant citrate dextrose solution&#160;</td>
			<td>Fenwal, Inc.</td>
			<td style="width:156px;">NDC:0942-0641</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 0.8% citric acid, 
			0.22% sodium citrate, and 0.223% dextrose.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3% (w/v) Calcium chloride&#160;</td>
			<td>Choongwae Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">644902101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.5% (w/v) HA (Hyaluronic acid )</td>
			<td>Dongkwang pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645902030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.25% Ropivacaine</td>
			<td>Huons Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">670600150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Equipment</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">3.0 mm Cannula&#160;</td>
			<td style="width:221px;">WOOJU Medical Instruments Co.</td>
			<td style="width:156px;">ML30200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">60-mL Luer-Lock syringe</td>
			<td style="width:221px;">BD (Becton Dickinson)&#160;</td>
			<td style="width:156px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centrifuge Barrel Kit&#160;</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue homogenizer that contains blades</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rotating incubator mixer</td>
			<td style="width:221px;">Medikan Co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">MS02060092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:221px;">Hanil Scientific Inc.</td>
			<td style="width:156px;">CE1133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Magnetic Resonance Imaging</td>
			<td style="width:221px;">Philips Medical Systems Inc.</td>
			<td style="width:156px;">18068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:261px;">Ultrasound Imaging System</td>
			<td style="width:221px;">Samsung Medison co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">CT-LK-V10-ICM-09.05.2007</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration

هشاشة العظام (الزراعة العضوية) واحدة من الأكثر شيوعاً اضطرابات المنهكة. في الآونة الأخيرة، بذلت محاولات عديدة لتحسين وظائف الركبتين باستخدام أشكال مختلفة من الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs). في كوريا ومركزات نخاع العظام والحبل السري عليها الخلايا الجذعية المشتقة من الدم "الأغذية الكورية" وإدارة المخدرات (مستخلصات) لتجديد الغضاريف. وباﻹضافة إلى ذلك، سمح مستخلصات المستمدة من الأنسجة الدهنية stromal الأوعية الدموية جزء (SVF) لحقن مشتركة في المرضى البشرية. ذاتي المستمدة من الأنسجة الدهنية لصندوق التبرعات الخاص يحتوي على مصفوفة خارج الخلية (ECM) بالإضافة إلى الخلايا الجذعية الوسيطة. إدارة المحتوى في المؤسسة يتغوط السيتوكينات المختلفة، جنبا إلى جنب مع حمض الهيالورونيك (هكتار) والبلازما الغنية بالصفائح الدموية (PRP) تنشيط بواسطة كلوريد الكالسيوم، ويمكن أن تساعد MSCs تجديد الغضاريف، وتحسين وظائف الركبة. في هذه المقالة، قدمنا بروتوكول لتحسين وظائف الركبة بتجديد الأنسجة مثل الغضاريف في المرضى البشرية مع الزراعة العضوية. أولاً ذكرت 2011 متبوعاً بعدد قليل من المنشورات إضافية نتيجة للبروتوكول. ويشمل البروتوكول شفط الدهون للحصول على ليبواسبيراتيس ذاتي مختلطة مع كولاجيناز. ثم يتم قص هذا الخليط ليبواسبيراتيس-كولاجيناز وتجانس لإزالة النسيج الليفي الكبيرة التي قد تسد الإبرة أثناء الحقن. وبعد ذلك، هو المحتضنة الخليط للحصول على التبرعات المستمدة من الأنسجة الدهنية. التبرعات المستمدة من الأنسجة الدهنية الناتجة عن ذلك، تتضمن كل المستمدة من الأنسجة الدهنية MSCs وبقايا من إدارة المحتوى في المؤسسة، يتم حقن في الركبتين للمرضى، جنبا إلى جنب مع ها وكلوريد الكالسيوم المنشط الحزب الثوري. وتشتمل على ثلاث حالات من المرضى الذين عولجوا مع بروتوكول لدينا مما أدى إلى تحسن الأم في الركبة وتورم ونطاق الحركة جنبا إلى جنب مع الأدلة التصوير بالرنين المغناطيسي للأنسجة مثل الغضاريف هيلين.

ثلاثة مرضى (إحدى الإناث 87 عاماً مع المرحلة 3 من الزراعة العضوية، وذكر عمره 68 سنة واحد مع المرحلة 3 من الزراعة العضوية، وامرأة عمرها 60 عاماً مع مرحلة الزراعة العضوية 3) دون أي الماضي هامة التاريخ الطبي المقدمة إلى العيادة مع الأم في الركبة المستمرة والمطلوب لإمكانات ذاتي ال?...

Watch this Scientific Journal Video about Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration at JoVE.com

Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

نقدم هنا، بروتوكولا لإنتاج جزء الأوعية الدموية stromal المستمدة من الأنسجة الدهنية وتطبيقه على تحسين وظائف الركبة بتجديد الأنسجة مثل الغضاريف في مرضى هشاشة العظام البشرية.

بروتوكول السريرية لإنتاج كسر الأوعية الدموية Stromal المستمدة من الأنسجة الدهنية لتجديد الغضاريف المحتملة

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

هشاشة العظام هي واحدة من الاضطرابات المنهكة الأكثر شيوعا بين السكان المسنين. في الوقت الحاضر ، لا يوجد علاج محدد للأسباب الكامنة وراء هشاشة العظام. يصف هذا البروتوكول السريري إجراءً مبتكرًا لعلاج واعد، وبسيط، وبديلًا من التهاب المفاصل في الركبة البشرية عن طريق تجديد الغضروف مثل الأنسجة.هشاشة العظام هي واحدة من الاضطرابات المنهكة الأكثر شيوعا بين السكان المسنين. في الوقت الحاضر، لا يوجد علاج محدد للأسباب التي تؤكد من هشاشة العظام. هذا البروتوكول السريري هو إجراء مبتكر لعلاج واعد، والحد الأدنى من الغازية، والعلاج البديل من هشاشة العظام في الركبة البشرية عن طريق تجديد الأنسجة الشبيهة بالغضاريف.جلب المريض إلى غرفة العمليات مع غطاء محرك السيارة من الفئة A الخطر الحيوي، ووضع له أو لها في موقف supine. تنظيف منطقة البطن للمريض مع 5٪ بيتادين بوفيدين اليود والثناد المريض باستخدام تقنية معقمة، وتعريض منطقة نظيفة من البطن لشفط الدهون. تقريبا خمسة سنتيمترات [إيندبلو-ثريبي] من ال [أومبيليكوس], يُغزن اثنان موقعات, واحدة على اليسار وأخرى على الجانب يمني من ال [أومبيليكوس] الشق أن يكون جعلت.باستخدام مليلتر من 2٪ ليدوكاين دون ادرينالين مع إبرة 1.5 بوصة قياس 25 في حقنة خمسة ملليلتر عن طريق حقن كل موقع على مستوى البشرة. تخدير موقع شق المراد إجراؤه باستخدام خمسة ملليلتر من محلول الطنين وحقنة 10 ملليلتر وإبرة قياس 25 1.5 بوصة. جعل شقين من 0.5 سم ما يقرب من خمسة سنتيمترات تحت umbilicus بشكل مشقى عن طريق معسر الجلد لرفع عمق مستوى تحت الجلد.باستخدام شفرة رقم 11 ، تساعد الجلد المرفوع على اختراقه إلى المستوى تحت الجلد ولكن ليس لاختراق جدار البطن. باستخدام 20 سم 60 قياس القناء، تخدير مستوى تحت الجلد من منطقة البطن السفلي كله الذي هو أن يكون liposuctioned مع 700 إلى 800 ملليلتر من محلول tumescent. بعد الانتهاء من التسلل من البطن كله السفلي مع محلول tumescent، وإعداد جهاز شفط الدهون عن طريق ربط 3.0 ملليمتر cannula متصلة 60 ملليلتر أو 30 ملليلتر حقنة لشفط الدهون اليدوي أو مصممة خصيصا 3.0 ملليمتر القنب متصلة طقم الطرد المركزي.حقنة نظام مغلق وضعت من قبل أنفسنا والتي وافقت عليها إدارة الأغذية والعقاقير CDRH لغرض الحفاظ على العقم متصلة آلة فراغ للفراغ ساعد شفط الدهون. تنفيذ شفط الدهون للحصول على 100 إلى 110 غرام من الأنسجة الدهنية باستثناء محلول tumescent. عند إجراء شفط الدهون، سيتم الحصول على الأنسجة الدهنية جنبا إلى جنب مع محلول tumescent ولكن ينبغي فصل وإزالتها.لفصل حل الطنين أولاً عن طريق الجاذبية، يمكن نقل الأنسجة الدهنية في مجموعة أجهزة الطرد المركزي إلى حقنة 60 ملليلتر ووضع الحقنة أسفل. في المثال، الجزء الافتتاحي من الحقنة هو في الجزء السفلي. من خلال الانتظار من خمس إلى ست دقائق ، سيتم فصل الأنسجة الدهنية والمحلول الزندي.إزالة السائل في الجزء السفلي من الحقنة عن طريق الضغط على الجزء العلوي من المكبس حقنة. تنفيذ الخطوات المذكورة أعلاه تسعة إلى 11 حتى المجموع من 100 غرام إلى 110 غرام من الدهنية الدهنية وقد تراكمت في الركبة. بعد فصل حل tumescent عن طريق الجاذبية وتراكم 50 غراما إلى 55 غراما من الدهون الpirate لكل 60 ملليلتر الطرد المركزي مجموعة طقم معقم مغلقة، ووضع اثنين من مجموعات الطرد المركزي في دلو حاوية الطرد المركزي وتدور في 1600 G لمدة خمس دقائق، وتكثيف الدهون الpirate وفصل السوائل من الأنسجة الدهنية.هذه العملية تكثف مزيد من التعرق الدهون، ويمكن أن تنتج زيت دهنية في حالات معينة. الحرص على عدم اهتزاز، وإزالة غطاء السلامة والمكونات في الجزء السفلي من عدة أجهزة الطرد المركزي. إزالة السائل السفلي عن طريق دفع ببطء إلى أسفل على رأس المكبس من عدة أجهزة الطرد المركزي.على حقنة منفصلة 60 ملليلتر، تذوب 10 ملليغرام من الكولاجيناز، خمسة ملليغرام collagenase محددة لالأنسجة الضامة، وخمسة ملليغرام من الكولاجين محددة للأنسجة الدهنية مع 50 ملليلتر من المالحة العادية. مزيج ما يقرب من 25 إلى 30 ملليلتر من التعرق الدهون المكثف مع الكولاجيناز الذائب، وخمسة ملليغرام من الكولاجين محددة لالأنسجة الضامة، وخمسة ملليغرام من الكولاجين محددة للأنسجة الدهنية بنسبة واحد إلى واحد، وحجم لحجم، عن طريق ربط حقنة 60 ملليلتر إلى عدة أجهزة الطرد المركزي باستخدام موصل متخصص. مزيج دقيق لتكثف التعرق والإعدادية وكولاجيناز عن طريق دفع المحتوى بين حقنة 60 ملليلتر ومجموعة أجهزة الطرد المركزي باستخدام قضيب أو دافع.نقل خليط من الدهنية وكولاجيناز مرة أخرى إلى حقنة 60 ملليلتر. ربط كل حقنة 60 ملليلتر تحتوي على الخليط مع التجانس الأنسجة التي تحتوي على ريش. توصيل حقنة فارغة 60 ملليلتر إلى الطرف الآخر من المهيجين.دفع الخليط إلى حقنة 60 ملليلتر أخرى من خلال التجانس لمدة أربع إلى ست مرات، مما أدى إلى قطع و mincing من التعرق الدهون. نقل التعرق الدهون المتجانسة والخليط الكولاجيني مرة أخرى إلى 60 ملليلتر الطرد المركزي عدة من خلال موصل متخصص. ضع أطقم أجهزة الطرد المركزي في حاوية توضع في حاضنة تم تسخينها مسبقاً عند 37 درجة مئوية.احتضان مجموعات الطرد المركزي اثنين مع خليط متجانسة في 37 درجة مئوية لمدة 40 دقيقة أثناء الدوران في 45 دورة في الدقيقة. بعد 40 دقيقة من الحضانة، وإزالة الحاوية من الحاضنة بطريقة عقيمة. ثم إزالة مجموعات أجهزة الطرد المركزي ووضعها في جهاز الطرد المركزي.أجهزة الطرد المركزي الخلائط في 800 G لمدة خمس دقائق لفصل الدهنية الأنسجة المشتقة من SVF. بعد الطرد المركزي، يتم إزالة المكبر، الذي يتضمن الكولاجين والأنسجة الدهنية المهضمة من كل مجموعة أجهزة الطرد المركزي عن طريق إزالة غطاء الحقنة على رأس المكبس ووضع حقنة 30 ملليلتر على فتحة المكبس من خلال اتصال قفل الحقنة. اضغط ببطء على الجزء برميل من حقنة 30 ملليلتر لsupernatant لملء في حقنة 30 ملليلتر.اضغط أسفل برميل حقنة 30 ملليلتر على طول الطريق إلى آخر ثلاثة إلى أربعة ملليلترات من الجزء السفلي من عدة أجهزة الطرد المركزي، وترك فقط آخر ثلاثة إلى أربعة ملليلترات من SVF المشتقة من الأنسجة الدهنية. المُندفع هو الإهمال إزالة حقنة 30 ملليلتر من الجزء العلوي من المكبس وملء حقنة مع 5٪ دكستروز حل الرنين، والمعروف أيضا باسم D5LR.عن طريق إرفاق حقنة 30 ملليلتر مليئة D5LR على الجزء العلوي من فتحة المكبس، ملء مجموعات الطرد المركزي التي تحتوي على ثلاثة إلى أربعة ملليلتر من SVF المشتقة من الأنسجة الدهنية مع D5LR تصل إلى 55 ملليلتر. ثم إزالة حقنة 30 ملليلتر، سقف فتح المكبس، والطرد المركزي مجموعات الطرد المركزي مرة أخرى في 300 G لمدة أربع دقائق تقريبا. كرر الخطوات رقم 17 إلى رقم 21 لما مجموعه أربع غسيلات.بعد جهاز الطرد المركزي الرابع، من أجل الحصول على SVF النهائي للحقن، وإزالة سقف السلامة والمكونات في فتح أسفل مجموعة أجهزة الطرد المركزي دون اهتزاز أو تحويل مجموعة أجهزة الطرد المركزي. إرفاق حقنة 20 ملليلتر لفتح قاع مجموعة أجهزة الطرد المركزي باستخدام موصل مصمم خصيصًا. سحب المكبس من حقنة 20 ملليلتر عدة مرات ذهابا وإيابا لزعزعة الخلايا التي استقرت على الجزء السفلي من عدة أجهزة الطرد المركزي.إزالة الحجم الإجمالي المطلوب من SVF التي تحتوي على كل من ASTs و ECM جنبا إلى جنب مع الخلايا والأنسجة الأخرى. عادة حوالي ثلاثة إلى أربعة ملليلتر من كل طقم الطرد المركزي لحقن مفصل الركبة. فعلنا 30 ملليلتر من الدم الذاتي جنبا إلى جنب مع 2.5 ملليلتر من محلول كسيترويز رات تخثر.ثم تم نقل الدم المسحوب إلى أطقم براميل الطرد المركزي سعة 60 ملليلتر. ثم تم الطرد في 730 الجاذبية لمدة خمس دقائق. وتمت إزالة المُتسرّع ووضع في مجموعة جديدة من أجهزة الطرد المركزي سعة 60 ملليلتر.تم طرد المُتفوّض في 1350 جاذبية لمدة أربع دقائق، وحصل على 4.4 ملليلتر من PRP. تنظيف الركبة للمريض مع 5٪ بيتادين والستائر بطريقة عقيمة. Palpate الأمامي للركبة لمساحة مشتركة بين عظام التيبالي والفيمور.تخدير موقع الحقن بشكل سطحي مع الليدوكائين المخفف، ملليلتر واحد من 1٪ ليدوكاين المخفف مع أربعة ملليلتر من المالحة العادية، من الجلد إلى خارج كبسولة مشتركة. ثم تخدير داخل كبسولة مشتركة مع ropivacain المخفف، واحد ملليلتر 0.75٪ ropivacain المخفف مع ثلاثة ملليلتر من المالحة العادية. مزيج مليلتر اثنين من HA إلى 6-8 ملليلتر من SVF الواردة في حقنة 20 ملليلتر من خلال حقنة لموصل الحقنة.باستخدام حقنة لموصل الحقنة، إضافة 0.4 ملليلتر من كلوريد الكالسيوم إلى ثلاثة إلى أربعة ملليلتر من PRP الذاتية التي تم إعدادها بالفعل ويجري جاهزة في حقنة خمسة ملليلتر. الجمع بين 3.5 إلى 4.5 ملليلتر PRP كلوريد الكالسيوم في حقنة خمسة ملليلتر مع 8-10 ملليلتر من خليط HA-SVF في حقنة 20 ملليلتر من خلال حقنة لموصل الحقنة. حقن على الفور الخليط، حوالي 12 إلى 15 ملليلتر، ببطء في المفصل الريبالي الفخذي الأمامي للركبة، وذلك باستخدام 38 ملليمتر 18 مقياس إبرة مع أو بدون التوجيه الموجات فوق الصوتية.بعد الحقن، ضمادة موقع الحقن مع الضغط عن طريق طي شاش القطن 4x4 أربع مرات ووضع الأشرطة على الشاش 4x4 مطوية. تعليمات المريض أن يبقى لا يزال لمدة 60 دقيقة للسماح لمرفق الخلية. تعليمات المريض للحد من الأنشطة لمدة لا أدنى من أسبوع واحد بعد الخروج من العيادة.العودة إلى العيادة للحصول على ثلاث حقن إضافية من PRP تفعيلها من كلوريد الكالسيوم على مدى ثلاثة أسابيع. تلقى المريض مع المرحلة الثالثة OA العلاج كما هو موضح في قسم البروتوكول. بعد الأسبوع الثاني من حقن خليط ASV-ECM ، تحسن ألم المريض وROM.بحلول الأسبوع 16th, الألم المريض وROM تحسنت بشكل ملحوظ أكثر من 70٪ ما بعد العلاج MRI, التي اتخذت بعد الأسبوع 16, أظهرت زيادة سماكة الأنسجة الشبيهة بالغضاريف على الجانب المتوسط من الركبة. تلقى مريض آخر مع المرحلة الثالثة OA العلاج كما هو موضح في قسم البروتوكول. بعد الأسبوع الثاني من حقن خليط ASV-ECM ، تحسن ألم المريض وROM.وبحلول الأسبوع الثامن عشر، تحسن الألم والذاكرة ROM بشكل ملحوظ إلى 80٪ التصوير بالرنين المغناطيسي المتكرر الذي تم التقاطه بعد الأسبوع الثامن عشر أظهر زيادة في ارتفاع الأنسجة الشبيهة بالغضاريف على الجانب الأمامي من الركبة. وتلقى المريض الثالث الذي أصيب بالمرحلة الثالثة من العلاج كما هو موضح في قسم البروتوكول. بعد الأسبوع الثاني من حقن خليط ASV-ECM، تحسن ألم المريض وROM بنسبة 50٪ تقريبًا في الأسبوع الثاني والعشرين، تحسن الألم واللّص ROM بشكل ملحوظ أكثر من 80٪ التصوير بالرنين المغناطيسي المتكرر الذي تم التقاطه بعد الأسبوع الثاني والعشرين أظهر زيادة في ارتفاع الأنسجة الشبيهة بالغضاريف على الجانب الوسيط من الركبة.لا يتوفر حاليا أي علاج علاجي لعلاج الزراعة العضوية. ومع ذلك، حقن عن طريق الجلد من العلاج بالخلايا الجذعية مع ASCs وECM متجانسة جنبا إلى جنب مع HA وPRP مماثلة تفعيلها مع كلوريد الكالسيوم قد توفر بديلا للعلاج الحالي للعلاج من علاج الزراعة العضوية في الركبة.

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

الجيل التجريبية للسرطان ، المرتبطين بها الخلايا الليفية (مقاهي) من الخلايا الليفية الثديية البشرية

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

إصلاح نموذج الحرجة الحجم عيب قبي طريق الدهنية المشتقة من الخلايا اللحمية المقطوع Lipoaspirate

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. ...

Improved Protocol For Laser Microdissection Of Human Pancreatic Islets From Surgical Specimens

تحسين بروتوكول للتسليخ مجهري ليزر من الجزر البنكرياسية الإنسان من عينات جراحية

Laser microdissection (LMD) is a technique that allows the recovery of selected cells and tissues from minute amounts of parenchyma 1,2. The dissected ...

Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

بروتوكول الفحص السريري للكشف عن Scrapie غير نمطية والكلاسيكية في الأغنام

The diagnosis of scrapie, a transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) of sheep and goats, is currently based on the detection of disease-associated ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

ثلاثي الأبعاد نموذج المشارك الثقافة ل-ورم انسجة التفاعل

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

التصور الأوعية الدموية ومتني التجديد بعد استئصال الكبد الجزئي 70٪ في الفئران العادية

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

A Novel Clinical Grade Isolation Method for Human Kidney Perivascular Stromal Cells

طريقة عزل رواية الصف سريرية للكلى البشرية ارتشاح الخلايا اللحمية

Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) are tissue homeostatic and immune modulatory cells that have shown beneficial effects in kidney diseases and ...

Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

Stromal الأوعية الدموية الغنية بكسر الدهون تطعيم لعلاج أعراض نهاية-نيوروماتا

The purpose of this study was to methodically illustrate and highlight the crucial steps of stromal vascular fraction (SVF)-enriched fat grafting as a ...

An Optimized Evans Blue Protocol to Assess Vascular Leak in the Mouse

الأزرق إيفانز أمثل البروتوكول لتقييم تسرب الأوعية الدموية في الماوس

Vascular leak, or plasma extravasation, has a number of causes, and may be a serious consequence or symptom of an inflammatory response. This study may ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

زرع صفحة الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية للحد من تسرب بعد Colectomy الجزئية في نموذج الفئران

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...