Name: clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration
Uploaded: 2018-09-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration at JoVE.com

De auteur erkent de steun van het personeel van Mipro medische kliniek en het ontwerp van de figuur door Jaepil/David Lee. Dit werk werd gesteund door onderzoekssubsidies van de Bio & medische programma van de ontwikkeling van de technologie van de NRF gefinancierd door de MSIT (nummer NRF-2017M3A9E4078014); en de nationale onderzoek Stichting van Korea (NRF) gefinancierd door het ministerie van wetenschap en ICT (getallen NRF-2017R1A2B4002315 en de NRF-2016R1C1B2010308).

De goedkeuring van en instemming met het verslag na Aanvraagrapporten waren afstand door de Myongji Universiteit institutionele Review Board Comité (MJUIRB). Verder was dit protocol voor klinische met inachtneming van de richtsnoeren van de verklaring van Helsinki en regulering van de KFDA. Voor de procedures, zijn geïnformeerde toestemming verkregen van de patiënten.
1. liposuctie
Opmerking: Presteren met steriele techniek.
<ol><li>Gebruik de volgende criteri...

<ol>
	<li>Arnoczky, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Building+a+meniscus.+Biologic+considerations.">Building a meniscus. Biologic considerations.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (367 Suppl), S244-S253 (1999).</li><li>Barry, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell+therapy+in+joint+disease.">Mesenchymal stem cell therapy in joint disease.</a> Novartis Foundation Symposium. 249, 86-241 (2003).</li><li>Usuelli, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cells+in+orthopaedic+pathologies.">Adipose-derived stem cells in orthopaedic pathologies.</a> British Medical Bulletin. 124 (1), 31-54 (2017).</li><li>Zhang, H. N., Li, L., Leng, P., Wang, Y. Z., Lv, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uninduced+adipose-derived+stem+cells+repair+the+defect+of+full-thickness+hyaline+cartilage.">Uninduced adipose-derived stem cells repair the defect of full-thickness hyaline cartilage.</a> Chinese Journal of Traumatology. 12 (2), 92-97 (2009).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adipose+tissue+is+a+source+of+multipotent+stem+cells.">Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells.</a> Molecular Biology of the Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multilineage+cells+from+human+adipose+tissue:+implications+for+cell-based+therapies.">Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies.</a> Tissue Engineering. 7 (2), 211-228 (2001).</li><li>Baer, P. C., Geiger, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+mesenchymal+stromal/stem+cells:+tissue+localization,+characterization,+and+heterogeneity.">Adipose-derived mesenchymal stromal/stem cells: tissue localization, characterization, and heterogeneity.</a> Stem Cells International. 2012, 812693 (2012).</li><li>Zhu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cell:+a+better+stem+cell+than+BMSC.">Adipose-derived stem cell: a better stem cell than BMSC.</a> Cell Biochemistry and Function. 26 (6), 664-675 (2008).</li><li>Bellei, B., Migliano, E., Tedesco, M., Caputo, S., Picardo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maximizing+non-enzymatic+methods+for+harvesting+adipose-derived+stem+from+lipoaspirate:+technical+considerations+and+clinical+implications+for+regenerative+surgery.">Maximizing non-enzymatic methods for harvesting adipose-derived stem from lipoaspirate: technical considerations and clinical implications for regenerative surgery.</a> Scientific Reports. 7 (1), 10015 (2017).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Park, K. S., Jeong, B. C., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+Cartilage+in+Human+Knee+Osteoarthritis+with+Autologous+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells+and+Autologous+Extracellular+Matrix.">Regeneration of Cartilage in Human Knee Osteoarthritis with Autologous Adipose Tissue-Derived Stem Cells and Autologous Extracellular Matrix.</a> BioResearch Open Access. 5 (1), 192-200 (2016).</li><li>Alexander, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+Adipose-derived+Stromal+Vascular+Fraction+(AD-SVF)+Cell+Biology+and+Use+on+the+Basis+of+Cellular,+Chemical,+Structural+and+Paracrine+Components:+A+Concise+Review.">Understanding Adipose-derived Stromal Vascular Fraction (AD-SVF) Cell Biology and Use on the Basis of Cellular, Chemical, Structural and Paracrine Components: A Concise Review.</a> Journal of Prolotherapy. 4, e855-e869 (2012).</li><li>Benders, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+scaffolds+for+cartilage+and+bone+regeneration.">Extracellular matrix scaffolds for cartilage and bone regeneration.</a> Trends in Biotechnology. 31 (3), 169-176 (2013).</li><li>Korean Food and Drug Administration (KFDA). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+therapy:+Rules+and+Regulations.">Cell therapy: Rules and Regulations.</a> KFDA. , (2009).</li><li>Pak, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+human+bones+in+hip+osteonecrosis+and+human+cartilage+in+knee+osteoarthritis+with+autologous+adipose-tissue-derived+stem+cells:+a+case+series.">Regeneration of human bones in hip osteonecrosis and human cartilage in knee osteoarthritis with autologous adipose-tissue-derived stem cells: a case series.</a> Journal of Medical Case Reports. 5, 296 (2011).</li><li>Pak, J., Chang, J. J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+reporting+on+implantation+of+autologous+adipose+tissue-derived+stem+cells+with+platelet-rich+plasma+into+human+articular+joints.">Safety reporting on implantation of autologous adipose tissue-derived stem cells with platelet-rich plasma into human articular joints.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 14, 337 (2013).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Kartolo, W. A., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cartilage+Regeneration+in+Human+with+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells:+Current+Status+in+Clinical+Implications.">Cartilage Regeneration in Human with Adipose Tissue-Derived Stem Cells: Current Status in Clinical Implications.</a> BioMed Research International. 2016, 4702674 (2016).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+biological+approach+to+treat+chondromalacia+patellae.">A novel biological approach to treat chondromalacia patellae.</a> PLoS One. 8 (5), e64569 (2013).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+repair+of+damaged+meniscus+with+autologous+adipose+tissue-derived+stem+cells.">Regenerative repair of damaged meniscus with autologous adipose tissue-derived stem cells.</a> BioMed Research International. 2014, 436029 (2014).</li><li>Aust, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yield+of+human+adipose-derived+adult+stem+cells+from+liposuction+aspirates.">Yield of human adipose-derived adult stem cells from liposuction aspirates.</a> Cytotherapy. 6 (1), 7-14 (2004).</li><li>De Ugarte, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+multi-lineage+cells+from+human+adipose+tissue+and+bone+marrow.">Comparison of multi-lineage cells from human adipose tissue and bone marrow.</a> Cells Tissues Organs. 174 (3), 101-109 (2003).</li><li>Guilak, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonal+analysis+of+the+differentiation+potential+of+human+adipose-derived+adult+stem+cells.">Clonal analysis of the differentiation potential of human adipose-derived adult stem cells.</a> Journal of Cellular Physiology. 206 (1), 229-237 (2006).</li><li>Mitchell, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunophenotype+of+human+adipose-derived+cells:+temporal+changes+in+stromal-associated+and+stem+cell-associated+markers.">Immunophenotype of human adipose-derived cells: temporal changes in stromal-associated and stem cell-associated markers.</a> Stem Cells. 24 (2), 376-385 (2006).</li><li>Oedayrajsingh-Varma, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue-derived+mesenchymal+stem+cell+yield+and+growth+characteristics+are+affected+by+the+tissue-harvesting+procedure.">Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell yield and growth characteristics are affected by the tissue-harvesting procedure.</a> Cytotherapy. 8 (2), 166-177 (2006).</li><li>. Liberase TL information available from Sigma Millipore online Available from: <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/05401020001?lang=en&amp;region=US">https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/05401020001?lang=en&amp;region=US</a> (2018)</li><li>. Liberase TM information available from Sigma Millipore online Available from: <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/Libtmro?lang=en&amp;region=US">https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/Libtmro?lang=en&amp;region=US</a> (2018)</li><li>Childs, J. D., Piva, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychometric+properties+of+the+functional+rating+index+in+patients+with+low+back+pain.">Psychometric properties of the functional rating index in patients with low back pain.</a> European Spine Journal. 14 (10), 1008-1012 (2005).</li><li>Price, D. D., McGrath, P. A., Rafii, A., Buckingham, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+validation+of+visual+analogue+scales+as+ratio+scale+measures+for+chronic+and+experimental+pain.">The validation of visual analogue scales as ratio scale measures for chronic and experimental pain.</a> Pain. 17 (1), 45-56 (1983).</li><li>Pilgaard, L., Lund, P., Rasmussen, J. G., Fink, T., Zachar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+highly+defined+proteases+for+the+isolation+of+adipose+tissue-derived+stem+cells.">Comparative analysis of highly defined proteases for the isolation of adipose tissue-derived stem cells.</a> Regenerative Medicine. 3 (5), 705-715 (2008).</li><li>D'Ambrosi, R., Indino, C., Maccario, C., Manzi, L., Usuelli, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+Microfractured+and+Purified+Adipose+Tissue+for+Arthroscopic+Management+of+Osteochondral+Lesions+of+the+Talus.">Autologous Microfractured and Purified Adipose Tissue for Arthroscopic Management of Osteochondral Lesions of the Talus.</a> Journal of Visualized Experiments. (131), e56395 (2018).</li><li>Packer, J. D., Chang, W. T., Dragoo, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+vibrational+energy+to+isolate+adipose-derived+stem+cells.">The use of vibrational energy to isolate adipose-derived stem cells.</a> Plastic Reconstructive Surgery-Global Open. 6 (1), e1620 (2018).</li><li>Hanke, C. W., Bernstein, G., Bullock, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+of+tumescent+liposuction+in+15,336+patients.+National+survey+results.">Safety of tumescent liposuction in 15,336 patients. National survey results.</a> Dermatologic Surgery. 21 (5), 459-462 (1995).</li><li>Illouz, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+of+liposuction.">Complications of liposuction.</a> Clinics in Plastic Surgery. 33 (1), 129-163 (2006).</li><li>Dixit, V. V., Wagh, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unfavourable+outcomes+of+liposuction+and+their+management.">Unfavourable outcomes of liposuction and their management.</a> Indian Journal of Plastic Surgery. 46 (2), 377-392 (2013).</li><li>Lehnhardt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Major+and+lethal+complications+of+liposuction:+a+review+of+72+cases+in+Germany+between+1998+and+2002.">Major and lethal complications of liposuction: a review of 72 cases in Germany between 1998 and 2002.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (6), 396e-403e (2008).</li><li>Iyer, S. S., Rojas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+mesenchymal+stem+cells:+novel+concept+for+future+therapies.">Anti-inflammatory effects of mesenchymal stem cells: novel concept for future therapies.</a> Expert Opinion on Biological Therapy. 8 (5), 569-581 (2008).</li><li>Zhang, J., Middleton, K. K., Fu, F. H., Im, H. J., Wang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HGF+mediates+the+anti-inflammatory+effects+of+PRP+on+injured+tendons.">HGF mediates the anti-inflammatory effects of PRP on injured tendons.</a> PLoS One. 8 (6), e67303 (2013).</li><li>Li, N. Y., Yuan, R. T., Chen, T., Chen, L. Q., Jin, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+platelet-rich+plasma+and+latissimus+dorsi+muscle+flap+on+osteogenesis+and+vascularization+of+tissue-engineered+bone+in+dogs.">Effect of platelet-rich plasma and latissimus dorsi muscle flap on osteogenesis and vascularization of tissue-engineered bone in dogs.</a> Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 67 (9), 1850-1858 (2009).</li><li>Parsons, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biological+effect+of+platelet+rich-plasma+on+the+fracture+healing+process.">The biological effect of platelet rich-plasma on the fracture healing process.</a> The Journal of bone and joint surgery. British volume. 91-B, 293 (2009).</li><li>Wu, W., Chen, F., Liu, Y., Ma, Q., Mao, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+injectable+tissue-engineered+cartilage+by+using+platelet-rich+plasma:+experimental+study+in+a+rabbit+model.">Autologous injectable tissue-engineered cartilage by using platelet-rich plasma: experimental study in a rabbit model.</a> Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 65 (10), 1951-1957 (2007).</li><li>Cooper, T. W., Eisen, A. Z., Stricklin, G. P., Welgus, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+collagenase+inhibitor:+characterization+and+subcellular+localization.">Platelet-derived collagenase inhibitor: characterization and subcellular localization.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 82 (9), 2779-2783 (1985).</li><li>Uzuki, M., Sawai, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+affinity+of+sodium+hyaluronate+of+various+molecular+weights+for+degenerated+cartilage:+a+histochemical+study+using+hyaluronic+acid+binding+protein.">A comparison of the affinity of sodium hyaluronate of various molecular weights for degenerated cartilage: a histochemical study using hyaluronic acid binding protein.</a> International Congress Series. 1223, 279-284 (2001).</li><li>Pagano, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+morphometric+description+of+adipose+tissue+during+weight+changes:+a+quantitative+tool+for+assessment+of+tissue+texture.">Molecular and morphometric description of adipose tissue during weight changes: a quantitative tool for assessment of tissue texture.</a> International Journal of Molecular Medicine. 14 (5), 897-902 (2004).</li></ol>

In 2001, Zuk et al. geïsoleerde stamcellen uit adipeus weefsel door het afbreken van de collageen-matrix met collagenase6. Nadien, toonde de Fractie dat deze stamcellen geïsoleerd van het vetweefsel kan transformeren in kraakbeen en andere weefsels van mesoderm in oorsprong, waaruit blijkt dat deze stamcellen mesenchymale in oorsprong waren.
Ook is de procedure die in dit artikel een gemodificeerde protocol bij soortgelijke methode toepassen op de menselijke ...

Mesenchymale stamcellen (MSCs) is bekend dat er de mogelijkheid om te regenereren van kraakbeen1,2,3,4,5,6. Deze kunnen gemakkelijk worden verkregen uit verschillende bronnen: beenmerg, navelstrengbloed en vetweefsel onder vele anderen. Onder deze bronnen is adipeus weefsel de enige bron waar een voldoende aantal MSCs kan worden verkregen zonder een uitbreiding van de cultuur om te regenereren van kraakbeen in klinische instellingen7,8. Autologe beenmerg stromale vasculaire breuk (SVF) kan ook gemakkelijk worden verkregen. Het aantal cellen van de stam die zijn opgenomen in de niet-cultuur uitgebreide beenmerg is echter zeer laag7,8. Koord-bloed kan een voldoende aantal MSCs bevatten. Navelstrengbloed is echter niet een beschikbaar bron van autologe SVF.
Tal van methoden van verwerking adipeus weefsel te verkrijgen van SVF zijn beschikbaar voor klinische toepassingen. Onder deze, de methode voor het verkrijgen van MSCs uit vetweefsel met collagenase, ontwikkeld en bevestigd door Zuk et al. 5 , 6, wordt zeer goed geaccepteerd. Deze methode van het gebruik van collagenase is aangepast voor klinische toepassingen in orthopedie. Om te worden toegepast op klinische instellingen, moet het systeem een gesloten systeem te behouden de steriliteit terwijl het gemak. Één bepaalde wijziging gepresenteerd in dit artikel impliceert homogenisering van de lipoaspirates. Klein formaat lipoaspirates zijn relatief sneller dan grotere degenen die leiden de ongelijke verdeling van het vetweefsel tot verteerd. Bovendien kan deze grotere formaat lipoaspirates vezelig weefsels die verstoppen kunnen de spuiten en naalden tijdens het uitvoeren van gezamenlijke injecties9,10produceren. Om te voorkomen dat deze kwesties, kan de lipoaspirates worden gehomogeniseerd door snijden en hakken van de lipoaspirates voordat de incubatie met collagenase. De resulterende adipeus weefsel afkomstige SVF kan bevatten meer uniforme extracellulaire matrix (ECM) in vergelijking met lipoaspirates die niet gehomogeniseerde11. De achtergebleven ECM vervat in de SVF kan werken als een steiger12.
In 2009, heeft autologe adipeus weefsel afkomstige SVF gekregen door de Korean Food and Drug Administration (KFDA) wanneer verwerkt in een medische inrichting met minimale verwerking door een arts-13. Daarna is autologe adipeus weefsel afkomstige SVF gebruikt als een potentiële agent te knie functies bij osteoartritis (OA) patiënten te verbeteren door het potentieel het regenereren van kraakbeen-achtig weefsel10,14,15 , 16 , 17 , 18 . 
In 2011 toonde Pak voor de eerste keer dat vetweefsel afkomstige stamcellen (ASC's) opgenomen in het adipeus weefsel afkomstige SVF knie functies mogelijk het regenereren van kraakbeen-achtig weefsel in menselijke OA patiënten wanneer geïnjecteerd met platelet-rich kan verbeteren plasma (PRP) 14. Daarnaast hebben Pak et al. veiligheidsgegevens in 2013 waarbij 91 patiënten gemeld. Het tarief van de gemiddelde werkzaamheid gemeld in deze veiligheidsgegevens was 67%15. Daarna aanvullend onderzoek door Pak et al. toonde verbeterde knie functies mogelijk als gevolg van kraakbeen-achtige weefselregeneratie bij patiënten met een meniscus scheuren en Patellofemoraal pijnsyndroom10,16,17 ,18. Op basis van artikelen gemeld, is het bekend dat het aantal cellen van de stam in 100 g adipeus weefsel verwerkt door het protocol gepresenteerd in dit artikel vervatte van 1.000.000-40.000.000 afhankelijk van patiëntenverenigingen kenmerken8, variëren kan 19 , 20 , 21 , 22 , 23.
Hier presenteren we een protocol voor klinische van menselijke knie OA met behulp van autologe adipeus weefsel afkomstige SVF met HA en PRP geactiveerd met calciumchloride. De eerste versie van dit protocol voor klinische, waarbij een gesloten, handmatige systeem om te handhaven de steriliteit, werd gemeld in 201114. De identieke protocol werd geoptimaliseerd, steriliteit, onderhouden en werd gemeld in 2013 en 201610,15. Hier, wordt het geoptimaliseerde protocol gepresenteerd. Het schematisch overzicht van het protocol is opgenomen in afbeelding 1.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58363/58363fig1.jpg"> Figuur 1: het schematisch overzicht van het protocol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58363/58363fig1large.jpg" target="_blank">Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.</a>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:941px;" width="941">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Material</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5% Betadine (povidone-iodine)&#160;</td>
			<td>Firson Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">657400260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2% Lidocaine&#160;</td>
			<td>Daehan Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">670603480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Tumescent solution&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Myungmoon Pharm. Co. Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">N01BB01</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 500 mL normal saline, 40 mL 2% lidocaine, 20 mL 0.5% marcaine, and 0.5 mL epinephrine 1:1000.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Liberase TL and TM research grade&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Roche Applied Science</td>
			<td style="width:156px;">5401020001</td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">D5LR</td>
			<td>Dahan Pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645101072</td>
			<td>Dextrose 5% in lactated Ringer&#39;s solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Anticoagulant citrate dextrose solution&#160;</td>
			<td>Fenwal, Inc.</td>
			<td style="width:156px;">NDC:0942-0641</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 0.8% citric acid, 
			0.22% sodium citrate, and 0.223% dextrose.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3% (w/v) Calcium chloride&#160;</td>
			<td>Choongwae Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">644902101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.5% (w/v) HA (Hyaluronic acid )</td>
			<td>Dongkwang pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645902030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.25% Ropivacaine</td>
			<td>Huons Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">670600150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Equipment</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">3.0 mm Cannula&#160;</td>
			<td style="width:221px;">WOOJU Medical Instruments Co.</td>
			<td style="width:156px;">ML30200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">60-mL Luer-Lock syringe</td>
			<td style="width:221px;">BD (Becton Dickinson)&#160;</td>
			<td style="width:156px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centrifuge Barrel Kit&#160;</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue homogenizer that contains blades</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rotating incubator mixer</td>
			<td style="width:221px;">Medikan Co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">MS02060092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:221px;">Hanil Scientific Inc.</td>
			<td style="width:156px;">CE1133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Magnetic Resonance Imaging</td>
			<td style="width:221px;">Philips Medical Systems Inc.</td>
			<td style="width:156px;">18068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:261px;">Ultrasound Imaging System</td>
			<td style="width:221px;">Samsung Medison co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">CT-LK-V10-ICM-09.05.2007</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration

Osteoartritis (OA) is een van de meest voorkomende invaliderende aandoeningen. Onlangs, hebben talrijke pogingen gedaan om de functies van de knieën met behulp van verschillende vormen van mesenchymale stamcellen (MSCs). In Korea, het beenmerg concentraten en koord zijn bloed-afgeleide cellen van de stam goedgekeurd door de Korean Food and Drug Administration (KFDA) voor regeneratie van het kraakbeen. Daarnaast heeft een adipeus weefsel afkomstige stromale vasculaire breuk (SVF) gekregen door de KFDA voor gezamenlijke injecties in menselijke patiënten. Autologe adipeus weefsel afkomstige SVF bevat extracellulaire matrix (ECM) naast mesenchymale stamcellen. ECM excretes verschillende cytokines waarmee, samen met hyaluronzuur (HA) en platelet-rich plasma (PRP) geactiveerd door calciumchloride, MSCs te regenereren van kraakbeen en knie functies te verbeteren. In dit artikel presenteerden we een protocol ter verbetering van de functies van de knie door het regenereren van kraakbeen-achtig weefsel in menselijke patiënten met OA. Het resultaat van het protocol werd voor het eerst gemeld in 2011 gevolgd door een paar extra publicaties. Het protocol houdt liposuctie met het oog op autologe lipoaspirates die zijn vermengd met collagenase. Dit lipoaspirates-collagenase mengsel vervolgens gesneden en gehomogeniseerd Schakel grote vezelig weefsel dat de naald tijdens de injectie kan verstoppen. Daarna is het mengsel geïncubeerd om te verkrijgen van SVF adipeus weefsel-afgeleide. De resulterende adipeus weefsel afkomstige SVF, met zowel adipeus weefsel afkomstige MSCs en restanten van ECM, wordt geïnjecteerd in de knieën van patiënten, gecombineerd met HA en calciumchloride geactiveerd PRP. Opgenomen zijn drie gevallen van patiënten die werden behandeld met ons protocol leidt tot verbetering van de kniepijn, zwelling en bereik van de beweging samen met MRI bewijs van hyalien kraakbeen-achtig weefsel.

Drie patiënten (een 87-jarige vrouw met fase 3 OA, een 68-jarige man met fase 3 OA, en een 60-jarige danseres met fase 3 OA) zonder enige significante verleden medische geschiedenis gepresenteerd naar de kliniek met persistente kniepijn en gewenst voor potentiële autologe adipeus weefsel afkomstige SVF behandeling. Alle drie patiënten hadden hun knie onderzocht door een orthopedisch chirurg en werden aangeboden aan totale knie vervanging (TKR) en waren terughoudend om de operatie. Vó?...

Watch this Scientific Journal Video about Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration at JoVE.com

Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

Hier presenteren we een protocol voor de productie van een adipeus weefsel afkomstige stromale vasculaire breuk en de toepassing ervan te verbeteren functies van de knie door het regenereren van kraakbeen-achtig weefsel in menselijke patiënten met artrose.

Protocol voor klinische adipeus weefsel afkomstige stromale vasculaire breuk oplevert potentiële regeneratie van het kraakbeen

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

Artrose is een van de meest voorkomende slopende aandoeningen onder de oudere bevolking. Op dit moment is er geen duidelijke remedie voor de onderliggende oorzaken van artrose. Dit klinische protocol beschrijft een innovatieve procedure voor een veelbelovende, minimaal invasieve, en alternatieve behandeling van menselijke knieartrose door het regenereren van kraakbeen zoals weefsel.Artrose is een van de meest voorkomende slopende aandoeningen onder de oudere bevolking. Op dit moment is er geen duidelijke remedie voor de onderstrepende oorzaken van artrose. Dit klinische protocol is een innovatieve procedure voor een veelbelovende, minimaal invasieve, en alternatieve behandeling van menselijke knieartrose door het regenereren van kraakbeen-achtig weefsel.Breng de patiënt in een operatiekamer met een biohazard Klasse A kap, en plaats hem of haar in een supine positie. Reinig de buikstreek van de patiënt met 5%betadine-povidine jodium en drapeer de patiënt met behulp van de steriele techniek, waardoor het schone gebied van de buik voor liposuctie wordt bloot. Ongeveer vijf centimeter infero-lateraal van umbilicus, verdoven twee plaatsen, aan de linkerkant en andere aan de rechterkant van de umbilicus van incisie te maken.Met behulp van twee milliliter van 2% lidocaïne zonder epinephrinum met een 25-gauge 1,5 inch naald in een vijf milliliter spuit door het injecteren van elke site op het epidermale niveau. Verdoven de plaats van incisie te maken met behulp van vijf milliliter van tumescent oplossing en 10 milliliter spuit en de naald 25-gauge 1,5 inch. Maak twee incisies van 0,5 centimeter ongeveer vijf centimeter onder de umbilicus lateraal door knijpen de huid om de diepte van het onderhuidse niveau te verhogen.Met behulp van een nummer 11 mes, helpen de verhoogde huid door te dringen tot het onderhuidse niveau, maar niet door te dringen door de buikwand. Door het gebruik van 20 centimeter 60-gauge canule, verdoven het onderhuidse niveau van de hele onderbuik gebied dat moet worden liposuctie met 700 tot 800 milliliter van de tumescent oplossing. Na het beëindigen van infiltratie van de hele onderbuik met tumescente oplossing, bereid een liposuctie apparaat door het aansluiten van een 3,0 millimeter canule aangesloten op een 60 milliliter of 30 milliliter spuit voor handmatige liposuctie of speciaal ontworpen 3,0 millimeter canule aangesloten op een centrifuge kit.Een gesloten systeem spuit ontwikkeld door onszelf en goedgekeurd door FDA CDRH met het oog op het houden van de steriliteit aangesloten op een vacuüm machine voor vacuüm bijgestaan liposuctie. Voer liposuctie uit om 100 tot 110 gram vetweefsel te verkrijgen, met uitzondering van tumescente oplossing. Bij het uitvoeren van liposuctie, vetweefsel zal worden verkregen samen met tumescent oplossing, maar moet worden gescheiden en verwijderd.Om de tumescente oplossing eerst door de zwaartekracht te scheiden, kan het vetweefsel in de centrifugekit worden overgebracht naar een spuit van 60 milliliter en de spuit naar beneden plaatsen. Het openingsgedeelte van de spuit bevindt zich bijvoorbeeld onderaan. Door vijf tot zes minuten te wachten, worden het vetweefsel en de tumescentoplossing gescheiden.Verwijder de vloeistof aan de onderkant van de spuit door op de bovenkant van de spuitzuiger te drukken. Voer de bovenstaande stappen negen tot 11 tot het totaal van de 100 gram tot 110 gram vetweefsel lipide aanzuigen per knie is opgehoopt. Na het scheiden van de tumescent oplossing door de zwaartekracht en accumuleren 50 gram tot 55 gram lipide aanzuigen per elke 60 milliliter centrifuge kit steriel gesloten systeem, plaats de twee centrifuge kits in een centrifuge container emmer en spin op 1600 G gedurende vijf minuten, condenseren de lipide aspiraat en het scheiden van vloeistof uit het vetweefsel.Dit proces condenseert verder de lipide aanzuigen en kan produceren vette olie in bepaalde gevallen. Wees voorzichtig niet te schudden, verwijder de veiligheidsdop en de stekker aan de onderkant van de centrifuge kit. Verwijder de onderste vloeistof door langzaam naar beneden te duwen op de top van de zuiger van de centrifuge kit.Los op afzonderlijke 60 milliliter spuit, los 10 milligram collagenase, vijf milligram collagenase specifiek voor bindweefsel, en vijf milligram collagenase specifiek voor vetweefsel met 50 milliliter van normale zoutoplossing. Meng ongeveer 25 tot 30 milliliter gecondenseerd lipide aanzuigen met opgeloste collagenase, vijf milligram collagenase specifiek voor bindweefsel, en vijf milligram collagenase specifiek voor vetweefsel bij een verhouding van een op een, volume in volume, door het aansluiten van de 60 milliliter spuit met een centrifuge kit met behulp van een gespecialiseerde connector. Meng grondig om de prep aanzuigen en collagenase te condenseren door het duwen van de inhoud tussen de 60 milliliter spuit en de centrifuge kit met behulp van een staaf of een pusher.Breng het mengsel van de lipide aanzuigen en de collagenase terug naar de 60 milliliter spuit. Sluit elke 60 milliliter spuit met het mengsel met het weefsel homogenisator die messen bevat. Sluit een lege spuit van 60 milliliter aan de andere kant van de homogenisator aan.Duw het mengsel naar de andere 60 milliliter spuit door de homogenisator voor vier tot zes keer, wat resulteert in het snijden en snijden van de lipide aanzuigen. Breng de gehomogeniseerde lipide aanzuigen en het collageenmengsel terug naar de 60 milliliter centrifugekit via een gespecialiseerde connector. Plaats de centrifugekits in een container die in een couveuse wordt geplaatst die voorverwarmd is bij 37 graden Celsius.Incubeer de twee centrifugekits met het gehomogeniseerde mengsel bij 37 graden Celsius gedurende 40 minuten tijdens het draaien bij 45 rpm. Na 40 minuten incubatie, verwijder de container uit de couveuse in steriele wijze. Verwijder vervolgens de centrifugekits en plaats ze in een centrifugemachine.Centrifugeren de mengsels op 800 G gedurende vijf minuten om het vetweefsel afgeleide SVF te scheiden. Na de centrifuge wordt de supernatant, die collagenase en verteerd vetweefsel bevat, uit elke centrifugekit verwijderd door de spuitdop bovenop de zuiger te verwijderen en een spuit van 30 milliliter op de zuiger te plaatsen die door een spuitslotverbinding opent. Druk langzaam naar beneden op het vat deel van de 30 milliliter spuit voor de supernatant te vullen in de 30 milliliter spuit.Druk op de 30 milliliter spuit vat helemaal naar de laatste drie tot vier milliliter van de bodem van de centrifuge kit, waardoor alleen de laatste drie tot vier milliliter vetweefsel afgeleide SVF. De supernatant is weggooien. Verwijder de 30 milliliter spuit van de bovenkant van de zuiger en vul de spuit met 5% dextrose lactated ringer oplossing, ook bekend als D5LR.Door het bevestigen van de 30 milliliter spuit gevuld met D5LR op de top van de zuiger opening, vul de centrifuge kits met drie tot vier milliliter vetweefsel afgeleide SVF met D5LR tot 55 milliliter. Verwijder vervolgens de 30 milliliter spuit, dop de zuiger opening, en centrifuge de centrifuge kits weer op 300 G voor ongeveer vier minuten. Herhaal stap 17 naar nummer 21 voor een totaal van vier wasbeurten.Na de vierde centrifuge, om de laatste SVF voor injectie te verkrijgen, verwijder de veiligheidsdop en de stekker aan de onderkant opening van de centrifuge kit zonder te schudden of draaien van de centrifuge kit. Bevestig een spuit van 20 milliliter aan de bodemopening van de centrifugekit met behulp van een speciaal ontworpen connector. Trek de zuiger van de 20 milliliter spuit meerdere malen heen en weer te schudden van de cellen die zich hebben gevestigd op de bodem van de centrifuge kit.Verwijder het gewenste totale volume van de SVF met zowel AST's als ECM samen met andere cellen en weefsels. Meestal ongeveer drie tot vier milliliter van elke centrifuge kit voor knie gewrichtsinjecties. We deden 30 milliliter autoloog bloed samen met 2,5 milliliter antistollingsmiddel citraat dextrose oplossing.Toen werd het getrokken bloed overgebracht naar de 60 milliliter centrifuge vat kits. Het werd toen gecentrifugeerd bij 730 zwaartekracht gedurende vijf minuten. En de supernatant werd verwijderd en in een nieuwe 60 milliliter centrifuge vat kit.De supernatant werd gecentrifugeerd op 1350 zwaartekracht gedurende vier minuten, het verkrijgen van 4,4 milliliter PRP. Reinig de knie van de patiënt met 5% betadine en drapeer het op een steriele manier. Palpate de voorste van de knie voor de gezamenlijke ruimte tussen scheenbeen en dijbeenbotten.Verdoof de injectieplaats oppervlakkig met verdunde lidocaïne, een milliliter van 1%lidocaïne verdund met vier milliliter normale zoutoplossing, van de huid tot net buiten de gewrichtscapsule. Verdoven vervolgens de binnenkant van de gewrichtscapsule met verdunde ropivacaine, een milliliter 0,75%ropivacaine verdund met drie milliliter normale zoutoplossing. Meng twee milliliter HA tot de zes tot acht milliliter SVF in een spuit van 20 milliliter door een spuit naar spuitconnector.Door het gebruik van een spuit om spuit connector, voeg 0,4 milliliter calciumchloride aan de drie tot vier milliliter van autologe PRP die al is voorbereid en klaar in een vijf milliliter spuit. Combineer 3,5 tot 4,5 milliliter PRP calciumchloride in een spuit van vijf milliliter met acht tot 10 milliliter HA-SVF mengsel in een 20 milliliter spuit door een spuit naar spuitconnector. Injecteer het mengsel onmiddellijk, ongeveer 12 tot 15 milliliter, langzaam in het voorste scheenbeen-dijbeengewricht van de knie, met behulp van 38 millimeter 18-gauge naald met of zonder de echografie begeleiding.Na de injectie, verband de injectie plaats met druk door het vouwen van 4x4 katoenen gaas vier keer en het plaatsen van tapes over de gevouwen 4x4 gaas. Instrueer de patiënt om 60 minuten stil te blijven staan om celbevestiging mogelijk te maken. Instrueer de patiënt om activiteiten te beperken voor minimaal een week na ontslag uit de kliniek.Terug naar de kliniek voor drie extra injecties van PRP geactiveerd door calciumchloride gedurende drie weken. Patiënt met stadium drie OA ontving de behandeling zoals beschreven in de protocolsectie. Na de tweede week van de ASV-ECM mengsel injectie, de pijn van de patiënt en ROM verbeterd.Tegen de 16e week verbeterden de pijn en ROM van de patiënt aanzienlijk meer dan 70%Na de behandeling mri, genomen na de 16e week, toonde de verhoogde dikte van kraakbeenachtig weefsel aan de mediale kant van de knie. Een andere patiënt met stadium drie OA ontving de behandeling zoals beschreven in de protocolsectie. Na de tweede week van de ASV-ECM mengsel injectie, de pijn van de patiënt en ROM verbeterd.Tegen de 18e week, de pijn en ROM aanzienlijk verbeterd tot 80%Herhaalde MRI genomen na de 18e week toonde een toename van de hoogte van kraakbeen-achtig weefsel aan de voorste-mediale kant van de knie. De derde patiënt met stadium drie OA ontving de behandeling zoals beschreven in de protocolsectie. Na de tweede week van ASV-ECM mengsel injectie, de pijn van de patiënt en ROM verbeterd met ongeveer 50%Door de 22e week, de pijn en ROM aanzienlijk verbeterd meer dan 80%Herhaalde MRI genomen na de 22e week toonde een toename van de hoogte van het kraakbeen-achtige weefsel aan de mediale kant van de knie.Momenteel is er geen curatieve therapie beschikbaar voor de behandeling van OA. Echter, percutane injectie van stamceltherapie met ASC's en gehomogeniseerde ECM samen met HA en analoge PRP geactiveerd met calciumchloride kan een alternatief vormen voor de huidige behandeling therapie van de behandeling van knie OA.

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

Experimentele Generatie van Carcinoom-geassocieerde fibroblasten (cafe&#39;s) van Human Borst fibroblasten

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

Reparatie van een kritische grootte Calvarial Defect Model Met behulp van Adipose-afgeleide stromale cellen geoogst uit Lipoaspirate

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. ...

Improved Protocol For Laser Microdissection Of Human Pancreatic Islets From Surgical Specimens

Verbeterd protocol voor Laser Microdissection der humane pancreatische eilandjes Van Chirurgische Specimens

Laser microdissection (LMD) is a technique that allows the recovery of selected cells and tissues from minute amounts of parenchyma 1,2. The dissected ...

Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

Klinisch onderzoeksprotocol om atypische en klassieke scrapie bij schapen op te sporen

The diagnosis of scrapie, a transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) of sheep and goats, is currently based on the detection of disease-associated ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

Driedimensionale Co-cultuur Model voor Tumor-stromale Interactie

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

Visualisatie van vasculaire en Parenchymale Regeneratie na 70% Gedeeltelijke hepatectomy in normale muizen

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

A Novel Clinical Grade Isolation Method for Human Kidney Perivascular Stromal Cells

Een nieuwe klinische Grade isolatie methode voor menselijke nieren gerelateerde stromale cellen

Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) are tissue homeostatic and immune modulatory cells that have shown beneficial effects in kidney diseases and ...

Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

Stromale vasculaire breuk-verrijkt vet enten voor de behandeling van symptomatische einde-neuromata

The purpose of this study was to methodically illustrate and highlight the crucial steps of stromal vascular fraction (SVF)-enriched fat grafting as a ...

An Optimized Evans Blue Protocol to Assess Vascular Leak in the Mouse

Een geoptimaliseerde Evans Blue Protocol bij het beoordelen van vasculaire lek in de muis

Vascular leak, or plasma extravasation, has a number of causes, and may be a serious consequence or symptom of an inflammatory response. This study may ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Transplantatie van stamcellen adipeus weefsel afkomstige blad om lekkage na gedeeltelijke Colectomy in een Rat-Model

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...