Name: clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration
Uploaded: 2018-09-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration at JoVE.com

लेखक Mipro चिकित्सा क्लिनिक के कर्मचारियों से समर्थन और Jaepil/डेविड ली द्वारा चित्रा डिजाइन स्वीकार करता है । यह काम MSIT (संख्या एनआरएफ-2017M3A9E4078014) द्वारा वित्त पोषित एनआरएफ के जैव और चिकित्सा प्रौद्योगिकी विकास कार्यक्रम से अनुसंधान अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था; और कोरिया के नेशनल रिसर्च फाउंडेशन (एनआरएफ) विज्ञान और आईसीटी (संख्या एनआरएफ-2017R1A2B4002315 और एनआरएफ-2016R1C1B2010308) मंत्रालय द्वारा वित्त पोषित ।

Myongji विश्वविद्यालय संस्थागत समीक्षा बोर्ड समिति (MJUIRB) द्वारा मामले की रिपोर्ट के बाद स्वीकृति और सहमति को माफ कर दिया गया । इसके अलावा, इस नैदानिक प्रोटोकॉल हेलसिंकी और KFDA के विनियमन के दिशा निर्देशों की ?...

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२००१ में, Zuk एट अल. वसा ऊतक से अलग स्टेम कोशिकाओं के नीचे collagenase6के साथ कोलेजन मैट्रिक्स को तोड़ने के द्वारा । बाद में, समूह से पता चला कि इन स्टेम वसा ऊतक से पृथक कोशिकाओं उपास्थि और मूल में मध्य ?...

Mesenchymalस्टेम सेल (MSCs) को उपास्थि1,2,3,4,5,6पुनर्जीवित करने की क्षमता है जाना जाता है । वे आसानी से विभिंन स्रोतों से प्राप्त किया जा सकता है: अस्थि मज्जा, गर्भनाल रक्त, और कई अंय लोगों के बीच वसा ऊतक । इन स्रोतों के अलावा, वसा ऊतक ही स्रोत है जहां MSCs की एक पर्याप्त संख्या किसी भी संस्कृति के विस्तार के बिना प्राप्त किया जा सकता नैदानिक सेटिंग्स7,8में उपास्थि पुनर्जंम है । ऑटोलॉगस अस्थि मज्जा stromal संवहनी अंश (SVF) आसानी से के रूप में अच्छी तरह से प्राप्त किया जा सकता है । हालांकि, स्टेम कोशिकाओं की संख्या में निहित गैर संस्कृति का विस्तार मज्जा बहुत कम है7,8. गर्भनाल-रक्त में पर्याप्त संख्या में MSCs शामिल हो सकते हैं । हालांकि, गर्भनाल रक्त ऑटोलॉगस SVF के एक आसानी से उपलब्ध स्रोत नहीं है ।
SVF प्राप्त करने के लिए वसा ऊतक प्रसंस्करण के कई तरीकों नैदानिक अनुप्रयोगों के लिए उपलब्ध हैं । इन के अलावा, collagenase का उपयोग वसा ऊतक से MSCs प्राप्त करने की विधि, विकसित और Zuk एट अल द्वारा पुष्टि की । 5 , 6, बहुत अच्छी तरह से स्वीकार किया है । collagenase का उपयोग करने की इस पद्धति में आर्थोपेडिक्स नैदानिक अनुप्रयोगों के लिए संशोधित किया गया है । आदेश में नैदानिक सेटिंग्स को लागू किया जा करने के लिए, प्रणाली एक बंद प्रणाली के लिए सुविधा रखते हुए बाँझ बनाए रखने होना चाहिए । एक विशेष संशोधन इस अनुच्छेद में प्रस्तुत lipoaspirates के homogenization शामिल है । छोटे आकार lipoaspirates अपेक्षाकृत तेजी से बड़े लोगों कि वसा ऊतक के असमान टूटने में जिसके परिणामस्वरूप कर रहे है से पचा रहे हैं । इसके अलावा, इन बड़े आकार lipoaspirates रेशेदार ऊतकों है कि सीरिंज और सुई संयुक्त इंजेक्शन9,10प्रदर्शन करते समय रोकना कर सकते हैं उत्पादन कर सकते हैं । आदेश में इन मुद्दों को रोकने के लिए, lipoaspirates काटने से homogenized जा सकता है और collagenase के साथ lipoaspirates से पहले नख़रेबाज़ । परिणामस्वरूप वसा ऊतक-व्युत्पंन SVF अधिक यूनिफ़ॉर्म extracellular मैट्रिक्स (ECM) lipoaspirates कि11नहीं है homogenized की तुलना में हो सकता है । टूटी-ECM SVF में समाहित नीचे एक पाड़12के रूप में काम कर सकते हैं ।
२००९ में, ऑटोलॉगस वसा ऊतक-व्युत्पंन SVF कोरियाई खाद्य और औषधि प्रशासन (KFDA) द्वारा अनुमति दी गई है जब एक चिकित्सक द्वारा ंयूनतम प्रसंस्करण के साथ एक चिकित्सा सुविधा के भीतर संसाधित13। बाद में, ऑटोलॉगस वसा ऊतक-व्युत्पंन SVF एक संभावित एजेंट के रूप में उपयोग किया गया है पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस में घुटने कार्यों में सुधार (OA) संभावित रूप से पुनः प्राप्त करने के ऊतकों की तरह उपास्थि10,14,15 , 16 , 17 , 18 . 
२०११ में, पाक पहली बार है कि वसा ऊतक-व्युत्पन्न स्टेम सेल (ASCs) वसा ऊतक में निहित-व्युत्पंन SVF घुटने के कार्यों में सुधार कर सकते है के लिए दिखाया संभावित मानव OA रोगियों जब प्लेटलेट के साथ इंजेक्शन अमीर में उपास्थि की तरह ऊतक regenerating प्लाज्मा (पीआरपी) 14. इसके अलावा पाक एट अल. ने ९१ मरीजों को शामिल करते हुए २०१३ में सेफ्टी डाटा की जानकारी दी है । इस सुरक्षा डेटा में रिपोर्ट की गई माध्य प्रभावकारिता दर ६७%15थी । इसके बाद, पाक एट अल द्वारा अतिरिक्त अध्ययन । संभावित घुटने के कारण एक meniscus आंसू और chondromalacia patellae10,16,17 के साथ रोगियों में उपास्थि की तरह ऊतक उत्थान के लिए कार्य में सुधार दिखाया ,18. लेख के आधार पर रिपोर्ट, यह ज्ञात है कि स्टेम वसा ऊतक के १०० जी में निहित कोशिकाओं की संख्या इस लेख में प्रस्तुत प्रोटोकॉल द्वारा संसाधित १,०००,०००-४०,०००,००० रोगियों की विशेषताओं के आधार पर8से रेंज मई, 19 , 20 , 21 , 22 , 23.
यहां, हम ऑटोलॉगस वसा ऊतक का उपयोग करके मानव घुटने OA के एक नैदानिक प्रोटोकॉल वर्तमान-हा और कैल्शियम क्लोराइड के साथ सक्रिय पीआरपी के साथ SVF व्युत्पंन । इस नैदानिक प्रोटोकॉल के पहले संस्करण, एक बंद, मैनुअल प्रणाली को बाँझ बनाए रखने के शामिल, २०११14में बताया गया था । समान प्रोटोकॉल अनुकूलित किया गया था, बाँझ को बनाए रखने, और २०१३ और २०१६10,15में बताया गया था. यहां, अनुकूलित प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया है । इस प्रोटोकॉल के योजनाबद्ध सिंहावलोकन चित्रा 1में प्रस्तुत किया है ।
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58363/58363fig1.jpg"> चित्रा 1: प्रोटोकॉल के योजनाबद्ध सिंहावलोकन । <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58363/58363fig1large.jpg" target="_blank">कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।</a>

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	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Material</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5% Betadine (povidone-iodine)&#160;</td>
			<td>Firson Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">657400260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2% Lidocaine&#160;</td>
			<td>Daehan Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">670603480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Tumescent solution&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Myungmoon Pharm. Co. Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">N01BB01</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 500 mL normal saline, 40 mL 2% lidocaine, 20 mL 0.5% marcaine, and 0.5 mL epinephrine 1:1000.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Liberase TL and TM research grade&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Roche Applied Science</td>
			<td style="width:156px;">5401020001</td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">D5LR</td>
			<td>Dahan Pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645101072</td>
			<td>Dextrose 5% in lactated Ringer&#39;s solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Anticoagulant citrate dextrose solution&#160;</td>
			<td>Fenwal, Inc.</td>
			<td style="width:156px;">NDC:0942-0641</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 0.8% citric acid, 
			0.22% sodium citrate, and 0.223% dextrose.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3% (w/v) Calcium chloride&#160;</td>
			<td>Choongwae Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">644902101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.5% (w/v) HA (Hyaluronic acid )</td>
			<td>Dongkwang pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645902030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.25% Ropivacaine</td>
			<td>Huons Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">670600150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Equipment</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">3.0 mm Cannula&#160;</td>
			<td style="width:221px;">WOOJU Medical Instruments Co.</td>
			<td style="width:156px;">ML30200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">60-mL Luer-Lock syringe</td>
			<td style="width:221px;">BD (Becton Dickinson)&#160;</td>
			<td style="width:156px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centrifuge Barrel Kit&#160;</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue homogenizer that contains blades</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rotating incubator mixer</td>
			<td style="width:221px;">Medikan Co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">MS02060092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:221px;">Hanil Scientific Inc.</td>
			<td style="width:156px;">CE1133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Magnetic Resonance Imaging</td>
			<td style="width:221px;">Philips Medical Systems Inc.</td>
			<td style="width:156px;">18068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:261px;">Ultrasound Imaging System</td>
			<td style="width:221px;">Samsung Medison co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">CT-LK-V10-ICM-09.05.2007</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration

पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (OA) सबसे आम दुर्बल विकारों में से एक है । हाल ही में, mesenchymal स्टेम सेल (MSCs) के विभिंन रूपों का उपयोग करके घुटनों के कार्यों में सुधार करने के लिए कई प्रयास किए गए हैं । कोरिया में, अस्थि मज्जा ध्यान केंद्रित और गर्भनाल रक्त व्युत्पंन स्टेम सेल कोरियाई खाद्य और औषधि प्रशासन द्वारा अनुमोदित किया गया है (KFDA) उपास्थि पुनर्जनन के लिए. इसके अलावा, मानव रोगियों में संयुक्त इंजेक्शन के लिए KFDA द्वारा एक वसा ऊतक-व्युत्पंन stromal संवहनी अंश (SVF) की अनुमति दी गई है । ऑटोलॉगस वसा ऊतक-व्युत्पन्न SVF में ECM स्टेम कोशिकाओं के अलावा extracellular मैट्रिक्स (mesenchymal) होता है. ECM विभिंन साइटोकिंस है कि, hyaluronic एसिड (हेक्टेयर) और प्लेटलेट युक्त प्लाज्मा (पीआरपी) कैल्शियम क्लोराइड द्वारा सक्रिय के साथ, उपास्थि पुनर्जीवित करने के लिए MSCs मदद कर सकते है और घुटने के कार्यों में सुधार उत्सर्जित करता है । इस अनुच्छेद में, हम एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करने के लिए OA के साथ मानव रोगियों में उपास्थि की तरह ऊतक फिर से उत्पंन करके घुटने कार्यों में सुधार । प्रोटोकॉल का परिणाम पहले २०११ में कुछ अतिरिक्त प्रकाशनों के बाद रिपोर्ट किया गया था । प्रोटोकॉल ऑटोलॉगस lipoaspirates कि collagenase के साथ मिश्रित कर रहे है प्राप्त करने के लिए liposuction शामिल है । इस lipoaspirates-collagenase मिश्रण तो काट लिया जाता है और इंजेक्शन के दौरान सुई को रोकना हो सकता है कि बड़े रेशेदार ऊतक को हटाने के लिए homogenized. बाद में, मिश्रण वसा ऊतक प्राप्त करने की मशीन है-SVF व्युत्पंन । परिणामस्वरूप वसा ऊतक-व्युत्पंन SVF, दोनों वसा ऊतक युक्त-MSCs और ECM के अवशेष व्युत्पंन, रोगियों के घुटनों में इंजेक्ट किया जाता है, हा और कैल्शियम क्लोराइड के साथ संयुक्त पीआरपी सक्रिय । शामिल रोगियों जो हमारे घुटने के दर्द, सूजन के सुधार में जिसके परिणामस्वरूप प्रोटोकॉल के साथ इलाज किया गया के तीन मामले हैं, और hyaline उपास्थि ऊतक की तरह एमआरआई सबूत के साथ गति की सीमा ।

तीन रोगियों (१ ८७ वर्षीय स्टेज 3 oa, १ ६८ के साथ वर्षीय महिला चरण 3 oa के साथ पुराने पुरुष, और १ ६० वर्षीय महिला चरण 3 oa के साथ) किसी भी महत्वपूर्ण पिछले चिकित्सा लगातार घुटने के दर्द के साथ क्लिनिक क?...

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Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

यहाँ, हम एक वसा ऊतक का उत्पादन करने के लिए एक प्रोटोकॉल मौजूद-stromal संवहनी अंश और अपने आवेदन के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस के साथ मानव रोगियों में उपास्थि की तरह ऊतक पुनः उत्पन्न करके घुटने के कार्यों में सुधार करने के लिए व्युत्पंन.

वसा ऊतक के उत्पादन के नैदानिक प्रोटोकॉल-संभावित उपास्थि पुनर्जनन के लिए Stromal संवहनी अंश व्युत्पंन

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

कार्सिनोमा - एसोसिएटेड Fibroblasts के प्रायोगिक मानव स्तन Fibroblasts से जनरेशन (CAFs)

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

एक क्रिटिकल आकार Calvarial दोष मॉडल वसा से व्युत्पन्न Stromal Lipoaspirate से काटा कोशिकाओं का उपयोग की मरम्मत

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. ...

Improved Protocol For Laser Microdissection Of Human Pancreatic Islets From Surgical Specimens

मानव अग्नाशय islets के सर्जिकल नमूनों से लेजर Microdissection में सुधार के लिए प्रोटोकॉल

Laser microdissection (LMD) is a technique that allows the recovery of selected cells and tissues from minute amounts of parenchyma 1,2. The dissected ...

Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

नैदानिक परीक्षा प्रोटोकॉल भेड़ में असामान्य और शास्त्रीय स्क्रैपी का पता लगाने के लिए

The diagnosis of scrapie, a transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) of sheep and goats, is currently based on the detection of disease-associated ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

ट्यूमर स्ट्रोमल इंटरेक्शन के लिए तीन आयामी सह संस्कृति मॉडल

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

सामान्य चूहों में 70% आंशिक hepatectomy के बाद संवहनी और Parenchymal उत्थान के दृश्य

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

A Novel Clinical Grade Isolation Method for Human Kidney Perivascular Stromal Cells

मानव गुर्दा Perivascular Stromal कक्षों के लिए एक उपन्यास चिकित्सीय ग्रेड अलगाव विधि

Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) are tissue homeostatic and immune modulatory cells that have shown beneficial effects in kidney diseases and ...

Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

रोगसूचक अंत-neuromata के उपचार के लिए Stromal संवहनी अंश-समृद्ध वसा भ्रष्टाचार

The purpose of this study was to methodically illustrate and highlight the crucial steps of stromal vascular fraction (SVF)-enriched fat grafting as a ...

An Optimized Evans Blue Protocol to Assess Vascular Leak in the Mouse

माउस में संवहनी रिसाव का आकलन करने के लिए एक अनुकूलित इवांस ब्लू प्रोटोकॉल

Vascular leak, or plasma extravasation, has a number of causes, and may be a serious consequence or symptom of an inflammatory response. This study may ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

वसा ऊतक के प्रत्यारोपण-व्युत्पन्न स्टेम सेल शीट एक चूहा मॉडल में आंशिक Colectomy के बाद रिसाव को कम करने के लिए

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...