Name: clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration
Uploaded: 2018-09-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration at JoVE.com

L'autore riconosce il sostegno da parte del personale della clinica medica Mipro e il disegno di figura di Jaepil/David Lee. Questo lavoro è stato sostenuto da borse di ricerca dal Bio & programma di sviluppo tecnologia medicale della NRF finanziata da MSIT (numero NRF-2017M3A9E4078014); e nazionali Research Foundation di Corea (NRF) finanziato dal Ministero della scienza e ICT (numeri NRF-2017R1A2B4002315 e NRF-2016R1C1B2010308).

L'approvazione e il consenso per segnalare i seguenti rapporti di caso sono stati rinunziati a dal Comitato Myongji University Institutional Review Board (MJUIRB). Inoltre, questo protocollo clinico era compatibile con le istruzioni di dichiarazione di Helsinki e regolamento del KFDA. Per le procedure, sono stati ottenuti consensi dai pazienti.
1. liposuzione
Nota: Eseguire con tecnica sterile.
<ol><li>Utilizzare i seguenti criteri di inclusione: (1) prova di MRI...

<ol>
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Nel 2001, Zuk et al. cellule staminali isolate dal tessuto adiposo, abbattendo la matrice del collagene con collagenasi6. In seguito, il gruppo ha mostrato che queste cellule staminali isolate da tessuto adiposo potrebbe trasformare in cartilagine e altri tessuti del mesoderma in origine, dimostrando che non c'erano queste cellule staminali mesenchimali in origine.
Allo stesso modo, la procedura presentata in questo articolo è un protocollo modificato per appl...

Cellule staminali mesenchimali (MSCs) sono noti per avere la capacità di rigenerare la cartilagine1,2,3,4,5,6. Possono essere facilmente ottenuti da varie fonti: midollo osseo, sangue del cordone ombelicale e tessuto adiposo tra molti altri. Tra queste fonti, il tessuto adiposo è l'unica fonte dove un numero sufficiente di cellule staminali mesenchimali possa essere ottenuto senza alcuna espansione di cultura per rigenerare la cartilagine nelle regolazioni cliniche7,8. Autologous del midollo osseo stromale vascolare frazione (SVF) può essere facilmente ottenuto pure. Tuttavia, il numero delle cellule staminali contenute nel midollo espanso non-cultura è molto basso7,8. Sangue del cordone può contenere un numero sufficiente di cellule staminali mesenchimali. Tuttavia, sangue del cordone ombelicale non è una fonte prontamente disponibile di SVF autologo.
Numerosi metodi di lavorazione il tessuto adiposo per ottenere SVF sono disponibili per applicazioni cliniche. Tra questi, il metodo di ottenimento MSCs dal tessuto adiposo mediante collagenasi, sviluppato e confermata da Zuk et al. 5 , 6, è molto ben accettato. Questo metodo di utilizzo della collagenosi è stato modificato per applicazioni cliniche in ortopedia. Per poter essere applicati a contesti clinici, il sistema deve essere un sistema chiuso per garantire la sterilità, mantenendo la comodità. Una modifica particolare presentata in questo articolo comporta l'omogeneizzazione della lipoaspirates. Piccole dimensioni lipoaspirates sono digeriti relativamente più velocemente di quelle di grandi dimensioni che risultano nella ripartizione irregolare del tessuto adiposo. Inoltre, questi lipoaspirates di dimensioni più grandi possono produrre tessuti fibrosi che possono intasare le siringhe e gli aghi durante l'esecuzione di iniezioni congiunta9,10. Per evitare questi problemi, il lipoaspirates può essere omogeneizzato da tagliare e sminuzzare la lipoaspirates prima l'incubazione con collagenasi. La SVF tessuto adiposo-derivato risultante potrebbe contenere più uniforme matrice extracellulare (ECM) rispetto a lipoaspirates che non sono omogeneizzati11. L'ECM scassata contenuta nella SVF funzionino come un' impalcatura12.
Nel 2009, SVF derivate da tessuto adiposo autologo è stato permesso dalla Korean Food and Drug Administration (KFDA) durante l'elaborazione all'interno di una struttura medica con trattamento minimo da un medico13. In seguito, SVF derivate da tessuto adiposo autologo è stata utilizzata come agente potenziale per migliorare le funzioni del ginocchio nei pazienti di osteoartrite (OA) potenzialmente rigenerando cartilagine-come il tessuto10,14,15 , 16 , 17 , 18 . 
Nel 2011, Pak ha mostrato per la prima volta che tessuto adiposo cellule staminali derivate (ASCs) contenute nella SVF tessuto adiposo-derivato può migliorare le funzioni del ginocchio potenzialmente rigenerazione della cartilagine-come il tessuto nei pazienti affetti da OA quando iniettato con piastrina-ricco plasma (PRP) 14. Inoltre, Pak et al sono riportati dati di sicurezza nel 2013 su 91 pazienti. Il tasso di efficacia media segnalato in questi dati di sicurezza era 67%15. Successivamente, ulteriori studi di Pak et al hanno dimostrato ginocchio migliorata funzioni potenzialmente grazie alla rigenerazione del tessuto della cartilagine-come in pazienti con un menisco lacrima e Condromalacia della rotula10,16,17 ,18. Basato sugli articoli segnalati, è noto che il numero delle cellule staminali contenute in 100 g di tessuto adiposo elaborato dal protocollo presentato in questo articolo può variare da 1.000.000-40.000.000 a seconda delle caratteristiche dei pazienti8, 19 , 20 , 21 , 22 , 23.
Qui, presentiamo un protocollo clinico di osteoartrosi del ginocchio umano utilizzando SVF derivate da tessuto adiposo autologo con HA e PRP attivato con cloruro di calcio. La prima versione di questo protocollo clinico, che coinvolge un sistema chiuso, manuale per mantenere la sterilità, è stata segnalata nel 201114. Il protocollo identico è stato ottimizzato, mantenere la sterilità ed è stato segnalato nel 2013 e 201610,15. Qui, è presentato il protocollo ottimizzato. La presentazione schematica del protocollo è presentato nella Figura 1.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58363/58363fig1.jpg"> Figura 1: Panoramica schematica del protocollo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58363/58363fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:941px;" width="941">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Material</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5% Betadine (povidone-iodine)&#160;</td>
			<td>Firson Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">657400260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2% Lidocaine&#160;</td>
			<td>Daehan Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">670603480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Tumescent solution&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Myungmoon Pharm. Co. Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">N01BB01</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 500 mL normal saline, 40 mL 2% lidocaine, 20 mL 0.5% marcaine, and 0.5 mL epinephrine 1:1000.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Liberase TL and TM research grade&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Roche Applied Science</td>
			<td style="width:156px;">5401020001</td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">D5LR</td>
			<td>Dahan Pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645101072</td>
			<td>Dextrose 5% in lactated Ringer&#39;s solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Anticoagulant citrate dextrose solution&#160;</td>
			<td>Fenwal, Inc.</td>
			<td style="width:156px;">NDC:0942-0641</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 0.8% citric acid, 
			0.22% sodium citrate, and 0.223% dextrose.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3% (w/v) Calcium chloride&#160;</td>
			<td>Choongwae Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">644902101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.5% (w/v) HA (Hyaluronic acid )</td>
			<td>Dongkwang pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645902030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.25% Ropivacaine</td>
			<td>Huons Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">670600150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Equipment</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">3.0 mm Cannula&#160;</td>
			<td style="width:221px;">WOOJU Medical Instruments Co.</td>
			<td style="width:156px;">ML30200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">60-mL Luer-Lock syringe</td>
			<td style="width:221px;">BD (Becton Dickinson)&#160;</td>
			<td style="width:156px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centrifuge Barrel Kit&#160;</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue homogenizer that contains blades</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rotating incubator mixer</td>
			<td style="width:221px;">Medikan Co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">MS02060092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:221px;">Hanil Scientific Inc.</td>
			<td style="width:156px;">CE1133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Magnetic Resonance Imaging</td>
			<td style="width:221px;">Philips Medical Systems Inc.</td>
			<td style="width:156px;">18068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:261px;">Ultrasound Imaging System</td>
			<td style="width:221px;">Samsung Medison co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">CT-LK-V10-ICM-09.05.2007</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration

L'osteoartrite (OA) è uno dei più comuni disturbi debilitanti. Recentemente, numerosi tentativi apportati per migliorare le funzioni delle ginocchia utilizzando diverse forme di cellule staminali mesenchimali (MSCs). In Corea, concentrati di midollo osseo e cavo di cellule staminali derivate dal sangue sono state approvate dalla Korean Food and Drug Administration (KFDA) per la rigenerazione della cartilagine. Inoltre, una tessuto adiposo-derivato stromal vascolare frazione (SVF) è stato permesso del KFDA per iniezioni congiunte in pazienti umani. SVF derivate da tessuto adiposo autologo contiene la matrice extracellulare (ECM) oltre alle cellule staminali mesenchimali. ECM secerne varie citochine che, insieme con acido ialuronico (HA) e plasma ricco di piastrine (PRP) attivato dal cloruro di calcio, possono aiutare MSCs per rigenerare la cartilagine e migliorare le funzioni del ginocchio. In questo articolo, abbiamo presentato un protocollo per migliorare le funzioni del ginocchio eseguendo la rigenerazione della cartilagine-come il tessuto in pazienti umani con OA. Il risultato del protocollo in primo luogo è stato segnalato nel 2011, seguita da alcuni ulteriori pubblicazioni. Il protocollo coinvolge liposuzione per ottenere lipoaspirates autologhi che si mescolano con collagenasi. Questa miscela di lipoaspirates-collagenasi è poi tagliare e omogeneizzata per rimuovere grande tessuto fibroso che può intasare l'ago durante l'iniezione. In seguito, la miscela viene incubata per ottenere tessuto adiposo-derivato SVF. La SVF risultante tessuto adiposo-derivato, contenente sia il tessuto adiposo-derivato MSCs e resti di ECM, viene iniettato nel ginocchio dei pazienti, combinati con l'HA e cloruro di calcio attivato PRP. Sono inclusi tre casi di pazienti che sono stati trattati con il nostro protocollo conseguente miglioramento del dolore al ginocchio, il gonfiamento e la gamma di movimento insieme a prova di MRI di cartilagine ialina-come il tessuto.

Tre pazienti (una donna di 87 anni con tappa 3 OA, un uomo di 68 anni con stadio 3 OA, e una donna di 60 anni con stadio 3 OA) senza qualsiasi significativo passato storia medica ha presentato alla clinica con dolore persistente del ginocchio e desiderato per il potenziale trattamento di SVF derivate da tessuto adiposo autologo. Tutti e tre i pazienti avevano loro ginocchio esaminato da un chirurgo ortopedico e sono stati offerti per avere la sostituzione totale del ginocchio (TKA) ed era...

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Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

Qui, presentiamo un protocollo per la produzione di una frazione di vascolare stromal derivate da tessuto adiposo e la sua applicazione per migliorare le funzioni del ginocchio eseguendo la rigenerazione della cartilagine-come il tessuto in pazienti umani con l'osteoartrite.

Protocollo clinico di produrre tessuto adiposo-derivato Stromal frazione vascolare per potenziale rigenerazione della cartilagine

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

L'osteoartrite è uno dei disturbi debilitanti più comuni tra la popolazione anziana. Al momento, non esiste una cura definitiva per le cause sottostanti dell'osteoartrite. Questo protocollo clinico descrive una procedura innovativa per un trattamento promettente, minimamente invasivo e alternativo dell'osteoartrite del ginocchio umano rigenerando la cartilagine come il tessuto.L'osteoartrite è uno dei disturbi debilitanti più comuni tra la popolazione anziana. Al momento, non esiste una cura definitiva per le cause di sottolineatura dell'osteoartrite. Questo protocollo clinico è una procedura innovativa per un trattamento promettente, minimamente invasivo e alternativo dell'osteoartrite del ginocchio umano rigenerando il tessuto simile alla cartilagine.Portare il paziente in una sala operatoria con una cappa di classe A a rischio biologico e posizionare lui o lei in una posizione supina. Pulire l'area addominale del paziente con iodio 5%betadina-povidina e drappeggiare il paziente utilizzando la tecnica sterile, esponendo l'area pulita dell'addome per la liposuzione. Circa cinque centimetri infero-lateralmente dall'ombelico, anestetizzano due siti, uno a sinistra e l'altro sul lato destro dell'ombelico di incisione da fare.Utilizzo di due millilitri di lidocaina al 2% senza epinefrina con un ago da 1,5 pollici calibro 25 in una siringa da cinque millilitri iniettando ogni sito a livello epidermico. Anestetizzare il sito di incisione da fare utilizzando cinque millilitri di soluzione tumescente e siringa da 10 millilitri e l'ago da 1,5 pollici calibro 25. Fare due incisioni di 0,5 centimetri circa cinque centimetri sotto l'ombelico lateralmente pizzicando la pelle per sollevare la profondità del livello sottocutaneo.Usando una lama numero 11, aiuta la pelle sollevata a penetrare fino al livello sottocutaneo ma a non penetrare attraverso la parete addominale. Utilizzando cannula calibro 20 centimetri 60, anestetizza il livello sottocutaneo dell'intera area dell'addome inferiore che deve essere liposuctioned con 700-800 millilitri della soluzione tumescente. Dopo aver terminato l'infiltrazione dell'intero addome inferiore con soluzione tumescente, preparare un apparato di liposuzione collegando una cannula da 3,0 millimetri collegata a una siringa da 60 millilitro o 30 millilitri per la liposuzione manuale o una cannula da 3,0 millimetri appositamente progettata collegata a un kit di centrifuga.Una siringa a sistema chiuso sviluppata da noi stessi e approvata dalla FDA CDRH allo scopo di mantenere la sterilità collegata a una macchina per vuoto per la liposuzione assistita sottovuoto. Eseguire la liposuzione per ottenere da 100 a 110 grammi di tessuto adiposo esclusa la soluzione tumescente. Quando si esegue la liposuzione, il tessuto adiposo sarà ottenuto insieme alla soluzione tumescente ma deve essere separato e rimosso.Per separare la soluzione tumescente prima per gravità, il tessuto adiposo nel kit di centrifuga può essere trasferito su una siringa da 60 millilitri e posizionare la siringa verso il basso. Ad esempio, la parte di apertura della siringa si trova nella parte inferiore. Aspettando da cinque a sei minuti, il tessuto adiposo e la soluzione tumescente saranno separati.Rimuovere il fluido nella parte inferiore della siringa premendo sulla parte superiore dello stantuffo della siringa. Eseguire i passaggi precedenti da nove a 11 fino a quando non è stato accumulato un totale di 100 grammo a 110 grammi di aspirato lipidico del tessuto adiposo per ginocchio. Dopo aver separato la soluzione tumescente per gravità e aver accumulato da 50 a 55 grammi di aspirato lipidico per ogni sistema chiuso sterile kit centrifuga da 60 millilitri, posizionare i due kit di centrifuga in un secchio contenitore di centrifuga e girare a 1600 G per cinque minuti, condensando l'aspirazione lipidica e separando il fluido dal tessuto adiposo.Questo processo condensa ulteriormente l'aspirato lipidico e può produrre olio grasso in alcuni casi. Facendo attenzione a non tremare, rimuovere il tappo di sicurezza e la spina nella parte inferiore del kit di centrifuga. Rimuovere il fluido inferiore spingendo lentamente verso il basso sopra lo stantuffo del kit di centrifuga.Su una siringa separata da 60 millilitri, sciogliere 10 milligrammi di collagenasi, cinque milligrammi di collagenasi specifici per il tessuto connettivo e cinque milligrammi di collagenasi specifici per il tessuto adiposo con 50 millilitri di soluzione salina normale. Mescolare circa 25-30 millilitri di aspirato lipidico condensato con collagenasi disciolta, cinque milligrammi di collagenasi specifici per il tessuto connettivo e cinque milligrammi di collagenasi specifici per il tessuto adiposo ad un rapporto di uno a uno, volume/volume, collegando la siringa da 60 millilitri a un kit di centrifuga utilizzando un connettore specializzato. Mescolare accuratamente per condensare l'aspirato di preparazione e la collagenasi spingendo il contenuto tra la siringa da 60 millilitri e il kit di centrifuga utilizzando un'asta o un pusher.Trasferire la miscela dell'aspirato lipidico e della collagenasi alla siringa da 60 millilitri. Collegare ogni siringa da 60 millilitri contenente la miscela con l'omogeneizzatore tissutale che contiene lame. Collegare una siringa vuota da 60 millilitri all'altra estremità dell'omogeneizzatore.Spingere la miscela verso l'altra siringa da 60 millilitri attraverso l'omogeneizzatore per quattro o sei volte, con conseguente taglio e tritare l'aspirato lipidico. Trasferire l'aspirato lipidico omogeneizzato e la miscela collagenosa al kit di centrifuga da 60 millilitri attraverso un connettore specializzato. Posizionare i kit di centrifuga in un contenitore da posizionare in un incubatore che è stato preriscaldato a 37 gradi Celsius.Incubare i due kit di centrifuga con la miscela omogeneizzata a 37 gradi Celsius per 40 minuti mentre si ruota a 45 giri/min. Dopo 40 minuti di incubazione, rimuovere il contenitore dall'incubatore in modo sterile. Quindi rimuovere i kit di centrifuga e metterli in una macchina di centrifuga.Centrifugare le miscele a 800 G per cinque minuti per separare la SVF derivata dal tessuto adiposo. Dopo la centrifuga, il supernatante, che include collagenasi e tessuto adiposo digerito, viene rimosso da ogni kit di centrifuga rimuovendo il cappuccio della siringa sopra lo stantuffo e posizionando una siringa da 30 millilitri sull'apertura dello stantuffo attraverso una connessione di blocco della siringa. Premere lentamente verso il basso sulla parte della canna della siringa da 30 millilitri affinché il supernatante si riempia nella siringa da 30 millilitri.Premere la canna della siringa da 30 millilitri fino agli ultimi tre o quattro millilitri del fondo del kit di centrifuga, lasciando solo gli ultimi tre o quattro millilitri di SVF derivato dal tessuto adiposo. Il supernatante viene scartato. Rimuovere la siringa da 30 millilitri dalla parte superiore dello stantuffo e riempire la siringa con una soluzione di suoneria lattata al 5%destrosio, nota anche come D5LR.Attaccando la siringa da 30 millilitri riempita con D5LR sulla parte superiore dell'apertura dello stantuffo, riempire i kit di centrifuga contenenti da tre a quattro millilitri di SVF derivato dal tessuto adiposo con D5LR fino a 55 millilitri. Quindi rimuovere la siringa da 30 millilitri, cappuccio l'apertura dello stantuffo e centrifugare nuovamente i kit di centrifuga a 300 G per circa quattro minuti. Ripetere i passaggi da 17 a numero 21 per un totale di quattro lavaggi.Dopo la quarta centrifuga, al fine di ottenere la SVF finale per iniezione, rimuovere il tappo di sicurezza e la spina all'apertura inferiore del kit centrifuga senza scuotere o ruotare il kit centrifuga. Collegare una siringa da 20 millilitri all'apertura inferiore del kit di centrifuga utilizzando un connettore appositamente progettato. Tirare lo stantuffo della siringa da 20 millilitri più volte avanti e indietro per scuotere le cellule che si sono depositate sul fondo del kit di centrifuga.Rimuovere il volume totale desiderato della SVF contenente sia AST che ECM insieme ad altre cellule e tessuti. Di solito da tre a quattro millilitri da ogni kit di centrifuga per iniezioni di articolazione del ginocchio. Abbiamo fatto 30 millilitri di sangue autologo insieme a 2,5 millilitri di soluzione anticoagulante di destrosio citrato.Quindi il sangue prelevato è stato trasferito ai kit di barili di centrifuga da 60 millilitri. È stato poi centrifugato a gravità 730 per cinque minuti. E il supernatante è stato rimosso e messo in un nuovo kit di barili di centrifuga da 60 millilitri.Il supernatante fu centrifugato a gravità 1350 per quattro minuti, ottenendo 4,4 millilitri di PRP. Pulire il ginocchio del paziente con il 5% di betadina e drappeggiarlo in modo sterile. Palpare la parte anteriore del ginocchio per lo spazio articolare tra le ossa tibiali e femorali.Anestetizzare superficialmente il sito di iniezione con lidocaina diluita, un millilitro di 1%lidocaina diluito con quattro millilitri di normale salina, dalla pelle all'appena fuori dalla capsula articolare. Quindi anestetizzare l'interno della capsula articolare con ropivacaina diluita, un millilitro 0,75% diropivacaina diluita con tre millilitri di soluzione salina normale. Mescolare due millilitri di HA con i sei-otto millilitri di SVF contenuti in una siringa da 20 millilitri attraverso un connettore siringa-siringa.Utilizzando una siringa al connettore della siringa, aggiungere 0,4 millilitri di cloruro di calcio ai tre o quattro millilitri di PRP autologo che è già stato preparato ed essendo pronto in una siringa da cinque millilitri. Unire da 3,5 a 4,5 millilitri cloruro di calcio PRP in una siringa da cinque millilitri con da otto a 10 millilitri di miscela HA-SVF in una siringa da 20 millilitri attraverso un connettore siringa-siringa. Iniettare immediatamente la miscela, da circa 12 a 15 millilitri, lentamente nell'articolazione tibiale-femorale anteriore del ginocchio, utilizzando un ago da 38 millimetri calibro 18 con o senza la guida ad ultrasuoni.Dopo l'iniezione, bendare il sito di iniezione con pressione piegando quattro volte la garza di cotone 4x4 e posizionando nastri sulla garza 4x4 piegata. Istruire il paziente a rimanere fermo per 60 minuti per consentire l'attacco cellulare. Istruisi il paziente a limitare le attività per un minimo di una settimana dopo la dimissione dalla clinica.Rientro in clinica per altre tre iniezioni di PRP attivate dal cloruro di calcio nell'corso di tre settimane. Il paziente con OA di terza fase ha ricevuto il trattamento come descritto nella sezione del protocollo. Dopo la seconda settimana di iniezione della miscela ASV-ECM, il dolore e la ROM del paziente sono migliorati.Alla 16a settimana, il dolore e la ROM del paziente migliorarono significativamente più del 70% La risonanza prima del trattamento, assunta dopo la 16a settimana, mostrò l'aumento dello spessore del tessuto simile alla cartilagine sul lato mediale del ginocchio. Un altro paziente con OA di terza fase ha ricevuto il trattamento come descritto nella sezione del protocollo. Dopo la seconda settimana di iniezione della miscela ASV-ECM, il dolore e la ROM del paziente sono migliorati.Alla 18a settimana, il dolore e la ROM migliorarono significativamente fino all'80%La risonanza malata ripetuta scattata dopo la 18a settimana mostrò un aumento dell'altezza del tessuto simile alla cartilagine sul lato anteriore-mediale del ginocchio. Il terzo paziente con OA di terza fase ha ricevuto il trattamento come descritto nella sezione del protocollo. Dopo la seconda settimana di iniezione di miscela ASV-ECM, il dolore e la ROM del paziente sono migliorati di circa il 50% Entro la 22a settimana, il dolore e la ROM sono migliorati significativamente di oltre l'80%La risonanza ripetuta assunta dopo la 22a settimana ha mostrato un aumento dell'altezza del tessuto simile alla cartilagine sul lato mediale del ginocchio.Attualmente non è disponibile alcuna terapia curativa per il trattamento dell'OA. Tuttavia, l'iniezione percutanea di terapia con cellule staminali con ASC e ECM omogeneizzato insieme all'HA e al PRP analogo attivato con cloruro di calcio può fornire un'alternativa all'attuale terapia di trattamento del trattamento dell'OA del ginocchio.

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

Generazione sperimentale di carcinoma-Associated fibroblasti (CAF) da fibroblasti umani mammari

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Ricerca

Medicina

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Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

Protocollo di esame clinico per rilevare la scrapie atipica e classica negli ovini

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Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

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Visualizzazione dei Vascolare e parenchimale rigenerazione dopo il 70% epatectomia parziale in topi normali

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