Name: clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration
Uploaded: 2018-09-29T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration at JoVE.com

O autor reconhece que o apoio da equipe do Mipro clínica médica e o desenho de figura por Mariana/David Lee. Este trabalho foi apoiado por bolsas de investigação do Bio & programa de desenvolvimento de tecnologia médica da NRF financiada pelo MSIT (número NRF-2017M3A9E4078014); e o nacional Research Foundation da Coreia (NRF) financiado pelo Ministério da ciência e TIC (números NRF-2017R1A2B4002315 e NRF-2016R1C1B2010308).

A aprovação e o consentimento para relatar após relatos de casos dispensadas pelo Comité do Conselho de revisão institucional Myongji University (MJUIRB). Além disso, este protocolo clínico foi em conformidade com as diretrizes da declaração de Helsinque e regulamento do KFDA. Para os procedimentos, consentimento informado foram obtido de pacientes.
1. lipoaspiração
Nota: Execute com técnica estéril.
<ol><li>Use os seguintes critérios de inclusão: ...

<ol>
	<li>Arnoczky, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Building+a+meniscus.+Biologic+considerations.">Building a meniscus. Biologic considerations.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (367 Suppl), S244-S253 (1999).</li><li>Barry, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cell+therapy+in+joint+disease.">Mesenchymal stem cell therapy in joint disease.</a> Novartis Foundation Symposium. 249, 86-241 (2003).</li><li>Usuelli, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cells+in+orthopaedic+pathologies.">Adipose-derived stem cells in orthopaedic pathologies.</a> British Medical Bulletin. 124 (1), 31-54 (2017).</li><li>Zhang, H. N., Li, L., Leng, P., Wang, Y. Z., Lv, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uninduced+adipose-derived+stem+cells+repair+the+defect+of+full-thickness+hyaline+cartilage.">Uninduced adipose-derived stem cells repair the defect of full-thickness hyaline cartilage.</a> Chinese Journal of Traumatology. 12 (2), 92-97 (2009).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adipose+tissue+is+a+source+of+multipotent+stem+cells.">Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells.</a> Molecular Biology of the Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multilineage+cells+from+human+adipose+tissue:+implications+for+cell-based+therapies.">Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies.</a> Tissue Engineering. 7 (2), 211-228 (2001).</li><li>Baer, P. C., Geiger, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+mesenchymal+stromal/stem+cells:+tissue+localization,+characterization,+and+heterogeneity.">Adipose-derived mesenchymal stromal/stem cells: tissue localization, characterization, and heterogeneity.</a> Stem Cells International. 2012, 812693 (2012).</li><li>Zhu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cell:+a+better+stem+cell+than+BMSC.">Adipose-derived stem cell: a better stem cell than BMSC.</a> Cell Biochemistry and Function. 26 (6), 664-675 (2008).</li><li>Bellei, B., Migliano, E., Tedesco, M., Caputo, S., Picardo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maximizing+non-enzymatic+methods+for+harvesting+adipose-derived+stem+from+lipoaspirate:+technical+considerations+and+clinical+implications+for+regenerative+surgery.">Maximizing non-enzymatic methods for harvesting adipose-derived stem from lipoaspirate: technical considerations and clinical implications for regenerative surgery.</a> Scientific Reports. 7 (1), 10015 (2017).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Park, K. S., Jeong, B. C., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+Cartilage+in+Human+Knee+Osteoarthritis+with+Autologous+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells+and+Autologous+Extracellular+Matrix.">Regeneration of Cartilage in Human Knee Osteoarthritis with Autologous Adipose Tissue-Derived Stem Cells and Autologous Extracellular Matrix.</a> BioResearch Open Access. 5 (1), 192-200 (2016).</li><li>Alexander, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+Adipose-derived+Stromal+Vascular+Fraction+(AD-SVF)+Cell+Biology+and+Use+on+the+Basis+of+Cellular,+Chemical,+Structural+and+Paracrine+Components:+A+Concise+Review.">Understanding Adipose-derived Stromal Vascular Fraction (AD-SVF) Cell Biology and Use on the Basis of Cellular, Chemical, Structural and Paracrine Components: A Concise Review.</a> Journal of Prolotherapy. 4, e855-e869 (2012).</li><li>Benders, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+scaffolds+for+cartilage+and+bone+regeneration.">Extracellular matrix scaffolds for cartilage and bone regeneration.</a> Trends in Biotechnology. 31 (3), 169-176 (2013).</li><li>Korean Food and Drug Administration (KFDA). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+therapy:+Rules+and+Regulations.">Cell therapy: Rules and Regulations.</a> KFDA. , (2009).</li><li>Pak, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+human+bones+in+hip+osteonecrosis+and+human+cartilage+in+knee+osteoarthritis+with+autologous+adipose-tissue-derived+stem+cells:+a+case+series.">Regeneration of human bones in hip osteonecrosis and human cartilage in knee osteoarthritis with autologous adipose-tissue-derived stem cells: a case series.</a> Journal of Medical Case Reports. 5, 296 (2011).</li><li>Pak, J., Chang, J. J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+reporting+on+implantation+of+autologous+adipose+tissue-derived+stem+cells+with+platelet-rich+plasma+into+human+articular+joints.">Safety reporting on implantation of autologous adipose tissue-derived stem cells with platelet-rich plasma into human articular joints.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 14, 337 (2013).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Kartolo, W. A., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cartilage+Regeneration+in+Human+with+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells:+Current+Status+in+Clinical+Implications.">Cartilage Regeneration in Human with Adipose Tissue-Derived Stem Cells: Current Status in Clinical Implications.</a> BioMed Research International. 2016, 4702674 (2016).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+biological+approach+to+treat+chondromalacia+patellae.">A novel biological approach to treat chondromalacia patellae.</a> PLoS One. 8 (5), e64569 (2013).</li><li>Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+repair+of+damaged+meniscus+with+autologous+adipose+tissue-derived+stem+cells.">Regenerative repair of damaged meniscus with autologous adipose tissue-derived stem cells.</a> BioMed Research International. 2014, 436029 (2014).</li><li>Aust, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yield+of+human+adipose-derived+adult+stem+cells+from+liposuction+aspirates.">Yield of human adipose-derived adult stem cells from liposuction aspirates.</a> Cytotherapy. 6 (1), 7-14 (2004).</li><li>De Ugarte, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+multi-lineage+cells+from+human+adipose+tissue+and+bone+marrow.">Comparison of multi-lineage cells from human adipose tissue and bone marrow.</a> Cells Tissues Organs. 174 (3), 101-109 (2003).</li><li>Guilak, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonal+analysis+of+the+differentiation+potential+of+human+adipose-derived+adult+stem+cells.">Clonal analysis of the differentiation potential of human adipose-derived adult stem cells.</a> Journal of Cellular Physiology. 206 (1), 229-237 (2006).</li><li>Mitchell, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunophenotype+of+human+adipose-derived+cells:+temporal+changes+in+stromal-associated+and+stem+cell-associated+markers.">Immunophenotype of human adipose-derived cells: temporal changes in stromal-associated and stem cell-associated markers.</a> Stem Cells. 24 (2), 376-385 (2006).</li><li>Oedayrajsingh-Varma, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue-derived+mesenchymal+stem+cell+yield+and+growth+characteristics+are+affected+by+the+tissue-harvesting+procedure.">Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell yield and growth characteristics are affected by the tissue-harvesting procedure.</a> Cytotherapy. 8 (2), 166-177 (2006).</li><li>. Liberase TL information available from Sigma Millipore online Available from: <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/05401020001?lang=en&amp;region=US">https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/05401020001?lang=en&amp;region=US</a> (2018)</li><li>. Liberase TM information available from Sigma Millipore online Available from: <a target="_blank" href="https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/Libtmro?lang=en&amp;region=US">https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/Libtmro?lang=en&amp;region=US</a> (2018)</li><li>Childs, J. D., Piva, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychometric+properties+of+the+functional+rating+index+in+patients+with+low+back+pain.">Psychometric properties of the functional rating index in patients with low back pain.</a> European Spine Journal. 14 (10), 1008-1012 (2005).</li><li>Price, D. D., McGrath, P. A., Rafii, A., Buckingham, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+validation+of+visual+analogue+scales+as+ratio+scale+measures+for+chronic+and+experimental+pain.">The validation of visual analogue scales as ratio scale measures for chronic and experimental pain.</a> Pain. 17 (1), 45-56 (1983).</li><li>Pilgaard, L., Lund, P., Rasmussen, J. G., Fink, T., Zachar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+highly+defined+proteases+for+the+isolation+of+adipose+tissue-derived+stem+cells.">Comparative analysis of highly defined proteases for the isolation of adipose tissue-derived stem cells.</a> Regenerative Medicine. 3 (5), 705-715 (2008).</li><li>D'Ambrosi, R., Indino, C., Maccario, C., Manzi, L., Usuelli, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+Microfractured+and+Purified+Adipose+Tissue+for+Arthroscopic+Management+of+Osteochondral+Lesions+of+the+Talus.">Autologous Microfractured and Purified Adipose Tissue for Arthroscopic Management of Osteochondral Lesions of the Talus.</a> Journal of Visualized Experiments. (131), e56395 (2018).</li><li>Packer, J. D., Chang, W. T., Dragoo, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+vibrational+energy+to+isolate+adipose-derived+stem+cells.">The use of vibrational energy to isolate adipose-derived stem cells.</a> Plastic Reconstructive Surgery-Global Open. 6 (1), e1620 (2018).</li><li>Hanke, C. W., Bernstein, G., Bullock, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+of+tumescent+liposuction+in+15,336+patients.+National+survey+results.">Safety of tumescent liposuction in 15,336 patients. National survey results.</a> Dermatologic Surgery. 21 (5), 459-462 (1995).</li><li>Illouz, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complications+of+liposuction.">Complications of liposuction.</a> Clinics in Plastic Surgery. 33 (1), 129-163 (2006).</li><li>Dixit, V. V., Wagh, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unfavourable+outcomes+of+liposuction+and+their+management.">Unfavourable outcomes of liposuction and their management.</a> Indian Journal of Plastic Surgery. 46 (2), 377-392 (2013).</li><li>Lehnhardt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Major+and+lethal+complications+of+liposuction:+a+review+of+72+cases+in+Germany+between+1998+and+2002.">Major and lethal complications of liposuction: a review of 72 cases in Germany between 1998 and 2002.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (6), 396e-403e (2008).</li><li>Iyer, S. S., Rojas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+mesenchymal+stem+cells:+novel+concept+for+future+therapies.">Anti-inflammatory effects of mesenchymal stem cells: novel concept for future therapies.</a> Expert Opinion on Biological Therapy. 8 (5), 569-581 (2008).</li><li>Zhang, J., Middleton, K. K., Fu, F. H., Im, H. J., Wang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HGF+mediates+the+anti-inflammatory+effects+of+PRP+on+injured+tendons.">HGF mediates the anti-inflammatory effects of PRP on injured tendons.</a> PLoS One. 8 (6), e67303 (2013).</li><li>Li, N. Y., Yuan, R. T., Chen, T., Chen, L. Q., Jin, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+platelet-rich+plasma+and+latissimus+dorsi+muscle+flap+on+osteogenesis+and+vascularization+of+tissue-engineered+bone+in+dogs.">Effect of platelet-rich plasma and latissimus dorsi muscle flap on osteogenesis and vascularization of tissue-engineered bone in dogs.</a> Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 67 (9), 1850-1858 (2009).</li><li>Parsons, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biological+effect+of+platelet+rich-plasma+on+the+fracture+healing+process.">The biological effect of platelet rich-plasma on the fracture healing process.</a> The Journal of bone and joint surgery. British volume. 91-B, 293 (2009).</li><li>Wu, W., Chen, F., Liu, Y., Ma, Q., Mao, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+injectable+tissue-engineered+cartilage+by+using+platelet-rich+plasma:+experimental+study+in+a+rabbit+model.">Autologous injectable tissue-engineered cartilage by using platelet-rich plasma: experimental study in a rabbit model.</a> Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 65 (10), 1951-1957 (2007).</li><li>Cooper, T. W., Eisen, A. Z., Stricklin, G. P., Welgus, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+collagenase+inhibitor:+characterization+and+subcellular+localization.">Platelet-derived collagenase inhibitor: characterization and subcellular localization.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 82 (9), 2779-2783 (1985).</li><li>Uzuki, M., Sawai, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+affinity+of+sodium+hyaluronate+of+various+molecular+weights+for+degenerated+cartilage:+a+histochemical+study+using+hyaluronic+acid+binding+protein.">A comparison of the affinity of sodium hyaluronate of various molecular weights for degenerated cartilage: a histochemical study using hyaluronic acid binding protein.</a> International Congress Series. 1223, 279-284 (2001).</li><li>Pagano, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+morphometric+description+of+adipose+tissue+during+weight+changes:+a+quantitative+tool+for+assessment+of+tissue+texture.">Molecular and morphometric description of adipose tissue during weight changes: a quantitative tool for assessment of tissue texture.</a> International Journal of Molecular Medicine. 14 (5), 897-902 (2004).</li></ol>

Em 2001, Zuk et al. células-tronco isoladas de tecido adiposo por quebrar a matriz de colágeno com colagenase6. Depois, o grupo mostrou que essas células-tronco isoladas de tecido adiposo pode transformar em cartilagem e outros tecidos da mesoderme, na origem, provando que essas células-tronco eram mesenquimais na origem.
Da mesma forma, o procedimento apresentado neste artigo é um protocolo modificado para aplicar o método semelhante para pacientes human...

Células-tronco mesenquimais (MSCs) são conhecidas por terem a capacidade de regenerar a cartilagem1,2,3,4,5,6. Elas podem ser facilmente obtidas de várias fontes: sangue do cordão umbilical, medula óssea e tecido adiposo, entre muitos outros. Entre essas fontes, o tecido adiposo é a única fonte onde um número suficiente de MSCs pode ser obtido sem qualquer expansão da cultura para regenerar a cartilagem em ambientes clínicos7,8. Autólogo de medula óssea do estroma vascular fração (SVF) pode ser facilmente obtida também. No entanto, o número de células-tronco contida na medula expandida não-cultura é muito baixa7,8. Sangue do cordão umbilical pode conter um número suficiente de MSCs. No entanto, o sangue do cordão umbilical não é uma fonte prontamente disponível de SVF autólogo.
Numerosos métodos de processamento de tecido adiposo para obter SVF estão disponíveis para aplicações clínicas. Entre estes, o método de obtenção MSCs de tecido adiposo usando colagenase, desenvolvida e confirmada pelo Zuk et al 5 , 6, é muito bem aceito. Este método de usar colagenase foi modificado para aplicações clínicas em Ortopedia. A fim de ser aplicada a situações clínicas, o sistema deve ser um sistema fechado para manter a esterilidade, mantendo a conveniência. Uma modificação particular apresentada neste artigo envolve homogeneização do lipoaspirates. Lipoaspirates tamanhos pequenos são digeridos relativamente mais rápido do que os maiores que estão resultando na repartição desigual de tecido adiposo. Além disso, estes lipoaspirates de tamanhos maiores pode produzir tecidos fibrosos que podem entupir as seringas e agulhas durante a execução conjunta de injeções9,10. Para evitar esses problemas, o lipoaspirates pode ser homogeneizado por corte e picagem a lipoaspirates antes da incubação com colagenase. O SVF derivadas de tecido adiposo resultante pode conter mais uniforme da matriz extracelular (ECM) em comparação com lipoaspirates que não são homogeneizadas11. O ECM quebrado contido o SVF pode funcionar como um andaime12.
Em 2009, foi autorizada pela Korean Food and Drug Administration (KFDA) quando processado dentro de uma instalação médica com processamento mínimo, por um médico13SVF autóloga derivadas de tecido adiposo. Depois, SVF autóloga derivadas de tecido adiposo tem sido utilizada como um agente potencial para melhorar as funções do joelho em pacientes de osteoartrite (OA) potencialmente regenerando tecido de cartilagem, como10,14,15 , 16 , 17 , 18 . 
Em 2011, Pak mostrou pela primeira vez que derivadas de tecido adiposo as células-tronco (ASCs) contidas no SVF derivadas de tecido adiposo podem melhorar as funções de joelho potencialmente regenerar o tecido da cartilagem, como em pacientes humanos de OA quando injetado com rico em plaquetas plasma (PRP) 14. Além disso, Pak et al relataram dados de segurança em 2013 envolvendo 91 pacientes. A taxa de eficácia média relatada nesses dados de segurança foi 67%15. Posteriormente, estudos adicionais por Pak et al mostraram joelho melhorou funções potencialmente devido a regeneração do tecido de cartilagem, como em pacientes com um menisco lacrimal e condromalacia patelas10,16,17 ,18. Com base em artigos relatados, é sabido que o número de células-tronco contida em 100 g de tecido adiposo processado pelo protocolo apresentado neste artigo pode variar de 1.000.000-40,000,000 dependendo características8, dos pacientes 19 , 20 , 21 , 22 , 23.
Aqui, apresentamos um protocolo clínico do joelho humano OA usando SVF autóloga derivadas de tecido adiposo com HA e PRP ativado com cloreto de cálcio. A primeira versão do presente protocolo clínico, envolvendo um sistema fechado, manual para manter a esterilidade, foi relatada em 201114. O protocolo idêntico foi otimizado, manutenção de esterilidade e foi relatado em 2013 e 201610,15. Aqui, o protocolo otimizado é apresentado. A visão esquemática do protocolo é apresentado na Figura 1.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58363/58363fig1.jpg"> Figura 1: A visão esquemática do protocolo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58363/58363fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:941px;" width="941">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Material</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5% Betadine (povidone-iodine)&#160;</td>
			<td>Firson Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">657400260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2% Lidocaine&#160;</td>
			<td>Daehan Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">670603480</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Tumescent solution&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Myungmoon Pharm. Co. Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">N01BB01</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 500 mL normal saline, 40 mL 2% lidocaine, 20 mL 0.5% marcaine, and 0.5 mL epinephrine 1:1000.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Liberase TL and TM research grade&#160;</td>
			<td style="width:221px;">Roche Applied Science</td>
			<td style="width:156px;">5401020001</td>
			<td style="width:303px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">D5LR</td>
			<td>Dahan Pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645101072</td>
			<td>Dextrose 5% in lactated Ringer&#39;s solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;">Anticoagulant citrate dextrose solution&#160;</td>
			<td>Fenwal, Inc.</td>
			<td style="width:156px;">NDC:0942-0641</td>
			<td style="width:303px;">The solution was composed of 0.8% citric acid, 
			0.22% sodium citrate, and 0.223% dextrose.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3% (w/v) Calcium chloride&#160;</td>
			<td>Choongwae Pharmaceutical Co.</td>
			<td style="width:156px;">644902101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.5% (w/v) HA (Hyaluronic acid )</td>
			<td>Dongkwang pharm. Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">645902030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.25% Ropivacaine</td>
			<td>Huons Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">670600150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Equipment</td>
			<td style="width:221px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">3.0 mm Cannula&#160;</td>
			<td style="width:221px;">WOOJU Medical Instruments Co.</td>
			<td style="width:156px;">ML30200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">60-mL Luer-Lock syringe</td>
			<td style="width:221px;">BD (Becton Dickinson)&#160;</td>
			<td style="width:156px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centrifuge Barrel Kit&#160;</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue homogenizer that contains blades</td>
			<td>CPL Co., Ltd.</td>
			<td style="width:156px;">30-0827045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rotating incubator mixer</td>
			<td style="width:221px;">Medikan Co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">MS02060092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:221px;">Hanil Scientific Inc.</td>
			<td style="width:156px;">CE1133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:261px;">Magnetic Resonance Imaging</td>
			<td style="width:221px;">Philips Medical Systems Inc.</td>
			<td style="width:156px;">18068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:261px;">Ultrasound Imaging System</td>
			<td style="width:221px;">Samsung Medison co., Ltd</td>
			<td style="width:156px;">CT-LK-V10-ICM-09.05.2007</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

clinical protocol of producing adipose tissue-derived stromal vascular fraction for potential cartilage regeneration

Osteoartrite (OA) é uma das mais comuns doenças debilitantes. Recentemente, várias tentativas foram feitas para melhorar as funções dos joelhos usando diferentes formas de células-tronco mesenquimais (MSCs). Na Coreia, concentrados de medula óssea e cordão hemoderivados células-tronco foram aprovadas pela Korean Food and Drug Administration (KFDA) para regeneração da cartilagem. Além disso, uma tecido adiposo-derivado do estroma vascular fração (SVF) foi autorizada pelo KFDA para injeções conjuntas em pacientes humanos. SVF autóloga derivadas de tecido adiposo contém matriz extracelular (ECM), além de células-tronco mesenquimais. ECM excreta várias citocinas que, juntamente com o ácido hialurónico (HA) e o plasma rico em plaquetas (PRP) ativado pelo cloreto de cálcio, podem ajudar o MSCs para regenerar a cartilagem e melhorar as funções do joelho. Neste artigo, apresentamos um protocolo para melhorar as funções do joelho Regenerando o tecido da cartilagem, como em pacientes humanos com OA. O resultado do protocolo foi primeiramente relatado em 2011, seguido por algumas publicações adicionais. O protocolo envolve lipoaspiração para obter lipoaspirates autólogo que são misturados com colagenase. Esta mistura de lipoaspirates-colagenase é então cortada e homogeneizada para remover grandes de tecido fibroso que pode entupir a agulha durante a injeção. Depois disso, a mistura é incubada para obter SVF derivadas de tecido adiposo. O resultante SVF derivadas de tecido adiposo, contendo tecido adiposo-derivado MSCs e restos de ECM, é injetado em joelhos de pacientes, combinados com HA e cloreto de cálcio ativado PRP. Incluem-se três casos de pacientes que foram tratados com nosso protocolo, resultando em melhora da amplitude de movimento, juntamente com provas de MRI de cartilagem hialina, como tecido, inchaço e dor no joelho.

Três pacientes (uma mulher de 87 anos, com estágio 3 OA, um homem de 68 anos, com estágio 3 OA, e uma mulher de 60 anos com estágio 3 OA) sem qualquer passado significativo histórico médico apresentado à clínica com dor persistente no joelho e desejado para o potencial tratamento de SVF autólogo derivadas de tecido adiposo. Todos os três pacientes tinham seu joelho examinado por um cirurgião ortopédico e ofereceram-se para ter a substituição total do joelho (TKR) e estavam r...

Watch this Scientific Journal Video about Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration at JoVE.com

Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

Aqui, apresentamos um protocolo para produzir uma tecido adiposo-derivado do estroma vascular fração e sua aplicação para melhorar as funções de joelho Regenerando o tecido da cartilagem, como em pacientes humanos com osteoartrite.

Protocolo clínico de produzir tecido adiposo-derivado do estroma Vascular fração para a regeneração da cartilagem potenciais

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

A osteoartrite é um dos transtornos debilitantes mais comuns entre a população idosa. Atualmente, não há cura definitiva para as causas subjacentes da osteoartrite. Este protocolo clínico descreve um procedimento inovador para um tratamento promissor, minimamente invasivo e alternativo da osteoartrite do joelho humano, regenerando cartilagem como tecido.A osteoartrite é um dos transtornos debilitantes mais comuns entre a população idosa. Atualmente, não há cura definitiva para as causas sublinhadoras da osteoartrite. Este protocolo clínico é um procedimento inovador para um tratamento promissor, minimamente invasivo e alternativo da osteoartrite do joelho humano, regenerando tecido semelhante à cartilagem.Leve o paciente para uma sala de cirurgia com um capuz classe A de risco biológico, e coloque-o em uma posição supina. Limpe a área abdominal do paciente com 5% de iodo betadina-povidina e drape o paciente usando a técnica estéril, expondo a área limpa do abdômen para lipoaspiração. Aproximadamente cinco centímetros infero-lateralmente do umbigo, anestesiam dois locais, um à esquerda e outro no lado direito do umbigo da incisão a ser feita.Usando dois mililitros de 2% de lidocaína sem epinefrina com uma agulha de 1,5 polegada de calibre 25 em uma seringa de cinco mililitros injetando cada local no nível epidérmico. Anestesiar o local da incisão a ser feita usando cinco mililitros de solução tumescente e seringa de 10 mililitros e a agulha de 25 bitola de 1,5 polegada. Faça duas incisões de 0,5 centímetros aproximadamente cinco centímetros abaixo do umbigo lateralmente, beliscando a pele para elevar a profundidade do nível subcutâneo.Usando uma lâmina número 11, ajude a pele elevada a penetrar até o nível subcutâneo, mas não penetrar através da parede abdominal. Usando cânula de 20 centímetros de 60 metros, anestesia o nível subcutâneo de toda a área inferior do abdômen que deve ser lipoaspirado com 700 a 800 mililitros da solução tumescente. Após terminar a infiltração de todo o abdômen inferior com solução tumescente, prepare um aparelho de lipoaspiração conectando uma cânula de 3,0 milímetros conectada a uma seringa de 60 mililitros ou 30 mililitros para lipoaspiração manual ou especialmente projetada canânula de 3,0 milímetros conectada a um kit de centrífuga.Uma seringa de sistema fechada desenvolvida por nós mesmos e aprovada pela FDA CDRH com o propósito de manter a esterilidade conectada a uma máquina de vácuo para lipoaspiração assistida a vácuo. Realizar lipoaspiração para obter 100 a 110 gramas de tecido adiposo excluindo solução tumescente. Ao realizar a lipoaspiração, o tecido adiposo será obtido juntamente com a solução tumescente, mas deve ser separado e removido.Para separar a solução tumescente primeiro pela gravidade, o tecido adiposo no kit centrífuga pode ser transferido para uma seringa de 60 mililitros e colocar a seringa para baixo. Por exemplo, a parte de abertura da seringa está na parte inferior. Esperando de cinco a seis minutos, o tecido adiposo e a solução tumescente serão separados.Remova o fluido na parte inferior da seringa pressionando a parte superior do êmbolo da seringa. Realize as etapas acima de nove a 11 até que o total de 100 gramas a 110 gramas de tecido adiposo aspirado por joelho tenha sido acumulado. Depois de separar a solução tumescente por gravidade e acumular 50 gramas a 55 gramas de lipídio aspirado por cada 60 mililitros centrífugas kit estéril sistema fechado, coloque os dois kits de centrífugas em um balde de recipiente de centrífugas e gire a 1600 G por cinco minutos, condensando o aspirado lipídico e separando fluido do tecido adiposo.Esse processo condensa ainda mais o aspirado lipída e pode produzir óleo gorduroso em certos casos. Com cuidado para não tremer, remova a tampa de segurança e o plugue na parte inferior do kit centrífuga. Remova o fluido inferior empurrando lentamente para baixo em cima do êmbolo do kit centrífuga.Em seringa de 60 mililitros separados, dissolva 10 miligramas de colagenase, cinco miligramas de colagenase específicos para tecido conjuntivo e cinco miligramas de colagenase específicos para tecido adiposo com 50 mililitros de soro fisiológico normal. Misture aproximadamente 25 a 30 mililitros de lipídico condensado aspirado com colagem dissolvida, cinco miligramas de colagenase específicos para tecido conjuntivo, e cinco miligramas de colagenase específico para tecido adiposo em uma proporção de um a um, volume a volume, conectando a seringa de 60 mililitros a um kit de centrífugas usando um conector especializado. Misture completamente para condensar o aspirado de preparação e colagem, empurrando o conteúdo entre a seringa de 60 mililitros e o kit centrífuga usando uma haste ou um empurrador.Transfira a mistura do lipídio aspirado e a colagem de volta para a seringa de 60 mililitros. Conecte cada seringa de 60 mililitros contendo a mistura com o homogeneizador de tecido que contém lâminas. Conecte uma seringa vazia de 60 mililitros à outra extremidade do homogeneizador.Empurre a mistura para a outra seringa de 60 mililitros através do homogeneizador por quatro a seis vezes, resultando em corte e picar o aspirado lipídudo. Transfira o aspirado lipídico homogeneizado e a mistura de colágeno de volta para o kit de centrífuga de 60 mililitros através de um conector especializado. Coloque os kits de centrífugas em um recipiente a ser colocado em uma incubadora que foi pré-aquecido a 37 graus Celsius.Incubar os dois kits de centrífugas com a mistura homogeneizada a 37 graus Celsius por 40 minutos enquanto gira a 45 rpm. Após 40 minutos de incubação, remova o recipiente da incubadora de forma estéril. Em seguida, remova os kits de centrífugas e coloque-os em uma máquina centrífuga.Centrifugar as misturas a 800 G durante cinco minutos para separar o SVF derivado do tecido adiposo. Após a centrífuga, o supernante, que inclui colagenase e tecido adiposo digerido, é removido de cada kit de centrífuga, removendo a tampa da seringa em cima do êmbolo e colocando uma seringa de 30 mililitros no êmbolo abrindo através de uma conexão de trava de seringa. Pressione lentamente a parte do barril da seringa de 30 mililitros para que o supernatante encha a seringa de 30 mililitros.Pressione o barril de seringa de 30 mililitros até os últimos três a quatro mililitros do fundo do kit centrífuga, deixando apenas os últimos três a quatro mililitros de SVF derivado de tecido adiposo. O supernante é descartado. Remova a seringa de 30 mililitros da parte superior do êmbolo e encha a seringa com solução de anéis lactados de 5%dextrose, também conhecida como D5LR.Ao anexar a seringa de 30 mililitros preenchida com D5LR na parte superior da abertura do êmbolo, encha os kits de centrífugas contendo três a quatro mililitros de SVF derivado de tecido adiposo com D5LR até 55 mililitros. Em seguida, remova a seringa de 30 mililitros, tampe a abertura do êmbolo e centrifugar os kits de centrífugas novamente a 300 G por cerca de quatro minutos. Repita as etapas número 17 ao número 21 para um total de quatro lavagens.Após a quarta centrífuga, a fim de obter o SVF final para injeção, remova a tampa de segurança e o plugue na abertura inferior do kit centrífuga sem balançar ou girar o kit centrífuga. Conecte uma seringa de 20 mililitros à abertura inferior do kit centrífuga usando um conector especialmente projetado. Puxe o êmbolo da seringa de 20 mililitros várias vezes para frente e para trás para agitar as células que se estabeleceram na parte inferior do kit de centrífuga.Remova o volume total desejado do SVF contendo TANTO ASTs quanto ECM, juntamente com outras células e tecidos. Normalmente cerca de três a quatro mililitros de cada kit de centrífuga para injeções articulares do joelho. Fizemos 30 mililitros de sangue autólogo junto com 2,5 mililitros de solução de dextrose citrato anticoagulante.Então o sangue extraído foi transferido para os kits de barril de centrífugas de 60 mililitros. Foi então centrifuada em 730 gravidade por cinco minutos. E o supernante foi removido e colocado em um novo kit de barril de centrífugas de 60 mililitros.O supernasce foi centrifuado em 1350 gravidade por quatro minutos, obtendo 4,4 mililitros de PRP. Limpe o joelho do paciente com 5% de betadina e drape-o de forma estéril. Palpa o anterior do joelho para o espaço articular entre ossos tibiais e femorais.Anestesiar o local de injeção superficialmente com lidocaína diluída, um mililitro de 1%lidocaína diluída com quatro mililitros de soro fisiológico normal, da pele para fora da cápsula articular. Em seguida, anestesiar o interior da cápsula articular com ropivacaína diluída, um mililitro 0,75% ropivacaína diluída com três mililitros de soro fisiológico normal. Misture dois mililitros de HA ao seis a oito mililitros de SVF contidos em uma seringa de 20 mililitros através de uma seringa para conector de seringa.Usando uma seringa para conector de seringa, adicione 0,4 mililitros de cloreto de cálcio aos três a quatro mililitros de PRP autólogo que já foi preparado e estar pronto em uma seringa de cinco mililitros. Combine 3,5 a 4,5 mililitros prp cloreto de cálcio em uma seringa de cinco mililitros com oito a 10 mililitros de mistura HA-SVF em uma seringa de 20 mililitros através de uma seringa para conector de seringa. Injete imediatamente a mistura, cerca de 12 a 15 mililitros, lentamente na articulação tibial-femoral anterior do joelho, usando agulha de calibre 38 milímetros com ou sem a orientação de ultrassom.Após a injeção, enfaixe o local da injeção com pressão dobrando a gaze de algodão 4x4 quatro vezes e colocando fitas sobre a gaze 4x4 dobrada. Instrua o paciente a ficar parado por 60 minutos para permitir a fixação celular. Instrua o paciente a limitar as atividades pelo mínimo de uma semana após a alta da clínica.Retorne à clínica para três injeções adicionais de PRP ativados por cloreto de cálcio ao longo de três semanas. O paciente com estágio três de OA recebeu o tratamento conforme descrito na seção de protocolo. Após a segunda semana da injeção de mistura ASV-ECM, a dor do paciente e a ROM melhoraram.Na 16ª semana, a dor do paciente e a ROM melhoraram significativamente mais de 70% A ressonância magnética pós-tratamento, feita após a 16ª semana, mostrou o aumento da espessura do tecido semelhante à cartilagem no lado medial do joelho. Outro paciente com estágio três de OA recebeu o tratamento conforme descrito na seção de protocolo. Após a segunda semana da injeção de mistura ASV-ECM, a dor do paciente e a ROM melhoraram.Na 18ª semana, a dor e a ROM melhoraram significativamente para 80% A ressonância magnética repetida tomada após a 18ª semana mostrou um aumento na altura do tecido semelhante à cartilagem no lado medial anterior do joelho. O terceiro paciente com estágio três OA recebeu o tratamento conforme descrito na seção de protocolo. Após a segunda semana de injeção de mistura ASV-ECM, a dor do paciente e a ROM melhoraram em aproximadamente 50% Na 22ª semana, a dor e a ROM melhoraram significativamente mais de 80% A ressonância magnética repetida tomada após a 22ª semana mostrou um aumento na altura do tecido semelhante à cartilagem no lado medial do joelho.Atualmente não há terapia curativa disponível para o tratamento de OA. No entanto, a injeção percutânea de terapia de células-tronco com ASCs e ECM homogeneizado juntamente com HA e PRP análogo ativado com cloreto de cálcio pode fornecer uma alternativa à terapia de tratamento atual do tratamento do joelho OA.

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

Geração Experimental de Carcinoma Associado fibroblastos (FAC) de Fibroblastos Humanos mamária

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Medicina

Repair of a Critical-sized Calvarial Defect Model Using Adipose-derived Stromal Cells Harvested from Lipoaspirate

Reparação de um modelo de defeito crítico porte calvária Usando derivadas de tecido adiposo células do estroma colhidas lipoaspirado

Craniofacial skeletal repair and regeneration offers the promise of de novo tissue formation through a cell-based approach utilizing stem cells. ...

Improved Protocol For Laser Microdissection Of Human Pancreatic Islets From Surgical Specimens

Protocolo melhorado para microdissecção a laser de ilhotas pancreáticas humanas a partir de espécimes cirúrgicos

Laser microdissection (LMD) is a technique that allows the recovery of selected cells and tissues from minute amounts of parenchyma 1,2. The dissected ...

Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

Protocolo de Exame Clínico para Detectar Scrapie Atípico e Clássico em Ovelhas

The diagnosis of scrapie, a transmissible spongiform encephalopathy (TSEs) of sheep and goats, is currently based on the detection of disease-associated ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

Tridimensional modelo de co-cultura para Interaction Tumor estromal-

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice

Visualização dos Vascular e parênquima regeneração após 70% hepatectomia parcial em ratos normais

A modified silicone injection procedure was used for visualization of the hepatic vascular tree. This procedure consisted of in-vivo injection of the ...

A Novel Clinical Grade Isolation Method for Human Kidney Perivascular Stromal Cells

Um método de isolamento do romance grau clínico para rim humano Perivascular de células do estroma

Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) are tissue homeostatic and immune modulatory cells that have shown beneficial effects in kidney diseases and ...

Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

Do estroma Vascular fração enriquecida enxerto de gordura para o tratamento sintomático final-neuromata

The purpose of this study was to methodically illustrate and highlight the crucial steps of stromal vascular fraction (SVF)-enriched fat grafting as a ...

An Optimized Evans Blue Protocol to Assess Vascular Leak in the Mouse

Um otimizado Evans Blue protocolo para avaliar vazamento Vascular no Mouse

Vascular leak, or plasma extravasation, has a number of causes, and may be a serious consequence or symptom of an inflammatory response. This study may ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Transplante de células-tronco derivadas de tecido adiposo folha para reduzir o vazamento após colectomia parcial em um modelo do rato

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...