Name: visualize drosophila leg motor neuron axons through the adult cuticle
Uploaded: 2018-10-30T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle at JoVE.com

ونحن نشكر رينار روبرت لإعداد الطعام ذبابة المتوسط. وكان هذا العمل مدعومة بمنحه المعاهد الوطنية للصحة NS070644 R.S.M. والتمويل من رابطة ALS (رقم 256) والعلاجات (#AJE20170537445) والبرنامج افينير ATIP على J.E.

1-الساق التشريح والتثبيت
<ol><li>تأخذ لوحة زجاج متعدد جيدا وتعبئة العدد المناسب من الآبار مع الإيثانول 70%. إضافة 15 – 20 CO2-الذباب تخديره (من الجنس وأي عمر) لكل منهما جيدا باستخدام فرشاة، بلطف ربت الذباب إلى الحل الإيثانول حتى الذباب مغمورة تماما. ملاحظة: هذه الخطوة لإزالة hydrophobicity بشرة. ع?...

<ol>
	<li>Miller, A., Demerec, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+internal+anatomy+and+histology+of+the+imago+of+Drosophila+melanogaster.">The internal anatomy and histology of the imago of Drosophila melanogaster.</a> Biology of Drosophila. , 420-531 (1950).</li><li>Soler, C., Ladddada, L., Jagla, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+development+of+muscles+and+tendons+of+the+Drosophila+leg.">Coordinated development of muscles and tendons of the Drosophila leg.</a> Development. 131 (24), 6041-6051 (2004).</li><li>Baek, M., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+and+Birth+Date+Specify+Motor+Neuron+Targeting+and+Dendritic+Architecture+in+adult+Drosophila.">Lineage and Birth Date Specify Motor Neuron Targeting and Dendritic Architecture in adult Drosophila.</a> Journal of Neuroscience. 29 (21), 6904-6916 (2009).</li><li>Brierley, D. J., Rathore, K., VijayRaghavan, K., Williams, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+origins+and+architecture+of+Drosophila+leg+motoneurons.">Developmental origins and architecture of Drosophila leg motoneurons.</a> Journal of Comparative Neurology. 520 (8), 1629-1649 (2012).</li><li>Enriquez, J., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specification+of+Individual+Adult+Motor+Neuron+Morphologies+by+Combinatorial+Transcription+Factor+Codes.">Specification of Individual Adult Motor Neuron Morphologies by Combinatorial Transcription Factor Codes.</a> Neuron. 86 (4), 955-970 (2015).</li><li>Mahr, A., Aberle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+pattern+of+the+Drosophila+vesicular+glutamate+transporter:+a+marker+protein+for+motoneurons+and+glutamatergic+centers+in+the+brain.">The expression pattern of the Drosophila vesicular glutamate transporter: a marker protein for motoneurons and glutamatergic centers in the brain.</a> Gene Expression Patterns. 6 (3), 299-309 (2006).</li><li>Lee, T., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+analysis+with+a+repressible+cell+marker+(MARCM)+for+Drosophila+neural+development.">Mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) for Drosophila neural development.</a> Trends in Neuroscience. 24 (5), 251-254 (2001).</li><li>Enriquez, J., Rio, L. Q., Blazeski, R., Bellemin, S., Godement, P., Mason, C. A., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differing+Strategies+Despite+Shared+Lineages+of+Motor+Neurons+and+Glia+to+Achieve+Robust+Development+of+an+Adult+Neuropil+in+Drosophila.">Differing Strategies Despite Shared Lineages of Motor Neurons and Glia to Achieve Robust Development of an Adult Neuropil in Drosophila.</a> Neuron. 97 (3), 538-554 (2018).</li><li>Preibisch, S., Saalfeld, S., Tomancak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Globally+optimal+stitching+of+tiled+3D+microscopic+image+acquisitions.">Globally optimal stitching of tiled 3D microscopic image acquisitions.</a> Bioinformatics. 25 (11), 1463-1465 (2009).</li><li>Brierley, D. J., Blanc, E., Reddy, O. V., Vijayraghavan, K., Williams, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+targeting+in+the+leg+neuropil+of+Drosophila:+the+role+of+midline+signalling+molecules+in+generating+a+myotopic+map.">Dendritic targeting in the leg neuropil of Drosophila: the role of midline signalling molecules in generating a myotopic map.</a> PLoS Biology. 7 (9), e1000199 (2009).</li></ol>

بشرة المورفولوجية الكبار والمفصليات الأخرى، التي تحتوي على العديد من الصبغات الداكنة، يشكل عقبة رئيسية لعرض هياكل داخل أجسامهم. وبالإضافة إلى ذلك، أنها بشدة الفلورسنت السيارات التي تتفاقم بالتثبيت. هاتان السمتان إشكالية جداً بالنسبة للملاحظات من الأصباغ الفلورية أو الجزيئات داخل الجس?...

مثل الفقاريات أطرافهم، وساقه الكبار المورفولوجية ينقسم إلى شرائح. ويتضمن كل ساق يطير عضلات 14، كل منها يضم عدة ألياف العضلات1،2. تقع جثث خلية MNs الساق الكبار في T1 (بروثوراسيك)، T2 (ميسوثوراسيك)، والعقد T3 (ميتاثوراسيك) على كل جانب من الحبل البطني العصب (فنك)، هيكلي مشابه للحبل الشوكي الفقاريات (الشكل 1). وهناك ما يقرب من 50 MNs في كل العقد، التي تستهدف عضلات في أربعة أجزاء من الساق عن (كوكسا، تروتشانتير، وعظم الفخذ، والساق) (الشكل 1)3. الأهم من ذلك، يحتوي كل ساق الكبار الفردية MN هوية فريدة من نوعها مورفولوجية التي هي النمطية للغاية بين الحيوانات3،4. كل هذه MNs فريدة مستمدة من 11 من الخلايا الجذعية، يسمى نيوروبلاستس (مكتب الإحصاء الوطني) المنتجة للمحطة MNs خلال مراحل اليرقات3،4. في نهاية كل مراحل اليرقات تفرق MNs بوستميتوتيك غير ناضجة أثناء التحول للحصول على العرش الجذعية محددة وأهداف المحطة الطرفية محواري التي تعرف بهم مورفولوجيا فريدة من نوعها3،4. سابقا قمنا باختبار الفرضية القائلة بأن مدونة اندماجي لعوامل النسخ (TFs) تعين مورفولوجية فريدة من نوعها لكل ساق المورفولوجية الكبار MN5. كنموذج، قمنا باستخدام النسب ب أحد الأنساب NB 11 التي تنتج سبعة من أصل MNs وأثبتت أن مدونة اندماجي TFs المعرب عنها في الساق الكبار بوستميتوتيك MNs يملي على مورفولوجيس الفردية. قبل ريبروجرامينج مدونة TF MNs قد تمكنا من تبديل MN مورفولوجيس بطريقة يمكن التنبؤ بها. ونحن ندعو هذه TFs: mTFs (TFs المورفولوجية)5.
واحدة من أصعب الأجزاء من التحليلات المورفولوجية للكبار MNs تصور محاور عصبية عن طريق بشرة سميكة والسيارات-فلوري بدقة عالية. نحن عادة ما تسمية محاور عصبية مع معلم غشاء بروتينات فلورية خضراء التي يتم التعبير عنها في MNs مع نظام ثنائي تعبير، مثل دفجلوت-Gal4/UAS-mCD8::GFP أو دفجلوت-QF/QUAS mCD8::GFP، حيث دفجلوت تشكل دافعا قويا في 6من موتونيورونس. من خلال الجمع بين هذه الأدوات مع تقنيات الاستنساخ الأخرى مثل تحليل فسيفساء بعلامة ريبريسيبلي (ماركم)7، ورابطة الدول المستقلة-ماركم8أو ماركمبوو5، نحن يمكن تقييد التعبير التجارة والنقل للفئات السكانية الفرعية لإجراء تحليل المظهرية MNs من محاور عصبية أسهل. ونحن قد ولدت بروتوكول بغية إبقاء الساق مورفولوجيا محواري MN سليمة للتعمير 3D التصوير واللاحقة بمعالجة مسائل معينة مضمنة في الساق المورفولوجية الكبار مثل التثبيت (1) بشأن الهياكل الداخلية لفريق الخبراء البالغين دون التأثير على مورفولوجيا إكسون والتعبير الفلورسنت الذاتية، وعضلات الساق، (2) تركيب المحطة للمحافظة على الهيكل العام لإطار ساترة وفي الاتجاه المناسب للتصوير، و (3) معالجة للحصول على بشرة الصور الخلفية، فضلا عن إشارة الفلورسنت محواري. بينما هذا البروتوكول تفصيلي للكشف عن التعبير الفلورسنت في مينيسوتا محاور عصبية، أنه يمكن تطبيقها على تصور مكونات أخرى من الساق نيوروموسكولاتوري في المفصليات.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>E/6550DF/17</td>
			<td>Absolute analytical reagent grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nonionic&#160;surfactant&#160;detergent</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td>Triton X-100, for molecular biology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521</td>
			<td>Jewelers forceps, Dumont No. 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass multi-well plate</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>71563-01</td>
			<td>9 cavity Pyrex, 100x85 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PFA</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>28908</td>
			<td>Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP 229-1</td>
			<td>Glycerol (Molecular Biology)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spacers</td>
			<td>Sun Jin Lab Co</td>
			<td>IS006</td>
			<td>iSpacer, four wells, around 12 &#956;L working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Square 22x22 mm coverslips</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FIS#12-541-B</td>
			<td>No.1.5 -0.16 to 0.19mm thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Medium</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1000</td>
			<td>Vectashield Antifade Mounting Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>LSM780; objective used LD LCI Plan-Apochromat 
			25x/0,8 Imm Korr DIC M27 (oil/ 
			silicon/glycerol/water 
			immersion) (420852-9871-000)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>imaging software</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>ZEN 2011</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D-Image software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Amira 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td>https://imagej.nih.gov/ij/</td>
			<td>ImageJ/FIJI</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualize drosophila leg motor neuron axons through the adult cuticle

نفذت معظم العمل لمواصفات الخلايا العصبية في نماذج أصعب وراثيا وفسيولوجيا مثل ج. ايليجانس، اليرقات المورفولوجية ، والأسماك، والتي جميعها الانخراط في حركات أوندولاتوري (مثل الزحف أو السباحة) كطريقة أساسية للحركة. ولكن أكثر تطورا فهم المواصفات الفردية الخلايا العصبية الحركية (مينيسوتا) – على الأقل فيما يتعلق بإبلاغ علاجات الأمراض – يطالب نظام يستهدف أيضا أفضل نماذج مخططات الحركة المعقدة القائمة على أطرافهم الفقاريات. النظام الحركي المورفولوجية الكبار المسؤولين عن المشي تلبي جميع هذه المعايير بسهولة، في هذا النموذج أنه من الممكن لدراسة مواصفات عدد صغير من الساق تمييزها بسهولة MNs (حوالي 50 MNs كل جولة) كلا استخدام واسعة مجموعة من الأدوات الوراثية قوية، وفي سياق الفسيولوجية لوضع خطة تحرك تستند إلى طرف من أطرافهم. هنا يصف لنا وضع بروتوكول لتصور تعصيب عضلة الساق في يطير الكبار.

كما هو موضح في الشكل 4، يسمح هذا الإجراء تصوير ممتازة من محاور عصبية المسمى بروتينات فلورية خضراء في الساقين المورفولوجية الكبار، جنبا إلى جنب مع بهم العرش المحطة الطرفية. الأهم من ذلك هو الحصول على إشارة بروتينات فلورية خضراء نظيفة دون أي تلوث من ال?...

Watch this Scientific Journal Video about Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle at JoVE.com

Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle

تصور المورفولوجية الساق الحركية محاور عصبية من خلال بشرة الكبار

هنا يصف لنا وضع بروتوكول لتصور استهداف محواري مع بروتين الفلورسنت في الساقين الكبار من المورفولوجية التثبيت والمتصاعدة، والتصوير، والتصوير بعد انتهاء الخطوات.

The majority of work on the neuronal specification has been carried out in genetically and physiologically tractable models such as C. elegans, Drosophila ...

ويمكن تكييف هذه الطريقة بسهولة لمراقبة إشارات من البروتينات الفلورية الأخرى أو يمكن استخدامها لصورة محاور في الكبار أخرى والميزة الرئيسية لهذه التقنية تسهيل إعادة بناء ممتازة ثلاثية الأبعاد وتصور من محاور عصبية وarbors المحطة الطرفية الخاصة بهم. تبدأ بملء العدد المناسب من الآبار في لوحة زجاجية متعددة الآبار مع 70٪ الإيثانول. استخدام فرشاة لإضافة 15 إلى 20 ثاني أكسيد الكربون يصير الذباب من أي عمر أو جنس إلى كل بئر وداب بلطف الذباب في الإيثانول حتى يتم غمرها بالكامل.بعد ما لا يزيد عن دقيقة واحدة، شطف الذباب ثلاث مرات مع 0.3٪ غير الأيونية محلول المنظفات السطحية في المالحة الفوسفات المخزنة لمدة 10 دقائق على الأقل لكل غسل. بعد الغسيل الأخير، استخدم ملقط لإزالة الرأس والبطن من كل ذبابة دون إتلاف الجزء الصدري أو الساقين واستخدام غيض من زوج من ملقط غرامة ل بلطف ولكن بحزم تطبيق الضغط على تقاطع كوكسا-ثوراكس لفصل ساق واحدة من الجزء الصدري. وضع الساقين في بئر واحدة من لوحة جديدة متعددة جيدا تحتوي على الطازجة أعدت 4٪ شبهformaldehyde على الجليد لاحتضان بين عشية وضحاها في أربع درجات مئوية.من المهم دفع الساقين بلطف إلى حاجز التثبيت دون السماح لهم تعويم للحصول على الساقين ثابتة بشكل جيد. في اليوم التالي، غسل الساقين خمس مرات في 0.3٪ الطازجة غير الأيونية حل المنظفات السطحية لمدة 20 دقيقة لكل غسل. بعد الغسيل الأخير، استبدل المنظفات بمتوسط التركيب، وإبقاء الساقين في وسط التركيب لمدة 24 ساعة على الأقل.في اليوم التالي، إضافة ما يقرب من 20 ميكروليترس من 70٪ الجلسرين بجانب نهاية المغلفة من الشريحة المجهر الزجاجي وتغطية الجلسرين مع 22 في 22 ملليمتر coverslip. المقبل، إضافة في حوالي 10 خط microliter من تصاعد المتوسطة إلى يمين غطاء وتطبيق خط 30 ميكرولتر الثانية من المتوسطة تصاعد إلى يمين خط ميكرولتر 10. باستخدام ملقط غرامة، نقل ساق واحدة من لوحة متعددة جيدا في قطرة متوسطة إلى 10 شريط ميكرولتر من تصاعد المتوسطة في اتجاه الجانب الخارجي صعودا أو هبوطا.كرر حتى تم تركيب ستة إلى ثمانية أرجل ومحاذاة ووضع غطاء الثانية على الساقين بحيث يغطي الثاني تقع قليلا على الغطاء الأول. ثم استخدام طلاء الأظافر في كل ركن من أركان الأغطية لتأمين لهم في مكان. لتصوير الساقين، استخدم الليزر 488 نانومتر واثنين من أجهزة الكشف في وقت واحد لإعداد المسار الأول للحصول على كل من GFP وsasicle السيارات fluorescence.حدد هدف غمر الزيت من 20 إلى 25X وحدد الدقة إلى 1024 بكسل بمقدار 1024 مع عمق 12 بت وتعيين التباعد z إلى ميكرومتر واحد. قم بتحميل الشريحة على مرحلة المجهر واستخدام نفس قوة الليزر لكل من الكاشفين، وضبط كسب الكاشف الأول للحصول على إشارة GFP الساطعة وضبط الكاشف الثاني لضمان أن بعض المناطق ذات إشارة بشرة عالية تنتج إشارة مشبعة في هذا الكاشف. ثم صورة الساقين باستخدام البلاط أو خيارات الموقف لالتقاط كامل الساق إذا تم تمديد الساق أو كبيرة جدا ليتم تصويرها في إطار واحد.لمعالجة الصور، افتح المكدس confocal في Fiji ImageJ واستخدم المكون الإضافي "تنسيقات حيوية" لفتح أي صور ليست بتنسيق TIFF. لتقسيم القنوات، حدد الصور والألوان وقنوات الانقسام. لطرح إشارة بشرة من إشارة GFP، افتح عملية وحاسبة الصورة وحدد المكدس من كاشف واحد كصورة واحدة.في نافذة العملية، حدد طرح وحدد المسار من جهاز الكشف اثنين كصورة اثنين بحيث سيتم الحصول على إشارة GFP الذاتية فقط. استخدام الصورة، والمكدسات، Z حماية لتوليد أقصى كثافة الإسقاط للإشارة GFP الذاتية. استخدم عناصر التحكم في نافذة التحكم في السطوع لضبط السطوع والتباين.ثم توليد كثافة متوسطة ل بشرة، تليها الصور، اللون، و دمج القنوات لدمج كومة GFP مرة أخرى مع كومة بشرة فقط المكتسبة من كاشف اثنين. وهذا سيؤدي إلى صورة RGB تتألف من إشارة GFP الخاصة بالأنسجة بالإضافة إلى إشارة بشرة للمساعدة في تحديد أربور محور عصبي داخل أجزاء الساق. لاستخدام الماكرو، افتح المكدس confocal وانقر فوق صورة، وضبط، وسطوع/تباين.ثم انقر فوق البرنامج المساعد وتشغيل ماكرو لتشغيل الماكرو واتبع الإرشادات. عند طلب تحديد العملية في إطار آلة حاسبة الصورة، حدد صورة واحدة كتكديس واحد. في إطار العملية، حدد طرح.حدد الصورة اثنين كتكدس اثنين. عندما يطلب لضبط التباين، استخدم عناصر التحكم في نافذة التحكم في السطوع لضبط تباين السطوع لصورة الإسقاط القصوى لـ GFP ومتوسط إسقاط بشرة توليد صورة مدمجة RGB لكل من الإشارات التي تظهر GFP باللون الأخضر و بشرة باللون الرمادي. ثم دمج نتائج المكدس واحد واثنين من المكدس لتوليد مجمع GFP و كدسة بشرة التي يمكن استخدامها في المرحلة التالية.لتصور الساقين في ثلاثة أبعاد، افتح مكدس RGB في برنامج 3D مناسب. في نافذة الحوار المنبثقة، حدد جميع القنوات في قسم تحويل الوضع وأدخل حجم voxel تم الحصول عليها من التحليل السابق. في وحدة قناة واحدة، انقر بزر الماوس الأيمن وحدد عرض وVolren.ثم غادر انقر على وحدة Volren. في المقطع خصائص، انقر على اليسار على خيارات متقدمة وحدد DDR. ثم اضبط قيمة غاما لرؤية خلفية بشرة.في وحدة القناة الثانية ، انقر بزر الماوس الأيمن وحدد عرض Volren. ثم غادر انقر على وحدة Volren، تحرير وحدد volrenGreen.col. باستخدام هذا الإجراء، يمكن الجمع بين الإشارة من بشرة مع إشارة GFP لتحديد موضع محاور داخل الساقين.من المهم للغاية الحصول على الساقين ثابتة بشكل جيد. في الساقين ثابتة بشكل صحيح، والهياكل الداخلية داخل الساقين هي من لون موحد والقصبة الهوائية، والتي هي داكنة، مرئية. في الساقين ثابتة سيئة، والمواد الداكنة موجودة في الترسوس والساق ونظام القصبة الهوائية ليست واضحة للعيان في عظم الفخذ coxa.الإجراء الذي وصفناه هنا يتغلب على التحدي المتمثل في الكشف عن التعبير الفلورسنت في محاور عصبية المحرك من خلال بشرة فلورية سميكة والسيارات ذات دقة عالية. لذلك فإن إشارة الفلورسنت النظيفة والمفصلة التي تم الحصول عليها تسمح لنا بتصور وكمية ميزة ثلاثية الأبعاد لربور محور عصبي باستخدام برامج التصوير ثلاثية الأبعاد. لذلك هذه التقنية سوف تسمح لنا لاستخدام درسوسوفيليا الكبار كنموذج ليس فقط لدراسة تطوير الخلايا العصبية الحركية, ولكن أيضا لدراسة, لفهم تأثير مرض التنكسية مثل ERAS على النظام الحركي المتكاملة.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

يعيش التصوير لل<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; العذراء العين

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Mechanism of Regulation of Adipocyte Numbers in Adult Organisms Through Differentiation and Apoptosis Homeostasis

آلية تنظيم أرقام خلية شحمية في الكائنات الكبار من خلال التمايز وموت الخلايا المبرمج التوازن

Considering that adipose tissue (AT) is an endocrine organ, it can influence whole body metabolism. Excessive energy storage leads to the dysregulation of ...

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

طرق لفحص الليمفاوية الغدة وHemocytes في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; يرقات

Many parallels exist between the Drosophila and mammalian hematopoietic systems, even though Drosophila lack the lymphoid lineage that characterize ...

Biosensing Motor Neuron Membrane Potential in Live Zebrafish Embryos

بيوسنسينغ موتور الخلايا العصبية الغشاء المحتملة في الأجنة الزرد الحية

The protocols described here are designed to allow researchers to study cell communication without altering the integrity of the environment in which the ...

Generation of Genetically Modified Mice through the Microinjection of Oocytes

جيل من الفئران المعدلة وراثيا من خلال ميكروينجكتيون من البويضات

The use of genetically modified mice has significantly contributed to studies on both physiological and pathological in vivo processes. The pronuclear ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

تشريح وتلطيخ إيممونوفلوريسسينت للفطر الجسم وعلم الخلايا العصبية في أدمغة البالغين melanogaster المورفولوجية

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

ذوبان الجليد واستزراع كريوبريسيرفينج خطوط الخلايا المورفولوجية

There are currently over 160 distinct Drosophila cell lines distributed by the Drosophila Genomics Resource Center (DGRC). With genome engineering, the ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

طريقة مباشرة وبسيطة لتقييم قدرة دروسوفيلا ميلانوغاسترعلى البقاء من الجنين إلى الكبار

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

عزل مجموعات الخلايا العصبية المحددة من الدودة المستديرة Caenorhabditis elegans

During the aging process, many cells accumulate high levels of damage leading to cellular dysfunction, which underlies many geriatric and pathological ...

Retrograde Tracing of Drosophila Embryonic Motor Neurons Using Lipophilic Fluorescent Dyes

Retrograde Tracing of Drosophila Embryonic Motor Neurons Using Lipophilic Fluorescent Dyes

التتبع العكسي للخلايا العصبية للمحركات الجنينية باستخدام الاصباغ الفلورية الليبوهيلليك

We describe a technique for retrograde labeling of motor neurons in Drosophila. We use an oil-dissolved lipophilic dye and deliver a small droplet to an ...