Name: visualize drosophila leg motor neuron axons through the adult cuticle
Uploaded: 2018-10-30T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle at JoVE.com

Vi vil gerne takke Robert Renard for at forberede flyve mad medium. Dette arbejde blev understøttet af en NIH grant NS070644 til R.S.M. og finansiering fra ALS Association (#256), FRM (#AJE20170537445) og ATIP-Avenir Program til J.E.

1. ben dissektion og fiksering
<ol><li>Tage en glasplade multi godt og fyld passende antal brønde med 70% ethanol. Tilføj 15 – 20 CO2-bedøvede fluer (af enten sex og enhver alder) til hver godt og ved hjælp af en pensel, forsigtigt duppe fluer i ethanol løsning indtil fluer er fuldt neddykket. Bemærk: Dette trin er at fjerne hydrophobicity af neglebånd. Vask ikke for mere end 1 min, fordi det øger auto-fluorescens af neglebånd.</li>
	<li>Skyl flyver 3 gange med 0,3% nonionisk overfladeaktivt re...

<ol>
	<li>Miller, A., Demerec, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+internal+anatomy+and+histology+of+the+imago+of+Drosophila+melanogaster.">The internal anatomy and histology of the imago of Drosophila melanogaster.</a> Biology of Drosophila. , 420-531 (1950).</li><li>Soler, C., Ladddada, L., Jagla, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+development+of+muscles+and+tendons+of+the+Drosophila+leg.">Coordinated development of muscles and tendons of the Drosophila leg.</a> Development. 131 (24), 6041-6051 (2004).</li><li>Baek, M., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+and+Birth+Date+Specify+Motor+Neuron+Targeting+and+Dendritic+Architecture+in+adult+Drosophila.">Lineage and Birth Date Specify Motor Neuron Targeting and Dendritic Architecture in adult Drosophila.</a> Journal of Neuroscience. 29 (21), 6904-6916 (2009).</li><li>Brierley, D. J., Rathore, K., VijayRaghavan, K., Williams, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+origins+and+architecture+of+Drosophila+leg+motoneurons.">Developmental origins and architecture of Drosophila leg motoneurons.</a> Journal of Comparative Neurology. 520 (8), 1629-1649 (2012).</li><li>Enriquez, J., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specification+of+Individual+Adult+Motor+Neuron+Morphologies+by+Combinatorial+Transcription+Factor+Codes.">Specification of Individual Adult Motor Neuron Morphologies by Combinatorial Transcription Factor Codes.</a> Neuron. 86 (4), 955-970 (2015).</li><li>Mahr, A., Aberle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+pattern+of+the+Drosophila+vesicular+glutamate+transporter:+a+marker+protein+for+motoneurons+and+glutamatergic+centers+in+the+brain.">The expression pattern of the Drosophila vesicular glutamate transporter: a marker protein for motoneurons and glutamatergic centers in the brain.</a> Gene Expression Patterns. 6 (3), 299-309 (2006).</li><li>Lee, T., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+analysis+with+a+repressible+cell+marker+(MARCM)+for+Drosophila+neural+development.">Mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) for Drosophila neural development.</a> Trends in Neuroscience. 24 (5), 251-254 (2001).</li><li>Enriquez, J., Rio, L. Q., Blazeski, R., Bellemin, S., Godement, P., Mason, C. A., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differing+Strategies+Despite+Shared+Lineages+of+Motor+Neurons+and+Glia+to+Achieve+Robust+Development+of+an+Adult+Neuropil+in+Drosophila.">Differing Strategies Despite Shared Lineages of Motor Neurons and Glia to Achieve Robust Development of an Adult Neuropil in Drosophila.</a> Neuron. 97 (3), 538-554 (2018).</li><li>Preibisch, S., Saalfeld, S., Tomancak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Globally+optimal+stitching+of+tiled+3D+microscopic+image+acquisitions.">Globally optimal stitching of tiled 3D microscopic image acquisitions.</a> Bioinformatics. 25 (11), 1463-1465 (2009).</li><li>Brierley, D. J., Blanc, E., Reddy, O. V., Vijayraghavan, K., Williams, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+targeting+in+the+leg+neuropil+of+Drosophila:+the+role+of+midline+signalling+molecules+in+generating+a+myotopic+map.">Dendritic targeting in the leg neuropil of Drosophila: the role of midline signalling molecules in generating a myotopic map.</a> PLoS Biology. 7 (9), e1000199 (2009).</li></ol>

Hårstrået voksen Drosophila og andre leddyr, der indeholder mange mørke pigmenter, er en væsentlig hindring for at se strukturer inde i deres krop. Det er derudover stærkt auto fluorescerende, som forværres af fiksering. Disse to funktioner er meget problematisk for observationer af fluorescerende farvestoffer eller molekyler inde i kroppen af dyr med en exoskeleton.
Den procedure, vi har beskrevet, og at vi rutinemæssigt bruger i laboratoriet udbytter ren og detaljerede billeder af axo...

Ligesom de hvirveldyr lemmer, er Drosophila voksen benet organiseret i segmenter. Hvert fly ben indeholder 14 muskler, som hver består af flere muskelfibre1,2. Voksen ben MNs celle organer er placeret i T1 (prothoracic), T2 (mesothoracic) og T3 (metathoracic) ganglier på hver side af den ventrale nerve ledningen (VNC), en strukturel analog med hvirveldyr rygmarven (figur 1). Der er ca 50 MNs i hver ganglier, hvor målet muskler i fire segmenter af ipsilaterale benet (coxa, trochanter, lårben og skinneben) (figur 1)3. Vigtigere, har hvert enkelte voksne ben MN en unik morfologiske identitet er meget stereotype mellem dyr3,4. Alle disse unikke MNs er afledt af 11 stamceller, kaldet neuroblasts (NBs) producerer ben MNs under larve faser3,4. I slutningen af de larve faser alle differentiere de umodne postmitotic MNs under metamorfose at erhverve deres specifikke dendritiske Dorne og cytoskeletale terminal mål, der definerer deres enestående morfologi3,4. Vi har tidligere testet den hypotese, at en kombinatorisk kode af transkriptionsfaktorer (TFs) angiver den entydige morfologi af hvert Drosophila voksen ben MN5. Som en model brugte vi lineage B, en af de 11 NB slægter, som producerer syv ud af MNs og påvist, at en kombinatorisk kode af TFs udtrykt i postmitotic voksen ben MNs dikterer deres individuelle morfologier. Af reprograming TF kode af MNs har vi kunnet skifte MN morfologier på en forudsigelig måde. Vi kalder disse TFs: MHF'er (morfologiske TFs)5.
En af de mest udfordrende dele af de morfologiske analyser af voksen MNs er at visualisere axoner via en tyk og auto-fluorescerende neglebånd med høj opløsning. Vi mærker normalt axoner med en membran-tagged NGL, der er udtrykt i MNs med et binært udtryk system, som DVglut-Gal4/UAS-mCD8::GFP eller DVglut-QF / QUAS mCD8::GFP, hvor DVglut er en stærk drivkraft udtrykt i motoneurons6. Ved at kombinere disse værktøjer med andre klonede teknikker som mosaik analyse med en repressible markør (MARCM)7, cis-MARCM8eller MARCMbow5, kan vi begrænse normal god landbrugspraksis udtryk til delpopulationer af MNs gør de fænotypiske analyser af axoner lettere. Vi har genereret en protokol for at holde benet MN cytoskeletale morfologi intakt til billedbehandling og efterfølgende 3D rekonstruktion ved at løse specifikke problemer iboende til voksen Drosophila benet som (1) fiksering af de interne strukturer af voksen benet uden at det påvirker axon morfologi, endogene fluorescerende udtryk og ben muskulatur, (2) montering af ben for at bevare den overordnede struktur under en coverslip og i de relevante orientering til billedbehandling, og (3) billedbehandling for at få neglebånd baggrund samt cytoskeletale fluorescerende signal. Mens denne protokol har været detaljeret til påvisning af fluorescerende udtryk i MN axoner, kan det anvendes til at visualisere andre komponenter af ben neuromusculature i leddyr.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>E/6550DF/17</td>
			<td>Absolute analytical reagent grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nonionic&#160;surfactant&#160;detergent</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td>Triton X-100, for molecular biology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521</td>
			<td>Jewelers forceps, Dumont No. 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass multi-well plate</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>71563-01</td>
			<td>9 cavity Pyrex, 100x85 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PFA</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>28908</td>
			<td>Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP 229-1</td>
			<td>Glycerol (Molecular Biology)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spacers</td>
			<td>Sun Jin Lab Co</td>
			<td>IS006</td>
			<td>iSpacer, four wells, around 12 &#956;L working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Square 22x22 mm coverslips</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FIS#12-541-B</td>
			<td>No.1.5 -0.16 to 0.19mm thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Medium</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1000</td>
			<td>Vectashield Antifade Mounting Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>LSM780; objective used LD LCI Plan-Apochromat 
			25x/0,8 Imm Korr DIC M27 (oil/ 
			silicon/glycerol/water 
			immersion) (420852-9871-000)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>imaging software</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>ZEN 2011</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D-Image software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Amira 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td>https://imagej.nih.gov/ij/</td>
			<td>ImageJ/FIJI</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualize drosophila leg motor neuron axons through the adult cuticle

Størstedelen af arbejdet på specifikationen neuronal foretaget i genetisk og fysiologisk tractable modeller såsom C. elegans, Drosophila larver og fisk, som alle deltage i undulatory bevægelser (gerne kravle eller svømning) som deres primære tilstand af bevægelse. Dog en mere nuanceret forståelse af den enkelte motor neuron (MN) specifikation — i det mindste i form af informere sygdom behandlinger — kræver en lige så tractable system, der bedre modeller komplekse vedhæng-baserede locomotion ordninger af hvirveldyr. Drosophila voksen bevægeapparatet ansvaret for gåafstand opfylder alle disse kriterier med lethed, da i denne model er det muligt at studere specifikation af et lille antal let at skelne ben MNs (ca 50 MNs pr. ben) begge bruger en langt matrix af stærke værktøjer, genetiske og fysiologiske led i en ordning for vedhæng-baserede locomotion. Her beskriver vi en protokol for at visualisere ben muskler innervation i en voksen flue.

Som vist i figur 4, giver denne procedure fremragende billeddannelse af normal god landbrugspraksis-mærket axoner i voksen Drosophila ben, sammen med deres terminal Dorne. Vigtigere er er en ren normal god landbrugspraksis signal fremstillet uden nogen forurening fra fluorescens udledes af ben neglebånd. Signalet fra neglebånd kan derefter kombineres med normal god landbrugspraksis signalet til at identificere placeringen af axoner i benene (<stro...

Watch this Scientific Journal Video about Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle at JoVE.com

Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle

Visualisere Drosophila ben Motor Neuron Axons gennem voksen neglebånd

Her beskriver vi en protokol til at visualisere den cytoskeletale målretning med en fluorescerende proteiner i voksen ben af Drosophila fiksering, montering, imaging og efter imaging skridt.

The majority of work on the neuronal specification has been carried out in genetically and physiologically tractable models such as C. elegans, Drosophila ...

Denne metode kan nemt tilpasses til observation af signaler fra andre fluorescerende proteiner eller kan bruges til at afbilde axoner hos andre voksne Den største fordel ved denne teknik letter en fremragende tredimensionel rekonstruktion og visualisering af axonerne og deres terminale lystrene. Begynd med at fylde det rette antal brønde i en glas multi-brønd plade med 70% ethanol. Brug en børste til at tilføje 15 til 20 kuldioxid-bedøvet fluer af enhver alder eller køn til hver brønd og forsigtigt duppe fluerne i ethanol, indtil de er helt nedsænket.Efter højst et minut skylles fluerne tre gange med 0,3 % ikke-ionisk overfladeaktivt vaskemiddelopløsning i fosfatbufferet saltvand i mindst 10 minutter pr. vask. Efter den sidste vask anvendes vicessmus til at fjerne hoved og mave i hver flue uden at beskadige brystsegmentet eller benene, og spidsen af et par fine kraftafcesser anvendes til forsigtigt, men fast pres på coxa-thorax-krydset for at løsne det ene ben fra brystsegmentet. Placer benene i en brønd af en ny multi-brønd plade, der indeholder frisklavet 4% paraformaldehyd på is for en overnatning inkubation på fire grader Celsius.Det er vigtigt at skubbe benene forsigtigt ind i fikseringsbufferen uden at lade dem flyde for at opnå velfaste ben. Den næste dag, vaske benene fem gange i frisk 0,3% non-ionisk overfladeaktivt vaskemiddel opløsning i 20 minutter pr vask. Efter den sidste vask udskiftes vaskemidlet med monteringsmedium, og benene opbevares i monteringsmediet i mindst 24 timer.Den næste dag, tilsættes ca 20 mikroliter af 70% glycerol ved siden af den overtræbte ende af glasmikroskop dias og dække glycerol med en 22 af 22 millimeter coverslip. Dernæst tilsættes i omkring 10 mikroliter linje montering medium til højre for coverslip og anvende en anden 30 microliter linje montering medium til højre for 10 mikroliter linje. Brug fine fakbånd, overføre det ene ben fra multi-godt plade i en dråbe medium til de 10 mikroliter strimmel af montering medium i en ekstern side op eller ned orientering.Gentag indtil seks til otte ben er blevet monteret og justeret og placere en anden coverslip over benene, således at den anden coverslip hviler lidt på den første coverslip. Brug derefter neglelak i hvert hjørne af dækslerne for at fastgøre dem på plads. For at afbilde benene skal du bruge 488 nanometerlaseren og to detektorer samtidigt til at oprette det første spor for at opnå både GFP og neglebånds auto fluorescens.Vælg en målsætning for 20 til 25 X olienedsænkning, og indstil opløsningen til 1024 gange 1024 pixel med en 12-bit dybde, og indstil z-afstanden til et mikrometer. Indlæs diaset på mikroskopstadiet og brug den samme lasereffekt til begge detektorer, juster forstærkningen af den første detektor for at opnå et lyst GFP-signal og juster den anden detektor for at sikre, at nogle områder med et højt neglebåndssignal giver et mættet signal i denne detektor. Derefter billede benene ved hjælp af flise eller position muligheder for at fange hele benet, hvis et ben er udvidet eller for stor til at blive afbildet i en enkelt ramme.Til billedbehandling skal du åbne den konfokale stak i ImageJ Fiji og bruge Bio-Formater-plugin'et til at åbne billeder, der ikke er i TIFF-format. Hvis du vil opdele kanalerne, skal du vælge Billedkanaler, Farve og Opdel kanaler. Hvis du vil trække neglebåndssignalet fra GFP-signalet, skal du åbne Proces- og billedberegner og vælge stakken fra detektor en som billede.I operationsvinduet skal du vælge trække og vælge sporet fra detektor to som billede to, så kun det endogene GFP-signal opnås. Brug Billede, stakke, Z Protect til at generere max intensitetsprojektion for det endogene GFP-signal. Brug kontrolelementerne i vinduet lysstyrkekontrol til at justere lysstyrken og kontrasten.Generer derefter en gennemsnitlig intensitet for neglebånd, efterfulgt af Billed, Farve og Flet kanaler for at fusionere GFP-stakken tilbage med den neglebåndsstak, der er anskaffet fra detektor to. Dette vil resultere i et RGB-billede, der består af det vævsspecifikke GFP-signal samt neglebåndssignalet for at hjælpe med at identificere axon arbors inden for bensegmenterne. Hvis du vil bruge makroen, skal du åbne den konfokale stak og klikke på Billede, Juster og Lysstyrke/Kontrast.Klik derefter på Plugin og Makrokørsel for at afspille makroen og følge vejledningen. Når du bliver bedt om at angive handlingen i billedberegnervinduet, skal du vælge billede et som stak et. Vælg træk i operationsvinduet.Vælg billede to som stak to. Når du bliver bedt om at justere kontrasten, skal du bruge kontrolelementerne i vinduet med lysstyrkekontrol til at justere lysstyrkekontrasten i det maksimale projektionsbillede af GFP og af den gennemsnitlige projektion af neglebåndet for at generere et FGB-flettet billede af begge signaler, der viser GFP'en med grønt og neglebånd i gråt. Flet derefter resultaterne af stak en og stak to for at generere en kombineret GFP og neglebåndsstak, der kan bruges i næste fase.Hvis du vil visualisere benene i tre dimensioner, skal du åbne RGB-stakken i et passende 3D-program. I popup-dialogvinduet skal du vælge alle kanalerne i modekonverteringssektionen og indtaste størrelsen på en voxel, der er hentet fra den tidligere analyse. Højreklik på det modul i kanal et modul, og vælg Vis og Volren.Derefter venstre klik på Volren modulet. Venstre klik på Avanceret i sektionen Egenskaber, og vælg DDR. Juster derefter gammaværdien for at se neglebåndsbaggrunden.Højreklik på kanal to-modulet, og vælg Vis Volren. Derefter venstre klik på Volren modul, Rediger og vælg volrenGreen.col. Ved hjælp af denne fremgangsmåde kan signalet fra neglebåndet kombineres med GFP-signalet for at identificere placeringen af axonerne i benene.Det er afgørende vigtigt at opnå velfaste ben. I korrekt faste ben er de indvendige strukturer i benene af en ensartet farve, og luftrøret, som er mørke, er synlige. I dårligt faste ben er mørkt materiale til stede i tarsus og skinneben, og luftrørssystemet er ikke klart synligt i lårbenet og coxa.Den procedure, vi beskrev her overvinder udfordringen med at opdage fluorescerende udtryk i motor neuron axoner gennem en tyk og auto fluorescerende neglebånd med høj opløsning. Så den rene og detaljerede fluorescerende signal opnået giver os mulighed for at visualisere og kvantisere de tre-dimensionelle træk ved axon arbors ved hjælp af 3D-billeddannelse programmer. Så denne teknik vil give os mulighed for at bruge voksne Drosophila som model ikke kun at studere udviklingen af motor neuron, men også at studere, at forstå virkningen af degenerative sygdomme som ERAS på det locomotor system integreret.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Levende-billeddannelse af<em&gt; Drosophila</em&gt; Puppe Eye

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Mechanism of Regulation of Adipocyte Numbers in Adult Organisms Through Differentiation and Apoptosis Homeostasis

Mekanisme af forordning af fedtcellerne Tal i voksne organismer Gennem Differentiering og Apoptose Homeostase

Considering that adipose tissue (AT) is an endocrine organ, it can influence whole body metabolism. Excessive energy storage leads to the dysregulation of ...

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Metoder til at undersøge lymfeknuder kirtel og hæmocytter i<em&gt; Drosophila</em&gt; Larver

Many parallels exist between the Drosophila and mammalian hematopoietic systems, even though Drosophila lack the lymphoid lineage that characterize ...

Biosensing Motor Neuron Membrane Potential in Live Zebrafish Embryos

Biosensing Motor Neuron Membran Potential i Live Zebrafish Embryoer

The protocols described here are designed to allow researchers to study cell communication without altering the integrity of the environment in which the ...

Generation of Genetically Modified Mice through the Microinjection of Oocytes

Generering af genetisk modificerede mus gennem mikroinjektion af oocytter

The use of genetically modified mice has significantly contributed to studies on both physiological and pathological in vivo processes. The pronuclear ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissektion og immunfluorescent farvning af champignon krop og fotoreceptor neuroner i voksen Drosophila melanogaster hjerner

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

Optøning, dyrkning og Cryopreserving Drosophila cellelinjer

There are currently over 160 distinct Drosophila cell lines distributed by the Drosophila Genomics Resource Center (DGRC). With genome engineering, the ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

En direkte og enkel metode til at vurdere Drosophila melanogasterslevedygtighed fra embryo til voksen

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

Isolering af specifikke neuron populationer fra rundorm Caenorhabditis elegans

During the aging process, many cells accumulate high levels of damage leading to cellular dysfunction, which underlies many geriatric and pathological ...

Retrograde Tracing of Drosophila Embryonic Motor Neurons Using Lipophilic Fluorescent Dyes

Retrograde Tracing of Drosophila Embryonic Motor Neurons Using Lipophilic Fluorescent Dyes

Retrograde sporing af Drosophila embryonale motoriske neuroner ved hjælp af lipofile fluorescerende farvestoffer

We describe a technique for retrograde labeling of motor neurons in Drosophila. We use an oil-dissolved lipophilic dye and deliver a small droplet to an ...