Name: visualize drosophila leg motor neuron axons through the adult cuticle
Uploaded: 2018-10-30T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle at JoVE.com

We bedanken Robert Renard voor het opstellen van vliegen voedsel medium. Dit werk werd ondersteund door een NIH-subsidie NS070644 voor R.S.M. en financiering uit ALS vereniging (#256), FRM (#AJE20170537445) en ATIP-Avenir programma aan J.E.

1. been dissectie en fixatie
<ol><li>Neem een multi goed glasplaat en vul de juiste aantal putjes met 70% ethanol. Toevoegen van 15 – 20 CO2-narcose vliegen (van hetzij geslacht en elke leeftijd) aan elk goed en met behulp van een penseel, zachtjes schar de vliegen in de ethanol oplossing tot vliegen zijn volledig ondergedompeld. Opmerking: Deze stap is het verwijderen van de hydrophobicity van de cuticle bestaat. Niet wassen voor meer dan 1 min, want dit auto-fluorescentie van de cuticle bestaat verhoo...

<ol>
	<li>Miller, A., Demerec, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+internal+anatomy+and+histology+of+the+imago+of+Drosophila+melanogaster.">The internal anatomy and histology of the imago of Drosophila melanogaster.</a> Biology of Drosophila. , 420-531 (1950).</li><li>Soler, C., Ladddada, L., Jagla, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+development+of+muscles+and+tendons+of+the+Drosophila+leg.">Coordinated development of muscles and tendons of the Drosophila leg.</a> Development. 131 (24), 6041-6051 (2004).</li><li>Baek, M., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+and+Birth+Date+Specify+Motor+Neuron+Targeting+and+Dendritic+Architecture+in+adult+Drosophila.">Lineage and Birth Date Specify Motor Neuron Targeting and Dendritic Architecture in adult Drosophila.</a> Journal of Neuroscience. 29 (21), 6904-6916 (2009).</li><li>Brierley, D. J., Rathore, K., VijayRaghavan, K., Williams, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+origins+and+architecture+of+Drosophila+leg+motoneurons.">Developmental origins and architecture of Drosophila leg motoneurons.</a> Journal of Comparative Neurology. 520 (8), 1629-1649 (2012).</li><li>Enriquez, J., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specification+of+Individual+Adult+Motor+Neuron+Morphologies+by+Combinatorial+Transcription+Factor+Codes.">Specification of Individual Adult Motor Neuron Morphologies by Combinatorial Transcription Factor Codes.</a> Neuron. 86 (4), 955-970 (2015).</li><li>Mahr, A., Aberle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+pattern+of+the+Drosophila+vesicular+glutamate+transporter:+a+marker+protein+for+motoneurons+and+glutamatergic+centers+in+the+brain.">The expression pattern of the Drosophila vesicular glutamate transporter: a marker protein for motoneurons and glutamatergic centers in the brain.</a> Gene Expression Patterns. 6 (3), 299-309 (2006).</li><li>Lee, T., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+analysis+with+a+repressible+cell+marker+(MARCM)+for+Drosophila+neural+development.">Mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) for Drosophila neural development.</a> Trends in Neuroscience. 24 (5), 251-254 (2001).</li><li>Enriquez, J., Rio, L. Q., Blazeski, R., Bellemin, S., Godement, P., Mason, C. A., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differing+Strategies+Despite+Shared+Lineages+of+Motor+Neurons+and+Glia+to+Achieve+Robust+Development+of+an+Adult+Neuropil+in+Drosophila.">Differing Strategies Despite Shared Lineages of Motor Neurons and Glia to Achieve Robust Development of an Adult Neuropil in Drosophila.</a> Neuron. 97 (3), 538-554 (2018).</li><li>Preibisch, S., Saalfeld, S., Tomancak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Globally+optimal+stitching+of+tiled+3D+microscopic+image+acquisitions.">Globally optimal stitching of tiled 3D microscopic image acquisitions.</a> Bioinformatics. 25 (11), 1463-1465 (2009).</li><li>Brierley, D. J., Blanc, E., Reddy, O. V., Vijayraghavan, K., Williams, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+targeting+in+the+leg+neuropil+of+Drosophila:+the+role+of+midline+signalling+molecules+in+generating+a+myotopic+map.">Dendritic targeting in the leg neuropil of Drosophila: the role of midline signalling molecules in generating a myotopic map.</a> PLoS Biology. 7 (9), e1000199 (2009).</li></ol>

De schubbenlaag van volwassen Drosophila en andere geleedpotigen, waarin vele donkere pigmenten, is een groot obstakel voor het bekijken van de structuren in hun lichaam. Het is bovendien sterk auto TL, die wordt verergerd door fixatie. Deze twee functies zijn zeer problematisch voor waarnemingen van fluorescente kleurstoffen of moleculen in het lichaam van dieren met een exoskelet.
De procedure die we hebben beschreven en die we regelmatig gebruiken in het lab levert schoon en gedetailleerde ...

Zoals de gewervelde ledematen, is de Drosophila volwassen poot onderverdeeld in segmenten. Elk vliegen been bevat 14 spieren, die bestaat uit meerdere spiervezels1,2. De organen van de cel van de volwassen been MNs bevinden zich in de T1 (prothoracic), (mesothoracic) T2 en T3 (metathoracic) ganglia aan elke kant van het ventrale zenuw snoer (VNC), een structurele analoog aan het gewervelde ruggenmerg (Figuur 1). Er zijn ongeveer 50 MNs in elke ganglia, welk doel spieren in vier segmenten van de ipsilaterale poot (coxa, trochanter, femur en tibia) (Figuur 1)3. Nog belangrijker is, heeft elke individuele volwassen been MN een unieke morfologische identiteit die is zeer stereotiep tussen dieren3,4. Alle deze unieke MNs zijn afgeleid van de 11 cellen van de stam, genaamd neuroblasten (NBs) been MNs produceren tijdens de larvale stadia3,4. Aan het einde van de larvale stadia van alle onderscheiden de onrijpe postmitotic MNs tijdens de metamorfose hun specifieke dendritische arbors en axonale terminal doelen die bepalen van hun unieke morfologie3,4te verwerven. Eerder testten we de hypothese dat een combinatorische code van transcriptiefactoren (TFs) Hiermee geeft u de unieke morfologie van elk Drosophila volwassen been MN5. Als een model, we gebruikten lineage B, één van de 11 NB lineages die zeven van de MNs produceert en aangetoond dat een combinatorische code van TFs uitgedrukt in postmitotic volwassen been MNs dicteert hun individuele morphologies. Door reprograming van de code van de TF van MNs is ons gelukt om over te schakelen van MN morphologies op een voorspelbare wijze. We noemen deze TFs: MTF's (morfologische TFs)5.
Een van de meest uitdagende onderdelen van de morfologische analyses van volwassen MNs is het visualiseren van de axonen door middel van een dikke en auto-belichting fluorescerende schubbenlaag met hoge resolutie. We meestal label axonen met een membraan-gelabeld GFP die wordt uitgedrukt in MNs met een binaire expressie systemen, zoals DVglut-Gal4/UAS-mCD8::GFP of DVglut-QF / QUAS mCD8::GFP, waar DVglut is een sterke driver uitgedrukt in motoneurons6. Door deze hulpmiddelen te combineren met andere klonen technieken zoals mozaïek analyse met een repressible marker (MARCM)7, cis-MARCM8of MARCMbow5, kunnen we de expressie GFP subpopulaties van MNs maken de fenotypische analyse beperken van axonen gemakkelijker. We hebben een protocol gegenereerd zodat been MN axonale morfologie intact voor beeldvorming en de daaropvolgende 3D reconstructie door het aanpakken van specifieke problemen inherent is aan de volwassen Drosophila been zoals (1) fixatie van de interne structuren van de volwassen poot zonder axon morfologie, endogene fluorescerende expressie, en been spieren, (2) montage van de poot voor het behoud van de algehele structuur onder een dekglaasje aan en in de juiste richting voor beeldvorming, en (3) beeldverwerking te verkrijgen van de epidermis achtergrond evenals axonale fluorescent signaal. Terwijl dit protocol heeft voor het opsporen van fluorescerende expressie in MN axonen zijn gedetailleerd, kan het worden toegepast om te visualiseren van andere onderdelen van been neuromusculature bij geleedpotigen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>E/6550DF/17</td>
			<td>Absolute analytical reagent grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nonionic&#160;surfactant&#160;detergent</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td>Triton X-100, for molecular biology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521</td>
			<td>Jewelers forceps, Dumont No. 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass multi-well plate</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>71563-01</td>
			<td>9 cavity Pyrex, 100x85 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PFA</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>28908</td>
			<td>Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP 229-1</td>
			<td>Glycerol (Molecular Biology)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spacers</td>
			<td>Sun Jin Lab Co</td>
			<td>IS006</td>
			<td>iSpacer, four wells, around 12 &#956;L working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Square 22x22 mm coverslips</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FIS#12-541-B</td>
			<td>No.1.5 -0.16 to 0.19mm thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Medium</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1000</td>
			<td>Vectashield Antifade Mounting Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>LSM780; objective used LD LCI Plan-Apochromat 
			25x/0,8 Imm Korr DIC M27 (oil/ 
			silicon/glycerol/water 
			immersion) (420852-9871-000)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>imaging software</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>ZEN 2011</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D-Image software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Amira 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td>https://imagej.nih.gov/ij/</td>
			<td>ImageJ/FIJI</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualize drosophila leg motor neuron axons through the adult cuticle

Het merendeel van de werkzaamheden op de neuronale specificatie is in genetisch en fysiologisch hanteerbare modellen zoals Cuitgevoerd. elegans Drosophila larven en vis, die alle golvend bewegingen (zoals kruipen of zwemmen) deelnemen als hun primaire wijze van voortbewegen. Echter een meer verfijnd begrip van de individuele motor neuron (MN) specificatie — ten minste op het gebied van de voorlichting van ziekte therapieën — vraagt om een even hanteerbare systeem dat beter de motoriek van complexe aanhangsel gebaseerde regelingen van modellen gewervelde dieren. Het volwassen Drosophila bewegingsstelsel belast met wandelen voldoet aan al deze criteria met gemak, aangezien in dit model is het mogelijk om te bestuderen van de specificatie van een klein aantal gemakkelijk DN been MNs (ongeveer 50 MNs per poot) beide met behulp van een enorme matrix van krachtige genetische hulpmiddelen, en in de fysiologische context van een aanhangsel gebaseerde locomotion-regeling. Hier beschrijven we een protocol om te visualiseren het been spier innervatie arm in een volwassen vlieg.

Zoals blijkt uit Figuur 4, kunnen deze procedure uitstekende beeldvorming van GFP-geëtiketteerden axonen in volwassen Drosophila benen, samen met hun terminal arbors. Nog belangrijker is wordt een schone GFP-signaal verkregen zonder elke besmetting van de fluorescentie die wordt uitgestraald door de cuticle been. Het signaal van de cuticle kan dan worden gecombineerd met het GFP-signaal om te identificeren de positie van axonen in de benen (<strong ...

Watch this Scientific Journal Video about Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle at JoVE.com

Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle

Visualiseren van Drosophila been Motor Neuron axonen via de volwassen cuticula

Hier beschrijven we een protocol om te visualiseren de axonale richt met een TL proteïne in volwassen benen van Drosophila door fixatie, montage, imaging en na imaging stappen.

The majority of work on the neuronal specification has been carried out in genetically and physiologically tractable models such as C. elegans, Drosophila ...

Deze methode kan gemakkelijk worden aangepast voor het observeren van signalen van andere fluorescerende eiwitten of kan worden gebruikt om axonen beeld in andere volwassene Het belangrijkste voordeel van deze techniek te vergemakkelijken een uitstekende driedimensionale reconstructie en visualisatie van de axonen en hun terminale prieeltjes. Begin met het vullen van het juiste aantal putten in een glazen multi-well plaat met 70% ethanol. Gebruik een borstel om 15 tot 20 koolstofdioxide-verdoofde vliegen van elke leeftijd of geslacht toe te voegen aan elke put en zachtjes deppen van de vliegen in de ethanol totdat ze volledig zijn ondergedompeld.Na niet meer dan een minuut, spoel de vliegen drie keer met 0,3% niet-ionische oppervlakteactieve wasmiddel oplossing in fosfaat-gebufferde zoutoplossing gedurende ten minste 10 minuten per wasbeurt. Gebruik na de laatste wasbeurt tangen om het hoofd en de buik van elke vlieg te verwijderen zonder het thoracale segment of de benen te beschadigen en gebruik het puntje van een paar fijne tangen om voorzichtig maar stevig druk uit te oefenen op de coxa-thoraxverbinding om één been los te maken van het thoracale segment. Plaats de poten in een put van een nieuwe multi-well plaat met vers bereide 4%paraformaldehyde op ijs voor een nachtelijke incubatie bij vier graden Celsius.Het is belangrijk om de benen zachtjes in de fixatiebuffer te duwen zonder ze te laten zweven om goed vaste benen te verkrijgen. De volgende dag, was de benen vijf keer in verse 0,3% niet-ionische oppervlakteactieve wasmiddel oplossing voor 20 minuten per wasbeurt. Vervang na de laatste wasbeurt het wasmiddel door montagemedium en houd de poten minstens 24 uur in het montagemedium.Voeg de volgende dag ongeveer 20 microliter van 70%glycerol toe naast het gecoate uiteinde van de glazen microscoopdia en bedek de glycerol met een afdekking van 22 bij 22 millimeter. Voeg vervolgens ongeveer 10 microliter lijn van montage medium aan de rechterkant van de coverslip en breng een tweede 30 microliter lijn van montage medium aan de rechterkant van de 10 microliter lijn. Breng met behulp van fijne tangen één been van de multi-well plaat over in een druppel medium naar de 10 microliter strip van montagemedium in een externe zijwaartse richting.Herhaal tot zes tot acht poten zijn gemonteerd en uitgelijnd en plaats een tweede coverslip over de benen zodanig dat de tweede coverslip rust iets op de eerste coverslip. Gebruik vervolgens nagellak op elke hoek van de coverslips om ze op zijn plaats te beveiligen. Om de benen in beeld te brengen, gebruikt u de 488 nanometer laser en twee detectoren tegelijkertijd om het eerste spoor op te zetten voor het verkrijgen van zowel de GFP en cuticula auto fluorescentie.Selecteer een doelstelling voor 20 tot 25x olieonderdompeling en stel de resolutie in op 1024 bij 1024 pixels met een diepte van 12 bits en stel de z-afstand in op één micrometer. Laad de schuif op het microscoopstadium en gebruik dezelfde laserkracht voor beide detectoren, pas de versterking van de eerste detector aan om een helder GFP-signaal te verkrijgen en pas de tweede detector aan om ervoor te zorgen dat sommige gebieden met een hoog cuticulasignaal een verzadigd signaal in deze detector produceren. Vervolgens afbeelding van de benen met behulp van de tegel of positie opties om het hele been vast te leggen als een been is uitgebreid of te groot om te worden afgebeeld in een enkel frame.Open voor beeldverwerking de confocale stack in ImageJ Fiji en gebruik de plug-in Bio-Formats om afbeeldingen te openen die niet in TIFF-formaat zijn. Als u de kanalen wilt splitsen, selecteert u Afbeeldings-, Kleur- en Gesplitste kanalen. Als u het cuticulasignaal van het GFP-signaal wilt aftrekken, opent u Proces- en Image Calculator en selecteert u de stapel van detector één als afbeelding.Selecteer in het bewerkingsvenster de track af en selecteer het spoor van detector twee als afbeelding twee, zodat alleen het endogene GFP-signaal wordt verkregen. Gebruik Image, Stacks, Z Protect om maximale intensiteitsprojectie te genereren voor het endogene GFP-signaal. Gebruik de besturingselementen in het helderheidsbesturingselementvenster om de helderheid en het contrast aan te passen.Genereer vervolgens een gemiddelde intensiteit voor de cuticula, gevolgd door beeld-, kleur- en samenvoegkanalen om de GFP-stack weer samen te voegen met de cuticula-stack die is verkregen van detector twee. Dit zal resulteren in een RGB-afbeelding die bestaat uit het weefselspecifieke GFP-signaal en het cuticulasignaal om de axon-prieeltjes binnen de beensegmenten te identificeren. Als u de macro wilt gebruiken, opent u de confocale stapel en klikt u op Afbeelding, Aanpassen en Helderheid/contrast.Klik vervolgens op Plug-in en macrorun om de macro uit te voeren en de instructies op te volgen. Wanneer u wordt gevraagd de bewerking op te geven in het venster afbeeldingscalculator, selecteert u afbeelding één als stapel. Selecteer aftrekken in het bewerkingsvenster.Selecteer afbeelding twee als stapel twee. Wanneer u wordt gevraagd het contrast aan te passen, gebruikt u de besturingselementen in het venster voor helderheidscontrole om het helderheidscontrast van het maximale projectiebeeld van GFP en van de gemiddelde projectie van de cuticula aan te passen om een rgb-samengevoegd beeld van beide signalen met de GFP in het groen en de cuticula in grijs te genereren. Voeg vervolgens de resultaten van stapel één samen en stapel twee om een gecombineerde GFP- en cuticulastapel te genereren die in de volgende fase kan worden gebruikt.Open de RGB-stack in een geschikt 3D-softwareprogramma om de poten in drie dimensies te visualiseren. Selecteer in het pop-updialoogvenster alle kanalen in de sectie modusconversie en voer de grootte in van een voxel die is verkregen uit de vorige analyse. Klik in kanaal één module met de rechtermuisknop en selecteer Weergave en Volren.Klik vervolgens links op de Volren module. Klik in de sectie Eigenschappen op Geavanceerd en selecteer DDR. Pas vervolgens de gammawaarde aan om de cuticula-achtergrond te zien.Klik in de module kanaal twee met de rechtermuisknop en selecteer Volren weergeven. Klik vervolgens links op de Volren module, Bewerken en selecteer volrenGreen.col. Met behulp van deze procedure kan het signaal van de cuticula worden gecombineerd met het GFP-signaal om de positionering van de axonen in de benen te identificeren.Het is van cruciaal belang om goed vaste benen te verkrijgen. In goed vaste poten zijn de interne structuren in de benen van een uniforme kleur en zijn de tracheas, die donker zijn, zichtbaar. In slecht vaste benen is donker materiaal aanwezig in het tarsus en scheenbeen en is het tracheale systeem niet duidelijk zichtbaar in het dijbeen en coxa.De procedure die we hier beschreven overwint de uitdaging van het detecteren van fluorescerende expressie in motorneuron axonen door middel van een dikke en automatische fluorescerende nagelriem met hoge resolutie. Dus het schone en gedetailleerde fluorescerende signaal dat ons verkregen heeft, stelt ons in staat om het driedimensionale kenmerk van de axon-prieel arbors te visualiseren en te kwantificeren met behulp van 3D-beeldvormingsprogramma's. Dus deze techniek zal ons in staat stellen om volwassen Drosophila te gebruiken als een model, niet alleen om de ontwikkeling van motorneuron te bestuderen, maar ook om te bestuderen, om de impact van degeneratieve ziekte zoals WIS op het geïntegreerde bewegingsapparaat te begrijpen.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-beeldvorming van de<em&gt; Drosophila</em&gt; Pupal Eye

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Mechanism of Regulation of Adipocyte Numbers in Adult Organisms Through Differentiation and Apoptosis Homeostasis

Mechanisme van de verordening van Adipocyte Numbers in volwassen organismen door differentiatie en apoptose Homeostasis

Considering that adipose tissue (AT) is an endocrine organ, it can influence whole body metabolism. Excessive energy storage leads to the dysregulation of ...

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Methoden om Onderzoek de lymfeklier en Hemocytes in<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven

Many parallels exist between the Drosophila and mammalian hematopoietic systems, even though Drosophila lack the lymphoid lineage that characterize ...

Biosensing Motor Neuron Membrane Potential in Live Zebrafish Embryos

Biosensing Motor Neuron Membraan Potentieel in Live Zebrafish Embryo&#39;s

The protocols described here are designed to allow researchers to study cell communication without altering the integrity of the environment in which the ...

Generation of Genetically Modified Mice through the Microinjection of Oocytes

Generatie van genetisch gemodificeerde muizen via de microinjectie van oocyten

The use of genetically modified mice has significantly contributed to studies on both physiological and pathological in vivo processes. The pronuclear ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissectie en immunefluorescentie kleuring van Mushroom lichaam en fotoreceptor neuronen in de hersenen van de volwassen Drosophila melanogaster

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

Ontdooien, kweken en Cryopreserving van Drosophila cellijnen

There are currently over 160 distinct Drosophila cell lines distributed by the Drosophila Genomics Resource Center (DGRC). With genome engineering, the ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

Een directe en eenvoudige methode om de levensvatbaarheid van Drosophila melanogasterte beoordelen van embryo tot volwassene

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

Isolatie van specifieke neuron populaties van Roundworm Caenorhabditis elegans

During the aging process, many cells accumulate high levels of damage leading to cellular dysfunction, which underlies many geriatric and pathological ...

Retrograde Tracing of Drosophila Embryonic Motor Neurons Using Lipophilic Fluorescent Dyes

Retrograde Tracing of Drosophila Embryonic Motor Neurons Using Lipophilic Fluorescent Dyes

Retrograde tracing van Drosophila embryonale motor neuronen met behulp van lipofiele fluorescerende kleurstoffen

We describe a technique for retrograde labeling of motor neurons in Drosophila. We use an oil-dissolved lipophilic dye and deliver a small droplet to an ...