Name: visualize drosophila leg motor neuron axons through the adult cuticle
Uploaded: 2018-10-30T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle at JoVE.com

אנו מודים רוברט רנארד על הכנת אוכל לטוס בינוני. עבודה זו היה נתמך על ידי מענק NIH NS070644 כדי R.S.M., במימון עמותת ALS (#256), עקרות (#AJE20170537445), ATIP-Avenir תוכנית כדי במקום

1. ניתוח של קיבוע רגל
<ol><li>לקחת צלחת זכוכית רב טוב מילוי מספר מתאים של וולס עם 70% אתנול. להוסיף 15 – 20 CO2-מרדימים זבובים (של סקס, בכל גיל) לכל אחד טוב ואני באמצעות מברשת, בעדינות כי אמחה קלות את הזבובים בתוך תמיסת אתנול עד זבובים מלא טובע. הערה: השלב זה כדי להסיר את hydrophobicity של הקוטיקולה. אנ...

<ol>
	<li>Miller, A., Demerec, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+internal+anatomy+and+histology+of+the+imago+of+Drosophila+melanogaster.">The internal anatomy and histology of the imago of Drosophila melanogaster.</a> Biology of Drosophila. , 420-531 (1950).</li><li>Soler, C., Ladddada, L., Jagla, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+development+of+muscles+and+tendons+of+the+Drosophila+leg.">Coordinated development of muscles and tendons of the Drosophila leg.</a> Development. 131 (24), 6041-6051 (2004).</li><li>Baek, M., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+and+Birth+Date+Specify+Motor+Neuron+Targeting+and+Dendritic+Architecture+in+adult+Drosophila.">Lineage and Birth Date Specify Motor Neuron Targeting and Dendritic Architecture in adult Drosophila.</a> Journal of Neuroscience. 29 (21), 6904-6916 (2009).</li><li>Brierley, D. J., Rathore, K., VijayRaghavan, K., Williams, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+origins+and+architecture+of+Drosophila+leg+motoneurons.">Developmental origins and architecture of Drosophila leg motoneurons.</a> Journal of Comparative Neurology. 520 (8), 1629-1649 (2012).</li><li>Enriquez, J., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specification+of+Individual+Adult+Motor+Neuron+Morphologies+by+Combinatorial+Transcription+Factor+Codes.">Specification of Individual Adult Motor Neuron Morphologies by Combinatorial Transcription Factor Codes.</a> Neuron. 86 (4), 955-970 (2015).</li><li>Mahr, A., Aberle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+pattern+of+the+Drosophila+vesicular+glutamate+transporter:+a+marker+protein+for+motoneurons+and+glutamatergic+centers+in+the+brain.">The expression pattern of the Drosophila vesicular glutamate transporter: a marker protein for motoneurons and glutamatergic centers in the brain.</a> Gene Expression Patterns. 6 (3), 299-309 (2006).</li><li>Lee, T., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+analysis+with+a+repressible+cell+marker+(MARCM)+for+Drosophila+neural+development.">Mosaic analysis with a repressible cell marker (MARCM) for Drosophila neural development.</a> Trends in Neuroscience. 24 (5), 251-254 (2001).</li><li>Enriquez, J., Rio, L. Q., Blazeski, R., Bellemin, S., Godement, P., Mason, C. A., Mann, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differing+Strategies+Despite+Shared+Lineages+of+Motor+Neurons+and+Glia+to+Achieve+Robust+Development+of+an+Adult+Neuropil+in+Drosophila.">Differing Strategies Despite Shared Lineages of Motor Neurons and Glia to Achieve Robust Development of an Adult Neuropil in Drosophila.</a> Neuron. 97 (3), 538-554 (2018).</li><li>Preibisch, S., Saalfeld, S., Tomancak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Globally+optimal+stitching+of+tiled+3D+microscopic+image+acquisitions.">Globally optimal stitching of tiled 3D microscopic image acquisitions.</a> Bioinformatics. 25 (11), 1463-1465 (2009).</li><li>Brierley, D. J., Blanc, E., Reddy, O. V., Vijayraghavan, K., Williams, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+targeting+in+the+leg+neuropil+of+Drosophila:+the+role+of+midline+signalling+molecules+in+generating+a+myotopic+map.">Dendritic targeting in the leg neuropil of Drosophila: the role of midline signalling molecules in generating a myotopic map.</a> PLoS Biology. 7 (9), e1000199 (2009).</li></ol>

הקוטיקולה של דרוזופילה למבוגרים, של פרוקי רגליים אחרים, אשר מכיל פיגמנטים כהים רבים, זו היא מכשול גדול לצפייה מבנים בתוך הגוף שלהם. בנוסף, מומלץ מאוד פלורסנט אוטומטי אשר נעשה גרוע יותר על ידי קיבוע. שתי תכונות אלה הן בעייתי מאוד עבור תצפיות של צבעי פלורסנט או מולקולות בתוך הגוף של בעלי שלד ח...

כמו האיבר חוליות, הרגל למבוגרים דרוזופילה מאורגן למקטעים. כל רגל לטוס מכיל 14 השרירים, שכל אחת מהן כוללת סיבי שריר מספר1,2. הגופים תא של הרגל למבוגרים MNs ממוקמים ב (prothoracic) T1, T2 (mesothoracic), ו T3 הגרעינים (metathoracic) בכל צד של חוט עצבי הגחון (VNC), הנדסי מקביל חוליות חוט השדרה (איור 1). ישנם כ- 50 MNs כל הגרעינים, היעד שבו השרירים ארבעה חלקים של הרגל חולשת (coxa תל הירך, עצם הירך, שוקה) (איור 1)3. חשוב, כל רגל מבוגרים בודדים MN יש זהות מורפולוגי ייחודי זה מאוד סטריאוטיפית בין בעלי חיים3,4. כל MNs ייחודיים אלה נגזרים מתאי גזע 11, שנקרא neuroblasts (שהודיעו) בהפקת הרגל MNs במהלך ה3,דרגות זחל4. בסוף כל הזחל MNs postmitotic ילדותי להבדיל במהלך המטמורפוזה לרכוש שלהם ובשבילים דנדריטים ספציפיות ויעדים עצב מסוף המגדירים שלהם3,ייחודי מורפולוגיה4. קודם לכן בדקנו את ההשערה כי קוד קומבינטורית של גורמי שעתוק (TFs) מציינת המבנה הייחודי של כל רגל למבוגרים דרוזופילה MN5. כמודל, השתמשנו השושלת B, לאחד שושלות NB 11, אשר מייצרת שבעה מתוך MNs והפגינו קוד קומבינטורית של TFs הביע ברגל למבוגרים postmitotic MNs מכתיבה מורפולוגיות בודדים שלהם. על ידי reprograming את הקוד TF של MNs היינו מסוגלים להחליף MN מורפולוגיות באופן צפוי. אנחנו קוראים להם שר: mTFs (TFs מורפולוגי)5.
אחד החלקים המאתגרים ביותר של המורפולוגיים של MNs למבוגרים הוא להמחיש את האקסונים דרך הקוטיקולה עבה, auto-פלורסנט עם רזולוציה גבוהה. בדרך כלל מתייגים אקסונים עם GFP מתויג ממברנה מתבטאת MNs עם מערכת בינארית הביטוי, כגון DVglut-Gal4/UAS-mCD8::GFP או DVglut-העל / QUAS mCD8::GFP, כאשר DVglut הוא נהג חזק לידי motoneurons6. על ידי שילוב של כלים אלה עם טכניקות טיפול נוספות המשובטים פסיפס ניתוח עם סמן repressible (MARCM)7, cis-MARCM8או MARCMbow5, אנחנו ניתן להגביל את הביטוי GFP כדי subpopulations של MNs ביצוע הניתוח פנוטיפי של אקסונים קל יותר. יש לנו שנוצר פרוטוקול על מנת לשמור על הרגל מורפולוגיה עצב MN ללא פגע עבור שחזור 3D הדמיה ובעקבות שתתייחסי לנושאים ספציפיים מהותי הרגל דרוזופילה למבוגרים כגון קיבוע (1) של המבנים הפנימיים של הרגל למבוגרים מבלי להשפיע על מורפולוגיה האקסון ביטוי פלורסנט אנדוגני, לשריר הרגל, (2) הרכבה של הרגל כדי לשמר את המבנה הכללי תחת של coverslip, את הכיוון המתאים לעיבוד כדי להשיג את הקוטיקולה תמונה הדמיה, ו- (3) ברקע, כמו גם עצב אות ניאון. אמנם יש כבר מפורט פרוטוקול זה איתור פלורסנט ביטוי MN אקסונים, ניתן להחיל אותה לדמיין רכיבים אחרים של הרגל neuromusculature של פרוקי רגליים.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>E/6550DF/17</td>
			<td>Absolute analytical reagent grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nonionic&#160;surfactant&#160;detergent</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td>Triton X-100, for molecular biology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521</td>
			<td>Jewelers forceps, Dumont No. 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass multi-well plate</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>71563-01</td>
			<td>9 cavity Pyrex, 100x85 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PFA</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>28908</td>
			<td>Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP 229-1</td>
			<td>Glycerol (Molecular Biology)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spacers</td>
			<td>Sun Jin Lab Co</td>
			<td>IS006</td>
			<td>iSpacer, four wells, around 12 &#956;L working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Square 22x22 mm coverslips</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FIS#12-541-B</td>
			<td>No.1.5 -0.16 to 0.19mm thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Medium</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1000</td>
			<td>Vectashield Antifade Mounting Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>LSM780; objective used LD LCI Plan-Apochromat 
			25x/0,8 Imm Korr DIC M27 (oil/ 
			silicon/glycerol/water 
			immersion) (420852-9871-000)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>imaging software</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>ZEN 2011</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D-Image software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Amira 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td>https://imagej.nih.gov/ij/</td>
			<td>ImageJ/FIJI</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualize drosophila leg motor neuron axons through the adult cuticle

רוב העבודה על המפרט עצביים התבצע במודלים גנטית, מבחינה פיזיולוגית צייתן כמו C. elegans דרוזופילה הזחלים, דגים, אשר כולם עוסקים תנועות undulatory (כמו זחילה או שחייה) כמצב העיקרי שלהם ומכניקה. עם זאת, יותר מתוחכם הבנה של מפרט נוירון מוטורי הפרט (MN) — לפחות מבחינת להודיע טיפולים למחלות — דורש מערכת לא פחות צייתן יותר מודלים מורכבים מבוססי גפה ומכניקה של סכמות חולייתנים. למבוגרים דרוזופילה גינקולוגיות המערכת אחראית על הליכה עונה כל קריטריונים אלה בקלות, שכן במודל זה ניתן ללמוד את המפרט של מספר קטן של הרגל בקלות מכובד MNs (כ 50 MNs לכל הרגל) באמצעות שני עצום מערך של כלים רבי-עוצמה גנטי, בהקשר פיזיולוגיים של מזימת מבוססי גפה ומכניקה. כאן נתאר פרוטוקול להמחיש את העצבוב שריר הרגל ב זבוב למבוגרים.

כפי שמוצג באיור4, הליך זה מאפשר הדמיה מצוינת של אקסונים GFP שכותרתו ברגליים דרוזופילה למבוגרים, יחד עם ובשבילים מסוף שלהם. חשוב מתקבל אות GFP נקי ללא כל זיהום מן ידי קרינה פלואורסצנטית הנפלטת לציפורן הרגל. האיתות הקוטיקולה אז יכול להיות משולב עם האות ה-GFP...

Watch this Scientific Journal Video about Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle at JoVE.com

Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle

דמיינו דרוזופילה הרגל מוטור נוירון אקסונים דרך הקוטיקולה למבוגרים

כאן נתאר פרוטוקול להמחיש את מיקוד עצב עם חלבון נמכרות ברגליים למבוגרים של זבוב החומץ על ידי קיבוע, הרכבה, הדמיה, ההדמיה שלאחר צעדים.

The majority of work on the neuronal specification has been carried out in genetically and physiologically tractable models such as C. elegans, Drosophila ...

שיטה זו יכולה להיות מותאמת בקלות להתבוננות באותות מחלבונים פלואורסצנטיים אחרים או לשמש לאקסונים תמונה במבוגר אחר היתרון העיקרי של טכניקה זו להקל על שחזור תלת מימדי מעולה הדמיה של האקסונים ואת הסרבורים סופניים שלהם. התחל על ידי מילוי המספר המתאים של בארות בצלחת זכוכית רב באר עם 70% אתנול. השתמש במברשת כדי להוסיף 15 עד 20 זבובים הרדמה פחמן דו חמצני בכל גיל או מין לכל באר בעדינות לטבול את הזבובים לתוך האתנול עד שהם שקועים לחלוטין.לאחר לא יותר מדקה אחת, יש לשטוף את הזבובים שלוש פעמים בתמיסת דטרגנט לא יונית למשך 10 דקות לפחות. לאחר הכביסה האחרונה, השתמש במטליות כדי להסיר את הראש והבטן של כל זבוב מבלי לפגוע בקטע בית החזה או ברגליים ולהשתמש בקצה של זוג מדפים עדין כדי להפעיל בעדינות אך בתקיפות לחץ על צומת coxa-thorax לנתק רגל אחת מקטע בית החזה. מניחים את הרגליים באר אחת של צלחת רב באר חדשה המכילה טרי מוכן 4% paraformaldehyde על קרח עבור דגירה לילה בארבע מעלות צלזיוס.חשוב לדחוף את הרגליים בעדינות לתוך חיץ קיבוע מבלי לתת להם לצוף כדי לקבל רגליים קבועות היטב. למחרת, לשטוף את הרגליים חמש פעמים טרי 0.3% פתרון דטרגנט פעילי שטח לא יוני במשך 20 דקות לשטוף. לאחר הכביסה האחרונה, להחליף את חומר הניקוי עם מדיום הרכבה ולשמור את הרגליים במדיום הרכבה לפחות 24 שעות.למחרת, להוסיף כ 20 microliters של 70% גליצרול ליד הקצה הציפוי של מגלשת מיקרוסקופ זכוכית לכסות את גליצרול עם 22 על ידי 22 מילימטר coverslip. לאחר מכן, להוסיף כ 10 קו microliter של מדיום הרכבה בצד ימין של coverslip ולהחיל קו שני 30 microliter של מדיום הרכבה בצד ימין של קו 10 microliter. בעזרת מדפים עדין, מעבירים רגל אחת מהצלחת הרב-בארית בירידה של מדיום לרצועת 10 מיקרוליטר של מדיום הרכבה בצד חיצוני למעלה או למטה.חוזרים על הפעולה עד שש עד שמונה רגליים הורכבו ומיושרות וה מניחים כיסוי שני על הרגליים כך שהכיסוי השני נשען מעט על הכיסוי הראשון. לאחר מכן השתמש לק בכל פינה של coverslips כדי לאבטח אותם במקום. כדי לדמיין את הרגליים, השתמש בלייזר 488 ננומטר ושני גלאים בו זמנית כדי להגדיר את המסלול הראשון להשגת פלואורסצנטיות אוטומטית GFP ו- cuticle.בחר יעד טבילת שמן של פי 20 עד 25 והגדר את הרזולוציה ל- 1024 על 1024 פיקסלים בעומק של 12 סיביות והגדר את המרווח למיקרומטר אחד. לטעון את השקופית על שלב המיקרוסקופ באמצעות כוח לייזר זהה עבור שני הגלאים, להתאים את הרווח של הגלאי הראשון כדי לקבל אות GFP בהיר ולהתאים את הגלאי השני כדי להבטיח כי אזורים מסוימים עם אות קוטיקל גבוה לייצר אות רווי בגלאי זה. לאחר מכן צלם את הרגליים באמצעות אפשרויות האריח או המיקום כדי ללכוד את הרגל כולה אם רגל מורחבת או גדולה מכדי שניתן יהיה לדמיין אותה במסגרת אחת.לעיבוד תמונה, פתחו את מחסנית הקונפוקלים ב- ImageJ Fiji ולהשתמש בתוסף Bio-Formats כדי לפתוח תמונות שאינן בתבנית TIFF. לפיצול הערוצים, בחרו 'תמונה', 'צבע' ו'פיצול ערוצים'. כדי להחסיר את אות החיתוך מאות GFP, פתחו את 'מחשבון תהליך' ו'תמונה' ובחרו בערימה מהגלאי 1 כתמונה 1.בחלון הפעולה, בחר חיסור ובחר את המסלול מהגלאי 2 כתמונה 2 כך שרק אות GFP אנדוגני יושג. השתמש בתמונה, ערימות, Z Protect כדי ליצור הקרנה בעוצמה מרבית עבור אות GFP אנדוגני. השתמש בפקדים בחלון בקרת הבהירות כדי לכוונן את הבהירות והחדות.לאחר מכן צור עוצמה ממוצעת עבור קוטיקל, ואחריו תמונה, צבע, וערוצי מיזוג כדי למזג את מחסנית GFP בחזרה עם מחסנית קוטיקל בלבד שנרכש גלאי 2. זה יגרום תמונת RGB המורכב אות GFP ספציפי לרקמות, כמו גם אות קוטיקל כדי לעזור לזהות את arbors אקסון בתוך מקטעי הרגל. כדי להשתמש במאקרו, פתח את מחסנית הקונפוקל ולחץ על תמונה, כוונון ובהירות/חדות.לאחר מכן לחץ על תוסף ועל הפעל מאקרו כדי להפעיל את המאקרו ובצע את ההוראות. כאשר התבקשו לציין את הפעולה בחלון מחשבון התמונה, בחרו תמונה אחת כמחסנית אחת. בחלון הפעולה, בחר חיסור.בחר תמונה 2 כערימה 2. כאשר התבקשו להתאים את החדות, השתמשו בפקדים בחלון בקרת הבהירות כדי לכוונן את ניגודיות הבהירות של תמונת ההקרנה המקסימלית של GFP ואת ההקרנה הממוצעת של הקוטיקל כדי ליצור תמונה ממוזגת של RGB של שני האותות המציגים את ה- GFP בירוק ואת הקוטיקל באפור. לאחר מכן מזג את התוצאות של מחסנית אחת וערימה 2 כדי ליצור מחסנית GFP ו cuticle משולבת שניתן להשתמש בה בשלב הבא.כדי להמחיש את הרגליים בשלושה ממדים, פתח את מחסנית RGB בתוכנה תלת-ממדית מתאימה. בחלון הדו-שיח המוקפץ, בחר את כל הערוצים במקטע המרת המצב והזן את גודל הווקסל שהתקבל מהניתוח הקודם. במודול ערוץ אחד, לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני ובחר תצוגה וולרן.ואז לחץ שמאלה על מודול Volren. במקטע מאפיינים, לחץ שמאלה על מתקדם ובחר DDR. לאחר מכן התאימו את ערך הגמא כדי לראות את רקע החיתוך.במודול ערוץ 2, לחץ באמצעות לחצן העכבר הימני ובחר הצג Volren. לאחר מכן לחץ שמאלה על מודול Volren, לערוך ולבחור volrenGreen.col. באמצעות הליך זה, האות מן cuticle ניתן לשלב עם אות GFP כדי לזהות את המיקום של האקסונים בתוך הרגליים.חשוב מאוד להשיג רגליים קבועות היטב. ברגליים קבועות כראוי, המבנים הפנימיים בתוך הרגליים הם בצבע אחיד ואת קנה הדרך, אשר כהים, גלויים. ברגליים קבועות בצורה גרועה, חומר כהה קיים בטרסוס ובטיביה ומערכת קנה הנשימה אינה נראית בבירור בעצם הירך ובקסה.ההליך שתיארנו כאן מתגבר על האתגר של גילוי ביטוי פלואורסצנטי באקסונים נוירונים מוטוריים דרך קוטיקל פלואורסצנטי עבה ומותחת ברזולוציה גבוהה. אז אות פלואורסצנט נקי ומפורט שהושג מאפשר לנו לדמיין ולכומת את התכונה התלת מימדית של arbors אקסון באמצעות תוכניות הדמיה 3D. אז טכניקה זו תאפשר לנו להשתמש Drosophila למבוגרים כמודל לא רק כדי ללמוד את הפיתוח של נוירון מוטורי, אלא גם כדי ללמוד, כדי להבין את ההשפעה של מחלה ניוונית כגון ERAS על מערכת לוקומוטור משולב.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Visualize Drosophila Leg Motor Neuron Axons Through the Adult Cuticle

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-הדמיה של<em&gt; דרוזופילה</em&gt; גלמי עין

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Mechanism of Regulation of Adipocyte Numbers in Adult Organisms Through Differentiation and Apoptosis Homeostasis

מנגנון הוויסות של מספרי adipocyte למבוגרים אורגניזמים באמצעות בידול הומאוסטזיס אפופטוזיס

Considering that adipose tissue (AT) is an endocrine organ, it can influence whole body metabolism. Excessive energy storage leads to the dysregulation of ...

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

שיטות לבדיקת בלוטת לימפה hemocytes ב<em&gt; תסיסנית</em&gt; זחלים

Many parallels exist between the Drosophila and mammalian hematopoietic systems, even though Drosophila lack the lymphoid lineage that characterize ...

Biosensing Motor Neuron Membrane Potential in Live Zebrafish Embryos

Biosensing מוטורית נוירון פוטנציאל ממברנה עוברי דג הזברה חיים

The protocols described here are designed to allow researchers to study cell communication without altering the integrity of the environment in which the ...

Generation of Genetically Modified Mice through the Microinjection of Oocytes

הדור של עכברים השתנה גנטית דרך Microinjection של ביציות

The use of genetically modified mice has significantly contributed to studies on both physiological and pathological in vivo processes. The pronuclear ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

ניתוח Immunofluorescent מכתים של פטריות הגוף והנפש ומה קולט אור נוירונים במוח למבוגרים דרוזופילה melanogaster

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

Thawing, Culturing, and Cryopreserving Drosophila Cell Lines

מפשיר Culturing, Cryopreserving שורות תאים דרוזופילה

There are currently over 160 distinct Drosophila cell lines distributed by the Drosophila Genomics Resource Center (DGRC). With genome engineering, the ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

שיטה ישירה ופשוטה להערכת דרוזופילה מלאנוגסטרהכדאיות מעובר למבוגר

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

Isolation of Specific Neuron Populations from Roundworm Caenorhabditis elegans

בידוד אוכלוסיות מסוימות של תא העצב מתוך האלאנים

During the aging process, many cells accumulate high levels of damage leading to cellular dysfunction, which underlies many geriatric and pathological ...

Retrograde Tracing of Drosophila Embryonic Motor Neurons Using Lipophilic Fluorescent Dyes

Retrograde Tracing of Drosophila Embryonic Motor Neurons Using Lipophilic Fluorescent Dyes

מעקב רטרוגרדי של דרוזופילה ממונע נוירונים מוטוריים שימוש בצבעי פלורסנט

We describe a technique for retrograde labeling of motor neurons in Drosophila. We use an oil-dissolved lipophilic dye and deliver a small droplet to an ...