Name: the mub40 peptide for use in detecting neutrophil-mediated inflammation events
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The MUB40 Peptide for Use in Detecting Neutrophil-Mediated Inflammation Events at JoVE.com

Este trabajo fue financiado por la Fundación Laurette Fugain (LF-2015-15) (B.S.M.) y convocatoria de ANR JCJC (ANR-17-CE15-0012) (B.S.M.).

Todos los métodos aquí descritos han sido revisados y aprobadas por las organizaciones francesas CoRC (Comité de Recherche Clinique), CPP (Comité de Protection des Personnes) y CNIL (Comisión Nationale Informatique et Liberté).
1. neutrófilos en la histopatología del tejido con la coloración fluorescente etiquetado MUB40
<ol><li>Para obtener el tejido para histopatología, fijar las secciones de biopsia de tejido en un volumen adecuado de paraformaldehído al 4% (PFA) dur...

<ol>
	<li>Nathan, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+and+immunity:+challenges+and+opportunities.">Neutrophils and immunity: challenges and opportunities.</a> Nature Reviews Immunology. 6 (3), 173-182 (2006).</li><li>Nicol&#225;s-&#193;vila, J. &. #. 1. 9. 3. ;., Adrover, J. M., Hidalgo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+in+Homeostasis,+Immunity,+and+Cancer.">Neutrophils in Homeostasis, Immunity, and Cancer.</a> Immunity. 46 (1), 15-28 (2017).</li><li>Coffelt, S. B., Wellenstein, M. D., de Visser, K. 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R., Print, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-induced+neutrophil+survival+is+mediated+by+HIF-1alpha-dependent+NF-kappaB+activity.">Hypoxia-induced neutrophil survival is mediated by HIF-1alpha-dependent NF-kappaB activity.</a> Journal of Experimental Medicine. 201 (1), 105-115 (2005).</li><li>Monceaux, V., Chiche-Lapierre, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anoxia+and+glucose+supplementation+preserve+neutrophil+viability+and+function.">Anoxia and glucose supplementation preserve neutrophil viability and function.</a> Blood. 128 (7), 993-1002 (2016).</li></ol>

Aquí, se describen dos ensayos en que el péptido de40 MUB se utiliza para estudiar la activación e inflamación neutrófila. Mostramos cómo puede revelar MUB40 neutrófilos presentan en las secciones de la histopatología o mostrar su estado de activación utilizando neutrófilos purificados vivo. Los pasos críticos para el uso de MUB40 como un reactivo de tinción son los mismos que con cualquier otro método de detección fluorescente. Debe tenerse cuidado para garantizar la compat...

Neutrófilos son uno de los principales brazos del sistema inmune innato y son reclutados sistemáticamente a los sitios de inflamación alrededor del cuerpo. El estudio de los neutrófilos se ha deteriorado en gran parte por su corta vida útil en vitro (menos de 8 h) y herramientas de detección limitada bajo condiciones basales o luego de la activación. Aquí, presentamos un protocolo bien probado para la detección amplio y específico de los neutrófilos mamíferos en muestras fijas/permeabilized. También proporcionamos un protocolo detallado para la tinción energizados neutrófilos con MUB40. Utilizando el protocolo de tinción neutrófilo vivo, el momento y el lugar de la activación de neutrófila pueden ser identificados. Este protocolo es ideal para investigadores que deseen estudiar la liberación de activación o del gránulo neutrófilo. Más allá de sus funciones antimicrobianas, neutrófilos ahora son apreciados como inmunomoduladores de células implicadas en una amplia gama de enfermedades y la respuesta inmune (innata y adaptativa)1,2. Están presentes en los tejidos más inflamatorios, en un número elevado en los tejidos infectados, en tumores inflamatorios3, IBS y enfermedad de Crohn las llamas4y en áreas de inflamación no infecciosa como el synovia de la artritis reumatoide (neutrófilos Pacientes de RA)5. Neutrófilos contienen cuatro clases de gránulos preformados llamados azurófilos (α), específicos (β1), gránulos terciarios (β2) y vesículas secretoras (γ)6. Migración a un sitio inflamatoria, neutrófilos reclutados se activan y secuencialmente secretan gránulos contenidos (compuestos de adherencia, compuestos antimicrobianos y moléculas inmunomoduladoras), que promueve la contratación y contribuye a resolución (pero también al daño de tejido de host) de infección7. Neutrófilos se consideran un aspecto fundamental de la inmunidad innata, hasta la fecha hay son pocos reactivos de detección disponibles para estudiarlos, y aun menos que puede utilizarse para evaluar el estado de activación de los neutrófilos de vida.
Los métodos actuales de detección de neutrófilos dependen de anticuerpos monoclonales generados contra los antígenos expuestos superficie de la célula, como proteínas específicamente almacenadas en gránulos neutrófilos bajo condiciones basales (por ejemplo, mieloperoxidasa o Ly - 6 G2 lactoferrina). Ventajas de anticuerpos monoclonales incluyen su atascamiento fuerte sensibilidad y versatilidad en diferentes condiciones de ensayo. Sin embargo, hay varias desventajas al uso de anticuerpos monoclonales y anti-Ly - 6G en particular. Estas desventajas incluyen la especificidad, como Ly - 6G está presente en la mayoría de las células mieloides en médula ósea y sobre todo granulocitos incluyendo eosinófilos; por lo tanto, descifrar neutrófilos de eosinófilos con este marcador requiere complejos más se acerca a8. Otro intercambio frecuente con anticuerpos monoclonales es su anfitrión a menudo limitada especificidad, dificultando los estudios de comparación con más de una especie animal. Un tercer inconveniente de los métodos de detección de anticuerpos, especialmente cuando se utilizan células vivas o en vivo, es su potencial para alterar la función de la célula o llevar a la activación de la célula. Por ejemplo, la administración de anti-Ly - 6G a los ratones se aplica comúnmente a agotamiento del neutrófilo y neutropenia transitoria9. Además se ha demostrado que la inyección de anticuerpos puede estimular función antitumoral neutrófilos10. Finalmente, la detección de anticuerpo de neutrófilos no revela el estado de activación de la célula.
Hemos identificado un péptido de 40 aminoácidos llamado MUB40, que puede utilizarse en un número de ensayos para etiqueta de neutrófilos bajo condiciones en vitro o en vivo , así como analizar el estado de activación de neutrófilos en11. MUB40 se deriva de MUB7012, un dominio de la proteína de unión a moco superficial Lactobacillus reuteri , descrito originalmente por su capacidad para enlazar moco13,14. MUB40 interactúa con lactoferrina glucosilada que está presente en altas concentraciones en los gránulos específicos de neutrófilos y terciarios. MUB40 puede estar expuesto a estos gránulos a través de pasos de permeabilización estándar presentes en la histopatología o celular activado por fluorescencia clasificación protocolos (FACS) para tinción robusto de neutrófilos fijadas. Cuando neutrófilos vivo se mantienen en un estado inactivo, el péptido de40 MUB queda excluido de los contenidos del gránulo, y células no tiñen positivamente con el marcador. Después de la activación, MUB40 puede enlazar a la lactoferrina expuesta y conducir a coloración robusta con el péptido. Por ello, MUB40 puede utilizarse para determinar el estado de activación de los neutrófilos purificados, lo que es un marcador de atractivo a seguir el proceso infeccioso. La capacidad de enlazar a vivir neutrófilos activados también permite MUB40 para ser utilizado como una herramienta para detectar áreas de inflamación neutrófila en modelo animal vivo (por ejemplo, un ratón artritis modelo15). Los protocolos en este detalle del manuscrito como fluorescencia etiquetada MUB40 pueden utilizarse para revelar neutrófilos en histología tejidos y cómo analizar la activación de neutrófilos purificados vivo en vitro.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:895px;" width="894">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:261px;">MUB40-Cy5</td>
			<td style="width:123px;">Benoit Marteyn</td>
			<td style="width:344px;">benoit.marteyn@pasteur.fr</td>
			<td style="width:167px;">Fluorescent MUB40 peptide (available with other conjugated fluorophores)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">RI-MUB40-Cy5</td>
			<td>Benoit Marteyn</td>
			<td>benoit.marteyn@pasteur.fr</td>
			<td>Retro-inverso fluorescent MUB40 peptide. Synthesized with D-amino acids and resistant to proteases (available with other conjugated fluorophores)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Parformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right">16005</td>
			<td>Fixative for histology</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sucrose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S7903</td>
			<td>Solution used to remove excess PFA</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Optimal Cutting Temperature Compound (OCT)</td>
			<td>Sakura Finetek USA</td>
			<td align="right">4583</td>
			<td>Used to freeze tissue before cryostat sectioning</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">2-Methylbutane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M32631</td>
			<td>Used to freeze tissue before cryostat sectioning</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Ethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right">1.00974</td>
			<td>Used for dry ice bath to freeze tissue</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Leica Cryostat</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>CM1520</td>
			<td>Used to section tissues</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Glass microscopy slides</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-518-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cover slips</td>
			<td>Thor Labs</td>
			<td>CG15CH</td>
			<td>Hi precision coverslip</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Dako pen&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z377821</td>
			<td>Used to prevent liquid loss during tissue staining</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Saponin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right">47036</td>
			<td>Used to permeabilize cells for IF staining</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DAPI</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right">10236276001</td>
			<td>Stains DNA&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Alexa fluor 488 Phalloidin&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Binds actin</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Prolong Gold antifade Mountant</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P36930</td>
			<td>Prolongs IF signal and resistance to photobleaching</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Fluorescent microscope</td>
			<td>Various</td>
			<td>Various</td>
			<td>Used to image IF slides</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Anoxic Cabinet</td>
			<td>Various</td>
			<td>Various</td>
			<td>Used for the purification of live inactivated neutrophils</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sodium Chloride NaCL</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">EDTA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E9884</td>
			<td>Washing buffer component</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">MACS BSA buffer</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-091-376</td>
			<td>Washing buffer component</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Percoll</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4937</td>
			<td>Gradient for neutrophil purification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CD235a glycophorin magnetic microbeads</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-050-501</td>
			<td>Used to remove contaminating RBCs</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">LS columns</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-042-401</td>
			<td>Used in the removal of RBCs from neutrophils</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RPMI-1640 without Phenol Red</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R8755</td>
			<td>Used for neutrophil assays</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the mub40 peptide for use in detecting neutrophil-mediated inflammation events

Presentamos un protocolo que implica el uso de MUB40, un péptido sintetizado con la capacidad de enlazar glucosilada lactoferrina almacenado en altas concentraciones en específicos y terciarios los gránulos de los neutrófilos. Este detalles del protocolo MUB40 conjugado directamente a un fluoróforo pueden utilizarse para teñir neutrófilos en tejidos fijados/permeabilized así como cómo esto puede ser usado en imágenes de células vivas al ensayo para la granulación y la activación de neutrófila. Métodos de detección de neutrófilos se limitan a anticuerpos monoclonales específicos para cada especie, que no siempre son convenientes para ciertas aplicaciones. MUB40 no penetra la membrana celular y por lo tanto se excluye de lactoferrina en neutrófilos no-activado/no-permeabilized. MUB40 tiene la ventaja de reconocer lactoferrina de un rango de hospederos amplio, lo que es especialmente útil para comparar resultados en estudios con múltiples modelos de investigación, reduciendo el número de duplicados y simplificando protocolos a través del solo paso de tinción.

Resultados de MUB40-tejidos manchados de diapositivas de la histopatología normalmente revelan células individuales dispersadas por todo el tejido. MUB40 manchas de lactoferrina, que está presente en los gránulos neutrófilos y compartimentado. Así, típicamente visto manchas punteadas o varias grandes áreas separadas de la señal viene de los neutrófilos (figura 1). Es útil añadir un segundo marcador de célula como DAPI para a...

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The MUB40 Peptide for Use in Detecting Neutrophil-Mediated Inflammation Events

Aquí, presentamos un protocolo para detectar la presencia de neutrófilos en las secciones fijas/permeabilized histología y evaluar el estado de activación de los neutrófilos purificados vivo. En particular, el péptido de40 MUB ATA lactoferrina presente en gránulos específicos de neutrófilos y terciarios. Exposición de los contenidos del gránulo a través de permeabilización o neutrófila activación permite el marcado de los neutrófilos.

El péptido de40 de MUB para uso en la detección de eventos de la inflamación mediada por neutrófilos

Here, we provide a protocol involving the use of MUB40, a synthesized peptide with the ability to bind glycosylated lactoferrin stored at high ...

MUB40 es un nuevo marcador de neutrófilos, que se une a la lactoferrina y permite una detección específica en humanos y todas las muestras de tejido de mamíferos probadas hasta ahora. Etiquetar neutrófilos con MUB40 es fácil, rápido y específico. Ahora se utiliza ampliamente en nuestro laboratorio y la implicación de esta técnica se extiende hacia el diagnóstico de enfermedades inflamatorias.Para empezar, prepare las soluciones uno, dos y tres de acuerdo con el protocolo de texto, y colóquelas en un gabinete anóxico durante la noche. Luego, centrifugar los tubos de sangre recolectada a 650 g durante 20 minutos para separar las células de la fracción plasmática. Sin alterar la sangre separada, transfiera los tubos al gabinete anóxico y transfiera las fracciones de plasma a un tubo cónico de 50 mililitros.Después de esto, retire el tubo de plasma del armario anóxico y centrifugarlo a 2900 g durante 20 minutos. Teniendo cuidado de no interrumpir las plaquetas peletadas, transferir el tubo al gabinete anóxico y pipetear el plasma pobre de plaquetas en un tubo fresco de 50 mililitros. Usando los tubos de recolección de sangre, combine los glóbulos rojos en un tubo cónico de 50 mililitros.A continuación, agregue 0,9% de solución de cloruro de sodio hasta que el volumen total alcance los 44 mililitros y agregue seis mililitros de 6% dextran. Invierta el tubo de 10 a 20 veces para mezclar suavemente la sangre y la mezcla de dextrán, y deje que el tubo se sedimente durante al menos 30 minutos. Mientras que los sedimentos del tubo, preparar un gradiente Percoll mediante la adición de 4,2 mililitros de solución de Percoll a 5,8 mililitros de plasma, e invertir el tubo para mezclar.A continuación, recoger el neutrófilo que contiene la fracción superior del dextrán, teniendo cuidado de no pipetear los glóbulos rojos. Apriete la tapa del tornillo, retire el tubo de dextrán del gabinete anóxico y centrifugar el tubo a 300 g durante 10 minutos. Teniendo cuidado de no molestar las células peletónicas, coloque el tubo de nuevo en el gabinete anóxico.A continuación, retire el líquido pipeteando. Resuspender suavemente el pellet en un mililitro de plasma. Agregue lentamente las células resuspendidas a la parte superior de la solución Percoll.Retire cuidadosamente el tubo de solución Percoll del gabinete anóxico y centrifúelo a 800 g durante 20 minutos para separar los PBMC de los neutrófilos. A continuación, prepare 14 mililitros de solución de tampón de lavado de acuerdo con el protocolo de texto. A continuación, coloque el tubo Percoll en el gabinete anóxico.Utilice una pipeta para eliminar el Percoll y los PBMC y resuspender el neutrófilo que contiene el pellet en un mililitro de solución tampón de lavado. A continuación, agregue 200 microlitros de cuentas magnéticas a las células resuspendidas. Mezcle e incuba suavemente las células y las perlas durante al menos 15 minutos.Después de esto, lave una columna de separación dos veces, con dos mililitros de tampón de lavado. Mientras sostiene un nuevo tubo cónico de 15 mililitros debajo de la columna, pipetee lentamente la mezcla de glóbulos rojos neutrófilos a través de la columna. El flujo a través de la columna debe estar turbio y perder su color rojo, confirmando la separación total de los neutrófilos de los glóbulos rojos restantes.Agregue dos mililitros de tampón de lavado a la parte superior de la columna y recoja el flujo a través en el mismo tubo. Al final de este lavado, el flujo debe ser claro. Mezcle suavemente el tubo de recogida para asegurarse de que los neutrófilos se distribuyen uniformemente.Luego recogió 10 microlitros del flujo a través del conteo celular. Después de esto, retire el tubo neutrófilo del gabinete anóxico y centrifugar el tubo a 300 g durante 20 minutos. Coloque los neutrófilos sedimentados de nuevo en el gabinete anóxico y retire el tampón de lavado a través del pipeteo.Luego, resuspender el pellet en plasma. Agregue un microlitro de RI-MUB40-Cy5 a un mililitro de RPMI-1640 medio, sin rojo fenol, y mezcle a través de pipeteo. A continuación, agregue un microlitrotro de solución FMLP y pipeta para mezclar.Transfiera la mezcla a un plato de microscopía de fondo de vidrio. Luego agregue un volumen apropiado de células purificadas al plato. Por último, coloque el plato en un microscopio fluorescente invertido e inicie la adquisición de imágenes.En este protocolo, MUB40 se utilizó en células vivas para detectar la secreción de neutrófilos tras la simulación con FMLP. La dinámica de la liberación del contenido del gránulo, incluida la lactoferrina, puede visualizarse con el tiempo, aquí en magenta. MUB40 se puede utilizar adicionalmente en neutrófilos fijos.Aquí, fagociizing cuentas fluorescentes en una serie cronometaria. El contenido del gránulo de neutrófilos se etiqueta aquí en azul. Los neutrófilos mostraron poca o ninguna tinción celular en los primeros momentos y gradualmente, el etiquetado RI-MUB40 aumentó con el tiempo, tanto en la membrana plasmática como en la superficie del cordón.MUB40 también se puede utilizar en tejidos inflamatorios fijos para detectar neutrófilos específicamente, como se muestra en las cifras del texto. Aquí describimos el procedimiento de purificación de neutrófilos, aplicado rutinariamente en nuestro laboratorio. Cualquier otro método es adecuado, el etiquetado MUB40-Cy5 seguirá funcionando.El neutrófilo puede etiquetarse específicamente con MUB40 después de la purificación, o directamente en tejido inflamado de pacientes o modelos animales. Varios derivados MUB40 han sido diseñados para ampliar su uso. Después de su desarrollo, esta técnica allanó el camino para que el investigador en el campo de la inflamación, explorara el reclutamiento neutrófilo y la activación en enfermedades inflamatorias.

Research

JoVE Journal

Biology

The MUB40 Peptide for Use in Detecting Neutrophil-Mediated Inflammation Events

The use of Biofeedback in Clinical Virtual Reality: The INTREPID Project

El uso de la biorretroalimentación en Realidad Virtual Clínica: El Proyecto de INTREPID

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Investigación

Biología

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FRET Microscopy for Real-time Monitoring of Signaling Events in Live Cells Using Unimolecular Biosensors

FRET Microscopía de Monitoreo en tiempo real de eventos de señalización en las células vivas Uso de biosensores unimoleculares

F&ouml;rster resonance energy transfer (FRET) microscopy  continues to gain increasing interest as a technique for real-time monitoring  of biochemical ...

The Use of Chemostats in Microbial Systems Biology

El uso de quimiostatos en Microbiana Biología de Sistemas

Cells regulate their rate of growth in response to signals from the external world. As the cell grows, diverse cellular processes must be coordinated ...

Live Cell Imaging of Early Autophagy Events: Omegasomes and Beyond

Imágenes de células vivas de las primeras autofagia Eventos: Omegasomes y más allá

Autophagy is a  cellular response triggered by the lack of nutrients, especially the absence of  amino acids. Autophagy is defined by the formation of ...

Identifying Protein-protein Interaction Sites Using Peptide Arrays

La identificación de sitios de interacción proteína-proteína utilizando péptido arrays

Protein-protein interactions mediate most of the processes in the living cell and control homeostasis of the organism. Impaired protein interactions may ...

Spatiotemporal Analysis of Cytokinetic Events in Fission Yeast

Análisis espacio-temporal de cytokinetic Eventos en la levadura de fisión

Cytokinesis, the final step in cell division is critical for maintaining genome integrity. Proper cytokinesis is important for cell differentiation and ...

Characterization of Calcification Events Using Live Optical and Electron Microscopy Techniques in a Marine Tubeworm

Caracterización de la calcificación Eventos en vivo mediante técnicas ópticas y microscopía electrónica en un Gusano Tubícola Marina

Characterizing the first event of biological production of calcium carbonate requires a combination of microscopy approaches. First, intracellular pH ...

Detecting Estrogenic Ligands in Personal Care Products using a Yeast Estrogen Screen Optimized for the Undergraduate Teaching Laboratory

Detección de ligandos estrogénica en productos de Cuidado Personal con una pantalla de estrógeno levadura optimizado para el laboratorio de enseñanza de pregrado

The Yeast Estrogen Screen (YES) is used to detect estrogenic ligands in environmental samples and has been broadly applied in studies of endocrine ...

Detecting the Lyme Disease Spirochete, Borrelia Burgdorferi, in Ticks Using Nested PCR

Detecting the Lyme Disease Spirochete, Borrelia Burgdorferi, in Ticks Using Nested PCR

Detectar el Spirochete de la enfermedad de Lyme, Burgdorferi de Borrelia, de garrapatas mediante PCR anidado

Lyme disease is a serious vector-borne infection that is caused by the Borrelia burgdorferi sensu lato family of spirochetes, which are transmitted to ...