Name: a hyperandrogenic mouse model to study polycystic ovary syndrome
Uploaded: 2018-10-02T14:30:00
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이 작품은 건강의 국가 학회 (보조금 R00-남서에 HD068130)와 볼티모어 당뇨병 연구 센터에 의해 지원 되었다: 조종사와 (남서)에 타당성 부여.

여기, 상세한 프로토콜 DHT 펠 릿 준비 및 삽입, 및 생식 하 고 신진 대사 테스트를 위해 선물이. 쥐가이 연구에 사용 된 혼합된 배경 (C57/B6, c d 1, 129Sv) 그리고 음식과 함께 유지 되었다 광고 libitum 24 ° c의 존스 홉킨스 대학에서 브로드 웨이 연구 건물 동물 시설에서 14/10 h 명암 주기 물 의학입니다. 모든 절차는 존스 홉킨스 대학 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 되었다.
<p class="jove_tit...

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	<li>Palomba, S., de Wilde, M. A., Falbo, A., Koster, M. P., La Sala, G. B., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+complications+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome.">Pregnancy complications in women with polycystic ovary syndrome.</a> Hum. Reprod. Update. 21 (5), 575-592 (2015).</li><li>Doherty, D. A., Newnham, J. P., Bower, C., Hart, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+polycystic+ovary+syndrome+for+pregnancy+and+for+the+health+of+offspring.">Implications of polycystic ovary syndrome for pregnancy and for the health of offspring.</a> Obstet. Gynecol. 125 (6), 1397-1406 (2015).</li><li>de Wilde, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+and+Metabolic+Health+of+74+Children+From+Women+Previously+Diagnosed+With+Polycystic+Ovary+Syndrome+in+Comparison+With+a+Population-Based+Reference+Cohort.">Cardiovascular and Metabolic Health of 74 Children From Women Previously Diagnosed With Polycystic Ovary Syndrome in Comparison With a Population-Based Reference Cohort.</a> Reprod. Sci. , (2018).</li><li>Caldwell, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+reproductive,+metabolic,+and+endocrine+features+of+polycystic+ovary+syndrome+in+female+hyperandrogenic+mouse+models.">Characterization of reproductive, metabolic, and endocrine features of polycystic ovary syndrome in female hyperandrogenic mouse models.</a> Endocrinology. 155 (8), 3146-3159 (2014).</li><li>van Houten, E. L., Kramer, P., McLuskey, A., Karels, B., Themmen, A. P., Visser, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproductive+and+metabolic+phenotype+of+a+mouse+model+of+PCOS.">Reproductive and metabolic phenotype of a mouse model of PCOS.</a> Endocrinology. 153 (6), 2861-2869 (2012).</li><li>Cardoso, R. C., Puttabyatappa, M., Padmanabhan, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroidogenic+versus+Metabolic+Programming+of+Reproductive+Neuroendocrine,+Ovarian+and+Metabolic+Dysfunctions.">Steroidogenic versus Metabolic Programming of Reproductive Neuroendocrine, Ovarian and Metabolic Dysfunctions.</a> Neuroendocrinology. 102 (3), 226-237 (2015).</li><li>Dumesic, D. A., Abbott, D. H., Padmanabhan, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polycystic+ovary+syndrome+and+its+developmental+origins.">Polycystic ovary syndrome and its developmental origins.</a> Rev. Endocr. Metab Disord. 8 (2), 127-141 (2007).</li><li>Kauffman, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Letrozole+Model+Recapitulates+Both+the+Reproductive+and+Metabolic+Phenotypes+of+Polycystic+Ovary+Syndrome+in+Female+Mice.">A Novel Letrozole Model Recapitulates Both the Reproductive and Metabolic Phenotypes of Polycystic Ovary Syndrome in Female Mice.</a> Biol Reprod. 93 (3), 69 (2015).</li><li>Kelley, S. T., Skarra, D. V., Rivera, A. J., Thackray, V. 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S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Letrozole+Model+Recapitulates+Both+the+Reproductive+and+Metabolic+Phenotypes+of+Polycystic+Ovary+Syndrome+in+Female+Mice.">A Novel Letrozole Model Recapitulates Both the Reproductive and Metabolic Phenotypes of Polycystic Ovary Syndrome in Female Mice.</a> Biol. Reprod. 93 (3), 69 (2015).</li><li>Filippou, P., Homburg, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+foetal+hyperexposure+to+androgens+a+cause+of+PCOS?.">Is foetal hyperexposure to androgens a cause of PCOS?.</a> Hum. Reprod. Update. 23 (4), 421-432 (2017).</li><li>Wang, Z., Shen, M., Xue, P., DiVall, S. A., Segars, J., Wu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+Offspring+From+Chronic+Hyperandrogenemic+Dams+Exhibit+Delayed+Puberty+and+Impaired+Ovarian+Reserve.">Female Offspring From Chronic Hyperandrogenemic Dams Exhibit Delayed Puberty and Impaired Ovarian Reserve.</a> Endocrinology. 159 (2), 1242-1252 (2018).</li><li>Abbott, D. H., Barnett, D. K., Bruns, C. M., Dumesic, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Androgen+excess+fetal+programming+of+female+reproduction:+a+developmental+aetiology+for+polycystic+ovary+syndrome?.">Androgen excess fetal programming of female reproduction: a developmental aetiology for polycystic ovary syndrome?.</a> Hum. Reprod. Update. 11 (4), 357-374 (2005).</li><li>Abbott, D. H., Dumesic, D. A., Franks, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+origin+of+polycystic+ovary+syndrome+-+a+hypothesis.">Developmental origin of polycystic ovary syndrome - a hypothesis.</a> J. Endocrinol. 174 (1), 1-5 (2002).</li><li>Padmanabhan, V., Veiga-Lopez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sheep+models+of+polycystic+ovary+syndrome+phenotype.">Sheep models of polycystic ovary syndrome phenotype.</a> Mol. Cell. Endocrinology. 373 (1-2), 8-20 (2013).</li><li>Pierre, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysregulation+of+the+Anti-Mullerian+Hormone+System+by+Steroids+in+Women+With+Polycystic+Ovary+Syndrome.">Dysregulation of the Anti-Mullerian Hormone System by Steroids in Women With Polycystic Ovary Syndrome.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 102 (11), (2017).</li><li>Dumesic, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperandrogenism+Accompanies+Increased+Intra-Abdominal+Fat+Storage+in+Normal+Weight+Polycystic+Ovary+Syndrome+Women.">Hyperandrogenism Accompanies Increased Intra-Abdominal Fat Storage in Normal Weight Polycystic Ovary Syndrome Women.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 101 (11), 4178-4188 (2016).</li><li>Fassnacht, M., Schlenz, N., Schneider, S. B., Wudy, S. A., Allolio, B., Arlt, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+adrenal+and+ovarian+androgen+generation:+Increased+peripheral+5+alpha-reductase+activity+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome.">Beyond adrenal and ovarian androgen generation: Increased peripheral 5 alpha-reductase activity in women with polycystic ovary syndrome.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 88 (6), 2760-2766 (2003).</li><li>Dikensoy, E., Balat, O., Pence, S., Akcali, C., Cicek, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+risk+of+hepatotoxicity+during+long-term+and+low-dose+flutamide+treatment+in+hirsutism.">The risk of hepatotoxicity during long-term and low-dose flutamide treatment in hirsutism.</a> Arch. Gynecol. Obstet. 279 (3), 321-327 (2009).</li><li>Ma, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Androgen+Receptor+in+the+Ovary+Theca+Cells+Plays+a+Critical+Role+in+Androgen-Induced+Reproductive+Dysfunction.">Androgen Receptor in the Ovary Theca Cells Plays a Critical Role in Androgen-Induced Reproductive Dysfunction.</a> Endocrinology. , en20161608 (2016).</li><li>Andrisse, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+Dose+Dihydrotestosterone+Drives+Metabolic+Dysfunction+via+Cytosolic+and+Nuclear+Hepatic+Androgen+Receptor+Mechanisms.">Low Dose Dihydrotestosterone Drives Metabolic Dysfunction via Cytosolic and Nuclear Hepatic Androgen Receptor Mechanisms.</a> Endocrinology. , en20161553 (2016).</li><li>Andrisse, S., Billings, K., Xue, P., Wu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+signaling+displayed+a+differential+tissue-specific+response+to+low-dose+dihydrotestosterone+in+female+mice.">Insulin signaling displayed a differential tissue-specific response to low-dose dihydrotestosterone in female mice.</a> Am. J. Physiol.Endocrinol. Metab. 314 (4), E353-E365 (2018).</li><li>van Houten, E. L., Visser, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+to+study+polycystic+ovary+syndrome:+a+possible+link+between+metabolism+and+ovarian+function?.">Mouse models to study polycystic ovary syndrome: a possible link between metabolism and ovarian function?.</a> Reprod. Biol. 14 (1), 32-43 (2014).</li><li>Caligioni, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+reproductive+status/stages+in+mice.">Assessing reproductive status/stages in mice.</a> Curr. Protoc. Neurosci. , (2009).</li><li>Wu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+knockout+of+the+androgen+receptor+in+gonadotropes+reveals+crucial+roles+for+androgen+in+gonadotropin+synthesis+and+surge+in+female+mice.">Conditional knockout of the androgen receptor in gonadotropes reveals crucial roles for androgen in gonadotropin synthesis and surge in female mice.</a> Mol. Endocrinol. 28 (10), 1670-1681 (2014).</li><li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL/6J+mice:+I.+Cycle+frequency,+length+and+vaginal+cytology.">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biol. Reprod. 27 (2), 327-339 (1982).</li><li>Dinger, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+Glucose+Tolerance+Test,+Measurement+of+Lung+Function,+and+Fixation+of+the+Lung+to+Study+the+Impact+of+Obesity+and+Impaired+Metabolism+on+Pulmonary+Outcomes.">Intraperitoneal Glucose Tolerance Test, Measurement of Lung Function, and Fixation of the Lung to Study the Impact of Obesity and Impaired Metabolism on Pulmonary Outcomes.</a> Journal of Visualized Experiments. (133), (2018).</li><li>Nilsson, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+a+Comprehensive+Sex+Steroid+Profile+in+Rodent+Serum+by+High-Sensitive+Gas+Chromatography-Tandem+Mass+Spectrometry.">Measurement of a Comprehensive Sex Steroid Profile in Rodent Serum by High-Sensitive Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry.</a> Endocrinology. 156 (7), (2015).</li><li>McNamara, K. M., Harwood, D. T., Simanainen, U., Walters, K. A., Jimenez, M., Handelsman, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+sex+steroids+in+murine+blood+and+reproductive+tissues+by+liquid+chromatography-tandem+mass+spectrometry.">Measurement of sex steroids in murine blood and reproductive tissues by liquid chromatography-tandem mass spectrometry.</a> J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 121 (3-5), 611-618 (2010).</li><li>Klein, S. L., Bird, B. H., Glass, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+Seoul+virus+infection+are+not+related+to+adult+sex+steroid+concentrations+in+Norway+rats.">Sex differences in Seoul virus infection are not related to adult sex steroid concentrations in Norway rats.</a> J. Virol. 74 (17), 8213-8217 (2000).</li><li>Siracusa, M. C., Overstreet, M. G., Housseau, F., Scott, A. L., Klein, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17beta-estradiol+alters+the+activity+of+conventional+and+IFN-producing+killer+dendritic+cells.">17beta-estradiol alters the activity of conventional and IFN-producing killer dendritic cells.</a> J. Immunol. 180 (3), 1423-1431 (2008).</li></ol>

Hyperandrogenism은 PCOS의 핵심 기능입니다. 혈 청 DHT (두 배 높은 아니 DHT 마우스에 비해 DHT 쥐)이이 프로토콜에 사용 되는 이전 연구에서 다른 조사자에 의해 보고 그 보다 낮은 및 비례 PCOS5,19, 여성 모방을 보정 20,21. 다른 모델과 달리이 2-fold DHT 모델 몸 무게와 DHT 삽입23,<sup clas...

Hyperandrogenism 안 드로 겐 과잉 및 PCOS (애 PCOS) 사회와 NIH 기준에 따라 polycystic 난소 증후군 (PCOS)의 특징 이다. PCOS 가진 여자 임신 어려움이 있고 임신 합병증1의 위험을 증가 했다. 그들은 임신 하는 경우에 그들의 여성 자손 불리 한 건강 결과2,3있다. 다양 한 전략4,5,6,7,,89,10,11 을 사용 하 여 동물 모델 개발 되었습니다. , 12 그리고 체중 증가와 비만 확장된 adipocyte 크기 및 증가 체형 무게와 관련 된 (무 배 란, 나 장애인된 포도 당 및 인슐린 내성) PCOS의 많은 기능을 전시. PCOS를 공부 하는 데 사용 되는 동물 모델을 생산 하는 두 가지 주요 전략을 확인 하 고 있습니다. 하나는 출생13후 높은 수준의 androgens 직접 (외 인 안 드로 겐 주입/삽입) 또는 직접 (예: 안 드로 겐 변환할 aromatase 억제제와 에스트로겐 차단) 치료입니다. 다른 연구는 자손을 임신14,15 동안 androgens의 태아 hyperexposure입니다. 예를 들어 붉은 털 원숭이16,17, 양18, 그리고 자궁내 기간 안 드로 겐의 남성 수준에 노출 하는 설치류에서 여성 자손 PCOS 같은 특성 나중에 인생에서에서 개발. 이 모델은 크게 높은 안 드로 겐 효과, 그리고 태아 프로그래밍, 그리고 자 궁 환경에 미치는 영향에 대 한 우리의 이해를 향상. 그러나,이 모델은 그들의 자신의 제한: 1) 동물 개발 비만 이며 따라서 어려운 비만 유발 생식과 대사 부전;에서 hyperandrogenemia의 효과 분리 하 2) 하기 전에 임신 PCOS 가진 여자는 이미 안 드로 겐의 상부를 전시, 따라서 oocytes 수정; 전에 초과 androgen에 노출 되었을 3) 스토 (T) 또는 dihydrotestosterone (DHT) 출생 후 또는 임신 중 사용의 약리학 복용량 PCOS의 안 드로 겐 환경을 반영 되지 않을 수 있습니다. 난소 follicular 액체 또는 혈 청에서 측정 되었습니다 테 스토 테 론과 DHT 수치가 되며 남성 호르몬 DHT 수준과 PCOS5,,1920,21 여성에서 더 높은 1.5 3.9 배 ,,2223 영향을 받지 않는 여성에 비해. 우리는 성인 마우스 모델23,24,25 의 4 m m 길이와 펠 릿의 삽입에서 만성 DHT 노출의 개시의 2 주 이내 생식 및 대사 기능 장애를 개발 하 고 만든 크리스탈 DHT 분말 (펠 릿의 총 길이 8 m m). 이 모델 DHT 치료 없이 통제 쥐 보다 2-fold 높은 (2xDHT 라고도 함)에 대 한 혈 청 DHT 수준을 생성 합니다. 2xDHT 마우스 기저 혈 청 estradiol, 남성 호르몬, LH의 변경을 전시 하지 않습니다 하지 비만, 개발 하 고 유사한 난소 무게, 콜레스테롤, 자유로운 지방산, leptin의 혈 청 수준 표시 TNFα과 일리노이-623,24, 25 상대적으로 제어도 최대 3.5 개월 DHT 삽입23,,2425후. 또한, 이미 PCOS의 기능 개발 여성 짝짓기, 우리 자손15의 대사 및 생식 건강에 hyperandrogenic 모성 환경의 영향을 공부할 수 있습니다.
이 새로운 패러다임 (NIH와 AE PCOS 사회 기준에 관련 된)는 상대적으로 비슷한 수준의 androgens 그 여자와 PCOS 2-3 더 높은 남성 호르몬에 영향을 받지 않는 여성에 비해 DHT 수치를 생산 하 여 질병을 모델링 합니다. 그러나,이 모델은 유지 지속적인 exogenous DHT에 의해 프로그래밍 된 생 hyperandrogenism에서 DHT 철회 되 면. 이 글의 전반적인 목표 1에 초점을 하는) 어떻게 DHT 펠 릿; 2) 마우스 모델; 처럼 엎드려 서 PCOS를 생성 하는 방법 3)이이 댐에서 여성 자손을 평가 하는 전략. 다른 측정 및 고기의 평가이 원고에서 해결 되지 않습니다 하지만5,15,23,,2425,26에서 찾을 수 있습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:908px;" width="909">
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:243px;">Crystalline 5&#945;-DHT powder&#160;</td>
			<td style="width:135px;">&#160;Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">A8380-1G</td>
			<td style="width:412px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:243px;">Dow Corning Silastic tubing</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">11-189-15D</td>
			<td>0.04in/1mm inner diameter x0.085in/2.15mm outer diameter</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Medical adhesive silicone</td>
			<td style="width:135px;">&#160;Factor II, InC.</td>
			<td style="width:119px;">&#160;A-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Goggles, lab coats, gloves and masks.</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;10 &#181;L pipette tips without filter</td>
			<td style="width:135px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:119px;">11113700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Microscope slide for smear</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">12-550-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Diff Quik for staining cells</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">NC9979740</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160; Lancet</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">NC9416572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">3 mL Syring&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Becton, Dickinson and Company (BD),</td>
			<td style="width:119px;">30985</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;attached needle: 20G</td>
			<td style="width:135px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">&#160;Ruler: any length than 10cm with milimeter scale.&#160;</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Xylazine&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Vet one AnnSeA LA, MWI, Boise</td>
			<td style="width:119px;">NDC13985-704-10</td>
			<td>100mg/ml</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Ketamine Hydrochloride</td>
			<td style="width:135px;">Hospira, Inc</td>
			<td style="width:119px;">NDC 0409-2051-05</td>
			<td>100mg/ml</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">&#160;Surgical staple</td>
			<td style="width:135px;">&#160;AutoClip&#174; System, Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;Insulin syringe</td>
			<td style="width:135px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">329461</td>
			<td>1/2 CC, low dose U-100 insulin syringe</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">&#160;Trochar&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Innovative Research of America</td>
			<td style="width:119px;">MP-182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Microscope</td>
			<td style="width:135px;">Carl Zeiss Primo Star</td>
			<td style="width:119px;">415500-0010-001</td>
			<td>Germany</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Ear punch</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">13-812-201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Testosterone rat/mouse ELISA kit</td>
			<td style="width:135px;">IBL</td>
			<td style="width:119px;">B79174</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">DHT ELISA kit</td>
			<td style="width:135px;">Alpha Diagnostic International</td>
			<td style="width:119px;">1940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">One touch ultra glucometer</td>
			<td>Life Scan, Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">One touch ultra test stripes</td>
			<td>Life Scan, Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Eppendorf tube</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/eppendorf-snap-cap-microcentrifuge-safe-lock-tubes-24/0540218?keyword=true">05-402-18</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Razor blade</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td>12-640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Clidox</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/clidox-s-base-4x1gal/nc0089321#?keyword=true">NC0089321</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">surgical underpad</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td>50587953</td>
			<td align="left"><img alt="Supplier Diversity Partner" height="13" src="file:///C:/Users/Tim/AppData/Local/Packages/oice_16_974fa576_32c1d314_e42/AC/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image002.png" width="25" />
			<table cellpadding="0" cellspacing="0">
				<tbody>
					<tr>
						<td height="21" style="height:21px;width:412px;">Manufacturer:&#160; Andwin Scientific&#160;56616018</td>
					</tr>
				</tbody>
			</table>
			</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Betadine Antiseptic Solution</td>
			<td style="width:135px;">Walgreens</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">3M Vetbond (n-butyl cyanoacrylate)</td>
			<td style="width:135px;">3M Science. Applied to Life</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Animal tattoo ink paste</td>
			<td style="width:135px;">Ketchum manufacturing Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Brockville, Ontario, Canada</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Scale</td>
			<td style="width:135px;">Ohaus Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">HH120D</td>
			<td>Pine Brook, NJ</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Electronic digital caliper</td>
			<td style="width:135px;">NEIKO Tools USA</td>
			<td style="width:119px;">01407A</td>
			<td>available from Amazon</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a hyperandrogenic mouse model to study polycystic ovary syndrome

Hyperandrogenemia 여성에서 생식 및 대사 기능에 중요 한 역할을 담당 하 고 다낭 성 난소 증후군의 특징 이다. PCOS 가진 여자를 모방 하는 마른 PCOS 같은 마우스 모델을 개발 하는 것은 임상적으로 의미가 있습니다. 이 프로토콜에서 우리는 이러한 모델을 설명합니다. DHT (dihydrotestosterone) 크리스탈 분말 펠 릿의 4mm 길이 삽입 하 여 (펠 릿의 총 길이 8 m m), 매월 교체, 하지 DHT (no-DHT)으로 이식 하는 쥐 보다 더 높은 혈 청 DHT 레벨 2 배와 PCOS 같은 마우스 모델을 생성할 수 있습니다. 우리는 체중과 신체 구성을 변경 하지 않고 생식 및 대사 장애를 관찰. 불모의 높은 학위를 전시, 이러한 PCOS 같은 여성 쥐의 작은 하위 집합 임신 얻을 수 그들의 자손 성인 지연된 사춘기 및 증가 남성 호르몬을 표시 하는 동안에. 이 PCOS 같은 마른 마우스 모델 PCOS와 이러한 PCOS 같은 댐에서 자손의 이상 공부를 유용한 도구입니다.

혈 청 DHT 수준 및 포도 당 내성 검사
DHT 수준은 측정 했다 수집 된 혈 청에서 두 ELISA와 LC-MS 프로토콜 1.24-1.25, 그리고 2.9, 3.0. 그러나 DHT 절대 값은 질량 분석 및 ELISA,, DHT 대 아니 DHT 삽입 두 분석에서 유사 이며 전체 실험15,,2324 ( 의 상대 배 (약 2...

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A Hyperandrogenic Mouse Model to Study Polycystic Ovary Syndrome

우리는 PCOS와 이러한 PCOS 같은 댐에서 자손의 이상 공부 dihydrotestosterone 펠 릿 마른 PCOS 같은 마우스 모델의 개발을 설명 합니다.

Polycystic 난소 증후군 연구 Hyperandrogenic 마우스 모델

Hyperandrogenemia plays a critical role in reproductive and metabolic function in females and is the hallmark of polycystic ovary syndrome. Developing a ...

이 방법은 재생 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 그리고 내분비학. 그리고 다낭성 난소 증후군 또는 PCOS 및 hyperandrogenism의 연구에 적용 할 수 있습니다.이 기술의 장점은 비용이 많이 드는 효과적인 방법으로 호르몬의 일관된, 균일한, 장기 방출을 용이하게한다는 것입니다. 절차를 치료하는 JHUs는 내 실험실에서 기술자 인 Ping Xue가 될 것입니다. 디하이드로테스토스테론 또는 DHT 펠릿 준비를 위해 면도날을 사용하여 15mm 크기의 실리콘 튜브를 자른다.또한 무딘 20 게이지 바늘이 장착된 3밀리리터 주사기를 사용하여 2~5밀리미터의 의료용 접착제 실리콘을 튜브의 한쪽 끝에 주입합니다. 하룻밤 사이에 튜브를 건조시키십시오. 그리고 밀봉 된 끝에 기포를 확인합니다.적절한 개인 보호 장비를 착용하면 흐름이 플라스틱 웨이보트에 DHT 분말을 붓습니다. 접착제 캡 튜브의 열린 끝을 파우더에 감동. 큰 스트레이트 페이퍼 클립을 사용하여, DHT가 적절한 실험 깊이에 도달 할 때까지, 튜브에 분말을 탬핑.그런 다음 하룻밤 동안 실리콘으로 튜브의 열린 측면을 밀봉합니다. 다음 날 아침, DHT양쪽에 2밀리미터 길이의 실리콘을 얻기 위해 밀봉된 측면을 잘라내고 DHT 제어 펠릿을 분리하지 않았다. 그런 다음 펠릿을 실온에서 호일로 감싸는 50 밀리리터 원내 튜브에 최대 3개월 동안 보관하십시오.PCOS 마우스 모델 생성의 경우 최대 20개의 DHT 또는 대조군 펠릿을 별도의 50밀리리터 원물 튜브에 함유하고 있으며 37°C에서 24시간 동안 0.9% 식염수의 30밀리리터를 함유하고 있습니다. 다음 날, 마취 된 2 개월 된 여성 마우스에서 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인하고 순차적 포비도네 요오드및 70 % 에티놀 스크럽을 수술 부위에 투여하기 위해 멸균 거즈를 사용합니다. 다음으로 목 근처의 피부를 통해 5밀리미터 절개를 합니다.그리고 10 게이지 트로카를 사용하여 장밋빛 방향으로 15mm 터널을 만듭니다. 트로카를 사용하여 펠릿을 터널에 삽입하고 수술 접착제로 절개를 밀봉하십시오. 손동포면으로 상처 가장자리를 수동으로 근사화하고 부드러운 칫솔질 스트로크를 사용하여 상대상처 가장자리의 각 면에서 1센티미터 떨어진 액체 접착제의 세 개의 박막 층을 적용합니다.그런 다음 마우스를 열 패드에 케이지에 혼자 두면 전체 재조정이 있을 때까지 모니터링합니다. 안드로겐 노출의 일정한 수준을 유지하기 위해 4 주마다 펠릿을 교체. 펠릿 삽입 3일 후, p10 파이펫을 사용하여 멸균 식염수 10마이크로리터를 질 구멍에 분출하고 파이펫 팁을 사용하여 식염수를 즉시 회수합니다.질 세포 식염수 샘플을 표지된 슬라이드에 퍼감습니다. 그리고 식염수들이 실온에서 건조하도록 합니다. 말린 슬라이드를 100% 에티놀의 용기에 5분 이상 고정합니다.그런 다음 슬라이드를 버퍼 B로 1분 동안 염색하고 DIF 빠른 염색 키트에서 C를 버퍼링합니다. 완충C인큐베이션의 끝에서 는 슬라이드를 수돗물로 3초 동안 세척하고 실온에서 건조시다. 경현미경의 10배 목표 하에서 슬라이드를 볼 수 있는 에스스트러스 사이클리시티를 결정한다.각 단계의 일수를 계산하고 각 단계에서 백분율 시간을 계산하기 위해 총 일수로 나눕니다. 포도당 내성을 테스트하기 위해, 20 일 DHT 삽입, 하룻밤 마우스를 빨리. 다음 아침 마우스의 무게를 측정하고, 꼬리 정맥 혈액의 바질 포도당 수준을 측정하기 위해 글루코프터와 테스트 스트립을 사용합니다.20%의 덱스트로스트로즈의 킬로그램 당 2 그램의 마우스를 주입하십시오. 그런 다음 15, 30, 60, 90, 120 분 후 덱스트로스 투여에서 꼬리 정맥 혈액 샘플의 포도당 수준을 측정합니다. DHT 삽입 된 여자에서 여성 자손을 취득하려면, 펠릿 삽입 다음 15 일에 입증 된 비옥한 남성과 케이지에서 테스트하는 여성 마우스를 이동합니다.마우스가 임신여부를 결정하기 위해 매주 여성의 체중을 문서화합니다. 산후 7일째에, 랜싯 팁을 문신 페이스트에 담그고 발가락에 문신으로 각 새끼를 표시하십시오. 70일까지 7일마다 표시된 마우스의 무게를 측정합니다.산후 날짜 12에서 16 사이, 귀는 그림에 도시된 바와 같이 시스템에 따라 그(것)들을 번호하는 마우스를 펀치합니다. 성별을 구별하려면 태그가 지정된 각 마우스의 복부 면을 검사합니다. 암컷은 눈에 보이는 젖꼭지를 가질 것입니다.다양한 다운스트림 분석을 위한 혈액 샘플을 수집하기 위하여는 하부 정맥 출혈에 의해 9와 10 am 사이 혈액의 대략적인 실험적인 양을 수집하는 랜싯을 이용합니다. 그리고 세럼 수집을 허용하기 위해 샘플을 원심 분리합니다. 그런 다음 혈청 샘플을 분석 할 때까지 섭씨 영하 80도에서 1.5 밀리리터 미세 원심 분리 튜브에 저장합니다.DHT 여성 자손의 사춘기를 평가하기 위해, 산후 21일에 짜낸 후 매일, 육안 검사에 의하여 질 개구부를 확인하십시오. 그리고 구경을 사용하여 아노 생식기 거리를 측정하십시오. 혈청 DHT의 절대 값은 질량 분석과 엘리사 분석 사이에 다르지만 DHT대 DHT 삽입의 상대적 포크 변화는 분석과 실험 전반에 걸쳐 유사합니다.DHT 수준은 DHT와 노 DHT 마우스 모두에서 임신을 통해 임신전에서 크게 증가한다. 그러나, DHT 수준은 전 개념화 및 임신 시간 지점에서 DHT 마우스가 없는 것과 비교하여 DHT 마우스에서 2배 더 높습니다. 성인 DHT 딸은 생식 기능에 있는 다름을 전시합니다.예를 들어, 자궁 에서 상당히 긴 시간을 경험 하는 성인 NO DHT 딸에 비해 심 즙이 많은 사이클리시티를 중단 하 고 프로 에스테우스와 에스테르에서 더 적은 시간. 이 절차를 시도하는 동안 그들은 호르몬의 균일 한 방출에 사용 되기 전에 24 시간 동안 펠 릿을 배양 하는 것을 기억 하는 것이 중요 하다. 이 절차에 따라, DHT 노출의 생식 및 신진 대사 결과 또한 검사될 수 있습니다.그것은 개발 후, 이 기술 PCOS와 여성 마우스에 낮은 수준의 hyperandrogenism의 영향을 공부 하는 엔로크로노학 및 모계 태아 상호 작용의 분야에서 연구원에 대 한 길을 포장. DHT와 함께 일하는 것은 매우 위험할 수 있으며 장갑과 마스크및 고글을 착용하고 바이오 안전 후드에서 작업하는 것과 같은 예방 조치는 항상 이 절차를 수행하는 동안 취해야 합니다.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generating CRISPR/Cas9 Mediated Monoallelic Deletions to Study Enhancer Function in Mouse Embryonic Stem Cells

생성 CRISPR은 / Cas9 중재 Monoallelic 삭제할 경우는 마우스 배아 줄기 세포의 증강 기능을 연구하는

Enhancers control cell identity by regulating tissue-specific gene expression in a position and orientation independent manner. These enhancers are often ...

연구

발생학

Isolation and Characterization of Primary Rat Valve Interstitial Cells: A New Model to Study Aortic Valve Calcification

절연 및 기본 쥐의 밸브 중간 세포: 관상동맥 밸브 석 회화를 공부 하는 새로운 모델

Calcific aortic valve disease (CAVD) is characterized by the progressive thickening of the aortic valve leaflets. It is a condition frequently found in ...

Whole-mount Confocal Microscopy for Adult Ear Skin: A Model System to Study Neuro-vascular Branching Morphogenesis and Immune Cell Distribution

성인 귀 피부에 대 한 전체 실장 Confocal 현미경 검사 법: 신경-혈관 분기 Morphogenesis 및 면역 세포 분포를 연구 하는 모델 시스템

Here, we present a protocol of a whole-mount adult ear skin imaging technique to study comprehensive three-dimensional neuro-vascular branching ...

Organotypic Culture Method to Study the Development Of Embryonic Chicken Tissues

Organotypic 문화 메서드 배아 치킨 조직 개발 연구를

The embryonic chicken is commonly used as a reliable model organism for vertebrate development. Its accessibility and short incubation period makes it ...

Ovarian Tissue Culture to Visualize Phenomena in Mouse Ovary

난소 조직 문화 현상을 마우스 난소에서 시각화 하

Mammalian females periodically ovulate an almost constant number of oocytes during each estrus cycle. To sustain such regularity and periodicity, ...

A Mouse Distraction Osteogenesis Model

마우스 산만 골 모델

Distraction osteogenesis (DO) is a surgical procedure that involves skeletal tissue regeneration without cell transplantation. A DO model consists of the ...

Use of Hematopoietic Stem Cell Transplantation to Assess the Origin of Myelodysplastic Syndrome

조 혈 줄기 세포 이식 Myelodysplastic 증후군의 평가에 사용

Myelodysplastic syndromes (MDS) are a diverse group of hematopoietic stem cell disorders that are defined by ineffective hematopoiesis, peripheral blood ...

An In Vitro Model of a Parallel-Plate Perfusion System to Study Bacterial Adherence to Graft Tissues

An In Vitro Model of a Parallel-Plate Perfusion System to Study Bacterial Adherence to Graft Tissues

연구 조직 이식에 세균성 부착을 병렬 플레이트 관류 시스템의 생체 외에서 모델

Various valved conduits and stent-mounted valves are used for right ventricular outflow tract (RVOT) valve replacement in patients with congenital heart ...

An In Vivo Method to Study Mouse Blood-Testis Barrier Integrity

An In Vivo Method to Study Mouse Blood-Testis Barrier Integrity

Vivo에서 하는 방법 마우스 혈액 고환 방 벽 완전성을 공부

Spermatogenesis is the development of spermatogonia into mature spermatozoa in the seminiferous tubules of the testis. This process is supported by ...

Adult Mouse Digit Amputation and Regeneration: A Simple Model to Investigate Mammalian Blastema Formation and Intramembranous Ossification

성인 마우스 숫자 절단 및 재생 : 포유류 블라스터 마 형성 및 intramembranous Ossification을 조사하는 간단한 모델

Here, we present a protocol of adult mouse distal terminal phalanx (P3) amputation, a procedurally simple and reproducible mammalian model of epimorphic ...