Name: a hyperandrogenic mouse model to study polycystic ovary syndrome
Uploaded: 2018-10-02T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Hyperandrogenic Mouse Model to Study Polycystic Ovary Syndrome at JoVE.com

Bu eser Ulusal Sağlık Enstitüleri (hibe S.W. için R00-HD068130) ve Baltimore diyabet araştırma merkezi tarafından desteklenmiştir: pilotlar ve fizibilite Grant (için S.W.).

Burada, detaylı protokol DHT Pelet hazırlık ve ekleme ve üreme ve metabolik testleri için mevcut. Bu çalışmada kullanılan fare karışık bir arka plan (C57/B6, CD1, 129Sv) olduğunu ve gıda ile muhafaza ve ad libitum Broadway araştırma bina hayvan tesiste Johns Hopkins Üniversitesi School of 24 ° c 14/10 h açık/koyu döngüsünde su Tıp. Tüm yordamları Johns Hopkins Üniversitesi hayvan bakım ve kullanım Komitesi tarafından kabul edildi.
1. PCOS benzer fare modeli...

<ol>
	<li>Palomba, S., de Wilde, M. A., Falbo, A., Koster, M. P., La Sala, G. B., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+complications+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome.">Pregnancy complications in women with polycystic ovary syndrome.</a> Hum. Reprod. Update. 21 (5), 575-592 (2015).</li><li>Doherty, D. A., Newnham, J. P., Bower, C., Hart, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+polycystic+ovary+syndrome+for+pregnancy+and+for+the+health+of+offspring.">Implications of polycystic ovary syndrome for pregnancy and for the health of offspring.</a> Obstet. Gynecol. 125 (6), 1397-1406 (2015).</li><li>de Wilde, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+and+Metabolic+Health+of+74+Children+From+Women+Previously+Diagnosed+With+Polycystic+Ovary+Syndrome+in+Comparison+With+a+Population-Based+Reference+Cohort.">Cardiovascular and Metabolic Health of 74 Children From Women Previously Diagnosed With Polycystic Ovary Syndrome in Comparison With a Population-Based Reference Cohort.</a> Reprod. Sci. , (2018).</li><li>Caldwell, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+reproductive,+metabolic,+and+endocrine+features+of+polycystic+ovary+syndrome+in+female+hyperandrogenic+mouse+models.">Characterization of reproductive, metabolic, and endocrine features of polycystic ovary syndrome in female hyperandrogenic mouse models.</a> Endocrinology. 155 (8), 3146-3159 (2014).</li><li>van Houten, E. L., Kramer, P., McLuskey, A., Karels, B., Themmen, A. P., Visser, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproductive+and+metabolic+phenotype+of+a+mouse+model+of+PCOS.">Reproductive and metabolic phenotype of a mouse model of PCOS.</a> Endocrinology. 153 (6), 2861-2869 (2012).</li><li>Cardoso, R. C., Puttabyatappa, M., Padmanabhan, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroidogenic+versus+Metabolic+Programming+of+Reproductive+Neuroendocrine,+Ovarian+and+Metabolic+Dysfunctions.">Steroidogenic versus Metabolic Programming of Reproductive Neuroendocrine, Ovarian and Metabolic Dysfunctions.</a> Neuroendocrinology. 102 (3), 226-237 (2015).</li><li>Dumesic, D. A., Abbott, D. H., Padmanabhan, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polycystic+ovary+syndrome+and+its+developmental+origins.">Polycystic ovary syndrome and its developmental origins.</a> Rev. Endocr. Metab Disord. 8 (2), 127-141 (2007).</li><li>Kauffman, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Letrozole+Model+Recapitulates+Both+the+Reproductive+and+Metabolic+Phenotypes+of+Polycystic+Ovary+Syndrome+in+Female+Mice.">A Novel Letrozole Model Recapitulates Both the Reproductive and Metabolic Phenotypes of Polycystic Ovary Syndrome in Female Mice.</a> Biol Reprod. 93 (3), 69 (2015).</li><li>Kelley, S. T., Skarra, D. V., Rivera, A. J., Thackray, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Gut+Microbiome+Is+Altered+in+a+Letrozole-Induced+Mouse+Model+of+Polycystic+Ovary+Syndrome.">The Gut Microbiome Is Altered in a Letrozole-Induced Mouse Model of Polycystic Ovary Syndrome.</a> PLoS One. 11 (1), e0146509 (2016).</li><li>Kafali, H., Iriadam, M., Ozardali, I., Demir, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Letrozole-induced+polycystic+ovaries+in+the+rat:+a+new+model+for+cystic+ovarian+disease.">Letrozole-induced polycystic ovaries in the rat: a new model for cystic ovarian disease.</a> Arch. Med. Res. 35 (2), 103-108 (2004).</li><li>Maliqueo, M., Benrick, A., Stener-Victorin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+polycystic+ovary+syndrome:+phenotypic+presentation,+pathophysiology,+and+the+effects+of+different+interventions.">Rodent models of polycystic ovary syndrome: phenotypic presentation, pathophysiology, and the effects of different interventions.</a> Semin. Reprod. Med. 32 (3), 183-193 (2014).</li><li>Yanes, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular-renal+and+metabolic+characterization+of+a+rat+model+of+polycystic+ovary+syndrome.">Cardiovascular-renal and metabolic characterization of a rat model of polycystic ovary syndrome.</a> Gend. Med. 8 (2), 103-115 (2011).</li><li>Kauffman, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Letrozole+Model+Recapitulates+Both+the+Reproductive+and+Metabolic+Phenotypes+of+Polycystic+Ovary+Syndrome+in+Female+Mice.">A Novel Letrozole Model Recapitulates Both the Reproductive and Metabolic Phenotypes of Polycystic Ovary Syndrome in Female Mice.</a> Biol. Reprod. 93 (3), 69 (2015).</li><li>Filippou, P., Homburg, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+foetal+hyperexposure+to+androgens+a+cause+of+PCOS?.">Is foetal hyperexposure to androgens a cause of PCOS?.</a> Hum. Reprod. Update. 23 (4), 421-432 (2017).</li><li>Wang, Z., Shen, M., Xue, P., DiVall, S. A., Segars, J., Wu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+Offspring+From+Chronic+Hyperandrogenemic+Dams+Exhibit+Delayed+Puberty+and+Impaired+Ovarian+Reserve.">Female Offspring From Chronic Hyperandrogenemic Dams Exhibit Delayed Puberty and Impaired Ovarian Reserve.</a> Endocrinology. 159 (2), 1242-1252 (2018).</li><li>Abbott, D. H., Barnett, D. K., Bruns, C. M., Dumesic, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Androgen+excess+fetal+programming+of+female+reproduction:+a+developmental+aetiology+for+polycystic+ovary+syndrome?.">Androgen excess fetal programming of female reproduction: a developmental aetiology for polycystic ovary syndrome?.</a> Hum. Reprod. Update. 11 (4), 357-374 (2005).</li><li>Abbott, D. H., Dumesic, D. A., Franks, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+origin+of+polycystic+ovary+syndrome+-+a+hypothesis.">Developmental origin of polycystic ovary syndrome - a hypothesis.</a> J. Endocrinol. 174 (1), 1-5 (2002).</li><li>Padmanabhan, V., Veiga-Lopez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sheep+models+of+polycystic+ovary+syndrome+phenotype.">Sheep models of polycystic ovary syndrome phenotype.</a> Mol. Cell. Endocrinology. 373 (1-2), 8-20 (2013).</li><li>Pierre, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysregulation+of+the+Anti-Mullerian+Hormone+System+by+Steroids+in+Women+With+Polycystic+Ovary+Syndrome.">Dysregulation of the Anti-Mullerian Hormone System by Steroids in Women With Polycystic Ovary Syndrome.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 102 (11), (2017).</li><li>Dumesic, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperandrogenism+Accompanies+Increased+Intra-Abdominal+Fat+Storage+in+Normal+Weight+Polycystic+Ovary+Syndrome+Women.">Hyperandrogenism Accompanies Increased Intra-Abdominal Fat Storage in Normal Weight Polycystic Ovary Syndrome Women.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 101 (11), 4178-4188 (2016).</li><li>Fassnacht, M., Schlenz, N., Schneider, S. B., Wudy, S. A., Allolio, B., Arlt, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beyond+adrenal+and+ovarian+androgen+generation:+Increased+peripheral+5+alpha-reductase+activity+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome.">Beyond adrenal and ovarian androgen generation: Increased peripheral 5 alpha-reductase activity in women with polycystic ovary syndrome.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 88 (6), 2760-2766 (2003).</li><li>Dikensoy, E., Balat, O., Pence, S., Akcali, C., Cicek, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+risk+of+hepatotoxicity+during+long-term+and+low-dose+flutamide+treatment+in+hirsutism.">The risk of hepatotoxicity during long-term and low-dose flutamide treatment in hirsutism.</a> Arch. Gynecol. Obstet. 279 (3), 321-327 (2009).</li><li>Ma, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Androgen+Receptor+in+the+Ovary+Theca+Cells+Plays+a+Critical+Role+in+Androgen-Induced+Reproductive+Dysfunction.">Androgen Receptor in the Ovary Theca Cells Plays a Critical Role in Androgen-Induced Reproductive Dysfunction.</a> Endocrinology. , en20161608 (2016).</li><li>Andrisse, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+Dose+Dihydrotestosterone+Drives+Metabolic+Dysfunction+via+Cytosolic+and+Nuclear+Hepatic+Androgen+Receptor+Mechanisms.">Low Dose Dihydrotestosterone Drives Metabolic Dysfunction via Cytosolic and Nuclear Hepatic Androgen Receptor Mechanisms.</a> Endocrinology. , en20161553 (2016).</li><li>Andrisse, S., Billings, K., Xue, P., Wu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+signaling+displayed+a+differential+tissue-specific+response+to+low-dose+dihydrotestosterone+in+female+mice.">Insulin signaling displayed a differential tissue-specific response to low-dose dihydrotestosterone in female mice.</a> Am. J. Physiol.Endocrinol. Metab. 314 (4), E353-E365 (2018).</li><li>van Houten, E. L., Visser, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+to+study+polycystic+ovary+syndrome:+a+possible+link+between+metabolism+and+ovarian+function?.">Mouse models to study polycystic ovary syndrome: a possible link between metabolism and ovarian function?.</a> Reprod. Biol. 14 (1), 32-43 (2014).</li><li>Caligioni, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+reproductive+status/stages+in+mice.">Assessing reproductive status/stages in mice.</a> Curr. Protoc. Neurosci. , (2009).</li><li>Wu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+knockout+of+the+androgen+receptor+in+gonadotropes+reveals+crucial+roles+for+androgen+in+gonadotropin+synthesis+and+surge+in+female+mice.">Conditional knockout of the androgen receptor in gonadotropes reveals crucial roles for androgen in gonadotropin synthesis and surge in female mice.</a> Mol. Endocrinol. 28 (10), 1670-1681 (2014).</li><li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL/6J+mice:+I.+Cycle+frequency,+length+and+vaginal+cytology.">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biol. Reprod. 27 (2), 327-339 (1982).</li><li>Dinger, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+Glucose+Tolerance+Test,+Measurement+of+Lung+Function,+and+Fixation+of+the+Lung+to+Study+the+Impact+of+Obesity+and+Impaired+Metabolism+on+Pulmonary+Outcomes.">Intraperitoneal Glucose Tolerance Test, Measurement of Lung Function, and Fixation of the Lung to Study the Impact of Obesity and Impaired Metabolism on Pulmonary Outcomes.</a> Journal of Visualized Experiments. (133), (2018).</li><li>Nilsson, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+a+Comprehensive+Sex+Steroid+Profile+in+Rodent+Serum+by+High-Sensitive+Gas+Chromatography-Tandem+Mass+Spectrometry.">Measurement of a Comprehensive Sex Steroid Profile in Rodent Serum by High-Sensitive Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry.</a> Endocrinology. 156 (7), (2015).</li><li>McNamara, K. M., Harwood, D. T., Simanainen, U., Walters, K. A., Jimenez, M., Handelsman, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+sex+steroids+in+murine+blood+and+reproductive+tissues+by+liquid+chromatography-tandem+mass+spectrometry.">Measurement of sex steroids in murine blood and reproductive tissues by liquid chromatography-tandem mass spectrometry.</a> J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 121 (3-5), 611-618 (2010).</li><li>Klein, S. L., Bird, B. H., Glass, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+Seoul+virus+infection+are+not+related+to+adult+sex+steroid+concentrations+in+Norway+rats.">Sex differences in Seoul virus infection are not related to adult sex steroid concentrations in Norway rats.</a> J. Virol. 74 (17), 8213-8217 (2000).</li><li>Siracusa, M. C., Overstreet, M. G., Housseau, F., Scott, A. L., Klein, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17beta-estradiol+alters+the+activity+of+conventional+and+IFN-producing+killer+dendritic+cells.">17beta-estradiol alters the activity of conventional and IFN-producing killer dendritic cells.</a> J. Immunol. 180 (3), 1423-1431 (2008).</li></ol>

Hyperandrogenism PCOS önemli bir özelliktir. Bu protokol için kullanılan (iki yüksek no-DHT farelerde DHT farelerde kat) serum DHT seviyeleri bu önceki çalışmalarda diğer müfettişler tarafından bildirilen daha düşüktür ve PCOS5,19kadınlarla orantılı olarak taklit etmek için kalibre, 20,21. Diğer modelleri farklı olarak, vücut ağırlığı ve 3.5 ay sonra DHT ekleme<sup...

Hyperandrogenism polikistik over sendromu (PCOS) NIH kriterleri göre ve androjen fazlalığı ve PCOS (AE-PCOS) toplumun özelliğimizdir. PCOS ile kadın hamile zorluk ve gebelik komplikasyonları1riski artmıştır. Onlar hamile bile, dişi yavrularını bir olumsuz sağlık sonuçları2,3var. Hayvan modelleri çeşitli stratejileri4,5,6,7,8,9,10,11 ile geliştirilmiş , 12 ve PCOS (anovulation, ve/veya bozulmuş glukoz ve insülin dayanıklılık) birçok özellikleri artan vücut ağırlığı ve genişlemiş adipocyte boyut ve artan adipocyte ağırlık ile ilişkili obezite ile sergilenmesi. PCOS incelemek için kullanılır hayvan modelleri üretmek için iki büyük strateji vardır. Doğum13den sonra tedavi androjenler doğrudan (eksojen androjen enjeksiyon/ekleme) ya da dolaylı olarak (örneğin, androjen dönüşüm için östrojen aromataz inhibitörü ile engelleme) düzeyi yüksek olan biri. Başka androjenler fetal hyperexposure tarafından gebelik14,15 sırasında belgili tanımlık çoluk çocuk incelemektir. Örneğin, al yanaklı maymun16,17, koyun18ve intrauterin dönemde androjen erkek düzeyde maruz kemirgenler dişi yavru sonraki hayatında PCOS benzeri özellikleri geliştirmek. Bu modeller önemli ölçüde yükseltilmiş androjen etkileri ve fetal programlama ve rahim çevresel etkileri bizim anlayış gelişmiş. Ancak, bu modeller kendi sınırlamaları vardır: 1) hayvanlar obezite geliştirmek ve bu nedenle indüklenen obezite üreme ve metabolik fonksiyon bozukluğu; hyperandrogenemia etkilerini ayırt etmek zordur 2) daha önce gebelik, kadın PCOS ile zaten androjen yüksek düzeyde sergi, böylece yumurta androjen fertilizasyon önce aşırı maruz kalmış; 3) farmakolojik dozlarda testosteron (T) veya doğumdan sonra veya gebelik sırasında kullanılan dihidrotestosteron (DHT) PCOS androjen ortamının yansıtmıyor olabilir. Yumurtalık foliküler sıvı ve/veya serum testosteron ve DHT seviyeleri ölçüldü ve 1.5-3,9 kat PCOS5,19,20,21 olan kadınlarda daha yüksek testosteron ve DHT seviyeleri ,22,23 etkilenmemiş kadınlara kıyasla. Üreme ve metabolik fonksiyon bozukluğu bir Pelet ekleme 4 mm uzunluğu ile kronik DHT maruz inisiyasyon iki hafta içinde gelişen bir yetişkin fare modeli23,24,25 yarattık Kristal DHT toz (Pelet toplam uzunluğu 8 mm'dir). Bu model hakkında (2xDHT anılacaktır) 2 kat daha yüksek serum DHT seviyeleri kontrol fareler DHT tedavi olmadan daha üretir. 2xDHT fareler değişiklik bazal serum östradiol, testosteron, LH ve sergi değil değil obezite geliştirmek ve benzer yumurtalık ağırlık, kolesterol, serbest yağ asitleri, leptin, serum düzeyleri göster TNFα ve Il-623,24, bile ilâ 3,5 ay sonra DHT ekleme23,24,25 25 göreli olarak denetler. Ayrıca, zaten PCOS özelliklerini geliştirdik dişiler çiftleşme tarafından15yavru bir hyperandrogenic anne tarafından çevre-metabolik ve üreme sağlığı üzerinde etkisini eğitim görebilirsiniz.
Bu yeni paradigma (NIH ve AE-PCOS toplum kriterlerine uygun) hastalık nispeten benzer bu kadınların androjenler ile PCOS 2 - 3 kat daha yüksek testosteron düzeylerini veya etkilenmemiş kadınlara kıyasla DHT seviyeleri üreterek modelleri. Bununla birlikte, DHT içine kapanık bir kez bu model programlanmış endojen hyperandrogenism değil ve sürekli eksojen DHT tarafından korunur. Bu makalede genel amacı 1 odaklanmaktır) nasıl DHT Pelet; 2) nasıl bir yalın PCOS gibi fare modeli oluşturmak için; 3) stratejileri bu barajlar gelen kadın çoluk çocuk değerlendirmek için. Diğer ölçümler ve fenotipleri değerlendirilmesi bu el yazması ele değil ama5,15,23,24,25,26içinde bulunabilir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:908px;" width="909">
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:243px;">Crystalline 5&#945;-DHT powder&#160;</td>
			<td style="width:135px;">&#160;Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">A8380-1G</td>
			<td style="width:412px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:243px;">Dow Corning Silastic tubing</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">11-189-15D</td>
			<td>0.04in/1mm inner diameter x0.085in/2.15mm outer diameter</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Medical adhesive silicone</td>
			<td style="width:135px;">&#160;Factor II, InC.</td>
			<td style="width:119px;">&#160;A-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Goggles, lab coats, gloves and masks.</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;10 &#181;L pipette tips without filter</td>
			<td style="width:135px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:119px;">11113700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Microscope slide for smear</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">12-550-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Diff Quik for staining cells</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">NC9979740</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160; Lancet</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">NC9416572</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">3 mL Syring&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Becton, Dickinson and Company (BD),</td>
			<td style="width:119px;">30985</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;attached needle: 20G</td>
			<td style="width:135px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">&#160;Ruler: any length than 10cm with milimeter scale.&#160;</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Xylazine&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Vet one AnnSeA LA, MWI, Boise</td>
			<td style="width:119px;">NDC13985-704-10</td>
			<td>100mg/ml</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Ketamine Hydrochloride</td>
			<td style="width:135px;">Hospira, Inc</td>
			<td style="width:119px;">NDC 0409-2051-05</td>
			<td>100mg/ml</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">&#160;Surgical staple</td>
			<td style="width:135px;">&#160;AutoClip&#174; System, Fine Science Tool</td>
			<td style="width:119px;">12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;Insulin syringe</td>
			<td style="width:135px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">329461</td>
			<td>1/2 CC, low dose U-100 insulin syringe</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">&#160;Trochar&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Innovative Research of America</td>
			<td style="width:119px;">MP-182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Microscope</td>
			<td style="width:135px;">Carl Zeiss Primo Star</td>
			<td style="width:119px;">415500-0010-001</td>
			<td>Germany</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Ear punch</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">13-812-201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Testosterone rat/mouse ELISA kit</td>
			<td style="width:135px;">IBL</td>
			<td style="width:119px;">B79174</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">DHT ELISA kit</td>
			<td style="width:135px;">Alpha Diagnostic International</td>
			<td style="width:119px;">1940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">One touch ultra glucometer</td>
			<td>Life Scan, Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">One touch ultra test stripes</td>
			<td>Life Scan, Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Eppendorf tube</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/eppendorf-snap-cap-microcentrifuge-safe-lock-tubes-24/0540218?keyword=true">05-402-18</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Razor blade</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td>12-640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Clidox</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td><a href="https://www.fishersci.com/shop/products/clidox-s-base-4x1gal/nc0089321#?keyword=true">NC0089321</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">surgical underpad</td>
			<td style="width:135px;">Fisher Scientific</td>
			<td>50587953</td>
			<td align="left"><img alt="Supplier Diversity Partner" height="13" src="file:///C:/Users/Tim/AppData/Local/Packages/oice_16_974fa576_32c1d314_e42/AC/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image002.png" width="25" />
			<table cellpadding="0" cellspacing="0">
				<tbody>
					<tr>
						<td height="21" style="height:21px;width:412px;">Manufacturer:&#160; Andwin Scientific&#160;56616018</td>
					</tr>
				</tbody>
			</table>
			</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Betadine Antiseptic Solution</td>
			<td style="width:135px;">Walgreens</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">3M Vetbond (n-butyl cyanoacrylate)</td>
			<td style="width:135px;">3M Science. Applied to Life</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Animal tattoo ink paste</td>
			<td style="width:135px;">Ketchum manufacturing Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Brockville, Ontario, Canada</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Scale</td>
			<td style="width:135px;">Ohaus Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">HH120D</td>
			<td>Pine Brook, NJ</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Electronic digital caliper</td>
			<td style="width:135px;">NEIKO Tools USA</td>
			<td style="width:119px;">01407A</td>
			<td>available from Amazon</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a hyperandrogenic mouse model to study polycystic ovary syndrome

Hyperandrogenemia kadın üreme ve metabolik işlevinde önemli bir rol oynar ve Polikistik over sendromu özelliğidir. PCOS kadınlarla taklit eden bir yalın PCOS gibi fare modeli geliştirmek klinik olarak anlamlı demektir. Bu protokol için böyle bir model açıklar. DHT (dihidrotestosteron) kristal toz Pelet 4 mm uzunluğunda ekleyerek (Pelet toplam uzunluğu ise 8 mm) ve aylık değiştirmek yerine, biz bir PCOS gibi fare modeli ile serum DHT seviyeleri 2 kat DHT (no-DHT) ile implante değil fareler daha yüksek üretmek mümkün. Biz üreme ve metabolik fonksiyon bozukluğu vücut ağırlığı ve vücut kompozisyonu değiştirmeden gözlenen. Süre kısırlık yüksek derecede sergilenmesi, küçük bir alt kümesi bu PCOS benzeri dişi fareler hamile kalabilir ve yavrularını gecikmeli ergenlik ve artan Testosteron yetişkin olarak gösterir. Bu PCOS benzer yalın fare modeli PCOS ve belgili tanımlık çoluk çocuk bu PCOS benzeri baraj üzerinden Patofizyoloji eğitim için yararlı bir araçtır.

Serum DHT seviyeleri ve glikoz tolerans testi
DHT seviyeleri toplanan serum her iki ELISA ve LC-MS tarafından ölçüldü protokolü 1,24-1,25 ve 2.9, 3.0 göre. DHT mutlak değerler farklı kütle spektrometresi ve ELISA, ancak, göreli kat no-DHT ekleme her iki deneyleri benzer ve genelinde15,23,24 ( deneyler DHT vs...

Watch this Scientific Journal Video about A Hyperandrogenic Mouse Model to Study Polycystic Ovary Syndrome at JoVE.com

A Hyperandrogenic Mouse Model to Study Polycystic Ovary Syndrome

Biz bir yalın PCOS gibi fare modeli ile PCOS ve belgili tanımlık çoluk çocuk bu PCOS benzeri baraj üzerinden Patofizyoloji çalışmaya dihidrotestosteron Pelet gelişimi tanımlamak.

Polikistik over sendromu çalışmaya Hyperandrogenic fare modeli

Hyperandrogenemia plays a critical role in reproductive and metabolic function in females and is the hallmark of polycystic ovary syndrome. Developing a ...

Bu yöntem, çoğaltma alanındaki anahtar soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Ve endokrinoloji. Polikistik Over Sendromu veya PKOS ve hiperandrojenizm çalışmaları için de geçerlidir.Bu tekniğin avantajı, pahalı etkili bir şekilde hormonların tutarlı, düzgün, uzun vadeli salınımını kolaylaştırıyor olmasıdır. Prosedürü tedavi eden JHUs Ping Xue, benim laboratuvar bir teknisyen olacaktır. Dihidrotestosteron veya DHT pelet hazırlama için, silikon boru 15 milimetrelik bir parça kesmek için bir jilet kullanın.Ve tüpün bir ucuna iki ila beş milimetrelik tıbbi yapışkan silikon enjekte etmek için körtilmiş 20 gauge iğne ile donatılmış üç mililitrelik şırınga kullanın. Tüpün bir gecede kurumasını bekleyin. Ve mühürlü ucunda hava kabarcıkları kontrol edin.Uygun kişisel koruyucu ekipman giyen akışiçinde plastik bir yol teknesi içine DHT tozu dökün. Yapışkan kapaklı tüpün açık ucunu tozun içine doğru etkileyin. Büyük bir düzleştirilmiş ataş kullanarak, DHT uygun deneysel derinliğe ulaşana kadar tozu boruya boşaltın.Sonra bir gecede silikon ile tüpün açılan tarafı mühür. Ertesi sabah, DHT'nin her iki tarafında iki milimetre uzunluğunda silikon elde etmek için her mühürlü tarafı kesin ve DHT kontrol peletleri yok. Daha sonra peletleri oda sıcaklığında folyo ile sarılmış 50 mililitrelik konik tüpte üç aya kadar saklayın.PCOS fare modeli üretimi için 20 DHT'ye kadar denge leyin veya 30 mililitrelik konik tüplerde 30 mililitrelik tuzlu su içeren ayrı 50 mililitrelik borularda 37 santigrat derecede 24 saat boyunca dengeleyin. Ertesi gün, anestezi iki aylık kadın fare de parmak çimdik yanıt eksikliği onaylamak ve cerrahi alana sıralı Povidon-iyot ve yüzde 70 ethynol scrubs yönetmek için steril gazlı bez kullanın. Sonra, boynuna yakın deriden beş milimetrelik bir kesik yapın.Ve 10 metrelik bir trocar kullanarak rostral yönde 15 milimetrelik bir tünel yapın. Tünele bir pelet dorsally eklemek ve cerrahi yapıştırıcı ile kesi mühür için trocar kullanın. Kopma kuvveti ile yara kenarlarını manuel olarak yaklaşın ve karşı yara kenarlarının her iki yanından bir santimetre ye üç ince sıvı yapıştırıcı katmanı uygulamak için nazik fırçalama vuruşları kullanın.Sonra tam recumbency kadar izleme ile bir ısı yastığı üzerinde bir kafeste tek başına fare yerleştirin. Androjen maruziyeti sabit bir düzeyde korumak için her dört haftada bir pelet değiştirme. Pelet takıldıktan üç gün sonra, vajinal kaviteye on mikrolitre steril salin fışkırtmak için p10 pipet kullanın ve pipet ucunu kullanarak tuzlu eti hemen geri alın.Vajinal hücre tuzlu örneği etiketli bir slayt üzerine yayın. Ve tuzlu oda sıcaklığında kurumasını bekleyin. Kurutulmuş slaytları en az beş dakika boyunca yüzde 100 ethynol bir kapta düzeltin.Daha sonra slaytları her biri bir dif hızlı boyama kitinden B tamponve tampon C'de birer dakika lekelayın. Tampon C kuluçka sonunda üç saniye musluk suyu ile slaytlar yıkayın ve oda sıcaklığında kuru. Bir ışık mikroskobu on kez hedefi altında slaytlar görüntülemek için estrous döngüsellik görüntülemek için.Her aşamadaki günleri sayın ve her aşamada yüzde süresini hesaplamak için toplam gün sayısına bölün. Glikoz toleransını test etmek için, 20 gün DHT takılması, fareleri bir gecede hızlı bir şekilde hızlandırın. Farelerertesi sabah tartın ve kuyruk damar kanı fesleğen glikoz seviyesini ölçmek için bir glucometer ve test şeritler kullanın.Farelere kilogram başına yüzde 20 dekstroz vücut ağırlığı ile iki gram enjekte edin. Sonra 15, 30, 60, 90, 120 dakika dekstroz uygulama sonrası kuyruk damar kan örneklerinin glikoz düzeyini ölçün. DHT eklenmiş kadınlardan dişi yavrular elde etmek için, pelet takılması sonrasında, 15 gün kendini proven doğurgan bir erkek ile kafeste test etmek için kadın fare hareket ettirin.Farenin hamile olup olmadığını belirlemek için her hafta kadın vücut ağırlığını belgele. Doğum dan sonra gün yedi, dövme macunu içine bir mızrak ucu daldırma ve ayak üzerinde bir dövme ile her yavru işaretlemek. İşaretli fareleri 70 güne kadar her yedi günde bir tartın.Doğum sonrası tarih 12 ile 16 arasında, kulak yumruk fareler ilerler şekilde gösterildiği gibi sisteme göre numaralandırmak için. Cinsiyeti ayırt etmek için, etiketlenen her farenin ventral tarafını inceleyin. Dişilerin görünür meme uçları olacaktır.Çeşitli downstream analizleri için kan örnekleri toplamak için submandibuler damar kanaması ile dokuz ve on arasında yaklaşık deneysel kan hacmi toplamak için bir lancet kullanın. Ve serum toplama sağlamak için örnekleri santrifüj. Daha sonra serum örneklerini analiz edilene kadar eksi 80 santigrat derecede 1,5 mililitrelik mikro santrifüj tüplerde saklayın.DHT dişi yavrularda ergenliği değerlendirmek için, her gün doğum sonrası 21. Ve ano-genital mesafeölçmek için kalibre kullanın. Serum DHT'nin mutlak değerleri kütle spektrometresi ve Elisa analizi arasında farklılık olsa da, DHT'nin göreceli halk değişimi ile no-DHT eklemesi hem tahlillerden hem de deneylerde benzerdir.HEM DHT hem de DHT farelerde gebelik öncesi DHT düzeyleri önemli ölçüde artmaktadır. Bununla birlikte, DHT düzeyleri DHT farelerde hem pre-conceptional hem de gebelik zaman noktalarında dht farelere göre iki kat daha yüksektir. Yetişkin DHT kızları üreme fonksiyonlarında farklılıklar sergilerler.Örneğin, yetişkin hiçbir DHT kızları metestrus diestrus ve pro-esterous ve esteröz daha az zaman önemli ölçüde daha uzun süre yaşayan göre bozulmuş eestrous döngüsellik. Bu prosedürü denerken, hormonun tek tip salınımı için kullanılmadan önce peletleri 24 saat kuluçkaya yatırmayı unutmamak önemlidir. Bu işlemden sonra DHT maruziyetinin üreme ve metabolik sonuçları da incelenebilir.Bu teknik, geliştirildikten sonra, endrokronoloji ve maternal fetal etkileşim alanında araştırmacıların PKOS'u ve kadın farelerde düşük seviyeli hiperandrojenizmin etkisini incelemelerinin önünü açtı. DHT ile çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve eldiven, maske ve gözlük takmak ve biyo-güvenlik başlığında çalışmak gibi önlemlerin bu işlemi gerçekleştirirken her zaman alınması gerektiğini unutmayın.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generating CRISPR/Cas9 Mediated Monoallelic Deletions to Study Enhancer Function in Mouse Embryonic Stem Cells

Yaratma CRISPR / Cas9 aracılığı monoallelik Delesyonlar Fare Embriyonik Kök Hücreleri Artırıcı Fonksiyonu Eğitim için

Enhancers control cell identity by regulating tissue-specific gene expression in a position and orientation independent manner. These enhancers are often ...

Isolation and Characterization of Primary Rat Valve Interstitial Cells: A New Model to Study Aortic Valve Calcification

Birincil fare malzemelerin yalıtım ve Vana interstisyel hücreleri: Aort Kapak kalsifikasyon eğitim için yeni bir Model

Calcific aortic valve disease (CAVD) is characterized by the progressive thickening of the aortic valve leaflets. It is a condition frequently found in ...

Whole-mount Confocal Microscopy for Adult Ear Skin: A Model System to Study Neuro-vascular Branching Morphogenesis and Immune Cell Distribution

Bütün-Confocal mikroskobu yetişkin kulak cilt için mount: nöro-vasküler dallanma morfogenez ve bağışıklık hücre dağıtım modeli sistemi

Here, we present a protocol of a whole-mount adult ear skin imaging technique to study comprehensive three-dimensional neuro-vascular branching ...

Organotypic Culture Method to Study the Development Of Embryonic Chicken Tissues

Embriyonik tavuk doku gelişimi çalışmaya Organotypic kültür yöntemi

The embryonic chicken is commonly used as a reliable model organism for vertebrate development. Its accessibility and short incubation period makes it ...

Ovarian Tissue Culture to Visualize Phenomena in Mouse Ovary

Mouse ovarium olayları görselleştirmek için yumurtalık doku kültürü

Mammalian females periodically ovulate an almost constant number of oocytes during each estrus cycle. To sustain such regularity and periodicity, ...

A Mouse Distraction Osteogenesis Model

Bir fare oyalama Osteogenesis modeli

Distraction osteogenesis (DO) is a surgical procedure that involves skeletal tissue regeneration without cell transplantation. A DO model consists of the ...

Use of Hematopoietic Stem Cell Transplantation to Assess the Origin of Myelodysplastic Syndrome

Hematopoetik kök hücre transplantasyonu myelodisplastik sendromu kökeni değerlendirmek için kullanımı

Myelodysplastic syndromes (MDS) are a diverse group of hematopoietic stem cell disorders that are defined by ineffective hematopoiesis, peripheral blood ...

An In Vitro Model of a Parallel-Plate Perfusion System to Study Bacterial Adherence to Graft Tissues

An In Vitro Model of a Parallel-Plate Perfusion System to Study Bacterial Adherence to Graft Tissues

Vitro modeli doku grefti bakteriyel bağlılık çalışmaya paralel-plaka perfüzyon sistemi

Various valved conduits and stent-mounted valves are used for right ventricular outflow tract (RVOT) valve replacement in patients with congenital heart ...

An In Vivo Method to Study Mouse Blood-Testis Barrier Integrity

An In Vivo Method to Study Mouse Blood-Testis Barrier Integrity

Fare kan-Testis bariyeri bütünlük çalışma için In Vivo yöntemi

Spermatogenesis is the development of spermatogonia into mature spermatozoa in the seminiferous tubules of the testis. This process is supported by ...

Adult Mouse Digit Amputation and Regeneration: A Simple Model to Investigate Mammalian Blastema Formation and Intramembranous Ossification

Yetişkin fare basamak amputasyon ve rejenerasyonu: Mammalin Blastema oluşumu ve Intramembranous ossifikasyon araştırmak için basit bir model

Here, we present a protocol of adult mouse distal terminal phalanx (P3) amputation, a procedurally simple and reproducible mammalian model of epimorphic ...