Name: a conditioned place preference protocol for measuring incubation of craving in rats
Uploaded: 2018-11-06T14:00:00
Duration: 4 min 11 s
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이 작품에 의해 국가 자연 과학 재단의 중국 (NSFC) 31741058 (Y.Z.), 심천 정부 보조금 (JCYJ20170818162613877 및 JCYJ20170818163217196) 및 중국 박사 후 과학 재단 부여 2017 M 622826 (K.Z.)을 지원 했다.

실험 절차는 국가 관심에 대 한 지침에 따라 수행한 및 동물의 사용 및 실험 기관 동물 관리 및 사용 위원회 심천 연구소의 첨단 기술은 중국에 의해 승인 되었다 과학의 아카데미입니다.
1. 동물 요법이 니
<ol><li>동물 실험에서 남성 성인 쥐를 얻을 하 고 음식 및 물 12 h 명암 주기 (빛에 7시 19:00)에서 그들을 유지.</li>
	<li>그들과 함께 재생 또는 실험 하기 전에 2 주 동안 하루에 두 번 그들을 patting 하 여 동물을 처리 합니다.</li>
	<li>염 분 또는 모 르 핀 그룹으로 동물을 임의로 할당 합니다.</li>
</ol>2. 약 준비
<ol><li>모 르 핀 염 산 염 10mg/mL로 준비 하 고 쥐를 intraperitoneally 주사 (i.p.) 1 mL/kg의 볼륨에서.</li>
	<li>컨트롤, 1 mL/kg의 볼륨에 식 염 수와 쥐를 주사.</li>
</ol>3. CPP 장치
<ol><li>다른 촉각 (층) 큐 3-챔버 CPP 기구를 구성 하 고 두 측 챔버 쥐 초기 환경 설정을 테스트. 두 개의 큰 블랙 사이드 실 (30 cm × 25 cm × 30 cm, L × W × H)와 한 중간 흰색 챔버 (11 cm × 25 cm × 30 cm, L × W × H) 흰 부드러운 PVC 바닥으로 기구에 의하여 이루어져 있다. 두 측 챔버는 somatosensory 큐로 다른 층 텍스처: 그리드 플 렉 시 유리 바닥으로 하나, 거친 PVC 바닥에 다른.</li>
	<li>기구는 편견, 편 파 장치 거짓 긍정적인 결과4저조한 쉽습니다 이후 되도록 촉각 단서의 조합을 다. 참고: CPP 기구의 디자인에서 중요 한 방법론 문제는 기구 인지 "편 파" 또는 "공평된"4. 익숙하지 않은 쥐의 한 그룹 다른 한쪽 챔버에 대 한 초기 기본 설정이 없습니다 보여줍니다, 기구 "편견"으로 간주 됩니다. 그렇지 않으면, "편견된"13로 그것을 고려 하십시오.</li>
</ol>4. CPP 절차
<ol><li>주로 이전 연구21,22 시간 포인트, 세션 처리, 시험 기간을 조절 하 고 시험 시간 포인트20의 수를 조절의 수정에 따라 모 르 핀 유도 CPP 패러다임 구축 . 짧은 묘사는 실험 일정은 그림 1에 묘사 된 아래, 주어진 다.</li>
	<li>사전 조절 단계<ol>
<li>이 단계 (하루 1 ~ 3), 중간 챔버에 동물을 전체 장치에 무료로 액세스할 수 있도록 단두대 문을 제거 합니다.</li>
		<li>15 분에 대 한 동물의 활동을 기록 합니다.</li>
		<li>기준으로 3 일에 2 개의 측 실에서 소요 된 시간을 계산 하 고 t 0로 이것을 참조 하십시오.</li>
		<li>적은 입력 쥐 제거 보다-4 번이이 쥐로 실험23 에서 사이드 실 중 하나에 일반적인 복지 (예를 들어, 더러운 모피와 데 종양)에 문제가 있을 가능성이. 전체 실험 기간 동안 동물의 건강 상태를 확인 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>조절 단계 참고: 조절 단계는 6 일 (4 ~ 9 일) 포함 됩니다.<ol>
<li>모 르 핀 조절 과목에 대 한 주사 쥐 i.p. 모 르 핀 (10 mg/kg) 또는 식 염 수 (1 mL/kg) 또는 아침 (9:00)과 저녁 (19:00) 세션 (10 h 떨어져).</li>
		<li>(기본이 아닌)의 약 결합을 각 주입 직후 쥐 또는 45 분 (그림 1B)에 대 한 (기본) 챔버 염 쌍 한정.</li>
		<li>비디오 녹화 시스템을 유지. 참고: 우리의 경험에의 하면 약 5% 쥐의 있다 모 르 핀 (10 mg/kg)의 첫 번째 주사 후 호흡 저하. 이러한 경우에 호흡기 우울된 쥐의 생존 율을 증가 하 쥐 컨디셔닝 상공에서 그것의 혀를 꺼내 가져오고 홈 장에 하얀 휴지에 그것을 넣어.</li>
		<li>염 분 조절 컨트롤 줄 쥐 식 염 수 주사 (1 mL/kg) 이전에 노출 아침 세션 동안 CPP 기구에의 한 측 챔버와 모 르 핀 그룹 (그림에 맞춰 45 분/세션 저녁 세션 동안 다른 쪽 1 C).</li>
	</ol>
</li>
	<li>테스트 단계<ol>
<li>이 단계 동안, 15 분 전체 장치를 자유롭게 탐험 그들 중간 챔버에 동물을 전체 장치에 무료로 액세스할 수 있도록 단두대 문을 제거 합니다.</li>
		<li>이 분 동안 자신의 활동을 기록 합니다.</li>
		<li>3 후 컨디셔닝 테스트 수행, 즉, 테스트 1 (T1), 2 (T2)을 테스트 하 고 테스트 3 (T3), 2 일, 10 일 및 모 르 핀 없는 상태에서 마지막 컨디셔닝 세션 후 18 일 각각 (그림 1A).</li>
		<li>다른 실험 목표에 대 한 테스트 시간 포인트 다. 참고: 필요한 쥐의 수를 최소화 하기 위해 내 주제 디자인 채택 된다. 그러나, 소 광 효과 제외 하는 주제 사이 디자인은 필요.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58384/58384fig1.jpg"> 그림 1: 실험 절차. (모든 CPP 과정의 A) 실험 절차. (모 르 핀 그룹의 컨디셔닝 단계 B) 실험 일정. 식 염 수 그룹의 컨디셔닝 단계 (C) 실험 일정. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58384/58384fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
5. 데이터 분석
<ol><li>Morphine(saline) 그룹에서 CPP 점수 계산: CPP 점수 = 약 결합 (기본이 아닌) 실에서 소요 된 시간 / 두 컨디셔닝 실에서 소요 된 총 시간.</li>
	<li>SPSS를 사용 하 여 적절 한 통계적 방법으로 CPP 점수와 측 실에 입구의 데이터 분석을 수행 합니다.</li>
	<li>SEM의 표준 오차는 ± SEM을 의미 모든 행동 데이터를 제시. P의 값 고려 < 0.05 통계적으로 중요 한 별표 (*)와 octothorpesin (#)는 숫자에 의해 표시.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Leshner, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Addiction+is+a+brain+disease,+and+it+matters.">Addiction is a brain disease, and it matters.</a> Science. 278 (5335), 45-47 (1997).</li><li>Koob, G. F., Volkow, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurocircuitry+of+Addiction.">Neurocircuitry of Addiction.</a> Neuropsychopharmacology. 35 (1), 217-238 (2010).</li><li>Zhu, Y., Wienecke, C. F., Nachtrab, G., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+thalamic+input+to+the+nucleus+accumbens+mediates+opiate+dependence.">A thalamic input to the nucleus accumbens mediates opiate dependence.</a> Nature. 530 (7589), 219-222 (2016).</li><li>Tzschentke, T. 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저자는 공개 없다.

여기, 모 르 핀 CPP 패러다임을 사용 하 여 메서드 바른 컨텍스트 somatosensory 단서와 쥐에서 장기적인 보상 메모리 설정 설명 되어 있습니다. 균형 잡힌된 CPP 기구와 이전 프로토콜21 수정 같은 장기 보상 메모리를 구축 하 고 염 분 및 모 르 핀 세션 설정 적어도 10 h 떨어져. 또한, 더 많은 조절 세션 연관 학습 하 조절 단계 동안 추가 됩니다. CPP 점수 떨어져 두 측 실에 입구는 측정 하 고 측 챔버에 증가 입구의 패턴 자체 관리 패러다임에서 증가 활성 응답의와 비슷합니다.
여러 가지 요인이 영향을 위에서 언급 한 CPP 패러다임의 설립. 한 핵심 요소는 기구의 디자인: 쥐 일반적 기구 균형을 보장 하기 위해 측 두 약 실 전부에 유사한 선호 해야. 불균형된 기구 한쪽 챔버13초기 높은 취향 때문에 CPP의 인수를 마스크 수 있습니다. 따라서, 한 측 챔버 (90% 이상 총 시간의 두 측면 챔버의) 극단적인 환경 설정은 바닥 또는 다른 문맥 단서의 질감을 선택할 때 피해 야 한다. 다른 실험적인 목적을 위한 경험 상황별 자극을 수정 하 여 CPP 장치를 균형 수 있습니다. 균형된 장치, 실험적인 디자인의 두 가지 방법으로 일반적으로 사용 되4. 한 편견 방법은 모든 과목; 비 선호 챔버와 쌍 마약 편견된 방법은 기본이 아닌 상공에서 약물으로 동물의 절반, 선호 챔버와 나머지 절반을 쌍을입니다. 두 가지 방법으로 CPP13 를 설정할 수 있습니다 하지만 후자의 디자인 연구17,25 항상 한쪽 약 실에 그들의 강한 특혜로 인해 많은 과목을 제외. 마약 중독26,,2728 개별 취약점 존재 하는 경우 한쪽으로 치우친된 디자인을 피하기 위해 건강 한 과목의이 연구에 선정 되었다. 한쪽으로 치우친된 디자인의 한계가 측 챔버에 일치 하지 않는 기본 설정의 효과입니다. 그림 2에서 같이, 쥐 염 분 그룹에 초기 비 선호 챔버에 대 한 일관 된 낮은 CPP 점수 있다. 따라서, 일관성 없는 특혜 사이드 챔버를 CPP 점수 모 르 핀 그룹에 영향을 미칠 수 가능성이 염 컨트롤을 설정 하 여 제외 됩니다. 선호 챔버의 천장 효과 피하기 위해, 우리는 모 르 핀 쌍된 챔버로 초기 기본이 아닌 챔버를 사용 합니다. 측 실에 기준선 설정에 참신 하 고 스트레스의 효과 피하기 위해, 3 개의 사전 컨디셔닝 세션 수행 됩니다, 그리고 세 번째 세션 기준으로 사용 됩니다. 네 번째 요소는 모 르 핀과 염 분 세션 사이의 간격입니다. 우리의 패러다임, 우리 염 분 조절 기간에 철수 효과 피하기 위해 10 시간 이상의 간격을 선택 합니다. 모 르 핀의 복용량은 또한 중요 한 요소 이다. 0.01 mg/kg6, 같은 모 르 핀의 매우 낮은 복용량 장소 특혜를 유도 하지 않았다. 10 mg/kg의 복용량 유발 쥐에서 높은 CPP 점수17 고 쥐 모 르 핀 CPP 연구17,,2123에서 주로 사용 됩니다. 그러나, 모 르 핀 10 mg/kg (i.p.) 수 쥐의 약 5%에서 호흡기 우울증을 유도 하 고 있다. 5 mg/kg, 같은 모 르 핀의 더 낮은 복용량은 미래 연구에 사용 될 수 있습니다. 트리 말괄량이 같은 다른 종족에 대 한 약물 내성은 CPP 패러다임을 작성할 때 고려 되어야 한다. 시설 중 모 르 핀의 증가 복용량을 사용 해야 합니다 이후 트리 말괄량이 모 르 핀 빠른 허용을 개발,29,30단계.
장기적인 보상 메모리 수정 프로토콜, 컨디셔닝11 (그림 2)의 6 일 후 적어도 18 일 설립 하 고. 미래 연구는 CPP는 긴 시간 동안 유지 될 수 있는지 여부를 측정 해야 한다. 반복된 재발 마약 중독 치료에 주요 방 벽 이다. 스트레스, 환경 단서 약물 및 재발을 유도 수 있습니다. 통화 당 메모리의 멸종, 후이 모델 스트레스 또는 약물에 의해 유도 된 재발을 모델링 하는 데 사용 될 수 있습니다.
모 르 핀 그룹에서 마약 짝 챔버에 입구 (그림 3), 금 욕 기간11 자체 관리 패러다임에서 증가 활성 응답와 비슷한 증가. 그러나, 염 분 짝 약 실에 입구 또한 증가 쥐와 트리 shrews11, CPP 패러다임 자체 관리 패러다임의 비활성 반응에서 다른. 2 개의 패러다임의 다른 기본 원리 때문이 차이 있습니다: 하나는 고전적인 조건, 다른 이다 기사 조절. 게다가, CPP 경험 음식 트리 shrews 증가 입구30의 이러한 패턴을 보여 주지 않았다. 따라서, 모 르 핀 경험 동물에 모두 측 실에 증가 입구 마약의 incubated 갈망을 표현 하기 위해 생각 된다. 반복된 측정을 사용 하 여 하나의 주제에의 한계를 제외할 수 없습니다, 비록 증가 항목의 패턴 쥐11에 보존 되었다 나무 shrews11,30 과 원숭이31. 그럼에도 불구 하 고, 한 절제 동안 주제 디자인 사이 기간이 좋습니다 반복된 측정의 소 광 효과 제외 하려면 미래 연구에 대 한.
증가 입구 외 모 르 핀 (1 mg/kg 및 3 mg/kg)의 낮은 복용량과 CPP 점수17금 욕 기간 동안 점진적으로 증가 했다. 이 결과 CPP 패러다임 또한 갈망 하는 현상의 외피를 모델 수 것이 좋습니다. 그러나, 증가 CPP 점수 또한 조건 자극에 대 한 증가 된 메모리를 나타낼 수 있습니다. 이 측면에서 자체 관리 패러다임에서 활성 응답 비슷합니다 3-챔버 장치에 측 실에 입구는 더 밀접 하 게 마약 이나 약물의 보상 효과 대 한 검색을 유사 합니다. 그것은 모 르 핀의 더 낮은 복용량의 쥐 CPP 패러다임에서 금 욕 기간 동안 측 실에 입구의 동향을 확인 흥미로울 것입니다. 다른 약물과 마우스와 함께 미래 연구가이 현상 약물 남용/종에 걸쳐 보존 여부 확인 수행 되어야 합니다.

마약 중독은 만성 질환1 여러 다른 단계2: 파티/중독, 철수/부정적인 영향을, 그리고 근 심/기대. 마약 중독 주기 초기 파티/중독 단계 과목 강화 효과2인해 마약 걸릴. 철수/부정적인 영향 무대에서 과목 부정적인 체세포 및 정서적 상태 마약 철수의 부정적인 증강 메커니즘 중독3의 개발와 관련 된 홍보 경험. 근 심/기대 단계에서 과목 복원할 약 찾는 멸종, 마약 관련 단서 또는 스트레스에 의해 유발 될 수 있는 후. 마약 중독의 동물 연구에서 바른된 장소 특혜 (CPP) 패러다임 마약4,,56 의 긍정적인 강화 효과 모방 하는 데 사용 됩니다 및, 따라서, 그것은 약물의 초기 단계를 모델링 하는 데 사용 중독 주기입니다. 모 르 핀, opioid 가족의 일원이 뇌7,8에 opioid 수용 체를 활성화 하 여 긍정적인 강화 효과 생성 합니다.
CPP 패러다임 클래식 (파블로프) 조절의 원리에 따라 그리고 일반적으로 악용, 모 르 핀4,5,,910, 그것의 쉬운 때문에의 약의 보람 효과 측정 하는 데 사용 실험실에서 가용성입니다. 전형적인 CPP 패러다임의 3 단계 구성: 사전 컨디셔닝, 컨디셔닝 및 테스트 단계. 컨디셔닝 단계 약물 (unconditioned 자극)의 보람 있는 속성은 하나 이상의 중립 콘텐츠 자극으로, 여러 가지 컨디셔닝 pairings 후 보람 속성을 얻을 하 고 조건 자극으로 결합 됩니다. 테스트 단계 동안 약물 결합 구획에 대 한 동물 들의 선호는 측정 하 고 그들의 보상 메모리로 반영. 이러한 이유로, CPP 패러다임도 학습 및 메모리의 메커니즘을 조사 하기 위해 사용 됩니다. 모 르 핀의 장기 보상 메모리를 설정 하려면 CPP의 설립에 영향을 주는 변수 조정 되었고와 최적화는 아래에 설명한 프로토콜11. 상황별 자극, 촉각 시각과 냄새 단서의 조합입니다. 상황별 자극 그리고 테스트 시간 포인트의 다양 한 연구 목적에 따라 만들어집니다. 예를 들어 우리의 이전 연구12, somatosensory 신호 (다른 층 텍스처) 주로 사용한 상황별 자극으로 꼬리 부분의 섬 피 질, 뇌 영역 somatosensory 기능 취득에서의 역할을 조사 하 그리고 장기 보상 메모리의 유지 보수입니다. 기구 설계 및 선호/비 선호 면 쥐의 할당 CPP의 설립을 영향을 줍니다. 3-챔버 장치 2 챔버 장치 대신에 사용 되는 프로토콜을 강제 선택을 피하기 위해 아래. 두 측 챔버의 균형 및 그들에 동물의 초기 할당 CPP4,13의 인수를 영향을 줍니다. 따라서, 측 챔버의 균형 잡힌된 디자인 및 동물의 편견된 할당 강한 장소 특혜를 얻으려고이 프로토콜에 적용 됩니다. 장기 보상 메모리의 유지 보수 컨디셔닝 단계에서 더 많은 조절 실험을 필요합니다. 하루 두 개의 조절 실험 수행 됩니다 컨디셔닝 단계 시간 비용을 줄이기 위해, 고 염 분 짝된 재판4에서 모 르 핀의 급성 금 단 효과 피하기 위해 모 르 핀/식 염 수 주사는 균형 세력.
복직 동물 모델14 마약 중독 주기의 근 심/기대 단계를 설립 되었습니다. CPP는 습 관성 행동5재발 모델 복직 공부 또한 이용 된다. 재발은 마약 중독의 치료에서 장애물의 하나입니다. 갈망은 반복된 재발의 한 원인이 다. 금 욕 기간 동안 지속적으로 마약 증가 대 한 갈망 현상이15,16갈망의 부 화 되 나. 갈망의 인큐베이션 널리 마약 자체 관리 패러다임 하지만 하지 CPP 패러다임에서 공부 했다. 갈망의 부 화 처음에 맞게 CPP 패러다임의 사용 제안 리 외. 17. 그들의 결과17 절제의 첫 14 일 동안 점차적으로 증가 하지 높은 복용량 (10 mg/kg) 모 르 핀 (1 mg/kg 및 3 mg/kg)의 낮은 복용량의 CPP 점수 보여주었다. 마찬가지로, 마우스 시간18에 증가 CPP 점수를 보였다 코카인의 낮은 복용량 주입. 모 르 핀의 낮은 복용량의 증가 CPP 점수17incubated 갈망 반영 하기 위해 사용 되었다. 두 기간에 지출 하 고 마약 관련 환경에 항목 수 제안 CPP 패러다임19강화 조건부 응답을 반영 하 고. 최근 연구의 대부분 CPP 점수를 사용 하 여 직접 또는 간접적으로 매개 변수는 자주 무시 측면 챔버 항목 수 동안 마약 쌍 실에서 보낸 시간을 반영. 이러한 이유로, 그리고 모 르 핀 10 mg/kg의 복용량 사용 항목의 수는 우리의 연구11에 측정 되었다. 결과 측 실에 쥐의 입구11금 욕 기간 동안 크게 증가 보여줍니다. 이 항목의 수와 CPP 점수는 마약에 대 한 증가 갈망 평가에 유용한 매개 변수 나타내고 CPP 패러다임은 갈망 하는 현상의 외피를 적용. 그러나, 필요한 동물의 수를 줄이기 위해, 모 르 핀 경험 동물의 그룹은 테스트 반복; 따라서, 멸종의 효과 주제 디자인 내에서 전류와 제외할 수 없습니다. 동일한 프로토콜 주제 디자인 사이 A이이 한계를 극복할 수 있습니다.
다음 설명 CPP 프로토콜을 장기 보상 메모리를 설립 하 고 증가 갈망을 모델링 합니다. 간단히, 3 사전 컨디셔닝 일 후 쥐 6 컨디셔닝 일 하루 두 컨디셔닝 재판 통해가 고 마지막 컨디셔닝 재판 후 다른 시간 지점에서 테스트 후. 이 CPP 패러다임에서 CPP 기구 사용 3-챔버 폴 리 염화 비닐 (PVC) 상자는 건설 하 고 기구의 바닥 균형. 두 개의 큰 블랙 사이드 실 (30 cm × 25 cm × 30 cm, L × W × H)와 한 중간 흰색 챔버 (11 cm × 25 cm × 30 cm, L × W × H) 흰 부드러운 PVC 바닥으로 기구에 의하여 이루어져 있다. 두 측 챔버는 somatosensory 큐로 다른 층 텍스처: 그리드 플 렉 시 유리 바닥으로 하나, 거친 PVC 바닥에 다른.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="854">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Morphine</td>
			<td style="width:352px;">Shenyang First Pharmaceutical Factory</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CPP apparatus/Camera</td>
			<td style="width:352px;">Anlai Technology Company</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">SPSS</td>
			<td style="width:352px;">IBM Inc</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a conditioned place preference protocol for measuring incubation of craving in rats

반복된 relapses의 주요 원인은 약물에 대 한 갈망 이다. 금 욕 기간 동안 점차적으로 약물 갈망 증가, 현상 약물 갈망의 부 화 되 나. 여기, 우리가 쥐에 갈망의 부 화를 측정 하기 위한 모 르 핀 조절 장소 특혜 (CPP) 프로토콜을 설명 합니다. 이 프로토콜에서 somatosensory 신호를 주로 사용 하는 CPP 패러다임은 모 르 핀의 장기 보상 메모리를 설정 하는 데 사용 됩니다. 3-챔버 CPP 상자 챔버 바닥의 질감에 다른 구성 되어. 첫째, 동물 3 일 연속 2 측 약 실에 그들의 초기 기본 설정에 대해 테스트 됩니다. 다음, 그들은 intraperitoneally 핀/식 염 수를 주입 하 고 45 분에 대 한 그들의 기본/기본이 아닌 챔버에 넣어. 컨디셔닝의 6 일 후 측 약 실에 그들의 특혜는 마지막 컨디셔닝 세션 후 다른 시간 지점에서 15 분 동안 테스트 됩니다. 이 패러다임, 모 르 핀의 보상 메모리 수 적어도 18 일 동안 지속. 위에서 언급 한 프로토콜 증가 갈망을 모델링할 수 있는지 여부를 테스트 하려면 두 개의 측 실에 입구의 수는 금 욕 기간 계산 됩니다. 결과 표시는 입구 증가, CPP 패러다임 갈망의 인큐베이션을 모방 수 제안. 미래 연구는이 모델을 기본 장기 메모리 및 갈망의 외피 신경 메커니즘을 연구를 고용 수 있습니다.

다음 대표 결과 CPP 프로토콜 위에서 설명한 장기 모 르 핀 보상 메모리 (그림 2)에 의해 성공적으로 설치 될 수 있다 모 르 핀 유지 될 수 보여 줍니다. 사이드 실, 자기 관리 패러다임에서 활성 응답 수 유사 항목의 수 모 르 핀의 강화 속성을 반영합니다. 갈망의 외피를 나타내는 항목 (그림 3)의 증가 수는이 모 르 핀 CPP 패러다임을 사용 하 여 관찰 되었다.
통화 당 메모리 마지막 컨디셔닝 세션 후 최소 18 일 마지막 수 있습니다.
모 르 핀 그룹에서 21 쥐와 염 분 그룹에서 10 쥐 장기 보람 메모리의 식을 테스트 하 사용 되었다. 혼합된 ANOVA 공개 그룹 및 테스트 간의 상호 작용에 있는 뜻깊은 다름이 (F (3,87) 4.973, p = 0.003 =), 테스트 (F (3,87) = 18.237, p < 0.001) 및 그룹 (F (1,29) = 11.413, p = 0.002). 테스트에서 상당한 차이 (F (3,60) = 46.628, p < 0.001) 모 르 핀 그룹 하지만 하지 염 group(F(3,27) = 1.576, p = 0.218) 단방향 반복된 ANOVA에 의해 감지 되었다. Bonferroni 조정 다중 비교 분석 모 르 핀 그룹 3 테스트와 T0 간의 중요 한 차이 보였다. 그림 2에서 같이, 모 르 핀 보상 메모리 최소 18 일을 지속 하 고 시간에 따른 추세에서 감소. 데이터 이전 출판된 연구11에서 얻을 수 있습니다.
모 르 핀 그룹 측 구획에 입구는 점진적으로 증가
모 르 핀 그룹 과목 내의 요소로 입구, 그룹 (식 염 수 한 쌍 및 모 르 핀 쌍) 사이 주제 요소와 테스트 (T0, T1, T2, T3)의 추세를 테스트 하려면 혼합된 ANOVA에 대 한 설정 했다. 그룹 및 테스트 간의 상호 작용에 중요 한 차이가 (F (2.311,92.449) 1.915, p = = 0.147) 및 그룹 (F(1,40) 0.898, p = = 0.349), 테스트에서 의미 하지만 (F(2.311,92.499) = 24.243, p < 0.001), 감지 했다. 최하위 차이 (LSD) 테스트와 여러 비교 분석 T1 및 t 0 사이 큰 차이가 나타났다 (p < 0.001), T2 및 t 0 (p < 0.001) T3 및 t 0 (p < 0.001) 모 르 핀 쌍 입구에 모 르 핀 그룹에서. 식 염 수 한 쌍 구획에 관한 통계 significances t 2와 t 0 사이 존재 (p = 0.002) T3 및 t 0 (p 0.003 =) 하지 T1 및 t 0 (p = 0.246), 비슷한24를 갈망 하는 헤로인의 외피의 패턴. 일반적으로 모 르 핀 약 실 쪽에 입구 증가 시간-독립적으로 그룹.
쥐 T1에서 식 염 수 한 쌍 구획 보다 모 르 핀 한 쌍 구획을 더 자주 입력 (t(1,21) =-2.833, p = 0.010)과 t 2 (t(1,21) =-4.458, p = 0.0002) T3 하지 하지만 (t(1,21)-0.471, p = 0.642 =) (양측 쌍 t-테스트).
염 분 그룹 유사 모 르 핀 그룹, 혼합된 ANOVA 적용 된 및 그룹 및 테스트 간의 상호 작용에 큰 차이가 밝혀 (F(3,54) = 0.345, p = 0.793), 테스트 (F(3,54) 1.793, p = = 0.159) 및 그룹 (F(1,18) 0.151, p = 0.702 =). 따라서, 염 분 그룹 약 실 쪽에 입구 시간이 지남에 안정 했다.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58384/58384fig2.jpg"> 그림 2: CPP 메모리 시간이 감소 하지만 적어도 18 일 지난 수 있습니다. 모 르 핀 그룹에서 CPP의 메모리 보존 (n = 21) 및 염 분 그룹 (n = 10) 마지막 컨디셔닝 (T1, 2 일; 후 몇 시간 포인트 CPP 점수를 측정 하 여 평가 되었다 T2, T3, 18 일과 10 일). CPP의 모든 값은 평균 ± SEM. # # # p 나타냅니다 < 0.001와 # # p < 0.01; 염 분 그룹과 비교를 의미 p < 0.001 T0 모 르 핀 그룹에 비해 나타냅니다. 두이 일 외., 201711에서 수정 되었습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58384/58384fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58384/58384fig3.jpg"> 그림 3: 모 르 핀 및 염 분 그룹 측 실에 입구. 모 르 핀 그룹에 두 개의 측 실에 입구 (n = 21) 및 염 분 그룹 (n = 10) 마지막 컨디셔닝 (T1, 2 일; 후 몇 시간 포인트에서 평가 했다 T2, T3, 18 일과 10 일) t 0와 비교. 입구의 모든 값은 평균 ± SEM. 모 르 핀 그룹 (A)에서 모 르 핀 쌍 측에 입구 매우 크게 증가 t 1에서 t 3만 t 2에서 크게 증가 염 분 짝 챔버의 입구 동안. 쌍체 t t 1과 t 2에 보여주는 매우 중요 한 증가 모 르 핀 한 쌍 구획 및 식 염 수 한 쌍 구획 테스트합니다. 염 분 그룹 (B)에서 양쪽에 입구에 큰 변화가 없다 있다. 이 그림은 태양 외., 201711에서 수정 되었습니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58384/58384fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

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A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

여기, 모 르 핀 조절 장소 특혜 (CPP) 프로토콜은 쥐에 갈망의 부 화를 측정 하는 설명입니다.

쥐에 갈망의 부 화를 측정 하기 위한 바른된 장소 설정 프로토콜

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...

이 방법은 약물 사용 욕구와 욕망 응답의 잠복에 대한 약물 중독 분야에서 몇 가지 주요 질문을 해결하는 데 도움이 될 수 있습니다. 6일간의 모르핀 컨디셔닝으로, 조건부 장소 선호도 메모리 응답은 쥐 모델에서 갈망하는 현상을 관찰하기 위해 18일로 연장될 수 있다. 이 쥐 모르핀 컨디셔닝 모델의 의미는 갈망의 잠복기의 우리의 이해 근본적인 메커니즘의 발전으로 확장됩니다.시술을 시작하기 전에, 30센티미터 측 챔버에 의해 2개의 크고 검은 색 30 으로 구성된 3개의 챔버 조절 장소 환경 설정 장치를 구성한다. 그리고 매끄러운 흰색 PVC 바닥으로 25 바이 30센티미터 중간 챔버의 흰색 11. 그런 다음 쥐의 초기 환경 설정을 테스트하기 위해 측면 챔버에 다른 촉각 단서를 추가합니다.동물의 사전 컨디셔닝을 위해 기요틴 도어를 제거하여 전체 장치에 무료로 접근할 수 있도록 하십시오. 그리고 중간 챔버에 쥐를 배치합니다. 동물의 활동을 15분 동안 기록하여 3일째에 양측 챔버에서 보낸 시간을 기준선으로 계산합니다.동물의 컨디셔닝을 위해, 아침에 밀리리터 모르핀 염산염 IP당 1킬로그램당 1밀리리터로 모르핀 조절쥐 군을 주입하십시오. 그리고 킬로그램 식염수 당 1 밀리 리터 10 시간 후, 6 일 동안 매일. 각 쥐를 페어링한 적절한 약물, 비선호 또는 식염수 쌍으로 배치하고, 각 주사 직후 45분 동안 선호하는 챔버를 선호합니다.마지막 컨디셔닝 세션 후 2일, 10일 및 18일에 모르핀 조절 동물의 테스트를 위해 기요틴 도어를 제거하여 전체 장치에 무료로 접근할 수 있도록 한다. 그리고 모르핀 프리 상태에서 전체 장치의 자유로운 탐사를 위해 중간 챔버에 배치 후 15 분 동안 각 동물의 활동을 기록한다. 모핀 및 식염수 그룹에서 조건된 장소 기본 설정의 메모리 보존은 마지막 컨디셔닝 세션 후 여러 시간 지점에서 조건부 장소 기본 설정 점수를 측정하여 평가됩니다.측면 챔버에 대한 항목수는 모르핀의 보강 특성을 반영하고 갈망의 배양을 나타내는 항목의 증가 수를 반영하는 자체 관리 패러다임에서 활성 응답의 수와 유사합니다. 그림과 같이 이 프로토콜을 사용하여 모르핀 컨디셔닝된 장소 기본 설정을 성공적으로 수립할 수 있습니다. 마지막 컨디셔닝 세션 후 최대 18일 동안 장기 모르핀 보상 메모리를 유도합니다.이 절차를 시도할 때 촉각 큐의 균형을 맞추는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 이 절차에 따라 각 컨디셔닝 후 복직과 같은 다른 조치를 수행할 수 있습니다. 욕망의 잠복에 따라 복종이 유사한 기본 메커니즘을 가지고 있는지 여부에 대한 추가 질문에 대답하기 위해.복직 후, 이 기술은 쥐의 조건된 장소 선호 패러다임에 욕망의 잠양을 탐구하기 위하여 약 추가의 필드에 있는 연구원을 위한 도로를 포장했습니다.

Research

JoVE Journal

Behavior

Stereotaxic Microinjection of Viral Vectors Expressing Cre Recombinase to Study the Role of Target Genes in Cocaine Conditioned Place Preference

크레 재조합이 코카인 컨디셔닝 장소 환경에있는 표적 유전자의 역할을 연구하는 표현 바이러스 성 벡터의 정위 미세 주입

Microinjecting recombinant adenoassociated viral (rAAV) vectors expressing Cre recombinase into distinct mouse brain regions to selectively knockout genes ...

연구

행동분석학

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

헤로인은 절제 쥐의 추구에 장시간 음식 제한의 효과를 연구하기위한 절차

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

지방 성향 : 먹는 행동의 소설 모델 쥐에

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

절차 흰쥐의 파블로프 에어컨 알코올 추구 행동의 상황에 의한 갱신을 준수합니다

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Protocol for Studying Extinction of Conditioned Fear in Naturally Cycling Female Rats

당연히 여성 쥐 사이클링에 에어컨 공포의 멸종 유학을위한 프로토콜

Extinction of conditioned fear has been extensively studied in male rodents. Recently, there have been an increasing number of studies indicating that ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

수정 된 구멍 보드 - 마우스 및 쥐의 행동,인지 및 사회적 상호 작용을 측정

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice

코카인 유발 행동 과민성 및 마우스의 조건 장소 선호도 평가

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

오픈 필드 타워 미로를 취하게하고 응답 학습

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats

흰쥐의 파블로프 조건 접근 교육

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the ...

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

바른된 장소 기본 패러다임을 사용 하 여 마우스에 마약 추구의 복직

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...