Name: reverse dissection and dicect reveal otherwise hidden data in the evolution of the primate face
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reverse Dissection and DiceCT Reveal Otherwise Hidden Data in the Evolution of the Primate Face at JoVE.com

De auteurs willen erkennen Yerkes nationale Primate Research Center voor toegang tot de chimpansee en rhesus makaak specimens en Chris Vinyard (noordoosten Ohio Medizinische Universität) voor toegang tot gemeenschappelijke Hapalomys exemplaren. Wij danken Marissa Boettcher, Kaitlyn Leonard en Antonia Meza aan de Universiteit van North Carolina voor hulp bij het scanproces. Dit werk werd uitgevoerd ten dele op de Duke universiteit gedeeld materialen Instrumentation Facility (SMIF), een lid van de North Carolina onderzoek driehoek nanotechnologie netwerk (RTNN), die wordt ondersteund door de National Science Foundation (Grant ECCS-1542015) Als onderdeel van de nationale nanotechnologie gecoördineerde infrastructuur (NNCI). Dit is hertog Lemur centrum publicatienummer 1405.

Omdat deze procedures gebruik maken van dieren die gestorven aan natuurlijke oorzaken op dierentuinen of werden opgeofferd in onderzoeklaboratoria waar ze deel van onafhankelijke studies waren, hebben deze protocollen niet IACUC goedkeuringen nodig.
1. omgekeerde dissectie
Opmerking: Het protocol voor omgekeerde dissectie is effectief voor zeer kleine zoogdieren, zoals laboratorium muizen, helemaal tot aan de grote landzoogdieren, zoals het gedomestic...

<ol>
	<li>Gregory, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Our face from fish to man. , (1929).</li><li>Burrows, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+facial+expression+musculature+in+primates+and+its+evolutionary+significance.">The facial expression musculature in primates and its evolutionary significance.</a> BioEssays. 30, 212-215 (2008).</li><li>Santana, S. E., Dobson, S. D., Diogo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plain+faces+are+more+expressive:+comparative+study+of+facial+colour,+mobility+and+in+primates.">Plain faces are more expressive: comparative study of facial colour, mobility and in primates.</a> Biology Letters. , (2014).</li><li>Burrows, A. M., Cohn, J. F., Li, S. Z., Jain, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+anatomy+of+the+face.">Comparative anatomy of the face.</a> Encyclopedia of Biometrics. , (2014).</li><li>Liebal, K., Waller, B. M., Burrows, A. M., Slocombe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Primate Communication. , (2013).</li><li>Rowe, N., Myers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> All the World's Primates. , (2016).</li><li>Burrows, A. M., Waller, B. M., Micheletta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mimetic+muscles+in+a+despotic+macaque+(Macaca+mulatta)+differ+from+those+in+a+closely+related+tolerant+macaque+(M.+nigra).">Mimetic muscles in a despotic macaque (Macaca mulatta) differ from those in a closely related tolerant macaque (M. nigra).</a> Anatomical Record. 299, 1317-1324 (2016).</li><li>Burrows, A. M., Parr, L. A., Durham, E. L., Matthews, L. C., Smith, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+faces+are+slower+than+chimpanzee+faces.">Human faces are slower than chimpanzee faces.</a> PLoS One. 9, 0110523 (2014).</li><li>Burrows, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+morphology+of+mimetic+musculature+in+primates:+how+social+variables+and+body+size+stack+up+to+phylogeny.">Functional morphology of mimetic musculature in primates: how social variables and body size stack up to phylogeny.</a> Anatomical Record. 301, 202-215 (2018).</li><li>Burrows, A. M., Smith, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscles+of+facial+expression+in+Otolemur,+with+a+comparison+to+Lemuroidea.">Muscles of facial expression in Otolemur, with a comparison to Lemuroidea.</a> Anatomical Record. 274, 827-836 (2003).</li><li>Burrows, A. M., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What's+inside+tarsier+faces.">What's inside tarsier faces.</a> Yearbook of Physical Anthropology. 60, 96 (2015).</li><li>Dickinson, E., Stark, H., Kupczik, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-destructive+determination+of+muscle+architectural+variables+through+the+use+of+DiceCT.">Non-destructive determination of muscle architectural variables through the use of DiceCT.</a> Anatomical Record. 301, 363-377 (2018).</li><li>March, D., Hartstone-Rose, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+morphology+and+behavioral+correlates+to+postcranial+musculature.">Functional morphology and behavioral correlates to postcranial musculature.</a> Anatomical Record. 301, 419-423 (2018).</li><li>Santana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+anatomy+of+bat+jaw+musculature+via+diffusible+iodine-based+contrast-enhanced+computed+tomography.">Comparative anatomy of bat jaw musculature via diffusible iodine-based contrast-enhanced computed tomography.</a> Anatomical Record. 301, 267-278 (2018).</li><li>Burrows, A. M., Waller, B. M., Parr, L. A., Bonar, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscles+of+facial+expression+in+the+chimpanzee+(Pan+troglodytes):+descriptive,+comparative+and+phylogenetic+contexts.">Muscles of facial expression in the chimpanzee (Pan troglodytes): descriptive, comparative and phylogenetic contexts.</a> Journal of Anatomy. 208, 153-167 (2006).</li><li>Burrows, A. M., Waller, B. M., Parr, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Facial+musculature+in+the+rhesus+macaque+(Macaca+mulatta):+evolutionary+and+functional+contexts+with+comparisons+to+chimpanzees+and+humans.">Facial musculature in the rhesus macaque (Macaca mulatta): evolutionary and functional contexts with comparisons to chimpanzees and humans.</a> Journal of Anatomy. 215, 320-334 (2009).</li><li>Cox, P. G., Jeffery, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reviewing+the+Morphology+of+the+Jaw-Closing+Musculature+in+Squirrels,+Rats,+and+Guinea+Pigs+with+Contrast-Enhanced+MicroCt.">Reviewing the Morphology of the Jaw-Closing Musculature in Squirrels, Rats, and Guinea Pigs with Contrast-Enhanced MicroCt.</a> Anatomical Record. 294, 915-928 (2011).</li><li>Gignac, P. M., Kley, N. J., Clarke, J. A., Colbert, M. W., Morhardt, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusible+iodine-based+contrast-enhanced+computed+tomography+(diceCT):+An+emerging+tool+for+rapid,+high-resolution,+3-D+imaging+of+metazoan+soft+tissues.">Diffusible iodine-based contrast-enhanced computed tomography (diceCT): An emerging tool for rapid, high-resolution, 3-D imaging of metazoan soft tissues.</a> Journal of Anatomy. 228, 889-909 (2016).</li></ol>

Volgens de procedure voor de "omgekeerde dissectie" produceert protocol meestal een gezichtsmasker dat langzaam en methodisch te onthullen mimetische spierstelsel, ongeacht de grootte van het hoofd kan worden ontleed. Het is vooral belangrijk om langzaam en continu beoordelen of de spieren zijn volledig verlaagd door per ongeluk, met name in kleinere carrosserie soorten.
Om te bepalen waar de spieren zich bevindt, is het vooral essentieel dat de ontwikkelingslanden masker te drogen in fasen te...

Mimetische de daaraan gehechte spiermassa, of gezichtsuitdrukking spierstelsel, is skeletspieren en Mammalia1is verspreid. Terwijl de meeste zoogdieren skeletspieren hecht aan discrete bony monumenten, is mimetische spierstelsel uniek in de bijbehorende bijlagen hoofdzakelijk in de huid van het gezicht, hoofdhuid en het ventrale aspect van de hals1,2,3, 4. Mimetische spierstelsel contractie vervormt de "facial mask" in expressies of facial van sociale en emotionele intentie toont, verandert de grootte en vorm van de kringspieren van het oog, neusholte en mondholte gebruikt in voeding, ademhaling, en stemgebruik, en is onderdeel van het algehele close-nabijheid visuele communicatiemechanisme gevonden onder de meeste zoogdieren2,3,4,5. Over Mammalia helpen de gezichts displays gegenereerd door mimetische spieren bij de regulering en handhaving van territoriale grenzen, sociale banden en de sociale groep door cuing soortgenoten op de emotionele en gedragsmatige bedoelingen van de afzender2, 5.
Onder de zoogdieren, worden primaten gekenmerkt gedeeltelijk als een hoog niveau van sociale gedrag gedurende de hele levenscyclus in dienst met alle soorten leven in een sociale groep2,5. Terwijl sommige taxa, zoals de nachtelijke soort en Lorisidae, wonen in groepen die uitsluitend uit een moeder, nakomelingen en andere taxa, zoals de diurnale makaken en bavianen, bestaat kunnen leven in groepen van meer dan 100 personen6. Ongeacht de grootte van de sociale groep, primaten gebruiken vaak stereotiep sociale gedrag geassocieerd met rang en territorialiteit en deze gedragingen omvatten meestal een onderdeel van het gezicht display. Facial displays zijn onderdeel van het proces van het behoud van obligaties onder lid van sociale groepen, dominantie hiërarchieën, reproductie en de mededeling die deel uitmaakt van het dagelijks leven, met name in dagactieve soorten2,5,7 . Terwijl het is al enige tijd duidelijk dat gezicht van de daaraan gehechte spiermassa wordt gebruikt voor het maken van deze gezicht schermen, is onlangs gebleken dat gezicht spierstelsel vorm en fysiologie gekoppeld aan de functionele eisen van sociale variabelen2zijn, 8. Eerdere studies op fylogenetisch en gedragsgestoorde divers bereiken van primaten hebben aangetoond dat dagactieve soorten die leven in grote, complexe sociale groepen hebben vaak een groot aantal discrete gezicht displays die zich richten op beweging van de lippen, wenkbrauwen en oogleden met een groot aantal gezichtsspieren geclusterd rond de lippen en de orbitale regio9. Daarentegen zijn er weinig studies over nachtelijke soorten leven in kleine groepen, maar deze soorten hebben een groot aantal discrete gezichtsspieren met bijlagen rond de externe oor en lippen, die geassocieerd met bewegingen van het oor en de lippen worden kunnen (die zijn gedocumenteerd in sommige nachtactieve soorten in agonistic ontmoetingen met soortgenoten en lokaliseren van geluiden)2,9,10,11. Bovendien, hebben mensen een relatief hoger percentage van slow-twitch myosin vezels in mimetische spiermassa dan rhesus makaken of chimpansees, die kunnen worden gerelateerd aan de "vertraging" in de samentrekking van menselijke mimetische spieren rond de lippen gebruikt tijdens de productie van spraak geluiden of algemene vermoeidheid-weerstand vermogen van de spieren-8.
Mensen zijn, misschien wel, de meeste sociale van alle primaten, en taal hebben ontwikkeld als een onderdeel van sociale communicatie. Toch wel, mensen gebruik te maken van gelaatsuitdrukking als middel van visuele communicatie en hebben de grootste bekende gezicht display repertoire onder primaten. In een poging om meer volledig begrijpen de variabelen rondom de evolutie van de mens en algemene primate sociaal gedrag, is toegenomen inzicht in de morfologie en de Fysiologie van primate mimetische spierstelsel zeer wenselijk. Omdat mimetische spierstelsel is aangesloten op de huid zelf en in sommige soorten kunnen uitzonderlijk dunne en moeilijk te visualiseren, hebben we een unieke methode van visualiseren van deze spieren, voor zowel de processen van opname bruto aanwezigheid/afwezigheid en bijlagen, alsmede bemonstering voor microanatomical verwerking.
"Reverse dissectie" is een methode voor het behoud van de mimetische van de daaraan gehechte spiermassa door het verwijderen van het hele gezicht masker uit het hoofd en het vergroten van de zichtbaarheid van zelfs kleine spieren. Omdat omgekeerde dissectie een destructieve proces is, zeldzame en waardevolle exemplaren altijd mogelijk niet beschikbaar voor deze methode. DiceCT is een effectieve methode die veel van de mimetische spieren in zelfs kleine soorten12,13,14kunt visualiseren. Deze methode kan worden gebruikt in concert met omgekeerde dissectie of in gevallen waar de zeldzame, waardevolle exemplaren niet kunnen worden ontleed en veel informatie kunnen geven zonder te verwijderen van het gezicht masker in "omgekeerde dissectie"12,13,, 14. Dit protocol beschrijft een aantal methoden voor het combineren van omgekeerde dissectie met DiceCT om te onderzoeken primate mimetische spierstelsel.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nikon XTH 225 ST</td>
			<td style="width:71px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">no catalog numbers</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">10% buffered formalin</td>
			<td style="width:71px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">SF98-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Iodine, ACS Grade</td>
			<td style="width:71px;">Lab Chem, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">LC155901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Sodium thiosulfate</td>
			<td style="width:71px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:119px;">AC450620010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Potassium Iodide</td>
			<td style="width:71px;">Alfa Aesar</td>
			<td style="width:119px;">A1270430</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reverse dissection and dicect reveal otherwise hidden data in the evolution of the primate face

Gezichtsuitdrukkingen of gezicht displays, van sociale of emotionele intentie worden geproduceerd door veel zoogdieren taxa als een middel van visueel communiceren met soortgenoten op een korte afstand. Deze schermen worden bereikt door samentrekking van de mimetische spieren, skeletspieren, gekoppeld aan de dermis van het gezicht zijn. Reverse dissectie, verwijderen van de volledige gezichtsmasker van de schedel en naderen mimetische spieren in omgekeerde volgorde, is een effectief maar destructieve wijze van het openbaren van de morfologie van de mimetische spieren, maar het is destructief. DiceCT is een nieuw mechanisme voor het visualiseren van de skeletspieren, met inbegrip van de mimetische spieren, en isoleren van individuele spieren werken voor kwantitatieve meting. Daarnaast biedt de DiceCT een niet-destructieve mechanisme voor het visualiseren van de spieren. De gecombineerde technieken van omgekeerde dissectie en DiceCT kunnen worden gebruikt ter beoordeling van de evolutionaire morfologie van mimetische spierstelsel, alsmede potentiële contractie kracht en snelheid in deze spieren. Deze studie verder blijkt dat DiceCT kan worden gebruikt om accuraat en betrouwbaar visualiseren mimetische spieren evenals omkeren dissectie en bieden een niet-destructieve methode voor de bemonstering van de mimetische spieren.

Deze sectie bevat voorbeelden van resultaten op gezicht spierstelsel formulier dat kan worden bereikt met behulp van de "omgekeerde dissectie" in concert met het scannen van DiceCT. Met behulp van de "omgekeerde dissectie" als u wilt maken een gezichtsmasker, een vollediger vertegenwoordiging van mimetische (gezichts) spier kan soms worden gezien dan in traditionele dissectie methodologie. Deze methode werkt bij allerlei lichaam maten van het kleine, kleine-bodied primaten, bijvoorbeeld h...

Watch this Scientific Journal Video about Reverse Dissection and DiceCT Reveal Otherwise Hidden Data in the Evolution of the Primate Face at JoVE.com

Reverse Dissection and DiceCT Reveal Otherwise Hidden Data in the Evolution of the Primate Face

Gezichtsuitdrukkingen zijn een wijze van visuele communicatie, geproduceerd door mimetische spieren. We presenteren hier protocollen voor de nieuwe technieken van omgekeerde dissectie en DiceCT volledig visualiseren en evalueren van de mimetische spieren. Deze gecombineerde technieken kunnen zowel morfologische en fysiologische aspecten van mimetische spierstelsel te bepalen functionele aspecten onderzoeken.

Omgekeerde dissectie en DiceCT onthullen anders verborgen gegevens in de evolutie van het Primate gezicht

Facial expressions, or facial displays, of social or emotional intent are produced by many mammalian taxa as a means of visually communicating with ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in de evolutionaire biologie, zoals de evolutie van sociale communicatie. De belangrijkste voordelen van deze techniek zijn dat het direct bewijs levert voor vorm en aanwezigheid van mimetisch spierstelsel. Het elimineert giswerk in het dissectieproces, en het behoudt spierlagen.In combinatie met DiceCT is omgekeerde dissectie de nieuwe gouden standaard voor mimetisch spieronderzoek. Volg om te beginnen het bijbehorende tekstprotocol voor monsterfixatie en voorbereiding. Breng het monster vervolgens over naar de rookkap.Spoel het monster vervolgens enkele uren in stromend water. Zodra het monster is gespoeld, dep het droog met papieren handdoeken, en breng het naar een werkplek. Met de hersenen en bovenlyse calvaria verwijderd, maak een incisie in de buurt van de glabella regio van de schedel, en een ander langs de staart aspect van de schedel, waar de schedel bot intact is.Palpate voor de externe occipitale uitsteeksel aan de staartrand van de schedel. Dit markeert het gebied waar de schedel voldoet aan de wervelkolom. Gebruik dan een scalpel en maak een middellijn incisie, te beginnen bij de externe occipitale uitstulping.Snijd het monster rostrally over de pariëtale en frontale regio van de schedel. Ga verder en ga over het orbitale gebied tussen de ogen, langs de neusstreek, helemaal door het externe neusgebied tussen de nares. Maak vervolgens een snee op de onderkaak tussen de onderste en centrale snijtanden en beweeg de scalpel caudally naar het sleutelbeen.Op dit punt, kies een kant van het gezichtsmasker, en laat het uit de schedel, waardoor de andere kant op zijn plaats. Begin in het occipitale gebied, gebruik de scalpel om het gezichtsmasker, inclusief mimetische spieren, weg van het occipitale bot van de schedel te snijden, het masker rostrally en lateraal te trekken. Snijd de occipitalis spier uit de buurt van de schedel, waardoor een kleine hoeveelheid van de spier achter op de schedel, zodat de bevestiging kan nog steeds worden gevisualiseerd, zodra het gezichtsmasker is verwijderd.Door een deel van de spier achter te laten op de benige en kraakbeenachtige schedel, kunnen bijlagen op een later tijdstip worden bewaard en geregistreerd. Zodra het externe oor is geraakt, lokaliseren van de auriculaire spieren. Snijd door deze spieren, zodat een klein deel van elke spier blijft met de schedel.Snijd vervolgens door het elastische kraakbeen dat het uitwendige oor aan de schedel bevestigt. Blijf het masker rostrally trekken, en laat elke mimetische spier uit de schedel, waardoor een klein deel van elke spier achter op de schedel. Zodra er een intact gezichtsmasker van de ene kant van de schedel, laat het uit te zitten met het spierstelsel blootgesteld aan de lucht, voor een tot drie uur, afhankelijk van de grootte van het monster.Dit zal het bindweefsel op het gezichtsmasker uitdroden en het kleurcontrast tussen spier- en bindweefsel vergroten. Met het contrast tussen spier en bindweefsel nu verbeterd, gebruik maken van de nummer drie scalpel, tangen, en micro schaar om voldoende bindweefsel te verwijderen, om het spierstelsel te visualiseren. De oppervlakkige laag van mimetische spieren in deze omgekeerde dissectie, voorzichtig tillen en scheiden van de diepe laag van het spierstelsel van de oppervlakkige laag, en verwijder de bindweefsels rond de oppervlakkige spieren.Als u klaar bent, keert u het resulterende gezichtsmasker terug in formaline. De procedure kan hier worden onderbroken, voordat u verder gaat met verdere dissectie, of voordat u verdergaat met vlekken. Bij elke tussenstap u voldoende droogtijd van het gezichtsmasker toestaan, zodat het bindweefsel gemakkelijk kan worden onderscheiden van het spierweefsel.Om het mimetische spierstelsel te visualiseerden met behulp van CT-scanning, bevlekt u de maskers met behulp van een jodiumoplossing door het masker in de kleuroplossing van Lugol te plaatsen, zoals beschreven in het bijbehorende tekstprotocol. Het kleuringsproces duurt over het algemeen ongeveer twee weken, in 1,75%Lugol's oplossing. Deze timing varieert echter, afhankelijk van verschillende factoren.Intermitterende scan met begeleide kleuring aanpassing wordt aanbevolen. Voor CT-scannen, eerst voor te bereiden gezichtsmasker met behulp van houten tandenstokers om het gezichtsmasker monteren op een lage dichtheid materiaal, zoals bloemenschuim. Dit zal elimineren eventuele rimpels in het masker, en beperken de beweging als het droogt iets tijdens de scan.Plaats het monster vervolgens in een container met een lage dichtheid en zet het op zijn plaats. Zodra u het monster in de scanner plaatst, sluit u de deur en schakelt u de röntgenfoto's in. Stel vervolgens de CT-scanparameters in voor een röntgentomografiescan met hoge resolutie.Met behulp van inter-slice afstand en inter pixel afstand van ongeveer 0,05 millimeter voor deze scans, als de kleine fascicles zal worden verduisterd bij lagere resolutie. Als fascicles niet volledig kunnen worden gevisualiseerd, als gevolg van overstaining, plaats gezichtsmasker in een ontvlek oplossing zoals 10% formaline, of 5% natrium thiosulfate om een deel van de vlek te verwijderen. Na het aanpassen van de kleuring, scan het gezichtsmasker opnieuw, en blijven de nodige aanpassingen te maken, totdat alle fascicles in staat zijn om volledig worden gevisualiseerd.Door omgekeerde dissectie te gebruiken om een gezichtsmasker te creëren, kan een volledigere representatie van mimetische spieren soms worden gezien, dan in traditionele dissectiemethodologie. Deze methode werkt op een reeks lichaamsgroottes, van het kleine, kleine lichaam van de Marmoset, tot groot-bodied primaten zoals de chimpansee. In kleine primaten die gracil gezichtsspieren hebben, kan een deel van het gezicht spierstelsel niet te onderscheiden zijn van het omringende bindweefsel, en kan verloren gaan tijdens dissectie.Een jodium vlek, zoals Lugol's, kan het contrast te verbeteren en helpen om zowel individuele mimetische spieren op te lossen, evenals individuele spier fascicles, en voor de eerste keer, het verkrijgen van hele spiervolumes van deze gracil spieren. Zoals hier getoond, zijn enkele van de zeer kleine spieren, geassocieerd met het uitwendige oor, duidelijk zichtbaar in de DiceCT scans. Het is niet ongewoon voor deze spieren te missen in sommige omgekeerde dissectie procedures, misschien te wijten aan hun kleine omvang.Deze driedimensionale volumeweergave maakt basisvolume thresholdering en kleurtoewijzing mogelijk, om het spierstelsel gemakkelijker te visualiseren, dan met kruisverhoor alleen. Hier u zien dat de individuele spier fascicles zijn duidelijk zichtbaar in dwarsdoorsnede, waardoor digitale dissectie haalbaar. Tijdens het proberen van deze procedure, is het belangrijk om in gedachten te houden, dat je langzaam, voorzichtig en met overleg moet bewegen, omdat deze methode destructief van aard is.Na deze procedure kunnen andere methoden, zoals histologische verwerking, worden gebruikt om aanvullende vragen te beantwoorden, zoals vezeldiameter of myosinevezeltypering. Na de ontwikkeling ervan maakte deze techniek de weg vrij voor onderzoekers op het gebied van evolutionaire biologie, om de evolutie van gezichtsuitdrukking en visuele communicatie bij niet-menselijke zoogdieren en bij mensen te verkennen. Vergeet niet, dat het werken met formaline, en een geladen scalpel kan zeer gevaarlijk zijn.Voorzorgsmaatregelen, zoals het spoelen van uw exemplaar, en weten waar je scalpel is te allen tijde, moet worden genomen tijdens het uitvoeren van deze procedure.

Research

JoVE Journal

Biology

Molecular Evolution of the Tre Recombinase

Moleculaire evolutie van de Tre recombinase

Here we report the generation of Tre recombinase through directed, molecular evolution. Tre recombinase recognizes a pre-defined target sequence within ...

Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space

Het ontleden van de niet-humane primaten Brain in stereotaxische Space

The use of non-human primates provides an excellent translational model for our understanding of developmental and aging processes in humans1-6. In ...

The Gateway to the Brain: Dissecting the Primate Eye

De poort naar de hersenen: Ontrafeling van de Primate Eye

The visual system in humans is considered the  gateway  to the world and plays a principal role in the plethora of sensory, perceptual and cognitive ...

Knowing What Counts: Unbiased Stereology in the Non-human Primate Brain

Weten wat telt: Unbiased Stereology in de niet-menselijke primaat hersenen

The non-human primate is an important translational species for understanding the normal function and disease processes of the human brain. Unbiased ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissectie van organen van de Adult zebravis

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Dissectie van de Adult zebravis Kidney

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Linking Predation Risk, Herbivore Physiological Stress and Microbial Decomposition of Plant Litter

Linking predatierisico, Herbivore fysiologische stress-en Microbiële afbraak van Plant Litter

The quantity and quality of detritus entering the soil  determines the rate of decomposition by microbial communities as well as  recycle rates of ...

Dissection and Flat-mounting of the Threespine Stickleback Branchial Skeleton

Dissection en Flat-montage van de driedoornige stekelbaars branchial Skeleton

The posterior pharyngeal segments of the vertebrate head give rise to the branchial skeleton, the primary site of food processing in fish. The morphology ...

Comprehensive Workflow for the Genome-wide Identification and Expression Meta-analysis of the ATL E3 Ubiquitin Ligase Gene Family in Grapevine

Uitgebreide Workflow voor de genoom-brede identificatie en expressie Meta-analyse van de ATL E3 Ubiquitin Ligase Gene familie in Grapevine

Classification and nomenclature of genes in a family can significantly contribute to the description of the diversity of encoded proteins and to the ...

Dissection and Lipid Droplet Staining of Oenocytes in Drosophila Larvae

Dissection and Lipid Droplet Staining of Oenocytes in Drosophila Larvae

Dissectie en lipide druppel kleuring van Oenocyten in Drosophila larven

Lipids are essential for animal development and physiological homeostasis. Dysregulation of lipid metabolism results in various developmental defects and ...