Name: reverse dissection and dicect reveal otherwise hidden data in the evolution of the primate face
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reverse Dissection and DiceCT Reveal Otherwise Hidden Data in the Evolution of the Primate Face at JoVE.com

המחברים רוצים להכיר Yerkes הפרימטים הלאומי לחקר לגישה שימפנזה דגימות מקוק רזוס, ואת כריס ששוחררו (צפון-מזרח אוהיו הרפואי האוניברסיטאי) עבור גישה נפוצה דגימות מרמוסט. אנו מודים מריסה Boettcher, לאונרד. קייטלין, אנטוניה Meza ב אוניברסיטת צפון קרוליינה לקבלת סיוע עם תהליך הסריקה. העבודה בוצעה באופן חלקי-הדוכס אוניברסיטת משותפים חומרים ומכשור מתקן (SMIF), חבר של צפון קרוליינה מחקר משולש ננוטכנולוגיה רשת (RTNN), אשר נתמך על ידי הקרן הלאומית למדע (גרנט מרכזים לגיל הרך-1542015) כחלק של נבחרת ננוטכנולוגיה מתואמת תשתית (NNCI). זהו המרכז למור דיוק םוסרפ רפסמ 1405.

כי הליכים אלה להשתמש בבעלי חיים מת מוות טבעי בגני או הוקרבו במעבדות מחקר שבו הם היו חלק שלא קשור ללימודים, פרוטוקולים אלה אינם מחייבים אישורי IACUC.
1. הפוך לנתיחה
הערה: הפרוטוקול עבור ניתוח הפוך יעיל עבור יונקים קטנים מאוד, כמו עכברי מעבדה, כל הדרך עד יונ?...

<ol>
	<li>Gregory, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Our face from fish to man. , (1929).</li><li>Burrows, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+facial+expression+musculature+in+primates+and+its+evolutionary+significance.">The facial expression musculature in primates and its evolutionary significance.</a> BioEssays. 30, 212-215 (2008).</li><li>Santana, S. E., Dobson, S. D., Diogo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plain+faces+are+more+expressive:+comparative+study+of+facial+colour,+mobility+and+in+primates.">Plain faces are more expressive: comparative study of facial colour, mobility and in primates.</a> Biology Letters. , (2014).</li><li>Burrows, A. M., Cohn, J. F., Li, S. Z., Jain, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+anatomy+of+the+face.">Comparative anatomy of the face.</a> Encyclopedia of Biometrics. , (2014).</li><li>Liebal, K., Waller, B. M., Burrows, A. M., Slocombe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Primate Communication. , (2013).</li><li>Rowe, N., Myers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> All the World's Primates. , (2016).</li><li>Burrows, A. M., Waller, B. M., Micheletta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mimetic+muscles+in+a+despotic+macaque+(Macaca+mulatta)+differ+from+those+in+a+closely+related+tolerant+macaque+(M.+nigra).">Mimetic muscles in a despotic macaque (Macaca mulatta) differ from those in a closely related tolerant macaque (M. nigra).</a> Anatomical Record. 299, 1317-1324 (2016).</li><li>Burrows, A. M., Parr, L. A., Durham, E. L., Matthews, L. C., Smith, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+faces+are+slower+than+chimpanzee+faces.">Human faces are slower than chimpanzee faces.</a> PLoS One. 9, 0110523 (2014).</li><li>Burrows, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+morphology+of+mimetic+musculature+in+primates:+how+social+variables+and+body+size+stack+up+to+phylogeny.">Functional morphology of mimetic musculature in primates: how social variables and body size stack up to phylogeny.</a> Anatomical Record. 301, 202-215 (2018).</li><li>Burrows, A. M., Smith, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscles+of+facial+expression+in+Otolemur,+with+a+comparison+to+Lemuroidea.">Muscles of facial expression in Otolemur, with a comparison to Lemuroidea.</a> Anatomical Record. 274, 827-836 (2003).</li><li>Burrows, A. M., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What's+inside+tarsier+faces.">What's inside tarsier faces.</a> Yearbook of Physical Anthropology. 60, 96 (2015).</li><li>Dickinson, E., Stark, H., Kupczik, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-destructive+determination+of+muscle+architectural+variables+through+the+use+of+DiceCT.">Non-destructive determination of muscle architectural variables through the use of DiceCT.</a> Anatomical Record. 301, 363-377 (2018).</li><li>March, D., Hartstone-Rose, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+morphology+and+behavioral+correlates+to+postcranial+musculature.">Functional morphology and behavioral correlates to postcranial musculature.</a> Anatomical Record. 301, 419-423 (2018).</li><li>Santana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+anatomy+of+bat+jaw+musculature+via+diffusible+iodine-based+contrast-enhanced+computed+tomography.">Comparative anatomy of bat jaw musculature via diffusible iodine-based contrast-enhanced computed tomography.</a> Anatomical Record. 301, 267-278 (2018).</li><li>Burrows, A. M., Waller, B. M., Parr, L. A., Bonar, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscles+of+facial+expression+in+the+chimpanzee+(Pan+troglodytes):+descriptive,+comparative+and+phylogenetic+contexts.">Muscles of facial expression in the chimpanzee (Pan troglodytes): descriptive, comparative and phylogenetic contexts.</a> Journal of Anatomy. 208, 153-167 (2006).</li><li>Burrows, A. M., Waller, B. M., Parr, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Facial+musculature+in+the+rhesus+macaque+(Macaca+mulatta):+evolutionary+and+functional+contexts+with+comparisons+to+chimpanzees+and+humans.">Facial musculature in the rhesus macaque (Macaca mulatta): evolutionary and functional contexts with comparisons to chimpanzees and humans.</a> Journal of Anatomy. 215, 320-334 (2009).</li><li>Cox, P. G., Jeffery, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reviewing+the+Morphology+of+the+Jaw-Closing+Musculature+in+Squirrels,+Rats,+and+Guinea+Pigs+with+Contrast-Enhanced+MicroCt.">Reviewing the Morphology of the Jaw-Closing Musculature in Squirrels, Rats, and Guinea Pigs with Contrast-Enhanced MicroCt.</a> Anatomical Record. 294, 915-928 (2011).</li><li>Gignac, P. M., Kley, N. J., Clarke, J. A., Colbert, M. W., Morhardt, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusible+iodine-based+contrast-enhanced+computed+tomography+(diceCT):+An+emerging+tool+for+rapid,+high-resolution,+3-D+imaging+of+metazoan+soft+tissues.">Diffusible iodine-based contrast-enhanced computed tomography (diceCT): An emerging tool for rapid, high-resolution, 3-D imaging of metazoan soft tissues.</a> Journal of Anatomy. 228, 889-909 (2016).</li></ol>

בעקבות צעדים "רוברט הפוכה" פרוטוקול בדרך כלל מייצר מסיכת הפנים זה יכול להיות באיטיות ובשיטתיות גזור כדי לחשוף מימטי לשריר, ללא קשר לגודל של הראש. זה חשוב במיוחד לאט לאט, להעריך באופן רציף אם השרירים לחלוטין שנחתכו באמצעות בשוגג, במיוחד קטנות בטעמי מינים.
על מנת לקבוע היכן ממו...

מערכת השרירים מימטי, או הבעת פנים לשריר, שרירי השלד ואת נמצא בכל היונקים1. בעוד ביותר בתרבית של שרירי השלד מייחסת דיסקרטית ציוני הגרמי, מערכת השרירים מימטי הוא ייחודי מצורפים בעיקר לתוך העור של הפנים, הקרקפת, ההיבט הגחון של הצוואר1,2,3, 4. התכווצות השרירים מימטי מתעוות "מסיכת פנים" לתוך ביטויים או טיפול פנים מציג כוונות חברתיים ורגשיים, משנה את הגודל והצורה של הפעלת הספינקטרים של העין, חלל האף, חלל הפה בשימוש בהאכלה, נשימה, וב -vocalizations, והוא חלק ממנגנון תקשורת חזותית בסך הכל סגור-הקרבה בקרב רוב היונקים2,3,4,5. בין היונקים, מציג פנים שנוצר על ידי השרירים מימטי לסייע וויסות ושמירה על גבולות טריטוריאליים, קשרים חברתיים, לבין קבוצה חברתית מאת cuing בני מינו על כוונות השולח את2, רגשיות והתנהגותיות 5.
בקרב יונקים, פרימטים מאופיינים חלק כמו העסקת רמה גבוהה של התנהגות חברתית לאורך כל מחזור החיים של כל המינים החיים2,קבוצה חברתית5. בעוד כמה taxa, כגון galagos ליליים של lorises, יחיו בקבוצות המורכב רק של אמא, הצאצאים, taxa אחרים, כגון קופי מקוק ההשתנות היומית, בבונים, עשוי לחיות בקבוצות של מעל 100 אנשים6. לא משנה גודל הקבוצה החברתית, פרימטים מרבים להשתמש הסטראוטיפי התנהגויות חברתיות הקשורות דרגה ולא הטריטוריאליות והתנהגויות אלו כוללות בדרך כלל רכיב התצוגה פנים. צגים פנים הם חלק מהתהליך של שמירה על קשרים בין חבר של קבוצות חברתיות, הדומיננטיות הירארכיות, רבייה, התקשורת היא חלק מחיי היומיום, במיוחד אצל מינים ההשתנות היומית2,5,7 . בעוד היה ברור כבר כמה זמן את מערכת השרירים פנים משמש ליצירת הצגת הפנים האלה, זה רק לאחרונה הפך גלוי פנים מערכת השרירים טופס ופיזיולוגיה קשורים עם דרישות פונקציונלי של משתנים חברתיים2, 8. מחקרים קודמים על טווחים phylogenetically, בהתנהגותו מגוונות של יונקים הראו כי ההשתנות היומית מינים חיים גדולים, קבוצות חברתיות מורכבות נוטים להיות בעלי מספר גבוה של מציג פנים דיסקרטית פוקוס על חופש התנועה של השפתיים, גבות, העפעפיים עם מספר גבוה של שרירי הפנים התקבצו סביב השפתיים מסלולית באזור9. לעומת זאת, היו כמה מחקרים על לילית מינים חיים בקבוצות קטנות, אך מינים אלה יש מספר גבוה של שרירי הפנים דיסקרטית עם קבצים מצורפים סביב האוזן החיצונית השפתיים, אשר עשוי להיות קשור עם תנועות של האוזן ואת השפתיים (אשר תועדו מספר מינים הלילית היתה ללא-חת מפגשים עם בני מינו ואיתור צלילים)2,9,10,11. בנוסף, בני האדם יש אחוז גבוה יחסית של סיבים צולבות הקישור חוטים שרירן איטי עווית השרירים מימטי מאשר קופי מקוק רזוס או השימפנזים, אשר עשויה להיות קשורה את "מאט" התכווצות של האדם מימטי השרירים סביב השפתיים בשימוש בתהליך הייצור של קולות דיבור או עייפות כללית-התנגדות היכולת של השרירים8.
בני אדם הן, ללא ספק, הכי חברותי של כל יצירי, פיתחו שפה כמו מרכיב אחד של תקשורת חברתית. עדיין, למרות זאת, בני אדם להשתמש הבעת פנים, כאמצעי תקשורת חזותית ויש הרפרטואר להציג פנים מוכרות הגדול ביותר בקרב פרימטים. במאמץ יותר לגמרי מבין המשתנים המקיפים את האבולוציה של התנהגות חברתית אנושית וכללית הפרימטים, הבנה מוגברת של המורפולוגיה ופיזיולוגיה של מערכת השרירים מימטי הפרימטים הוא רצוי מאוד. כי מערכת השרירים מימטי מצורפת על העור עצמו וייתכן, במינים מסוימים, דקה במיוחד שקשה לדמיין, פיתחנו שיטה ייחודית של להמחיש את מערכת השרירים עבור שני התהליכים של הקלטה ברוטו נוכחות/היעדרות ו קבצים מצורפים, כמו גם דגימה לצורך עיבוד microanatomical.
"הפוך לנתיחה" היא שיטה לשמר את מערכת השרירים מימטי על ידי הסרת את כל מסכת הראש והגדלת הנראות של השרירים אפילו קטן. בגלל הקרע הפוכה הוא תהליך הרסני, דגימות נדיר ורב ערך אולי לא תמיד תהיה זמינה עבור מתודולוגיה זו. DiceCT היא שיטה יעילה שיכולים להמחיש רבים של השרירים מימטי מינים קטנה12,13,14. ניתן להשתמש בשיטה זו ביחד עם ניתוח הפוך או במקרים לא עשוי להיות גזור ואיפה יכול לספק מידע רב בלי להסיר את מסכת "הפוך לנתיחה"12,13, דגימות נדיר, יקר 14. בפרוטוקול הנוכחי מתאר קבוצה של שיטות לשילוב לנתיחה הפוכה עם DiceCT כדי לבחון את מערכת השרירים מימטי הפרימטים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nikon XTH 225 ST</td>
			<td style="width:71px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">no catalog numbers</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">10% buffered formalin</td>
			<td style="width:71px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">SF98-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Iodine, ACS Grade</td>
			<td style="width:71px;">Lab Chem, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">LC155901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Sodium thiosulfate</td>
			<td style="width:71px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:119px;">AC450620010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Potassium Iodide</td>
			<td style="width:71px;">Alfa Aesar</td>
			<td style="width:119px;">A1270430</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reverse dissection and dicect reveal otherwise hidden data in the evolution of the primate face

הבעות פנים, או מציג פנים, כוונות חברתיות ורגשיות מופקים על ידי רבים taxa יונקים כאמצעי תקשורת חזותית עם בני מינו מטווח קרוב. אלה מציג מושגות על ידי התכווצות של השרירים מימטי, אשר הם שרירי השלד מחובר הדרמיס של הפנים. הפוך לנתיחה, מתקרב השרירים מימטי בין הסרת המסכה מלא פנים הגולגולת לאחור, הוא יעיל אך הרסני דרך. לגלות המורפולוגיה של השרירים מימטי אבל זה הוא הרסני. DiceCT הוא מנגנון להמחיש שרירי השלד, לרבות שרירי מימטי של בידוד שרירים בודדים fascicles למדידה כמותית. בנוסף, DiceCT מספק מנגנון הרסניות להמחשת השרירים. טכניקות משולבות של דיסקציה הפוכה, DiceCT יכול לשמש להערכת המורפולוגיה אבולוציונית של מערכת השרירים מימטי וכן פוטנציאליים עוצמת ההתכווצות של מהירות השרירים האלה. מחקר זה בהמשך מדגים כי DiceCT יכול לשמש כדי בדייקנות ובאמינות להמחיש השרירים מימטי וכן הפוך לנתיחה, מספקות שיטה גמישה דגימה מימטי השרירים.

סעיף זה מציג דוגמאות של תוצאות טופס פנים מערכת השרירים ניתן להשיג באמצעות "הפוך לנתיחה" בהופעה עם DiceCT סריקה. באמצעות "הפוך לנתיחה" ליצירת מסיכת הפנים, ייצוג פולר של השריר (פנים) מימטי לפעמים ניתן לראות מאשר מתודולוגיה ניתוח מסורתי. שיטה זו פועלת על מגוון של הגוף גדלים מ לקו?...

Watch this Scientific Journal Video about Reverse Dissection and DiceCT Reveal Otherwise Hidden Data in the Evolution of the Primate Face at JoVE.com

Reverse Dissection and DiceCT Reveal Otherwise Hidden Data in the Evolution of the Primate Face

הבעות פנים הם מצב של תקשורת חזותית המיוצר על ידי השרירים מימטי. כאן, אנו מציגים פרוטוקולים עבור טכניקות הרומן של דיסקציה הפוכה ו- DiceCT כדי להמחיש באופן מלא להעריך מימטי השרירים. טכניקות משולבות אלה ניתן לבחון היבטים מורפולוגיים פיזיולוגיים של מערכת השרירים מימטי כדי לקבוע היבטים פונקציונליים.

הפוך לנתיחה ונתונים DiceCT לחשוף אחרת מוסתרים באבולוציה של הפנים הפרימטים

Facial expressions, or facial displays, of social or emotional intent are produced by many mammalian taxa as a means of visually communicating with ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בביולוגיה האבולוציונית, כגון האבולוציה של תקשורת חברתית. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא מספקת ראיות ישירות עבור צורה ונוכחות של שרירים מימטיים. זה מבטל את הניחושים בתהליך הניתוח, והוא משמר שכבות שרירים.בשילוב עם DiceCT, ניתוח הפוך הוא תקן הזהב החדש לחקירת שרירים מימטיים. כדי להתחיל, בצע את פרוטוקול הטקסט הנלווה עבור קיבעון והכנה של דגימה. לאחר מכן, העבר את הדגימה למכסה המנוע של האדים.לאחר מכן, לשטוף את הדגימה במשך כמה שעות במים זורמים. לאחר שהדגימה נשטיפת, טופסים אותה יבשה במגבות נייר, ומעבירים אותה לתחנת עבודה. עם המוח וגולגולת יתר הוסר, לעשות חתך אחד ליד אזור glabella של הגולגולת, ועוד לאורך ההיבט caudal של הגולגולת, שם עצם הגולגולת שלם.תן תן תן תן לחץ חוץ על הפתגם העורפי בקצה הגולגולת. זה מסמן את האזור שבו הגולגולת פוגשת את עמוד השדרה. לאחר מכן השתמש אזמל ולעשות חתך קו האמצע, החל protuberance העורפי החיצוני.חותכים את הדגימה על פני האזור הקודקודי והחזיתי של הגולגולת. המשך ולעבור מעל אזור המסלול בין העיניים, במורד אזור האף, כל הדרך דרך אזור האף החיצוני בין nares. לאחר מכן, לעשות חתך על הלסת התחתונה והמרכזית החותכים, ולהזיז את האזמל באופן סיבתי לכיוון עצם הבריח.בשלב זה, לבחור צד אחד של מסכת הפנים, ולשחרר אותו מן הגולגולת, משאיר את הצד השני במקום. החל באזור העורפי, השתמש באזמל כדי לחתוך את מסכת הפנים, כולל שרירים מימטיים, הרחק העצם העורפית של הגולגולת, מושך את המסכה rostrally וצולח. חותכים את שריר העורף מן הגולגולת, משאיר כמות קטנה של השריר מאחור על הגולגולת, כך ההחזקה שלה עדיין ניתן לדמיין, לאחר מסכת הפנים הוסר.על ידי השארת חלק מהשריר מאחור על הגולגולת הגרמי והעגלתי, ניתן לשמר ולהקליט קבצים מצורפים במועד מאוחר יותר. לאחר האוזן החיצונית נפגעת, לאתר את השרירים auricular. חותכים דרך השרירים האלה, כך שחלק קטן של כל שריר נשאר עם הגולגולת.לאחר מכן, לחתוך דרך הסחוס האלסטי חיבור האוזן החיצונית לגולגולת. ממשיכים למשוך את המסכה, ומשחררים כל שריר מימטי מהגולגולת, משאירים חלק קטן מכל שריר מאחור על הגולגולת. ברגע שיש מסכת פנים שלמה מצד אחד של הגולגולת, לאפשר לו לשבת בחוץ עם השרירים חשופים לאוויר, במשך שעה עד שלוש שעות, בהתאם לגודל של הדגימה.זה יהיה לדכא את רקמת החיבור על מסכת הפנים, ולהגדיל את ניגודיות הצבע בין שריר רקמת חיבור. עם הניגוד בין שריר לרקמת חיבור משופרת כעת, השתמש במספר שלוש אזמל, מדפים ומספריים מיקרו כדי להסיר רקמת חיבור מספקת, על מנת לדמיין את השרירים. השכבה השטחית של השרירים הומיטיים בתפיסה הפוכה זו, מרימים ומפרידים בעדינות את שכבת השרירים העמוקה מהשכבה השטחית, ומסירים את רקמות החיבור המקיפות את השרירים השטחיים.בסיום, להחזיר את מסכת הפנים וכתוצאה מכך בחזרה לפורמלין. ההליך עשוי להיות מושהה כאן, לפני שעבר לנתח נוסף, או לפני שתמשיך להכתים. בכל שלב מתערב, לאפשר זמן ייבוש מספיק של מסכת הפנים, כך רקמת החיבור ניתן להבחין בקלות מתוך רקמת השריר.על מנת שהשרידים הומיטיים יתוארו באמצעות סריקת CT, הכתימו את המסכות באמצעות תווי יוד על ידי הנחת המסכה בתספור הכתמים של לוגול, כמתואר בפרוטוקול הטקסט הנלווה. תהליך הכתמים אורך בדרך כלל כשבועיים, ב-1.75% מהפתרון של לוגול. עם זאת, תזמון זה משתנה, בהתאם למספר גורמים.מומלץ לבצע סריקה לסירוגין עם כוונון כתמים מלווה. לסריקת CT, הכינו תחילה את מסכת הפנים באמצעות קיסמים מעץ כדי להרכיב את מסכת הפנים על חומר בצפיפות נמוכה, כגון קצף פרחוני. זה יבטל את כל הקמטים במסכה, ולהגביל את תנועתו כפי שהוא מתייבש מעט במהלך הסריקה.לאחר מכן, מניחים את הדגימה במיכל בצפיפות נמוכה, ומאבטחים אותה למקומה. לאחר הבטחה, מקם את הדגימה בסורק, סגור את הדלת והדליק את צילומי הרנטגן. לאחר מכן, הגדר את הפרמטרים של סריקת CT לסריקת טומוגרפיה ממוחשבת ברנטגן ברזולוציה גבוהה.באמצעות ריווח בין פרוסות ומרחק בין פיקסלים של כ 0.05 מילימטרים עבור סריקות אלה, כמו fascicles קטן יהיה מוסתר ברזולוציה נמוכה יותר. אם fascicles אינם מסוגלים להיות חזותיים באופן מלא, בשל overstaining, למקם מסכת פנים לתוך פתרון דה כתם כגון 10%פורמלין, או 5%נתרן thiosulfate כדי להסיר חלק מהכתם. לאחר התאמת הכתמים, לסרוק את מסכת הפנים שוב, ולהמשיך לבצע את ההתאמות הדרושות, עד שכל fascicles מסוגלים להיות חזותיים באופן מלא.באמצעות ניתוח הפוך כדי ליצור מסכת פנים, ייצוג מלא יותר של שריר מימטי לפעמים ניתן לראות, מאשר במתודולוגיית ניתוח מסורתית. שיטה זו פועלת במגוון גדלי גוף, החל מהגוף הזעיר והקטן של המרמוסט, דרך פרימטים בעלי גוף גדול כמו השימפנזה. בפרימטים בעלי גוף קטן בעלי שרירי פנים גרייסיל, חלק מהשרירים בפנים עשויים להיות בלתי ניתנים להבחנה מרקמה החיבור שמסביב, ועשויים ללכת לאיבוד במהלך הניתוח.כתם יוד, כגון לוגול, עשוי לשפר את הניגוד ולעזור לפתור הן שרירים מימטיים בודדים, כמו גם fascicles שרירים בודדים, ובפעם הראשונה, להשיג כמויות שרירים שלמות של שרירי gracil אלה. כפי שמוצג כאן, חלק מהשרירים הקטנים מאוד, הקשורים לאוזן החיצונית, נראים בבירור בסריקות הקוביות. זה לא נדיר עבור השרירים האלה להחמיץ כמה הליכי ניתוח הפוכים, אולי בשל גודלם הקטן.עיבוד נפח תלת מימדי זה מאפשר סף נפח בסיסי ומיפוי צבעים, כדי לדמיין את השרירים בקלות רבה יותר, מאשר עם חקירה נגדית בלבד. כאן אתה יכול לראות כי fascicles שריר בודדים גלויים בבירור חתך רוחב, מה שהופך את הניתוח הדיגיטלי ריאלי. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור, כי אתה צריך לנוע לאט, בזהירות, עם דיון, כמו שיטה זו היא הרסנית בטבע.בעקבות הליך זה, שיטות אחרות, כגון עיבוד היסטולוגי, עשוי לשמש כדי לענות על שאלות נוספות, כגון קוטר סיבים, או הקלדת סיבי מיוסין. לאחר התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום הביולוגיה האבולוציונית, לחקור את האבולוציה של הבעת פנים ותקשורת חזותית ביונקים לא אנושיים ובבני אדם. אל תשכח, כי עבודה עם פורמלין, ואזמל טעון יכול להיות מסוכן מאוד.אמצעי זהירות, כגון שטיפת הדגימה שלך, ולדעת איפה האזמל שלך הוא בכל עת, יש לנקוט בעת ביצוע הליך זה.

Research

JoVE Journal

Biology

Molecular Evolution of the Tre Recombinase

אבולוציה מולקולרית של recombinase Tre

Here we report the generation of Tre recombinase through directed, molecular evolution. Tre recombinase recognizes a pre-defined target sequence within ...

Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space

בניתוח מוח בלתי אנושי הפרימאטים בחלל Stereotaxic

The use of non-human primates provides an excellent translational model for our understanding of developmental and aging processes in humans1-6. In ...

The Gateway to the Brain: Dissecting the Primate Eye

השער המוח: בניתוח עיניים הפרימאטים

The visual system in humans is considered the  gateway  to the world and plays a principal role in the plethora of sensory, perceptual and cognitive ...

Knowing What Counts: Unbiased Stereology in the Non-human Primate Brain

מה שחשוב לדעת: Stereology משוחדת במוח שאינם האדם הפרימאטים

The non-human primate is an important translational species for understanding the normal function and disease processes of the human brain. Unbiased ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissection של איברים מן דג הזברה למבוגרים

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Dissection של הכליה דג הזברה למבוגרים

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Linking Predation Risk, Herbivore Physiological Stress and Microbial Decomposition of Plant Litter

קישור סיכוני טריפה, מתח פיסיולוגי אוכלי עשב ופירוק מיקרוביאלית המלטת צמח

The quantity and quality of detritus entering the soil  determines the rate of decomposition by microbial communities as well as  recycle rates of ...

Dissection and Flat-mounting of the Threespine Stickleback Branchial Skeleton

Dissection ו-הרכבה שטוחה של שלד Threespine קוצן branchial

The posterior pharyngeal segments of the vertebrate head give rise to the branchial skeleton, the primary site of food processing in fish. The morphology ...

Comprehensive Workflow for the Genome-wide Identification and Expression Meta-analysis of the ATL E3 Ubiquitin Ligase Gene Family in Grapevine

זרימת עבודה מקיפה עבור הביטוי מטא אנליזה ATL E3 אוביקוויטין ליגאז ג'ין משפחת גפן וזיהוי הגנום כולו

Classification and nomenclature of genes in a family can significantly contribute to the description of the diversity of encoded proteins and to the ...

Dissection and Lipid Droplet Staining of Oenocytes in Drosophila Larvae

Dissection and Lipid Droplet Staining of Oenocytes in Drosophila Larvae

לחיתוך וליפיד Droplet כתמים של Oenocytes בתוך דרוזופילה הזחלים

Lipids are essential for animal development and physiological homeostasis. Dysregulation of lipid metabolism results in various developmental defects and ...