Name: elevated plus maze test combined with video tracking software to investigate the anxiolytic effect of exogenous ketogenic supplements
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Duration: 5 min 42 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Elevated Plus Maze Test Combined with Video Tracking Software to Investigate the Anxiolytic Effect of Exogenous Ketogenic Supplements at JoVE.com

أيده هذا العمل ظاهرة منحة N000141310062 و GLUT1D منحة مؤسسة #6143113500 (إلى دومينيك ص داغوستينو)، وكالة التنمية الوطنية لهنغاريا (تحت "رقم المنحة" TIOP-1.3.1.-07/2-2F-2009-2008؛ إلى زولت كوفاتش) وشؤون إدارة شؤون قدامى المحاربين (بمناسبة الكندي العامة). الكتاب أود أن أشكر "شركة التغذية السعي" لدعم البحوث الجارية بشأن هذا الموضوع (لاري سيلا).

<ol>
	<li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+open+:+closed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat.">Validation of open : closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> Journal of Neuroscience Methods. 14 (3), 149-167 (1985).</li><li>Walf, A., Frye, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+the+elevated+plus+maze+as+an+assay+of+anxiety-related+behavior+in+rodents.">The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents.</a> Nature Protocols. 2 (2), 322-328 (2007).</li><li>Barnett, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The rat: A study in behavior. , (1975).</li><li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+'fear'-motivated+behaviour.">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Archives. In Pharmacology. 327 (1), 1-5 (1984).</li><li>Montgomery, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relation+between+fear+induced+by+novel+stimulation+and+exploratory+behavior.">The relation between fear induced by novel stimulation and exploratory behavior.</a> Journal of Comparative Physiology and Psychology. 48 (4), 254-260 (1955).</li><li>Sarkisova, K. Y., Midzianovskaia, I. S., Kulikov, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depressive-like+behavioral+alterations+and+c-fos+expression+in+the+dopaminergic+brain+regions+in+WAG/Rij+rats+with+genetic+absence+epilepsy.">Depressive-like behavioral alterations and c-fos expression in the dopaminergic brain regions in WAG/Rij rats with genetic absence epilepsy.</a> Behavioral Brain Research. 144 (1-2), 211-226 (2003).</li><li>Jain, N., Kemp, N., Adeyemo, O., Buchanan, P., Stone, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anxiolytic+activity+of+adenosine+receptor+activation+in+mice.">Anxiolytic activity of adenosine receptor activation in mice.</a> British Journal of Pharmacology. 1116 (3), 2127-2133 (1995).</li><li>Paslawski, T., Treit, D., Baker, G. B., George, M., Coutts, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+antidepressant+drug+phenelzine+produces+antianxiety+effects+in+the+plus-maze+and+increases+in+rat+brain+GABA.">The antidepressant drug phenelzine produces antianxiety effects in the plus-maze and increases in rat brain GABA.</a> Psychopharmacology (Berlin). 127 (1), 19-24 (1996).</li><li>Florio, C., Prezioso, A., Papaioannou, A., Vertua, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+A1+receptors+modulate+anxiety+in+CD1+mice.">Adenosine A1 receptors modulate anxiety in CD1 mice.</a> Psychopharmacology (Berlin). 136 (4), 311-319 (1998).</li><li>Engin, E., Treit, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+intra-cerebral+drug+infusions+on+animals'+unconditioned+fear+reactions:+a+systematic+review.">The effects of intra-cerebral drug infusions on animals' unconditioned fear reactions: a systematic review.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology &amp; Biological Psychiatry. 32 (6), 1399-1419 (2008).</li><li>Botton, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aged+mice+receiving+caffeine+since+adulthood+show+distinct+patterns+of+anxiety-related+behavior.">Aged mice receiving caffeine since adulthood show distinct patterns of anxiety-related behavior.</a> Physiology and Behavior. 170, 47-53 (2017).</li><li>Hughes, R. N., Hancock, N. J., Henwood, G. A., Rapley, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+anxiolytic+effects+of+acute+caffeine+on+anxiety-related+behavior+in+male+and+female+rats+tested+with+and+without+bright+light.">Evidence for anxiolytic effects of acute caffeine on anxiety-related behavior in male and female rats tested with and without bright light.</a> Behavioural Brain Research. 271, 7-15 (2014).</li><li>Rex, A., Marsden, C. A., Fink, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+diazepam+on+cortical+5-HT+release+and+behaviour+in+the+guinea-pig+on+exposure+to+the+elevated+plus+maze.">Effect of diazepam on cortical 5-HT release and behaviour in the guinea-pig on exposure to the elevated plus maze.</a> Psychopharmacology (Berlin). 110 (4), 490-496 (1993).</li><li>Almeida, S. S., Garcia, R. A., de Oliveira, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+early+protein+malnutrition+and+repeated+testing+upon+locomotor+and+exploratory+behaviors+in+the+elevated+plus-maze.">Effects of early protein malnutrition and repeated testing upon locomotor and exploratory behaviors in the elevated plus-maze.</a> Physiology of Behaviour. 54 (4), 749-752 (1993).</li><li>Bertoglio, L. J., Carobrez, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+profile+of+rats+submitted+to+session+1-session+2+in+the+elevated+plus-maze+during+diurnal/nocturnal+phases+and+under+different+illumination+conditions.">Behavioral profile of rats submitted to session 1-session 2 in the elevated plus-maze during diurnal/nocturnal phases and under different illumination conditions.</a> Behavioural Brain Research. 132 (2), 135-143 (2002).</li><li>Korte, S. M., De Boer, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+animal+model+of+state+anxiety:+fear-potentiated+behaviour+in+the+elevated+plus-maze.">A robust animal model of state anxiety: fear-potentiated behaviour in the elevated plus-maze.</a> European Journal of Pharmacology. 463 (1-3), 163-175 (2003).</li><li>Carobrez, A. P., Bertoglio, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethological+and+temporal+analyses+of+anxiety-like+behavior:+the+elevated+plus-maze+model+20+years+on.">Ethological and temporal analyses of anxiety-like behavior: the elevated plus-maze model 20 years on.</a> Neuroscience &amp; Biobehavioural Reviews. 29 (8), 1193-1205 (2005).</li><li>Ari, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exogenous+ketone+supplements+reduce+anxiety-related+behavior+in+Sprague-Dawley+and+Wistar+Albino+Glaxo/Rijswijk+rats.">Exogenous ketone supplements reduce anxiety-related behavior in Sprague-Dawley and Wistar Albino Glaxo/Rijswijk rats.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 9, 137 (2016).</li><li>D'Agostino, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+ketosis+with+ketone+ester+delays+central+nervous+system+oxygen+toxicity+seizures+in+rats.">Therapeutic ketosis with ketone ester delays central nervous system oxygen toxicity seizures in rats.</a> American Journal of Physiology: Regulation Integration and Comparative Physiology. 304 (10), R829-R836 (2013).</li><li>Kov&#225;cs, Z., D'Agostino, D. P., Ari, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anxiolytic+effect+of+exogenous+ketone+supplementation+is+abolished+by+adenosine+A1+receptor+inhibition+in+Wistar+Albino+Glaxo/Rijswijk+rats.">Anxiolytic effect of exogenous ketone supplementation is abolished by adenosine A1 receptor inhibition in Wistar Albino Glaxo/Rijswijk rats.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 12, 29 (2018).</li><li>Lynn, D. A., Brown, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ontogeny+of+anxiety-like+behavior+in+rats+from+adolescence+to+adulthood.">The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood.</a> Developmental Psychobiology. 52 (8), 731-739 (2010).</li><li>Ferguson, S. A., Gray, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+effects+on+elevated+plus+maze+behavior+in+spontaneously+hypertensive,+Wistar-Kyoto+and+Sprague-Dawley+male+and+female+rats.">Aging effects on elevated plus maze behavior in spontaneously hypertensive, Wistar-Kyoto and Sprague-Dawley male and female rats.</a> Physiology of Behavior. 85 (5), 621-628 (2005).</li></ol>

داغوستينو، موانئ دبي، كيسل، س.، أرنولد، P. التراكيب والأساليب لإنتاج مرتفعة ولحقت الكيتوزيه. # براءات الاختراع الدولية PCT/US2014/031237. جامعة جنوب فلوريدا.
أرى، جيم، داجوستينو، موانئ دبي، يكمل كيتون خارجية للحد من السلوك المتصلة بالقلق. المؤقت من البراءات #62289749. جامعة جنوب فلوريدا.
دومينيك ص داغوستينو وارية سيلا من الملاك الشركاء في الشركة "شركة التكنولوجيات كيتون".
تم استعراضها وتديرها الجامعة وفقا لسياساتها المؤسسية والفردية تضارب هذه المصالح. أن تعلن جميع المؤلفين أن هناك لا تضارب المصالح إضافية.

بشكل عام، عدة عادة استخدام الاختبارات، مثل اختبار اختيار الضوء الظلام، والتفاعل الاجتماعي، والاختبار EPM، تستخدم لقياس مستوى القلق في نماذج حيوانية مختلفة. ومع ذلك، مقايسة EPM وحدها طريقة مناسبة للتحقيق في, على سبيل المثال، مكملات أثر كيتون خارجية على القوارض القلق مستويات18،20.
والميزة الرئيسية لطريقة استخدام EPM أنها تعتمد على نزعة غريزية القوارض تجاه المساحات المظلمة، والمغلقة، بالإضافة إلى الخوف غير المشروطة من مرتفعات وتجنب الأماكن المفتوحة. من ناحية أخرى، تقوم الأساليب الأخرى لدراسة السلوك مثل القلق على الاستجابات السلوكية لبعض المؤثرات الضارة، مثل الصدمات الكهربائية، والحرمان من الغذاء والماء، وضجيج عال، والتعرض ل رائحة المفترس3. هذه الاختبارات عادة ما يؤدي في رد مشروط، في حين EPM أيضا يمثل بديلاً أكثر إنسانية. علاوة على ذلك، استخدام EPM يمكن أن تكون أداة مفيدة لدراسة مشاركة مناطق الدماغ المختلفة (مثلاً، مناطق الحوفي، الحصين) والآليات الكامنة (مثلاً، غابا، غلوتامات، السيروتونين، الادينوسين) السلوك القلق2.
عند تطبيق العلاجات التي تكون مرهقة جداً للحيوانات (مثلاً، تزقيمية الشفوي)، فمن المهم أن تعالج جميع الحيوانات بنفس الطريقة ونفس الشخص، خاصة عند تقييم آثار والمركنه المحتملة، وخفية. إذا كان ذلك ممكناً، قد يكون مقدمة للمخدرات/المجمع في مياه الشرب، أو عن طريق قبولا 'علاج' أسلوب مفضل. لضمان أن تدار بنفس المبلغ لكل الحيوانات، يمكن استخدام تزقيمية شفوي. استناداً إلى خصائص الحرائك الدوائية للمجمع، فمن المستحسن عادة لاختبار الحيوانات في EPM غضون ساعة واحدة بعد جافاجينج. عند اختيار المواضيع التجريبية، من المهم أن تنظر على السلالة، والجنس، ودورة السفاد، والعمر، فضلا عن وزن الجسم، وفقا للأهداف واختبار المواد2. فيما يتعلق بالعمر، وعند تصميم الدراسات EPM وتفسير البيانات، من المهم أن تنظر في أن تزيد النسبة المئوية لذراع فتح إدخالات خطيا مع سن21 والتغييرات المتعلقة بالشيخوخة في السلوك EPM هي سلالة محددة22.
وعند إجراء اختبار EPM، هناك المشكلات المحتملة التي تحتاج إلى معالجة. في بعض الأحيان تحتاج الحيوانات استبعادها من التحليل بسبب الاتجاهات الخارجة (مثلاً، الحيوان لم يترك المنطقة حيث أنها وضعت، تقريبا يقع قبالة الجهاز، وهو يصرف بالضوضاء أو حدث خارج الجهاز). وقد تشمل المزيد من التعقيدات مع اختبار EPM العلاجات التي تسبب التخدير أو فرط النشاط لهذه الأنواع من الآثار بحاجة إلى أن المقررة عن طريق معلمات EPM.
من المهم أن تعرض الحيوانات لاختبار EPM مرة واحدة فقط نظراً لانخفاض النشاط المعني أذرع مفتوحة، وأظهرت انخفاض إجمالي وقت ينفق على المنبر المركزي في التعرض (متكررة) الثانية من القوارض بالمقارنة مع التعرض الأولى في EPM 14،15. لذلك، ينصح بشدة تعرض مرة واحدة للقوارض لاختبار EPM. ومع ذلك، إذا كان هناك على الأقل ثلاثة أسابيع بين التعرض الأول والثاني إلى EPM وإنشاء EPM يتم نقله إلى غرفة أخرى (بيئة مختلفة)، وقد حقق الحيوانات من EPM اختبار أكثر من مرة2.
استخدام EPM المتاحة في مختلف المواد والأحجام (مثلاً، للماوس أو الفئران)، ودراسة الألوان، والتي يلزم أخذها في الاعتبار عند اختيار المواضيع. من المهم أن نضع في اعتبارنا أن الروائح خلفتها الحيوانات السابقة على الجهاز قد تغير سلوك الحيوان اللاحقة. ولذلك، نوصي باستخدام EPM مصنوعة من المواد التي من السهل نظيفة، مثل زجاج اﻷكريليك (غير شفافة)، التي لا تحتفظ بروائح بعد الغسيل. تجنب الأجهزة EPM مصنوعة من الخشب. ويفضل استخدام ماتي لون مختلف عن لون الحيوانات اختبار EPM (مثلاً، الأسود إذا اختبرت الحيوانات البيضاء). أفضل التباين بين الحيوان والعلبة، كان ذلك أفضل الكشف عن الحيوان وارتفعت الموثوقية والدقة في النتائج التي تم الحصول عليها (المسافة المقطوعة، والسرعة، تتبع). جهاز EPM مصنوعة من مادة رمادية ماتي مفيدة مع الحيوانات الأبيض والأسود، والأبيض والأسود.
وثمة ميزة أخرى لنظام تتبع الفيديو أنه بالإضافة إلى استخدام EPM، يوفر طريقة سهلة ومرنة لإعداده مع طائفة واسعة من الاختبارات السلوكية، مثل المتاهة المائية، فتح الحقل، زائد/شعاعي الذراع/T-Y متاهات، تفضيل المكان، اضطر سباحة ، وذيل تعليق الاختبارات.
باختصار، أن الهدف من هذه المادة وصف اختبار EPM المستخدمة في تركيبة مع فيديو تتبع برامج لجمع وتحليل التغييرات السلوكية استجابة للعلاجات والمركنه الرواية. وتشمل التطبيقات الممكنة لاستخدام EPM فرز وكلاء الدوائية المطورة حديثا لعلاج الاضطرابات المتصلة بالقلق. بالإضافة إلى وكلاء والمركنه وأنكسيوجينيك، يمكن أيضا التحقيق السلوكية تأثير الهرمونات المختلفة لتعاطي المخدرات. ويمكن أيضا تقييم تأثير الشيخوخة والتعرض لعوامل الإجهاد المختلفة. خلصت هذه الدراسة إلى أنه عندما يتم اتخاذ الخطوات المناسبة، استخدام EPM قد ثبت أن طريقة حساسة لتقييم التغيرات السلوكية المرتبطة كيتون مكملات18،20.

والهدف من هذه المقالة وصف منهجية اختبار EPM في تركيبة مع فيديو تتبع البرمجيات من أجل رصد التغيرات في السلوك المتصلة بالقلق وعلاجات جديدة في نماذج القوارض المختبرية. اختبار EPM هو أسلوب تقييم سلوكية بسيطة نسبيا، التي تم تطويرها للتحقيق لقياس مستويات السلوك القلق واستجابات القلق من الفئران بعد تطبيق العلاجات المخدرات1. في الواقع، فإنه قد ثبت أن اختبار EPM مقايسة سلوكية المستخدمة على نطاق واسع وفعال للتحقيق في أحداث تغييرات في مستويات القلق من القوارض1،2. ويستند تطبيق اختبار EPM في القوارض (أساسا الجرذان والفئران) بهم نزعة نحو الأماكن المغلقة المظلمة (نهج) وخوف غير المشروطة مفتوحة ممنوع/مرتفعات (الأبطال) ومستوى عال من الدوافع الفطرية لاستكشاف رواية بيئات. ونتيجة لذلك، اختبار EPM منهجية راسخة تستند نهج-تجنب صراع2،3.
استخدام EPM هو جهاز على شكل زائد تتألف من أربعة أذرع مرتفعة، مما قد وصف هاندلي وميثاني4 (الشكل 1)، ويتكون من اثنين من الأسلحة المقابلة التي تكون مفتوحة إلى المناطق المحيطة بها (أذرع مفتوحة)، بينما هما إغلاق الأسلحة مقابل (الأسلحة مغلقة) مجهزة بالجدران. بعد العلاج، إذا هو زيادة الوقت الذي يستغرقه أذرع مفتوحة و/أو الكشف عن زيادة عدد إدخالات ذراع مفتوحة مقارنة بالسيطرة على الحيوانات (غير المعالجة) على استخدام EPM، وهذا يدل تأثير والمركنه2،3. رد الأبطال أقوى قد تجلى في 5 دقائق الأولى بعد البدء (التنسيب للفئران في تقاطع أربعة أذرع من EPM) مقايسة EPM5؛ ولذلك، عادة يسجل أي سلوك بعد علاج لمدة 5 دقائق على EPM. تدابير إضافية لمستوى القلق، والعدد من الانخفاضات الرأس، الشاسي (الدائمة الرأسي من القوارض على ساقيه الخلفيتين)، بولي البراز، فضلا عن مجموع الذراع يمكن أيضا تسجيل إدخالات (النشاط الحركي العفوي) والمواقف المختلفة (تمتد أو تجميد)، على EPM2. وهكذا، يمكن ترجمة معلمات السلوكية متعددة لتقديم تقييم شامل للسلوك المتصلة بالقلق.
من أجل زيادة صحة النتائج، ثلاثة فحوصات السلوكية تستخدم عادة معا، مثل الاختبار اختيار الضوء الظلام، والاختبار، والتفاعل الاجتماعي واختبار EPM، لقياس مستويات القلق الحيوان مختلف نماذج6. مقايسة EPM القيام وحدها على القوارض أيضا طريقة مناسبة للتحقيق في تأثير المخدرات المختلفة7والمركنه أو أنكسيوجينيك. يتم اختبار EPM حساسة ليس فقط لنوع البنزوديازيبين المهدنه (مثلاً، الديازيبام)8، ولكن أيضا، بين أمور أخرى، إلى مركبات حمض مونوأمين وبيبتيديرجيك ونوكليوسيديرجيك الأمينية (مثلاً، خصم N-الميثيل-د-اسبارتاتي (نمدا) AP7، حمض α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic (امبا) خصم كنقكس، المورفين مؤثر على مستقبلات شبائه الأفيون μ، NPY1 خصم BIBP3226، ومادة ف، جريلين، الاوكسيتوسين، يضع مستقبلات السيروتونين والخصوم مثل 8-أوه-نيال و WAY-100635، وخصم β1 ادريناليه بيتاكسولول)9،10،،من1112. ونتيجة لذلك، مقايسة EPM على القوارض هو أسلوب مناسب وحساسة للتحقيق في تأثير العلاجات المختلفة التي تؤثر على مناطق الدماغ تشارك في تأثير والمركنه (مثلاً، اللوزة والحصين ومناطق الحوفي) و آليات العمل (مثلاً، نظام هرمون السيروتونين وجابايرجيك وأدينوسينيرجيك) المتورطين في القلق2. وتشمل وكلاء اختبار في هذه الدراسات EPM ملاحق خارجية كيتون أن يغير الدماغ إشارات بطرق خفية قد تتطلب طريقة حساسة للكشف عن التغيرات السلوكية.
في هذه المقالة، يصف لنا اختبار EPM المستخدمة في تركيبة مع فيديو تتبع البرمجيات، مما يساعد على القضاء على التحيز التجريبية ويسهل جمع وتحليل التغييرات السلوكية استجابة للعلاجات والمركنه الرواية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:744px;" width="744">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Elevated Plus Maze for mice and rats</td>
			<td style="width:159px;">Coulbourn Instruments</td>
			<td style="width:133px;">&#160;H10-35-EPM</td>
			<td style="width:236px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">SMART Video Tracking Software</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>SMART 3.0</td>
			<td style="width:236px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

elevated plus maze test combined with video tracking software to investigate the anxiolytic effect of exogenous ketogenic supplements

والهدف العام لهذه الدراسة وصف منهجية ترقيته بالإضافة إلى اختبار المتاهة (EPM) في تركيبة مع فيديو تتبع البرمجيات. وغرض الأسلوب توثيق تأثير مختلف العلاجات والمركنه المحتملة على نماذج القوارض المختبرية. ويستند اختبار EPM نزعة القوارض نحو الأماكن المظلمة المحمية المغلقة وغير المشروطة من الخوف من الأماكن المفتوحة ومرتفعات، ودوافعها الفطرية مكثفة لاستكشاف بيئات جديدة. اختبار EPM هو اختبار سلوكية تستخدم على نطاق واسع للتحقيق في الردود والمركنه أو أنكسيوجينيك من القوارض نظراً للمخدرات أن من المعروف أن تؤثر على السلوك. المراقبة مما يدل على أن نسبة انخفاض الوقت الذي ينفق على الأسلحة مغلقة، ونسبة متزايدة من الوقت المستغرق في فتح الأسلحة وتخفيض عدد الإدخالات للأسلحة مغلقة على عدد مرتفع من إدخالات لفتح الأسلحة تقاس باختبار EPM قد يعكس انخفاض مستويات القلق. باستخدام هذا الأسلوب، يتم اختبار أثر مكملات كيتون الخارجية على السلوك المتصلة بالقلق في الفئران سبراغ داولي (الحزب الاشتراكي الديمقراطي). ملاحق خارجية كيتون مزمن تتغذى على الفئران لمدة 83 يوما أو سوبتشرونيكالي وجافاجيد حدة شفويا، اختبار يوميا لمدة 7 أيام، قبل إجراء استخدام EPM. يتم جمع البيانات السلوكية باستخدام الفيديو الذكية نظام تتبع المراقبين أعمى في نهاية العلاج. النتائج الرئيسية تشير إلى أن اختبار EPM هو طريقة فعالة للكشف عن التأثير الناجم عن الملحق والمركنه كيتون، ويمكن اعتباره مقياسا حساسة تقييم التغيرات في السلوك القلق المرتبطة بالمخدرات أو الأيضية المستندة إلى العلاجات.

التجربة الحالية يحقق الفرضية القائلة بأن مكملات كيتون خارجية تدار أما مزمن (بنك الاحتياطي الفيدرالي لمدة 83 يوما) أو سوبتشرونيكالي (جافاجيد شفويا لمدة 7 أيام) له تأثير والمركنه على اثنين شهرا الذكور (الفئران سبراغ داولي (الحزب الاشتراكي الديمقراطي) 250-350 غ). الإدارة المزمنة وتألفت من الملاحق كيتون التالية: إستر كيتون جرعة منخفضة (LKE؛ 1، 3--هناك--أسيتواسيتاتي دييستر، ~ 10 غ/كغ/يوم، LKE)، إستر كيتون جرعة عالية (هك؛ ~ 25 غرام/كغ/يوم، هك)، بيتا-هيدروكسيبوتيراتي-المعدنية الملح (-S; ز ~ 25/ كجم/يوم، كانساس)، والدهون الثلاثية سلسلة-S + المتوسطة (MCT؛ ~ 25 غرام/كغ/يوم، كسمكت). لتجارب الفمية، استخدمت المجموعات المعاملة التالية: كه، كانساس، وكسمكت (5 غ/كغ/يوم). وشملت المجموعات مراقبة التنمية المستدامة أو التنمية المستدامة مع تزقيمية المياه (تحكم). ومثلت كافة البيانات كالمتوسط ± الخطأ المعياري للوسط (SEM). تم النظر في النتائج هامة عندما ف < 0.05. الأهمية تحددها ANOVA أحادي الاتجاه مع اختبار LSD فيشر.
بعد تغذية مزمنة، الفئران في المجموعة كسمكت قضى وقتاً أكثر بكثير بأذرع مفتوحة (p = 0.0094) مقارنة بمجموعة التحكم. الوقت الذي يقضيه في الأسلحة مغلقة كان أقل بشكل ملحوظ في المجموعات LKE، كانساس، وكسمكت (ف = 0.0389 و 0.0077 0.0019، على التوالي)، في حين أن فريق كانساس قضى وقتاً أكثر بكثير في المركز (p = 0.0239) (مجموعة المراقبة (SD) بالمقارنة مع الشكل 7 أ) 18.
الفئران في كانساس وكسمكت المجموعات سافر مسافات أطول بشكل ملحوظ بأذرع مفتوحة (p = 0.036 و 0.0165)، بينما سافر على الفئران في مجموعات LKE وكانساس وكسمكت وأظهرت إلى حد كبير أقل مسافة في الأسلحة مغلقة (p = 0.0252، 0.00041، و 0.0032، على التوالي)، مقارنة بمجموعة المراقبة (SD) (الشكل 7). بالمقارنة مع مجموعة المراقبة، مجموعات كانساس وكسمكت كان أكبر المسافة سافر في منطقة مركز (p = 0.0206 و 0.0482، على التوالي)، بينما في المجموعة كسمكت، وزمن الوصول إلى المدخل الأول إلى الأسلحة مغلقة كان أكبر بكثير بعد التغذية المزمن (p = 0.0038)18 (الشكل 7).
الوقت الذي يقضيه في الأسلحة مفتوحة وكان أكبر في المجموعة كه (ف = 0.0281) بعد 7 أيام تزقيمية الشفوية، بينما في المجموعات كه وكانساس وكسمكت، الوقت الذي يقضيه في وسط تناقص (p = 0.0005، < 0.0001، و = 0.023، على التوالي)، مقارنة كنترول l مجموعة (الشكل 8 أ)18. في مجموعات كه وكانساس، كان أدنى بكثير من عدد الإدخالات إلى الأسلحة مغلقة (p = 0.0436 و 0.0234، على التوالي) بعد 7 أيام إدارة (8B الشكل)، بينما الفئران في كانساس المجموعة أيضا دخلت وسط أقل كثيرا (ف = 0.0193)، مقارنة بمجموعة المراقبة (SD).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58396/58396fig1.jpg"> رقم 1: مرتفعة بالإضافة إلى متاهة (EPM) المستخدمة لاختبار الفئران. كل ذراع 10 سم وفتحه طويلة، مع اثنين من الأسلحة مقابل 50 سم مع حافة بارزة. البلدين مغلقة مقابل الأسلحة مجهزة 30 سم ارتفاع الجدران. ارتفاع المدرج من الكلمة هو 55 سم. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58396/58396fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58396/58396fig2.jpg"> رقم 2: أمثلة على المباشر والإضاءة المباشرة. ضمان مصدر الضوء أشار نحو السقف، بينما يتم حظر الضوء مباشرة فوق منطقة تجريبية. من المهم استخدام الضوء غير المباشر أثناء تجارب EPM كي تضيء وبالمثل جميع الأسلحة الأربعة دون الظلال. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58396/58396fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58396/58396fig3.jpg"> الشكل 3: شريط مساعد التجريب لتتبع حركة البرمجيات. صمم لتوفير الوصول إلى العمليات الرئيسية. تتوافق مع الأزرار لهذه المهمة في إطار عملية التجريب نموذجي، بينما تنشط المهام المسموح بها حاليا فقط. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58396/58396fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58396/58396fig4.jpg"> الشكل 4: مسار هذا الموضوع يتسم بخط أحمر بعد حركة الحيوان. عن طريق ضبط العتبة، يمكن تقليل الخلفية حتى يتم الكشف عنها فقط من هذا الحيوان وتعقبها بواسطة خط أحمر. يتم الإشارة إلى إحداثيات الموقف الحالي، ويتابع المسار مركز الكتلة من هذا الموضوع. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58396/58396fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58396/58396fig5.jpg"> الرقم 5: مرتفعة بالإضافة إلى متاهة (EPM) مع الفئران سبراغ داولي (الحزب الاشتراكي الديمقراطي) في arm. فتح ويتضح مثال الإعداد التجريبية. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58396/58396fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58396/58396fig6.jpg"> رقم 6: مسار حركة المتراكمة للحيوان أثناء محاكمة- كجزء من تحليل البيانات، يمكن عرض تتبع المسار التي تم جمعها من هذا الموضوع في مجال التعقب. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58396/58396fig6large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58396/58396fig7.jpg"> رقم 7: الاستجابات السلوكية للفئران والحزب الديمقراطي الاشتراكي في EPM بعد 83 يوما من التغذية المزمن من مكملات كيتون خارجية. هذه اللوحات إظهار الممثل النتائج التي تم جمعها باستخدام EPM و نظام تتبع حركة18. (أ) مجموعة كسمكت أنفقت نسبة مئوية أكبر من الزمن بأذرع مفتوحة، بينما LKE، كانساس، وجماعات كسمكت أنفاق وقت أقل في الأسلحة مغلقة، مقارنة بمجموعة المراقبة (SD). مجموعات كانساس (ب) وكسمكت سافر مسافة أكثر بأذرع مفتوحة، بينما LKE، كانساس، وجماعات كسمكت سافر مسافة أقل في الأسلحة مغلقة، عرض تخفيض القلق بالمقارنة مع عنصر التحكم المجموعة (SD). دخلت المجموعة (ج) كسمكت الأسلحة مغلقة في وقت لاحق، مما يشير إلى انخفاض القلق بالمقارنة مع السيطرة المجموعة (SD). المختصرات: SD = تشاو القوارض القياسية + الماء (25 غ/كغ من وزن الجسم (يتعلق) من الماء في اليوم)؛ LKE = SD + LKE (1، 3--هناك--أسيتواسيتاتي دييستر، b.w./day 10 جرام/كجم)؛ هك = SD + هك (25 غرام/كغ b.w./day)؛ KS = SD + الملح بيتا-هيدروكسيبوتيراتي-المعدنية (ليالي b.w./day 25 غرام/كغ)؛ كسمكت = SD + الدهون الثلاثية سلسلة-S + المتوسطة (MCT b.w./day 25 غرام/كغ)؛ الحزب الديمقراطي الاشتراكي = فأر سبراغ داولي؛ EPM = مرتفعة بالإضافة إلى متاهة (* p < 0.05؛ * * ف < 0.01؛ * * * ف < 0.001؛ * * * ف < 0.0001). لقد تم تعديل هذا الرقم من آرية وآخرون. 18- <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58396/58396fig7large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58396/58396fig8.jpg"> الشكل 8: الاستجابات السلوكية من الفئران والحزب الديمقراطي الاشتراكي بعد 7 أيام تزقيمية الشفوي مكملات كيتون خارجية. وجمعت نتائج ممثلة من خلال استخدام EPM اختبار، استخدام نظام تتبع حركة برمجيات18. (أ) مجموعة كه أنفقت نسبة مئوية أكبر من الزمن بأذرع مفتوحة، في حين كه، كانساس، وجماعات كسمكت قضى وقتاً أقل في المركز (مقارنة بمجموعة التحكم [SD])، مما يشير إلى انخفاض القلق. (ب) مقارنة بالسيطرة المجموعة (SD)، تم الكشف عن إدخالات أقل في الأسلحة مغلقة من الفئران في المجموعات كه وكانساس. المختصرات: SD = تشاو القوارض القياسية + الماء (يتعلق 5 غ/كغ من الماء يوميا)؛ كه = SD + كيتون إستر (1، 3--هناك--أسيتواسيتاتي دييستر، b.w./day 5 غ/كغ)؛ KS = SD + الملح بيتا-هيدروكسيبوتيراتي-المعدنية (ليالي b.w./day 5 غ/كغ)؛ كسمكت = SD + S MCT (b.w./day 5 غ/كغ)؛ الحزب الديمقراطي الاشتراكي = فأر سبراغ داولي؛ EPM = مرتفعة بالإضافة إلى متاهة (* p < 0.05؛ * * * ف < 0.001؛ * * * ف < 0.0001). لقد تم تعديل هذا الرقم من آرية وآخرون. 18- <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58396/58396fig8large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

Watch this Scientific Journal Video about Elevated Plus Maze Test Combined with Video Tracking Software to Investigate the Anxiolytic Effect of Exogenous Ketogenic Supplements at JoVE.com

Elevated Plus Maze Test Combined with Video Tracking Software to Investigate the Anxiolytic Effect of Exogenous Ketogenic Supplements

مرتفعة بالإضافة إلى متاهة اختبار جنبا إلى جنب مع الفيديو تتبع البرمجيات للتحقيق في تأثير والمركنه ملاحق Ketogenic خارجية

نقدم هنا، بروتوكولا للتحقيق في التغيرات في مستوى القلق من القوارض نماذج حيوانية. مرتفعة بالإضافة إلى متاهة اختبار (EPM)، يستخدم جنبا إلى جنب مع فيديو تتبع البرامج، يوفر طريقة موثوقة لتوثيق أثر العلاجات والمركنه المحتملة المختلفة في سيناريوهات المختبرات الإكلينيكية.

The overall goal of this study is to describe the methodology of the elevated plus maze (EPM) test in combination with a video tracking software. The ...

المتاهة المرتفعة هي طريقة لتوثيق تأثير العلاجات المختلفة التي يحتمل أن تكون مزيلة للقلق على نماذج القوارض المختبرية بطريقة أكثر إنسانية مقارنة بالطرق الأخرى. الميزة الرئيسية لهذه الطريقة هي أن يعتمد على ميل القوارض الغريزية إلى كل من المساحات المظلمة والمغلقة ، بالإضافة إلى الخوف غير المقيد من المرتفعات وتجنب المساحات المفتوحة. كولين بارك، متعاون من مختبري، سيساعد في إثبات الإجراء.قبل عدة أيام من الاختبار ، والتعامل مع الحيوانات عن طريق قطفها من جذعها وحملها لمدة دقيقة لتأقلمها مع المجرب. ثم، قياس وزن الجسم للحيوانات قبل البدء في أي علاجات لتحديد حساب الجرعة للعلاج. بعد ذلك، تعرف الحيوانات على طريقة الزلاجة داخل المعدة باستخدام الماء عن طريق الزلاجة لمدة خمسة أيام قبل مكملات الكيتون.لمقايسة القلق، واستخدام المتاهة زائد مرتفعة أو جهاز EPM، جهاز على شكل زائد مع أربعة أذرع مع اثنين مفتوحة واثنين مغلقة. تضيء جهاز EPM باستخدام الإضاءة غير المباشرة من السقف بدلاً من إلقاء الضوء عليها مباشرة. تأكد من أن جميع الأسلحة الأربعة مضاءة بالمثل.قم بتوصيل مفتاح التثبيت لبرنامج تتبع الحركة في منفذ USB 2.0 وتثبيت البرنامج. ثم، قم بإصلاح الكاميرا فوق المنطقة التجريبية، وتأكد من أنها ستظل غير متحركة طوال مدة التجربة. وأخيراً، قم بإعداد تجربة جديدة في نظام برامج تتبع الحركة باستخدام دليل الإرشادات.وضع الحيوان في منطقة التجريبية. ثم، ابدأ عملية الحصول على البيانات عن طريق الضغط على زر البدء في لوحة التحكم في الوقت. في غرفة الاختبار جمع البيانات EPM بطريقتين، يدويا وباستخدام البرنامج.ويفصل بين المراقبين المكفوفين ستارة. انتظر حتى ene من عملية تتبع تسجيل أو اضغط على زر التوقف على لوحة التحكم في الوقت. ثم، إزالة الحيوان من المنطقة التجريبية.وأخيراً، للوصول إلى أداة التحليل اضغط على زر التحليل في شريط مساعد التجريب. حدد التجارب والفواصل الزمنية لتحليل التقرير وإنشاءه. تبدأ بنقل الفئران في قفص وطنهم إلى غرفة تجريبية 30 دقيقة قبل بدء التجربة.ضع فأرًا عند تقاطع الذراعين الأربعة لـ EPM المواجهة للذراع المفتوحة المقابلة للمجرب. تشغيل برنامج تتبع الفيديو وكذلك يدويا تسجيل سلوك الحيوان لمدة خمس دقائق. ثم، إذا سقط الحيوان قبالة EPM، التقطه ووضعها مرة أخرى على نفس النقطة من EPM حيث سقطت.استبعاد البيانات السلوكية لهذا الحيوان من التحليل. في نهاية الاختبار لمدة خمس دقائق، أوقف برنامج تتبع الفيديو. إزالة الحيوان من EPM، ووضعها مرة أخرى على قفص المنزل.وأخيرا، قم بتنظيف EPM مع المنظفات المطهرة تليها مياه الصنبور. جفف الجهاز بمناشف ورقية. بعد التغذية المزمنة، قضى الجرذان في مجموعة KSMCT وقتاً أطول بكثير في الأذرع المفتوحة مقارنة بمجموعة التحكم.أمضت مجموعة KS وقتًا أطول بكثير في المركز مقارنة بمجموعة التحكم. وينفق وقتا أقل في الأسلحة المغلقة في LKE، KS، KSMCT بالمقارنة مع السيطرة. الجرذان في KS ومجموعات KSMCT سافر مسافات أطول بكثير في الأذرع المفتوحة.في حين أظهرت الفئران في مجموعات LKE وKS وKSMCT مسافة أقل بكثير في الأسلحة المغلقة مقارنة بمجموعة التحكم. علاوة على ذلك، بعد سبعة أيام من الزلاجة الشفوية كان الوقت الذي يقضيه في الذراعين المفتوحين أكبر في مجموعة KE ولكنه انخفض في مركز مجموعات KE و KS و KSMCT. كما انخفض عدد البنود إلى الأسلحة المغلقة انخفاضا كبيرا بعد سبعة أيام من الإدارة في مجموعات KE وKS.من المهم جدا وضع جميع الفئران على المعدات في مانور ثابت عند التقاطع التي تواجه بعيدا عن المجرب. إن فحص EPM على القوارض هو طريقة مناسبة وحساسة للتحقيق في تأثير العلاجات المختلفة التي تؤثر على مناطق الدماغ المشاركة في التأثير المزيل للمخاوف وآليات العمل.

Research

JoVE Journal

Behavior

Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software

الماوس قصيرة وطويلة الأجل الحركي نشاط تحليلها بواسطة برامج تتبع فيديو

Locomotor  activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice  and other rodents. Improvements in video tracking software ...

Barnes Maze Testing Strategies with Small and Large Rodent Models

بارنز استراتيجيات اختبار المتاهة مع نماذج القوارض الصغيرة والكبيرة

Spatial learning and memory of laboratory rodents is often assessed via navigational ability in mazes, most popular of which are the water and dry-land ...

A Dual Task Procedure Combined with Rapid Serial Visual Presentation to Test Attentional Blink for Nontargets

إجراء العمل المزدوج السريع جنبا إلى جنب مع عرض مرئي المسلسل لاختبار سيكلوجية الإنتباه الطرفة لNontargets

When viewers search for targets in a rapid serial visual presentation (RSVP) stream, if two targets are presented within about 500 msec of each other, the ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

ومزدوجة-H المتاهة: اختبار السلوكي قوية للتعلم والذاكرة في القوارض

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

موريس المياه متاهة الاختبار: الأمثل للماوس الانفعال والبيئة اختبار

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

The 4 Mountains Test: A Short Test of Spatial Memory with High Sensitivity for the Diagnosis of Pre-dementia Alzheimer's Disease

4 جبال الاختبار: اختبار قصير من الذاكرة المكانية مع حساسية عالية لتشخيص ما قبل الخرف مرض الزهايمر

This protocol describes the administration of the 4 Mountains Test (4MT), a short test of spatial memory, in which memory for the topographical layout of ...

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

وهناك طريقة لاختبار تأثير الإشارات البيئية على سلوك التزاوج في<em&gt; ذبابة الفاكهة ميلانوغاستر</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

The Other End of the Leash: An Experimental Test to Analyze How Owners Interact with Their Pet Dogs

على الطرف الآخر من المقود: اختبار تجريبي لتحليل كيفية تفاعل أصحاب مع الكلاب الأليفة

It has been suggested that the way in which owners interact with their dogs can largely vary and influence the dog-owner bond, but very few objective ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

اختبار القلق الحيوان في الفئران: آثار الحواف ذراع مفتوحة ومغلقة الذراع الجدار الشفافية في مرتفعة بالإضافة إلى اختبار المتاهة

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

A Novel Single Animal Motor Function Tracking System Using Simple, Readily Available Software

رواية حيوان موتور دالة واحدة تتبع النظام باستخدام برامج بسيطة ومتوفرة بسهولة

We have recently demonstrated that implanting intracortical microelectrodes in the motor corteces of rats&#160;results in immediate and lasting motor ...