Name: purification of extracellular trypanosomes, including african, from blood by anion-exchangers (diethylaminoethyl-cellulose columns)
Uploaded: 2019-04-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Purification of Extracellular Trypanosomes, Including African, from Blood by Anion-Exchangers Diethylaminoethyl-cellulose Columns at JoVE.com

ونشكر جميع أعضاء 177 قاسم أغا إينتيرتريب سيراد IRD جامعة بوردو دي. هذا البحث كان يدعمها التمويل الداخلي من جامعة بوردو والدعم من وكالة الاستخبارات الوطنية، لابيكس ANR بارافراب-11-لابكس-0024، والرابطة من أجل le التنمية de la البحوث في باراسيتولوجي et تروبيكال الطب والخدمات التعاون والعمل الثقافي de لعمباسادي à فرنسا دي بانغي (أفريقيا الوسطى).

التحقيقات مطابقة للمبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (المعاهد الوطنية للصحة المنشور رقم 85±23، تنقيح عام 1996). بروتوكولات وافق لجنتنا الأخلاقيات المحلية.
1-الحيوانات
<ol><li>تبقى الإناث الفئران السويسرية (من-1) الذين تتراوح أعمارهم بين ثمانية إلى عشرة أسا?...

<ol>
	<li>B&#252;scher, P., Cecchi, G., Jamonneau, V., Priotto, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+African+trypanosomiasis.">Human African trypanosomiasis.</a> Lancet. 390 (10110), 2397-2409 (2017).</li><li>Lejon, V., Bentivoglio, M., Franco, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+African+trypanosomiasis.">Human African trypanosomiasis.</a> Handbook of Clinical Neurology. 114, 169-181 (2013).</li><li>Giordani, F., Morrison, L. J., Rowan, T. G., De Koning, H. P., Barrett, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+animal+trypanosomiases+and+their+chemotherapy:+a+review.">The animal trypanosomiases and their chemotherapy: a review.</a> Parasitology. 143 (14), 1862-1889 (2016).</li><li>Aksoy, S., Buscher, P., Lehane, M., Solano, P., Van Den Abbeele, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+African+trypanosomiasis+control:+Achievements+and+challenges.">Human African trypanosomiasis control: Achievements and challenges.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 11 (4), e0005454 (2017).</li><li>B&#252;scher, P., Deborggraeve, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+can+molecular+diagnostics+contribute+to+the+elimination+of+human+African+trypanosomiasis?.">How can molecular diagnostics contribute to the elimination of human African trypanosomiasis?.</a> Expert Review of Molecular Diagnostics. 15 (5), 607-615 (2015).</li><li>Truc, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atypical+human+infections+by+animal+trypanosomes.">Atypical human infections by animal trypanosomes.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 7 (9), e2256 (2013).</li><li>Lumsden, W. H., Kimber, C. D., Evans, D. A., Doig, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trypanosoma+brucei:+miniature+anion-exchange+centrifugation+technique+for+detection+of+low+parasitaemias:+adaptation+for+field+use.">Trypanosoma brucei: miniature anion-exchange centrifugation technique for detection of low parasitaemias: adaptation for field use.</a> Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 73 (3), 312-317 (1979).</li><li>B&#252;scher, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+Models+of+Mini+Anion+Exchange+Centrifugation+Technique+(mAECT)+and+Modified+Single+Centrifugation+(MSC)+for+sleeping+sickness+diagnosis+and+staging.">Improved Models of Mini Anion Exchange Centrifugation Technique (mAECT) and Modified Single Centrifugation (MSC) for sleeping sickness diagnosis and staging.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 3 (11), e471 (2009).</li><li>Lanham, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separation+of+trypanosomes+from+the+blood+of+infected+rats+and+mice+by+anion-exchangers.">Separation of trypanosomes from the blood of infected rats and mice by anion-exchangers.</a> Nature. 218 (5148), 1273-1274 (1968).</li><li>Lanham, S. M., Godfrey, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+salivarian+trypanosomes+from+man+and+other+mammals+using+DEAE-cellulose.">Isolation of salivarian trypanosomes from man and other mammals using DEAE-cellulose.</a> Experimental Parasitology. 28 (3), 521-534 (1970).</li><li>Humphrey, P. A., Ashraf, M., Lee, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+of+trypanosomes+in+vivo,+host+body+weight+gains,+and+food+consumption+in+zinc-deficient+mice.">Growth of trypanosomes in vivo, host body weight gains, and food consumption in zinc-deficient mice.</a> Journal of the National Medical Association. 89 (1), 48-56 (1997).</li><li>Lowry, J. E., Leonhardt, J. A., Yao, C., Belden, E. L., Andrews, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+of+C57BL/6+mice+by+Trypanosoma+musculi+modulates+host+immune+responses+during+Brucella+abortus+cocolonization.">Infection of C57BL/6 mice by Trypanosoma musculi modulates host immune responses during Brucella abortus cocolonization.</a> Journal of Wildlife Diseases. 50 (1), 11-20 (2014).</li><li>Vincendeau, P., Da&#235;ron, M., Daulouede, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+antibody+classes+and+Fc+receptors+responsible+for+phagocytosis+of+Trypanosoma+musculi+by+mouse+macrophages.">Identification of antibody classes and Fc receptors responsible for phagocytosis of Trypanosoma musculi by mouse macrophages.</a> Infection and Immunity. 53 (3), 600-605 (1986).</li><li>Vincendeau, P., Da&#235;ron, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trypanosoma+musculi+co-express+several+receptors+binding+rodent+IgM,+IgE,+and+IgG+subclasses.">Trypanosoma musculi co-express several receptors binding rodent IgM, IgE, and IgG subclasses.</a> Journal of Immunology. 142 (5), 1702-1709 (1989).</li><li>Holzmuller, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virulence+and+pathogenicity+patterns+of+Trypanosoma+bruceigambiense+field+isolates+in+experimentally+infected+mouse:+differences+in+host+immune+response+modulation+by+secretome+and+proteomics.">Virulence and pathogenicity patterns of Trypanosoma bruceigambiense field isolates in experimentally infected mouse: differences in host immune response modulation by secretome and proteomics.</a> Microbes and Infections. 10 (1), 79-86 (2008).</li><li>Holzmuller, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+do+parasites+and+their+excreted-secreted+factors+modulate+the+inducible+metabolism+of+L-arginine+in+macrophages?.">How do parasites and their excreted-secreted factors modulate the inducible metabolism of L-arginine in macrophages?.</a> Frontiers in Immunology. 9, 778 (2018).</li><li>Abrahamson, I. A., Da Silva, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibody-dependent+cytotoxicity+against+Trypanosoma+cruzi.">Antibody-dependent cytotoxicity against Trypanosoma cruzi.</a> Parasitology. 75 (3), 317-323 (1977).</li><li>Herbert, W. J., Lumsden, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trypanosoma+brucei:+a+rapid+&amp;#34;matching&amp;#34;+method+for+estimating+the+host's+parasitemia.">Trypanosoma brucei: a rapid &amp;#34;matching&amp;#34; method for estimating the host's parasitemia.</a> Experimental Parasitology. 40 (3), 427-431 (1976).</li><li>Dauchy, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trypanosoma+brucei+CYP51:+Essentiality+and+Targeting+Therapy+in+an+Experimental+Model.">Trypanosoma brucei CYP51: Essentiality and Targeting Therapy in an Experimental Model.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 10 (11), e0005125 (2016).</li><li>Raz, B., Iten, M., Grether-B&#252;hler, Y., Kaminsky, R., Brun, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Alamar+Blue+assay+to+determine+drug+sensitivity+of+African+trypanosomes+(T.+b.+rhodesiense+and+T.+b.+gambiense)+in+vitro.">The Alamar Blue assay to determine drug sensitivity of African trypanosomes (T. b. rhodesiense and T. b. gambiense) in vitro.</a> Acta Tropica. 68 (2), 139-147 (1997).</li><li>Albright, J. W., Albright, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+growth+of+Trypanosoma+musculi+in+cell-free+medium+conditioned+by+rodent+macrophages+and+mercaptoethanol.">In vitro growth of Trypanosoma musculi in cell-free medium conditioned by rodent macrophages and mercaptoethanol.</a> International Journal for Parasitology. 10 (2), 137-142 (1980).</li><li>Gobert, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-Arginine+availability+modulates+local+nitric+oxide+production+and+parasite+killing+in+experimental+trypanosomiasis.">L-Arginine availability modulates local nitric oxide production and parasite killing in experimental trypanosomiasis.</a> Infection and Immunity. 68 (8), 4653-4657 (2000).</li><li>De Muylder, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Trypanosoma+brucei+kinesin+heavy+chain+promotes+parasite+growth+by+triggering+host+arginase+activity.">A Trypanosoma brucei kinesin heavy chain promotes parasite growth by triggering host arginase activity.</a> PLoS Pathogens. 9 (10), e1003731 (2013).</li><li>Nzoumbou-Boko, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trypanosoma+musculi+Infection+in+Mice+Critically+Relies+on+Mannose+Receptor-Mediated+Arginase+Induction+by+a+TbKHC1+Kinesin+H+Chain+Homolog.">Trypanosoma musculi Infection in Mice Critically Relies on Mannose Receptor-Mediated Arginase Induction by a TbKHC1 Kinesin H Chain Homolog.</a> Journal of Immunology. 199 (5), 1762-1771 (2017).</li><li>Bonhivers, M., Nowacki, S., Landrein, N., Robinson, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biogenesis+of+the+trypanosome+endo-exocytotic+organelle+is+cytoskeleton+mediated.">Biogenesis of the trypanosome endo-exocytotic organelle is cytoskeleton mediated.</a> PLoS Biology. 6 (5), e105 (2008).</li><li>Albisetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+between+the+flagellar+pocket+collar+and+the+hook+complex+via+a+novel+microtubule-binding+protein+in+Trypanosoma+brucei.">Interaction between the flagellar pocket collar and the hook complex via a novel microtubule-binding protein in Trypanosoma brucei.</a> PLoS Pathogens. 13 (11), e1006710 (2017).</li><li>Cross, G. A. M., Klein, R. A., Linstead, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilization+of+amino+acids+by+Trypanosoma+brucei+in+culture:+L-threonine+as+a+precursor+for+acetate.">Utilization of amino acids by Trypanosoma brucei in culture: L-threonine as a precursor for acetate.</a> Parasitology. 71 (2), 311-326 (1975).</li><li>Bringaud, F., Rivi&#232;re, L., Coustou, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Energy+metabolism+of+trypanosomatids:+adaptation+to+available+carbon+sources.">Energy metabolism of trypanosomatids: adaptation to available carbon sources.</a> Molecular and Biochemical Parasitology. 149 (1), 1-9 (2006).</li><li>Mazet, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revisiting+the+central+metabolism+of+the+bloodstream+forms+of+Trypanosoma+brucei:+production+of+acetate+in+the+mitochondrion+is+essential+for+the+parasite+viability.">Revisiting the central metabolism of the bloodstream forms of Trypanosoma brucei: production of acetate in the mitochondrion is essential for the parasite viability.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 7 (12), e2587 (2013).</li><li>Coutton, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+CFAP43+and+CFAP44+cause+male+infertility+and+flagellum+defects+in+Trypanosoma+and+human.">Mutations in CFAP43 and CFAP44 cause male infertility and flagellum defects in Trypanosoma and human.</a> Nature Communications. 9 (1), 686 (2018).</li><li>Cnops, J., Magez, S., De Trez, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Escape+mechanisms+of+African+trypanosomes:+Why+trypanosomosis+is+keeping+us+awake.">Escape mechanisms of African trypanosomes: Why trypanosomosis is keeping us awake.</a> Parasitology. 142 (3), 417-427 (2015).</li><li>Barrett, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidics-Based+Approaches+to+the+Isolation+of+African+Trypanosomes.">Microfluidics-Based Approaches to the Isolation of African Trypanosomes.</a> Pathogens. 6 (4), (2017).</li><li>Taylor, A. E., Lanham, S. M., Williams, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+methods+of+preparation+on+the+infectivity,+agglutination,+activity,+and+ultrastructure+of+bloodstream+trypanosomes.">Influence of methods of preparation on the infectivity, agglutination, activity, and ultrastructure of bloodstream trypanosomes.</a> Experimental Parasitology. 35 (2), 196-208 (1974).</li><li>Gutteridge, W. E., Cover, B., Gaborak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+blood+and+intracellular+forms+of+Trypanosoma+cruzi+from+rats+and+other+rodents+and+preliminary+studies+of+their+metabolism.">Isolation of blood and intracellular forms of Trypanosoma cruzi from rats and other rodents and preliminary studies of their metabolism.</a> Parasitology. 76 (2), 159-176 (1978).</li><li>Cruz-Saavedra, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+Trypanosoma+cruzi+metacyclic+trypomastigotes+by+ion+exchange+chromatography+in+sepharose-DEAE,+a+novel+methodology+for+host-pathogen+interaction+studies.">Purification of Trypanosoma cruzi metacyclic trypomastigotes by ion exchange chromatography in sepharose-DEAE, a novel methodology for host-pathogen interaction studies.</a> Journal of Microbiological Methods. 142, 27-32 (2017).</li><li>Lemesre, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-lasting+protection+against+canine+visceral+leishmaniasis+using+the+LiESAp-MDP+vaccine+in+endemic+areas+of+France:+double-blind+randomised+efficacy+field+trial.">Long-lasting protection against canine visceral leishmaniasis using the LiESAp-MDP vaccine in endemic areas of France: double-blind randomised efficacy field trial.</a> Vaccine. 25 (21), 4223-4234 (2007).</li></ol>

مثقبيات المنقي تمثل وسيلة قوية لدراسة علم المناعة، والكيمياء الحيوية، والخلوية والبيولوجيا الجزيئية. وحصلت مساحات كبيرة من البيانات والنتائج من المثقبيات، ثم مما ساعد على الحصول على المعلومات من خلايا حقيقية النواة الأخرى30. مثقبيات هي أيضا موضوع بحوث هامة ومثيرة للاهتمام ?...

طريقة عرض وصف هنا يسمح فصل مثقبيات، الطفيليات المسؤولة عن داء المثقبيات الأفريقي البشري والحيواني (قبعة) من الدم. وهذا هو أفضل طريقة لتشخيص المرحلة الأولى قبعة وعلاوة على ذلك يسمح هذا الأسلوب تنقية الطفيلي التحقيق المصلية وبحوث قوية.
قبعة بسبب ذبابة التسي تسي أحال المثقبيات البروسية الغامبية و rhodesiense ت1. تتكاثر هذه الطفيليات الأوالي اكستراسيلولارلي في مجرى الدم والليمفاوية، وسوائل الخلالي خلال المرحلة الأولى من المرض (المرحلة هيموليمفاتيك). تبدأ المرحلة الثانية (مرحلة مينينجونسيفاليتيك) عند الطفيليات عبور حاجز الدم في الدماغ؛ علامات عصبية، بما في ذلك اضطراب نوم، التي أعطت لهذا المرض باسم "مرض النوم"، نموذجية لهذه المرحلة الثانية2. مثقبيات ذات الصلة (افانسي ت.، النشيطة ت. ت. ب-البروسية، كونجولينسي ت.) هي العوامل المسببة للحيوان المثقبيات الأفريقي (محكمة الاستئناف الإدارية)3.
وتهدف منظمة الصحة العالمية (WHO) للقضاء على قبعة كمشكلة من مشاكل صحة العامة بحلول عام 2020، والتوقف عن الإرسال بحلول عام 20304. وقد الأخذ في الآونة الأخيرة من اختبارات التشخيص السريع تحسين التشخيص المصلية1،،من45. وضعت العديد من الاختبارات التشخيصية الجزيئية ولكن دورها في مجال التشخيص لم المنشأة5. يتم استخدامها لتحديد الأنواع الفرعية للمجموعة البروسية وداء المثقبيات شاذة الناجمة عن الطفيليات المسؤولة عن المثقبيات الحيواني6.
الكشف عن الطفيليات ضروري للتشخيص والعلاج والمتابعة، كما علم الأمصال يمكن أن تعطي نتائج سلبية كاذبة إيجابية وكاذبة للأسف1. الملاحظة المباشرة تقنيين من الاولانيات هيموفلاجيلاتي هذه يصعب في حالات القبعة التي تسببها الغامبية. ت.، (أكثر من 95% حالات) كما باراسيتيمياس المنخفضة هي القاعدة، بينما للقبعة الناجمة عن ت. رهوديسينسي، كبير عدد الطفيليات موجودة غالباً في الدم. وقد استخدمت تقنيات تركيز مختلفة، مثل إسقاط سميكة والأنبوبة الشعرية الطرد المركزي (مكافحة الإرهاب)، ولكن فصل الطفيليات من الدم بعمود شاردة-مبادل (دي السليلوز) متبوعاً بالطرد المركزي والمراقبة المجهرية بيليه، وهو الأسلوب الأكثر حساسية (ويمكن الكشف عن الطفيليات حوالي 50 مليلتر من الدم)1،7. ونتيجة لذلك، هو تنقية مثقبيات بهذا الأسلوب شاردة-مبادلات (السليلوز دي) الأفضل، وحتى هذا التاريخ، أسلوب المرجع لتصور وعزل الطفيليات من الدم لتشخيص القبعة. في الظروف الميدانية، عمود صغير من السليولوز دي قد استخدمت بنجاح وسهلت العديد من التحسينات الملاحظة تقنيين7،8.
يعتمد الأسلوب الفصل المثقبيات من الدم، المبينة أدناه، في مقابل سطح الطفيلي، الذي أقل سلبية من الثدييات خلايا الدم9. من المثير للاهتمام، هذا الأسلوب قد وضعت قبل 50 عاماً، في عام 1968 بالدكتورة شيلا لنهام، ويظل معيار الذهب للكشف وإعداد مثقبيات مجرى الدم. فسريع واستنساخه مثقبيات ساليفاريان من مجموعة واسعة من الثدييات، وتسمح بتشخيص داء المثقبيات الحيوانية والبشرية على حد سواء10.
للحصول على الطفيليات الحية، وتنقية، تتم إضافة الدم المصاب على عمود مبادل شاردة. الظروف اللوني (أساسا درجة الحموضة، القوة الأيونية للمخازن المؤقتة/وسائل الإعلام) لها لكي تلائم كل الأنواع المثقبيات، وبصورة أعم، كل مزيج من الثدييات خلايا الدم ومثقبيات10. يتم ضبط العازلة شطف تحديداً على درجة الحموضة 8 لمعظم الأفارقة مثقبيات10. هذا الأسلوب يفضل تركيز الطفيليات في الدم للمرضى، ونظرا لأن باراسيتيمياس يمكن أن تكون منخفضة للغاية للكشف عنها بواسطة المراقبة المجهرية وحدها، وكما أنها تمكن الفحوص المختبرية. العمل مع مثقبيات طازجة المعزولة وفي الدم من الحيوانات المصابة باستخدام هذا الأسلوب، أكثر صلة بالموضوع للتحقيقات المختلفة من الدراسات مع الطفيليات التي قد تم مثقف في ظروف أكسينيك في المختبر لأجل غير مسمى.
علاقات الطفيلي المضيف يتم دراسة أفضل مع طفيلي إصابة المضيف الطبيعي، ولذلك، ت. موسكولي، طفيلي مورين طبيعية، وهو ممثل مثقبيات خارج الخلية، مزايا عديدة تنطوي الإصابة مورين في الحيوانات المختبرية الصغيرة ولا تتطلب واقية شروط السلامة المستوى (BSL). موسكولي ت. لا تقتل الفئران الأشخاص، خلافا لكثير من الأنواع مثقبيه الأخرى، بما فيها مسببات الأمراض البشرية. لا يتم القضاء موسكولي ت. في الفئران المحرومين من خلية تي ويمكن زيادة باراسيتيمياس في الفئران المصابة بتعديل كمية الغذاء والمغذيات11. ينظم هذا الطفيلي الاستجابة المناعية في التهابات المشارك مع مسببات الأمراض الأخرى12. هو التعبير عن مستقبلات Fc غشاء موسكولي ت من الفئران المصابة معرض الاختلافات من مثقف ت. موسكولي، على سبيل المثال، فقدت في الثقافات موسكولي ت. أكسينيك، مقارنة بالطفيليات تنقيته من الفئران المصابة13 , 14-العوامل التي تفرز اكسكريتيد (كلية العلوم التربوية) هي أيضا نوعيا وكمياً أقل المعرب عنه في الثقافات المثقبيات أكسينيك وتختلف بين السلالات المعزولة في15من المناطق الموبوءة. كلية العلوم التربوية هي المستضدات الأولى عرض لاستضافة الجهاز المناعي وذلك تلعب دوراً هاما في المضيف الأولى الاستجابة المناعية16.
ويسهل هذا البروتوكول في الحيوانات المصابة تجريبيا للفحوص المختبرية، التجريب على عدد أكبر من الطفيليات، والتقليل من عدد الفئران المطلوبة لا سيما عند استخدام الحيوانات إيمونوسوبريسيد. لا يزال يتم تنقيته glycoproteins السطحي البديل (فسجس) التي يتم استخدامها في "اختبار تراص بطاقة" "داء المثقبيات" (كات) في الفحص الشامل من المثقبيات التي تم نشرها في الفئران. هما الاختبارات التشخيصية السريعة (شرائط ملفوفة على حدة) التي أصبحت الآن متاحة للاستخدام في الميدان، تزال تستخدم مصدر معدية نموذج أصلي فسجس ولا في المختبر مثقف مثقبيات1،4، 5. وقد تيسر النهوض بالدراسة من المثقبيات علم المناعة وعلم الأحياء منذ هذه الطفيليات السليلوز تنقية دي يمكن بسهولة الحصول على كميات كبيرة من المضيفين المصابة طبيعيا أو تجريبيا، وفي القوارض خاصة،.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1036px;" width="1036">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">10 mL Pipettes&#160;</td>
			<td style="width:381px;">Falcon</td>
			<td style="width:184px;">357,551</td>
			<td style="width:172px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">2 mL Pipettes&#160;</td>
			<td style="width:381px;">Falcon</td>
			<td style="width:184px;">352,507</td>
			<td style="width:172px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Centrifugation tube 50 mL</td>
			<td style="width:381px;">Falcon</td>
			<td style="width:184px;">352,070</td>
			<td style="width:172px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:381px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:184px;">4K15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">DEAE cellulose</td>
			<td style="width:381px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:184px;">s/c- 211213</td>
			<td>100 G</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">filter paper&#160;</td>
			<td style="width:381px;">Whatman</td>
			<td style="width:184px;">1,001,125</td>
			<td style="width:172px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Flat bottom flask narrow neck</td>
			<td style="width:381px;">Duran</td>
			<td style="width:184px;">21 711 76</td>
			<td style="width:172px;">6000 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Glucose&#160;</td>
			<td style="width:381px;">VWR</td>
			<td style="width:184px;">101174Y</td>
			<td>500 G</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Heparin</td>
			<td style="width:381px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:184px;">H3149-50KU</td>
			<td>5 000 U</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:299px;">KH2PO4</td>
			<td style="width:381px;">VWR</td>
			<td style="width:184px;">120 26936.260</td>
			<td>500 G</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:299px;">Microscope</td>
			<td style="width:381px;">Olympus</td>
			<td style="width:184px;">CH-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microscope coverslips</td>
			<td style="width:381px;">Thermofisher scientific</td>
			<td style="width:184px;">CB00100RA020MNT0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Microscope slides</td>
			<td style="width:381px;">Thermofisher scientific</td>
			<td style="width:184px;">AGAA000001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:299px;">Na2HPO4&#160;</td>
			<td style="width:381px;">VWR</td>
			<td style="width:184px;">100 28026;260</td>
			<td>500 G</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">NaCl</td>
			<td style="width:381px;">VWR</td>
			<td style="width:184px;">27800.291</td>
			<td>1 KG</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:299px;">NaH2PO4&#160;</td>
			<td style="width:381px;">VWR</td>
			<td style="width:184px;">110 33616;262</td>
			<td>500 G</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Nalgene Plastic Media Bottles size 125 mL</td>
			<td style="width:381px;">Thermofisher scientific</td>
			<td style="width:184px;">342024-0125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Nalgene Plastic Media Bottles size 500 mL</td>
			<td style="width:381px;">Thermofisher scientific</td>
			<td style="width:184px;">342024-0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Pasteur Pipette</td>
			<td style="width:381px;">VWR</td>
			<td style="width:184px;">BRND125400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:299px;">Penicillin 10,000 UI/Streptomycin 10,000 &#181;g</td>
			<td style="width:381px;">EUROBIO</td>
			<td style="width:184px;">CABPES01 OU</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Phenol red</td>
			<td style="width:381px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:184px;">P0290</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Syringue&#160;</td>
			<td style="width:381px;">Dutscher</td>
			<td style="width:184px;">SS+10S21381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Tissue culture hood</td>
			<td style="width:381px;">Thermoelectro Corporation</td>
			<td style="width:184px;">MSC-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Trypanosoma brucei brucei</td>
			<td style="width:381px;">Institute of Tropical Medicine (Antwerp, Belgium).</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td>ANTAT 1.1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Trypanosoma brucei gambiense</td>
			<td style="width:381px;">Institute of Tropical Medicine (Antwerp, Belgium).</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td>ITMAP 1893</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Trypanosoma musculi</td>
			<td>London School of Hygiene and Tropical Medicine (UK)</td>
			<td style="width:184px;"></td>
			<td>Partinico II</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

purification of extracellular trypanosomes, including african, from blood by anion-exchangers (diethylaminoethyl-cellulose columns)

هذا الأسلوب يتيح فصل مثقبيات، الطفيليات المسؤولة عن داء المثقبيات الأفريقي البشري والحيواني (قبعة)، من الدم الملوث. وهذا هو أفضل طريقة لتشخيص المرحلة الأولى قبعة وعلاوة على ذلك هذا الأسلوب تنقية الطفيلي تصاريح المصلية والبحوث التحقيقات.
قبعة بسبب ذبابة التسي تسي أحال المثقبيات البروسية الغامبية و رهوديسينسي ت.. مثقبيات ذات الصلة هي العوامل المسببة لداء المثقبيات الحيواني. الكشف عن المثقبيات ضروري للقبعة التشخيص والعلاج والمتابعة. الأسلوب الموصوفة هنا هو أسلوب الكشف عن الطفيليات الأكثر حساسية، تتكيف مع الظروف الميدانية لتشخيص الغامبية ت. قبعة ويمكن أن تنجز في غضون ساعة واحدة. الطبقات الدم على عمود مبادل شاردة (دي السليلوز) سبق تعديلها لدرجة الحموضة 8، وتتم إضافة شطف المخزن المؤقت. مشحونة سلبا على درجة عالية من خلايا الدم هي تمتز فوق العمود بينما يمر مثقبيات مشحونة بأقل تأثيراً سلبيا. مثقبيات جمعها القريبون من الطرد المركزي والتقيد بالفحص المجهري. وعلاوة على ذلك، تعد الطفيليات دون الأضرار الخلوية مع الحفاظ على هذه العدوى.
مثقبيات المنقي مطلوبة لاختبار المناعية؛ وتستخدم في الفحص تريبانوليسيس، معيار الذهب في الأمصال قبعة. الطفيليات الملون تستخدم في اختبار تراص بطاقة (كات) لحقل علم الأمصال. مولدات المضادات من مثقبيات المنقي، مثل بروتين سكري السطحي البديل، اكسوانتيجينس، تستخدم أيضا في تحديدكم المختلفة. ويهدف الإجراء الموضح هنا المثقبيات الأفريقي؛ ونتيجة لذلك، يضطر شروط الفصل اللوني لتكييفها لكل سلالة المثقبيات، وبشكل أعم، للدم من كل الأنواع من الثدييات المضيفة.
هذه رائعة مسببات الأمراض سهولة المنقي ومتاحة للاستخدام في الجزيئي، والكيمياء الحيوية وخلية دراسات علم الأحياء بما في ذلك ثقافة المشارك مع الخلايا المضيفة للتحقيق في علاقات الطفيلي المضيف على مستوى مستقبلات الغشاء، والإشارات، والجينات التعبير؛ المخدرات في المختبرمن الاختبار؛ التحقيق حذف الجينات أو طفرة أو overexpression على العمليات الأيضية ونشوء حيوي سيتوسكيليتال وبقاء الطفيلي.

وقد استخدمت مثقبيات المنقاة في الاختبارات الصيدلانية. يتم نقل الطفيليات في آبار الثقافة التي تتضمن تخفيف المسلسل محددة المخدرات، أما وحدها أو مختلطة19. الملاحظات المجهرية، تقييم حركية هو علامة على استمرارية، يمكن أن يؤديها عندما يجري اختبار دوجس قليلة فقط،...

Watch this Scientific Journal Video about Purification of Extracellular Trypanosomes, Including African, from Blood by Anion-Exchangers Diethylaminoethyl-cellulose Columns at JoVE.com

Purification of Extracellular Trypanosomes, Including African, from Blood by Anion-Exchangers Diethylaminoethyl-cellulose Columns

هذا الأسلوب من المثقبيات انفصال الدم يعتمد على تهمة السطحية يجري أقل سلبية من الثدييات خلايا الدم. وضع الدم الملوث ويعامل على عمود مبادل شاردة. يوفر هذا الأسلوب، الأكثر ملائمة في التشخيص لداء المثقبيات الأفريقي، الطفيليات المنقي للتحقيقات المناعية، والبيولوجية، والكيميائية الحيوية، الصيدلة والبيولوجيا الجزيئية.

تنقية مثقبيات خارج الخلية، بما في ذلك البلدان الأفريقية، من الدم بشاردة-مبادلات (ديثيلامينوثيل-السليلوز أعمدة)

This method allows the separation of trypanosomes, parasites responsible for animal and human African trypanosomiasis (HAT), from infected blood. This is ...

اليمبانوزومات الأفريقية هي المسؤولة عن داء المثقبيات الأفريقي البشري، أو مرض النوم والحيوانية الأفريقية. والمثقبيات التي تسبب مرض النوم هي ذبابة تسي تسي التي تنتقل الطفيليات الموجودة في العديد من البؤر الجغرافية في أفريقيا جنوب الصحراء الكبرى. الكشف عن الطفيلي ضروري للتشخيص والعلاج والمتابعة.يمكن أن تعطي المصلية إيجابية كاذبة ولسوء الحظ، نتائج سلبية كاذبة. للمساعدة في الكشف في الدم، يجب أن تتركز المثقبيات. وقد استخدمت تقنيات تركيز الطفيليات المختلفة.الطريقة الأكثر حساسية هي فصل الطفيليات عن الدم بواسطة عمود من مبادل أنيون ، السليلوز DEAE متبوعاً بالطرد المركزي والملاحظة المجهرية. وبالتالي، فإن طريقة السليلوز DEAE هي الأفضل وتبقى حتى الآن، وهي الطريقة المرجعية لتصور وعزل الطفيليات من الدم لتشخيص داء المثقبيات الأفريقي البشري، خاصة في الظروف الميدانية. هذه الطريقة، التشخيص الأكثر ملاءمة لالطباء المثقبيات الأفريقية كما يوفر الطفيليات النقية للفحوصات البيولوجية المناعية والبيولوجية والبيوكيميائية والصيدلية والجزيئية.وقد تم الحصول على جميع التحقيقات التي تتفق مع دليل رعاية المختبرات واستخدامها، وتم الحصول على اتفاق من السلطات الفرنسية، وقد وافقت على جميع البروتوكولات المستخدمة من قبل لجنتنا المحلية للأخلاقيات. تزن كل مادة وفقا للبروتوكول المكتوب. إضافة الماء المقطر وضبطها على وجه التحديد إلى درجة PH 8 مع فوسفات ديهيدروجين البوتاسيوم لجعل الحلول المخزنة التالية، ومركزة الفوسفات العازلة المالحة 2X.إضافة الماء المقطر والجلوكوز للفوسفات المخزنة الجلوكوز المالحة. بالنسبة لـ 100 ملليلتر من عازلة elution ، أضف 100 وحدة لكل ملليلتر من البنسلين ، و 100 ميكروغرام لكل ملليلتر من الستربتوميسين ، وخمس ميكروغرام ملليلتر من الفينول الأحمر إلى الجلوكوز الملحي الفوسفاتي المخزن. يتم غسلها 100 غرام من السليلوز DEAE أولا مع ثلاثة لترات من الماء المقطر ومن ثم ترك لتسوية.يتم التخلص من الجسيمات الدقيقة. يتم تكرار الغسلات حتى يكون المابير واضحًا. يتم إضافة الفوسفات المخزنة مؤقتا المالحة 2X وزيلولوز DEAE هو أثار.يتم تعديل الـ (pH) إلى ثمانية مع فوسفات بوتاسيوم واحد. ثم يتم غسل السليلوز مرتين بالماء المقطر ومرتين مع الجلوكوز الملحي الفوسفاتي المخزن. يتم خلط السليلوز DEAE والفوسفات المخزنة الجلوكوز المالحة في وحدات التخزين المتساوية.سبائك أرباع وتخزينها في درجة حرارة الغرفة أو أربع درجات مئوية أو في ناقص 20 درجة مئوية للتخزين لفترات طويلة. يتم تخزين الدم المصاب بالميبانوزوم في النيتروجين السائل. يتم إذابة ربع سبائك من ملليلتر واحد في درجة حرارة الغرفة.يتم جمع الطفيليات بعناية من الأنبوب المبرد باستخدام إبرة وحقنة مليلتر واحد. يتم تقييم صلاحية الطفيليات المذابة من خلال الحركة كما هو متصور من خلال مراقبة المجهر الخفيف قبل العدوى. يتم حقن الطفيليات في تجاويف الصفاق من اثنين من الفئران ، 500 ميكرولتر لكل فأر.كل يوم بعد العدوى ، يتم تقييم الطفيليات عن طريق جمع قطرة دم من الذيل مع إبرة وفحصها عن طريق المجهر. عندما يكون الطفيلي في مستوى مناسب ، يتم جمع الدم المصاب. يتم دعم حقنة 10 ملليلتر في المشبك أو حامل ويتم إضافة قطعة قبل القطع من ورقة التصفية.يتم صب السليلوز DEAE المعدة في الحقنة تصل إلى مستوى ثمانية أو تسعة ملليلتر. يتم غسل العمود مع العازلة elution. يتم وضع مليلترين من الدم المصاب بعناية على رأس العمود ويتم جمع المثقبيات في رُل العمود في أنبوب الطرد المركزي 50 ملليلتر.يتم إضافة عازلة Elution بانتظام وفقا لعبور trypanosomes. يتم فحص عبور المثقبيات من خلال العمود عن طريق أخذ قطرة من رُلود الأعمدة على فترات منتظمة ومراقبة المثقبيات باستخدام المجهر الخفيف. عندما لم تعد تلاحظ المثقبيات في eluate ، يتم طرد الأنبوب المخروطي في 1 ، 800 مرة G لمدة 10 دقائق عند أربع درجات مئوية.يتم التخلص من المثقبية ويتم حساب الهيمبوسات في البليت مع مقياس للهيموسيت. وتم تخفيف الجرببوسومات التي تم جمعها في الوسط المطلوب للتحقيق المخطط له. هذه الطريقة، التشخيص الأكثر ملاءمة لالطب المثقبية الأفريقية يوفر الطفيليات النقية للفحوصات البيولوجية المناعية والبيولوجية والبيوكيميائية والصيدلية والجزيئية.وقد وضعت هذه الدراسات لأن الطفيليات المنقية السليلوز DEAE يمكن الحصول عليها بسهولة بكميات كبيرة من المضيفين المصابين بشكل طبيعي أو تجريبي وعلى وجه الخصوص القوارض. يتم تقييم صلاحية الميربانوسوم في وجود عوامل صيدلانية من خلال المراقبة المجهرية. ويرتبط بقاء الطفيليات مع الحركة ، وبالتالي ، يمكن فحصها بالعين تحت مجهر خفيف في 40 مرة أو أعلى التكبير.يتم تقييم صلاحية الطفيليات من خلال قياس النسبة المئوية للأشكال المتحركة. يتم إضافة التخفيفات من مركبات الاختبار في كل بئر من 96 بئراً من لوحة الأنسجة في حين يتم التعامل مع آبار التحكم وهمية. ويتم تقييم كل تركيز في ثلاث 33.يتم مقارنة عدد الطفيليات القابلة للحياة لكل تخفيف بعدد الطفيليات في الآبار المسيطرة. يتم عرض آثار Pentamidine، وهو دواء مرجعي، المستخدمة في علاج داء المثقبيات الأفريقي البشري في هذا الشكل. الثقافات الضامة المثقبية تسمح بالتحقيق في التفاعل الطفيلي المضيف على المستوى الخلوي.في الثقافات المشتركة طفيليات الضامة ، تحفز trypanosomes الخلوية الإضافية إنتاج أرجيناز الضامة الذي يتحلل الأرجينين إلى ornithine. Ornithine هو مقدمة من البوليامينات و trypanothione ، ضرورية لبقاء الطفيلي والنمو. وعلاوة على ذلك، يقلل استنفاد الأرجينين من إنتاج أكسيد النيتريك الإبادة المثقبية.في وقت لاحق، إضافة مثبط أرجيناز، S-L-السيستين إلى الثقافات المشتركة يقلل بشكل كبير من نمو الطفيليات الناجمة عن الضامة. يتم توسط الاتحريض أرجيناسي بواسطة تريبانوزوم تفرز أو العوامل السرية. وقد تم تحديد هذا العامل المستحث أرجيناز باعتباره كينسين الأورثين.kinesin يربط إلى C-نوع الليكتين مستقبلات ملزمة. يتم حث أرجيناسي وينتج الأورنيثين الذي يفضل نمو الطفيليات. لا يتم تحريض Arginase بواسطة kinesin في الضامة المستزرعة مع 12.5 ملم مانوز أو في الضامة من الفئران حيث تم حذف مستقبلات مانيوز الضامة.وأمثلة أخرى على بيولوجيا الخلايا والتجارب الكيميائية الحيوية باستخدام الأراضي المثقبية المنقية من السليلوز DAEA هي التي تظهر في الدراسات التي تم فيها تحديد البروتينات الخلوية الهيكلية الجديدة مثل BILBO1. BILBO1 مطلوب للحصول على النشوء الحيوي للهياكل الهيكلية الحيوية الهامة وبقاء الطفيليات. وهكذا، يمثل بيلبو1 هدفاً هاماً للتدخل في التهيّمات المسببة للأمراض.صورة تظهر المناعة المناعة وسم من شكل ثقافة مجرى الدم، تظهر خلية البروسي المثقبية مسبر مع الأجسام المضادة BILBO1 في هذا الشكل. بالإضافة إلى ذلك، تم وصف استقلاب الجلوكوز والثريون باستخدام السليلوز تنقية trypanosomes والإنزيمات المشاركة في هذه العمليات تم التحقق من صحة تجريبية. يظهر في هذا الشكل تمثيل تخطيطي للغلوز والتمثيل الغذائي للثريونين في المثقبيات التي تشكل مجرى الدم.تنقية المثقبيات الأفريقية من الدم عن طريق أنيون التبادلات السليلوز الأعمدة مع التحسينات الأخيرة لا يزال المعيار الذهبي للكشف عن المثقبيات، ليس فقط في المضيفين الطبيعية مع الطفيليات منخفضة في المناطق المتوطنة، ولكن أيضا لمتطلبات الطفيليات بأعداد كبيرة للتحقيقات التجريبية. وقد سمحت التحقيقات بتحديد جزيئات المثقبيات التي تلعب أدواراً أساسية في بقاء الطفيليات ونموها. وقد تمثل الأهداف المحددة الأساس للقاح مستقبلي مع مستضدات محتملة لكل من البشر والحيوانات في نهج صحي واحد.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Purification of Extracellular Trypanosomes, Including African, from Blood by Anion-Exchangers (Diethylaminoethyl-cellulose Columns)

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

نضوب بالسكان خلية معينة من قبل استنفاد تكملة

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells

عزل خلايا فأر التجويف البريتوني

The peritoneal cavity is a membrane-bound and fluid-filled abdominal cavity of mammals, which contains the liver, spleen, most of the gastro-intestinal ...

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting FACS

تنقية سكان خلية معينة من قبل الإسفار الفرز الخلية المنشط (FACS)

Experimental and clinical studies often require highly purified cell populations.  FACS is a technique of choice to purify cell populations of known ...

Expansion, Purification, and Functional Assessment of Human Peripheral Blood NK Cells

توسيع وتنقية ، والتقييم الوظيفي للخلايا الدم المحيطية الإنسان NK

Natural killer (NK) cells play an important role in immune surveillance against a variety of infectious microorganisms and tumors. Limited availability of ...

Purification and Visualization of Lipopolysaccharide from Gram-negative Bacteria by Hot Aqueous-phenol Extraction

تنقية والتصور من Lipopolysaccharide من البكتريا سالبة الجرام بواسطة استخراج مائي، الفينول الساخن

Lipopolysaccharide (LPS)  is a major component of Gram-negative bacterial outer membranes. It is a tripartite molecule consisting of  lipid A, which is ...

Purification of Pathogen Vacuoles from Legionella-infected Phagocytes

Purification of Pathogen Vacuoles from Legionella-infected Phagocytes

تنقية من الفجوات المرضي من<em&gt; البكتيريا</em&gt; المصابة البالعات

The opportunistic pathogen Legionella pneumophila is an amoeba-resistant bacterium, which also replicates in alveolar macrophages thus causing the severe ...

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

محمي مستضدات خلايا الدم الحمراء وظيفية بواسطة الغشاء مسمار Polyglycerols Hyperbranched الاتفاق

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

Bioluminescence Imaging to Detect Late Stage Infection of African Trypanosomiasis

تلألؤ بيولوجي التصوير لكشف العدوى المرحلة المتأخرة من داء المثقبيات الأفريقي

Human African trypanosomiasis (HAT) is a multi-stage disease that manifests in two stages; an early blood stage and a late stage when the parasite invades ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

ديكستران يعزز كفاءة توصيل لينتيفيرال الخلايا ناغورني كاراباخ الابتدائي مورين والبشرية

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...