Name: a visual guide for studying behavioral defenses to pathogen attacks in leaf-cutting ants
Uploaded: 2018-10-12T15:00:00
Duration: 8 min 10 s
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アンテナ機のメカニズムをグルーミングと設定を撮影についての有益な議論の行 Vej Ugelvig とキルステン ・ シーヒーに感謝したいと思います。Villum ラスムッセン Kann ヤングフェロー捜査官 (VKR10101) と、マリー キュリー個々 ヨーロッパでタバサ無実マイケルポウルセンはサポートされて (IEF 付与 627949) の交わり。私たちも収集し、デンマークにアリをエクスポートする設備、パナマでは、後方支援の使用のためのスミソニアン熱帯研究所と許可 Autoridad ナシオナル ・ デル ・ アンビエンテに感謝したいと思います。

1 Escovopsisの分離。
<ol><li>削除と湿った脱脂綿Escovopsis発芽し、sporulates までの数日間、シャーレにアリと菌庭の断片を配置することによってAcromyrmex echinatior研究所植民地からEscovopsis系統を分離します。ジャガイモ デキスト ロース寒天 (PDA、39 g/L) に胞子を転送し、約 2 週間 23 ° C でインキュベートします。 注: 1 つのひずみは、現在の研究で使用されました。</li>
	<li>滅菌針を使用して、これらの最初の版から成熟した胞子を選択します。針の先端をカバーする十分な胞子を選択します。</li>
	<li>無菌条件下で新しい板に胞子を接種し、, で 〜 23 ° C、約 2 週間。</li>
	<li>菌糸をプレート全体を解説し、成熟した茶色の胞子に成長して、1.3 のステップが、今度新しい PDA プレートから胞子を繰り返します。</li>
	<li>それぞれの株のEscovopsisのきれいな株になるまでのプロセスを取得 (目に見える汚染が成長したり、プレート表面の下) を繰り返します。</li>
</ol>2. 実験の設定
<ol><li>3 A. echinatiorコロニーを使用します。 注: ここで Ae160b、Ae322、Ae263 のコロニーを使用されました。</li>
	<li>各植民地から 12 サブ コロニーを作る。0 h 後の観察にサブ植民地 6 と 72 時間後の観察にサブ 6 のコロニーを作る。これにより合計で 36 サブ コロニー;コントロールとして各 '親' 植民地および「Escovopsis治療」として残りの半分からサブのコロニーの半分をマークします。 注: 中親コロニー女王の存在影響者の行動、(これが保証できない)、我々 は期待、女王レス副コロニーが実験を実行する時間の短い期間のための queenright のコロニーとして動作する可能性が高い。</li>
	<li>各サブのコロニーの長さの正方形のボックスを使用して、: 〜 3.15 インチ (8 cm)、幅: 〜 2.17 (5.5 cm) で、深さ ~ 1.77 インチ (4.5 cm)。 注: 重要なポイント撮影や動作の認識が可能である飼料し、廃棄物をダンプに菌フラグメント外が十分に小さいボックスをする同時に蟻のため十分なスペースを提供することです。</li>
	<li>各サブのコロニーの元植民地、キイチゴの葉のカップルから菌ガーデン (L. gongylophorus) の中央部のティー スプーン サイズ (約 2.2 cm3と 1.2 g) 作品を追加し、水に浸した脱脂綿の作品。 注: 綿ウールは、湿度を提供します。それは水、びっしょり必要がありますいないと菌庭に触れないでください。</li>
	<li>サブの植民地Escovopsisで治療、接種ループを使用し、 Escovopsisの胞子によってちょうどカバー開口部を埋めます。胞子があまり集まっていないように、10 から 20 倍菌庭の小さな、ローカライズされた部分をやさしくタッピングによって胞子を接種します。</li>
	<li>サブの植民地コントロールとして使用、滅菌接種ループと菌の庭にEscovopsisのアプリケーションを模倣します。 注: 本研究ではこれはないが滅菌粉末 (のようなグラファイトやタルカム パウダー) の接種は病原体の感染と不活性のエージェントとの間を区別するためにこの段階で実行できます。</li>
	<li>72 h 観測、サブのコロニーの半分を残す (制御および感染) アリを追加またはビデオの録画を開始する前にEscovopsisの導入の後の 72 時間。 注: はそれにEscovopsis胞子は (未発表の in vitroデータ) を発芽する可能性がアリの不在で 72 h を待っています。また (例えばから菌菌ガーデンに存在) 他の感染症の可能性が大きく、この期間はこのトリートメントは確立された感染症の初期段階を示すことが望ましい。</li>
	<li>0 h 観測、ステップ 2.6 とレコーディングの前に約 30 分後に直接 2 つの雛、4 つのマイナーな労働者および 4 つの主要な労働者同時に親のコロニーからそれぞれボックスに追加します。<ol>
<li>2 主要な労働者から庭園内、キューティクルのほとんどをカバー アクチノ バクテリア光色素を持つ若いを使用します。他の 2 つから暗い顔料とアクチノ バクテリア laterocervical プレートをカバーして、庭の外を取る。</li>
	</ol>
</li>
	<li>72 時間の観察、記録、すなわち、 Escovopsis接種後 71.5 h する前に 2.8 と 30 分で 2.8.1 を繰り返します。 注: 実験的サブ コロニーは確立された自然Acromyrmexコロニーより大幅に小さいです。これは、動作を正確に記録するために必要です。一方、いくつかの行動の頻度に質的影響この可能性があります、サブの植民地の組成が高く定性的行動の相互作用を反映するように自然な植民地での労働者の混合を反映させるのに選ばれました。</li>
</ol>3. ビデオ録画と行動を得点
<ol><li>ラップトップ (または同等) に接続されている USB 内視鏡を使用し、十分な光を提供します。</li>
	<li>各サブの植民地 (0 h または 72 時間後の感染症のいずれかで開始) 4 h のビデオ録画を実行します。</li>
	<li>36 サブ植民地を記録した後各サブ植民地のすべての個人の関心のすべての動作の映像とスコア 144 h の合計を確認します。 注: 現在の実験例では、我々 あった 2 つのサブ コロニー (植民地 Ae160b からコントロール) と Ae322 の植民地から治療サブ植民地Escovopsis観測の時間数の合計を減らす以外の菌の感染によるものを除外するには136。</li>
	<li>現象は、するたびに 1 が発生してそれを記録します。 注:動作はできるスコアだけが短期または長期の期間のそれ > 1 としてそれが別の動作によって中断された場合または場合アリは、一定期間受動的。</li>
</ol>4. 動作
注: 行動の定義は、前研究23,27,28,31,45および個人的な観察からの記述の組み合わせを使用して行われました。認識行動のためプロトコルで使用される重要な形態学的構造を展示詳細図、図 1を参照してください。
<ol><li>セルフ グルーミングとクリーニング アンテナ(ビデオ 1)<ol>
<li>アリがセルフ グルーミングを開始する脚の動きを停止したかどうかに注意してください。アンテナ、前脚 (図 1) のアンテナ クリーナー引っ張られる別の拍車に直面してノッチから成る脛骨足根関節にあるクランプ状の構造サイズ毛櫛で45,ことを確認46。</li>
		<li>アンテナを洗浄した後、アリが粒子および蜂 (図 1) と潜在的な病原体の取り外し、口器を足を引いて足とアンテナ クリーナーをきれいを観察します。 注: はセルフ グルーミングのアンテナとその後アンテナ クリーナー (図 1)、クリーニングも足をきれいに口器を使用で構成できます。アリは、その足を洗浄は、最も頻繁、連続 6 本すべての足をきれいにします。</li>
	</ol></li>
	<li>グルーミング (動画 2) 菌
	<ol>
<li>お知らせアリ菌庭に固定点での足の動きを停止した場合。アンテナが動かず、パラレル、花茎と索 (図 1) 間の角度は約 45 ° 菌に向かって指摘した、アンテナの先端はほとんど下顎骨 (の先端に近い、お互いを触れているを観察します。図 1)。</li>
		<li>大文字 (上顎) と下部 (唇) 口器が菌をなめるように蜂 (図 1) の出現、開かれているに注意してください。</li>
	</ol></li>
	<li>Allogrooming (動画 3)
	<ol>
<li>別の ant (受信者) またはその逆に 1 つまたは複数のアリが近づいているときは、この行動を観察します。動作中にアリの動きを停止し、の物理的な接触と密接に一緒に立ちます。グルーミングの ant(s) は受信者の ant のボディの大きい区域をカバーする少し移動があります。</li>
		<li>Actor(s) のアンテナは動かずと受信 ant または移動および受信機を軽くタップの特定地点へ向かって指摘できることを確認します。花茎と索 (図 1) 間の角度は約 45 ° の特定のポイントまたはタップで修正するかどうかに応じて。俳優の触角の先端が通常互いと (図 1) の下顎骨の先端近くにあります。</li>
		<li>大文字 (上顎) と下部 (唇) の口器はレシーバー ant をなめるように蜂 (図 1) の出現で開くことに注意してください。</li>
	</ol></li>
	<li>Metapleural 腺の手入れ (動画 4)<ol>
<li>観察アリが metapleural 腺 (図 1) のグルーミングを開始する動きを停止したとき。アリが metapleural 腺 (たとえば、右の前部の足) の開港 (道) をこする前脚背中の片側に傾いていることに注意してください。 注: 他の前脚は同時に (この例では左の前脚) バルセロナ (図 1) で舐めた。</li>
		<li>アリはスイッチの足と反対の足で同じ動きを繰り返すことと反対側に傾いていることを確認してください。アリは、metapleural 腺、その後常に足 (図 1) を切り替える蜂に前脚を移動し続けます。 注: この例では、アリは今左の前脚に渡す metapleural 腺および蜂 (図 1) に右の前部の足。Metapleural 腺 (図 1) グルーミング後アリはしばしば自己手入れ (手順 4.1) を開始します。</li>
	</ol></li>
	<li>胞子除草 (動画 5)
	<ol>
<li>アリ菌庭に固定点での足の動きを停止したときは、この現象を確認します。アンテナが動かず、パラレル、花茎と索間の角度は約 45 °、菌に向かって指摘した、アンテナの先端は、お互いと下顎骨 (図 1) の先端にほとんど触れているを確認します。</li>
		<li>アリがを引いてその下顎骨表示Escovopsis胞子をつかむ fungal 穀物からそれらをデタッチし (図 1) を開くことを確認します。アンテナは向きにゆっくり動いている間、アリは巣から胞子のクラスターを運ぶ。アンテナは、アンテナのクリーナー (図 1;ビデオ 1参照) を胞子のクラスターを押しながら削除があります。アリ廃棄物の山に胞子を低下します。 注: 廃棄物の山の周りの活動の記録現在の実験では行わなかったが、現在のプロトコルの適切な拡張子になります。</li>
	</ol></li>
	<li>菌除草 (動画 6)
	<ol>
<li>アリは、菌の固定ポイントでの足の動きを停止したときは、この現象を確認します。アンテナ緩くアリが若干カビ部分をタップしながら削除しよう菌部に向かって指摘しています。</li>
		<li>指定された領域をデタッチまたは菌部分 (図 1)、下顎骨の部分をつかむアリが真菌の作物のいずれかのカットに、下顎骨を使用することを確認します。菌部分をひっぱったりしながらアリはその足で同時に左右からをロックします。 注: 除草行うことができます複数の労働者、未成年者および専攻学生。そう、いくつかのアリは菌切断、他の揺れや動きを引っ張るを実行します。菌の戸の部分は巣の外に運ばれる、廃棄物の山に落ちています。廃棄物の処分の記録は現在の実験では行わなかったが、現在のプロトコルの適切な拡張子になります。</li>
	</ol></li>
	<li>(動画 7) をグルーミング糞便液
	<ol>
<li>アリ菌庭に固定点での足の動きを停止したときは、この現象を確認します。アリは、口器に糞便液の液滴を適用する、ガスター (図 1) とお互いに向かって頭を曲げます。</li>
		<li>アリが下顎骨 (図 1)、一度に 1 つずつをフロントの足を引っ張ることを確認します。その後、アリは前脚の脛骨足根関節にあるアンテナ クリーナー (図 1) をアンテナを移動します。</li>
	</ol></li>
	<li>液滴逆流 (動画 8)
	<ol>
<li>アリは、菌の固定ポイントでの足の動きを停止したときは、この現象を確認します。アンテナが動かず、パラレル、花茎と索間の角度は約 45 °、菌に対する指摘し、アンテナの先端はほとんどお互いと下顎骨 (図 1) の先端を触れます。</li>
		<li>光の黄色またはその口器からも茶色に透明であることからさまざまな菌に液体の液滴をアリに逆流を確認します。</li>
	</ol></li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

本研究の主な目的は観察し、菌ガーデン感染Escovopsisのための参照クリップを作成するとレコードの特徴的な葉さしアリ防衛行動をより広い科学界に使用します。これらの動作は、排他的ではないことに注意してくださいEscovopsisからの植民地の防衛に他の汚染物質や感染症6,7,8,9 に対する防衛のためにも役割を果たす可能性がありますが、 ,,1011,12,42自身アリの防衛のために。私達のプロトコルにより背景が菌の成長の防御より広い研究アリ。これは特に有用である: (i) 若手研究者これらの動作に精通していないため(ii) へのセキュリティで保護された一貫性のある定義と動作の観察(iii) 研究とアリの種の間で比較を容易にする(iv) これらの動作の数がありますのでそう頻繁経験も研究者決して観察したかもしれない。(iv) ための実験室の助けで制御された条件で動作を認識・理解研究の in situ条件が制御するため困難です。
私たちの行動の研究からの結果はその未成年者を示した前作品と一致している労働者菌新郎-重要な感染症が早期に検出された場合-以上主要な労働者25,28,32。ここでは、主要な労働者は、(図 2、) Escovopsis感染後真菌グルーミングの量を増やしました。これは、マイナーな労働者が優勢な菌ゲレンデが、感染を確立された主要な労働者より多くの拡散防止に役立つことを示唆しています。マイナーな労働者に以下のアクセスの胞子を除去に適してなる可能性が大きい主要な労働者はより速く、胞子を削除できます。また、感染症の時に導入された、従って病原体初期 (図 3c) を検出することが、労働者が感染したサブ コロニー (9 つのうち 4) の約半分で正常に胞子が削除されたと分かった。全体的にみて、アリが最初に試みる行動応答のシリーズにこのポイントは胞子を除去することによってEscovopsisの感染症を停止 (とこうやって感染広がる)、菌の庭の部分を削除するのではなく (図 3、b。).これはアリが菌ガーデン28の部分を削除する可能性が高い場合、感染症が進行する場合は時間と共に変わります。私たちのデータが真菌感染 (図 3 の後の段階で存在している主に除草にこの傾向をサポート、サンプル サイズが小さすぎて、決定的でなければ、同時感染除草行動を誘発したことを排除できないが、 、)。菌の除草の一般的に低レベルが示唆するアリがさらにEscovopsisの成長を阻害する他の防御 (例えば、化学物質) を使用、または我々 の実験的サブ植民地のどれもは余りに厳しく (感染しなかったともっと破壊的な防御不要)。
示唆されたこと糞便液自己手入れ菌庭に入るアリの特徴であるし、感染症に関連付けられているのではなく、予防策として使用されます。似たような観測は、パネルシアター女性自分自身をグルーミングし巣に入るとき、自分の足に、口で糞便の液滴を転送で見られている作物27を処理または。感染増やす必要があります理論で菌の庭の端の労働者の活動削除感染材料を実施し、廃棄物の山に落とした場合。したがって、糞便液グルーミング可能性がありますも間接的に増やすこと感染症疾患感染を最小限に抑えるために。我々 は労働者が菌を放棄または化学防衛などもっと極端な手段を採用すると菌の庭の端に減らされた動きと、重篤な感染症の逆のパターンを期待しました。
糞便中の水分は、個々 の化学重要な予防として役立つことができる中、異物や微生物を検出した場合、allogrooming が他の労働者に巣の仲間によって使用されます。相当な相違を糞便液グルーミングの頻度 (表 1) 間見ました (n = 304) と allogrooming (n = 48) 病原体検出の違いを示す可能性があります。アリは、簡単に彼ら自身の彼らのアンテナと病原体を検出することがないです。一方、allogrooming は、巣の仲間、がアリの全身を検査でき、新郎の必要な場合にのみ選択によって行われます。Escovopsisはアリではなく、菌の庭の寄生虫なのでこれはまた allogrooming の少量を説明するかもしれない。
我々 はめったにクリーンアップ、および感染症の後の段階でのみ metapleural 腺を観察しました。真菌の成長の種豊富な導入細菌カバー付きアリ metapleural 腺を新郎は、少ない種またはいいえカバー25,47未満。A. echinatiorが共生47の豊かさにあり、これは周波数をグルーミング低腺を説明するかもしれない。Metapleural 腺の分泌は、30日を生成する高価なも、metapleural 腺の手入れをすることの必要性が頻繁にないことを意味時間の長い期間の infrabuccal ポケット内に格納することがあります。グルーミング metapleural 腺、中にアリは同時にスイッチの足と腺の手入れだけ足をなめる胞子、腺分泌物がEscovopsisを阻害するための重要な infrabuccal ポケットにそれにより転送 ' 発芽25潜在的な。マイナー労働者巣の中より豊富なユニット本体質量30、あたりの大きな metapleural 腺 metapleural 腺分泌物の大半を担当している示唆しています。これはまた、私たちの研究では菌のグルーミングの最高周波数何故マイナーな労働者を説明できます。
我々 は動作アクティブを示す細菌共生導入、一般Acromyrmex労働者のキューティクルの観察し、 Escovopsisに対する防衛の役割を果たすことが知られてからの抗生物質の使用を観察すると予想36,39,40そのような行動を観察しないため最も可能性の高い説明はこれらの抗生物質のアプリケーションを他の動作に組み込むことができる続くセルフ グルーミング菌の手入れや除草、として観察するハードになることなど、。異なる動作です。
Regurgitating 菌庭に液滴の異常な現象が見られました。Nestmates のための食糧の逆流は、葉さしアリ22以前記載されています。私たちの実験では水滴異なる色が透明からダークブラウン、彼らは他のアリの食料源および水を提供する可能性があることを示唆します。他のアリが、水滴から飲んだ我々 は、水滴が他のアリの利益や湿度が低いときに菌を水分補給に役立つかどうかを判断できないので、2 回だけ観察した.Escovopsis感染症は、抗菌ペプチド16,48の逆流による免疫プライミングなどの防衛の役割を意味するかもしれない間、この現象のほとんどの観測でした。以来、この現象は稀、だったが、それはさらに調査する、たとえば、決定することで液滴は、抗菌特性を持つかどうかの興味深いライン、我々 はこの上の確固たる結論を描画できません。
リーフ カッター アリの複雑な防衛行動の観測研究を考えると、フィールドの非常に困難になる庭の真菌感染症との比較を含む、実験データは、貴重な洞察を提供できます。下でこれらの行動もっと条件を制御します。実験条件下で観察は、自然条件下で発見した行動から異なる場合があります、キー的な防衛行動の私達のカタログなどのツールを開発、向上に努めることを必要な実験とフィールドは、将来的に研究します。実験的アプローチ、しかし、部分的に説明するかもしれないなぜいくつかの行動は極めてまれだった (例えばallogrooming、metapleural 腺グルーミング) これらの行動の定義を使用しての私たちのデモで。今後の研究は従ってこの実験装置より自然な観察の方法を見つけることの制限を考慮するかもしれない。付加的な要因は、アクチノ バクテリアを運ぶ (若い) 労働者と異なる、 Escovopsisの脅威への対応がより少なく豊富なカバーと高齢労働者の区別など、現在のプロトコルに統合されること感染症。(たとえば焦点個人の得点) でより正確な観測を作るまたはサブ コロニー サイズ (大きい数の労働者) と時間量またはで撮影することができますサブ植民地や個人の数を持つとの間のトレードオフを指定しました。時点します。それにもかかわらず、セットアップは、行動目標を対処するのに焦点をより大規模な行動研究の拡張が、ここで我々 に焦点を当てて正常に記録、特定の防御的な動作を定義するための方法を紹介します。
我々 は切葉アリの防衛に寄与する行動を文書化し、大幅に体系的に識別、説明と映画的な防衛行動をキャプチャします。当社の代表的な結果をなぜそれが難しい防衛行動の設定し、抗菌のアプリケーションに関連付けられている大規模な直面している菌類耕作アリ ・ コロニーを正常に感染する病原体の示唆しているこの分野の他の研究を強化します。化合物。私たちの主な目標はこの分野での今後の作業のための新しいツールを提供する、我々 は行動のカタログがコンセンサスと合理化された定義、観察、および重要なリソースとして提供するために、行動の解釈を確保するために貴重な証明することを願って今後の研究。

葉切断の蟻高度な社会性昆虫は、地球上最も複雑な植民地の一部を形成します。真菌成長の蟻 (Attini 族) の派生分岐している 2 つの属Acromyrmexとアタ1で構成されます。彼らを養う fungal 穀物種Leucoagaricus gongylophorus (担子菌類: ハラタケ目)、彼らは、主要な食糧ソース2,3に依存します。アリがその成長のための新鮮な葉材料でこの菌を供給し、菌が見返り栄養豊富な腫れ菌糸のヒント (gongylidia) アリと彼らのひなによって消費されるを生成します。植民地が地下に構築されて、外部庭園4、5、fungal 穀物は維持され、ant 農家6,病原体潜在的な7,8 からの作物モノカルチャーを保護します。 ,9,10、11,12。植民地は異なるサイズ (カースト) の労働者と年齢13,14,15、病原体からアリと作物の防衛にひろがる間分業します。
葉さしアリ ・ コロニーが病気に脆弱性が存在する必要があります私たちがあります。グループ リビングは、頻繁に相互作用による関連労働者と、したがって、簡単にトランス ミッション16の間の病気の広がりを促進する予定です。アリは、 Metarhizium種、 Beauveria 材6などの病原真菌寄生虫に敏感であります。これらの寄生虫はジェネラ リストで、巣7、8に近い土壌に多い。単作4,として菌作物の農業5では、また病17,18を受ける可能性が高い。(コウジカビ ニジェール、トリコデルマの種3を含む) ジェネラ リスト真菌寄生虫によって感染することがしかし、最も重要な脅威はEscovopsis属の専門家 necrotrophic 菌 (子嚢菌門: ボタンタケ目)11。真菌類溶解酵素の分泌やその他の化合物、 Escovopsisは殺すし、菌作物から12アリの植民地11,19の潜在的に致命的な結果と栄養素を取得します。
病気の脅威に対処するため、アリ個人と植民地の両方のレベル、合成生物学的制御、感染症に対して、予防的に、とき必要な行動する行動と化学防御で顕著な防御があります。総称して、これらの防御を防ぐまたは感染症病原体ジェネラ リストとEscovopsisなどの専門家の両方からの影響を軽減します。広く環境20巣に入ると巣内感染の広がりを制限することから寄生虫を防ぐことで寄生虫の収縮を避けることを含 します。防衛の最初の行は、腺分泌物3,21,22,23,24,25,26,からの化学物質27菌ガーデンと自己と allogrooming の両方を運ぶアリの設立前にそれらを舐めている労働者からの植物基板を消毒します。巣に入ると特に、自分自身をグルーミング、労働者彼らのボディの27にまた糞便アリオンの酸液あります。これらの予防的防御が明らかに重要な病原性の脅威6,7,8,9,10、11、感染を避けるために 12。
アリが真菌胞子25,28.を削除するクリーンアップを使用して初期防御は失敗し、 Escovopsisなどの病原体が巣と菌の庭を入力に成功した場合、早い段階で感染症が検出された場合、アリは metapleural 腺からの分泌物を適用、転送胞子 infrabuccal ポケット (口腔)、彼らは metapleural と口唇腺分泌物26を含む化学カクテルと混合されています。Γ - ケト - カルボン酸を含むこれらの腺を 20 以上の知られている化合物がある- と indoleactic 酸3。これらは積極的に応用で25、抗生物質、菌、殺菌のプロパティ29、30 Escovopsis胞子の発芽を抑えることができます。Infrabuccal ポケットに格納されている胞子が後で植民地31,32外追放されます。この菌の早期検出、次の手入れのほとんどはマイナー労働者28,33によって行われます。ただし、病原体検出を避けるために管理、菌庭園内に広がる場合は、両方はマイナーで、主要な労働者28菌の感染部分の雑草、巣31外この除去される材料を堆積します。また、 Acromyrmex共生アクチノ バクテリア34,35,36-によって生成される抗生物質の形で生物学的コントロールを使用して、葉さし属の種の維持主に若い主要な労働者34,38,39,40- Escovopsisの菌糸の成長を妨げる化合物を生成する ant キューティクル3734,38,41。 この抗生物質生産可能性がありますEscovopsisによって損なわれる順番-感染症19の間化合物を生成します。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58420/58420fig1.jpg"> 図 1: Ant 形態。プロトコルに記載されている形態学的構造を示すアリの図。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/58420fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
葉さしアリ防御はこうして病気42からの非常に効率的な保護とこれらのアリをまとめて提供行動および化学的メカニズムの統合されたアセンブリを構成します。広範な関心は、これらの防御を理解することが、彼らは広く研究16,20,42,43,44をされています。ただし、明確な定義に役立つだろう的な防衛行動の視覚的コンパイルおよびそれらの研究者による体系的な使用のための説明は、私たちの知る限り、利用できません。Ant の振る舞いを記述するための用語が標準化されて比較的したがっては同じ行動の行為が一貫して名前はさまざまな研究に確実性はありません。ここでは、私たちの主な目標は、明快さと関連付けられている定義を伴う予防と守備の個人の行動のビデオ録画のコンパイルによって標準化を提供することによってこの問題を解決します。我々 は我々 が観察され結果を我々 はまたここで紹介Acromyrmex echinatiorサブ植民地のEscovopsis感染実験のコンテキストでの動作の定量化の行動の実験中にこれらのクリップを撮影として行動の研究のためのこのコンパイルの使用方法の説明例です。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1058">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Plastic boxes</td>
			<td style="width:175px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td style="width:549px;">Transparent. Length: 3.15 in (8 cm), width: 2.17 in (5.5 cm), depth: 1.77 in (4.5 cm)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Petri dishes</td>
			<td style="width:175px;">Sarstedt</td>
			<td>82.1472</td>
			<td>3.62x0.63 in (9.2x1.6 cm)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Inoculation loops</td>
			<td style="width:175px;">Labsolute</td>
			<td style="width:119px;">7696431</td>
			<td>Disposable 1uL. Length: 7.67 in (19.5 cm)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Cameras</td>
			<td style="width:175px;">DBPower</td>
			<td style="width:119px;">NTC50HD_8.5mm</td>
			<td>USB Endoscope Camera</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Holders for the cameras</td>
			<td style="width:175px;">N/A</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Old beaker clamp stand.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Laptop</td>
			<td style="width:175px;">HP</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td>Generic laptop for saving recordings.</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Program used on the laptop</td>
			<td style="width:175px;">Windows Movie maker</td>
			<td style="width:119px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:216px;">Forceps</td>
			<td style="width:175px;">Vermandel</td>
			<td style="width:119px;">50.054</td>
			<td>Soft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Potato dextrose broth</td>
			<td style="width:175px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P6685-1KG</td>
			<td>24 g/L</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a visual guide for studying behavioral defenses to pathogen attacks in leaf-cutting ants

複雑な生活、高度な協力の進化の歴史と葉切断の蟻の疾患防御は盛んに。数多くの研究は、病の防衛や化学物質や抗菌剤の関連付けの使用との接続動作を説明しているが共通の視覚参照は行っていません。本研究の主な目的は、疾患防御、予防と直接感染コロニーの拮抗薬を対象に関与する動作の短いクリップを記録するためでした。葉さしの蟻種Acromyrmex echinatiorのサブのコロニーとアリの fungal 穀物に最も重要な既知の病原性の脅威、感染実験を使いましたので (Leucoagaricus gongylophorus)、 、専門Escovopsis属の病原性の真菌。撮影し、感染症の初期より高度な段階で感染し、感染していないコロニーを比較します。治療と可能性が高い病原体の攻撃行動に対して変化の働きアリは、異なるカースト間および脅威の初期と後期の検出を示す主要な防御的な動作を定量化しました。主な個別的な防衛行動の定義を伴う行動のクリップのライブラリを行ったこれらの録音に基づいています。このようなガイドが認識し、これらの行動を研究するこの分野で働く研究所員共通フレームの参照を提供でき、また最終的に役割を理解を支援するさまざまな研究を比較するためのより大きな範囲を提供と見込んでください。これらの動作は、病の防衛で遊ぶ。

本研究の主な目的は、葉さしアリ、将来の研究のための参照として使用するカタログを生成する疾患防御に関連する動作を説明する短いクリップの作成だった。さらに、研究は、これらの行動は行動学、ここに要約の代表的な結果で、このカタログを使用する方法を示す定量化された実験装置の例を使用します。
Sub-colonies は初期段階 (0 h) で後半ステージ (72 h) 感染症の観察のためにセットアップされました。結果のプレゼンテーションを 0 h 時点に着目し、, より少ない重点を置くので 72 時間後Escovopsis以外の真菌による重い感染による 2 つのサブの植民地 (植民地 Ae160b の 1 つのコントロール) と Ae322 のコロニーの 1 つの治療が除外されました。72 時間後に観察された動作です。後サブのすべてのコロニーを撮影、守備の動作を得点感染とマイナーで、主要な労働者によって使用されたさまざまな方法を含む、コンテキストの後時間に関連付けられている行動パターンに違いがみられました。対照的に、セルフ グルーミングで行われたすべての時間制御で感染したサブ コロニー。アリが求めて、およびEscovopsisの菌糸や胞子を削除しようにも一般的でした。普遍的に観察し、すべての状況で頻繁にこの現象になったので、それを定量化私たちしなかった。
サブ植民地 (表 1) あたりのマイナーで、主要な労働者のプロトコルと現在の計算された合計と平均周波数で説明した他のすべての動作を記録しました。コントロールでは、マイナーな労働者 (図 2a)、主要な労働者以上の園芸作物の手入れし、菌の庭で過ごす時間が増えたことを逸話的に観察がわかった。Escovopsisに感染している植民地で増加菌グルーミング制御のコロニーを基準にして全体の傾向にあったが、これは認められなかった (F1, 23 = 2.80、p = 0.1077;テーブル2;図 2). 糞便感染手入れで非有意な増加があった (F1, 23 = 0.60、p = 0.4455;テーブル1) マイナーおよびメジャーの労働者 (図 2b) 間違いはありませんが。長時間のため労働者が、菌を入力したときではなくときに彼らは、または完全に菌からの手入れを糞便を見ました。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58420/58420fig2v3.jpg"> 図 2: イベントをグルーミングの頻度。数の意味 (± 標準誤差 (SE); n = 9) ()菌手入れをすることおよび(b)糞便流体の接種後 4 時間以内のイベントをグルーミング、コントロール、 Escovopsis治療のマイナーおよびメジャー労働者を比較します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/58420fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
いくつかの挙動は非常にまれであった。我々 はのみ metapleural 腺の手入れを 4 回することを観察し、72 h の後に発生したすべてのインスタンスEscovopsis感染症 (表 1) と植民地にコントロール群と 3 回に 1 回。ほとんどにまれに、アリが液滴菌 (表 1) 外菌庭園、数回を繰り返すだろうとわかりました。0 h グループで、これはすべての 3 つのインスタンス制御サブ コロニー、2 回感染したコロニー - 主要な労働者によっては動作が実行された後起こった。1 つの機会にマイナーな労働者はかつて主要な労働者はキイチゴの葉、 Escovopsis治療の両方で同じボックスの角に液滴を逆流しました。72 h の植民地で菌液滴逆流だった決して制御のコロニーの観察が感染したコロニーで 7 回が起こった。これらの六つは主要な労働者と菌庭の外滴を追加単一の個人によってこれらの 3 つでした。
胞子の草取り (図 3、) と菌除草 (図 3b) の低周波の音の両方いた。菌感染したコロニーとコントロール間除草の頻度に有意差はなかった、感染からの時間とともに増加する除草のための傾向があった (F1, 23= 2.91、p = 0.1014;テーブル2). Escovopsisの胞子除草、時間を大幅に変更していないに焦点を当てた我々 の観察が、感染していないコントロール (F1, 23 よりEscovopsisに感染したコロニーのより高い頻度のための傾向があった= 3.27、P = 0.0838;テーブル2). 少ないサブ植民地のEscovopsisに感染していたアリのほぼすべての胞子を削除すると初期段階の感染 (アリの胞子接種 0 h 以降後で導入された) ときの観察期間後残り表示の胞子(4 のうち 9; のサブのコロニーの半分図 3c). 後で段階感染症で (アリが胞子接種 72 時間後導入された)、アリでサブの植民地のいずれかの完全に胞子を除去することはなかった。一緒に取られて、これらの観察は胞子菌感染の経過除草除草からシフトするアリのための傾向を示唆しています。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58420/58420fig3v2.jpg"> 図 3: イベントを除草の頻度。平均周波数 (± 標準誤差 (SE); n = 9) ( Escovopsis胞子) の(a)の胞子の除草と未成年者との治療グループからメジャーを比較する 4 h 観測期間中 (Escovopsisまたは他の菌類) を除草(b)菌の((c))観察期間の終わりに、試験治療グループに表示Escovopsisの胞子を持つサブ コロニーの数。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/58420fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<table fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>マイナー労働者 - コントロール</td>
			<td>マイナー労働者 - 治療</td>
			<td>主要な労働者 - コントロール</td>
			<td>主要な労働者 - 治療</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5" fo:text-align="center" style="text-align: center;">0 h</td>
		</tr>
<tr>
<td>菌のグルーミング</td>
			<td>84 (9.333)</td>
			<td>131 (14.56)</td>
			<td>37 (4.111)</td>
			<td>66 (7.333)</td>
		</tr>
<tr>
<td>Allogrooming</td>
			<td>6 (0.6667)</td>
			<td>14 (1.556)</td>
			<td>5 (0.5556)</td>
			<td>6 (0.6667)</td>
		</tr>
<tr>
<td>胞子の除草</td>
			<td>0</td>
			<td>3</td>
			<td>0</td>
			<td>5 (0.5556)</td>
		</tr>
<tr>
<td>菌の除草</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td>糞便液グルーミング</td>
			<td>46 (5.111)</td>
			<td>69 (7.667)</td>
			<td>27 (3.000)</td>
			<td>48 (5.333)</td>
		</tr>
<tr>
<td>液滴アプリケーション</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>1 (0.1111)</td>
			<td>2 (0.2220)</td>
		</tr>
<tr>
<td>Metapleural 腺の手入れ</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5" fo:text-align="center" style="text-align: center;">72 h</td>
		</tr>
<tr>
<td>菌のグルーミング</td>
			<td>10 (1.429)</td>
			<td>45 (5.000)</td>
			<td>24 (3.429)</td>
			<td>38 (4.222)</td>
		</tr>
<tr>
<td>Allogrooming</td>
			<td>2 (0.2857)</td>
			<td>10 (1.111)</td>
			<td>1 (0.1110)</td>
			<td>4 (0.4440)</td>
		</tr>
<tr>
<td>胞子の除草</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>1 (0.1110)</td>
		</tr>
<tr>
<td>菌の除草</td>
			<td>0</td>
			<td>1 (0.1110)</td>
			<td>0</td>
			<td>2 (0.2220)</td>
		</tr>
<tr>
<td>糞便液グルーミング</td>
			<td>19 (2.714)</td>
			<td>38 (4.222)</td>
			<td>30 (4.286)</td>
			<td>30 (3.333)</td>
		</tr>
<tr>
<td>液滴アプリケーション</td>
			<td>0</td>
			<td>1 (0.1110)</td>
			<td>0</td>
			<td>6 (0.6667)</td>
		</tr>
<tr>
<td>Metapleural 腺の手入れ</td>
			<td>0</td>
			<td>2 (0.2220)</td>
			<td>1 (0.1429)</td>
			<td>1 (0.1110)</td>
		</tr>
</tbody></table>テーブル1: 観測の 4 時間動作の数0と72h 後Escovopsis接種。(かっこで個人ごと平均周波数)、による観測の平均合計数コントロールとEscovopsis感染サブ コロニーからマイナーで、主要な労働者をそれぞれ比較すること (n = 9)。
<table border="1" fo:font-size="6" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="22" fo:text-align="center" style="text-align: center;">固定効果の 3 種類のテスト</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2"></td>
			<td colspan="4">菌のグルーミング</td>
			<td colspan="4">Allogrooming</td>
			<td colspan="4">糞便のグルーミング</td>
			<td colspan="4">胞子の除草</td>
			<td colspan="4">菌の除草</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">効果</td>
			<td>Num DF</td>
			<td>デン DF</td>
			<td>F 値</td>
			<td>Pr > F</td>
			<td>Num DF</td>
			<td>デン DF</td>
			<td>F 値</td>
			<td>Pr > F</td>
			<td>Num DF</td>
			<td>デン DF</td>
			<td>F 値</td>
			<td>Pr > F</td>
			<td>Num DF</td>
			<td>デン DF</td>
			<td>F 値</td>
			<td>Pr > F</td>
			<td>Num DF</td>
			<td>デン DF</td>
			<td>F 値</td>
			<td>Pr > F</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">コロニー</td>
			<td>2</td>
			<td>23</td>
			<td>0.77</td>
			<td>0.4733</td>
			<td>2</td>
			<td>23</td>
			<td>0.52</td>
			<td>0.5989</td>
			<td>2</td>
			<td>23</td>
			<td>0.54</td>
			<td>0.5903</td>
			<td>2</td>
			<td>23</td>
			<td>0.51</td>
			<td>0.6052</td>
			<td>2</td>
			<td>23</td>
			<td>1.17</td>
			<td>0.3272</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">サブの植民地 (コロニー)</td>
			<td>6</td>
			<td>23</td>
			<td>0.93</td>
			<td>0.4892</td>
			<td>6</td>
			<td>23</td>
			<td>0.51</td>
			<td>0.7978</td>
			<td>6</td>
			<td>23</td>
			<td>0.63</td>
			<td>0.7067</td>
			<td>6</td>
			<td>23</td>
			<td>1.67</td>
			<td>0.1742</td>
			<td>6</td>
			<td>23</td>
			<td>1.53</td>
			<td>0.2127</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">治療</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>2.8</td>
			<td>0.1077</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>1.85</td>
			<td>0.1875</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>0.6</td>
			<td>0.4455</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>3.27</td>
			<td>0.0838</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>1</td>
			<td>0.3275</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="2">時間</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>6.53</td>
			<td>0.0177</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>0.88</td>
			<td>0.3574</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>0.97</td>
			<td>0.3361</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>0.53</td>
			<td>0.4742</td>
			<td>1</td>
			<td>23</td>
			<td>2.91</td>
			<td>0.1014</td>
		</tr>
</tbody></table>テーブル2: 混合分散分析の統計結果を統計解析を実行することができる別の行動テスト。固定効果は、植民地、サブの植民地 (コロニーの中で入れ子になっている)、治療と時間をだった。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Nilsson-Moller_Table1.xlsx">この表をダウンロードするにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Video 1" src="/files/ftp_upload/58420/58420video1.jpg"> ビデオ 1: 自己毛づくろいとアンテナ洗浄します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Video1.mp4" target="_blank">してくださいここをクリックしてこのビデオを表示します。右クリックしてダウンロードします</a>。
<img alt="Video 2" src="/files/ftp_upload/58420/58420video2.jpg"> ビデオ 2: 菌グルーミングします。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Video2.mp4" target="_blank">してくださいここをクリックしてこのビデオを表示します。右クリックしてダウンロードします</a>。
<img alt="Video 3" src="/files/ftp_upload/58420/58420video3.jpg"> ビデオ 3: Allogrooming です。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Video3.mp4" target="_blank">してくださいここをクリックしてこのビデオを表示します。右クリックしてダウンロードします</a>。
<img alt="Video 4" src="/files/ftp_upload/58420/58420video4.jpg"> ビデオ 4: Metapleural 腺グルーミングします。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Video4.mp4" target="_blank">してくださいここをクリックしてこのビデオを表示します。右クリックしてダウンロードします</a>。
<img alt="Video 5" src="/files/ftp_upload/58420/58420video5.jpg"> ビデオ 5: 胞子除草します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Video5.mp4" target="_blank">してくださいここをクリックしてこのビデオを表示します。右クリックしてダウンロードします</a>。
<img alt="Video 6" src="/files/ftp_upload/58420/58420video6.jpg"> ビデオ 6: 菌除草します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Video6.mp4" target="_blank">してくださいここをクリックしてこのビデオを表示します。右クリックしてダウンロードします</a>。
<img alt="Video 7" src="/files/ftp_upload/58420/58420video7.jpg"> ビデオ 7: 糞便液グルーミングします。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Video7.mp4" target="_blank">してくださいここをクリックしてこのビデオを表示します。右クリックしてダウンロードします</a>。
<img alt="Video 8" src="/files/ftp_upload/58420/58420video8.jpg"> ビデオ 8: 液滴逆流します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58420/Video8.mp4" target="_blank">してくださいここをクリックしてこのビデオを表示します。右クリックしてダウンロードします</a>。

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A Visual Guide for Studying Behavioral Defenses to Pathogen Attacks in Leaf-Cutting Ants

個々 のクリップおよび実験感染シナリオに示す付属の定義を剪葉アリの疾患防御の動作を視覚的なガイドを提案します。私たちの主な目的は他の研究者の主要な防御的な動作を認識してこの分野での今後の研究の一般的な理解を提供します。

病原体の防御行動を研究するための視覚的なガイドの剪葉アリの攻撃します。

The complex lifestyle, evolutionary history of advanced cooperation, and disease defenses of leaf-cutting ants are well studied. Although numerous studies ...

可視化されたプロトコルは防御および真菌の成長のアリに関するより広い研究のための参照のフレームを提供する。このアプローチの主な利点は、研究者が将来の作業のための共通の理解を確保するために重要な防御行動を認識するのに役立つということです。真菌を栽培するアリの研究のための参照は、これらの行動に精通していない若い研究者のために特に有用である可能性が高い.これらの行動の多くはまれであるため、経験豊富な研究者はそれらを観察したことがないかもしれません。このガイドは、一貫した定義と共に主要な防御行動を示すことによって、研究とアリ種間の比較を容易にします。さらに、制御された条件での行動を理解することは、条件を制御するのが難しい自然の生息地での研究に役立ちます。まず、エスコボプシス株をアクロミルメックス発シナチオール実験室コロニーから分離し、真菌園の断片を取り除き、数日間湿った綿毛を含むペトリ皿に、エスコノプシスが発芽して胞果するまで分離する。胞子をポテトデキストロース寒天プレートに移し、摂氏約23度で2週間インキュベートする。滅菌針を使用して、プレートから成熟した胞子を取り除きます。次に、滅菌条件下で新しいプレート上の胞子を接種し、2週間摂氏約23度でインキュベートする。ヒファエがプレート全体を覆い、成熟した茶色の胞子に成長したら、無菌条件下で胞子を新しいプレートに接種する。3つの元のA.エチニオールコロニーを使用して、各親コロニーから12のサブコロニーを有する合計36のサブコロニーを得る。アリの導入の4時間前に、元のコロニーの真菌園の小さじサイズの部分、いくつかの乱暴な葉、水浸しの綿毛を箱に加えます。感染する亜コロニーについては、エスコボプス胞子で接種ループを埋める。次いで、真菌園の小さな部分を10~20回軽くタップして胞子を接種する。対照サブコロニーについては、菌園を無菌接種ループで10〜20回タップしてエスコボプシス胞子の適用を模倣する。感染後72時間の観察では、小コロニーの半分をエスコプス病の導入後72時間妨げずに放置する。感染後のゼロ時間の観測では、記録の30分前に、親コロニーから各ボックスに2人のブロード、4人のマイナーワーカー、4人の主要な労働者をすぐに追加します。次に、記録の30分前に72時間の感染後の観測に同じ作業者の混合物を追加します。サブコロニーごとに4時間のビデオ録画を行います。36のサブコロニーのすべてを記録した後、映像を確認し、各サブコロニーの各個人の関心の挙動をスコア付けします。次のクリップは、観測中に観察される主な個別の動作の説明を示します。ビデオを見直している間、アリが自己グルーミングを開始するために脚の動きを止めるかどうかに注意してください。アンテナが前脚のアンテナ クリーナーを通過することを確認します。その後、アリは口の部分で脚とアンテナクリーナーをきれいにする必要があります。また、アリが真菌園の固定点で脚の動きを止める場合にも注意してください。アンテナが静止していて平行で、真菌に向かって指差し、下顎の先端に近いところにほとんど触れ合っているかどうかを観察してください。その後、グロッサは真菌をなめるために出現するはずです。1つ以上のアリも互いにグルーミングすることができます。この動作の間、アリはすべての動きを止め、物理的な接触を維持して密接に立ちます。次に、グルーミングアリは、受け取るアリに向かってそのアンテナを向け、受信機を軽くタップする必要があります。グルーミング個人の上下の口の部分は、受信機アリを舐めるために出現するグロッサで開いていることに注意してください。アリが動きを止め、歯肉花のグルーミングを開始するタイミングを観察します。アリは片側に傾き、前脚の1つに手を伸ばして腺の開口部をこすり、もう一方の前脚をグロッサで舐める必要があります。そして、アリは反対の脚で動作を繰り返します。アリが真菌園の固定点で脚の動きを止めると、アンテナが動かず平行で、真菌園の固定点を指していることに注意してください。そして、アリは目に見えるエスコプス胞子をつかみ、巣からそれらを運ぶ。アリはまた、真菌の固定点で脚の動きを止め、そのアンテナを真菌の一部に向けてゆるく向け、そのアンテナで真菌片をタップする。この後、アリは真菌の残りの部分から真菌の破片を取り外します。別の潜在的な行動は、アリが真菌園の固定点で脚の動きを停止したときに観察される可能性があります。アリはガスターを曲げ、お互いに向かって、口の部分に便液の滴を適用します。一度に1つずつ、アリは下顎を通して前足を引っ張り、アンテナはアンテナクリーナーを通して引っ張ります。この研究の主な目的は、葉を切断するアリの病気防御行動を示す短いクリップのカタログを作成することであった。プロトコルに記載されている動作は、実験的な感染シナリオでスコア付けされました。コントロールコロニーでは、マイナーな労働者は主要な労働者よりも庭の作物を手入れしました。感染したコロニーでは、対照コロニーに対する真菌のグルーミングの増加に対する有意でない傾向があった。便のグルーミングの有意な増加は感染に関連していたが、マイナーと主要な労働者の間に違いは検出されなかった。胞子除草と真菌除草はいずれも頻度が低く、感染したコロニーとコントロールの間に有意な差は認められなかった。感染以来、経時増加する菌類の草取の傾向が観察される。初期感染を有する感染したコロニーのうち、4時間の観察期間の後に目に見える胞子が残っていたものはほとんどなかった。興味深いことに、後段階の感染状態では、アリはコロニーのいずれでも胞子を完全に除去することができない。したがって、この実験の結果は、小さい労働者行動と主要な労働者の行動の平均頻度を計算するために、クリップのコンパイルを行動研究に使用する方法の例示的な例です。我々は、真菌を増殖するアリの防御に寄与する行動を文書化し、これらの行動を体系的に同定し、記述し、捕らえた。我々の結果は、広範な行動と関連する抗微生物化合物に直面したときに病原体がコロニーに感染するのが難しい理由を示唆する分野での研究を強化する。今後の現場での作業に向けた新しいツールを提供し、行動カタログがコンセンサスの確保と、行動の定義、観察、解釈の合理化に役立つことを願っています。

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