Name: sub-acute cerebral microhemorrhages induced by lipopolysaccharide injection in rats
Uploaded: 2018-10-17T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats at JoVE.com

Vi takker lærer Jian Feng Lei og kolleger fra Capital medicinske universitet vejledning under Mr. Vi takker også Jing Zeng fra Department of Neurology, den anden Hospital Yichang til at yde teknisk support.

Alle metoder beskrevet her er blevet godkendt af Animal Care og brug udvalg (ACUC) af PLA Army General Hospital.
1. materialer
<ol><li>Forberedelse af LP'ER injektion<ol>
<li>Tilsættes 25 mL destilleret vand til 25 mg af LP'ER pulver stammer fra S. typhimurium til en endelig koncentration på 1 mg/mL. Butik injektion i sterile rør ved 4 ° C. Forsigtig: LPS er giftigt.</li>
		<li>Forbered en 2% EB løsning i normal 0,9% saltvand løsning til at holde EB injektion på arbejde ko...

<ol>
	<li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+inflammation-induced+cerebral+microbleeds.">A murine model of inflammation-induced cerebral microbleeds.</a> J Neuroinflammation. 13 (1), 218 (2016).</li><li>Vernooij, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+risk+factors+of+cerebral+microbleeds+the+Rotterdam+Scan+Study.">Prevalence and risk factors of cerebral microbleeds the Rotterdam Scan Study.</a> Neurology. 70 (14), 1208-1214 (2009).</li><li>Pettersen, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbleed+topography,+leukoaraiosis,+and+cognition+in+probable+Alzheimer+disease+from+the+Sunnybrook+dementia+study.">Microbleed topography, leukoaraiosis, and cognition in probable Alzheimer disease from the Sunnybrook dementia study.</a> Archives of Neurology. 65 (6), 790-795 (2008).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+microbleeds+and+neuropsychiatric+symptoms+in+an+elderly+Asian+cohort.">Cerebral microbleeds and neuropsychiatric symptoms in an elderly Asian cohort.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 88 (1), 7-11 (2017).</li><li>Mcauley, G., Schrag, M., Barnes, S., Obenaus, A., Dickson, A., Kirsch, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+iron+quantification+in+collagenase-induced+microbleeds+in+rat+brain.">In vivo iron quantification in collagenase-induced microbleeds in rat brain.</a> Magnetic Resonance in Medicine. 67 (3), 711-717 (2012).</li><li>Reuter, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+cerebral+microbleeds+in+the+APP23-transgenic+mouse+model+of+cerebral+amyloid+angiopathy-a+9.4+tesla+MRI+study.">Development of cerebral microbleeds in the APP23-transgenic mouse model of cerebral amyloid angiopathy-a 9.4 tesla MRI study.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 8 (8), 170 (2016).</li><li>Scott, L. L., Downing, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+neonatal+exposure+to+BMAA+in+a+rat+model+produces+neuropathology+consistent+with+neurodegenerative+diseases.">A single neonatal exposure to BMAA in a rat model produces neuropathology consistent with neurodegenerative diseases.</a> Toxins. 10 (1), E22 (2018).</li><li>Toth, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+exacerbates+hypertension-induced+cerebral+microhemorrhages+in+mice:+role+of+resveratrol+treatment+in+vasoprotection.">Aging exacerbates hypertension-induced cerebral microhemorrhages in mice: role of resveratrol treatment in vasoprotection.</a> Aging Cell. 14 (3), 400-408 (2015).</li><li>Liu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+H&amp;E+and+Prussian+blue+staining+in+a+mouse+model+of+cerebral+microbleeds.">Comparative analysis of H&amp;E and Prussian blue staining in a mouse model of cerebral microbleeds.</a> Journal of Histochemistry &amp; Cytochemistry. 62 (11), 767-773 (2014).</li><li>Zeng, J., Zh&#224;o, H., Liu, Z., Zhang, W., Huang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipopolysaccharide+induces+subacute+cerebral+microhemorrhages+with+involvement+of+Nitric+Oxide+Synthase+in+rats.">Lipopolysaccharide induces subacute cerebral microhemorrhages with involvement of Nitric Oxide Synthase in rats.</a> Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 27 (7), 1905-1913 (2018).</li><li>Greenberg, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+microbleeds:+A+guide+to+detection+and+interpretation.">Cerebral microbleeds: A guide to detection and interpretation.</a> Lancet Neurology. 8 (2), 165-174 (2009).</li><li>Hoffmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Field+MRI+reveals+a+drastic+increase+of+hypoxia-induced+microhemorrhages+upon+tissue+reoxygenation+in+the+mouse+brain+with+strong+predominance+in+the+olfactory+bulb.">High-Field MRI reveals a drastic increase of hypoxia-induced microhemorrhages upon tissue reoxygenation in the mouse brain with strong predominance in the olfactory bulb.</a> Plos One. 11 (2), e0148441 (2016).</li><li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+phosphodiesterase+3A+modulation+on+murine+cerebral+microhemorrhages.">Effects of phosphodiesterase 3A modulation on murine cerebral microhemorrhages.</a> Journal of Neuroinflammation. 14 (1), 114 (2017).</li><li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+exacerbates+development+of+cerebral+microbleeds+in+a+mouse+model.">Aging exacerbates development of cerebral microbleeds in a mouse model.</a> Journal of Neuroinflammation. 15 (1), 69 (2018).</li><li>Mello, B. S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+influences+in+behavior+and+brain+inflammatory+and+oxidative+alterations+in+mice+submitted+to+lipopolysaccharide-induced+inflammatory+model+of+depression.">Sex influences in behavior and brain inflammatory and oxidative alterations in mice submitted to lipopolysaccharide-induced inflammatory model of depression.</a> Journal of Neuroimmunol. 320, 133-142 (2018).</li><li>Souza, D. F. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+astroglial+markers+in+a+maternal+immune+activation+model+of+schizophrenia+in+Wistar+rats+are+dependent+on+sex.">Changes in astroglial markers in a maternal immune activation model of schizophrenia in Wistar rats are dependent on sex.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 9 (489), (2015).</li><li>Dutta, G., Zhang, P., Liu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Lipopolysaccharide+Parkinson's+disease+animal+model:+mechanistic+studies+and+drug+discovery.">The Lipopolysaccharide Parkinson's disease animal model: mechanistic studies and drug discovery.</a> Fundamental &amp; Clinical Pharmacology. 22 (5), 453-464 (2008).</li><li>El-Sayed, N. S., Bayan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Possible+role+of+resveratrol+targeting+estradiol+and+neprilysin+pathways+in+lipopolysaccharide+model+of+Alzheimer+disease.">Possible role of resveratrol targeting estradiol and neprilysin pathways in lipopolysaccharide model of Alzheimer disease.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 822 (822), 107-118 (2015).</li><li>Combrinck, M. I., Perry, V. H., Cunningham, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+infection+evokes+exaggerated+sickness+behaviour+in+pre-clinical+murine+prion+disease.">Peripheral infection evokes exaggerated sickness behaviour in pre-clinical murine prion disease.</a> Neuroscience. 112 (1), 7-11 (2002).</li><li>Pantoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+small+vessel+disease:+from+pathogenesis+and+clinical+characteristics+to+therapeutic+challenges.">Cerebral small vessel disease: from pathogenesis and clinical characteristics to therapeutic challenges.</a> Lancet Neurology. 9 (7), 689-701 (2010).</li><li>Rosand, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+clustering+of+hemorrhages+in+probable+cerebral+amyloid+angiopathy.">Spatial clustering of hemorrhages in probable cerebral amyloid angiopathy.</a> Annals of Neurology. 58 (3), 459-462 (2005).</li><li>Robinson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microstructural+and+microglial+changes+after+repetitive+mild+traumatic+brain+injury+in+mice.">Microstructural and microglial changes after repetitive mild traumatic brain injury in mice.</a> Journal of Neuroscience Research. 95 (4), 1025-1035 (2017).</li><li>Kraft, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypercholesterolemia+induced+cerebral+small+vessel+disease.">Hypercholesterolemia induced cerebral small vessel disease.</a> Plos One. 12 (8), e0182822 (2017).</li><li>Schreiber, S., Bueche, C. Z., Garz, C., Baun, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+brain+barrier+breakdown+as+the+starting+point+of+cerebral+small+vessel+disease?+-+New+insights+from+a+rat+model.">Blood brain barrier breakdown as the starting point of cerebral small vessel disease? - New insights from a rat model.</a> Experimental &amp; Translational Stroke Medicine. 5 (1), 4 (2013).</li></ol>

Forskningsundersøgelser på CMHs er steget i de seneste par år. Mekanismen af CMHs er imidlertid uklart, hvilket fik forskere til at etablere dyremodeller, at simulerer denne særlige betingelse. For eksempel, Hoffmann et al. udviklet en hypoxi-induceret CMHs musemodel der viser at CMHs er forårsaget af iltmangel og afbrydelse af cerebrovaskulær autoregulation12. Reuter et al. 5 etableret en CMHs model i APP23-Transgene mus, som viste at cerebral amylo...

Klassisk cerebral microhemorrhages (CMHs) henviser til lille perivascular aflejringer af blod nedbrydningsprodukter f.eks hemosiderin fra rød blod celler i hjernen1. Ifølge Rotterdam Skan undersøgelse, kunne CMHs findes i næsten 17,8% af personer i alderen 60-69 år og 38,3% i personer over 80 år2. Forekomsten af CMHs i ældre er forholdsvis høj, og en korrelation mellem ophobning af CMHs og kognitive og neuropsykiatriske dysfunktion har været etableret3,4. Flere dyremodeller for CMHs er for nylig blevet rapporteret, herunder gnavere modeller induceret af type IV collagenase stereotaxisk injektion5, APP transgene6, β-N-methylamino-L-alanin eksponering7og hypertension8, med CMHs induceret af systemisk inflammation som en af de mest godt accepteret valg. Fisher et al. 9 først brugt LP'ER afledt af Salmonella typhimurium for at udvikle en akut CMHs musen model. Efterfølgende, rapporteret den samme gruppe udviklingen af en subakut CMHs musen model ved hjælp af den samme metode2.
LP'ER betragtes som en standardiseret inflammatoriske stimulus via intraperitoneal injektion. Tidligere undersøgelser har bekræftet, at LPS injektion kan forårsage neuroinflammation, som afspejles af store mængder af mikroglia og astrocyte aktivering i dyre modeller2,10. Derudover har en positiv korrelation mellem aktivering af neuroinflammation aktivering og antallet af CMHs været etableret2,10. Baseret på disse tidligere undersøgelser, vi blev bedt om at udvikle en CMHs rotte model af intraperitoneal injektion af LP'ER.
Fremskridt i opdagelse teknologier har resulteret i en stigning i antallet af forskning undersøgelser på CMHs. Mest almindeligt anerkendt metoder til påvisning af CMHs omfatter påvisning af røde blodlegemer af hæmatoxylin og eosin (han) farvning, jern jern påvisning af preussiske blå farvning9, påvisning af Evans blå (EB) aflejring ved immunfluorescens billedbehandling, og 7,0 Tesla magnetisk resonans-modtagelighed vægtet imaging (MRI-SWI)10. Den nuværende undersøgelse sigter mod at udvikle en metode til screening for CMHs.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>LPS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L-2630</td>
			<td>for inflammation induction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EB</td>
			<td>Sigma-aldrich</td>
			<td>E2129</td>
			<td>for EB leakage detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI dying solution</td>
			<td>Servicbio</td>
			<td>G1012</td>
			<td>count medium for IF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perl&#8217;s Prussian staining</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G1424</td>
			<td>Kit for Prussian staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HE staining</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G1120</td>
			<td>Kit for HE staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chloral hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>47335U</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phosphate buffer saline (PBS)</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1022</td>
			<td>a kind of buffer solution commonly used in experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% saline solution</td>
			<td>Hainan DonglianChangfu Pharmaceutical Co., Ltd., China</td>
			<td></td>
			<td>solution for perfusion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20% sucrose solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G2461</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30% sucrose solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G2460</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vet ointment</td>
			<td>Solcoseryl eye gel, Bacel, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td>for rat&#39;s eyes protection</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sub-acute cerebral microhemorrhages induced by lipopolysaccharide injection in rats

Cerebral microhemorrhages (CMHs) er almindelig hos ældre patienter og er korreleret til forskellige neuropsykiatriske lidelser. Årsagen til CMHs er komplekse, og neuroinflammation er ofte observeret som en samtidig forekomst. Her, vi beskriver en sub-akutte CMHs rotte model induceret af LPS (LPS) injektion, samt en metode til påvisning af CMHs. systemisk LP'ER injektion er relativt enkel, økonomisk og omkostningseffektive. En væsentlig fordel ved LP'ER injektion, er dens stabilitet til at fremkalde betændelse. CMHs forårsaget af LP'ER injektion kunne påvises ved grov observation, hæmatoxylin og eosin (han) farvning, Perls preussiske farvning, dobbelt mærkning af Evans blå (EB) og magnetisk resonans-modtagelighed vægtet imaging (MRI-SWI) teknologi. Andre metoder for at udvikle CMHs dyremodeller, herunder deres fordele og ulemper, er endelig også behandles i denne rapport.

CMHs kan påvises ved hjælp af forskellige metoder. De mest godt accepterede metoder omfatter følgende: (1) brutto observation og vurdering af overflade CMHs (vist i figur 1, øverste panel); (2) han farvning for påvisning af røde blodlegemer (vist i figur 2A, øverste panel) eller preussiske farvning afsløre jern jern stammer fra lysering af røde blodlegemer (figur 2A, nederste panel); (3) EB ...

Watch this Scientific Journal Video about Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats at JoVE.com

Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats

Vi præsenterer en protokol for at fremkalde og registrere CMHs forårsaget af LP'ER injektion i Sprague-Dawley rotter, som kan udnyttes i fremtiden forskning undersøgelser om patogenesen af CMHs.

Sub-akut Cerebral Microhemorrhages induceret af LPS injektion i rotter

Cerebral microhemorrhages (CMHs) are common in aged patients and are correlated to various neuropsychiatric disorders. The etiology of CMHs is complex, ...

Denne metode kan hjælpe med at besvare centrale spørgsmål i cerebral mikro-blødning felt såsom ætiologi, distribution, og påvisning af cerebral mikro-blødning og så videre. Den største fordel ved denne teknik er, at LPS injektioner stabilt fremkalde betændelse. Desuden, LPS injektion er ganske enkel, økonomisk, og omkostningseffektiv.Selv om denne metode kan give indsigt i cerebral blødning induktion, det kan også anvendes til andre hjernesygdomme såsom depression, skizofreni, Parkinsons sygdom, Alzheimers sygdom, og prion sygdom. Administrere LPS ved en dosis på en milligram pr kg kropsvægt til 10-ugergamle mandlige Sprague Dawley rotter ved intraperitoneal injektion, derefter returnere hver rotte til hjemmet bur. Gentag LPS-injektionen efter seks timer og 16 timer.Bemærk, at indsprøjtning af SD-rotter med LPS med en dosis på 1 mg/kg kan resultere i en dødelighed på 5 %. Dødeligheden kan stige yderligere hos yngre eller ældre rotter eller drægtige hunrotter. Returner rotterne til deres bure efter LPS injektion, og give ad libitum adgang til mad og drikke.Under terminal anæstesi, udføre en fem til otte-millimeter dyb hjertepunktur på hver rotte. Punkteringspunktet skal være fem millimeter til venstre margen af brystbenet på det tredje og fjerde interkostale rum. Hold nålen på plads og udskift det tomme rør med et rør, der indeholder Evans blå.Vent, indtil blodopvinding er observeret, og derefter injicere Evans blå ved en dosis på 0,2 milliliter pr 100 gram kropsvægt i venstre hjertekammer. Hold rotten i en liggende position i 10 minutter, hvis vurderingen Evans blå lækage gennem blod / hjerne barrieren ved immunfluorescens imaging. Udfør hjerteperfusioner ved hjælp af iskold 200 til 300 milliliter 0,9% saltvandsopløsning for at rydde hjernevasketur og hjerner.Skift til iskold 4% paraformaldehyd til fiksering. Derefter, efter isolering af hjernen, nedsænkes det i 20% saccharose i PBS i mindst seks timer, eller indtil hjernen synker til bunden af røret. Skift opløsningen til 30%saccharose og fastgør den i yderligere seks timer.Endelig forberede 10-millimeter tyk hjernevæv sektioner ved hjælp af en kryostat. Vask objektglassene med PBS tre gange i fem minutter hver, og inkuber derefter objektglas med 4, 6'diamidino-2-phenylindole eller DAPI-opløsning i 15 minutter ved stuetemperatur. Efter vask af objektglas i PBS som før monteres objektglassene med PBS-glycerol-opløsning.Tag billeder på et fluorescensmikroskop. EB deposition er indikeret ved rød fluorescens, kerner er indikeret med blå fluorescens. Begynd H & E farvning ved at vaske dias i destilleret vand.Derefter nedsænkes i hæmaxylin opløsning i otte minutter. Alternativt, for Perl preussisk blå farvning, plet i reaktionsopløsning med lige dele blanding af ferrocyanid og saltsyre i 10 minutter. Efter farvning vaskes i rindende vand fra hanen i fem minutter.Differentiere i 1% syre alkohol i 30 sekunder. Efter vask i rindende vand fra hanen i et minut, plet i 0,2% ammoniak vand eller mættet lithiumcarbonat opløsning i 30 sekunder til et minut. Dernæst vaskes i rindende vand fra hanen i fem minutter.Kontraplet med eosinopløsning i 30 sekunder til et minut. Dehydrere gennem 90% alkohol, derefter 95% alkohol, og absolut alkohol i 0,5 til to minutter hver. Efter dehydrering, klar i xylen i 30 sekunder.Efter montering, analysere H & E farvning ved hjælp af en brightfield fluorescens mikroskop. De røde blodlegemer frigivet fra blodkarrene, som er komponenter i CMHs, vises i rød-orange under H & E farvning. Surface CMH'er kan detekteres ved grov observation som angivet af de røde pile.Evans blå farvning afslører synlig rød fluorescens, hvor Evans blå molekyler lækket fra en skadet blod - hjerne barriere. H & E farvning viser røde blodlegemer fundet uden for kapillærer, og preussiske farvning afslører ferr ion punkter stammer fra lysis af røde blodlegemer. Mens du forsøger denne procedure, Er det vigtigt at huske, at dosis af LPS at fremkalde cerebral mikro-blødning er større end den, der anvendes i Parkinsons sygdom eller skizofreni model.Derfor bør dyrenes miljø holdes rent for at reducere dødeligheden. Efter denne procedure, andre metoder som elektron mikroskopi, magnetisk resonans imaging, og immunfluorescerende billeddannelse kunne udføres for at bestemme skaderne på den ydre struktur af blod - hjerne barrieren i cerebral mikro-blødning, fordeling af cerebral mikro-blødninger i hjernen parenkym i vivo, samt glia celle aktivering.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dobbelte Elektrofysiologiske Optagelser af synaptisk-evoked astrogliale og Neuronal respons i Akut hippocampusskiver

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

Quantification of Cerebral Vascular Architecture using Two-photon Microscopy in a Mouse Model of HIV-induced Neuroinflammation

Kvantificering af cerebral vaskulær arkitektur ved hjælp af to-foton mikroskopi i en musemodel af HIV-induceret Neuroinflammation

Human Immunodeficiency Virus 1 (HIV-1) infection frequently results in HIV-1 Associated Neurocognitive Disorders (HAND), and is characterized by a chronic ...

Rat Model of Widespread Cerebral Cortical Demyelination Induced by an Intracerebral Injection of Pro-Inflammatory Cytokines

Rottemodel af udbredt cerebral kortikal demyelinering induceret af en intracerebral injektion af proinflammatoriske cytokiner

Multiple sclerosis (MS) is the most common immune-mediated disease of the central nervous system (CNS) and progressively leads to physical disability and ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Virkningerne af Blast-induceret Neurotrauma på trykisoleret gnaver midt cerebrale arterier

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation

Etablering af akut Pontine Infarkt hos rotter ved elektrisk stimulation

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided ...

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Laser-induceret hjerneskade i Motor Cortex af rotter

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Detrusor Underactivity Model in Rats by Conus Medullaris Transection

Detrusor underaktivitetsmodel hos rotter af Conus medullaris transektion

The goal of the presented protocol was to establish a detrusor underactivity (DU) model in the rat through conus medullaris transection. Laminectomy was ...

Modeling Neonatal Intraventricular Hemorrhage Through Intraventricular Injection of Hemoglobin

Modellering af neonatal intraventrikulær blødning gennem intraventrikulær injektion af hæmoglobin

Neonatal intraventricular hemorrhage (IVH) is a common consequence of premature birth and leads to brain injury, posthemorrhagic hydrocephalus (PHH), and ...