Name: sub-acute cerebral microhemorrhages induced by lipopolysaccharide injection in rats
Uploaded: 2018-10-17T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats at JoVE.com

Vi takker lærer Jian Feng Lei og kolleger fra hovedstaden medisinske universitet etter veiledning under MRI. Vi takker også Jing Zeng fra ved Institutt for nevrologi, andre folks sykehuset av Yichang for teknisk støtte.

Alle metodene som er beskrevet her er godkjent av Animal Care og bruk Committee (ACUC) den PLA Army General Hospital.
1. materiale
<ol><li>Utarbeidelse av LPS injeksjon<ol>
<li>Legg til 25 mL destillert vann 25 mg LPS pulver avledet fra S. typhimurium en siste konsentrasjon av 1 mg/mL. Lagre injeksjon i et sterilt rør på 4 ° C. FORSIKTIG: LPS er giftig.</li>
		<li>Forberede en 2% EB løsning i normal 0,9% saltvann å holde EB injeksjon på arbeider konsentrasjon.</li>
	</ol>
<...

<ol>
	<li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+inflammation-induced+cerebral+microbleeds.">A murine model of inflammation-induced cerebral microbleeds.</a> J Neuroinflammation. 13 (1), 218 (2016).</li><li>Vernooij, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+risk+factors+of+cerebral+microbleeds+the+Rotterdam+Scan+Study.">Prevalence and risk factors of cerebral microbleeds the Rotterdam Scan Study.</a> Neurology. 70 (14), 1208-1214 (2009).</li><li>Pettersen, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbleed+topography,+leukoaraiosis,+and+cognition+in+probable+Alzheimer+disease+from+the+Sunnybrook+dementia+study.">Microbleed topography, leukoaraiosis, and cognition in probable Alzheimer disease from the Sunnybrook dementia study.</a> Archives of Neurology. 65 (6), 790-795 (2008).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+microbleeds+and+neuropsychiatric+symptoms+in+an+elderly+Asian+cohort.">Cerebral microbleeds and neuropsychiatric symptoms in an elderly Asian cohort.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 88 (1), 7-11 (2017).</li><li>Mcauley, G., Schrag, M., Barnes, S., Obenaus, A., Dickson, A., Kirsch, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+iron+quantification+in+collagenase-induced+microbleeds+in+rat+brain.">In vivo iron quantification in collagenase-induced microbleeds in rat brain.</a> Magnetic Resonance in Medicine. 67 (3), 711-717 (2012).</li><li>Reuter, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+cerebral+microbleeds+in+the+APP23-transgenic+mouse+model+of+cerebral+amyloid+angiopathy-a+9.4+tesla+MRI+study.">Development of cerebral microbleeds in the APP23-transgenic mouse model of cerebral amyloid angiopathy-a 9.4 tesla MRI study.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 8 (8), 170 (2016).</li><li>Scott, L. L., Downing, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+neonatal+exposure+to+BMAA+in+a+rat+model+produces+neuropathology+consistent+with+neurodegenerative+diseases.">A single neonatal exposure to BMAA in a rat model produces neuropathology consistent with neurodegenerative diseases.</a> Toxins. 10 (1), E22 (2018).</li><li>Toth, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+exacerbates+hypertension-induced+cerebral+microhemorrhages+in+mice:+role+of+resveratrol+treatment+in+vasoprotection.">Aging exacerbates hypertension-induced cerebral microhemorrhages in mice: role of resveratrol treatment in vasoprotection.</a> Aging Cell. 14 (3), 400-408 (2015).</li><li>Liu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+H&amp;E+and+Prussian+blue+staining+in+a+mouse+model+of+cerebral+microbleeds.">Comparative analysis of H&amp;E and Prussian blue staining in a mouse model of cerebral microbleeds.</a> Journal of Histochemistry &amp; Cytochemistry. 62 (11), 767-773 (2014).</li><li>Zeng, J., Zh&#224;o, H., Liu, Z., Zhang, W., Huang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipopolysaccharide+induces+subacute+cerebral+microhemorrhages+with+involvement+of+Nitric+Oxide+Synthase+in+rats.">Lipopolysaccharide induces subacute cerebral microhemorrhages with involvement of Nitric Oxide Synthase in rats.</a> Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 27 (7), 1905-1913 (2018).</li><li>Greenberg, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+microbleeds:+A+guide+to+detection+and+interpretation.">Cerebral microbleeds: A guide to detection and interpretation.</a> Lancet Neurology. 8 (2), 165-174 (2009).</li><li>Hoffmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Field+MRI+reveals+a+drastic+increase+of+hypoxia-induced+microhemorrhages+upon+tissue+reoxygenation+in+the+mouse+brain+with+strong+predominance+in+the+olfactory+bulb.">High-Field MRI reveals a drastic increase of hypoxia-induced microhemorrhages upon tissue reoxygenation in the mouse brain with strong predominance in the olfactory bulb.</a> Plos One. 11 (2), e0148441 (2016).</li><li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+phosphodiesterase+3A+modulation+on+murine+cerebral+microhemorrhages.">Effects of phosphodiesterase 3A modulation on murine cerebral microhemorrhages.</a> Journal of Neuroinflammation. 14 (1), 114 (2017).</li><li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+exacerbates+development+of+cerebral+microbleeds+in+a+mouse+model.">Aging exacerbates development of cerebral microbleeds in a mouse model.</a> Journal of Neuroinflammation. 15 (1), 69 (2018).</li><li>Mello, B. S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+influences+in+behavior+and+brain+inflammatory+and+oxidative+alterations+in+mice+submitted+to+lipopolysaccharide-induced+inflammatory+model+of+depression.">Sex influences in behavior and brain inflammatory and oxidative alterations in mice submitted to lipopolysaccharide-induced inflammatory model of depression.</a> Journal of Neuroimmunol. 320, 133-142 (2018).</li><li>Souza, D. F. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+astroglial+markers+in+a+maternal+immune+activation+model+of+schizophrenia+in+Wistar+rats+are+dependent+on+sex.">Changes in astroglial markers in a maternal immune activation model of schizophrenia in Wistar rats are dependent on sex.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 9 (489), (2015).</li><li>Dutta, G., Zhang, P., Liu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Lipopolysaccharide+Parkinson's+disease+animal+model:+mechanistic+studies+and+drug+discovery.">The Lipopolysaccharide Parkinson's disease animal model: mechanistic studies and drug discovery.</a> Fundamental &amp; Clinical Pharmacology. 22 (5), 453-464 (2008).</li><li>El-Sayed, N. S., Bayan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Possible+role+of+resveratrol+targeting+estradiol+and+neprilysin+pathways+in+lipopolysaccharide+model+of+Alzheimer+disease.">Possible role of resveratrol targeting estradiol and neprilysin pathways in lipopolysaccharide model of Alzheimer disease.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 822 (822), 107-118 (2015).</li><li>Combrinck, M. I., Perry, V. H., Cunningham, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+infection+evokes+exaggerated+sickness+behaviour+in+pre-clinical+murine+prion+disease.">Peripheral infection evokes exaggerated sickness behaviour in pre-clinical murine prion disease.</a> Neuroscience. 112 (1), 7-11 (2002).</li><li>Pantoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+small+vessel+disease:+from+pathogenesis+and+clinical+characteristics+to+therapeutic+challenges.">Cerebral small vessel disease: from pathogenesis and clinical characteristics to therapeutic challenges.</a> Lancet Neurology. 9 (7), 689-701 (2010).</li><li>Rosand, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+clustering+of+hemorrhages+in+probable+cerebral+amyloid+angiopathy.">Spatial clustering of hemorrhages in probable cerebral amyloid angiopathy.</a> Annals of Neurology. 58 (3), 459-462 (2005).</li><li>Robinson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microstructural+and+microglial+changes+after+repetitive+mild+traumatic+brain+injury+in+mice.">Microstructural and microglial changes after repetitive mild traumatic brain injury in mice.</a> Journal of Neuroscience Research. 95 (4), 1025-1035 (2017).</li><li>Kraft, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypercholesterolemia+induced+cerebral+small+vessel+disease.">Hypercholesterolemia induced cerebral small vessel disease.</a> Plos One. 12 (8), e0182822 (2017).</li><li>Schreiber, S., Bueche, C. Z., Garz, C., Baun, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+brain+barrier+breakdown+as+the+starting+point+of+cerebral+small+vessel+disease?+-+New+insights+from+a+rat+model.">Blood brain barrier breakdown as the starting point of cerebral small vessel disease? - New insights from a rat model.</a> Experimental &amp; Translational Stroke Medicine. 5 (1), 4 (2013).</li></ol>

Studier på CMHs har økt i de siste årene. Mekanismen for CMHs er imidlertid uklart, spørre forskere å etablere dyremodeller som simulerer denne bestemt tilstanden. For eksempel Hoffmann et al. utviklet en hypoksi-indusert CMHs musemodell som viser at CMHs er forårsaket av hypoksi og avbrudd i cerebrovascular autoregulation12. Reuter et al. 5 etablert en CMHs modell i APP23-transgene mus, som viste at cerebral amyloid angiopathy (CAA) spiller en vikti...

Klassisk cerebral microhemorrhages (CMHs) refererer til lille perivascular forekomster av blod nedbrytningsprodukter som hemosiderin fra røde blod celler i hjernen1. Ifølge Rotterdam skanne Studien fant CMHs nesten 17,8% av personer i alderen 60-69 år og 38,3% i de over 80 år2. Utbredelsen av CMHs hos eldre er relativt høy, og en sammenheng mellom akkumulering av CMHs og kognitive og nevropsykiatriske dysfunksjon har vært etablert3,4. Flere dyr modeller av CMHs har nylig blitt rapportert, inkludert gnager modeller av type IV collagenase stereotaxic injeksjon5, APP transgene6, β-N-methylamino-L-alanin eksponering7og hypertensjon8, med CMHs indusert av systemisk betennelse som en av de fleste valgene. Fisher et al. 9 først brukt LPS avledet fra Salmonella typhimurium for å utvikle en akutt CMHs musemodell. Deretter rapportert samme gruppe utviklingen av en sub akutt CMHs musemodell bruker den samme tilnærmingen2.
LPS er regnet som en standardisert inflammatorisk stimulans via intraperitoneal injeksjon. Tidligere studier har bekreftet at LPS injeksjon føre neuroinflammation som gjenspeiles av store mengder microglia og astrocytter aktivisering i dyr modeller2,10. Videre er en positiv korrelasjon mellom aktivering av neuroinflammation aktivisering og antallet CMHs etablert2,10. Basert på disse tidligere studier, vi ble bedt om å utvikle en CMHs rotte modell av intraperitoneal injeksjon av LPS.
Fremskritt i oppdagelsen teknologiene har ført til en økning i antall forskning undersøkelser på CMHs. Mest allment anerkjent metoder av oppdager CMHs inkluderer gjenkjenning av røde blodlegemer av hematoxylin og eosin (han) flekker, ferric jern gjenkjenning av prøyssiske blå flekker9, oppdagelsen av Evans blå (EB) deponering av immunofluorescence bildebehandling og 7.0 Tesla magnetisk resonans imaging-mottakelighet vektet imaging (MRI-SWI)10. Studien har som mål å utvikle en metode for screening for CMHs.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>LPS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L-2630</td>
			<td>for inflammation induction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EB</td>
			<td>Sigma-aldrich</td>
			<td>E2129</td>
			<td>for EB leakage detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI dying solution</td>
			<td>Servicbio</td>
			<td>G1012</td>
			<td>count medium for IF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perl&#8217;s Prussian staining</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G1424</td>
			<td>Kit for Prussian staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HE staining</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G1120</td>
			<td>Kit for HE staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chloral hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>47335U</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phosphate buffer saline (PBS)</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1022</td>
			<td>a kind of buffer solution commonly used in experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% saline solution</td>
			<td>Hainan DonglianChangfu Pharmaceutical Co., Ltd., China</td>
			<td></td>
			<td>solution for perfusion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20% sucrose solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G2461</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30% sucrose solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G2460</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vet ointment</td>
			<td>Solcoseryl eye gel, Bacel, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td>for rat&#39;s eyes protection</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sub-acute cerebral microhemorrhages induced by lipopolysaccharide injection in rats

Et microhemorrhages (CMHs) er vanlig hos eldre pasienter, og er korrelert til ulike nevropsykiatriske lidelser. Etiologien for CMHs er kompleks, og neuroinflammation er ofte observert som en samtidig forekomst. Her beskriver vi en sub akutt CMHs rotte modell av lipopolysakkarid (LPS) injeksjon, samt en metode for å oppdage CMHs. systemisk LPS injeksjon er relativt enkel, økonomisk og kostnadseffektiv. En stor fordel av LPS injeksjon er dens stabilitet å indusere betennelse. CMHs forårsaket av LPS injeksjon kan oppdages av brutto observasjon, hematoxylin og eosin (han) flekker, Perl er prøyssiske flekker, Evans blå (EB) dobbel-merking og magnetisk resonans imaging-mottakelighet vektet imaging (MRI-SWI) teknologi. Til slutt, andre metoder for å utvikle CMHs dyr modeller, inkludert deres fordeler og/eller ulemper, er også omtalt i denne rapporten.

CMHs kan oppdages ved hjelp av ulike tilnærminger. De fleste metodene inkluderer følgende: (1) brutto observasjon og vurdering av overflaten CMHs (vist i figur 1, øvre panel); (2) han flekker for påvisning av røde blodlegemer (vist i figur 2A, øvre panel) eller prøyssiske flekker oppdage ferric jern avledet fra lysis av røde blodlegemer (figur 2A, nedre panel); (3) EB doblet flekker for påvi...

Watch this Scientific Journal Video about Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats at JoVE.com

Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats

Vi presenterer en protokoll for å indusere og oppdage CMHs forårsaket av LPS injeksjon i Sprague-Dawley rotter, som kan benyttes i fremtiden forskning undersøkelser på patogenesen av CMHs.

Sub akutt Cerebral Microhemorrhages av lipopolysakkarid injeksjon i rotter

Cerebral microhemorrhages (CMHs) are common in aged patients and are correlated to various neuropsychiatric disorders. The etiology of CMHs is complex, ...

Denne metoden kan bidra til å svare på viktige spørsmål i cerebral mikroblødning felt som etiologi, distribusjon, og påvisning av cerebral mikroblødning og så videre. Den største fordelen med denne teknikken er at LPS injeksjoner stabilt indusere betennelse. I tillegg er LPS-injeksjon ganske enkel, økonomisk og kostnadseffektiv.Selv om denne metoden kan gi innsikt i hjerneblødning induksjon, det kan også brukes på andre hjernesykdommer som depresjon, schizofreni, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom, og prion sykdom. Administrer LPS i en dose på ett mg per kilo kroppsvekt til 10 uker gamle hannSprague Dawley rotter ved intraperitoneal injeksjon, og returner deretter hver rotte til hjemmeburet. Gjenta LPS-injeksjonen etter seks timer og 16 timer.Vær oppmerksom på at injeksjon av SD-rotter med LPS med en dose på ett mg per kilo kan føre til 5 % dødelighet. Dødeligheten kan ytterligere øke hos yngre eller eldre rotter eller gravide hunnrotter. Returner rottene til burene sine etter LPS-injeksjon, og gi ad libitum tilgang til mat og drikke.Under terminalbedøvelse utfører du en fem til åtte millimeter dyp hjertepunktering på hver rotte. Punkteringspunktet skal være fem millimeter til venstre margin av brystbenet på tredje og fjerde interkostalrom. Hold nålen på plass og skift ut det tomme røret med et rør som inneholder Evans blå.Vent til blod utvinning er observert, og deretter injisere Evans blå i en dose på 0,2 milliliter per 100 gram kroppsvekt i venstre hjerte ventrikkel. Hold rotten i liggende stilling i 10 minutter hvis du vurderer Evans blå lekkasje gjennom blod/hjernebarrieren ved immunofluorescence imaging. Utfør hjerteperfusjoner ved hjelp av iskalde 200 til 300 milliliter med 0,9% saltløsning for å fjerne hjernevaskulaturen og hjernen.Bytt til iskald 4% paraformaldehyd for fiksering. Deretter, etter å ha isolert hjernen, senk den i 20% sukrose i PBS i minst seks timer eller til hjernen synker til bunnen av røret. Endre løsningen til 30% sukrose og fikse den i ytterligere seks timer.Til slutt, forberede 10-millimeter tykke hjernevev seksjoner ved hjelp av en kryostat. Vask lysbildene med PBS tre ganger i fem minutter hver, og inkuber deretter lysbilder med 4, 6'diamidino-2-fenylindol eller DAPI løsning i 15 minutter ved romtemperatur. Etter vask av lysbildene i PBS som før, monter lysbildene med PBS-glyserolløsning.Ta bilder på et fluorescensmikroskop. EB-deponering indikeres med rød fluorescens, kjerner indikeres med blå fluorescens. Begynn H&E-fargingen ved å vaske skliene i destillert vann.Senk deretter i hematoksylinløsning i åtte minutter. Alternativt, for Perl prøyssisk blå farging, flekk i reaksjonsløsning med like deler blanding av ferrocyanid og saltsyre i 10 minutter. Etter farging, vask i rennende vann fra springen i fem minutter.Differensier i 1% sur alkohol i 30 sekunder. Etter vask i rennende vann fra springen i ett minutt, flekk i 0,2% ammoniakkvann eller mettet litiumkarbonatløsning i 30 sekunder til ett minutt. Vask deretter i rennende vann fra springen i fem minutter.Motflekk med eosinløsning i 30 sekunder til ett minutt. Dehydrer gjennom 90% alkohol, deretter 95% alkohol, og absolutt alkohol i 0, 5 til to minutter hver. Etter dehydrering, klar i xylen i 30 sekunder.Etter montering analyserer du H&E-fargingen ved hjelp av et brightfield fluorescensmikroskop. De røde blodlegemene som frigjøres fra blodårene, som er komponenter i CMHs, vises i rød-oransje under H&E farging. CmH-er på overflaten kan oppdages ved grov observasjon som angitt av de røde pilene.Evans blå flekker avslører synlig rød fluorescens der Evans blå molekyler lekket fra en skadet blod-hjernebarriere. H&E farging viser røde blodlegemer funnet utenfor kapillærene, og prøyssisk farging avslører ferric ion poeng avledet fra lysis av røde blodlegemer. Mens du prøver denne prosedyren, er det viktig å huske at dosen av LPS for å indusere cerebral mikroblødning er større enn den som brukes i Parkinsons sykdom eller schizofreni modell.Derfor bør miljøet av dyr holdes rent for å redusere dødeligheten. Etter denne prosedyren kan andre metoder som elektronmikroskopi, magnetisk resonansavbildning og immunofluorescent imaging utføres for å bestemme skaden på ytre struktur av blod-hjernebarrieren i cerebral mikroblødning, distribusjon av cerebral mikroblødning i hjerneparenchyma in vivo, samt glialcelleaktivering.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dual Elektrofysiologiske Opptak av Synaptically-fremkalt Astroglial og Neuronal Responses i akutt hippocampus Slices

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

Quantification of Cerebral Vascular Architecture using Two-photon Microscopy in a Mouse Model of HIV-induced Neuroinflammation

Kvantifisering av Cerebral Vascular Architecture ved hjelp av to-foton mikroskopi i en musemodell for HIV-indusert nevroinflammasjon

Human Immunodeficiency Virus 1 (HIV-1) infection frequently results in HIV-1 Associated Neurocognitive Disorders (HAND), and is characterized by a chronic ...

Rat Model of Widespread Cerebral Cortical Demyelination Induced by an Intracerebral Injection of Pro-Inflammatory Cytokines

Rottemodell av utbredt cerebral kortikale demyelinering indusert av en intracerebral injeksjon av proinflammatoriske cytokiner

Multiple sclerosis (MS) is the most common immune-mediated disease of the central nervous system (CNS) and progressively leads to physical disability and ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Effekter av Blast-indusert Biografiske filmer på trykksatt gnager midt Cerebral arterier

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation

Etablering av akutt pontinfarkt hos rotter ved elektrisk stimulering

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided ...

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Laserindusert hjerneskade i motorcortex av rotter

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Detrusor Underactivity Model in Rats by Conus Medullaris Transection

Detrusor Underactivity Model in Rats av Conus Medullaris Transection

The goal of the presented protocol was to establish a detrusor underactivity (DU) model in the rat through conus medullaris transection. Laminectomy was ...

Modeling Neonatal Intraventricular Hemorrhage Through Intraventricular Injection of Hemoglobin

Modellering av neonatal intraventrikulær blødning gjennom intraventrikulær injeksjon av hemoglobin

Neonatal intraventricular hemorrhage (IVH) is a common consequence of premature birth and leads to brain injury, posthemorrhagic hydrocephalus (PHH), and ...