Name: sub-acute cerebral microhemorrhages induced by lipopolysaccharide injection in rats
Uploaded: 2018-10-17T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats at JoVE.com

Vi tackar lärare Jian Feng Lei och kollegor från huvudstaden medicinska universitet för vägledning under MRI. Vi tackar också Jing Zeng från Institutionen för neurologi, folkets andra sjukhus i Yichang att ge teknisk support.

Alla metoderna som beskrivs här har godkänts av djur vård och användning kommittén (ACUC) av den PLA armén General Hospital.
1. material
<ol><li>Beredning av LPS injektion<ol>
<li>Tillsätt 25 mL destillerat vatten till 25 mg av LPS pulver härrör från S. typhimurium till en slutlig koncentration av 1 mg/mL. Lagra injektionen i ett sterilt rör vid 4 ° C. Varning: LPS är giftiga.</li>
		<li>Bered en 2% EB i normala 0,9% koksaltlösning att hålla EB injektion vid arbeta...

<ol>
	<li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+inflammation-induced+cerebral+microbleeds.">A murine model of inflammation-induced cerebral microbleeds.</a> J Neuroinflammation. 13 (1), 218 (2016).</li><li>Vernooij, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+risk+factors+of+cerebral+microbleeds+the+Rotterdam+Scan+Study.">Prevalence and risk factors of cerebral microbleeds the Rotterdam Scan Study.</a> Neurology. 70 (14), 1208-1214 (2009).</li><li>Pettersen, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbleed+topography,+leukoaraiosis,+and+cognition+in+probable+Alzheimer+disease+from+the+Sunnybrook+dementia+study.">Microbleed topography, leukoaraiosis, and cognition in probable Alzheimer disease from the Sunnybrook dementia study.</a> Archives of Neurology. 65 (6), 790-795 (2008).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+microbleeds+and+neuropsychiatric+symptoms+in+an+elderly+Asian+cohort.">Cerebral microbleeds and neuropsychiatric symptoms in an elderly Asian cohort.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 88 (1), 7-11 (2017).</li><li>Mcauley, G., Schrag, M., Barnes, S., Obenaus, A., Dickson, A., Kirsch, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+iron+quantification+in+collagenase-induced+microbleeds+in+rat+brain.">In vivo iron quantification in collagenase-induced microbleeds in rat brain.</a> Magnetic Resonance in Medicine. 67 (3), 711-717 (2012).</li><li>Reuter, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+cerebral+microbleeds+in+the+APP23-transgenic+mouse+model+of+cerebral+amyloid+angiopathy-a+9.4+tesla+MRI+study.">Development of cerebral microbleeds in the APP23-transgenic mouse model of cerebral amyloid angiopathy-a 9.4 tesla MRI study.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 8 (8), 170 (2016).</li><li>Scott, L. L., Downing, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+neonatal+exposure+to+BMAA+in+a+rat+model+produces+neuropathology+consistent+with+neurodegenerative+diseases.">A single neonatal exposure to BMAA in a rat model produces neuropathology consistent with neurodegenerative diseases.</a> Toxins. 10 (1), E22 (2018).</li><li>Toth, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+exacerbates+hypertension-induced+cerebral+microhemorrhages+in+mice:+role+of+resveratrol+treatment+in+vasoprotection.">Aging exacerbates hypertension-induced cerebral microhemorrhages in mice: role of resveratrol treatment in vasoprotection.</a> Aging Cell. 14 (3), 400-408 (2015).</li><li>Liu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+H&amp;E+and+Prussian+blue+staining+in+a+mouse+model+of+cerebral+microbleeds.">Comparative analysis of H&amp;E and Prussian blue staining in a mouse model of cerebral microbleeds.</a> Journal of Histochemistry &amp; Cytochemistry. 62 (11), 767-773 (2014).</li><li>Zeng, J., Zh&#224;o, H., Liu, Z., Zhang, W., Huang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipopolysaccharide+induces+subacute+cerebral+microhemorrhages+with+involvement+of+Nitric+Oxide+Synthase+in+rats.">Lipopolysaccharide induces subacute cerebral microhemorrhages with involvement of Nitric Oxide Synthase in rats.</a> Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 27 (7), 1905-1913 (2018).</li><li>Greenberg, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+microbleeds:+A+guide+to+detection+and+interpretation.">Cerebral microbleeds: A guide to detection and interpretation.</a> Lancet Neurology. 8 (2), 165-174 (2009).</li><li>Hoffmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Field+MRI+reveals+a+drastic+increase+of+hypoxia-induced+microhemorrhages+upon+tissue+reoxygenation+in+the+mouse+brain+with+strong+predominance+in+the+olfactory+bulb.">High-Field MRI reveals a drastic increase of hypoxia-induced microhemorrhages upon tissue reoxygenation in the mouse brain with strong predominance in the olfactory bulb.</a> Plos One. 11 (2), e0148441 (2016).</li><li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+phosphodiesterase+3A+modulation+on+murine+cerebral+microhemorrhages.">Effects of phosphodiesterase 3A modulation on murine cerebral microhemorrhages.</a> Journal of Neuroinflammation. 14 (1), 114 (2017).</li><li>Sumbria, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+exacerbates+development+of+cerebral+microbleeds+in+a+mouse+model.">Aging exacerbates development of cerebral microbleeds in a mouse model.</a> Journal of Neuroinflammation. 15 (1), 69 (2018).</li><li>Mello, B. S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+influences+in+behavior+and+brain+inflammatory+and+oxidative+alterations+in+mice+submitted+to+lipopolysaccharide-induced+inflammatory+model+of+depression.">Sex influences in behavior and brain inflammatory and oxidative alterations in mice submitted to lipopolysaccharide-induced inflammatory model of depression.</a> Journal of Neuroimmunol. 320, 133-142 (2018).</li><li>Souza, D. F. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+astroglial+markers+in+a+maternal+immune+activation+model+of+schizophrenia+in+Wistar+rats+are+dependent+on+sex.">Changes in astroglial markers in a maternal immune activation model of schizophrenia in Wistar rats are dependent on sex.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 9 (489), (2015).</li><li>Dutta, G., Zhang, P., Liu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Lipopolysaccharide+Parkinson's+disease+animal+model:+mechanistic+studies+and+drug+discovery.">The Lipopolysaccharide Parkinson's disease animal model: mechanistic studies and drug discovery.</a> Fundamental &amp; Clinical Pharmacology. 22 (5), 453-464 (2008).</li><li>El-Sayed, N. S., Bayan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Possible+role+of+resveratrol+targeting+estradiol+and+neprilysin+pathways+in+lipopolysaccharide+model+of+Alzheimer+disease.">Possible role of resveratrol targeting estradiol and neprilysin pathways in lipopolysaccharide model of Alzheimer disease.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 822 (822), 107-118 (2015).</li><li>Combrinck, M. I., Perry, V. H., Cunningham, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+infection+evokes+exaggerated+sickness+behaviour+in+pre-clinical+murine+prion+disease.">Peripheral infection evokes exaggerated sickness behaviour in pre-clinical murine prion disease.</a> Neuroscience. 112 (1), 7-11 (2002).</li><li>Pantoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+small+vessel+disease:+from+pathogenesis+and+clinical+characteristics+to+therapeutic+challenges.">Cerebral small vessel disease: from pathogenesis and clinical characteristics to therapeutic challenges.</a> Lancet Neurology. 9 (7), 689-701 (2010).</li><li>Rosand, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+clustering+of+hemorrhages+in+probable+cerebral+amyloid+angiopathy.">Spatial clustering of hemorrhages in probable cerebral amyloid angiopathy.</a> Annals of Neurology. 58 (3), 459-462 (2005).</li><li>Robinson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microstructural+and+microglial+changes+after+repetitive+mild+traumatic+brain+injury+in+mice.">Microstructural and microglial changes after repetitive mild traumatic brain injury in mice.</a> Journal of Neuroscience Research. 95 (4), 1025-1035 (2017).</li><li>Kraft, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypercholesterolemia+induced+cerebral+small+vessel+disease.">Hypercholesterolemia induced cerebral small vessel disease.</a> Plos One. 12 (8), e0182822 (2017).</li><li>Schreiber, S., Bueche, C. Z., Garz, C., Baun, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+brain+barrier+breakdown+as+the+starting+point+of+cerebral+small+vessel+disease?+-+New+insights+from+a+rat+model.">Blood brain barrier breakdown as the starting point of cerebral small vessel disease? - New insights from a rat model.</a> Experimental &amp; Translational Stroke Medicine. 5 (1), 4 (2013).</li></ol>

Forskningsstudier om CMHs har ökat under de senaste åren. Mekanismen av CMHs förblir dock oklart, vilket fick forskarna att upprätta djurmodeller som simulerar denna speciella tillstånd. Till exempel Hoffmann o.a. utvecklat en hypoxi-inducerad CMHs mus-modell som visar att CMHs orsakas av hypoxi och störningar av cerebrovaskulära självregleringen12. Reuter m.fl. 5 etablerade en CMHs modell i APP23-transgena möss, som visade att cerebral amyloid an...

Klassiskt cerebrala microhemorrhages (CMHs) avser små perivaskulär insättningar av blod nedbrytningsprodukter såsom hemosiderin från röda blodkroppar i hjärnan1. Enligt studien Skanna Rotterdam hittades CMHs i nästan 17,8 procent av personer i åldrarna 60 – 69 år och 38,3% i de över 80 år2. Prevalensen av CMHs hos äldre är relativt hög, och en korrelation mellan ansamling av CMHs och kognitiva och neuropsykiatriska dysfunktion har varit etablerade3,4. Flera djurmodeller av CMHs har nyligen rapporterats, inklusive gnagare modeller induceras av typ IV kollagenas stereotaxic injektion5, APP transgena6, β-N-methylamino-L-alanin exponering7och hypertoni8, med CMHs induceras av systemisk inflammation som en av de mest väl accepterade val. Fisher et al. 9 används först LPS härrör från Salmonella typhimurium för att utveckla en akut CMHs musmodell. Därefter redovisas samma grupp utvecklingen av en subakut CMHs musmodell med samma strategi2.
LPS är ansedd som en standardiserad inflammatoriskt stimulus via intraperitoneal injektion. Tidigare studier har bekräftat att LPS injektion kan orsaka neuroinflammation vilket återspeglas av stora mängder mikroglia och Astrocyten aktivering i djur modeller2,10. Dessutom varit en positiv korrelation mellan aktivering av neuroinflammation aktivering och antalet CMHs etablerade2,10. Baserat på dessa tidigare studier, uppmanades vi att utveckla en CMHs råtta modell av intraperitoneal injektion av LPS.
Framsteg inom detektering tekniker har resulterat i en ökning av antalet forskning utredningar på CMHs. Mest allmänt erkända metoder för att upptäcka CMHs inkluderar påvisande av röda blodkroppar av hematoxylin och eosin (han) färgning, järnklorid järn upptäckt av berlinerblått färgning9, upptäckt av Evans blå (EB) nedfall av immunofluorescens Imaging och 7,0 Tesla magnetkamera-känslighet vägt imaging (MRI-SWI)10. Föreliggande studie syftar till att utveckla en metod för screening för CMHs.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>LPS</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L-2630</td>
			<td>for inflammation induction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EB</td>
			<td>Sigma-aldrich</td>
			<td>E2129</td>
			<td>for EB leakage detection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI dying solution</td>
			<td>Servicbio</td>
			<td>G1012</td>
			<td>count medium for IF</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perl&#8217;s Prussian staining</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G1424</td>
			<td>Kit for Prussian staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HE staining</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G1120</td>
			<td>Kit for HE staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chloral hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>47335U</td>
			<td>For anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phosphate buffer saline (PBS)</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1022</td>
			<td>a kind of buffer solution commonly used in experiment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% saline solution</td>
			<td>Hainan DonglianChangfu Pharmaceutical Co., Ltd., China</td>
			<td></td>
			<td>solution for perfusion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20% sucrose solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G2461</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30% sucrose solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>G2460</td>
			<td>a kind of solution commonly used for fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vet ointment</td>
			<td>Solcoseryl eye gel, Bacel, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td>for rat&#39;s eyes protection</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sub-acute cerebral microhemorrhages induced by lipopolysaccharide injection in rats

Cerebrala microhemorrhages (CMHs) är vanliga hos äldre patienter och är korrelerade till olika neuropsykiatriska störningar. Etiologin till CMHs är komplex, och neuroinflammation är ofta observeras som en samtidig förekomst. Här, vi beskriver en subakut CMHs råtta modell induceras av lipopolysackarid (LPS) injektion, samt en metod för att upptäcka CMHs. systemisk LPS injektion är relativt enkelt, ekonomiskt och kostnadseffektivt. En stor fördel med LPS injektion är dess stabilitet att framkalla inflammation. CMHs orsakas av LPS injektion kunde ha upptäckts av brutto observation, hematoxylin och eosin (han) färgning, Perl's Prussian färgning, Evans blå (EB) dubbel-märkning och magnetisk resonanstomografi-känslighet vägt bildteknik (MRI-SWI). Slutligen diskuteras också andra metoder för att utveckla CMHs djurmodeller, inklusive deras fördelar eller nackdelar, i denna rapport.

CMHs kan upptäckas med olika metoder. De mest väl accepterade metoderna inkluderar följande: (1) brutto observation och bedömning av surface CMHs (visas i figur 1, övre panelen); (2) han färgning för påvisande av röda blodkroppar (visas i figur 2A, övre panelen) eller Prussian färgning upptäcka ferric järn härrör från Lys av röda blodkroppar (figur 2A, nedre panelen); (3) EB fördubb...

Watch this Scientific Journal Video about Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats at JoVE.com

Sub-acute Cerebral Microhemorrhages Induced by Lipopolysaccharide Injection in Rats

Vi presenterar ett protokoll för att inducera och upptäcka CMHs orsakas av LPS injektion hos Sprague-Dawley-råttor, som kan utnyttjas i framtiden forskning utredningar på patogenesen av CMHs.

Subakut Cerebral Microhemorrhages induceras av lipopolysackarid injektion hos råttor

Cerebral microhemorrhages (CMHs) are common in aged patients and are correlated to various neuropsychiatric disorders. The etiology of CMHs is complex, ...

Denna metod kan hjälpa till att besvara viktiga frågor i cerebral mikro-blödning fält såsom etiologi, distribution, och upptäckt av cerebral mikro-blödning och så vidare. Den största fördelen med denna teknik är att LPS injektioner stabilt framkalla inflammation. Dessutom lps injektion är ganska enkel, ekonomisk, och kostnadseffektiv.Även om denna metod kan ge insikt i hjärnblödning induktion, det kan också tillämpas på andra hjärnsjukdomar såsom depression, schizofreni, Parkinsons sjukdom, Alzheimers sjukdom, och prion sjukdom. Administrera LPS vid en dos av ett milligram per kilo kroppsvikt till 10 veckor gamla manliga Sprague Dawley råttor genom intraperitoneal injektion, sedan tillbaka varje råtta till hemmet buren. Upprepa LPS-injektionen efter sex timmar och 16 timmar.Observera att injicera SD råttor med LPS vid en dos av ett milligram per kilogram kan resultera i en 5%dödlighet. Dödligheten skulle kunna öka ytterligare hos yngre eller äldre råttor eller dräktiga honråttor. Returnera råttorna till sina burar efter LPS-injektion, och ge ad libitum tillgång till mat och dryck.Under terminal anestesi, utföra en fem till åtta-millimeters djup hjärtpunktion på varje råtta. Punkteringspunkten bör vara fem millimeter till vänster marginal av bröstbenet vid tredje och fjärde interkosala utrymmet. Håll nålen på plats och byt ut det tomma röret mot ett rör som innehåller Evans blått.Vänta tills blodåterhämtning observerats, och injicera sedan Evans blå vid en dos av 0,2 milliliter per 100 gram kroppsvikt i vänster hjärtkammare. Håll råttan i ryggläge i 10 minuter om du bedömer Evans blå läckage genom blod- /hjärnbarriären genom immunofluorescensavbildning. Utför hjärtperfusioner med iskall 200 till 300 milliliter av 0,9%saltlösning för att rensa cerebral vasculature och hjärnor.Byt till iskall 4%paraformaldehyd för fixering. Sedan, efter att ha isolerat hjärnan, fördjupa den i 20%sackaros i PBS i minst sex timmar eller tills hjärnan sjunker till botten av röret. Ändra lösningen till 30%sackaros och fixa den i ytterligare sex timmar.Slutligen, förbereda 10-millimeters tjock hjärnvävnad sektioner med hjälp av en kryostat. Tvätta objektglasen med PBS tre gånger i fem minuter vardera, sedan inkubera diabilder med 4, 6'diamidino-2-fenylindol eller DAPI-lösning i 15 minuter vid rumstemperatur. Efter tvättning av objektglasen i PBS som tidigare monterar du objektglasen med PBS-glycerollösning.Ta bilder på fluorescensmikroskop. EB nedfall indikeras med röd fluorescens, kärnor anges med blå fluorescens. Påbörja H&E-färgningen genom att tvätta rutschbanorna i destillerat vatten.Sänk sedan ner i hematoxylinlösning i åtta minuter. Alternativt, för Perl preussisk blå färgning, fläck i reaktionslösning med lika delar blandning av ferrocyanid och saltsyra i 10 minuter. Efter färgning, tvätta i rinnande kranvatten i fem minuter.Differentiera i 1%syra alkohol i 30 sekunder. Efter tvättning i rinnande kranvatten i en minut, fläck i 0,2%ammoniakvatten eller mättad litiumkarbonatlösning i 30 sekunder till en minut. Därefter tvätta i rinnande kranvatten i fem minuter.Motfläckning med eosinlösning i 30 sekunder till en minut. Torka genom 90% alkohol, sedan 95% alkohol, och absolut alkohol för 0,5 till två minuter vardera. Efter uttorkning, klart i xylen i 30 sekunder.Efter montering, analysera H & E färgning med hjälp av ett ljusfält fluorescens mikroskop. De röda blodkropparna som frigörs från blodkärl, som är komponenter i CMH: erna, visas i röd-orange under H & E färgning. Yt-CMHs kan detekteras med bruttoobservation som indikeras av de röda pilarna.Evans blå färgning avslöjar synlig röd fluorescens där Evans blå molekyler läckte ut från en skadad blod - hjärnbarriär. H&E-färgning visar röda blodkroppar som finns utanför kapillärerna, och preussiska färgning avslöjar ferric jonpunkter härrör från lys av röda blodkroppar. Samtidigt försöker detta förfarande, Det är viktigt att komma ihåg att dosen av LPS att inducera cerebral mikro-blödning är större än den som används vid Parkinsons sjukdom eller schizofreni modell.Därför bör djurens miljö hållas ren för att minska dödligheten. Efter detta förfarande, andra metoder som elektronmikroskopi, magnetic resonance imaging och immunofluorescent imaging kunde utföras för att fastställa skador på yttre strukturen av blod - hjärnbarriären i cerebral mikro-blödning, fördelning av cerebral mikro-blödningar i hjärnan parenkym i vivo, samt glia cell aktivering.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Fokal cerebral ischemi modellen genom endovaskulär suture Ocklusion av Mellanöstern Cerebral artär i Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

Ett förfarande för att studera de Footshock-Induced Återinför av kokain söker i laboratorieråttor

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dubbla Elektrofysiologiska Inspelningar av synaptiskt-framkallade astrogliala och neuronala svar i akut hippocampus skivor

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

Quantification of Cerebral Vascular Architecture using Two-photon Microscopy in a Mouse Model of HIV-induced Neuroinflammation

Kvantifiering av cerebral vaskulär Architecture med hjälp av två foton mikroskopi i en musmodell av HIV-inducerad Neuroinflammation

Human Immunodeficiency Virus 1 (HIV-1) infection frequently results in HIV-1 Associated Neurocognitive Disorders (HAND), and is characterized by a chronic ...

Rat Model of Widespread Cerebral Cortical Demyelination Induced by an Intracerebral Injection of Pro-Inflammatory Cytokines

Råtta modell av utbredd cerebrala när demyelination framkallas av en intrakraniell injektion av proinflammatoriska cytokiner

Multiple sclerosis (MS) is the most common immune-mediated disease of the central nervous system (CNS) and progressively leads to physical disability and ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Effekter av Blast-inducerad Neurotrauma på trycksatt gnagare mellersta cerebrala artärer

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation

Inrättande av akut pontinska infarkt hos råttor genom elektrisk stimulering

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided ...

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Laser-inducerad hjärnskada i motor cortex av råttor

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Detrusor Underactivity Model in Rats by Conus Medullaris Transection

Detrusor underaktivitetsmodell hos råttor av Conus medullaris transektion

The goal of the presented protocol was to establish a detrusor underactivity (DU) model in the rat through conus medullaris transection. Laminectomy was ...

Modeling Neonatal Intraventricular Hemorrhage Through Intraventricular Injection of Hemoglobin

Modellering av neonatal intraventrikulär blödning genom intraventrikulär injektion av hemoglobin

Neonatal intraventricular hemorrhage (IVH) is a common consequence of premature birth and leads to brain injury, posthemorrhagic hydrocephalus (PHH), and ...