Name: automation of a positron-emission tomography (pet) radiotracer synthesis protocol for clinical production
Uploaded: 2018-10-26T14:00:00
Duration: 10 min 20 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Automation of a Positron-emission Tomography PET Radiotracer Synthesis Protocol for Clinical Production at JoVE.com

Эта работа была поддержана в части фонда UCLA от пожертвования, сделанные Ральф и Марджори Крамп UCLA Крамп института для молекулярной визуализации и Национальный институт рака (R44 CA216539).

<ol>
	<li>Phelps, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positron+emission+tomography+provides+molecular+imaging+of+biological+processes.">Positron emission tomography provides molecular imaging of biological processes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 97 (16), 9226-9233 (2000).</li><li>Kitson, S., Cuccurullo, V., Ciarmiello, A., Salvo, D., Mansi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Applications+of+Positron+Emission+Tomography+(PET)+Imaging+in+Medicine:+Oncology,+Brain+Diseases+and+Cardiology.">Clinical Applications of Positron Emission Tomography (PET) Imaging in Medicine: Oncology, Brain Diseases and Cardiology.</a> Current Radiopharmaceuticalse. 2 (4), 224-253 (2009).</li><li>Sengupta, D., Pratx, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+metabolic+heterogeneity+in+cancer.">Imaging metabolic heterogeneity in cancer.</a> Molecular Cancer. 15, 4 (2016).</li><li>Rabinovich, B. A., Radu, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Adoptive+Cell+Transfer+Based+Cancer+Immunotherapy.">Imaging Adoptive Cell Transfer Based Cancer Immunotherapy.</a> Current Pharmaceutical Biotechnology. 11 (6), 672-684 (2010).</li><li>Matthews, P. M., Rabiner, E. A., Passchier, J., Gunn, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positron+emission+tomography+molecular+imaging+for+drug+development.">Positron emission tomography molecular imaging for drug development.</a> British Journal of Clinical Pharmacology. 73 (2), 175-186 (2012).</li><li>Hargreaves, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+Molecular+Imaging+in+Drug+Discovery+and+Development.">The Role of Molecular Imaging in Drug Discovery and Development.</a> Clinical Pharmacology &amp; Therapeutics. 83 (2), 349-353 (2008).</li><li>Keng, P. Y., Esterby, M., van Dam, R. M., Hsieh, C. -. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+Technologies+for+Decentralized+Production+of+PET+Tracers.">Emerging Technologies for Decentralized Production of PET Tracers.</a> Positron Emission Tomography - Current Clinical and Research Aspects. , 153-182 (2012).</li><li>Lazari, M., Irribarren, J., Zhang, S., van Dam, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+temperatures+and+pressures+during+short+radiochemical+reactions.">Understanding temperatures and pressures during short radiochemical reactions.</a> Applied Radiation and Isotopes. , 82-91 (2016).</li><li>Lazari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ELIXYS+-+a+fully+automated,+three-reactor+high-pressure+radiosynthesizer+for+development+and+routine+production+of+diverse+PET+tracers.">ELIXYS - a fully automated, three-reactor high-pressure radiosynthesizer for development and routine production of diverse PET tracers.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging (EJNMMI) Research. 3 (1), 52 (2013).</li><li>Claggett, S. B., Quinn, K., Lazari, M., Esterby, J., Esterby, M., van Dam, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+paradigm+for+programming+and+controlling+automated+radiosynthesizer.">A new paradigm for programming and controlling automated radiosynthesizer.</a> Journal of Nuclear Medicine. 53 (suppl. 1), 1471-1471 (2012).</li><li>Claggett, S. B., Quinn, K. M., Lazari, M., Moore, M. D., van Dam, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+programming+and+control+of+automated+radiosynthesizers+through+unit+operations.">Simplified programming and control of automated radiosynthesizers through unit operations.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging (EJNMMI) Research. 3, 53 (2013).</li><li>Lazari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fully+Automated+Production+of+Diverse+18F-Labeled+PET+Tracers+on+the+ELIXYS+Multireactor+Radiosynthesizer+Without+Hardware+Modification.">Fully Automated Production of Diverse 18F-Labeled PET Tracers on the ELIXYS Multireactor Radiosynthesizer Without Hardware Modification.</a> Journal of Nuclear Medicine Technology. 42 (3), 203-210 (2014).</li><li>Lazari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fully-automated+synthesis+of+16&#946;-18F-fluoro-5&#945;-dihydrotestosterone+(FDHT)+on+the+ELIXYS+radiosynthesizer.">Fully-automated synthesis of 16&#946;-18F-fluoro-5&#945;-dihydrotestosterone (FDHT) on the ELIXYS radiosynthesizer.</a> Applied Radiation and Isotopes. 103, 9-14 (2015).</li><li>Collins, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+diverse+PET+probes+with+limited+resources:+24+18F-labeled+compounds+prepared+with+a+single+radiosynthesizer.">Production of diverse PET probes with limited resources: 24 18F-labeled compounds prepared with a single radiosynthesizer.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 114 (43), 11309-11314 (2017).</li><li>Drake, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enzymatic+Radiofluorination+of+Biomolecules:+Development+and+Automation+of+Second+Generation+Prosthetic+on+ELIXYS+Radiosynthesizer.">Enzymatic Radiofluorination of Biomolecules: Development and Automation of Second Generation Prosthetic on ELIXYS Radiosynthesizer.</a> Journal of Nuclear Medicine. 58 (supplement 1), 1 (2017).</li><li>Gobbi, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Three+Novel+Radiotracers+for+Imaging+Aggregated+Tau+in+Alzheimer's+Disease+with+Positron+Emission+Tomography.">Identification of Three Novel Radiotracers for Imaging Aggregated Tau in Alzheimer's Disease with Positron Emission Tomography.</a> Journal of Medicinal Chemistry. 60 (17), 7350-7370 (2017).</li><li>Ippisch, R., Maraglia, B., Sutcliffe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+production+of+[18F]-F-Py-peptides.">Automated production of [18F]-F-Py-peptides.</a> Journal of Nuclear Medicine. 57, 275 (2016).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AMG+580:+A+Novel+Small+Molecule+Phosphodiesterase+10A+(PDE10A)+Positron+Emission+Tomography+Tracer.">AMG 580: A Novel Small Molecule Phosphodiesterase 10A (PDE10A) Positron Emission Tomography Tracer.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 352 (2), 327-337 (2015).</li><li>Waldmann, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Automated+Multidose+Synthesis+of+the+Potentiometric+PET+Probe+4-[18F]Fluorobenzyl-Triphenylphosphonium+([18F]FBnTP).">An Automated Multidose Synthesis of the Potentiometric PET Probe 4-[18F]Fluorobenzyl-Triphenylphosphonium ([18F]FBnTP).</a> Molecular Imaging and Biology. 20 (2), 205-212 (2018).</li><li>Ravert, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+synthesis+of+the+radiolabeled+prostate-specific+membrane+antigen+inhibitor,+[18F]DCFPyL.">An improved synthesis of the radiolabeled prostate-specific membrane antigen inhibitor, [18F]DCFPyL.</a> Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 59 (11), 439-450 (2016).</li><li>Betthauser, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+radiosynthesis+and+purification+of+[18F]THK-5351,+a+PET+ligand+for+neurofibrillary+tau.">Characterization of the radiosynthesis and purification of [18F]THK-5351, a PET ligand for neurofibrillary tau.</a> Applied Radiation and Isotopes. 130, 230-237 (2017).</li><li>Shu, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+PET+probes+specific+for+deoxycytidine+kinase.">Novel PET probes specific for deoxycytidine kinase.</a> Journal of Nuclear Medicine. 51 (7), 1092-1098 (2010).</li><li>Kim, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[18F]CFA+as+a+clinically+translatable+probe+for+PET+imaging+of+deoxycytidine+kinase+activity.">[18F]CFA as a clinically translatable probe for PET imaging of deoxycytidine kinase activity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 113 (15), 4027-4032 (2016).</li><li>Barrio, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Biodistribution+and+Radiation+Dosimetry+of+18F-Clofarabine,+a+PET+Probe+Targeting+the+Deoxyribonucleoside+Salvage+Pathway.">Human Biodistribution and Radiation Dosimetry of 18F-Clofarabine, a PET Probe Targeting the Deoxyribonucleoside Salvage Pathway.</a> Journal of Nuclear Medicine. 58 (3), 374-378 (2017).</li></ol>

Регенты университета Калифорнии лицензированные технологии Софи, которая была изобретена Джеффри Коллинз и Майкл р. ван Дам и взяли справедливости в Софи в рамках лицензирования транзакции. Кроме того Майкл р. ван Дам — основатель и консультант Софи. Условия этого соглашения, рассмотрели и утвердили в университете Калифорнии, Лос-Анджелес в соответствии со своей политикой конфликта интересов. Эрик Schopf и Кристофер Дрейк являются работниками и акционерами Софи.

Этот протокол определяет основные шаги, которые должны быть приняты при автоматизации ручной синтеза протокол для достижения производства клинической класс трассирующими формулировки. Весь цикл разработки, включая контроль качества развития, подтверждается радиоиндикаторных [18F] CFA (для изображения ДВК активности). Особое внимание уделялось изменения автоматизированного синтеза для обеспечения трассировщик пригодность для клинического использования. Синтез влечет за собой основные процессы активации [18F] фтор, radiofluorination прекурсоров молекулы, промежуточный патрон очистки, удаления защиты группы и полу препаративные ВЭЖХ очищения и разработки для инъекций. Эти основные процессы включают в себя Стандартный репертуар, который является достаточным для синтеза подавляющего большинства Трейсеры 18F-меченых животных.
При проектировании синтеза, выбор реагентов и их качества имеет особое значение для клинического использования. Обеспечение правильного программирования и надлежащего соединения, выполняя макет синтеза (только растворителей) необходимо устранить непредвиденные ошибки, когда синтез проводится с радиоактивностью. Последующих синтеза оптимизации (растворители, томов, суммы, температуры, времени реакции и условия очистки) зависят от конкретных PET tracer в развитии. В ходе этих экспериментов особое внимание следует светил на химических и радиохимических чистоты конечного продукта, который может быть достигнут, поскольку они должны отвечать строгим требованиям для клинического использования. Синтез, который надежно производит чистый продукт ниже, но достаточной активности урожайности обычно предпочтительнее более высокоурожайные процесс, который имеет риск потерпеть спорадически. После того, как синтез должным образом оптимизированы, окончательный процесс должен пройти проверочные тесты (нормативным требованием) для обеспечения клинического пригодности. Проверяемое синтеза метод может затем использоваться для производства ПЭТ трассировщик для клинического использования. Когда обобщения трассирующими PET согласно одобренного метода, стандартные оперативные процедуры следует тщательно. Для обеспечения соответствия, программное обеспечение запрограммирован иметь оператор подтвердить завершение ключевых шагов через предварительно выполнения контрольного списка после нажатия на Запуск для запуска синтеза. В то время как система будет выполнять синтеза в автоматическом режиме, очистка шаг требует ручного вмешательства. Оператор должен, таким образом, пристально наблюдать хроматографического экрана во время выполнения очистки ВЭЖХ и вручную вводить в режиме реального времени, когда для запуска и остановки сбора часть продукта.
В рамках нашей автоматизации и оптимизации усилий для синтеза CFA [18F] мы упорядочили полу препаративный метод ВЭЖХ очищения продукт смеси с помощью инъекционные жидкостной системы, состоящей из раствора ацетата аммония и EtOH ; Наш предыдущий метод требуется дополнительный шаг для обмена растворителя после очистки16. Последующие разработки процесса, таким образом, только необходимо уменьшить содержание EtOH собираемой фракции разрешенные уровни и обеспечить ее isotonicity, оба из которых может быть достигнуто путем разбавления. На этапе разработки проводилось с использованием второй программы, состоящей из одной операции группы разработки позволяет переменной тома дополнений растворов NaCl очищенный продукт фракция через разработку модуля учета для переменной объем полученной после очистки ВЭЖХ. Если объем доли собранного продукта был установлен вместо быть постоянным, операция блок разработки могут быть включены в программу основных синтеза, избегая необходимости независимой программой. Альтернативный подход к избежать ручного вмешательства будет использовать полную функциональность модуля разработки (например, разбавить очищенный трассировщик с водой, ловушки на картридж твердофазный извлечения C18, мыть, элюировать с фиксированным объемом EtOH и наконец, разбавить его с фиксированным объемом физиологического раствора).
Техника, представленные здесь для автоматизации и проверка синтез протокол для клинического использования предназначен быть довольно общий характер. Посредством выбора radiosynthesizer (ELIXYS) широкий спектр синтезы можно автоматизирован и проверены. Это включает в себя комплекс 3-горшок синтезов, или синтезы с участием высоких температур летучих растворителей. Оптимизация синтез может достигаться путем изменения параметров, программного обеспечения. Синтезатор имеет возможности контролировать влияние изменений, таких как позиционирование реакции сосудов для удаления образцов для радио TLC или радио ВЭЖХ анализа. Однако, без модификации системы, система в настоящее время не позволяют для обработки тома очень низкой реагента (~ 5-20 мкл), промежуточный продукт перегонки или обработки [18F] Альф, 68га, или другие radiometals. Если ручной синтеза чтобы автоматизировать содержит такие шаги, и они не могут быть обойдены, автоматизации и проверки с другой radiosynthesizer платформа может быть целесообразной.
Хотя эта работа была сосредоточена на разработке протокола для автоматизированного производства [18F] CFA для клинического применения, синтез многих других Трейсеры PET может быть автоматизированы в пригодном для клинического производства, следуя той же логике и методы. После метода, представленные здесь, мы адаптировали Автоматизированный синтез 9-(4-[18F] фтор - 3-[гидроксиметил] бутил) гуанин ([18F] FHBG) и протестированы для клинического использования. Пользователь установил протоколы могут быть загружены и загружаются из SOFIE зонд сети, веб-портал для синтеза программы обмена и сопроводительной документации среди различных radiopharmacy сайты27. Это может избежать дублирования усилий в рамках сообщества и способствовать многоцентровые клинические исследования с участием PET изображений.

Расширяющийся спектр биологических показателей может динамически визуализируется в жизни предметы через молекулярной визуализации модальности ПС. PET обеспечивает в vivo анализы конкретных биологических, биохимических и фармакологические процессов с помощью конкретных radiotracers (молекул, помечены позитронно излучающих радионуклидов), которые вводят в теме до визуализации1. Более широкое использование ПЭТ изучить широкий спектр этих процессов в фундаментальной науке и клинических исследований2,3,4и открытие, развития и клинического использования наркотиков в стационар5, 6, ведет к растущим спросом на различных radiotracers7,8. Чтобы избежать радиационного облучения в radiochemist и обеспечить воспроизводимое производство этих недолго Трейсеры, они обычно производятся с использованием автоматизированных radiosynthesizer, находившегося в ячейке «горячие». Последние radiosynthesizers использовать одноразовые кассета/комплект архитектуру для упрощения задачи соблюдения клинико класса производства также обеспечивая гибкость подготовить несколько типов radiotracers просто путем замены кассет9 . Однако в ранних клинических стадиях, есть обычно не коммерчески доступные кассеты/комплекты для выполнения автоматизированных radiosynthesis; Следовательно PET наркотиков производственные мощности борьба для настройки системы для реализации возможностей производства трассирующими цГМФ класса в подходящие сроки и по разумной цене. Таким образом были разработаны radiosynthesizers, которые сочетают кассеты/комплект архитектуры с возможностями для содействия развитию и оптимизации трассировщиков.
ELIXYS FLEX/CHEM (ELIXYS) является примером гибких основанных на кассету radiosynthesizer с широким реагента, растворитель и реакции температуры совместимости10. Он имеет три реакции сосудов и использует механизм роботов для динамически настроить путь жидкости как предусмотрено Протоколом любого конкретного синтез11. Синтезатор программное обеспечение позволяет создавать синтез программ (последовательностей) для различных трассировщиков, перетаскивая и снижается Операций , таких как Ловушка изотоп, Элюировать изотоп, Добавить реагента, реагировать, и выпарить12. Каждая единица операция имеет целый ряд программируемые параметры, доступные для оператора, например Длительность, температурыили инертного газа вождение давление (давление). Понимание характера каждой операции подразделение, ручной синтез могут быть легко переведены на последовательность операций и затем быть изменены во время оптимизации протокола13. В сочетании с модулем ELIXYS чистая/формы комплексной системы можно также выполнить автоматизированной очистки и формулирование PET tracer. С помощью этой radiosynthesizer, мы уже ранее сообщали автоматизированного синтеза 24 различных 18F-меченых Трейсеры и протезно группы11,14,,1516, как а также автоматизированного ферментативного radiofluorination биомолекул17, просто изменив реагентов и не конфигурация системы. Другие показали автоматизированного синтеза [18F] RO6958948 для визуализации Тау нейрофибриллярных связок18, Автоматизированный синтез протезно группы [18F] F-Py-TFP с последующей маркировки пептиды19 и автоматизированный синтез [18F] AM580 для визуализации фосфодиэстеразы 10А (PDE10A)20. Кроме того, несколько групп показали производства Трейсеры подходит для клинического применения, включая 4-[18F] Fluorobenzyl-triphenylphosphonium ([18F] FBnTP) для визуализации митохондриальной мембраны потенциал21, [ 18 DCFPyL F] для изображений мембраны простат специфического антигена (КСМК)22, и [18F] THK-5351 для изображений Тау23.
В этой статье, мы используем наш опыт с [18F] CFA, чтобы проиллюстрировать, как ручной radiosynthetic процедура может быть прямо и быстро переведен на автоматизированный синтез подходит для обычного производства после руководящих cGMP. Трассировщик [18F] CFA была разработана для отображения активности ДВК. Ручной radiosynthesis [18F] CFA первоначально был охарактеризован Шу и др. 24 как процедура, с помощью двух реакции сосудов, промежуточные кремнезема картридж очистки и окончательный ВЭЖХ шаг (см. Дополнительные материалы, раздел 1 для подробной информации). Последние в пробирке и доклинические исследования показали исключительные специфика этого трассировщика в ДВК, и первый в человека исследования показали благоприятные накопление25. Есть непосредственный интерес в более широких масштабах клинические исследования для подтверждения чувствительность [18F] CFA PET вариации в ДВК деятельности и долгосрочного интереса к потенциальным клинического применения этого трассировщика26. Это может быть полезным biomarker для терапии, которые вызывают активации Т-клеток, вызвать повреждение ДНК или полагаться на ДВК зависимых нуклеозидный аналог prodrugs. В частности, [18F] CFA может включить стратификация больных для потенциальной реакции на лечение с Clofarabine. [18F] CFA может также содействовать изучению и развитию ДВК ингибиторов, которые продвигаются к клинических испытаний. Поскольку этот трассировщик синтезирована традиционно вручную, продвижения все эти исследования требует надежной, Автоматизированный синтез [18F] CFA подходит для клинического использования.
Хотя мы сообщалось ранее автоматизированного синтеза [18F] CFA для доклинических исследований16, этот протокол основан на эти усилия и описывает дополнительные изменения, необходимые для клинического производства этого трассировщика, включая интеграцию полностью автоматизированной очистки и разработке, протокол проверки и контроля качества. Общие процедуры, описанные здесь, не ограничиваются разработки автоматизированных и клинически подходит синтез [18F] CFA, но может быть обобщена простым способом разработки автоматизированного синтеза подходит для клинического использования других radiotracers помечены фтора-18.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ELIXYS FLEX/CHEM</td>
			<td>Sofie (Culver City, CA, USA)</td>
			<td>1010001</td>
			<td>Radiosynthesizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Radiosynthesizer cassette</td>
			<td>Sofie (Culver City, CA, USA)</td>
			<td>1861030400</td>
			<td>Cassette for ELIXYS FLEX/CHEM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELIXYS PURE/FORM</td>
			<td>Sofie (Culver City, CA, USA)</td>
			<td>1510001</td>
			<td>Radiosynthesizer purification module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[O-18]H2O</td>
			<td>IBA RadioPharma Solutions (Reston, VA, USA)</td>
			<td>IBA.SP.065</td>
			<td>&#62;90% isotopic purity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[F-18]fluoride in [O-18]H2O</td>
			<td>UCLA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Produced in a cyclotron (RDS-112; Siemens; Knoxville, TN, USA) by the (p,n) reaction of [O-18]H2O. Bombardment at 11 MeV using a 1 mL tantalum target with havar foil.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deionized water</td>
			<td>UCLA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Purified to 18 M&#937; and passed through 0.1 &#181;m filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile (MeCN)</td>
			<td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td>
			<td>271004</td>
			<td>Anhydrous, 99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol (EtOH)</td>
			<td>Decon Laboratories, Inc. (King of Prussia, PA, USA)</td>
			<td>2701</td>
			<td>Anhydrous, 200 proof</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide (NaOH) solution</td>
			<td>Merck (Burlington, MA, USA)</td>
			<td>1.09137.1000</td>
			<td>1M solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid (HCl) solution</td>
			<td>Fisher Chemical (Hampton, NH, USA)</td>
			<td>SA48-500</td>
			<td>1M solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate (EtAc)</td>
			<td>Fisher Chemical (Hampton, NH, USA)</td>
			<td>E195SK-4</td>
			<td>HPLC grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Fisher Chemical (Hampton, NH, USA)</td>
			<td>S-640-500</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium acetate</td>
			<td>Fisher Chemical (Hampton, NH, USA)</td>
			<td>A639-500</td>
			<td>HPLC grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium carbonate (K2CO3)</td>
			<td>Fisher Chemical (Hampton, NH, USA)</td>
			<td>P-208-500</td>
			<td>Certified ACS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CFA precursor</td>
			<td>CalChem Synthesis (San Diego, CA, USA)</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryptand 222 (K222; Kryptofix 2.2.2)</td>
			<td>ABX Advanced Biochemical Compounds (Radeberg, Germany)</td>
			<td>800.1000</td>
			<td>&#62;99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl) solution (saline)</td>
			<td>Hospira (Lake Forest, IL, USA)</td>
			<td>0409-4888-02</td>
			<td>0.9%, for injection, USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica cartridge</td>
			<td>Waters (Milford, MA, USA)</td>
			<td>WAT051900</td>
			<td>Sep-pak Classic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quaternary methylammonium (QMA) cartridge</td>
			<td>Waters (Milford, MA, USA)</td>
			<td>WAT023525</td>
			<td>Sep-pak Light Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile syringe filter (0.22 &#181;m)</td>
			<td>Millipore Sigma (Burlington, MA, USA)</td>
			<td>SLGSV255F</td>
			<td>Millex-GV</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass V-vial (5 mL)</td>
			<td>Wheaton (Millville, NJ)</td>
			<td>W986259NG</td>
			<td>Used for reaction vessels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Septa</td>
			<td>Wheaton (Millville, NJ)</td>
			<td>224100-072</td>
			<td>Used for reagent vials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crimp cap</td>
			<td>Wheaton (Millville, NJ)</td>
			<td>224177-01</td>
			<td>Used for reagent vials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amber serum vial (2 mL)</td>
			<td>Voigt (Lawrence, KS, USA)</td>
			<td>62413P-2</td>
			<td>Used for reagent vials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stir bar</td>
			<td>Fisher Scientific (Hampton, NH, USA)</td>
			<td>14-513-65</td>
			<td>Used for reaction vessels</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automation of a positron-emission tomography (pet) radiotracer synthesis protocol for clinical production

Разработка новых Трейсеры томография (ПЭТ) позитронно выбросов позволяет исследователей и клиницистов изображения все более широкий спектр биологических задач и процессов. Однако все большее число различных трассировщиков создает проблемы для их производства на radiopharmacies. Хотя исторически это был практический посвятить настроен пользовательский radiosynthesizer и горячей камере для повторного производства каждого индивидуального трассирующими, он становится необходимым изменить этот рабочий процесс. Последние коммерческие radiosynthesizers, основанные на одноразовые кассеты/комплекты для каждого трассировочного упростить производство нескольких Трейсеры с одним набором оборудования, устраняя потребность в пользовательские трассировки конкретного изменения. Кроме того некоторые из этих radiosynthesizers позволяют оператору развивать и оптимизировать свои собственные протоколы синтеза в дополнение к покупке-продаже комплектов. В этом протоколе мы описать общую процедуру как ручной синтез трассирующими нового Питомца может быть автоматизирован на одном из этих radiosynthesizers и проверяются для производства Трейсеры клинико класса. В качестве примера, мы используем ELIXYS radiosynthesizer, гибкой основе кассеты радиохимии инструмент, который может поддерживать PET трассирующими усилия в области развития, а также обычные клинические зонд производства на той же системе, производить [18F] ([Clofarabine 18 F] CFA), ПЭТ трассировщик для измерения в vivo активности фермента Дезоксицитидин киназы (ДВК). Перевод ручной синтез предполагает разрушение синтетической протокол в основных радиохимии процессы, которые затем преобразуются в интуитивно химии «группы операций» синтезатора программное обеспечение поддерживает. Эти операции могут затем быстро быть преобразован в программе автоматизированного синтеза собирая их с помощью drag-and-drop интерфейс. После основных испытаний, синтеза и очистки процедура может потребоваться оптимизация для достижения желаемой доходности и чистоты. После того, как достичь желаемой производительности, проверки синтеза проводится для определения его пригодности для производства радиоиндикаторных для клинического использования.

Метод для автоматизации производства [18F] CFA была разработана и три проверки пакетов были синтезированы. Синтеза, очистки и формулирование [18F] CFA была достигнута в 90 ± 5 мин (n = 3) и не исправлены распада радиохимической урожайность составила 8,0 ± 1,4% (n = 3). Доходность деятельности трех запусков были 3.24 GBq, 2,83 GBq и 3.12 ГБК, начиная от 34.3 ГБК, 41,8 GBq и 41.1 ГБк, соответственно. Полученные [18F] CFA формулировки прошел все тесты контроля качества (Таблица 1). В настоящее время автоматизированный протокол используется для производства клинико класс [18F] CFA для поддержки клинических испытаний.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Контроль качества данных</td>
			<td rowspan="2">Проверка запуска 1</td>
			<td rowspan="2">Проверка запуска 2</td>
			<td rowspan="2">Проверка запуска 3</td>
		</tr>
<tr>
<td>[требование для «Pass»]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Внешний вид</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
		</tr>
<tr>
<td>[прозрачный, бесцветный, свободный твердых частиц]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Концентрация радиоактивности в EOS</td>
			<td rowspan="2">213 MBq/мл</td>
			<td rowspan="2">210 MBq/мл</td>
			<td rowspan="2">180 MBq/мл</td>
		</tr>
<tr>
<td>[≤ 740 EOS @ MBq/мл]</td>
		</tr>
<tr>
<td>pH</td>
			<td rowspan="2">6</td>
			<td rowspan="2">5.8</td>
			<td rowspan="2">6</td>
		</tr>
<tr>
<td>[5,0 – 8,0]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Период полураспада</td>
			<td rowspan="2">115 мин</td>
			<td rowspan="2">108 мин</td>
			<td rowspan="2">112 мин</td>
		</tr>
<tr>
<td>[105-115 мин.]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Радиохимический чистоты</td>
			<td rowspan="2">99%</td>
			<td rowspan="2">99%</td>
			<td rowspan="2">99%</td>
		</tr>
<tr>
<td>[> 95%]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Радиохимический идентичности время относительного сохранения (РРТ)</td>
			<td rowspan="2">1.01</td>
			<td rowspan="2">1.01</td>
			<td rowspan="2">1.01</td>
		</tr>
<tr>
<td>[1.00 < RRT < 1.10]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Молярная активность</td>
			<td rowspan="2">314 ГБК/мкмоль</td>
			<td rowspan="2">> 370 ГБК/мкмоль</td>
			<td rowspan="2">> 370 ГБК/мкмоль</td>
		</tr>
<tr>
<td>[≥ 3,7 мкмоль/ГБк]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Масса общая перевозчика в конечный продукт</td>
			<td rowspan="2">3.1 мкг</td>
			<td rowspan="2">< 1 мкг</td>
			<td rowspan="2">< 1 мкг</td>
		</tr>
<tr>
<td>[≤ 50 мкг/доза]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Масса всего примесей в конечном продукте</td>
			<td rowspan="2">ND</td>
			<td rowspan="2">ND</td>
			<td rowspan="2">ND</td>
		</tr>
<tr>
<td>[≤ 1 мкг / доза]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Максимальный допустимый инъекции объем на основе общего перевозчика массового ≤ 50 мкг/доза и всего примеси массовой ≤ 1 мкг/доза</td>
			<td>Весь пакет</td>
			<td>Весь пакет</td>
			<td>Весь пакет</td>
		</tr>
<tr>
<td>Остаточное содержание EtOH компанией GC</td>
			<td rowspan="2">8,90%</td>
			<td rowspan="2">9,50%</td>
			<td rowspan="2">9.60%</td>
		</tr>
<tr>
<td>[≤ 10%]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Остаточное содержание EtOAc компанией GC</td>
			<td rowspan="2">< 1 ppm</td>
			<td rowspan="2">< 1 ppm</td>
			<td rowspan="2">< 1 ppm</td>
		</tr>
<tr>
<td>[≤ 5000 ppm]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Остаточное содержание MeCN компанией GC</td>
			<td rowspan="2">< 1 ppm</td>
			<td rowspan="2">< 1 ppm</td>
			<td rowspan="2">< 1 ppm</td>
		</tr>
<tr>
<td>[≤ 410 ppm]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Остаточная K222 цвета пятно испытания</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
		</tr>
<tr>
<td>[< 50 мкг/мл]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Проверка целостности мембраны фильтра</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
		</tr>
<tr>
<td>[пузырь точки ≥ 50 psi]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Бактериальные эндотоксины</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
		</tr>
<tr>
<td>[≤ 175 ЕС/партии]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Radionuclidic чистоты методом спектроскопии гамма</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
		</tr>
<tr>
<td>[> 99,5%]</td>
		</tr>
<tr>
<td>Бесплодие</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
			<td rowspan="2">Перевал</td>
		</tr>
<tr>
<td>[требованиям USP < 71 >]</td>
		</tr>
</tbody></table>Таблица 1: контроль качества (КК) тестовых данных резюме три проверки пакетов. ПСЗ = конец бомбардировка; EOS = конец синтеза; ND = не обнаружено.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig1.jpg"> Рисунок 1: схема radiosynthesis [18F] CFA. MMT = Monomethoxytrityl. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig1large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig2.jpg"> Рисунок 2: перевод ручной синтеза на автоматизированной последовательности операций. (A) Эта группа дает обзор высокого уровня шагов в ручной синтез [18F] CFA. (B) Эта группа показывает основные процедуры, необходимые для выполнения каждого из шагов, высокого уровня. (C) Radiosynthesizer конкретных операций используется для выполнения основных процедур отображаются в виде карты. Каждая единица операция имеет свой собственный набор значений параметров (показано как подчеркнутый) которые настраиваются с помощью программного обеспечения. Обозначение «R1» и «R2» свидетельствуют о реакции сосудов #1 и #2, соответственно. Реагентов, соответствующий реагент номера указаны на рисунке 4. Серия операций сохраняется как последовательность и выполняется программное обеспечение для выполнения автоматизированного синтеза. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig2large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig3.jpg"> Рис: скриншот интерфейса программного обеспечения radiosynthesizer (ELIXYS) для создания программы синтеза. Унитарные операции помещаются в нужном порядке в Диафильм с помощью drag-and-drop интерфейс. На этом снимке экрана реагируют операции блок выбран, и его значения редактируемых параметров приведены в основной части экрана. В этом примере фторирование реакция будет осуществляться в реакционный сосуд #1 (герметичный) при 120 ° С за 10 мин с активного перемешивания. Судно будет охлаждаться до 35 ° C, после того, как прошло время реакции. Подробная информация о значения параметров, которые могут быть запрограммированы для других операций приводится в Дополнительном материале, раздел 3. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig3large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig4.jpg"> Рис: скриншот экрана конфигурации реагент. Для последовательности синтеза CFA [18F] все реагенты загружаются в одноразовые кассета #1, который отображается выделенное в области Выбор компонентов. Для синтеза CFA [18F], описанные здесь элюента 1,0 мг K2CO3 + 5.0 мг K222 в 0,4 мл, H2O/0.5 мл MeCN, предшественник — 6 мг CFA прекурсоров в 0,6 мл MeCN и ВЭЖХ Mobile фаза 85:15 v Ацетат аммония/v 25 мм: этанол. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig4large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig5.jpg"> Рисунок 5: Установка Radiosynthesizer для синтеза [18F] CFA. (A) это схематическое изображение кассету жидкости путей, соединения к картриджи и подключение для передачи окончательного сырой продукт из модуля radiosynthesis в модуле очистки/разработки. (Оба модуля контролируются с помощью одного интерфейса компьютера и программного обеспечения). (B) это фотография radiosynthesizer внутри горячей камере после подготовки для синтеза CFA [18F]. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig5large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig6.jpg"> Рис: скриншот интерфейса управления модуля очистки/разработки. Этот экран осуществляется оператором вручную управлять ВЭЖХ и разработке подсистемы во время установки синтеза. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig6large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig7.jpg"> Рисунок 7: экран предварительного хода контрольный. Оператор вводит серийный номер кассет, установленные в системе и должны проверить каждый элемент для обеспечения системы должным образом настроены и подготовлены для синтеза. Помимо этих разделов, оператор также предлагается ввести имя и описание синтеза запуска (раздел 1) и много номеров для всех замотают (раздел 2) и попросил проверить все реактор видео каналы работают правильно (раздел 6). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig7large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig8.jpg"> Рисунок 8: Скриншот radiosynthesizer программного обеспечения во время выполнения последовательности синтеза CFA [18F]. Программное обеспечение отображает порядок операций в районе Диафильм. Завершенные операции greyed вне и выделены в белом, текущей операции будет выделена серым цветом и предстоящих операций указаны в темно-серый. Центр области экрана показывает статус активного юнита операции, включая выполняется какой подкоманды, а также текущее состояние системы (реактор видео-каналы и данные датчиков). Это особенно реагируют блок операция является реакция фторирования. В районе Temp текущую температуру реактора отображается рядом с целевой (программируемый) температуры. Ниже, области деятельности отображает значения датчика радиации из трех датчиков, связанных с шагом реакции. Наконец видео-канал на левой стороне показывает живой вид реактора флакона. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig8large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58428/58428fig9.jpg"> Рисунок 9: Скриншот radiosynthesizer пользовательского интерфейса во время выполнения операции очистки подразделение во время синтеза [18F] CFA. УФ детектор и детектор излучения выходы модуля очистки/разработки отображаются на графе Центральной в режиме реального времени. Дополнительные отзывы от детекторов и ВЭЖХ насос показаны на правой стороне экрана. Оператор собирает пик продукта, временно выбора продукта , когда пик начинает появляться и переключение отходов , после того, как видел полный пик. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58428/58428fig9large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Automation of a Positron-emission Tomography PET Radiotracer Synthesis Protocol for Clinical Production at JoVE.com

Automation of a Positron-emission Tomography PET Radiotracer Synthesis Protocol for Clinical Production

Позитронно выбросов томография (ПЭТ) изображений сайты, которые участвуют в нескольких ранних клинических исследованиях испытаний нужен надёжный и универсальный радиоиндикаторных производственных возможностей. С помощью радиоиндикаторных [18F] Clofarabine в качестве примера, мы иллюстрируют способ автоматизировать синтез радиоиндикаторных, используя гибкие, основанные на кассету radiosynthesizer и проверить синтеза для клинического использования.

Автоматизация протокол синтеза радиоиндикаторных позитронно выбросов томография (ПЭТ) для клинических производства

The development of new positron-emission tomography (PET) tracers is enabling researchers and clinicians to image an increasingly wide array of biological ...

Этот метод может помочь исследователям в области биологии, радиохимии и ядерной медицины, автоматизировать производство недолговечных позитронно-эмиссионных томографов для фундаментальных исследований и клинического применения. Основными преимуществами автоматизации радиохимического синтеза являются стандартизация процесса синтеза, возможность повторного производства, повышение надежности синтеза и защита химика от радиационного облучения. С помощью одного гибкого радиосинтезайзера, несколько различных позитронно-эмиссионной томографии, или ПЭТ трассировщики, пригодные для клинического использования, могут быть произведены в рамках одной горячей клетки.Для обеспечения успеха автоматизированного синтеза, очень важно, чтобы принять большую осторожность во время процедуры установки, прежде чем радионуклид вводится в радиосинтезатор. Для создания автоматизированной программы синтеза для ПЭТ трассировщик фтора-18 помечены клофарабин, или CFA, предшественник сначала реагирует с сушеным активированным фтором-18, чтобы сформировать промежуточные следуют удаления защитных групп для формирования окончательного соединения. Используйте бумагу и ручку, чтобы разделить ручной синтез на шаги высокого уровня, а также шаги высокого уровня в дискретные основные требуемые процессы, а затем сопоставить каждый процесс на отдельные операции единицы, предоставляемые синтезаторным программным обеспечением.Используя интерфейс программирования radiosynthesizer, создайте пустую программу, нажав меню, последовательности и новую последовательность, чтобы запрограммировать каждую из идентифицированных операций единицы и их параметры в последовательности. Для испарения фтора в блоке операции три, перетащите операции испарения в пленолет зрения и войти в реактор используется, температура, продолжительность и желаемое давление потока азота. Для добавления прекурсоров в операции блока 8, перетащите операцию добавления к представлению пленополосы.Для реакции фторирования в блоке операции девять, перетащите операции реагирования на вид пленописи и настроить их параметры. Для настройки автоматизированного синтеза, питание на радиосинтезатор, и заботясь о том, что падение трубки каждой новой одноразовой кассеты указывается прямо вниз. Установка кассет в реактор номер один и номер два позиции.После вставки реакционной сосудов с магнитными барами для перемешивания установите флаконы реагента в кассеты согласно диаграмме и установите пустой флакон восстановления воды кислорода-18 в положении W1 кассеты номер один. Подключите картриджи к кассете номер один. И кремнеземный картридж между кассетой номер один и номером два.Затем подключите выход кассеты номер два к жидкой хроматографии высокого давления или системе HPLC модуля очистки. После проверки того, что соединения кассетных труб соответствуют схеме, подтвердите, что ни одна кассета не висит в интерьере, где она может мешать движениям роботов. Подключите линию источника фтора-18 от циклотрона к линии ввода фтора-18 на кассете номер один.Чтобы уравночные очистки формулы подсистемы перед началом синтеза, выберите HPLC, чтобы войти в страницу управления модульом формулировки очистки. По умолчанию вкладка очистки уже выбрана. Установите скорость потока до пяти миллилитров в минуту при определенном составе растворителя.И установите положение столбца очистки. Включите насос HPLC в изократическом режиме, по крайней мере 10 минут и промыть линейку продуктов и все линии сбора фракций с мобильной фазы в течение одной минуты каждый. Затем используйте шприц, чтобы вручную промыть каждый образец петли HPLC и HPLC образец цикла передачи труб с 10 миллилитров мобильной фазы.Чтобы загрунтовыть подсистему формулировки, откройте вкладку формулировки страницы управления формулировкой очистки. Чтобы загромоть концентрированный хлорид натрия, откройте вкладку elute. Нажмите инициализировать для инициализации шприц насоса и обойтись без пяти миллилитров концентрированного хлорида натрия.Чтобы загрунтовать 0,9%соленый раствор, выберите reconstitute вкладку и обойтись без пяти миллилитров солевого раствора. Затем соедините линейку продуктов и конечных продуктов с передней части подсистемы очистки в Т-соединении. Подключите выход Т-соединения к предварительно собранной, вентилируемой, стерильной, пустой флакон с фильтрами и поместите флакон в защищенную свинью свинца.Затем поверните ручки крыла кассеты, чтобы обезопасить кассеты на месте. Удалите дьюар из инструмента. Освободите холодную ловушку и добавьте спирт в двойную, за которой последует медленное добавление сухого льда.Наконец, установите холодную ловушку и Dewar обратно в синтезатор и закрыть горячую дверь ячейки. Чтобы запустить программу синтеза, откройте вкладку последовательностей, выберите программу фтора-18 CFA и нажмите кнопку, запустите. Внимательно просмотрите каждый элемент в предварительном контрольном списке, проверяя каждый элемент по мере его завершения.Затем нажмите, продолжайте в программном обеспечении, чтобы подтвердить, что установка завершена и начать автоматизированный синтез. Прежде чем нажать продолжить, внимательно просмотрите настройки, чтобы убедиться, что все правильно подключены. После того, как радиоактивность доставляется в синтезатор, никаких дальнейших ручных манипуляций не возможно из-за радиационного поля в горячей клетке.Во время операции по захвату фтора-18, всплывающее окно появится, когда пришло время для доставки деятельности из циклотрона. Когда это произойдет, доставить фтор-18 из циклотрона и контролировать датчик радиации, чтобы подтвердить фтор был пойман в ловушку на картридже ЗМА. Нажмите продолжить автоматизированную программу и контролировать синтез в режиме реального времени с помощью визуальной обратной связи, датчик чтения и таймеры обратного отсчета.В блоке операции три, жидкость в реакции сосуда испаряется, чтобы высохнуть и активировать фтор F-18. Температура, оставшееся время и оставшийся уровень жидкости можно контролировать на интерфейсе. В восьми-единице флакон раствора-прекурсора подбирается и перемещается в погрузочное положение кассеты номер один.После чего содержимое доставляется на реакционной сосуд. Оставшееся время и уровень жидкости в реакционной сосуде можно контролировать на интерфейсе. В блоке операции девять, реакционной сосуд запечатан и нагревается для выполнения фторирования реакции.Температура и оставшееся время, а также живой видеострим содержимого реакционной сосуда можно контролировать на интерфейсе. В блоке работы 10, трубка погружения вставляется в сосуд реакции и содержимое передается через картридж кремнезема для очистки промежуточного. Оставшееся время, уровень оставшейся жидкости в реакционной сосуде и радиационный детектор, прилегающий к картриджу, можно контролировать на интерфейсе.Во время заключительного шага работы блока очистки, когда пик продукта начал появляться на детекторе излучения хроматограммы, выберите, продукт. После того, как пик радиационного детектора хроматограммы вернулся к исходной линии, выберите, отходы, чтобы отвлечь путь потока подсистемы HPLC в контейнер для отходов. Чтобы настроить программу разработки, в соответствии с вкладкой последовательности, откройте программу разработки фтора-18 CFA и запустите программу.Система разбавит собранную очищенную фракцию продукта в окончательном стерильном флаконе продукта через фильтр для стерилизации и разбавит хлоридом натрия и солевым раствором, чтобы обеспечить изотоничность формулировки. Чтобы получить конечный продукт, откройте горячую дверь ячейки, отсоединить иглы от флакона продукта и удалить сформулированный флакон продукта из горячей клетки. Затем, используя асептические процедуры, удалите образец для выполнения необходимого тестирования контроля качества.Чтобы выключить синтезатор, нажмите кнопку питания. Всплывающее окно будет указывать, когда может быть отключена питание системы. Затем закройте соответствующие клапаны для выключения сжатого воздуха и инертных поставок газа, что позволит остаточной радиоактивности в горячей клетке распадаться до безопасного уровня, прежде чем выполнять другой синтез.Полученные препараты фтора-18 CFA прошли все тесты на контроль качества. В этих репрезентативных проверки работает, синтез, очистка и формулировка были достигнуты в 110 минут в среднем и не-decay исправлены радиохимические выход был почти 8% При использовании этой процедуры для производства трассировщиков для клинического использования, необходимо создать письменные, стандартные операционные процедуры, которые должны быть тщательно соблюдены, чтобы убедиться, что не установка или подготовка шаги пропущены. Следуя этой общей процедуре, синтез многих других радиотракторов может быть легко автоматизирован, способствуя переходу к текущей, хорошей производственной практике, соответствующей производству для клинических испытаний на людях или клинической помощи.Не забывайте, что работа с радиоактивностью может быть опасной. Необходимо принять такие меры, как мониторинг воздействия, надлежащие процедуры защиты и безопасности. Позаботьтесь о том, чтобы всегда работать в тесном сотрудничестве с вашим сотрудником по радиационной безопасности.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Automation of a Positron-emission Tomography (PET) Radiotracer Synthesis Protocol for Clinical Production

Thin-layer Chromatographic (TLC) Separations and Bioassays of Plant Extracts to Identify Antimicrobial Compounds

Thin-layer Chromatographic TLC Separations and Bioassays of Plant Extracts to Identify Antimicrobial Compounds

Тонкослойная Хроматографическое (ТСХ) Разделение и Биоанализы растительных экстрактов для идентификации антимикробные соединения

A common screen for plant antimicrobial compounds consists of separating plant extracts by paper or thin-layer chromatography (PC or TLC), exposing the ...

A Direct, Early Stage Guanidinylation Protocol for the Synthesis of Complex Aminoguanidine-containing Natural Products

Прямой, Ранняя стадия Guanidinylation Протокол для синтеза сложных Аминогуанидин содержащих натуральных продуктов

The guanidine functional group, displayed most prominently in the amino acid arginine, one of the fundamental building blocks of life, is an important ...

Synthesis of Cd-free InP/ZnS Quantum Dots Suitable for Biomedical Applications

Синтез Cd-фри InP / ZnS квантовых точек Подходит для биомедицинских применений

Fluorescent nanocrystals, specifically quantum dots, have been a useful tool for many biomedical applications. For successful use in biological systems, ...

Protocol for the Synthesis of Ortho-trifluoromethoxylated Aniline Derivatives

Protocol for the Synthesis of Ortho-trifluoromethoxylated Aniline Derivatives

Протокол синтеза<em&gt; Орто</em&gt; -trifluoromethoxylated анилина

Molecules bearing trifluoromethoxy (OCF3) group often show desired pharmacological and biological properties. However, facile synthesis of ...

A Protocol for the Production of Gliadin-cyanoacrylate Nanoparticles for Hydrophilic Coating

Протокол для производства Глиадин-цианоакрилатных наночастицами для гидрофильного покрытия

This article presents a protocol for the production of protein-based nanoparticles that changes the hydrophobic surface to hydrophilic by a simple spray ...

Hydroquinone Based Synthesis of Gold Nanorods

Гидрохинон основе Синтез наностержней золота

Gold nanorods are an important kind of nanoparticles characterized by peculiar plasmonic properties. Despite their widespread use in nanotechnology, the ...

Synthesis of a Water-soluble Metal&#8211;Organic Complex Array

Synthesis of a Water-soluble MetalÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã…â€œOrganic Complex Array

Синтез растворимой в воде металлоорганические сложный комплекс

We demonstrate a method for the synthesis of a water-soluble multimetallic peptidic array containing a predetermined sequence of metal centers such as ...

Microfluidic-based Synthesis of Covalent Organic Frameworks (COFs): A Tool for Continuous Production of COF Fibers and Direct Printing on a Surface

Microfluidic-based Synthesis of Covalent Organic Frameworks COFs: A Tool for Continuous Production of COF Fibers and Direct Printing on a Surface

Микрофлюидный синтез ковалентных органических структур (COFs): инструмент для непрерывного производства COF-волокон и прямая печать на поверхности

Covalent Organic Frameworks (COFs) are a class of porous covalent materials which are frequently synthesized as unprocessable crystalline powders. The ...

Protocol for the Solid-phase Synthesis of Oligomers of RNA Containing a 2'-O-thiophenylmethyl Modification and Characterization via Circular Dichroism

Protocol for the Solid-phase Synthesis of Oligomers of RNA Containing a 2'-O-thiophenylmethyl Modification and Characterization via Circular Dichroism

Протокол твердофазного синтеза олигомеров РНК, содержащий 2&#39;-<em&gt; O</em&gt; -тиофенилметильная модификация и характеризация с помощью циркулярного дихроизма

Solid-phase synthesis has been used to obtain canonical and modified polymers of nucleic acids, specifically of DNA or RNA, which has made it a popular ...