Name: reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification (rt-lamp) assay for zika virus and housekeeping genes in urine, serum, and mosquito samples
Uploaded: 2018-09-14T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reverse Transcription-Loop-mediated Isothermal Amplification RT-LAMP Assay for Zika Virus and Housekeeping Genes in Urine, Serum, and Mosquito Samples at JoVE

이 작품은 모 린과 로널드 허쉬 가족 자선 기여 및 필드 신경 과학 연구소, 세인트 메리의 미시간의 의해 지원 되었다. Funders 연구 설계, 데이터 수집 및 분석, 결정 게시 또는 원고의 준비에 전혀 역할을 했다. 우리 또한 그들의 중요 한 검토의 원고에 대 한 박사 집 엔 Zwaans와 엘리야 드를 감사합니다.

여기에 설명 된 모든 메서드는 버몬트 건강의 기관 검토 위원회 (IRB)에 의해 승인 되었습니다. 모든 실험 관련 지침 및 규정에 따라 수행 했다.
주의: 잠재적으로 전염 하는 모든 자료는 개인 보호 장비의 사용을 포함 하는 Biosafety 수준 2 기준에 따라 처리 되어야 합니다. 에 어로 졸을 생산 있습니다 어떤 절차 biosafety 내각에서 수행 되어야 합니다. 또한, 라이브 모기 사용 적절 ...

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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+Virus.">Zika Virus.</a> New England Journal of Medicine. 374 (16), 1552-1563 (2016).</li><li>Francois, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Robustness+of+a+loop-mediated+isothermal+amplification+reaction+for+diagnostic+applications.">Robustness of a loop-mediated isothermal amplification reaction for diagnostic applications.</a> Federation of European Microbiological Societies Immunology and Medical Microbiology. 62 (1), 41-48 (2011).</li><li>Tomita, N., Mori, Y., Kanda, H., Notomi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loop-mediated+isothermal+amplification+(LAMP)+of+gene+sequences+and+simple+visual+detection+of+products.">Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) of gene sequences and simple visual detection of products.</a> Nature Protocols. 3 (5), 877-882 (2008).</li><li>Gandasegui, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Rapid-Heat+LAMPellet+Method:+A+Potential+Diagnostic+Method+for+Human+Urogenital+Schistosomiasis.">The Rapid-Heat LAMPellet Method: A Potential Diagnostic Method for Human Urogenital Schistosomiasis.</a> Public Library of Science Neglected Tropical Diseases. 9 (7), 0003963 (2015).</li><li>Barkway, C. 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ZIKV RT-램프 분석 결과 인간과 모기 샘플6을 사용 하 여이 종이 작품에 설명 된. 탐지의 한계는 약 1 게놈에 해당6, 증상 ZIKV 감염 환자의 일반적인 바이러스 부하 이기 때문에 10 충분 해야3  106 PFU/mL7. 또한,이 방법은 ZIKV 샘플 먼저 분리 RNA와 세포 배양에서 바이러스 증폭 없이 검색할 수 있습니다. 이 크게 시간, 비용, 및 ...

2015 년, Zika 바이러스 (ZIKV) 주목 저명한 글로벌 관심사의 전염 성 질환으로 임신 중에 감염 유산, 사 산, microcephaly, 뿐만 아니라 다른 선 천 성 신경 심각한 출생 결함에 연결 했다 때문에 출생 결함1. 드문 경우에, ZIKV Guillain-바레 증후군과 연결 되었습니다. ZIKV는 주로 Aedes 모기;로 전송 그러나, 그것은 또한 성적 접촉1통해 확산 하실 수 있습니다. ZIKV 감염 대부분의 사람에서 무 증상 또는 다른 arborviruses1의 감염의 증상과 겹치는 가벼운 감기 같은 증상으로 선물 한다, 그의 신속 하 고 비용 효율적인 검색을 위한 향상 된 방법 필요가 했다 사람 뿐만 아니라 현지 모기 인구를 화면에 ZIKV.
양이 많은 반전 녹음 방송 PCR (qRT-PCR)은 ZIKV 감지;에 대 한 신뢰성 분석 결과 그러나,이 기술은 고가의 특수 장비, 숙련 된 직원, 그리고 관심의 샘플에서 RNA 격리 해야합니다. 반전 녹음 방송 루프 중재 등온 증폭 (RT-램프)는만 가닥으로 thermophilic DNA 중 합 효소의 사용으로 인 한 부 화 온도 필요로 하는 PCR 기술에 따라 1 단계 핵 산 증폭 방법 변위 속성입니다. 이 thermocycler 니드 circumvents 고 분석 결과 완료 하는 데 필요한 시간을 줄입니다. RT-램프의 추가 장점 높은 특이성, 감도, 견고성 pH 수준 및 온도, 저항 많은 PCR 억제제2의 범위에 포함 됩니다. 그것은 상대적으로 저렴 한 비용 및 시 약은 실 온에서 안정. 이러한 특성을 감안할 때, RT-램프 배포할 수 있습니다 실험실에서 또는 분야에서. 등, 램프 반응 병원 체와 감염3,,45의 다른 종류의 범위를 검출 하기 위하여 개발 되었습니다. 이 문서에 설명 된 RT 램프 프로토콜의 목표는 인간의 혈 청 및 소변 샘플에도 RT 램프를 통해 30 분 이내 단일 감염 된 모기에서 RNA 격리 없이 ZIKV를 감지. 그것은 실험실 밖으로 신속 하 고 설정에서 작동 민감한, 신속한 진단 도구 qRT-PCR을 대체 하이 메서드를 사용할 수 있습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:901px;" width="902">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:249px;">Bst 2.0 WarmStart DNA polymerase</td>
			<td style="width:223px;">New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">M0537S</td>
			<td style="width:207px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isothermal Amplification Buffer&#160;</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">B0537S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">WarmStart RTx Reverse Transcriptase</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">M0380S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antarctic Thermolabile UDG</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">M0372S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MgSO4</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">B1003S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100mM dATP Solution</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">N0440S</td>
			<td>Deoxynucleotide Set N0446S</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100mM dCTP Solution</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">N0441S</td>
			<td>Deoxynucleotide Set N0446S</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100mM dTTP Solution</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">N0443S</td>
			<td>Deoxynucleotide Set N0446S</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100mM dGTP Solution</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td style="width:223px;">N0442S</td>
			<td>Deoxynucleotide Set N0446S</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100mM dUTP Solution</td>
			<td style="width:223px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:223px;">R0133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain</td>
			<td style="width:223px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:223px;">S7563</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nancy-520</td>
			<td style="width:223px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:223px;">01494</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Low DNA Mass Ladder</td>
			<td style="width:223px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:223px;">10-068-013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:249px;">Zika Postive Control</td>
			<td style="width:223px;">Robert Koch Institute, Germany</td>
			<td style="width:223px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:249px;">Agarose</td>
			<td style="width:223px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:223px;">BP1600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:249px;">BlueJuice Gel Loading Buffer</td>
			<td style="width:223px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:223px;">10816015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:249px;">Primers</td>
			<td style="width:223px;">Integrated DNA Technologies</td>
			<td style="width:223px;">Custom Oligo</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:249px;">Nuclease-Free Water</td>
			<td style="width:223px;">Ambion</td>
			<td style="width:223px;">AM9938</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:249px;">Urine Preservative</td>
			<td style="width:223px;">Norgen Biotek</td>
			<td style="width:223px;">18126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:249px;">ZIKV PCR Standard</td>
			<td>Robert Koch Institute</td>
			<td style="width:223px;">N/A</td>
			<td>Vero E6 cell supernatants</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">DENV2 New Guinea C Control</td>
			<td style="width:223px;">Connecticut Agricultural Experiment Station</td>
			<td style="width:223px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification (rt-lamp) assay for zika virus and housekeeping genes in urine, serum, and mosquito samples

그러나 Zika 바이러스 (ZIKV) 감염 성인 무 증상 일 수 있다,, 임신 중 감염 유산 및 심각한 신경 기형이 발생할 수 있습니다. 이 프로토콜의 목표 신속 하 게 모두 인간과 모기 샘플에서 ZIKV를 검색 하는 것입니다. ZIKV 검출에 대 한 현재 금 표준 이다 양이 많은 반전 녹음 방송 PCR (qRT-PCR); 반전 녹음 방송 루프 중재 등온 증폭 (RT-램프)은 보다 효율적이 고 저렴 한 비용 테스트 고가의 장비에 대 한 필요 없이 수 있습니다. 본이 연구에서는 실시간 램프 첫 샘플에서 RNA를 분리 하지 않고 ZIKV 검출 다양 한 생물 학적 샘플 30 분 이내에 사용 됩니다. 이 기술은 ZIKV를 사용 하 여 환자 소변 및 혈 청, 감염 및 감염 모기 샘플 시연입니다. 18S ribosomal ribonucleic 산과 말라 각각 인간과 모기 샘플에서 컨트롤로 사용 됩니다.

RT-램프 반응 3 가지 방법을 사용 하 여 분석할 수 있습니다. 첫째, 형광 핵 산 염료의 추가 함께 긍정적인 반응이 됩니다 노란색/녹색 색상에 부정적인 반응을 오렌지 육안으로 색상에 나타납니다. 둘째, RT 램프 반응 형광 핵 산 염료의 추가에 결과 형광 신호 샘플 UV 빛에 의해 흥분. 부정적인 반응을 소량 부정적인 컨트롤에 있을 수 있는 모든 배경 형광에 감지 형광 신호를...

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Reverse Transcription-Loop-mediated Isothermal Amplification RT-LAMP Assay for Zika Virus and Housekeeping Genes in Urine, Serum, and Mosquito Samples

반대로 Zika 바이러스 및 내부 관리 유전자 소변, 혈 청, 그리고 모기 샘플에 대 한 분석 결과 전사 루프 중재 하는 등온 증폭 (RT-램프)

이 프로토콜 Zika 바이러스 탐지 또는 반전 녹음 방송 루프 중재 등온 증폭 (RT-램프)에 의해 대상 인간의 소변 및 혈 청 샘플 또는 모기를 제어 하는 효율적이 고 저렴 한 비용 메서드를 제공 합니다. 이 메서드는 RNA 격리는 필요 하지 않습니다 하 고 30 분 이내 할 수 있습니다.

Infection with Zika virus (ZIKV) can be asymptomatic in adults, however, infection during pregnancy can lead to miscarriage and severe neurological birth ...

이 방법은 샘플에 Zika 바이러스가 포함되어 있는지 신속하게 확인할 수 있습니다. 이것은 임신 한 여성, 임신을 시도하는 커플, 또는 Zika 감염의 위험이있는 지역 모기 집단의 감시에 유용합니다. 이 기술의 주요 장점은 빠르고 쉽고 고가의 장비가 필요하지 않으며 RNA 격리 단계없이 수행 할 수 있다는 것입니다.임신 도중 감염은 유산, 사산 및 그밖 가혹한 선천적인, 신경학적 출생 결함에 연결되기 때문에 이 기술의 연루는 Zika 감염의 진단으로 확장합니다. 이 방법은 Zika에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만 바이러스 별 프라이머를 사용하여 뎅기열, 치쿤구냐 또는 웨스트 나일 바이러스와 같은 다른 전염병에도 적용 될 수 있습니다. 시작하려면 분자 등급 의 물에 있는 각 RT-LAMP 프라이머를 100 마이크로몰라의 최종 농도로 재구성합니다.용액이 균일한지 확인하기 위해 프라이머 솔루션을 간략하게 소용돌이시다. 프라이머 솔루션을 수집하기 위해 최대 속도로 약 5초 동안 원심분리기. 그런 다음 기술 프로토콜의 표 2에 설명된 대로 10x RT-LAMP 프라이머 믹스를 준비합니다.균질성을 보장하기 위해 잠시 소용돌이. 그리고 손실을 피하기 위해 최대 속도로 원심 분리기. 프리머를 섭씨 영하 20도까지 저장하여 사용 사이에 동결 해동 주기를 피하십시오.인간의 소변 샘플에 대 한, 신선한 소변을 사용 하 여, 냉동 소변 또는 방부제에 소변. 사용하기 전에 얼음에 얼어 붙은 샘플을 해동하십시오. 인간 혈청 샘플은 신선하거나 냉동되어야 하며 ZIKV 감염된 세포주에는 조건부 된 미디어 또는 세포 리스가 포함되어야합니다.마지막으로, Aedes aegypti 모기에 대 한, 전체 시체를 사용 하 여, 신선한 또는 냉동. 얼음 위에 얼어 붙은 모기 시체를 해동하십시오. PBS의 100 마이크로 리터에 개별 모기를 놓습니다.P10 파이펫 팁을 사용하여 모기를 10번 분쇄하고 균질화하여 조잡한 모기 용해를 만듭니다. 원유 리세스를 간단히 원심분리하여 이물질을 펠렛하고 상류 RT-LAMP 분석을 위해 상퍼를 사용합니다. 시작하려면 기술 프로토콜의 표 3에 의해 윤곽선으로 사용할 각 프라이머 세트에 대한 얼음에 RT-LAMP 마스터 믹스 반응을 준비합니다.각 샘플을 소용돌이가 잘 혼합되었는지 확인합니다. 그런 다음 볼륨 손실을 방지하기 위해 잠시 아래로 회전합니다. 각 반응에 대해 RT-LAMP 마스터의 파이펫 23.0 마이크로리터가 200 마이크로리터 PCR 튜브로 혼합됩니다.그런 다음 두 개의 마이크로리터를 추가하여 총 부피를 25.0 마이크로리터로 가져옵니다. 음의 대조를 위해 분자 등급의 물을 사용하고 양수 조절을 포함하십시오. 선택적으로, 기술의 프로토콜에 설명된 바와 같이 뎅기열 바이러스와 같은 관련 arbovirus의 특이성 제어 반응을 포함한다.열 블록, 수조 또는 열 순환기는 샘플을 섭씨 61도에서 30 분 동안 가열합니다. 그 후, 열을 10분 동안 섭씨 80도로 늘려 중합체를 비활성화합니다. 별도의 밀폐된 공간에서 RT-LAMP 분석을 수행합니다.TAE 완충에서 형광 핵산 염료를 1~10개 희석시 희석한다. 형광 핵산 염료 용액의 2개의 미소리터를 RT-LAMP 반응의 12개 미소리터에 추가합니다. 색상 변경의 존재를 찾아 서 시각적으로 RT-LAMP 반응을 평가합니다.선택적으로 카메라를 사용하여 흰색 배경에서 RT-LAMP 반응 사진을 찍습니다. 다음으로, 302 나노미터 UV 빛 아래에 샘플을 배치하여 형광에 의한 RT-LAMP 제품의 존재를 확인합니다. 카메라를 사용하여 결과 사진을 찍습니다.전기포고증을 수행하기 시작하려면 1x TAE 완충제에 2%아가로즈 젤을 부어 핵산 얼룩을 가비시화한다. 분자량을 비교하기 위해 첫 번째 차선에 DNA 사다리의 5 마이크로 리터를 추가합니다. 각 RT-LAMP 반응에 대해, DNA 로딩 염료의 두 마이크로 리터와 RT-LAMP 반응 혼합물의 13 마이크로 리터를 혼합.이 15 마이크로 리터 혼합물을 로드합니다. 90볼트에서 90분 간 또는 밴드가 분리될 때까지 젤을 실행합니다. 302 나노미터 UV 광이 있는 이미지입니다.완료되면 RT-LAMP 반응을 이중 밀봉 된 가방에 폐기하십시오. 이 연구에서는 RT-LAMP 반응을 분석하기 위해 세 가지 다른 방법을 활용합니다. 형광 핵산 염료 양성 반응을 사용할 때 긍정적 인 반응은 색으로 황색 - 녹색이되고 부정적인 반응은 주황색으로 나타납니다.이 염료는 또한 샘플이 UV 빛에 의해 흥분될 때 형광 신호를 초래합니다. 마지막으로, RT-LAMP 반응은 아가로즈 젤에서 소진될 수 있다. 긍정적 인 RT-LAMP 반응은 밴딩 패턴을 가지지만 부정적인 반응은 DNA 밴드가 없습니다.이러한 방법은 ZIKV RT-LAMP 반응의 특이성을 입증하기 위해 사용된다. ZIKV 분자 제어만이 양성 RT-LAMP 반응을 가한다. 더욱이, ZIKV는 알려진 ZIKV 감염을 가진 환자의 소변과 혈청 둘 다에서 검출되는 동안, ZIKV 감염 없이 무증상 통제 환자에서 볼 수 없습니다.샘플은 인간 18S rRNA를 위해 시험됩니다. 환자에서 채취한 샘플만이 18S rRNA에 대해 양성으로 보입니다. 모기 샘플은 ZIKV 또는 RT-LAMP 품질 관리 AEDAE를 위해 유사하게 테스트될 수 있습니다.ZIKV와 ZIKV에 감염된 모기에 대한 양성 분자 제어만이 ZIKV에 대해 양성으로 보입니다. 그러나 모든 모기는 RT-LAMP에 의해 AEDAE에 대한 긍정적이다. 일단 마스터되면, 제대로 수행되는 경우이 기술은 30 분 이내에 수행 할 수 있습니다.RT-LAMP 반응은 거짓 긍정 반응에 경향이 있음을 기억하는 것이 중요합니다. 예방 단계에는 반응에 열람실 우라실 DNA 글리코슬라아제 사용, 측면 워크플로우 사용, 별도의 공간에서 분석 수행, 노출 후 증폭 튜브가 열린 시간 단축 등이 포함된다. 이 절차에 따라 QPCR과 같은 다른 방법은 샘플에 존재하는 바이러스 또는 기타 표적의 사본 수와 같은 추가 질문에 대답하기 위해 수행 될 수 있습니다.이 비디오를 시청 한 후, 당신은 Zika 바이러스를 감지하기 위해 RT-LAMP를 사용하는 방법의 좋은 이해가 있어야합니다 인간의 소변과 혈청에 제어를 대상으로, 뿐만 아니라 모기. Zika 바이러스와 핵산 얼룩으로 일하는 것은 매우 위험할 수 있다는 것을 잊지 마십시오, 장갑을 착용하는 것과 같은 예방 조치는 항상이 절차를 수행하는 동안 취해야한다. 선천적인 이상Zika 바이러스 감염의 협회를 감안할 때, 임신한 여자, 임신을 시도하는, 또는 이 여자의 파트너는, Zika 바이러스에 그들의 실험실 노출을 현저하게 최소화해야 합니다.

Research

JoVE Journal

Genetics

Reverse Transcription-Loop-mediated Isothermal Amplification (RT-LAMP) Assay for Zika Virus and Housekeeping Genes in Urine, Serum, and Mosquito Samples

The Use of Induced Somatic Sector Analysis (ISSA) for Studying Genes and Promoters Involved in Wood Formation and Secondary Stem Development

The Use of Induced Somatic Sector Analysis ISSA for Studying Genes and Promoters Involved in Wood Formation and Secondary Stem Development

나무 형성 및 보조 스템 개발에 관여하는 유전자 및 발기인 유학을위한 유도 체세포 업종 분석 (ISSA)의 사용

Secondary stem growth in trees and associated wood formation are significant both from biological and commercial perspectives. However, relatively little ...

연구

유전학

Peptide-derived Method to Transport Genes and Proteins Across Cellular and Organellar Barriers in Plants

펩타이드 유래의 방법은 식물의 유전자와 단백질 세포 간 및 Organellar 장벽을 수송하는

The capacity to introduce exogenous proteins and express (or down-regulate) specific genes in plants provides a powerful tool for fundamental research as ...

Determination of the Optimal Chromosomal Location(s) for a DNA Element in Escherichia coli Using a Novel Transposon-mediated Approach

Determination of the Optimal Chromosomal Locations for a DNA Element in Escherichia coli Using a Novel Transposon-mediated Approach

소설 Transposon 중재 방식을 사용 하 여 대장균 의 DNA 요소에 대 한 최적의 염색체 위치 결정

The optimal chromosomal position(s) of a given DNA element was/were determined by transposon-mediated random insertion followed by fitness selection. In ...

Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) Protocol for Low-abundance Embryonic Samples

Chromatin Immunoprecipitation ChIP Protocol for Low-abundance Embryonic Samples

낮은 풍부 배아 샘플 chromatin Immunoprecipitation (칩) 프로토콜

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a widely-used technique for mapping the localization of post-translationally modified histones, histone variants, ...

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

높은 해상도 교 잡 형광 제자리에 초파리 태아와 Tyramide 신호 증폭을 사용 하 여 조직에서

In our efforts to determine the patterns of expression and subcellular localization of Drosophila RNAs on a genome-wide basis, and in a variety of ...

Transient Expression of Foreign Genes in Insect Cells (sf9) for Protein Functional Assay

Transient Expression of Foreign Genes in Insect Cells sf9 for Protein Functional Assay

과도 식의 외국 유전자 단백질 기능 분석 결과 대 한 곤충 세포 (sf9)

The transient gene expression system is one of the most important technologies for performing protein functional analysis in the baculovirus in vitro cell ...

Adapting 3' Rapid Amplification of CDNA Ends to Map Transcripts in Cancer

암에 성적표를 매핑할 CDNA의 급속 한 확대 끝 적응 3'

Maturation of eukaryotic mRNAs involves 3&#39; end formation, which involves the addition of a poly(A) tail. In order to map the 3&#39; end of a gene, the ...

Amplification of Near Full-length HIV-1 Proviruses for Next-Generation Sequencing

다음-세대 시퀀싱에 대 한 전체 길이 HIV-1 Proviruses 근처의 증폭

The Full-Length Individual Proviral Sequencing (FLIPS) assay is an efficient and high-throughput method designed to amplify and sequence single, near ...

Evaluation of a Universal Nested Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction for the Detection of Lyssaviruses

Lyssaviruses 검출을 위한 보편적 중첩 역방향 전사 중 합 효소 연쇄 반응의 평가

To detect rabies virus and other member species of the genus Lyssavirus within the family Rhabdoviridae, the pan-lyssavirus nested reverse transcription ...

An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells

종양 세포에서 MicroRNA 수준, 기능 및 관련 표적 유전자를 평가하기 위한 시험관 내 프로토콜

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory RNAs which are recognized to modulate numerous intracellular signaling pathways in several diseases including ...