Name: generation of cationic nanoliposomes for the efficient delivery of in vitro transcribed messenger rna
Uploaded: 2019-02-01T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Cationic Nanoliposomes for the Efficient Delivery of In Vitro Transcribed Messenger RNA at JoVE.com

1. generasjon av kationisk Nanoliposomes (figur 1)
<ol><li>Oppløse lipider DC-kolesterol (3β-[N-(N′,N′-dimethylaminoethane)-carbamoyl] kolesterol hydroklorid) og dop (dioleoyl phosphatidylethanolamine), som et pulver i kloroform å oppnå en siste konsentrasjon av 25 mg/mL. Merk: Oppbevar de oppløste lipider på 20 ° C.</li>
	<li>Arbeide med 25 mg/mL lagerløsning av både lipider. Mix 40 µL av oppløst DC-kolesterol og 80 µL av oppløst dop i en glass kolbe. Merk: Totalt l...

Presentert protokollen beskriver generasjonen av NLps med høy innkapsling virkningen for syntetisk endret mRNA og pålitelig transfection celler i vitro. Videre garanterer NLps utgivelsen av mRNA, som igjen oversettes til en funksjonell protein i cellene. I tillegg transfections ved hjelp av NLps kan utføres i vanlig celle medium, som resulterer i høy celle viabilities under transfection og sist opp til tre dager etter hva.
For å bruke mRNA som en terapeutisk, foretrekkes selvsten...

Bruk av modifisert mRNA for terapeutiske programmer har vist stort potensial i de siste par årene. I hjerte, provoserende og monogenetic sykdommer og utvikle vaksiner, er mRNA en lovende terapeutisk agent1.
Protein erstatning terapi med mRNA tilbyr flere fordeler sammenlignet med den klassiske genterapi, som er basert på DNA hva til målet celler2. Funksjonen mRNA starter direkte i stoffer. Men plasmider DNA (pDNA), en konstruksjon av double-strandet, rund kan DNA som inneholder en promoter region og gene serie koding terapeutiske protein3, også handlinger i stoffer det bare inkluderes i celler som går gjennom mitose ved transfection. Dette reduserer antall transfekterte celler i vevet1,4. Hva av vev med svak mitose aktivitet, for eksempel hjerte celler, er spesielt vanskelig5. I motsetning til pDNA oppstår hva og oversettelse av mRNA i mitotisk og ikke-mitotisk celler i vevet1,6. Viral integrering av DNA i vert genomet kan komme med mutagene effekter eller immunreaksjoner7,8, men etter hva av celler med en protein-koding mRNA, ønsket protein syntese de novo starter selvstendig9,10. Videre kan proteinsyntese justeres til pasientens behov gjennom personlige doser, uten å forstyrre genomet og risikere mutagene effekter11. Aktivering av immun potensialet i syntetisk genererte mRNA kunne reduseres dramatisk med pseudo uridine og 5-methylcytidine i stedet for uridine og cytidine12. Pseudo uridine endret mRNA har også vist seg å ha en økt biologiske stabilitet og en betydelig høyere translasjonsforskning kapasitet13.
For å kunne dra nytte av de lovende egenskapene av mRNA-basert behandling av klinisk bruk, er det viktig å lage en passende bil for transport av mRNA inn i cellen. Dette kjøretøyet skal bære giftfri egenskaper i vitro og vivo, beskytte mRNA mot nuclease-degradering og gi tilstrekkelig mobilnettet opptak for en langvarig tilgjengelighet og oversettelse av de mRNA14.
Blant alle mulige transportør typer i vivo stoffet levering, som Karbonnanorør kvante prikker og liposomer, sistnevnte har vært studert de15,16. Liposomer er blemmer som består av en lipid bilayer10. De er amphiphilic med en hydrofobe og en hydrofile del, og selv hvordan disse molekylene, et sfærisk dobbelt lag er dannet17. I liposomer, kan terapeutiske agenter eller narkotika være innkapslet og dermed beskyttet enzymatisk degradering18. Liposomer inneholder N-[1-(2,3-dioleyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium chloride (DOTMA)19, [1,2-bis (oleoyloxy) -3-(trimethylammonio) propan] (DOTAP)20, og dioctadecylamidoglycylspermine (hunder)21, eller DC-kolesterol22, er vel preget og brukte for mobilnettet transfection med DNA eller RNA.
Kationisk liposomer utgjør en positivt ladet lipid og en uncharged phospholipid23. Hva via kationisk liposomer er en av de vanligste metodene for transport av nukleinsyrer til celler24,25. Kationisk lipid partikler danner komplekser med negativt ladde fosfat grupper i ryggraden i nukleinsyre molekyler26. Disse såkalte lipoplexes legge til overflaten av cellemembranen og angi cellen gjennom endocytose eller endocytose-lignende-mekanismer27.
I 1989, Malone et al. vellykket beskrevet kationisk lipid-formidlet mRNA transfection28. Men fant bruker en blanding av DOTMA og 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (dop), gruppen at DOTMA manifestert cytotoksiske effekter28. I tillegg viste Zohra et al. at DOTAP (1,2-dioleoyloxy-3-trimethylammonium-propan klorid) kan brukes som en mRNA transfection reagens29. Men for den effektive transfection celler, bør DOTAP brukes i kombinasjon med andre reagenser, som fibronectin29 eller DOPE30. Så langt var DOTMA den første kationisk lipid på markedet brukes for gen levering31. Andre lipider brukes som terapeutiske bærere eller blir testet i ulike stadier av kliniske forsøk, (f.eks EndoTAG-I, som inneholder DOTAP som en lipid bærer), undersøkes for tiden i en fase II kliniske prøve32.
Dette verket beskriver en protokoll for generering av NLps som inneholder DC-kolesterol og dop. Denne metoden er enkel å utføre og tillater generering av NLps av forskjellige størrelser. Vårt generelle mål om NLp generasjon med metoden tørrfilm er å skape liposomer for mRNA complexation, dermed gir effektiv og biokompatible celle transfection i vitro14,33.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)</td>
			<td>AppliChem, Darmstadt, Germany</td>
			<td>A2231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(3&#946;-[N-(N&#8242;,N&#8242;-dimethylaminoethane)-carbamoyl]cholesterol hydrochloride (DC-Cholesterol)</td>
			<td>Avanti, Alabama, USA</td>
			<td>700001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#160;&#8242;,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACScan system</td>
			<td>BD Biosciences, Heidelberg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Fix (10x)</td>
			<td>BD Biosciences, Heidelberg, Germany</td>
			<td>340181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>102445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxid (DMSO)</td>
			<td>Serva Electrophoresis GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>20385.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dioleoyl phosphatidylethanolamine (DOPE)</td>
			<td>Avanti, Alabama, USA</td>
			<td>850725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss Axio, Oberkochen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>11668019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini extruder</td>
			<td>Avanti, Alabama, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclease-free water</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>129114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-Mem</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>11058021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS buffer (w/o Ca2+/Mg2+)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>70011044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quant-iT Ribo Green RNA reagent kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>Q33140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI (w/o phenol red)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>11835030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica gel</td>
			<td>Carl Roth, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>P077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA (0.05%)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>25300054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HotStar HiFidelity Polymerase Kit</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>202602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAquick PCR Purification Kit</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>28104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td> 
			Pseudouridine-5&#39;-Triphosphate (&#936;-UTP)</td>
			<td>TriLink Biotechnologies, San Diego, USA</td>
			<td>N-1019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-Methylcytidine-5&#39;-Triphosphate (Methyl-CTP)</td>
			<td>TriLink Biotechnologies, San Diego, USA</td>
			<td>N-1014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyanine 3-CTP</td>
			<td>PerkinElmer, Baesweiler, Germany</td>
			<td>NEL580001EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy Mini Kit</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>74104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEGAscript T7 Transcription Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>AM1333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3&#180;-O-Me-m7G(5&#39;)ppp(5&#39;)G RNA Cap Structure Analog</td>
			<td>New England Biolabs, Ipswich, USA</td>
			<td>S1411L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antarctic Phosphatase</td>
			<td>New England Biolabs, Ipswich, USA</td>
			<td>M0289S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>16500-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GelRed</td>
			<td>Biotium, Fremont, USA</td>
			<td>41003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>peqGOLD DNA ladder mix</td>
			<td>VWR, Pennsylvania, USA</td>
			<td>25-2040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Invitrogen 0.5-10kb RNA ladder</td>
			<td>Fisher Scientific, G&#246;teborg, 
			Sweden</td>
			<td>11528766</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of cationic nanoliposomes for the efficient delivery of in vitro transcribed messenger rna

Utviklingen av budbringer RNA (mRNA)-basert therapeutics for behandling av ulike sykdommer blir stadig viktigere på grunn av positive egenskapene til i vitro transkribert (PES) mRNA. Med hjelp av IVT mRNA, kan de novo syntesen av et protein som ønsket indusert uten endring av fysiologiske status for målcellen. Videre kan protein biosyntesen kontrolleres nøyaktig på grunn av forbigående effekten av IVT mRNA.
For effektiv transfection celler, kan nanoliposomes (NLps) representere en sikker og effektiv levering kjøretøy for terapeutisk mRNA. Denne studien beskriver en protokoll for å generere sikker og effektiv kationisk NLps bestående av DC-kolesterol og 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (dop) som en vektor for levering for IVT mRNA. NLps har en definert størrelse, en homogen distribusjon og en høy complexation kapasitet, og kan produseres med metoden tørrfilm. Videre vi presenterer ulike testsystemer å analysere sine complexation og hva efficacies bruker syntetiske forbedret grønne fluorescerende protein (eGFP) mRNA, samt deres innvirkning på celle levedyktighet. Samlet gir presentert protokollen en effektiv og trygg tilnærming for mRNA complexation, som kan fremme og forbedre administrasjonen av terapeutiske mRNA.

Ved hjelp av protokollen som beskrevet, var NLps bestående av lipider DC-kolesterol og dop forberedt med metoden tørrfilm (figur 1). Under utarbeidelse viser den nanoliposome løsningen ulike stadier i turbiditet (figur 2).
Innkapsling effekten av NLps kan deretter analyseres etter innkapsling av 1 µg av eGFP-koding mRNA ved å analysere gratis mengden mRNA, som ikke...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Cationic Nanoliposomes for the Efficient Delivery of In Vitro Transcribed Messenger RNA at JoVE.com

Generation of Cationic Nanoliposomes for the Efficient Delivery of In Vitro Transcribed Messenger RNA

Generering av kationisk Nanoliposomes for effektiv levering av In Vitro transkribert budbringer RNA

Her beskriver vi en protokoll for generering av kationisk nanoliposomes, som er basert på metoden tørrfilm og kan brukes for trygg og effektiv levering av in vitro transkribert budbringer RNA.

The development of messenger RNA (mRNA)-based therapeutics for the treatment of various diseases becomes more and more important because of the positive ...

Denne protokollen tillater produksjon av trygge og effektive nanoliposomer som kan brukes som transfection kjøretøy for terapeutisk messenger RNA. Disse nanoliposomene letter mRNA-opptaket i celler som resulterer i økte proteinuttrykksnivåer uten å påvirke celle levedyktigheten. Den største fordelen med denne teknikken er rask og enkel generasjon stabile nanoliposomer med definert størrelse og homogen distribusjon.Videre beskytter de innkapslet mRNA mot nedbrytning og fører til langvarig oversettelse. Å demonstrere prosedyren vil være Antonia Link, en ph.d.-student fra laboratoriet vårt. For å begynne denne prosedyren, forberede lagerløsninger for lipider, DC-kolesterol og DOPE ved å oppløse hver i kloroform til en endelig konsentrasjon på 25 milligram per milliliter.Bland 40 mikroliter av oppløst DC-kolesterol med 80 mikroliter av oppløst DOPE i en glasskolbe. Fordampe kloroformen under en argongassstrøm i 15 minutter. Deretter fyller du en desiccator med silikagel.Plasser den åpne glasskolben inne og påfør et vakuum over natten for å sikre at den gjenværende kloroformen fordampes. Den resulterende lipidfilmen vil danne seg inne i glasskolben. Neste dag, tilsett en milliliter kjernefritt vann for å rehydrere lipidfilmen.Og vortex suspensjonen i 15 minutter. Plasser suspensjonen i et sonikeringsbad i en time. Etter dette monterer du mini ekstruderen i henhold til produsentens instruksjoner.Fyll en sprøyte med væskefjæringen og plasser den på den ene siden av ekstruderen. Plasser en tom sprøyte på den andre siden. Trykk lipidsuspensjonen gjennom membranen fra den ene sprøyten til den andre, ca. 20-25 ganger for å ekstrudere suspensjonen.Deretter oppbevarer du nanoliposomer i en glasskolbe ved fire grader Celsius til de er klare til bruk. Først tine syntetisk mRNA på is. Vortex den frosne mRNA og sentrifuger den kort tid før du åpner røret.Bland deretter ett mikrogram av syntetisk mRNA med ulike mengder nanoliposom suspensjon. Sentrifuge kort og inkuber ved romtemperatur i 20 minutter for nanolipoplex dannelse. Deretter legger du til milliliter vanlig cellemedium til nanolipoplex og bland ved å pipetter opp og ned.Forbered cellene en dag før transfection. Derfor, plate 150, 000 A549 celler i hver brønn av en 12 brønnplate en dag før transfection. Inkuber cellene ved 37 grader Celsius med 5% karbondioksid og vanlig cellemedium i 24 timer.Deretter neste dag, vask hver brønn av forberedte celler en gang med en milliliter PBS. Tilsett en milliliter av en forberedt nanolipoplexblanding til en av brønnene som inneholder A549-cellene. Inkuber ved vanlige forhold i 24 timer for å analysere transfection effektivitet, eller i 24-72 timer for å analysere celle levedyktigheten etter transfection.Fjern supernatanten og vask hver brønn med en milliliter PBS for å fjerne de gjenværende nanoliposomer. For å forberede cellene for cytometri, legg først til 500 mikroliter trypsin EDTA til hver brønn og inkubere ved 37 grader Celsius i tre minutter for å prøvepsinisere cellene. Deretter legger du til 500 mikroliter med vanlig FBS-inneholdende medium for å stoppe prosessen og deaktivere trypsin.Sentrifuger cellene ved 400 ganger G i fem minutter. Og fjern forsiktig det overnaturlige uten å forstyrre cellepellet. Vask cellene med en milliliter PBS.Deretter re-suspendere cellene i 300 mikroliter av celle fiksering løsning og overføre dem til strømning cytometri rør. Bruk et strømningssytometer til å analysere cellene ved 488 nanometer. For å forberede cellene for fluorescensmikroskopi, legg til en milliliter kjølt metanol til hver brønn for å fikse cellene.Tilsett 500 mikroliter av en 300 nanomolarløsning av DAPI oppløst i PBS til hver brønn. Inkuber i mørket i fem minutter. Etter dette fjerner du DAPI-løsningen og vasker cellene igjen med 100% metanol som tidligere ble lagret på minus 20 grader Celsius.Bruk et fluorescensmikroskop til å analysere cellene ved hjelp av eksitasjons- og utslippsbølgelengdene som vises her. I denne studien genereres nanoliposomer med høy innkapslingseffekt for syntetisk modifisert mRNA. Ved hjelp av RNA-kvantifiseringssettet kan innkapslingseffekten av nanoliposomene analyseres etter innkapslingen av ett mikrogram eGFP-koding av mRNA ved å analysere den frie mengden mRNA som ikke er innkapslet.Etter innkapsling av EGFP mRNA i forskjellige mengder nanoliposomer, kan de dannede nanolipoplexes inkuberes med celler in vitro og prosentandelen av eGFP-uttrykkende celler kan analyseres ved hjelp av strømningscytometri 24 timer etter transfeksjon. Som sett her, er selv bare en mikroliter av nanoliposomer løsningen tilstrekkelig til å oppnå en høy transfection av cellene invitro. Når cellene er transfisert med nanoliposomer som inneholder Cy3 merket eGFP mRNA, kan tilstedeværelsen av eGFP mRNA i cytoplasma, samt det allerede produserte eGFP-proteinet, visualiseres.Siden transfection av celler ved hjelp av nanolipoplexes kan ha negative effekter på celler, ble levedyktigheten til cellene testet etter 24 timer og 72 timer etter transfection. Ingen effekter på celle levedyktighet kunne oppdages når cellene ble behandlet med 2,5 eller fem mikroliter nanolipoplexes. Når du prøver denne prosedyren, er det viktig å huske å jobbe i et etanolfritt miljø hele tiden fordi dette kan skade nanoliposomstabilitet.Mens du forbereder og blander DC-kolesterolet med DOPE, bør du bruke en glasspipette for å unngå forurensning av oppløste lipider med løselige komponenter av plastpipettespisser. Etter denne protokollen kan de genererte nanoliposomer enkelt manipuleres under eller etter preparatet. For eksempel vil inkorporering av PEG-molekyler eller spesifikke antistoffer føre til økt stabilitet eller initiere aktiv vevsmålretting.De genererte nanoliposomene oppfyller de nødvendige sikkerhetsaspektene og letter mRNA-opptaket til målcellene. Nanoliposomer komplekst med en bestemt terapeutisk nRNA kan gi et viktig bidrag til utviklingen av nye mRNA-baserte terapier innen vevsteknikk eller erstatningsterapi for eksempel.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Generation of Cationic Nanoliposomes for the Efficient Delivery of In Vitro Transcribed Messenger RNA

Microscale Vortex-assisted Electroporator for Sequential Molecular Delivery

Mikro Vortex-assistert Electroporator for sekvensiell Molecular Levering

Electroporation has received increasing attention in the past years, because it is a very powerful technique for physically introducing non-permeant ...

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

Generering av en Tredimensjonal Full Tykkelse hudekvivalent og Automated såret

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

Øyeirritasjonstest (EIT) for fareidentifikasjon for Eye irriterende kjemikalier som bruker Rekonstruert Menneskelig Hornhinnen lignende Epithelial (RHCE) Tissue Modell

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Tilpasning av electro prosess for å gi tre unike miljøer for en Tri-lag<em&gt; In Vitro</em&gt; Modell av Airway Wall

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Delivery of Therapeutic siRNA to the CNS Using Cationic and Anionic Liposomes

Levering av Terapeutisk siRNA til CNS Bruke kationiske og anioniske liposomer

Prion diseases result from the misfolding of the normal, cellular prion protein (PrPC) to an abnormal protease resistant isomer called PrPRes.  The ...

Polyelectrolyte Complex for Heparin Binding Domain Osteogenic Growth Factor Delivery

Polyelektrolytkompleks for Heparin Binding Domain osteogene Growth Factor Levering

During reconstructive bone surgeries, supraphysiological amounts of growth factors are empirically loaded onto scaffolds to promote successful bone ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

en<em&gt; In Vitro</em&gt; Organ Culture Modell av Murine mellomvirvelskive

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

Efficient Generation and Editing of Feeder-free IPSCs from Human Pancreatic Cells Using the CRISPR-Cas9 System

Effektiv generasjon og redigering av mater-gratis IPSCs fra menneskelige bukspyttkjertelen celler ved hjelp av CRISPR-Cas9 System

Embryonic and induced pluripotent stem cells can self-renew and differentiate into multiple cell types of the body. The pluripotent cells are thus coveted ...

Preparation and Characterization of Nanoliposomes for the Entrapment of Bioactive Hydrophilic Globular Proteins

Utarbeidelse og karakterisering av Nanoliposomes for å felle av bioaktive hydrofile globular proteiner

Liposome nanocapsules have been applied for many purposes in the pharmaceutical, cosmetic, and food industries. Attributes of liposomes include their ...

Bioparticle Microarrays for Chemotactic and Molecular Analysis of Human Neutrophil Swarming in vitro

Biopartikkel Mikroarrayer for kjemotaktisk og molekylær analyse av human nøytrofil svermer in vitro

Neutrophil swarming is a cooperative process by which neutrophils seal off a site of infection and promote tissue reorganization. Swarming has classically ...