Name: generation of cationic nanoliposomes for the efficient delivery of in vitro transcribed messenger rna
Uploaded: 2019-02-01T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Cationic Nanoliposomes for the Efficient Delivery of In Vitro Transcribed Messenger RNA at JoVE.com

1. nesil katyonik Nanoliposomes (Şekil 1)
<ol><li>DC-kolesterol (3β-[N-(N′,N′-dimethylaminoethane)-carbamoyl] kolesterol hidroklorid) ve 25 mg/mL nihai bir konsantrasyon ulaşmak için kloroform içinde bir toz olarak teslim uyuşturucu (dioleoyl phosphatidylethanolamine), lipitler geçiyoruz. Not:-20 ° C'de çözünmüş lipidler depolamak</li>
	<li>25 mg/mL stok çözüm her iki lipidler ile çalışır. Mix 40 µL çözünmüş DC-kolesterol ve bir cam şişe içinde çözünm...

Sunulan Protokolü NLps nesil sentetik değiştirilmiş mRNA için yüksek kapsülleme etkinliği ile hem de hücreleri vitrogüvenilir transfection açıklar. Ayrıca, buna karşılık, hücre içinde işlevsel bir protein çevrilmiş mRNA sürümü NLps garanti. Ayrıca, NLps kullanarak transfections normal hücre ortamda gerçekleştirilebilir, yüksek çıkan viabilities transfection sırasında hücre ve üç gün sonra transfection son.
MRNA bir tedavi kullanmak için sistemi te...

Değiştirilmiş mRNA kullanımı tedavi uygulamaları için son birkaç yıldır büyük bir potansiyel göstermiştir. Kalp, enflamatuar ve monogenetic hastalıkları, olduğu gibi aşı geliştirme, mRNA bir umut verici terapötik ajan1' dir.
Protein replasman tedavisi ile mRNA DNA transfection2hedef hücreleri içine dayalı klasik gen terapisi birkaç avantaj sunar. MRNA işlevi sitozol doğrudan başlatır. Her ne kadar plazmid DNA (pDNA), bir çift iplikçikli yapı, daire organizatörü bölge ve terapötik protein3, ayrıca eylemlere sitozol, kodlama bir gen dizisini içeren DNA bu sadece mitoz gidiyorsun hücrelere dahil edilebilir transfection anda. Bu doku1,4transfected hücrelerin sayısını azaltır. Özellikle, kalp hücreleri gibi zayıf mitoz faaliyeti ile dokuların transfection zor5' tir. PDNA aksine, transfection ve çeviri mRNA doku1,6mitotik ve mitotik olmayan hücrelerde ortaya çikmaktadir. Ana bilgisayar genom viral entegrasyon DNA'ın mutajenik etkileri veya bağışıklık tepkileri7,8, ama hücrelerin protein kodlama mRNA, istenen protein de novo sentezi ile transfection sonra gelebilir özerk olarak9,10da başlıyor. Ayrıca, protein sentezi tam için hastanın ihtiyacı aracılığıyla bireysel dozlarda, genom ile müdahale ve mutajenik etkileri11riske olmadan ayarlanabilir. Sentetik oluşturulan mRNA bağışıklık aktive potansiyelini önemli ölçüde sahte üridin ve 5'-methylcytidine ve sitidin Üridin12yerine kullanarak indirdi. Sözde Üridin değiştirilmiş mRNA da artan bir biyolojik istikrar ve anlamlı olarak daha yüksek bir translasyonel kapasitesi13var olduğu gösterilmiştir.
MRNA tabanlı terapi klinik uygulamaları umut verici özelliklerinden yararlanmak için mRNA taşıma hücre içine için uygun bir araç oluşturmak için önemlidir. Bu araç toksik olmayan özellikleri vitro ve in vivoayı, mRNA nükleaz düşmesine karşı korumak ve bir uzun süreli kullanılabilirlik ve mRNA14olan için yeterli hücresel alımını sağlamak.
Karbon nanotüpler, kuantum noktaları ve lipozomlar, gibi vivo içinde ilaç dağıtım için tüm olası taşıyıcı türleri arasında ikinci olmuştur en15,16okudu. Lipozomlar veziküller bir lipid bilayer10/ oluşan vardır. Onlar amfifilik bir hidrofobik ve hidrofilik bir bölüm ile ve bu moleküller öz düzenleme ile küresel bir çift katmanlı kurulan17yaşında. Lipozomlar içinde terapötik ajanlar veya uyuşturucu olabilir kapsüllü ve, böylece, enzimatik Bozulması18korumalı. N-[1-(2,3-dioleyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium klorür (DOTMA)19, içeren lipozomlar [1,2-bis (oleoyloxy) -3-(trimethylammonio) propan] (DOTAP)20ve dioctadecylamidoglycylspermine (köpek)21, ya da DC-kolesterol22, iyi karakterize ve DNA veya RNA ile hücresel transfection için sık kullanılan.
Katyonik lipozomlar pozitif yüklü bir lipid ve bir doldurulmamış fosfolipid23oluştururlar. Nükleik asitler hücre24,25içine taşınması için en yaygın yöntemlerden birini transfection yolu ile katyonik lipozomlar var. Katyonik lipit parçacıklar kompleksleri olumsuz şarj edilmiş fosfat grupları ile nükleik asit molekülleri26omurgası oluşturmak. Bu sözde lipoplexes hücre membran yüzeyine takın ve endositoz veya endositoz-gibi-mekanizmaları27aracılığıyla hücre girin.
1989 yılında, Malone ve ark. başarıyla katyonik lipit-aracılı mRNA transfection28nitelendirdi. Ancak, bir karışım DOTMA ve 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine (uyuşturucu) kullanarak, Grup DOTMA sitotoksik efekt28tecelli bulundu. Ayrıca, Zohra vd. DOTAP (1,2-dioleoyloxy-3-trimethylammonium-propan klorür) bir mRNA transfection reaktif29kullanılabileceğini gösterdi. Ancak, için verimli transfection hücre DOTAP fibronektin29 veya uyuşturucu30gibi diğer kimyasalları ile birlikte kullanılmalıdır. Şimdiye kadar DOTMA ilk katyonik lipit gen teslim31için kullanılan piyasada oldu. Diğer lipidler tedavi taşıyıcı olarak kullanılan ya da klinik çalışmalarda, farklı aşamalarında test edilen (örneğin, EndoTAG-ı DOTAP lipid taşıyıcı olarak içeren), şu anda bir aşama II klinik deneme32araştırılmaktadır.
Bu eser DC-kolesterol ve uyuşturucu içeren NLps üretimi için bir protokolünü açıklar. Bu yöntemi gerçekleştirmek kolay ve farklı boyutlarda NLps nesil sağlar. Kuru film yöntemi kullanarak NLp üretimi genel amacı lipozomlar mRNA complexation, böylece verimli ve biyouyumlu hücre transfection vitro14,33izin için oluşturmaktır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)</td>
			<td>AppliChem, Darmstadt, Germany</td>
			<td>A2231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(3&#946;-[N-(N&#8242;,N&#8242;-dimethylaminoethane)-carbamoyl]cholesterol hydrochloride (DC-Cholesterol)</td>
			<td>Avanti, Alabama, USA</td>
			<td>700001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#160;&#8242;,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACScan system</td>
			<td>BD Biosciences, Heidelberg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Fix (10x)</td>
			<td>BD Biosciences, Heidelberg, Germany</td>
			<td>340181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>102445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxid (DMSO)</td>
			<td>Serva Electrophoresis GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td>20385.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dioleoyl phosphatidylethanolamine (DOPE)</td>
			<td>Avanti, Alabama, USA</td>
			<td>850725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss Axio, Oberkochen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>11668019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini extruder</td>
			<td>Avanti, Alabama, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclease-free water</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>129114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-Mem</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>11058021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS buffer (w/o Ca2+/Mg2+)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>70011044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quant-iT Ribo Green RNA reagent kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>Q33140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI (w/o phenol red)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>11835030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica gel</td>
			<td>Carl Roth, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>P077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA (0.05%)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>25300054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HotStar HiFidelity Polymerase Kit</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>202602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAquick PCR Purification Kit</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>28104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td> 
			Pseudouridine-5&#39;-Triphosphate (&#936;-UTP)</td>
			<td>TriLink Biotechnologies, San Diego, USA</td>
			<td>N-1019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-Methylcytidine-5&#39;-Triphosphate (Methyl-CTP)</td>
			<td>TriLink Biotechnologies, San Diego, USA</td>
			<td>N-1014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyanine 3-CTP</td>
			<td>PerkinElmer, Baesweiler, Germany</td>
			<td>NEL580001EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy Mini Kit</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>74104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEGAscript T7 Transcription Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>AM1333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3&#180;-O-Me-m7G(5&#39;)ppp(5&#39;)G RNA Cap Structure Analog</td>
			<td>New England Biolabs, Ipswich, USA</td>
			<td>S1411L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antarctic Phosphatase</td>
			<td>New England Biolabs, Ipswich, USA</td>
			<td>M0289S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Darmstadt, Germany</td>
			<td>16500-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GelRed</td>
			<td>Biotium, Fremont, USA</td>
			<td>41003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>peqGOLD DNA ladder mix</td>
			<td>VWR, Pennsylvania, USA</td>
			<td>25-2040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Invitrogen 0.5-10kb RNA ladder</td>
			<td>Fisher Scientific, G&#246;teborg, 
			Sweden</td>
			<td>11528766</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of cationic nanoliposomes for the efficient delivery of in vitro transcribed messenger rna

Mesajcı RNA (mRNA) gelişimi-çeşitli hastalıkların tedavisinde olumlu nedeniyle daha fazla önemli hale gelir therapeutics temel özelliklerini vitro transkripsiyonu (IVT) mRNA. IVT mRNA sayesinde, istenilen bir protein de novo sentezi hedef hücre fizyolojik durumunu değiştirmeden bağlı olmak. Ayrıca, protein biyosentezi tam IVT mRNA geçici etkisi nedeniyle kontrol edilebilir.
Hücreleri verimli transfection için nanoliposomes (NLps) tedavi mRNA için güvenli ve verimli teslim araç temsil edebilir. Bu çalışmada DC-kolesterol ve 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine oluşan güvenli ve verimli katyonik NLps (uyuşturucu) teslimat vektör olarak IVT mRNA için oluşturmak için bir protokol açıklar. Bir tanımlanmış olan NLps, homojen bir dağılım ve yüksek complexation kapasitesi, boyutu ve kuru-film yöntemi kullanılarak üretilen. Ayrıca, biz onların complexation analiz etmek için farklı test sistemleri mevcut ve transfection efficacies sentetik kullanarak gelişmiş yeşil flüoresan protein (eGFP) mRNA, hem de hücre canlılığı üzerindeki etkileri. Genel olarak, sunulan Protokolü ilerlemek ve terapötik mRNA yönetimini geliştirmek mRNA complexation için etkili ve güvenli bir yaklaşım sağlar.

Açıklandığı gibi iletişim kuralını kullanarak, lipitler DC-kolesterol ve uyuşturucu oluşan NLps Kuru-film (Şekil 1) yöntemiyle hazırlanmıştır. Hazırlık sırasında nanoliposome çözüm farklı aşamaları bulanıklık (Şekil 2) gösterir.
NLps kapsülleme etkinliğinin ardından eGFP kodlama mRNA 1 µg kapsülleme sonra ücretsiz kapsüllü değil, R...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Cationic Nanoliposomes for the Efficient Delivery of In Vitro Transcribed Messenger RNA at JoVE.com

Generation of Cationic Nanoliposomes for the Efficient Delivery of In Vitro Transcribed Messenger RNA

Vitro verimli bir şekilde teslim için katyonik Nanoliposomes nesil mesajcı RNA transkripsiyonu

Burada biz bir protokol üzerinde kuru-film yöntemini temel alır ve güvenli için kullanılan katyonik nanoliposomes, nesil için tarif ve in vitro verimli bir şekilde teslim mesajcı RNA transkripsiyonu.

The development of messenger RNA (mRNA)-based therapeutics for the treatment of various diseases becomes more and more important because of the positive ...

Bu protokol terapötik haberci RNA için transfeksiyon aracı olarak kullanılabilecek güvenli ve verimli nanoliposomes üretimine olanak sağlar. Bu nanoliposomes hücre canlılığını etkilemeden artan protein ekspresyonu düzeyleri ile sonuçlanan hücrelerde mRNA alımını kolaylaştırmak. Bu tekniğin en büyük avantajı, tanımlı boyut ve homojen dağılıma sahip hızlı ve kolay nesil kararlı nanoliposomes'tir.Ayrıca kapsüllü mRNA'yı bozulmadan korur lar ve uzun süreli çeviriye yol açarlar. Prosedürü gösteren Antonia Link, bizim laboratuvardan bir doktora öğrencisi olacaktır. Bu prosedürü başlatmak için, lipidler için stok çözümleri hazırlamak, DC-kolesterol ve DOPE mililitre başına 25 miligram son konsantrasyona kloroform her eriterek.40 mikrolitre çözünmüş DC-kolesterolü 80 mikrolitre çözünmüş DOPE ile bir cam şişede karıştırın. 15 dakika boyunca bir argon gaz akışı altında kloroformu buharlaştırın. Sonra, silika jel ile bir kurutucu doldurun.Açık cam şişeyi içine yerleştirin ve kalan kloroformun buharlaşmasını sağlamak için bir gecede vakum uygulayın. Ortaya çıkan lipid film cam şişe içinde oluşacaktır. Ertesi gün, lipid film rehydrate çekirdeksiz su bir mililitre ekleyin.Ve süspansiyonu 15 dakika girdaplayın. Süspansiyonu bir saat boyunca sonication bath'a yerleştirin. Bundan sonra, üreticilerin talimatlarına göre mini ekstrüder monte edin.Bir şırıngayı sıvı süspansiyonla doldurun ve ekstrüzyonun bir tarafına yerleştirin. Diğer tarafa boş bir şırınga yerleştirin. Süspansiyonekstrüzstrüze yaklaşık 20-25 kez, bir şırıngadan diğerine membran üzerinden lipid süspansiyon basın.Daha sonra nanolipoomları kullanıma hazır olana kadar dört santigrat derecede cam bir şişede saklayın. İlk olarak, sentetik mRNA'yı buz üzerinde eritin. Vortex dondurulmuş mRNA ve kısa bir süre tüp açmadan önce santrifüj.Daha sonra, nanolipozom süspansiyon çeşitli miktarlarda sentetik mRNA bir mikrogram karıştırın. Nanolipoplex oluşumu için 20 dakika oda sıcaklığında kısa bir süre santrifüj ve kuluçka. Sonra, nanolipoplex düzenli hücre orta mililitre ekleyin ve yukarı ve aşağı pipetleme tarafından karıştırın.Hücreleri transfeksiyondan bir gün önce hazırlayın. Bu nedenle, plaka 150, 000 A549 hücreleri transfection bir gün önce bir 12 kuyu plaka her kuyuiçine. Hücreleri %5 karbondioksit ve normal hücre ortamı ile 37 derecede 24 saat kuluçkaya yatırın.Sonra ertesi gün, pbs bir mililitre ile bir kez hazırlanan hücrelerin her iyi yıkayın. A549 hücrelerini içeren kuyulardan birine bir mililitre hazırlanmış nanolipoplex karışımı ekleyin. Transfeksiyon verimliliğini analiz etmek için 24 saat veya transfeksiyon sonrası hücrenin canlılığını analiz etmek için 24-72 saat düzenli koşullarda kuluçkaya yatırın.Supernatant çıkarın ve kalan nanoliposomes kaldırmak için PBS bir mililitre ile her iyi yıkayın. Hücreleri sitometriye hazırlamak için, öncelikle her kuyuya 500 mikrolitre tripsin EDTA ekleyin ve hücreleri denemek için 37 derecede 37 santigrat derecede kuluçkaya yatırın. Daha sonra, işlemi durdurmak ve trypsin inaktive düzenli FBS içeren orta 500 mikrolitre ekleyin.Hücreleri 400 kez G'de beş dakika santrifüj edin. Ve dikkatlice hücre pelet rahatsız etmeden supernatant çıkarın. Hücreleri bir mililitre PBS ile yıkayın.Daha sonra hücre fiksasyon çözeltisi 300 mikrolitre hücreleri yeniden askıya ve akış sitometri tüpleri içine aktarın. 488 nanometredeki hücreleri analiz etmek için bir akış sitometresi kullanın. Floresan mikroskopisi için hücreleri hazırlamak için, hücreleri düzeltmek için her iyi soğutulmuş metanol bir mililitre ekleyin.Her kuyuya PBS'de çözünmüş 300 nanomular dapi çözeltisinin 500 mikrolitresini ekleyin. Karanlıkta beş dakika kuluçkaya yat. Bundan sonra, DAPI çözeltisi çıkarın ve daha önce eksi 20 santigrat derece depolanan% 100 metanol ile hücreleri tekrar yıkayın.Burada gösterilen uyarma ve emisyon dalga boylarını kullanarak hücreleri analiz etmek için bir floresan mikroskobu kullanın. Bu çalışmada, nanoliposomes sentetik modifiye mRNA için yüksek kapsülleme etkinliği ile oluşturulur. RNA sayısallaştırma kiti kullanılarak, nanoliposomes kapsülleme etkinliği kapsülleme olmayan mRNA serbest miktarı analiz edilerek eGFP kodlama mRNA bir mikrogram kapsülleme sonra analiz edilebilir.EGFP mRNA'nın farklı miktarlarda nanoliposomezomlarda kapsüllenmesinden sonra, oluşan nanolipoplexes in vitro hücrelerle kuluçkaya yatırılabilir ve eGFP ifade eden hücrelerin yüzdesi transfeksiyon sonrası akış sitometrisi kullanılarak analiz edilebilir. Burada görüldüğü gibi, nanoliposomes çözeltisi bile sadece bir mikrolitre hücrelerin invitro yüksek transfeksiyon elde etmek için yeterlidir. Hücreler cy3 etiketli eGFP mRNA içeren nanolipoomlarla geçirildiğinde, sitoplazmada eGFP mRNA'nın varlığı ve halihazırda üretilen eGFP proteini görselleştirilebilir.Nanolipoplexes kullanarak hücrelerin transfeksiyon hücreleri üzerinde olumsuz etkileri olabilir bu yana, hücrelerin canlılığı 24 saat ve 72 saat post-transfection sonra test edildi. Hücreler 2,5 veya 5 mikrolitre nanolipoplexes ile tedavi edildiğinde hücre canlılığı üzerinde hiçbir etkisi tespit edilemedi. Bu yordamı denerken, bu nanolipozom istikrara zarar verebilir, çünkü her zaman etanol içermeyen bir ortamda çalışmak için hatırlamak önemlidir.Hazırlarken ve DOPE ile DC-kolesterol karıştırırken, plastik pipet uçları çözünür bileşenleri ile çözünmüş lipidlerin kontaminasyonunu önlemek için bir cam pipet kullanmalısınız. Bu protokolü takiben, oluşturulan nanoliposomes kolayca sırasında veya hazırlık sonrasında manipüle edilebilir. Örneğin, PEG moleküllerinin veya spesifik antikorların birleştirilmesi stabilitenin artmasına veya aktif doku hedeflemesine yol açacaktır.Oluşturulan nanoliposomes gerekli güvenlik yönlerini yerine getirmek ve hedef hücrelere mRNA alımını kolaylaştırmak. Nanoliposomes belirli bir terapötik nRNA ile karmaşık doku mühendisliği veya replasman tedavisi alanında yeni mRNA tabanlı terapötik gelişimine önemli bir katkı yapabilir.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Generation of Cationic Nanoliposomes for the Efficient Delivery of In Vitro Transcribed Messenger RNA

Microscale Vortex-assisted Electroporator for Sequential Molecular Delivery

Microscale Vortex destekli Sıralı Moleküler Teslimat için Electroporator

Electroporation has received increasing attention in the past years, because it is a very powerful technique for physically introducing non-permeant ...

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

Üç-boyutlu Tam Kalınlığı Deri Üretimi Eşdeğer ve Otomatik Yaralama

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

Yeniden İnşa İnsan Kornea gibi Epitelyal (RHCE) Doku Modeli kullanılarak Göz tahriş Kimyasalların Tehlike Tanımlaması Göz tahrişi Testi (EIT)

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Elektrospinning Süreci Uyarlama bir Tri-katmanlı için üç Benzersiz ortamlar sağlamak için<em&gt; In Vitro</em&gt; Havayolu Wall Modeli

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Delivery of Therapeutic siRNA to the CNS Using Cationic and Anionic Liposomes

Katyonik ve Anyonik lipozomlar kullanılarak merkezi sinir sistemine Terapötik siRNA teslimi

Prion diseases result from the misfolding of the normal, cellular prion protein (PrPC) to an abnormal protease resistant isomer called PrPRes.  The ...

Polyelectrolyte Complex for Heparin Binding Domain Osteogenic Growth Factor Delivery

Heparin Binding Domain osteojenik Büyüme Faktörü Teslim polielektrolit Kompleksi

During reconstructive bone surgeries, supraphysiological amounts of growth factors are empirically loaded onto scaffolds to promote successful bone ...

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

An In Vitro Organ Culture Model of the Murine Intervertebral Disc

bir<em&gt; İn Vitro</emKemirgen İntervertebral Disk&gt; Organ Kültürü Modeli

Intervertebral disc (IVD) degeneration is a significant contributor to low back pain. The IVD is a fibrocartilaginous joint that serves to transmit and ...

Efficient Generation and Editing of Feeder-free IPSCs from Human Pancreatic Cells Using the CRISPR-Cas9 System

Verimli üretimi ve besleyici-Alerjik IPSCs CRISPR-Cas9 sistemini kullanarak insan pankreas hücreleri düzenleme

Embryonic and induced pluripotent stem cells can self-renew and differentiate into multiple cell types of the body. The pluripotent cells are thus coveted ...

Preparation and Characterization of Nanoliposomes for the Entrapment of Bioactive Hydrophilic Globular Proteins

Biyoaktif Hidrofilik Globüler Proteinlerin Tuzakları Için Nanoliposomes Hazırlanması ve Karakterizasyonu

Liposome nanocapsules have been applied for many purposes in the pharmaceutical, cosmetic, and food industries. Attributes of liposomes include their ...

Bioparticle Microarrays for Chemotactic and Molecular Analysis of Human Neutrophil Swarming in vitro

İnsan Nötrofil Swarming in vitro Kemotaktik ve Moleküler Analizi için Biyopartikül Mikrodizileri

Neutrophil swarming is a cooperative process by which neutrophils seal off a site of infection and promote tissue reorganization. Swarming has classically ...