Name: in vivo imaging of reactive oxygen species in a murine wound model
Uploaded: 2018-11-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model at JoVE.com

Wij zijn dankbaar aan de preklinische Imaging Core aan de NYU School of Medicine, met speciale dank aan Orlando Aristizabal en Youssef Zaim Wadghiri. De kern is een gedeelde bron slechts gedeeltelijk ondersteund door de Laura en Isaac Perlmutter Cancer Center ondersteuning Grant NIH/NCI 5P30CA016087 en NIBIB biomedische technologie Resource Center Grant NIH P41 EB017183. Dit werk werd gesteund door de American Diabetes Association "Traject te stoppen-Diabetes" D.C. [subsidie nummer 1-16-ACE-08] en de NYU toegepast onderzoek Steunfonds aan P.R.

Alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de institutionele Animal Care en gebruik Comité van New York University School of Medicine. Alle muizen bevinden zich achter een barrière en al het personeel passende persoonlijke beschermingsmiddelen dragen.
1. dag 0: Voorbereiding van lymfkliertest Model van Excisional wondgenezing
<ol><li>Anesthetize (Leprdb/db) diabetesmuizen, leeftijd van 8-12 weken, met respiratoire Isofluraan van 2%. Bevestigen dat elke muis h...

<ol>
	<li>Nishinaka, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+sensitive+chemiluminescence+probe,+L-012,+for+measuring+the+production+of+superoxide+anion+by+cells.">A new sensitive chemiluminescence probe, L-012, for measuring the production of superoxide anion by cells.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 193 (2), 554-559 (1993).</li><li>Daiber, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+NAD(P)H+oxidase-derived+superoxide+with+the+luminol+analogue+L-012.">Measurement of NAD(P)H oxidase-derived superoxide with the luminol analogue L-012.</a> Free Radical Biology and Medicine. 36 (1), 101-111 (2004).</li><li>Imada, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+reactive+oxygen+species+generated+by+neutrophils+using+a+chemiluminescence+probe+L-012.">Analysis of reactive oxygen species generated by neutrophils using a chemiluminescence probe L-012.</a> Analytical Biochemistry. 271 (1), 53-58 (1999).</li><li>Sohn, H. Y., Gloe, T., Keller, M., Schoenafinger, K., Pohl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitive+superoxide+detection+in+vascular+cells+by+the+new+chemiluminescence+dye+L-012.">Sensitive superoxide detection in vascular cells by the new chemiluminescence dye L-012.</a> Journal of Vascular Research. 36 (6), 456-464 (1999).</li><li>Fuchs, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+Hypoxia+PET+Imaging+Quantifies+the+Severity+of+Arthritic+Joint+Inflammation+in+Line+with+Overexpression+of+Hypoxia-Inducible+Factor+and+Enhanced+Reactive+Oxygen+Species+Generation.">In vivo Hypoxia PET Imaging Quantifies the Severity of Arthritic Joint Inflammation in Line with Overexpression of Hypoxia-Inducible Factor and Enhanced Reactive Oxygen Species Generation.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 58 (5), 853-860 (2017).</li><li>Asghar, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+reactive+oxygen+and+nitrogen+species+in+murine+colitis.">In vivo imaging of reactive oxygen and nitrogen species in murine colitis.</a> Inflammatory Bowel Diseases. 20 (8), 1435-1447 (2014).</li><li>Galiano, R. D., Michaels, J. t., Dobryansky, M., Levine, J. P., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+and+reproducible+murine+model+of+excisional+wound+healing.">Quantitative and reproducible murine model of excisional wound healing.</a> Wound Repair and Regeneration. 12 (4), 485-492 (2004).</li><li>Soares, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+Nrf2+Signaling+Normalizes+the+Regenerative+Niche.">Restoration of Nrf2 Signaling Normalizes the Regenerative Niche.</a> Diabetes. 65 (3), 633-646 (2016).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+ROS+signaling+in+cells+and+animals.">Imaging ROS signaling in cells and animals.</a> Journal of Molecular Medicine. 91 (8), 917-927 (2013).</li><li>Kielland, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+reactive+oxygen+and+nitrogen+species+in+inflammation+using+the+luminescent+probe+L-012.">In vivo imaging of reactive oxygen and nitrogen species in inflammation using the luminescent probe L-012.</a> Free Radical Biology and Medicine. 47 (6), 760-766 (2009).</li><li>Balke, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+Oxidative+Cellular+Stress+Induced+by+Nanoparticles+in+the+Subcytotoxic+Range+Using+Fluorescence+Lifetime+Imaging.">Visualizing Oxidative Cellular Stress Induced by Nanoparticles in the Subcytotoxic Range Using Fluorescence Lifetime Imaging.</a> Small. , (2018).</li><li>Zielonka, J., Lambeth, J. D., Kalyanaraman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+use+of+L-012,+a+luminol-based+chemiluminescent+probe,+for+detecting+superoxide+and+identifying+inhibitors+of+NADPH+oxidase:+a+reevaluation.">On the use of L-012, a luminol-based chemiluminescent probe, for detecting superoxide and identifying inhibitors of NADPH oxidase: a reevaluation.</a> Free Radical Biology and Medicine. 65, 1310-1314 (2013).</li><li>Dikalov, S. I., Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+detection+of+mitochondrial+and+cellular+reactive+oxygen+species.">Methods for detection of mitochondrial and cellular reactive oxygen species.</a> Antioxidants &amp; Redox Signalling. 20 (2), 372-382 (2014).</li><li>Rabbani, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+Nrf2+activation+therapy+with+RTA+408+enhances+regenerative+capacity+of+diabetic+wounds.">Targeted Nrf2 activation therapy with RTA 408 enhances regenerative capacity of diabetic wounds.</a> Diabetes Research and Clinical Practice. 139, 11-23 (2018).</li><li>Rabbani, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+lipoproteoplex+delivers+Keap1+siRNA+based+gene+therapy+to+accelerate+diabetic+wound+healing.">Novel lipoproteoplex delivers Keap1 siRNA based gene therapy to accelerate diabetic wound healing.</a> Biomaterials. 132, 1-15 (2017).</li></ol>

Gemeenschappelijke technieken voor het meten van ROS hebben beperkt gebleven door complexe protocollen waarvoor weefsel extractie of vergelijkbare invasieve technieken. In de afgelopen jaren zijn de metingen van oxidatieve stress gemeld op basis van innovatieve beeldvormende modaliteiten, waardoor voor Spatio evaluaties9,10,11. L-012 heeft een aantal voordelen als een chemiluminescentie sonde ten opzichte van luminol, lucigenin ...

Zuurstof metabolieten gegenereerd door inflammatoire processen dragen bij aan verschillende signalering cascades evenals destructieve wijziging van cellulaire componenten1. Met behulp van gevoelige en specifieke technieken voor het meten van de ROS is essentieel voor het bestuderen van inflammatoire processen en karakteriseren van de effecten van oxidatieve stress. In vivo imaging is waardevol vanwege de mogelijkheid om dynamische ruimtelijke en temporele gegevens in levend weefsel te verstrekken. L-012 is een synthetische chemiluminescentie sonde die is zeer gevoelig voor superoxide anionen en produceert een hogere lichtintensiteit dan andere tl sondes in cellen, weefsels en bloed1,2,3, 4. het heeft met succes gewerkt voor in vivo imaging in lymfkliertest modellen te bestuderen van de verschillende ontstekingsziekten, met inbegrip van artritis en colitis5,6. Het moet nog worden ingezet in een gevestigde cutane wond genezing model. Meting van ROS gegenereerd is even relevant zijn voor het beoordelen van de voortgang van de wondgenezing onder verschillende omstandigheden. De gevoeligheid en de noninvasive aard van deze methode maakt het een veelbelovende techniek voor het bestuderen van de wondgenezing lymfkliertest modellen.
Nrf2 is een belangrijke motor van de antioxidant-respons en een transcriptionele factor met specificiteit voor de antioxidant respons-element (ARE) gemeenschappelijk aan de promotor gebieden van verschillende antioxidant enzymen8. Bij het ontbreken van oxidatieve stress, is Nrf2 afgezonderd in het cytoplasma door Keap1, waardoor vervolgens haar ubiquitination en afbraak. Onbalans van de Nrf2/Keap1-traject heeft betrokken bij ongepast redox homeostase en vertraagde wondgenezing in de omgeving van verhoogde oxidatieve stress9. Wij hebben eerder aangetoond dat de onderdrukking van de Keap1 verhoogde Nrf2 activiteit stimuleert en bevordert redding van pathologische cutane wondgenezing in diabetische wonden9.
Hier beschrijven we een protocol dat gebruikmaakt van L-012-bijgewoonde bioluminescentie imaging voor het meten van ROS niveaus in een excisional cutane wond genezing model, dat is van cruciaal belang voor het benadrukken van de associatie tussen ROS en wondgenezing. Deze techniek toont real-time wijzigingen in oxidatieve belasting binnen wonden en onmiddellijke periferie. Voorts staat deze methode voor snelle evaluatie van interventies en mechanismen die invloed redox behandeling. Hier gebruiken we een model van Keap1 knockdown voor het herstel van de redox homeostase te evalueren van de toepasbaarheid van onze strategie. Omdat onze techniek niet-invasief is en wonden ongestoord zijn, kan hetzelfde dier worden gebruikt voor verdere bevestigende analyses op basis van histologie of cel lysates.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="618">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:265px;">BKS.Cg-Dock7m+/+ Leprdb/J mice</td>
			<td style="width:164px;">Jackson Laboratories</td>
			<td style="width:111px;">000642</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">13 cm x 18 cm Silicone sheet (0.6 mm)</td>
			<td>Sigma Aldrich&#160;</td>
			<td>665581</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3M Tegaderm Transparent Film Dressings</td>
			<td>3M</td>
			<td>88-1626W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lipofectamine 2000 Transfection Reagent</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td>11668027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Keap1 Stealth siRNA</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>1299001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Silencer negative control&#160;</td>
			<td>Thermofisher Scientific&#160;</td>
			<td>AM4635</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Opti-MEM Reduced Serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11058021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">DPBS</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>14040133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Methyl-cellulose&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>9004-67-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">L-012</td>
			<td>Wako Chemicals</td>
			<td>120-04891</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">IVIS Lumina III XR In Vivo Imaging System&#160;</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo imaging of reactive oxygen species in a murine wound model

De generatie van reactieve zuurstof soorten (ROS) is een kenmerk van inflammatoire processen, maar in overmaat, oxidatieve stress is sterk betrokken bij verschillende ziektebeelden zoals kanker, atherosclerose en diabetes. Wij hebben eerder getoond dat disfunctie van de nucleaire factor (erythroid afkomstige 2)-2 (Nrf2) leuk / Kelch-achtige erythroid cel afkomstige eiwit 1 (Keap1) signalering traject leidt tot extreme ROS onbalans tijdens cutane wondgenezing bij diabetes. Aangezien ROS niveaus een belangrijke indicator voor voortgang zijn van wondgenezing, zijn specifieke en nauwkeurige kwantificering technieken waardevol. Verscheidene in vitro tests voor het meten van ROS in cellen en weefsels zijn beschreven; Zij bieden echter slechts een enkele cumulatieve meting per monster. Meer recentelijk hebben de ontwikkeling van indicatoren op basis van eiwitten en beeldvormende modaliteiten toegestaan voor unieke Spatio analyses. L-012 (C13H8ClN4NaO2) is een derivaat van luminol dat kan worden gebruikt voor zowel in vivo en in vitro chemiluminescentie detectie van ROS gegenereerd door NAPDH-oxidase. L-012 stoot een sterker signaal dan andere tl sondes en heeft aangetoond dat zowel gevoelige en betrouwbare voor het opsporen van ROS. De tijd vervallen toepasselijkheid van L-012-vergemakkelijkt imaging biedt waardevolle informatie over inflammatoire processen terwijl het verminderen van de noodzaak van offer en over het algemeen het aantal studie dieren te verminderen. Hier beschrijven we een protocol met behulp van L-012-vergemakkelijkt in vivo imaging om te kwantificeren oxidatieve stress in een model van excisional wondgenezing met behulp van diabetesmuizen met lokaal disfunctionele Nrf2/Keap1.

Drie dagen na het maken van bilaterale wonden volgens een gevestigde excisional wond model (figuur 1A), bevinden diabetesmuizen zich in de beeldvorming zaal. Een eerste foto en een zekere mate van bioluminescentie worden genomen vóór injectie van L-012 voor achtergrond signaal (figuur 1B). Na intraperitoneale injectie met de oplossing van de L-012, de muizen worden verplaatst in de kamer en bioluminescentie is gevisualiseerd in...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model at JoVE.com

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

Een niet-invasieve in vivo imaging protocol dat is gestroomlijnd en kosteneffectieve, beschrijven we met behulp van L-012, een chemiluminescentie luminol-analoog, om te visualiseren en te kwantificeren van reactieve zuurstof soorten (ROS) gegenereerd in een excisional wond muismodel.

In Vivo Beeldvorming van reactieve zuurstof soorten in een RattenUitrustingen wond Model

The generation of reactive oxygen species (ROS) is a hallmark of inflammatory processes, but in excess, oxidative stress is widely implicated in various ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen in het gebied weefselherstel en regeneratie over de associaties tussen de cytoprotectieve paden, oxidatieve stress en de wondgenezingsreactie. Het belangrijkste voordeel van deze krachtige techniek is dat u reactieve zuurstofsoorten in een wond in real-time meten om hun impact op weefselregeneratie te bepalen. Het aantonen van de procedure met mij zal Jennifer Kwong, een onderzoeksassistent in mijn laboratorium.Gebruik een glucometer om de bloedglucose van elke verdoofde acht tot 12 weken oude diabetische muis te meten. En gebruik een haartrimmer en ontharingscrème om het dorsale haar van het eerste dier te verwijderen. Gebruik alcoholdoekjes twee keer om de blootgestelde huid schoon te maken en het dier te draperen, zodat alleen het chirurgische gebied wordt blootgesteld.Wanneer de alcohol is gedroogd, gebruik steriele 10 millimeter biopsie stoten om twee, 10 millimeter volledige dikte wonden die zich uitstrekt door de panniculus carnosus volgens een gevestigde excisional wond healing techniek te creëren. Gebruik een 0,5 millimeter dikke siliconen plaat met 10 millimeter cirkelvormige uitsparingen om de wonden open te spuiten en de stints vast te stellen met onderbroken 4/0 zijden hechtingen. Plaats vervolgens de muizen op een warmtekussen met monitoring tot volledig herstel, voordat u terugkeert naar zijn individuele kooi, waarbij papieren handdoeken twee weken lang als extra nestmateriaal worden verstrekt.De volgende dag, breng ofwel controle onzin kleine storende RNA gel of experimentele kleine storende Keap1 gel aan de bovenkant van de wond van elk dier en wikkel elke romp met transparante film dressing om de gel op zijn plaats te houden, terwijl het verlaten van de ledematen vrij. Laad op dag drie van het experiment een spuit van één millimeter uitgerust met een 27-gauge naald met vers bereide L-012-oplossing en wikkel de spuit om de oplossing tegen licht te beschermen. Om de wonden in beeld te brengen, verwijder je voorzichtig de transparante filmdressing van elk van de muizen zonder de wonden te storen en plaats je de muizen in de beeldkamer van een bioluminescentiebeeldvormingssysteem.Stel de instroom van het beeldsysteem en de zuurstofniveaus van de inductiekamer in op één liter per minuut en beeld de muizen door bioluminescentie en helder veld bij baseline. Veeg vervolgens de buiken met alcoholdoekjes en injecteer vervolgens vijf milligram L-012-oplossing per 200 gram lichaamsgewicht, IP, in elke muis zodra de alcohol is opgedroogd. Het injecteren van de L-012-oplossing zonder de wonden op de rughuid te verstoren is van cruciaal belang, omdat elke vervorming de wondhelling en gegevensinterpretatie zal beïnvloeden.Zorg ervoor dat het dier zich vóór de injectie stevig in rugvermogen bevindt. Plaats de muizen onmiddellijk na de injectie terug in hun respectievelijke locaties in de beeldkamer en beeld de dieren gedurende één minuut om de vier minuten gedurende een beeldtijd van 60 minuten, waarbij de 10 millimeter wond wordt gedefinieerd als het gebied dat van belang is voor het bepalen van het niveau van reactieve zuurstofsoorten. Plaats vervolgens de muizen op een warmtekussen met controle tot volledig herstel voordat u de dieren terugverplaatst naar hun individuele kooien.Drie dagen na het maken van bilaterale wonden volgens het gevestigde excisionale wondmodel wordt geen bioluminescentie waargenomen vóór de L-012-injectie. Na intraperintoneal L-012-oplossingsinjectie wordt bioluminescentie waargenomen in de gebieden van de wond waar reactieve zuurstofsoorten worden gedetecteerd. Opname van de bioluminescentie gedurende een minuut om de vier tot vijf minuten in de loop van 60 minuten toont de bioluminescente verzadiging van het gebied van belang in de tijd, met de optimale beeldvorming tijd te bereiken volledige L-012 verzadiging waargenomen op ongeveer 50 minuten.De bioluminescentie in elk wondgebied van belang voor en na L-012-injectie in onzin kleine storende RNA behandeld of Keap1 kleine storende RNA behandelde muizen kunnen vervolgens worden berekend door het totale aantal lichtintensiteit door het gebied te delen. Analyse van dag 10 wondweefselsecties om de nauwkeurigheid van reactieve zuurstofsoorten niveaumeting door H&E-vlekken te bevestigen, onthult een verminderde cellulaire infiltratie in kleine storende Keap1 behandelde wonden in vergelijking met kleine storende onzin behandelde weefsels, wat wijst op een verminderde ontstekingmorfologie in de experimentele gelbehandelde dieren. Analyse van de immuno-reactiviteit van F4/80, een eiwitmacrofmarker op wondweefselsecties, wijst op een verminderd aantal macrofagen in kleine storende Keap1 behandelde wonden in vergelijking met kleine storende onzin behandelde wonden, wat de geldigheid van deze methode verder onderstreept.Bij het proberen van deze procedure, zorg ervoor dat de L-012 niet is verlopen en om de oplossing te roeren op een plaats beschermd tegen licht. Na deze procedure kunnen gerichte sondes en immuno-assay gebaseerde methoden worden gebruikt om de subcellulaire lokalisatie van reactieve zuurstofsoorten en hun correleert te bestuderen, waardoor een snelle beoordeling van interventies en mechanismen mogelijk is die de redux-statistieken van wonden beïnvloeden.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In vivo imaging van transgene Leishmania parasieten in een Live Host

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Niet-invasieve beeldvorming van Leukocyte Homing en migratie In vivo</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Inductie van Graft-versus-host ziekte en<em&gt; In Vivo</em&gt; T-cel monitoren door gebruik van een MHC-matched muizenmodel

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Total Protein Extraction and 2-D Gel Electrophoresis Methods for Burkholderia Species

Total Protein Extraction and 2-D Gel Electrophoresis Methods for Burkholderia Species

Totaal Eiwitextractie en 2-D gelelektroforese Werkwijzen voor<em&gt; Burkholderia</em&gt; Soorten

The investigation of  the intracellular protein levels of bacterial species is of importance to  understanding the pathogenic mechanisms of diseases ...

Femur Window Chamber Model for In Vivo Cell Tracking in the Murine Bone Marrow

Femur Window Chamber Model for In Vivo Cell Tracking in the Murine Bone Marrow

Dijbeen Window Chamber Model voor<em&gt; In Vivo</em&gt; Cell Tracking in het Muizen Bone Marrow

Bone marrow is a complex organ that contains various hematopoietic and non-hematopoietic cells. These cells are involved in many biological processes, ...

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo  Cell Trafficking by PET/CT

Muizen-lymfocyt Labeling door<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-Antibody Receptor targeting voor<em&gt; In Vivo</em&gt; Celverkeer PET / CT

This protocol illustrates the production of 64Cu and the chelator conjugation/radiolabeling of a monoclonal antibody (mAb) followed by murine lymphocyte ...

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Aan de kant van licht komen: In Vivo Monitoring van Pseudomonas aeruginosa Biofilm infecties in chronische wonden in een diabetische haarloze lymfkliertest Model

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. ...

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

Een vertraagde inenting model van chronische Pseudomonas aeruginosa wondinfectie

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is a major nosocomial pathogen of increasing relevance to human health and disease, particularly in the setting of ...

Live Imaging of Chemokine Receptors in Zebrafish Neutrophils During Wound Responses

Live imaging van chemokinereceptoren bij zebravisneutrofielen tijdens wondreacties

Leukocyte guidance by chemical gradients is essential for immune responses. Neutrophils are the first cells to be recruited to sites of tissue damage ...

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

Terugkerende Escherichia coli urineweginfectie veroorzaakt door Gardnerella vaginalis blaasblootstelling bij muizen

Recurrent urinary tract infections (rUTI) caused by uropathogenic Escherichia coli (UPEC) are common and costly. Previous articles describing models of ...