Name: in vivo imaging of reactive oxygen species in a murine wound model
Uploaded: 2018-11-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model at JoVE.com

אנחנו אסירי תודה עד היסוד פרה הדמיה בית הספר NYU לרפואה, עם תודה אורלנדו אריסטיסאל יוסוף Zaim Wadghiri מיוחדת הליבה הוא משאב משותף נתמכת באופן חלקי על ידי לורה, יצחק פרלמוטר סרטן מרכז תמיכה גרנט NIH/NCI 5P30CA016087 NIBIB ביו טכנולוגיה משאב מרכז גרנט NIH P41 EB017183. עבודה זו נתמך על ידי האגודה האמריקנית לסוכרת "מסלול כדי סוכרת להפסיק" בבירה [גרנט מספר 1-16-אייס-08], NYU להחיל מחקר תמיכה לקרן יחסי ציבור

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה של ניו יורק הספר לרפואה של אוניברסיטת. כל העכברים שוכנות מאחורי מחסום, כל אנשי הצוות ללבוש ציוד מגן אישי המתאים.
1. יום 0: הכנת מודל מאתר של ריפוי הפצע Excisional
<ol><li>עזים ומתנגד בעכברים סוכרתיים (Leprdb/db...

<ol>
	<li>Nishinaka, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+sensitive+chemiluminescence+probe,+L-012,+for+measuring+the+production+of+superoxide+anion+by+cells.">A new sensitive chemiluminescence probe, L-012, for measuring the production of superoxide anion by cells.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 193 (2), 554-559 (1993).</li><li>Daiber, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+NAD(P)H+oxidase-derived+superoxide+with+the+luminol+analogue+L-012.">Measurement of NAD(P)H oxidase-derived superoxide with the luminol analogue L-012.</a> Free Radical Biology and Medicine. 36 (1), 101-111 (2004).</li><li>Imada, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+reactive+oxygen+species+generated+by+neutrophils+using+a+chemiluminescence+probe+L-012.">Analysis of reactive oxygen species generated by neutrophils using a chemiluminescence probe L-012.</a> Analytical Biochemistry. 271 (1), 53-58 (1999).</li><li>Sohn, H. Y., Gloe, T., Keller, M., Schoenafinger, K., Pohl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitive+superoxide+detection+in+vascular+cells+by+the+new+chemiluminescence+dye+L-012.">Sensitive superoxide detection in vascular cells by the new chemiluminescence dye L-012.</a> Journal of Vascular Research. 36 (6), 456-464 (1999).</li><li>Fuchs, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+Hypoxia+PET+Imaging+Quantifies+the+Severity+of+Arthritic+Joint+Inflammation+in+Line+with+Overexpression+of+Hypoxia-Inducible+Factor+and+Enhanced+Reactive+Oxygen+Species+Generation.">In vivo Hypoxia PET Imaging Quantifies the Severity of Arthritic Joint Inflammation in Line with Overexpression of Hypoxia-Inducible Factor and Enhanced Reactive Oxygen Species Generation.</a> The Journal of Nuclear Medicine. 58 (5), 853-860 (2017).</li><li>Asghar, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+reactive+oxygen+and+nitrogen+species+in+murine+colitis.">In vivo imaging of reactive oxygen and nitrogen species in murine colitis.</a> Inflammatory Bowel Diseases. 20 (8), 1435-1447 (2014).</li><li>Galiano, R. D., Michaels, J. t., Dobryansky, M., Levine, J. P., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+and+reproducible+murine+model+of+excisional+wound+healing.">Quantitative and reproducible murine model of excisional wound healing.</a> Wound Repair and Regeneration. 12 (4), 485-492 (2004).</li><li>Soares, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoration+of+Nrf2+Signaling+Normalizes+the+Regenerative+Niche.">Restoration of Nrf2 Signaling Normalizes the Regenerative Niche.</a> Diabetes. 65 (3), 633-646 (2016).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+ROS+signaling+in+cells+and+animals.">Imaging ROS signaling in cells and animals.</a> Journal of Molecular Medicine. 91 (8), 917-927 (2013).</li><li>Kielland, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+reactive+oxygen+and+nitrogen+species+in+inflammation+using+the+luminescent+probe+L-012.">In vivo imaging of reactive oxygen and nitrogen species in inflammation using the luminescent probe L-012.</a> Free Radical Biology and Medicine. 47 (6), 760-766 (2009).</li><li>Balke, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+Oxidative+Cellular+Stress+Induced+by+Nanoparticles+in+the+Subcytotoxic+Range+Using+Fluorescence+Lifetime+Imaging.">Visualizing Oxidative Cellular Stress Induced by Nanoparticles in the Subcytotoxic Range Using Fluorescence Lifetime Imaging.</a> Small. , (2018).</li><li>Zielonka, J., Lambeth, J. D., Kalyanaraman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+use+of+L-012,+a+luminol-based+chemiluminescent+probe,+for+detecting+superoxide+and+identifying+inhibitors+of+NADPH+oxidase:+a+reevaluation.">On the use of L-012, a luminol-based chemiluminescent probe, for detecting superoxide and identifying inhibitors of NADPH oxidase: a reevaluation.</a> Free Radical Biology and Medicine. 65, 1310-1314 (2013).</li><li>Dikalov, S. I., Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+detection+of+mitochondrial+and+cellular+reactive+oxygen+species.">Methods for detection of mitochondrial and cellular reactive oxygen species.</a> Antioxidants &amp; Redox Signalling. 20 (2), 372-382 (2014).</li><li>Rabbani, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+Nrf2+activation+therapy+with+RTA+408+enhances+regenerative+capacity+of+diabetic+wounds.">Targeted Nrf2 activation therapy with RTA 408 enhances regenerative capacity of diabetic wounds.</a> Diabetes Research and Clinical Practice. 139, 11-23 (2018).</li><li>Rabbani, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+lipoproteoplex+delivers+Keap1+siRNA+based+gene+therapy+to+accelerate+diabetic+wound+healing.">Novel lipoproteoplex delivers Keap1 siRNA based gene therapy to accelerate diabetic wound healing.</a> Biomaterials. 132, 1-15 (2017).</li></ol>

טכניקות נפוצות למדידת ROS מוגבלות פרוטוקולים מורכבים הדורשים שאיבת רקמות או בדומה לכך טכניקות פולשניות. בשנים האחרונות, מדידות של סטרס חמצוני דווחו על בסיס שיטות הדמיה חדשניות, ובכך לאפשר הערכות ייתכן9,10,11. L-012 יש מספר יתרונות כמו בדיקה chemil...

מטבוליטים החמצן שנוצר באמצעות תהליכים דלקתיים לתרום cascades איתות שונים, כמו גם שינוי ההרסני של מרכיבי התא1. ניצול טכניקות רגישות וספציפיות למדוד ROS חיוני ללמוד תהליכים דלקתיים, אפיון השפעת סטרס חמצוני. דימות in vivo יקר בשל יכולתה לספק נתונים יכולות דינמיות ברקמת החיים. L-012 שווה בדיקה chemiluminescent סינתטי, כי היא רגישה מאוד עבור אניונים סופראוקסיד מייצרת עוצמת אור גבוה יותר מאשר אחרים הגששים פלואורסצנט תאים, רקמות, ו דם1,2,3, 4. זה כבר בהצלחה מועסקים עבור הדמיה ויוו במודלים מאתר ללמוד מספר מחלות דלקתיות, כולל דלקת מפרקים ו קוליטיס5,6. זה טרם ישתלב פציעה עורית הוקמה ריפוי מודל. מדידה של ROS שנוצר רלוונטי באותה מידה להעריך את ההתקדמות של ריפוי הפצע בתנאים שונים. הרגישות ואת הטבע לא פולשנית של שיטה זו הופכת טכניקה המבטיחים לימוד ריפוי הפצע על פני דגמים מאתר.
Nrf2 הוא מנהל התקן הגדולות של תגובת חמצון, גורם תעתיק עם ירידה לפרטים לרכיב נוגד חמצון תגובה (הם) נפוצה באזורים המקדם של אנזימים נוגדי חמצון מספר8. בהיעדרו של סטרס חמצוני, Nrf2 הוא מבודד בציטופלסמה על-ידי Keap1, מה שגורם לאחר מכן שלה ubiquitination והשפלה. חוסר איזון של הנתיב Nrf2/Keap1 היה מעורב חמצון-חיזור בלתי הולם הומאוסטזה ומתת ריפוי הפצע מושהית בסביבה של לחץ חימצוני מוגבר9. אנחנו בעבר הראו כי דיכוי Keap1 מעוררת פעילות Nrf2 מוגברת מקדם הצלה של ריפוי פצעים עורית פיפטות ב סוכרת פצעים9.
כאן נתאר פרוטוקול אשר מנצל ביולומינסנציה L 012-בסיוע הדמיה כדי למדוד רמות ROS במודל הפצע עורית excisional הריפוי, אשר הוא קריטי עבור הדגשת הקשר בין ROS לבין ריפוי הפצע. טכניקה זו מדגים שינויים בזמן אמת עומס חמצוני בתוך הפצעים ואת הפריפריה הקרובה. יתר על כן, שיטה זו מאפשרת להערכה מהירה של התערבויות ומנגנונים טיפול חמצון-חיזור זה משפיע. כאן אנו משתמשים מודל של נוקאאוט אותו1 לשיקום חמצון-חיזור הומאוסטזיס כדי להעריך את הישימות של האסטרטגיה שלנו. מכיוון הטכניקה שלנו אינה פולשנית הפצעים הם ללא הפרעה, אותה חיה יכול לשמש עבור נוסף מאשרות ניתוחים על בסיס היסטולוגיה או תא lysates.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="618">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:265px;">BKS.Cg-Dock7m+/+ Leprdb/J mice</td>
			<td style="width:164px;">Jackson Laboratories</td>
			<td style="width:111px;">000642</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">13 cm x 18 cm Silicone sheet (0.6 mm)</td>
			<td>Sigma Aldrich&#160;</td>
			<td>665581</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">3M Tegaderm Transparent Film Dressings</td>
			<td>3M</td>
			<td>88-1626W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lipofectamine 2000 Transfection Reagent</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td>11668027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Keap1 Stealth siRNA</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>1299001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Silencer negative control&#160;</td>
			<td>Thermofisher Scientific&#160;</td>
			<td>AM4635</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Opti-MEM Reduced Serum</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11058021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">DPBS</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>14040133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Methyl-cellulose&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>9004-67-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">L-012</td>
			<td>Wako Chemicals</td>
			<td>120-04891</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">IVIS Lumina III XR In Vivo Imaging System&#160;</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo imaging of reactive oxygen species in a murine wound model

הדור של מינים חמצן תגובתי (ROS) מהווה סימן היכר של תהליכים דלקתיים, אך עודף, סטרס חמצוני הוא נרחב בהפרות פתולוגיות שונות כגון סרטן, טרשת עורקים, סכרת. אנחנו בעבר הראו כי תפקוד של הגורם הגרעיני (נגזר erythroid 2)-אוהב 2 (Nrf2) / כמו Kelch erythroid תא, נגזר חלבון 1 (אותו1) איתות לשביל מוביל לחוסר איזון ROS קיצוני במהלך עורית פצע ריפוי סוכרת. מאז רמות ROS הן אינדיקטור חשוב של התקדמות של ריפוי הפצע, כימות ספציפי ומדויק בטכניקות הם בעלי ערך. תוארו מספר במבחנה מבחני למדוד ROS ב תאים ורקמות; עם זאת, הם רק מספקים מידה מצטברות יחיד עבור דגימה. לאחרונה, הפיתוח של מחוונים מבוססי חלבונים ושל שיטות הדמיה אפשרו עבור ניתוחים ייתכן ייחודי. L-012 (C13H8ClN4נאו2) היא נגזרת הלומינול יכול לשמש הן בתוך vivo והן במבחנה chemiluminescent זיהוי של ROS שנוצר על ידי אוקסידאז NAPDH. L-012 פולטת אות חזק יותר מאשר אחרים הגששים פלורסנט, הוכח להיות רגיש וגם אמינה לגילוי ROS. זמן לשגות תחולתה של L-012-ידי הדמיה מספק מידע חשוב אודות תהליכים דלקתיים תוך כדי הקטנת הצורך להקריב, הכולל הפחתת מספר חיות מחקר. כאן, אנו מתארים את פרוטוקול ניצול L-012-ידי ויוו הדמיה לכמת סטרס חמצוני במודל של ריפוי הפצע excisional שימוש בעכברים סוכרתיים עם Nrf2 לא מתפקדת באופן מקומי/Keap1.

שלושה ימים לאחר יצירת פצעים דו צדדיים על פי מודל הפצע excisional הוקמה (איור 1 א'), בעכברים סוכרתיים ממוקמים בבית הבליעה הדמיה. תצלום הראשונית ואת מידת ביולומינסנציה נלקחים לפני הזרקה של L-012 על רקע אות (איור 1B). בעקבות הזרקת בקרום הבטן עם הפתרון L-01...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model at JoVE.com

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

אנו מתארים יישום לא פולשנית ויוו הדמיה פרוטוקול מאופין בעיצוב חסכוני, ניצול L-012, chemiluminescent הלומינול-אנלוגי, כדי להמחיש ולכמת מינים חמצן תגובתי (ROS) שנוצר במודל של עכברים excisional פצע.

אין ויוו הדמיה של מינים חמצן תגובתי ב מאתר פצע מודל

The generation of reactive oxygen species (ROS) is a hallmark of inflammatory processes, but in excess, oxidative stress is widely implicated in various ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום תיקון רקמות והתחדשות על הקשרים בין המסלולים cytoprotective, מתח חמצוני, ואת התגובה ריפוי הפצע. היתרון העיקרי של טכניקה רבת עוצמה זו הוא שאתה יכול למדוד מינים חמצן תגובתי בפצע, בזמן אמת, כדי לקבוע את השפעתם על התחדשות רקמות. הפגנת ההליך איתי תהיה ג'ניפר קוונג, עוזרת מחקר במעבדה שלי.השתמש בגלוקומטר כדי למדוד את רמת הגלוקוז בדם של כל עכבר סוכרתי הרדמה בן שמונה עד 12 שבועות. ולהשתמש גוזם שיער קרם depilatory כדי להסיר את השיער הגבי מן החיה הראשונה. השתמשו במגבוני אלכוהול פעמיים כדי לנקות את העור החשוף ולעטף את החיה כך שרק האזור הכירורגי ייחשף.כאשר האלכוהול התייבש, להשתמש אגרופים ביופסיה סטרילית 10 מילימטר כדי ליצור שניים, 10 מילימטר פצעי עובי מלא המשתרעים דרך panniculus קרנוסוס על פי טכניקת ריפוי פצע כריתה הוקמה היטב. השתמש גיליון סיליקון עבה 0.5 מילימטר עם 10 מילימטר חתכים עגולים כדי לפזר את הפצעים פתוחים ולאבטח את התקופות עם תפרים משי מופרע 4/0. לאחר מכן מניחים את העכברים על כרית חום עם ניטור עד להחלמה מלאה, לפני החזרה לכלוב האישי שלה, מתן מגבות נייר כחומר קינון נוסף במשך שבועיים.למחרת, להחיל גם לשלוט שטויות קטן מפריע ג'ל RNA או ניסיוני קטן מפריע Keap1 ג'ל על החלק העליון של הפצע של כל בעל חיים לעטוף כל פלג גוף עליון עם רוטב סרט שקוף כדי לשמור על הג'ל במקום תוך השארת הגפיים חופשיות. ביום השלישי של הניסוי, לטעון מזרק מילימטר אחד מצויד מחט 27 מד עם פתרון L-012 מוכן טרי לעטוף את המזרק כדי להגן על הפתרון מפני אור. כדי לדמיין את הפצעים, הסר בעדינות את רוטב הסרט השקוף מכל אחד מהעכברים מבלי להפריע לפצעים והכנס את העכברים לתא ההדמיה של מערכת הדמיה ביולומינציה.הגדר את זרימת מערכת ההדמיה ואת רמות החמצן בתא אינדוקציה לליטר אחד לדקה ותדמיין את העכברים על ידי ביולומינציה ושדה בהיר בבסיס. לאחר מכן, לנגב את הבטן עם מגבונים אלכוהול ואז להזריק חמישה מיליגרם של פתרון L-012 לכל 200 גרם משקל גוף, IP, לתוך כל עכבר פעם האלכוהול התייבש. הזרקת פתרון L-012 מבלי להפריע לפצעים על העור הגבי היא קריטית, כי כל עיוות ישפיע על מסלול ריפוי הפצע ופרשנות הנתונים.ודא כי החיה היא בבטחה בהפוגה הגבית לפני הזריקה. מיד לאחר ההזרקה, החזירו את העכברים למקומם בתא ההדמיה ודמיינו את בעלי החיים במשך דקה אחת כל ארבע דקות במשך 60 דקות, והגדירו את הפצע 10 מילימטר כאזור העניין בקביעת רמת מיני החמצן תגובתי. לאחר מכן מניחים את העכברים על כרית חום עם ניטור עד החלמה מלאה לפני החזרת בעלי החיים לכלובים האישיים שלהם.שלושה ימים לאחר יצירת פצעים דו-צדדיים על פי מודל הפצע כריתה הוקמה, אין bioluminescence נצפתה לפני הזרקת L-012. בעקבות הזרקת פתרון L-012 תוך-אישית, ביולומינציה נצפית באזורי הפצע שבהם מזוהים מיני חמצן תגובתי. הקלטת הביולומינציה במשך דקה אחת כל ארבע עד חמש דקות במהלך 60 דקות מדגימה את הרוויה הביולומינסנטית של אזור העניין לאורך זמן, עם זמן ההדמיה האופטימלי להגיע לרוויה L-012 מלאה שנצפתה בערך 50 דקות.הביולומינציה בכל אזור פצע של עניין לפני ואחרי הזרקת L-012 לתוך שטויות RNA מפריע קטן מטופלים או Keap1 עכברים קטנים מפריעים RNA מטופלים אז ניתן לחשב על ידי חלוקת הספירה הכוללת של עוצמת האור על ידי האזור. ניתוח של יום 10 מקטעי רקמת פצע כדי לאשר את הדיוק של מדידת רמת מיני חמצן תגובתי על ידי כתמי H&E מגלה חדירה תאית מופחתת לפצעים קטנים המפריעים Keap1 מטופלים בהשוואה לרקמות קטנות שטופלו בשטויות מפריעות, מה שמצביע על מורפולוגיה דלקתית מופחתת בבעלי החיים הניסיוניים שטופלו בג'ל. ניתוח האימונו-תגובתיות של F4/80, סמן מקרופאג חלבון על מקטעי רקמת פצע, מצביע על מספר מופחת של מקרופאגים בפצעים קטנים שטופלו ב- Keap1 בהשוואה לפצעים קטנים שטופלו בשטויות מפריעות, מה שמדגיש עוד יותר את תוקפה של שיטה זו.בעת ניסיון הליך זה, הקפד לאשר L-012 לא פג ולעורר את הפתרון במקום מוגן מפני אור. בעקבות הליך זה, ניתן להשתמש בבדיקות ממוקדות ובשיטות מבוססות אימונו-בדיקה כדי לחקור את לוקליזציה תת-תאית של מיני חמצן תגובתי ואת קורלציה שלהם, המאפשר הערכה מהירה של התערבויות ומנגנונים המשפיעים על הנתונים הסטטיסטיים redux של פצעים.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

בתחום ההדמיה vivo של טפילים טראנסגנטי שושנת יריחו שורה חיים

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

לא פולשני הדמיה של ביות ליקוציט והגירה In vivo</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

אינדוקציה של מחלת שתל נגד מארח ו<em&gt; In Vivo</em&gt; ניטור תא T תוך שימוש במודל Murine MHC התאמה

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Total Protein Extraction and 2-D Gel Electrophoresis Methods for Burkholderia Species

Total Protein Extraction and 2-D Gel Electrophoresis Methods for Burkholderia Species

הפקת חלבון סה&quot;כ ו2-D שיטות ג&#39;ל אלקטרופורזה עבור<em&gt; Burkholderia</em&gt; מינים

The investigation of  the intracellular protein levels of bacterial species is of importance to  understanding the pathogenic mechanisms of diseases ...

Femur Window Chamber Model for In Vivo Cell Tracking in the Murine Bone Marrow

Femur Window Chamber Model for In Vivo Cell Tracking in the Murine Bone Marrow

חלון ירך דגם קאמרי<em&gt; In vivo</em&gt; מעקב תא Murine מח עצם

Bone marrow is a complex organ that contains various hematopoietic and non-hematopoietic cells. These cells are involved in many biological processes, ...

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo  Cell Trafficking by PET/CT

Murine לימפוציטים תיוג ידי<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-נוגדן קולטן מיקוד עבור<em&gt; In vivo</em&gt; סחר Cell על ידי PET / CT

This protocol illustrates the production of 64Cu and the chelator conjugation/radiolabeling of a monoclonal antibody (mAb) followed by murine lymphocyte ...

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

לצידו. אור: בויוו ניטור של דלקות Biofilm Pseudomonas aeruginosa לפצעים כרוניים במודל מאתר של שיער סוכרתית

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. ...

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

A Delayed Inoculation Model of Chronic Pseudomonas aeruginosa Wound Infection

מדבקת החיסון נגד הידבקות כרונית בנגיף הדלקת בפצע

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is a major nosocomial pathogen of increasing relevance to human health and disease, particularly in the setting of ...

Live Imaging of Chemokine Receptors in Zebrafish Neutrophils During Wound Responses

הדמיה חיה של קולטני כימוקין בנויטרופילים של דגי זברה במהלך תגובות לפצעים

Leukocyte guidance by chemical gradients is essential for immune responses. Neutrophils are the first cells to be recruited to sites of tissue damage ...

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

זיהום חוזר בדרכי השתן של Escherichia coli שנגרם על ידי גרדנרלה וגינליס חשיפה לשלפוחית השתן בעכברים

Recurrent urinary tract infections (rUTI) caused by uropathogenic Escherichia coli (UPEC) are common and costly. Previous articles describing models of ...