Name: assessing neuroprotective effects of glycyrrhizae radix et rhizoma extract using a transient middle cerebral artery occlusion mouse model
Uploaded: 2018-12-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model at JoVE.com

غير قابل للتطبيق.

جميع الإجراءات التي تنطوي على الحيوانات بموافقة لجنة الأخلاقيات التابعة لجامعة بوسان الوطنية (رقم الاعتماد، بنو-2016-1087). ويرد في الشكل 1نظرة عامة رسومية لهذه الدراسة.
1-إعداد وإدارة لجر
ملاحظة: الموارد الوراثية المستخدمة في هذه الدراسة تم شراؤه?...

<ol>
	<li>Bejot, Y., Delpont, B., Giroud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rising+stroke+incidence+in+young+adults:+more+epidemiological+evidence,+more+questions+to+be+answered.">Rising stroke incidence in young adults: more epidemiological evidence, more questions to be answered.</a> Journal of the American Heart Association. 11 (5), (2016).</li><li>Hadadha, M., Vakili, A., Bandegi, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+the+inhibition+of+hydrogen+sulfide+synthesis+on+ischemic+injury+and+oxidative+stress+biomarkers+in+a+transient+model+of+focal+cerebral+ischemia+in+rats.">Effect of the inhibition of hydrogen sulfide synthesis on ischemic injury and oxidative stress biomarkers in a transient model of focal cerebral ischemia in rats.</a> Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 24 (12), 2676-2684 (2015).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ischemic+stroke.">Animal models of ischemic stroke.</a> Article in Handbook of Clinical Neurology. 92, 43-66 (2009).</li><li>Kim, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+of+Stroke.">Animal Models of Stroke.</a> Brain and Neurorehabilitation. 4 (1), 1-11 (2011).</li><li>Rizzato, G., Scalabrin, E., Radaelli, M., Capodaglio, G., Piccolo, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+exploration+of+licorice+metabolome.">A new exploration of licorice metabolome.</a> Food Chemistry. 221, 959-968 (2017).</li><li>Zhu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+determination+of+flavonoids+in+licorice+and+comparison+of+three+licorice+species.">Rapid determination of flavonoids in licorice and comparison of three licorice species.</a> Journal of Separation Science. 39 (3), 473-482 (2016).</li><li>Ota, M., Mikage, M., Cai, S. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herbological+study+on+the+medicinal+effects+of+roasted+licorice+and+honey-roasted+licorice.">Herbological study on the medicinal effects of roasted licorice and honey-roasted licorice.</a> Yakushigaku Zasshi. 50 (1), 38-45 (2015).</li><li>Lim, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Licorice+pretreatment+protects+against+brain+damage+induced+by+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice.">Licorice pretreatment protects against brain damage induced by middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Journal of Medicinal Food. 21 (5), 474-480 (2018).</li><li>Koizumi, J. Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.">Experimental studies of ischemic brain edema.</a> Nosotchu. 8 (1), 1-8 (1986).</li><li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematoxylin+and+eosin+staining+of+tissue+and+cell+sections.">Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2008, (2008).</li><li>Zhu, Y., Liu, F., Zou, X., Torbey, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+unbiased+estimation+of+neuronal+number+in+the+rat+hippocampus+with+different+staining+methods.">Comparison of unbiased estimation of neuronal number in the rat hippocampus with different staining methods.</a> Journal of Neuroscience Methods. 254, 73-79 (2005).</li><li>Alberts, M. J., Ovbiagele, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+strategies+for+ischemic+stroke+prevention:+role+of+multimodal+combination+therapies.">Current strategies for ischemic stroke prevention: role of multimodal combination therapies.</a> Journal of Neurology. 254 (10), 1414-1426 (2007).</li><li>Pinto, A., Tuttolomondo, A., Di Raimondo, D., Fernandez, P., Licata, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrovascular+risk+factors+and+clinical+classification+of+strokes.">Cerebrovascular risk factors and clinical classification of strokes.</a> Seminars in Vascular Medicine. 4 (3), 287-303 (2004).</li><li>Barlow, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+the+brain+regions+associated+with+acute+spasticity+in+patients+diagnosed+with+an+ischemic+stroke.">Identifying the brain regions associated with acute spasticity in patients diagnosed with an ischemic stroke.</a> Somatosensory and Motor Research. 33 (2), 1-8 (2016).</li><li>Roth, S., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke+research+at+the+crossroads+-+where+are+we+heading.">Stroke research at the crossroads - where are we heading.</a> Swiss Medical Weekly. 146, 14329 (2016).</li><li>Feuerstein, G. Z., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke.">Animal models of stroke.</a> Molecular Medicine Today. 6 (3), 133-135 (2000).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9 (5), 541-551 (2014).</li><li>Kumar, A., Gupta Aakriti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+an+update.">A review on animal models of stroke: an update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>O'Collins, V. E., Donnan, G. A., Howells, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+animal+models+of+stroke.">History of animal models of stroke.</a> International Journal of Stroke. 6 (1), 77-78 (2011).</li><li>Ji, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioactive+constituents+of+Glycyrrhiza+uralensis+(licorice):+discovery+of+the+effective+components+of+a+traditional+herbal+medicine.">Bioactive constituents of Glycyrrhiza uralensis (licorice): discovery of the effective components of a traditional herbal medicine.</a> Journal of Natural Products. 79 (2), 281-292 (2016).</li><li>Yang, R., Wang, L. Q., Yuan, B. C., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pharmacological+activities+of+licorice.">The pharmacological activities of licorice.</a> Planta Medica. 81 (18), 1654-1669 (2015).</li><li>Yang, R., Yuan, B. C., Ma, Y. S., Zhou, S., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+anti-inflammatory+activity+of+licorice,+a+widely+used+Chinese+herb.">The anti-inflammatory activity of licorice, a widely used Chinese herb.</a> Pharmaceutical Biology. 55 (1), 5-18 (2017).</li></ol>

مع تزايد انتشار أمراض التمثيل الغذائي مثل ارتفاع ضغط الدم المزمن، ومرض السكري، والدهون، وعوامل الخطر الرئيسية للسكتة الدماغية، منع السكتة الدماغية والعلاج قد أصبحت مجالاً هاما للبحوث الطبية12، 13-العجز في اللغة والحركة بعد السكتة دماغية ترتبط بقوة مع درجة ...

تلف في المخ بسبب الاسكيمية وضخه من تدفق الدم الدماغي يؤدي إلى موت الخلايا العصبية وفقدان أنسجة الدماغ. وتواصل هذا النوع من تلف الدماغ تزيد مع تزايد انتشار الأمراض المخية الوعائية نتيجة لانتشار الأمراض الأيضية مثل السمنة وارتفاع ضغط الدم ومرض البول السكري1،2. العدد المطلق للمرضى المسنين مع السكتة الدماغية زاد زيادة كبيرة في جميع أنحاء العالم، وتكلفة الرعاية الطبية لهؤلاء المرضى، الذين كثيرا ما تترك ذوي الإعاقة طويلة الأمد، عبء مجتمعية رئيسية. ولذلك، ينبغي تخفيف الإعاقات الثانوية إلى أقصى حد ممكن للحد من العبء الاقتصادي1،2.
نموذج احتشاء دماغي القوارض الأكثر استخداماً هو النموذج (ماكاو) انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCA)، التي تغطي هيئة مكافحة الاحتكارات مع خيوط سوتورينج جراحية المغلفة بالسليكون لمنع تدفق الدم، مما تسبب في إصابة بالسكتة الدماغية3، 4-استخدام خيوط من المواد انسداد يتيح مراقبة انسداد الوقت والدوام عن طريق التلاعب في مدة الإدراج داخل لومينال الشعيرة.
وقد أظهرت الدراسات السابقة أن حتى عندما يتم استخدام نفس نموذج مكاو القوارض، يختلف الحجم الإجمالي لاحتشاء الدماغية بين التجارب، مما تسبب في انخفاض إمكانية تكرار نتائج الدراسات. لتحسين إمكانية تكرار نتائج، نحن الأمثل سمك منت الشعيرة التي استخدمت في التجربة. نتائج دراسة أولية لفترة السكتة الدماغية واحتشاء المستحث أظهرت أن فترة الدماغية أطول من 60 دقيقة سمح المنطقة الحجمي لتلف أنسجة المخ مراعاتها وتقديرها كمياً.
Radix جليسيرهيزاي et ريزوما (GR)، يعرف أيضا باسم عرق السوس، وتتألف من الجذور المجففة وجذور من أورالينسيس غلابرا و العرقسوس غ. قد استخدمت في الطب التقليدي الصيني والكوري لأغراض مختلفة بما في ذلك المضافات الغذائية وطبي5،6،7.
في سابق دراسة8، معالجة المسبقة مع استخراج الميثانول الموارد الوراثية (جريكس) وأظهرت تأثير apoptotic مكافحة الفئران مكاو، بما في ذلك منع كبير من هذا الانخفاض في تعبير البروتين من سرطان الغدد الليمفاوية الخلية-ب 2 (Bcl-2) وخارج كبيرة Bcl (Bcl-xL). أجريت هذه الدراسة تحسين إمكانية تكرار نتائج نموذج الماوس ماكاو التقليدية عن طريق تقييم كفاءته في تحديد ما إذا كان العلاج ما بعد احتشاء بجر فعالية خفض حجم احتشاء في الأضرار الدماغية الناجمة عن ماكاو.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1416px;" width="1417">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:383px;">Glycyrrhizae Radix et Rhizoma</td>
			<td style="width:307px;">Gwangmyoung Pharmaceuticals Co., Korea</td>
			<td style="width:344px;"></td>
			<td style="width:383px;">Glycyrrhizae Radix et Rhizoma</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Qualitative filter paper</td>
			<td>Advantec</td>
			<td style="width:344px;">Filter paper No. 2</td>
			<td>Qualitative filter paper</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D8418-250ML</td>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Syringe filter (0.45 &#181;m)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>CLS431220</td>
			<td>Syringe filter (0.45 &#181;m)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Stereo Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M50</td>
			<td>Stereo Microscope</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ745</td>
			<td>Stereo Microscope</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Laser Doppler</td>
			<td>Moor Instrument</td>
			<td>moorVMS-LDF</td>
			<td>Laser Doppler</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Anesthesia Tabletop Bracket with N2O&#38;O2 Flowmeter System</td>
			<td>Harvard Appratus</td>
			<td>34-1352</td>
			<td>Anesthesia Tabletop Bracket with N2O&#38;O2 Flowmeter System</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Homeothermic Monitoring System</td>
			<td>Harvard Appratus</td>
			<td>55-7020</td>
			<td>Homeothermic Monitoring System</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>Eos-M2</td>
			<td>Digital Camera</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM3050S</td>
			<td>Cryostat</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>Zeiss Axio</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Data Analysis</td>
			<td>Systat Software Inc.</td>
			<td>SigmaPlot version 12</td>
			<td>Data Analysis</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Data Analysis</td>
			<td>NIH Image</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td>Data Analysis</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse diet</td>
			<td>Doo Yeol Biotech</td>
			<td>Standard rodent chow</td>
			<td>Mouse diet</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Isoflurane</td>
			<td>JOONGWAE</td>
			<td>A02104781</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Isoflurane</td>
			<td>TROIKAA</td>
			<td>ISOTROY 100</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Silk suture (4-0 Black silk)&#160;</td>
			<td>AILEE</td>
			<td>SK47510</td>
			<td>Silk suture (4-0 Black silk)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Silk suture (3-0 White silk)&#160;</td>
			<td>Baekjae</td>
			<td>57</td>
			<td>Silk suture (3-0 White silk)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Nylon suture (8-0 monofilament)&#160;</td>
			<td>AILEE</td>
			<td>NB825</td>
			<td>Nylon suture (8-0 monofilament)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8877-25G</td>
			<td>2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Formalin (Formaldehyde solution)</td>
			<td>JUNSEI</td>
			<td>69360-1263 20KG</td>
			<td>Formalin (Formaldehyde solution)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Hematoxylin (Harris Hematoxylin)</td>
			<td>YD Diagnostics</td>
			<td>EasyStain</td>
			<td>Hematoxylin (Harris Hematoxylin)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Eosin (1% Eosin Y Solution)</td>
			<td>MUTO PURE CHEMICALS</td>
			<td>3200-2</td>
			<td>Eosin (1% Eosin Y Solution)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cresyl violet (acetate)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td>Cresyl violet (acetate)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Paraformaldehyde&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:344px;">P6148-1KG</td>
			<td>Paraformaldehyde&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sucrose</td>
			<td>JUNSEI</td>
			<td>31365-0350 1KG</td>
			<td>Sucrose</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Optimum cutting temperature (OCT) compound</td>
			<td>Scigen</td>
			<td>4583</td>
			<td>Optimum cutting temperature (OCT) compound</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Disecting Knife</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10055-12</td>
			<td>Disecting Knife</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">#4 Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11241-30</td>
			<td>#4 Forcep</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">#5 Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td>#5 Forcep</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">#6 Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11260-20</td>
			<td>#6 Forcep</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">#7 Fine Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11274-20</td>
			<td>#7 Fine Forcep</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14001-12</td>
			<td>Surgical Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Extra Fine Bonn Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14084-08</td>
			<td>Extra Fine Bonn Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Moria Pascheff-Wolff Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15371-92</td>
			<td>Moria Pascheff-Wolff Spring Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="31">
			<td height="31" style="height:31px;">Vessel Dilating Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18153-11</td>
			<td>Vessel Dilating Forcep</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing neuroprotective effects of glycyrrhizae radix et rhizoma extract using a transient middle cerebral artery occlusion mouse model

الاسكيمية تليها ضخه تدفق الدم الدماغي بعد السكتة دماغية يؤدي إلى موت الخلايا العصبية وفقدان أنسجة الدماغ. نموذج الحيوان الأكثر استخداماً لدراسة السكتة الدماغية هو النموذج (ماكاو) انسداد الشريان الدماغي الأوسط. وأفادت الدراسات البحثية السابقة احتشاء مختلفة الأحجام حتى عندما كان يستخدم نفس الأنواع الحيوانية التجريبية ماكاو في ظروف مماثلة. ولذلك، قمنا بتطوير طريقة تجريبية محسنة لمعالجة هذا التناقض. الفئران تعرضوا إلى ماكاو باستخدام خيوط كمادة انسداد لتقليد الشروط السكتة الدماغية البشرية وسمك الشعيرة الأمثل لإنشاء المزيد من حجم احتشاء استنساخه. استخراج الفئران تعامل مع ميثانول من الرقم الأساسي جليسيرهيزاي et جذمور (جر) عقب التعريفي السكتة الدماغية أظهرت وحدة تخزين احتشاء مجموع انخفض إلى حد كبير وزيادة عدد الباقين على قيد الحياة الخلايا مقارنة بمجموعة التحكم غير المعالجة. وهذا تعديل البروتوكول التجريبي بنجاح وتكاثر أثبتت الآثار المفيدة لجر على السكتة الدماغية.

من الملاحظ لا احتشاء دماغي في المجموعة العادية تعمل بالشام، بينما يلاحظ في مجموعة مراقبة، مجموعة واسعة نسبيا من المناطق المتضررة. ويلاحظ تدار 300 ملغ/كغ جر في ماكاو نموذج المجموعة، انخفاض يعتد به إحصائيا في المنطقة المتضررة في الفئران (الشكل 2).
<p class="jove_co...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model at JoVE.com

Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model

في هذه الدراسة، قمنا بتعديل أسلوب تجريبي موجود للحصول على المزيد من النتائج استنساخه، بوضع نموذج ماوس (ماكاو) انسداد شريان دماغي الأوسط. الإدارة عن طريق الفم من الرقم الأساسي جليسيرهيزاي et جذمور (GR) استخراج الميثانول (جر)، عقب التعريفي السكتة الدماغية، وتناقص حجم احتشاء مجموع مقارنة بمجموعة التحكم غير المعالجة.

تقييم آثار محصن من الرقم الأساسي جليسيرهيزاي et ريزوما استخراج باستخدام نموذج ماوس انسداد شريان دماغي الأوسط عابر

Ischemia followed by reperfusion of cerebral blood flow after a stroke leads to the death of nerve cells and loss of brain tissue. The most commonly used ...

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجالات أبحاث علم الأعصاب والطب الحديث التقليدي حول فحص المركبات الطبيعية العصبية ذات الصلة بالنموذج. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن ارتفاع قابلية إنتاج حجم العدوى هو وفقا لجرعة توقيت الإقفار. مظاهرة بصرية من هذه الطريقة أمر بالغ الأهمية كما هو نموذجي لإدراج تنفيذ رقيقة جدا في الأصلي، الشريان cerebellar الأوسط باستخدام المجهر العقيم.إثبات الإجراء سيكون سي أون لي، وهو طالب في مدرسة يدرس في مختبري. لإعداد استخراج جليسيريزاي راديكس ورهيزومي، أو GRex، أولاً إضافة 200 غرام من Glycyrrhizae راديكس et Rhizome، أو GR، إلى لترين من الميثانول لمدة خمسة أيام حضانة في درجة حرارة الغرفة. في نهاية الحضانة، سلالة الحل من خلال ورقة مرشح سميكة 0.26 ملليمتر مع حجم المسام 5 ميكرومتر.إضافة بقايا GR إلى لتر واحد من الميثانول الطازجة، وتصفية الحل مرة أخرى. الجمع بين filtrates اثنين، وتجهد لهم من خلال قطعة جديدة من ورقة مرشح. ثم ركز استخراج تحت فراغ قبل تجميد التجفيف لإنتاج GRex.لإعداد GRex للإدارة، قم بحل المنتج المجفف بالتجميد في ثنائيthylsulfoxide، وتمييع الخليط مع محلول ملحي فسيولوجي بنسبة 0.9٪. ثم تصفية الحل من خلال مرشح حقنة ميكرومتر 0.45، وضبط التركيز النهائي من DMSO إلى أقل من 5٪ لإعداد نموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط الماوس، أو MCAO، تأكيد عدم الاستجابة لحافز الذيل في تخدير ستة أسابيع من العمر 22 إلى 25 غراما الذكور C57BL/6 الماوس، ووضع الماوس على 36.5 درجة مئوية درجة حرارة الجسم عقد بطانية، متصلة بميزان الحرارة. بعد إزالة جميع الشعر من الصدر والرقبة من الماوس عن طريق الحلاقة وكريم إزالة الشعر، ووضع الماوس تحت stereomicroscope وجعل شق الجلد سمين في وسط الرقبة.عزل الشريان السباتي المشترك الأيسر، الشريان السباتي الخارجي، وفرع الشريان السباتي الداخلي من الأنسجة الضامة المحيطة، واستخدم خياطة 4.0 حريري لتحشي الشريان السباتي الخارجي والشريان السباتي المشترك مع عقدة نصف عقبة لمنع تدفق الدم مؤقتًا إلى الشريان السباتي الداخلي. إدراج خياطة 0.1 إلى 0.12 ملليمتر سميكة 11 ملليمتر طويلة سيليكون المغلفة 8.0-monofilament 4.0 الحرير من خلال الشريان السباتي الداخلي إلى أصل الشريان الدماغي الأوسط الأيسر، واستخدام الليزر دوبلر تدفق متر لقياس الانخفاض في الشريان الداخلي تدفق الدم الدماغي. إصلاح خيوط إدراجها في الأوعية الدموية لمدة ساعتين في حين يتم انسداد الشريان الدماغي.في نهاية فترة الانسداد ، اسحب خيوط استعادة الدم بعناية لمدة 22 ساعة من إعادة الضخ. واستخدم 3.0 خياطة من الحرير لخياطة الجلد في خمسة أماكن مع عقدتين نصفي الهزاق. ثم العودة إلى قفص الماوس لاسترداد التخدير.ساعة واحدة بعد نهاية reperfusion، وإدارة 300 ملليغرام لكل كيلوغرام وزن الجسم GRex للحيوانات التجريبية، فقط عن طريق ال gavage عن طريق الفم. بعد 24 ساعة من ظهور MCAO ، قم بعمل شق في الجلد الأوسط لرأس كل تجريبي ، وكسر العظام الجدارية مع ملقط الزاوية ، مع تقشير ماتر الجاف. عزل الدماغ بعناية عن الجمجمة، واستخدم مصفوفة دماغ الماوس لقطع الأنسجة المختّفة إلى أقسام سميكة من ملليمتر واحد.وصمة عار المقاطع لمدة 17 دقيقة في 2٪ TTC الحل، وفقا للبروتوكولات القياسية. وإصلاح المقاطع في 10٪ formalin لمدة 2 ساعة على الأقل قبل تصوير العينات مع كاميرا رقمية. ثم تحليل وقياس المنطقة الدماغية في كل قسم باستخدام ImageJ.في الوقت التجريبي المناسب بعد MCAO ، perfuse كل تجريبي القتل الرحيم transcardially مع 10 ملليلتر من برنامج تلفزيوني ، تليها 10 ملليلتر من 4 ٪ paraformaldehyde. بعد عزل العقول كما أظهرت للتو، غمر الأعضاء المحصودة في 10 ملليلتر من 30٪ السكروز بين عشية وضحاها. في صباح اليوم التالي، تضمين عينات أنسجة الدماغ في مجمع درجة الحرارة القطع الأمثل.وشريحة الأنسجة coronally إلى 15 ميكرومتر سميكة أقسام على سيروستات. جبل المقاطع على الشرائح الزجاجية وغمر المقاطع في 80٪ الإيثانول لمدة 1 دقيقة. لH & E تلطيخ، تسمية العينات مع حل الهماتيوكسيلين لمدة 5 دقائق، تليها اثنين من الانخفاضات في 1٪ من الكحول الحمضية.بعد ذلك، غمر الشرائح في محلول كربونات الليثيوم المشبع لمدة 30 ثانية، متبوعًا بغسل 30 ثانية في ماء الصنبور، و30 ثانية من التلطيخ المضاد بمحلول إيوسين. إزالة حل Eosin الزائدة مع غسل المياه الصنبور، وتجفيف الشرائح مع الانغماس التصاعدي دقيقة واحدة في 95 ثم 100٪ الإيثانول. ثم، airdry الشرائح، واضحة لهم في إكسيلين لمدة 10 دقائق على الأقل، وجبل الأغطية مع المتوسطة المتصاعدة.بالنسبة لتلطيخ البنفسج الكريلي، ضع الشرائح المعالجة بالإيثانول بنسبة 80٪ على شريحة أكثر دفئًا لمدة ساعة واحدة على الأقل، يليها الغمر في 50٪ من الإيثانول المخفف بالكلوروفورم بين عشية وضحاها. في صباح اليوم التالي، وصمة عار الشرائح مع 0.1٪ كريميل البنفسجي لمدة 10 دقائق في فرن جاف 40 درجة مئوية، تليها الجفاف في 95٪ الإيثانول لمدة 30 دقيقة، واثنين من خمس دقائق 100٪ الإيثانول الغمر. بعد ذلك، قم بمسح الشرائح اثنين من الغمرات الزيلين لمدة خمس دقائق، تليها تجفيف الهواء.ثم تحميل الشرائح مع تصاعد المتوسطة للتصور عن طريق المجهر الخفيفة. في المجموعات العادية التي تعمل بالشامية ، لا يلاحظ أي فاركت دماغية ؛ في حين أن الحيوانات MCAO غير المعالجة ، يتم ملاحظة مجموعة واسعة نسبيًا من المناطق المتضررة. في 300 ملليغرام لكل كيلوغرام GRex فئران نموذج المعالجة، لوحظ انخفاض كبير إحصائيا في الأنسجة التالفة.التحليل النسيجي لـ H&E و جليسيل النسيج البنفسجي الملون يوفر فهرساً لبقاء الخلية. في الواقع، H & E وكريسيل البنفسجي تلطيخ الشدة انخفاض كبير في السيطرة، غير المعالجة مجموعة MCAO نسبة إلى مجموعة طبيعية تعمل بشكل صوري. الحيوانات المعالجة GRex، من ناحية أخرى، تظهر قدرا أكبر من التكامل النسيجي، مما يعني أقل موت الخلايا العصبية من كل من مجموعات السيطرة، غير المعالجة والضيمة التي تديرها، مما يشير إلى تأثير العصبية قوية من استخراج ضد إصابة الدماغ الناجمة عن نقص التروية.أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن تتذكر أن تراقب تدفق الدم الداخلي في الدماغ خلال هذه الفترة. والموصلات من العمليات بعناية فائقة لتقليل الأضرار التي لحقت طبقات endothelial

Research

JoVE Journal

Medicine

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران -- الشرق انسداد الشريان الدماغي مع نموذج الشعيرة

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

نموذج الفأر من انسداد الشريان الدماغي الأوسط

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

الشريان الدماغي الأوسط انسداد داخل اللمعة (MCAO) النموذجي للاصابة بالسكتة الدماغية مع توجيه الليزر دوبلر Flowmetry في الفئران

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

تطبيق الربط الدائم الشريان المخي الأوسط في الماوس

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Endothelin-1 المستحثة انسداد الشريان الدماغي الأوسط نموذج للالسكتة الدماغية مع التوجيه بالليزر Flowmetry دوبلر في الجرذ

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

الاستفادة من وجود نافذة القحف لتصور الشريان الدماغي الأوسط خلال Endothelin-1 انسداد الشريان الدماغي الأوسط المستحثة

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

الأمثل نظام لرصد الإرواء الدماغي في نموذج الفئران من السكتة الدماغية داخل اللمعة انسداد الشريان الدماغي الأوسط

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

صمي الأوسط انسداد الشريان الدماغي (MCAO) لالدماغية السكتة الدماغية مع مثلي تجلط الدم في الجرذان

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

الكمي لحماية عائية عصبية بعد المتكرر نقص الأوكسجين شروط مسبقة وعابر الأوسط الشريان الدماغي انسداد في الفئران

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

أداء الدائم القاصي الأوسط الدماغي مع السباتي المشترك انسداد الشريان في الجرذان المسنين لدراسة القشرية نقص التروية ذوي الإعاقة المستديمة

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...