Name: assessing neuroprotective effects of glycyrrhizae radix et rhizoma extract using a transient middle cerebral artery occlusion mouse model
Uploaded: 2018-12-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model at JoVE.com

Geçerli değildir.

Hayvanları içeren tüm yordamları Pusan Milli Üniversitesi (onay numarası, PNU-2016-1087) Etik Komitesi tarafından kabul edildi. Bir grafik genel bakış bu çalışmanın Şekil 1' de gösterilen.
1. hazırlık ve GRex İdaresi
Not: Bu çalışmada kullanılan GR ticari ilaç şirketinden satın alınmıştır.
<ol><li>200 gr. GR 2000 mL metanol yerleştirin ve oda sıcaklığında (25 ° C) için 5 gün kuluçkaya.</li>
	<li>0...

<ol>
	<li>Bejot, Y., Delpont, B., Giroud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rising+stroke+incidence+in+young+adults:+more+epidemiological+evidence,+more+questions+to+be+answered.">Rising stroke incidence in young adults: more epidemiological evidence, more questions to be answered.</a> Journal of the American Heart Association. 11 (5), (2016).</li><li>Hadadha, M., Vakili, A., Bandegi, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+the+inhibition+of+hydrogen+sulfide+synthesis+on+ischemic+injury+and+oxidative+stress+biomarkers+in+a+transient+model+of+focal+cerebral+ischemia+in+rats.">Effect of the inhibition of hydrogen sulfide synthesis on ischemic injury and oxidative stress biomarkers in a transient model of focal cerebral ischemia in rats.</a> Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases. 24 (12), 2676-2684 (2015).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ischemic+stroke.">Animal models of ischemic stroke.</a> Article in Handbook of Clinical Neurology. 92, 43-66 (2009).</li><li>Kim, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+of+Stroke.">Animal Models of Stroke.</a> Brain and Neurorehabilitation. 4 (1), 1-11 (2011).</li><li>Rizzato, G., Scalabrin, E., Radaelli, M., Capodaglio, G., Piccolo, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+exploration+of+licorice+metabolome.">A new exploration of licorice metabolome.</a> Food Chemistry. 221, 959-968 (2017).</li><li>Zhu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+determination+of+flavonoids+in+licorice+and+comparison+of+three+licorice+species.">Rapid determination of flavonoids in licorice and comparison of three licorice species.</a> Journal of Separation Science. 39 (3), 473-482 (2016).</li><li>Ota, M., Mikage, M., Cai, S. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herbological+study+on+the+medicinal+effects+of+roasted+licorice+and+honey-roasted+licorice.">Herbological study on the medicinal effects of roasted licorice and honey-roasted licorice.</a> Yakushigaku Zasshi. 50 (1), 38-45 (2015).</li><li>Lim, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Licorice+pretreatment+protects+against+brain+damage+induced+by+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice.">Licorice pretreatment protects against brain damage induced by middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Journal of Medicinal Food. 21 (5), 474-480 (2018).</li><li>Koizumi, J. Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.">Experimental studies of ischemic brain edema.</a> Nosotchu. 8 (1), 1-8 (1986).</li><li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematoxylin+and+eosin+staining+of+tissue+and+cell+sections.">Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2008, (2008).</li><li>Zhu, Y., Liu, F., Zou, X., Torbey, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+unbiased+estimation+of+neuronal+number+in+the+rat+hippocampus+with+different+staining+methods.">Comparison of unbiased estimation of neuronal number in the rat hippocampus with different staining methods.</a> Journal of Neuroscience Methods. 254, 73-79 (2005).</li><li>Alberts, M. J., Ovbiagele, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+strategies+for+ischemic+stroke+prevention:+role+of+multimodal+combination+therapies.">Current strategies for ischemic stroke prevention: role of multimodal combination therapies.</a> Journal of Neurology. 254 (10), 1414-1426 (2007).</li><li>Pinto, A., Tuttolomondo, A., Di Raimondo, D., Fernandez, P., Licata, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrovascular+risk+factors+and+clinical+classification+of+strokes.">Cerebrovascular risk factors and clinical classification of strokes.</a> Seminars in Vascular Medicine. 4 (3), 287-303 (2004).</li><li>Barlow, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+the+brain+regions+associated+with+acute+spasticity+in+patients+diagnosed+with+an+ischemic+stroke.">Identifying the brain regions associated with acute spasticity in patients diagnosed with an ischemic stroke.</a> Somatosensory and Motor Research. 33 (2), 1-8 (2016).</li><li>Roth, S., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke+research+at+the+crossroads+-+where+are+we+heading.">Stroke research at the crossroads - where are we heading.</a> Swiss Medical Weekly. 146, 14329 (2016).</li><li>Feuerstein, G. Z., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke.">Animal models of stroke.</a> Molecular Medicine Today. 6 (3), 133-135 (2000).</li><li>Herson, P. S., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+stroke:+translational+potential+at+present+and+in+2050.">Animal models of stroke: translational potential at present and in 2050.</a> Future Neurology. 9 (5), 541-551 (2014).</li><li>Kumar, A., Gupta Aakriti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+animal+models+of+stroke:+an+update.">A review on animal models of stroke: an update.</a> Brain Research Bulletin. 122, 35-44 (2016).</li><li>O'Collins, V. E., Donnan, G. A., Howells, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+animal+models+of+stroke.">History of animal models of stroke.</a> International Journal of Stroke. 6 (1), 77-78 (2011).</li><li>Ji, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioactive+constituents+of+Glycyrrhiza+uralensis+(licorice):+discovery+of+the+effective+components+of+a+traditional+herbal+medicine.">Bioactive constituents of Glycyrrhiza uralensis (licorice): discovery of the effective components of a traditional herbal medicine.</a> Journal of Natural Products. 79 (2), 281-292 (2016).</li><li>Yang, R., Wang, L. Q., Yuan, B. C., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pharmacological+activities+of+licorice.">The pharmacological activities of licorice.</a> Planta Medica. 81 (18), 1654-1669 (2015).</li><li>Yang, R., Yuan, B. C., Ma, Y. S., Zhou, S., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+anti-inflammatory+activity+of+licorice,+a+widely+used+Chinese+herb.">The anti-inflammatory activity of licorice, a widely used Chinese herb.</a> Pharmaceutical Biology. 55 (1), 5-18 (2017).</li></ol>

Metabolik hastalıklar gibi kronik hipertansiyon, şeker hastalığı ve hiperlipidemi, kontur için büyük risk faktörleri olan artan yaygınlığı ile inme önleme ve tedavi tıbbi araştırma12, önemli bir alan haline gelmiştir 13. dil ve hareketi kalp krizi sonrası açıkları şiddetle doku14 beyin kalmasına ve yoksul bir yaşam kalitesi hastalar ve onların aileleri15için hasar derecesi ile ilişkili. ...

Beyin hasar iskemi ve reperfüzyon serebral kan akımı neden sinir hücrelerinin ölüm ve beyin doku kaybına yol açar. Bu tür bir beyin hasarı serebrovasküler hastalıklar obezite, hipertansiyon ve diyabet1,2gibi metabolik hastalıkların yayılması nedeniyle artan yaygınlığı ile artmaya devam ediyor. Yaşlı hastalarda inme ile kesin sayısı dünya çapında önemli ölçüde artmıştır ve uzun vadeli Engelli kez bırakan bu hastalar için tıbbi bakım maliyeti büyük bir toplumsal yüktür. Bu nedenle, ikincil Engelli ekonomik yük1,2azaltmak mümkün olduğu kadar hafifletilmiş.
En sık kullanılan kemirgen beyin enfarktüsü içinde iskemik inme3, neden olan kan akışını engellemek için bir silikon kaplı Cerrahi dikiş filaman ile MCA tıkandı orta serebral arter (MCA) tıkanıklığı (MCAO) modeli modeldir 4. tıkanıklığı malzeme içi luminal filaman ekleme süresi işleyerek tıkanıklığı zaman ve kalıcılığı kontrol sağlar gibi bir filament kullanarak.
Önceki çalışmalar, aynı kemirgen MCAO model kullanıldığında bile beyin enfarktüsü hacmi düşük tekrarlanabilirlik çalışmaların neden deneyler arasında değişir göstermiştir. Tekrarlanabilirlik artırmak için deneyde kullanılan filaman nane kalınlığı optimize. Serebral iskemik dönemi ve 60 dk uzun bir iskemik süre hacimsel bölgesinin izin gösterdi indüklenen infarktüsü ön bir çalışmanın sonuçlarını gözlenen ve sayısal beyin dokusuna zarar görmüş.
Glycyrrhizae Radix et Rhizoma (GR), olarak da bilinen meyan kökü kurutulmuş kök ve Glycyrrhiza uralensis köksaplar oluşur ve G. glabra. Bu Çin ve Kore geleneksel tıpta bir gıda katkı maddesi ve5,6,7olarak medicinally dahil olmak üzere çeşitli amaçlarla kullanılmıştır.
Bir önceki çalışmada8GR metanol özü (GRex) MCAO farelerde bir anti-apoptotik etki gösterdi ile ön arıtma önemli önlenmesi B hücreli lenfoma 2 protein ifadesi azalma (Bcl-2) ve Bcl ekstra büyük (Bcl-xL) dahil olmak üzere. Bu çalışma sonrası enfarktüsü tedavi GRex ile etkili bir şekilde MCAO bağlı serebral hasar enfarktüsü hacmindeki azaltılmış Eğer belirlemede verimlilik değerlendirerek tekrarlanabilirlik geleneksel MCAO fare modeli geliştirmek için yapılmıştır.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1416px;" width="1417">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:383px;">Glycyrrhizae Radix et Rhizoma</td>
			<td style="width:307px;">Gwangmyoung Pharmaceuticals Co., Korea</td>
			<td style="width:344px;"></td>
			<td style="width:383px;">Glycyrrhizae Radix et Rhizoma</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Qualitative filter paper</td>
			<td>Advantec</td>
			<td style="width:344px;">Filter paper No. 2</td>
			<td>Qualitative filter paper</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D8418-250ML</td>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Syringe filter (0.45 &#181;m)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>CLS431220</td>
			<td>Syringe filter (0.45 &#181;m)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Stereo Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M50</td>
			<td>Stereo Microscope</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ745</td>
			<td>Stereo Microscope</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Laser Doppler</td>
			<td>Moor Instrument</td>
			<td>moorVMS-LDF</td>
			<td>Laser Doppler</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Anesthesia Tabletop Bracket with N2O&#38;O2 Flowmeter System</td>
			<td>Harvard Appratus</td>
			<td>34-1352</td>
			<td>Anesthesia Tabletop Bracket with N2O&#38;O2 Flowmeter System</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Homeothermic Monitoring System</td>
			<td>Harvard Appratus</td>
			<td>55-7020</td>
			<td>Homeothermic Monitoring System</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Digital Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>Eos-M2</td>
			<td>Digital Camera</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM3050S</td>
			<td>Cryostat</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>Zeiss Axio</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Data Analysis</td>
			<td>Systat Software Inc.</td>
			<td>SigmaPlot version 12</td>
			<td>Data Analysis</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Data Analysis</td>
			<td>NIH Image</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td>Data Analysis</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Mouse diet</td>
			<td>Doo Yeol Biotech</td>
			<td>Standard rodent chow</td>
			<td>Mouse diet</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Isoflurane</td>
			<td>JOONGWAE</td>
			<td>A02104781</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Isoflurane</td>
			<td>TROIKAA</td>
			<td>ISOTROY 100</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Silk suture (4-0 Black silk)&#160;</td>
			<td>AILEE</td>
			<td>SK47510</td>
			<td>Silk suture (4-0 Black silk)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Silk suture (3-0 White silk)&#160;</td>
			<td>Baekjae</td>
			<td>57</td>
			<td>Silk suture (3-0 White silk)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Nylon suture (8-0 monofilament)&#160;</td>
			<td>AILEE</td>
			<td>NB825</td>
			<td>Nylon suture (8-0 monofilament)&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8877-25G</td>
			<td>2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Formalin (Formaldehyde solution)</td>
			<td>JUNSEI</td>
			<td>69360-1263 20KG</td>
			<td>Formalin (Formaldehyde solution)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Hematoxylin (Harris Hematoxylin)</td>
			<td>YD Diagnostics</td>
			<td>EasyStain</td>
			<td>Hematoxylin (Harris Hematoxylin)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Eosin (1% Eosin Y Solution)</td>
			<td>MUTO PURE CHEMICALS</td>
			<td>3200-2</td>
			<td>Eosin (1% Eosin Y Solution)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Cresyl violet (acetate)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td>Cresyl violet (acetate)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Paraformaldehyde&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:344px;">P6148-1KG</td>
			<td>Paraformaldehyde&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Sucrose</td>
			<td>JUNSEI</td>
			<td>31365-0350 1KG</td>
			<td>Sucrose</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Optimum cutting temperature (OCT) compound</td>
			<td>Scigen</td>
			<td>4583</td>
			<td>Optimum cutting temperature (OCT) compound</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Disecting Knife</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10055-12</td>
			<td>Disecting Knife</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">#4 Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11241-30</td>
			<td>#4 Forcep</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">#5 Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td>#5 Forcep</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">#6 Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11260-20</td>
			<td>#6 Forcep</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">#7 Fine Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11274-20</td>
			<td>#7 Fine Forcep</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14001-12</td>
			<td>Surgical Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Extra Fine Bonn Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14084-08</td>
			<td>Extra Fine Bonn Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Moria Pascheff-Wolff Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15371-92</td>
			<td>Moria Pascheff-Wolff Spring Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="31">
			<td height="31" style="height:31px;">Vessel Dilating Forcep</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18153-11</td>
			<td>Vessel Dilating Forcep</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing neuroprotective effects of glycyrrhizae radix et rhizoma extract using a transient middle cerebral artery occlusion mouse model

İskemi kalp krizi sonra serebral kan akımı reperfüzyon takip sinir hücrelerinin ölüm ve beyin doku kaybına yol açar. Kontur çalışmak için en sık kullanılan hayvan modeli orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modelidir. Hatta aynı deneysel hayvan türleri benzer MCAO koşullar altında kullanıldığında önceki araştırma çalışmaları farklı enfarktüsü boyutları bildirdi. Bu nedenle, bu tutarsızlık yönelik olarak geliştirilmiş bir deneysel yöntem geliştirdik. Fareler bir filament tıkanıklığı malzemesi olarak insan kontur koşulları taklit kullanarak MCAO tabi tutuldu ve filament kalınlığı daha tekrarlanabilir infarktüsü birim kurmak için optimize edildi. Metanol ile tedavi fareler ayıklamak Glycyrrhizae sayı tabanı et kontur indüksiyon takip köksap (GRex) önemli ölçüde azalan toplam infarktüsü birim gösterdi ve hayatta kalma artan sayı hücreleri tedavi edilmemiş kontrol grubuna göre. Bu Deneysel protokol başarıyla değiştirildi ve tekrarlanarak iskemik inme faydalı GRex etkisini gösterdi.

Kontrol grubunda nispeten geniş hasarlı bölgeleri görülmektedir, ancak sahte işletilen normal grubunda hiçbir beyin enfarktüsü görülmektedir. Fareler (Şekil 2) yönetilen 300 mg/kg GRex MCAO model grubunda, hasarlı bölgeyi istatistiksel olarak anlamlı bir azalma görülmektedir.
Histolojik değişiklikler iskemik beyin bölümleri H & E veya kresil mor ile boyama tarafından incelenmi...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model at JoVE.com

Assessing Neuroprotective Effects of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Extract Using a Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Mouse Model

Bu çalışmada, bir orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) fare modeli kurarak daha tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için varolan deneysel yöntemini değiştirmek. Glycyrrhizae Radix, sözlü yönetimi et köksap (GR) metanol özü (GRex), kontur indüksiyon, takip toplam infarktüsü cilt tedavi edilmemiş kontrol grubuna göre önemli ölçüde azalmıştır.

Glycyrrhizae Radix nöroprotektif etkilerinin değerlendirilmesi et Rhizoma ekstresi kullanarak bir geçici orta serebral arter tıkanıklığı fare modeli

Ischemia followed by reperfusion of cerebral blood flow after a stroke leads to the death of nerve cells and loss of brain tissue. The most commonly used ...

Bu yöntem, nöroprotektif doğal bileşikler Modeli ile ilgili tarama hakkında nörolojik ve geleneksel ağız hekimliği araştırma alanlarında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı enfeksiyon hacminin daha yüksek prodüksebilitesi iskemik zamanlama dozuna uygun olmasıdır. Bu yöntemin görsel gösterimi, steril bir mikroskop kullanarak orta serebellar arterorijinal, orta serebellar arter içine çok ince bir uygulama eklemek için tipik olduğu gibi önemlidir.Prosedürü gösteren Se-Eun Lee, benim laboratuvarımda okuyan bir okul öğrencisi olacak. Glycyrrhizae Radix et Rhizome ekstresi veya GRex hazırlamak için, ilk oda sıcaklığında beş günlük kuluçka için metanol iki litre glycyrrhizae Radix et Rhizome veya GR, 200 gram ekleyin. Kuluçka sonunda, çözeltiyi 5 mikrometre gözenek boyutuna sahip 0,26 milimetre kalınlığındafiltre kağıdıyla süzün.Taze metanol bir litre GR kalıntısı ekleyin ve tekrar çözüm filtre. İki filtrates birleştirin ve filtre kağıt yeni bir parça ile süzün. Daha sonra GRex üretmek için dondurularak kurutmadan önce ekstresi vakum altında yoğunlaştırın.GRex'i yönetime hazırlamak için dondurulmuş kurutulmuş ürünü dimetilsülfoksitle eritin ve karışımı %0,9 fizyolojik salinle seyreltin. Daha sonra çözeltiyi 0,45 mikrometrelik şırınga filtresinden geçirin, ve dmso'nun son konsantrasyonunu %5'ten daha az bir oranda ayarlayın Bir fare orta serebral arter oklüzyon modeli veya MCAO'yu kurmak için, anestezialtı haftalık 22 ila 25 gram erkek C57BL/6 farede kuyruk uyaranlarına yanıt verme eksikliğini onaylayın ve fareyi bir termometreye bağlı 36,5 derecelik santigrat vücut ısısını tutan battaniyeye yerleştirin. Tıraş ve tüy dökücü krem ile farenin göğüs ve boyun tüm saç çıkardıktan sonra, bir stereomikroskop altında fare yerleştirin ve boyun merkezinde iki santimetrelik deri kesi yapmak.Dikkatle sol ortak karotis arter izole, dış karotis arter, ve çevreleyen bağ dokularından internal karotid arter dalı, ve dış karotis arter ve ortak karotis arter ligate için bir 4.0-ipek sütür kullanın geçici olarak iç karotid arter içine kan akışını engellemek için yarım otostop ile. 0.1 ila 0.12 milimetre kalınlığında 11 milimetre uzunluğunda silikon kaplı 8.0-monofilament 4.0-ipek sütür internal karotis arter sol orta serebral arter kökeni için yerleştirin ve göreceli serebral kan akımı arter azalma ölçmek için bir lazer Doppler akış ölçer kullanın. Serebral arter tıkanmış iken iki saat boyunca kan damarına eklenen filament düzeltin.Oklüzyon periyodunun sonunda, 22 saatlik reperfüzyon için kan akışını geri getirmek için filamenti dikkatlice çekin. Ve iki yarım otostop düğümleri ile beş yerde cilt dikiş için 3.0-ipek dikiş kullanın. Sonra anestezik kurtarma için kafese fare dönün.Reperfüzyonun bitiminden bir saat sonra, sadece oral gavaj ile, deneysel hayvanlara kilogram vücut ağırlığı GRex başına 300 miligram uygulayın. MCAO'nun başlangıcından 24 Saat sonra, her deney hayvanının kafasının orta derisinde bir kesi yapın ve dura mater'i soyurken parietal kemikleri açılı enterler ile kırın. Beyni kafatasından dikkatlice izole edin ve bir milimetre kalınlığındaki dokuyu kesmek için bir fare beyin matrisi kullanın.Standart protokollere göre%2 TTC çözeltisinde 17 dakika boyunca kesitleri lekeleyin. Ve örnekleri dijital kamerayla görüntülemeden önce en az 2 saat boyunca %10 formalin ile bölümleri düzeltin. Daha sonra ImageJ kullanarak her bölümün serebral enfarkt alanını analiz edin ve ölçün.MCAO sonrası uygun deneysel zaman noktasında, her ötanazi edilmiş deneysel hayvanı 10 mililitre PBS ile transkardize edin ve ardından %4 paraformaldehit 10 mililitre. Beyinleri az önce gösterildiği gibi izole ettikten sonra, hasat edilen organları bir gecede %30 sakarozun 10 mililitresine batırın. Ertesi sabah, beyin dokusu örneklerini optimum kesme sıcaklık bileşime gömün.Ve dokuları bir cyrostat üzerinde 15 mikrometre kalınlığında bölümlere ayırın. Bölümleri cam kaydıraklara monte edin ve bölümleri 1 dakika boyunca %80 etanolle batırın. H&E boyama için numuneleri 5 dakika hematoksilin solüsyonu ile etiketleyin ve ardından %1'lik asit alkolüniki daldırmasını takip edin.Ardından, slaytları 30 saniye boyunca doymuş Lityum karbonat çözeltisi içine daldırın, ardından musluk suyunda 30 saniyelik bir yıkama ve Eosin çözeltisi ile 30 saniye lik karşı boyama. Bir musluk suyu yıkama ile fazla Eozin çözeltisi çıkarın ve 95 sonra% 100 etanol bir dakikalık artan daldırma ile slaytlar dehydrate. Daha sonra, slaytlar hava kurun, en az 10 dakika ksilen onları temizleyin ve montaj orta ile kapakları monte.Krem menekşe boyama için, en az bir saat boyunca bir slayt ısıtıcı üzerinde% 80 etanol tedavi slaytlar yerleştirin, bir gecede kloroform ile seyreltilmiş% 50 etanol daldırma izledi. Ertesi sabah, 40 derecelik santigrat kuru fırında 10 dakika boyunca %0.1 krem menekşe ile slaytları lekeleyin, ardından 30 dakika boyunca %95 etanolte dehidratasyon ve iki beş dakikalık %100 etanol daldırma. Daha sonra, slaytlar iki beş dakikalık ksilen daldırma, hava kurutma ardından temizleyin.Daha sonra ışık mikroskobu ile görselleştirme için montaj ortamı ile slaytlar monte. Sham-operated normal gruplarda serebral enfarktüs gözlenmez;kontrol de, tedavi edilmeyen MCAO hayvanlarda ise nispeten geniş bir hasarlı bölge aralığında gözlenir. GRex ile tedavi edilen model farelerde kilogram başına 300 miligramlık hasarlı dokuda istatistiksel olarak anlamlı bir azalma gözlenmektedir.H&E ve cresyl menekşe lekeli doku bölümlerinin histolojik analizi hücre sağkalım indeksini sağlar. Gerçekten de, H & E ve cresyl menekşe boyama yoğunlukları önemli ölçüde kontrol azalma, sham işletilen normal gruba göre tedavi edilmemiş MCAO grubu. GRex-tedavi hayvanlar, diğer taraftan, daha büyük bir histolojik bütünlük sergilemek, hem kontrol daha az nöronal hücre ölümü ima, tedavi edilmemiş ve sham-işletilen gruplar, iskemi reperfüzyon kaynaklı beyin hasarına karşı ekstre güçlü bir nöroprotektif etkisi düşündüren.Bu işlem denerken, bu dönemde göreceli serebellar kan akışını izlemek için hatırlamak önemlidir. Ve proseslerin iletkenleri endotel tabakalarındaki zararları en aza indirmek için çok dikkatli

Research

JoVE Journal

Medicine

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fare Modeli

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Fare lazer Doppler flowmetre Rehberlik İskemik İnme intraluminal Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO) Model

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

Fare Daimi Orta Serebral Arter ligasyon Of Uygulama

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Rat Lazer Doppler Flowmetri Rehberlik ile İskemik İnme için Endotelin-1 Bağlı Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Modeli

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Endotelin-1 Bağlı Orta Serebral Arter Tıkanıklığı sırasında Orta Serebral Arter görselleştirin bir Kranial Pencere kullanmak

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Intraluminar Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Sıçan Strok Model Serebral Perfüzyon İzleme için Optimize Sistemi

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Sıçanlar Homolog Kan pıhtısı ile İskemik İnme emboli Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO)

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Farelerde Tekrarlanan Hipoksik Önkoşullanma ve Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ardından Nörovasküler Koruma Kantitasyonu

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Yaşlı Sıçanlarda Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı ile Kalıcı Distal Orta Serebral Sahne Kortikal İskemi Sürekli Engelli Eğitim için

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...