Name: novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery
Uploaded: 2018-11-14T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

هذه الدراسة وأيده في الجزء "الخاص جامعة العلامة التجارية مشروع البحث" من يأمرون؛ معونات ل Research (C) العلمية (08249 ك 17 [أن ت وت. س.]) من الجمعية اليابانية لتعزيز العلوم (JSPS)؛ منحة للبحوث التعاونية من مؤسسة هاماغتشي للنهوض بالكيمياء الحيوية [إلى ت. س.]، ومؤسسة العلوم وتاكيدا [أن ت]. ونشكر السيد يويا Nito والسيدة أكيكو أسامي لمساعدتها التقنية القيمة في إجراء التجارب.

وأجرى هذه الدراسة الحيوانية (#AP17P004) وفقا للمبادئ التوجيهية التي أقرتها جامعة نيهون العناية بالحيوان واستخدام اللجنة (طوكيو، اليابان). واعتمد هذه الدراسة (#17-0001) مركز النظائر المشعة بكلية الصيدلة، جامعة نيهون.
1-الحيوانات المستخدمة للإدارة داخل الآنف تحت التخدير استنشاق
<ol><l...

<ol>
	<li>Sakane, T., Yamashita, S., Yata, N., Sezaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transnasal+delivery+of+5-fluorouracil+to+the+brain+in+the+rat.">Transnasal delivery of 5-fluorouracil to the brain in the rat.</a> Journal of Drug Targeting. 7 (3), 233-240 (1999).</li><li>Illum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transport+of+drugs+from+the+nasal+cavity+to+the+central+nervous+system.">Transport of drugs from the nasal cavity to the central nervous system.</a> European Journal of Pharmaceutical Science. 11 (1), 1-18 (2000).</li><li>Hanson, L. R., Frey, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+bypasses+the+blood-brain+barrier+to+target+therapeutic+agents+to+the+central+nervous+system+and+treat+neurodegenerative+disease.">Intranasal delivery bypasses the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease.</a> BMC Neuroscience. 9 (Suppl 3), S5 (2008).</li><li>Chapman, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+treatment+of+central+nervous+system+dysfunction+in+humans.">Intranasal treatment of central nervous system dysfunction in humans.</a> Pharmaceutical Research. 30 (10), 2475-2484 (2012).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+non-invasive+drug+delivery+system+to+the+brain+for+brain+diseases+therapy.">Development of non-invasive drug delivery system to the brain for brain diseases therapy.</a> Yakugaku-Zasshi. 138 (4), 443-450 (2018).</li><li>Kozlovskaya, L., Abou-Kaoud, M., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+drug+delivery+to+the+brain+via+nasal+route.">Quantitative analysis of drug delivery to the brain via nasal route.</a> Journal of Controlled Release. 189, 133-140 (2014).</li><li>Hirai, S., Yashiki, T., Matsuzawa, T., Mima, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorption+of+drugs+from+the+nasal+mucosa+of+rat.">Absorption of drugs from the nasal mucosa of rat.</a> International Journal of Pharmaceutics. 7 (4), 317-325 (1981).</li><li>Lochhead, J. J., Thorne, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+of+biologics+to+the+central+nervous+system.">Intranasal delivery of biologics to the central nervous system.</a> Advances in Drug Delivery Reviews. 64 (7), 614-628 (2011).</li><li>Lalatsa, A., Schatzlein, A. G., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+deliver+peptide+drugs+to+the+brain.">Strategies to deliver peptide drugs to the brain.</a> Molecular Pharmaceutics. 11 (4), 1081-1093 (2014).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+delivery+of+small+interfering+ribonucleic+acid+and+drugs+through+intranasal+administration+with+nano-sized+polymer+micelles.">Brain delivery of small interfering ribonucleic acid and drugs through intranasal administration with nano-sized polymer micelles.</a> Medical Devices. 8, 57-64 (2015).</li><li>Kanazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+nose-to-brain+delivery+of+hydrophilic+macromolecules+with+stearate-+or+polyethylene+glycol-modified+arginine-rich+peptide.">Enhancement of nose-to-brain delivery of hydrophilic macromolecules with stearate- or polyethylene glycol-modified arginine-rich peptide.</a> International Journal of Pharmacology. 530 (1-2), 195-200 (2017).</li><li>Kamei, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+an+enhanced+nose-to-brain+delivery+of+insulin+on+mild+and+progressive+memory+loss+in+the+senescence-accelerated+mouse.">Effect of an enhanced nose-to-brain delivery of insulin on mild and progressive memory loss in the senescence-accelerated mouse.</a> Molecular Pharmaceutics. 14 (3), 916-927 (2017).</li><li>Suzuki, T., Oshimi, M., Tomono, K., Hanano, M., Watanabe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+transport+mechanism+of+pentazocine+across+the+blood-brain+barrier+using+the+in+situ+rat+brain+perfusion+technique.">Investigation of transport mechanism of pentazocine across the blood-brain barrier using the in situ rat brain perfusion technique.</a> Journal of Pharmaceutical Science. 91 (11), 2346-2353 (2002).</li></ol>

الآنف إلى المخ إيصال الأدوية يتوقع أن يكون له تأثير واضح على اضطرابات الجهاز العصبي المركزي لهذا المسار يمثل مسار نقل مباشر الذي يتجاوز BBB. أبلغ ثلاثة مسارات مختلفة من الآنف إلى الدماغ بتاريخ8. الأول هو مسار عصب شمي، الذي يمر من الغشاء المخاطي حاسة الشم في الغشاء المخاطي الأنف?...

وتعتبر بيوميديسينيس مثل الببتيدات والنوكليوتيد والأجسام المضادة يكون التطبيق المحتملة كرواية العوامل العلاجية لاضطرابات الجهاز العصبي المركزي الصهر التي لديها حاليا لا العلاج العلاجية. بيد أن بيوميديسينيس معظم الجزيئات الكبيرة للذوبان في الماء، التسليم من الدم إلى الدماغ عن طريق الإدارة عن طريق الحقن أو عن طريق الفم صعبة للغاية بسبب مقاومة حاجز الدم في الدماغ (BBB).
وفي السنوات الأخيرة، سجلت الإدارة داخل الآنف لتكون مساراً محتملة لتسليم الآنف إلى المخ من العوامل العلاجية التي تتجنب بي بي بي1،2،3،،من45. ومع ذلك، كانت هناك تقارير قليلة نسبيا فيما يتعلق بالتحليل الكمي لمسار الآنف إلى المخ التسليم6. وعلاوة على ذلك، لم تكن هناك تقريبا أي تقارير في ظروف المنشأة الإدارة المثلى ونظم الجرعات، مثل الحجم، الأوقات، الفترات الزمنية، والسرعة، للتحقيقات المتعلقة بالتسليم الآنف إلى المخ. أوجه القصور المذكورة أعلاه يمكن أن تعزى للأسباب التالية: (ط) أسلوب أمثل للإدارة داخل الآنف للفئران ولم تنشأ، وعادة ما تتسم الإدارة (ثانيا) داخل الآنف قبل بيبيتينج، الذي يستخدم عادة، قبل إينتيرينديفيدوال من الاختلاف بين الحيوانات بسبب إزالة mucociliary (MC)، الأمر الذي غالباً ما يؤدي إلى البسط الإمكانات الآنف إلى المخ التسليم الفعلي لدواء معين.
التخدير استنشاق استخدام isoflurane (بدء: 4%، صيانة: 2%) مع استنشاق قناع للقوارض قد اكتسب الاستخدام على نطاق واسع، بهدف الحد من أو القضاء على الألم المقترنة بعملية جراحية أجريت على الحيوانات التجريبية. استخدام أقنعة يجعلها واضحة نسبيا لأداء إدارة المخدرات نموذجية في الحيوانات التجريبية تحت التخدير استنشاق عبر الطرق عن طريق الحقن تحت الجلد وداخل. ومع ذلك، في حالة الإدارة داخل الآنف، يحتاج القناع المراد إزالتها مؤقتاً من الحيوانات للدواء. مع الحفاظ على أقل من 2 في المائة إيسوفلوراني، الحيوانات عادة توقظ سريعاً من التخدير استنشاق. عندما يكون حجم الإدارة كل جرعة كبيرة، يمكن أن يسبب هذا الحل المخدرات تتدفق المريء من تجويف الآنف، وذلك قد تحتاج جرعة كبيرة واحدة إلى تقسيمها إلى جرعات صغيرة متعددة للإدارة داخل الآنف الصغيرة الحيوانات. كما يتطلب الإدارة داخل الآنف، إزالة القناع للإدارة المتكررة والوقت الكافي لإيصال تجويف الآنف المستمر، هناك احتمال كبير أن الفئران سوف توقظ من التخدير أثناء إجراء الإدارة. وهذا يجعل من الصعب جداً لأداء الإدارة داخل الآنف تحت مخدر دولة مستقرة، وربما يساهم في تباين interindividual الملاحظة إيصالها الآنف إلى المخ بين القوارض.
في هذه الدراسة، طورنا التالي طريقتين رواية إدارة مستقرة داخل الآنف تحت التخدير استنشاق، الذي فرض حد أدنى من الإجهاد البدني في الحيوانات التجريبية. للطريقة الأولى، استخدمنا قناع مؤقتاً أوبينابل التي تمكن الإدارة داخل الآنف أثناء التخدير استنشاق. يتضمن الجزء أوبينابل من القناع سيليكون المكونات التي يمكن استخدامها وفقا لتوقيت الإدارة لتسهيل الإدارة داخل الآنف مستقرة باستخدام ماصة. للأسلوب الثاني، قنية أدرجت جراحيا لتمريرها من المريء في تجويف الآنف، ومن ثم كان يعلق مضخة الحقن حيث أن الحل المخدرات يمكن مباشرة وبشكل موثوق تسليم في تجويف الآنف باستنشاق مستقرة لهذا التخدير. هذا الأسلوب يمكن تعزيز إيصال المخدرات إلى الدماغ عن طريق الآنف إلى المخ، لأنه سيتحسن كثيرا التقليل من آثار MC، المخدرات ريتينتيفيلي في تجويف الآنف. وبالإضافة إلى ذلك، يصف لنا طريقة لتقييم مستويات توزيع المخدرات (% للدماغ حقن جرعة/g) في الدماغ باستخدام الراديو المسمى [14ج] كمي-الاينولين [الوزن الجزيئي (ميغاواط): 5,000] كركيزة نموذجية للذوبان في الماء الجزيئات الكبيرة.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ddY mouse</td>
			<td>Japan SLC, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Male, 4-6 weeks, 20-30 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>v002139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane setup</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-OTAir, SN-489-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>For small rodents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask (Opneable type)</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Special orders</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Box</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-85-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-1</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-27H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-13H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-1</td>
			<td>FINE SCIENCE TOOLS Inc.</td>
			<td>11272-30</td>
			<td>Dumont #7 Dumoxel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>A-12-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (PE-50)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company.</td>
			<td>5069773</td>
			<td>I.D.: 0.58 mm, O.D.: 0.965 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (SP-10)</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>KN-392</td>
			<td>I.D.: 0.28 mm, O.D.: 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>MARUKAN, LTD.</td>
			<td>DC-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>SZ61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 27G 1/2 in 13 mm</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>NN-2738R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>SS-01T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>Neuro science</td>
			<td>NE-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellulose membrane</td>
			<td>Toyo Roshi Kaisya, Ltd.</td>
			<td>00011090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro spatula</td>
			<td>Shimizu Akira Inc.</td>
			<td>91-0088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette (0.5-10 uL)</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>Z368083</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette chip</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>0030 000.811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td>TimeMed Labeling System, Inc.</td>
			<td>T-534-R</td>
			<td>For fixing mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[14C]-Inulin</td>
			<td>American Radiolabeled Chemicals Inc.</td>
			<td>ARC0124A</td>
			<td>0.1 mCi/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EtOH</td>
			<td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td>
			<td>054-00461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid scintillation counter</td>
			<td>Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, Inc</td>
			<td>Tri-Carb 4810TR</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery

وقد أبلغ الإدارة داخل الآنف لتكون مساراً محتملة لتسليم الآنف إلى المخ من العوامل العلاجية التي تلتف حاجز الدم في الدماغ. ومع ذلك، كانت هناك تقارير قليلة فيما يتعلق تحليل كمي بل أيضا شروط الإدارة المثلى والجرعات الأنظمة العلاجية للتحقيقات المتعلقة بالتسليم الآنف إلى المخ. التقدم المحدود في البحث عن آليات مسار الآنف إلى الدماغ القوارض باستخدام يمثل عائقا كبيرا من حيث تصميم نظم إيصالها الآنف إلى المخ للمخدرات مرشح.
إلى تحقيق بعض التقدم في هذا الصدد، نحن المتقدمة وتقييم أساليب رواية اثنين مستقرة الإدارة داخل الآنف تحت التخدير استنشاق للحيوانات التجريبية. ونحن أيضا وصف أسلوب لتقييم مستويات توزيع المخدرات في الدماغ عن طريق الآنف بالدماغ المسار استخدام الراديو المسمى [14ج]-الاينولين (الوزن الجزيئي: 5,000) كركيزة نموذجية من الجزيئات الكبيرة للذوبان في الماء.
وفي البداية، قمنا بتطوير بروتوكول المستندة إلى ماصة إدارة داخل الآنف باستخدام أقنعة أوبينابل مؤقتاً، مما مكننا من القيام بإدارة موثوقة للحيوانات تحت التخدير مستقرة. باستخدام هذا النظام، [14ج]-يمكن تسليم الاينولين إلى الدماغ مع القليل من الخطأ التجريبي.
وفي وقت لاحق وضعنا بروتوكولا إدارة داخل الآنف يترتب عليه عكس كانولاتيون من جانب مجرى الهواء عن طريق المريء، الذي تم تطويره للتقليل من آثار إزالة mucociliary (MC). هذا الأسلوب أدى إلى مستويات أعلى بكثير من [14ج]-الاينولين، التي تم الكشف عنها كمياً في لمبة شمي والمخ، ولب سيسائيه، من الأسلوب ماصة. هذا يظهر أن يكون سبب الاحتفاظ بالحل المخدرات في تجويف الآنف زيد إلى حد كبير بالإدارة النشطة باستخدام مضخة الحقن في اتجاه المعاكس لمولودية في تجويف الآنف.
وفي الختام، يمكن أن يتوقع طريقتين للإدارة داخل الآنف نمواً في هذه الدراسة أن تقنيات مفيدة للغاية لتقييم الدوائية في القوارض. الأسلوب كانوليشن العكسية، على وجه الخصوص، يمكن أن تكون مفيدة لتقييم الإمكانات الكاملة لإيصال المخدرات المرشحين الآنف إلى المخ.

ويبين الشكل 3 [14ج]-مستويات inulin (معرف % ⁄g الدماغ) في لمبة شمي (A) والمخ (ب)، ولب سيسائيه (ج) التي تم الحصول عليها باستخدام هذين النوعين من الإدارة داخل الآنف المقررة في هذه الدراسة. الإدارة داخل الآنف باستخدام ماصة الأسلوب تمكين التسليم [14ج]-الاينولي...

Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

هنا، نحن تصف أسلوبي الرواية مستقرة الإدارة داخل الآنف تحت التخدير استنشاق مع حد أدنى من الإجهاد البدني للحيوانات التجريبية. ونحن أيضا وصف أسلوب للتقييم الكمي لمستويات توزيع المخدرات في الدماغ عبر مسار الآنف إلى المخ باستخدام راديولابيليد [14ج]-الاينولين كركيزة نموذجية من الجزيئات الكبيرة للذوبان في الماء.

أساليب مبتكرة للإدارة داخل الآنف تحت التخدير استنشاق لتقييم تسليم المخدرات الآنف إلى المخ

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال العلوم الصيدلانية حول الإدارة داخل الأنف ومستحضرات التجميل الدوائية والأدوية من الأدوية ذات الاهتمام. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن استخدامها للتقييم الكمي لمرشحين تسليم الأنف إلى الدماغ واستنشاق التخدير مع الحد الأدنى من الإجهاد للحيوانات. وتمتد آثار هذه التقنية نحو علاج أمراض الجهاز العصبي المركزي لأنها تسهم في تطوير تكنولوجيات توصيل الأدوية عن طريق الطريق من الأنف إلى الدماغ.إثبات الإجراء سيكون ميتسويوشي فوكودا، طالب دكتوراه من مختبري. للتسليم داخل الأنف عن طريق ميكروسيبيت في منشأة منفصلة للنظائر الراديوية. الشريط والجراحة الماوس إلى لوحة الفلين في موقف سوبين، وإدارة 25 ميكرولتررس من حل إينولين الكربون-14 في واحد إلى اثنين جرعات ميكرولتر، بدلا من ذلك، في الخياشيم اليمنى واليسرى للحيوان.للحصول على تسليم التطعيم العكسي من جانب مجرى الهواء عبر المريء، ضع الماوس المُجرّد تحت مجهر تشريح، واصنع شقًا جلديًا طوله 1.5 سنتيمتر فوق الحلق. استخدم ملقط لتوسيع الشق حتى يتعرض القصبة الهوائية، وجعل شق ملليمتر واحد في القصبة الهوائية المكشوفة. أدخل قنية 1.2 سنتيمتر إلى الموضع الذي تم تمييزه مسبقًا في الشق ، وأرفق الطرف المقابل من القنية داخل قناع الاستنشاق.بعد ذلك، استخدم ملقط لفضح المريء من تحت القصبة الهوائية. استخدم المقص لإجراء شق ملليمتر واحد في المريء وأدخل قنية ثانية 1.4 سنتيمتر إلى وضع علامة مسبقة نحو الطرف الخلفي من تجويف الأنف. من المهم إدراج القنية بطول مناسب وفقًا لوزن الحيوان التجريبي وضبط طول القنية في القنولا في الـأخرى.Ligate كانولا المريء وإرفاق إبرة قياس 27 إلى حقنة ملليلتر واحدة مليئة بحل الإدارة المتصلة مضخة ميكروسيرينغ قابلة للبرمجة. ثم تسليم 25 ميكرولتر من الكربون-14 إينولين بمعدل ثابت خمسة ميكرولتر في الدقيقة حتى تم إدارة حجم كامل من الحل. معدل انتشار بطيء ولكن ثابت مهم للاحتفاظ أكبر قدر ممكن من محلول الدواء داخل تجويف الأنف.لتحديد كمية من إينولين الكربون-14 التي عبرت حاجز الدم في الدماغ بعد 30 دقيقة من إدارة إينولين، استخدم مقص لفتح بعناية الجمجمة من كل المعالجة تجريبيا من الجانب oblongata نخاع، واستخدام microspatula لغرف بعناية خارج العقول. ضع كل دماغ على قطعة من ورق التصفية المبلل بالملوحة المالحة في طبق بيتري على الجليد أثناء حصاده. واستخدم مسحة قطنية مبللة بالملوحة لتنظيف أي دم من سطح كل دماغ.المقبل، بسرعة ولكن بعناية، تشريح العقول في لمبة الشم، المخ، ونخاع البحر، ونخاع، بالإضافة إلى أقسام البون. ووضع عينات الدماغ في سولوبيلر الأنسجة لمدة ساعة واحدة في 50 درجة مئوية، تليها إضافة 10 ميكرولترات من كوكتيل التلألؤ السائل. لتحديد النشاط الإشعاعي للحل المطبق ، نقل 25 ميكرولتر أليكوت من حل الإدارة ، المذاب في كوكتيل التلألؤ ، إلى قارورة التلألؤ ، وقياس تفكك في الدقيقة من النشاط الإشعاعي الكربوني -14 داخل عينة الدماغ والحل المطبق في عداد التلألؤ السائل.تحت التخدير الاستنشاقي ، لا يلاحظ أي اختلاف بين الأفراد التجريبية بين الحيوانات التي يتم توصيلها داخل الجسم. عندما يتم استخدام طريقة إدارة تجويف الأنف عكس المريء، لوحظ مستويات أعلى بكثير من إينولين الكربون-14 في لمبة الشم، المخ، و medulla oblongata، من خلال التسليم micropipette. وعلاوة على ذلك، يتم الكشف عن ارتفاع الكربون-14 inulin في لمبة الشم و oblongata medulla, وكلاهما تطورت بشكل بارز في مسار الأنف إلى الدماغ, مما كانت عليه في المخ.بعد تطورها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال الولادة من الأنف إلى الدماغ لاستكشاف النشاط الحيوي للعوامل العلاجية الجزيء كبيرة في الجهاز العصبي المركزي.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Novel Rescue Technique for Difficult Intubation and Difficult Ventilation

تقنية الرواية لانقاذ التنبيب الصعبة والعسيرة التهوية

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which ...

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

استخدام نموذج حيواني للتسمم لتقييم العلاجات العشبية رواية

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Intranasal Administration of CNS Therapeutics to Awake Mice

الأنف التداوي إدارة CNS على الفئران استيقظ

Intranasal administration is a method of delivering  therapeutic agents to the central nervous system (CNS). It is  non-invasive and allows large ...

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

منتبذ المخاطي Engrafting إجراءات تسليم المخدرات مباشرة الى المخ في الفئران

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

داخل اللمعة توصيل الدواء للماوس شرياني الناسور البطانة Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Intranasal Delivery of Therapeutic Stem Cells to Glioblastoma in a Mouse Model

داخل الأنف تسليم الخلايا الجذعية العلاجية إلى الورم الدبقي في نموذج الفأر

The intrinsic tropism towards brain malignancies renders stem cells as promising carriers of therapeutic agents against malignant tumors. The delivery of ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

أسلوب LC-MS/MS الأمثل لتحليل العينات السريرية إيفاكافتور، والايضات الرئيسية، ولوماكافتور في السوائل البيولوجية لمرضى التليف الكيسي الفائق

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

تحسين أسلوب لإنشاء في المختبر حاجز الدم – المخ نموذج استناداً إلى خلايا المخ الخنزيري بطانية

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

التعاونيةالجراحية في التخدير الموضعي في البالغين

Tonsil-related complaints are very common among the adult population. Tonsillectomy under general anesthesia is currently the most performed surgical ...

Intratracheal Administration of Dry Powder Formulation in Mice

الإدارة داخل الراشية لصياغة مسحوق جاف في الفئران

In the development of inhalable dry powder formulations, it is essential to evaluate their biological activities in preclinical animal models. This paper ...