Name: novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery
Uploaded: 2018-11-14T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

Deze studie werd gedeeltelijk ondersteund door de particuliere universiteit Branding onderzoeksproject van MEXT; een Grant-in-Aid voor wetenschappelijke Research (C) (17 K 08249 [naar T.K. en T.S.]) van de Japan Society voor de bevordering van de wetenschap (JSPS); een subsidie voor coöperatief onderzoek van de Hamaguchi-Stichting voor de vooruitgang van Biochemie [naar T.S.], en de Takeda Science Foundation [naar T.K.]. Wij danken de heer Yuya Nito en Ms. Akiko Asami voor hun waardevolle technische bijstand bij de uitvoering van de experimenten.

Deze dierlijke studie (#AP17P004) werd uitgevoerd overeenkomstig de richtsnoeren die zijn goedgekeurd door de Nihon Universiteit Animal Care en gebruik Comité (Tokyo, Japan). Deze studie (#17-0001) werd goedgekeurd door het midden van de isotoop van de School voor farmacie, Nihon Universiteit.
1. dieren die worden gebruikt voor intranasale toediening onder inademing verdoving
<ol><li>Het huis van de experimentele muizen in roestvrij stalen kooien onder een 12-h licht/donker cyclus (licht op...

<ol>
	<li>Sakane, T., Yamashita, S., Yata, N., Sezaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transnasal+delivery+of+5-fluorouracil+to+the+brain+in+the+rat.">Transnasal delivery of 5-fluorouracil to the brain in the rat.</a> Journal of Drug Targeting. 7 (3), 233-240 (1999).</li><li>Illum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transport+of+drugs+from+the+nasal+cavity+to+the+central+nervous+system.">Transport of drugs from the nasal cavity to the central nervous system.</a> European Journal of Pharmaceutical Science. 11 (1), 1-18 (2000).</li><li>Hanson, L. R., Frey, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+bypasses+the+blood-brain+barrier+to+target+therapeutic+agents+to+the+central+nervous+system+and+treat+neurodegenerative+disease.">Intranasal delivery bypasses the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease.</a> BMC Neuroscience. 9 (Suppl 3), S5 (2008).</li><li>Chapman, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+treatment+of+central+nervous+system+dysfunction+in+humans.">Intranasal treatment of central nervous system dysfunction in humans.</a> Pharmaceutical Research. 30 (10), 2475-2484 (2012).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+non-invasive+drug+delivery+system+to+the+brain+for+brain+diseases+therapy.">Development of non-invasive drug delivery system to the brain for brain diseases therapy.</a> Yakugaku-Zasshi. 138 (4), 443-450 (2018).</li><li>Kozlovskaya, L., Abou-Kaoud, M., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+drug+delivery+to+the+brain+via+nasal+route.">Quantitative analysis of drug delivery to the brain via nasal route.</a> Journal of Controlled Release. 189, 133-140 (2014).</li><li>Hirai, S., Yashiki, T., Matsuzawa, T., Mima, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorption+of+drugs+from+the+nasal+mucosa+of+rat.">Absorption of drugs from the nasal mucosa of rat.</a> International Journal of Pharmaceutics. 7 (4), 317-325 (1981).</li><li>Lochhead, J. J., Thorne, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+of+biologics+to+the+central+nervous+system.">Intranasal delivery of biologics to the central nervous system.</a> Advances in Drug Delivery Reviews. 64 (7), 614-628 (2011).</li><li>Lalatsa, A., Schatzlein, A. G., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+deliver+peptide+drugs+to+the+brain.">Strategies to deliver peptide drugs to the brain.</a> Molecular Pharmaceutics. 11 (4), 1081-1093 (2014).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+delivery+of+small+interfering+ribonucleic+acid+and+drugs+through+intranasal+administration+with+nano-sized+polymer+micelles.">Brain delivery of small interfering ribonucleic acid and drugs through intranasal administration with nano-sized polymer micelles.</a> Medical Devices. 8, 57-64 (2015).</li><li>Kanazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+nose-to-brain+delivery+of+hydrophilic+macromolecules+with+stearate-+or+polyethylene+glycol-modified+arginine-rich+peptide.">Enhancement of nose-to-brain delivery of hydrophilic macromolecules with stearate- or polyethylene glycol-modified arginine-rich peptide.</a> International Journal of Pharmacology. 530 (1-2), 195-200 (2017).</li><li>Kamei, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+an+enhanced+nose-to-brain+delivery+of+insulin+on+mild+and+progressive+memory+loss+in+the+senescence-accelerated+mouse.">Effect of an enhanced nose-to-brain delivery of insulin on mild and progressive memory loss in the senescence-accelerated mouse.</a> Molecular Pharmaceutics. 14 (3), 916-927 (2017).</li><li>Suzuki, T., Oshimi, M., Tomono, K., Hanano, M., Watanabe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+transport+mechanism+of+pentazocine+across+the+blood-brain+barrier+using+the+in+situ+rat+brain+perfusion+technique.">Investigation of transport mechanism of pentazocine across the blood-brain barrier using the in situ rat brain perfusion technique.</a> Journal of Pharmaceutical Science. 91 (11), 2346-2353 (2002).</li></ol>

De neus-naar-brain levering van drugs naar verwachting hebben een uitgesproken invloed op het centrale zenuwstelsel-stoornissen omdat dit traject vertegenwoordigt een rechtstreekse vervoer route die rondwegen van de BBB. Drie verschillende routes van de neus-naar-brain zijn bij datum8gemeld. De eerste is de bulbus zenuwtraject, die van de olfactorische mucosa in de nasale mucosa naar de reukkolf via de bulbus zenuw loopt. De tweede is het pad van de nervus trigeminus, die van de respiratoire mucos...

Biomedicines zoals peptiden, oligonucleotides en antilichamen worden beschouwd als potentiële toepassing als nieuwe therapeutische agenten voor vuurvaste centraal zenuwstelsel-stoornissen die momenteel geen curatieve therapie hebben. Omdat de meeste biomedicines wateroplosbaar macromoleculen zijn, is levering uit het bloed naar de hersenen via de intraveneuze of orale toediening echter zeer moeilijk als gevolg van de impedantie van de bloed - hersenbarrière (BBB).
In de afgelopen jaren is intranasale toediening gemeld als een mogelijke weg voor de neus-naar-brain levering van therapeutische agenten die de BBB1,2,3,4,5 vermijdt. Er zijn echter relatief weinig meldingen met betrekking tot de kwantitatieve analyse van neus-aan-hersenen pathway levering6. Bovendien zijn er vrijwel geen verslagen over vastgestelde optimale administratie voorwaarden en doseren regimes, zoals volume, times, periodes, en snelheid, voor onderzoek van de neus-naar-brain levering. De genoemde tekortkomingen kunnen worden toegeschreven aan de volgende redenen: (i) een optimale wijze van intranasale toediening voor muizen nog moet worden vastgesteld, en (ii) intranasale toediening door pipetteren, die over het algemeen wordt gebruikt, wordt doorgaans gekenmerkt door de variatie van de interindividual onder de dieren als gevolg van mucociliary klaring (MC), waardoor het vaak leidt tot underestimations van het potentieel van de feitelijke levering van neus-tot-brein van een bepaald geneesmiddel.
Inademing verdoving met behulp van Isofluraan (Inleiding: 4%, onderhoud: 2%) met een inademing masker voor knaagdieren heeft opgedaan wijdverbreide gebruik, met het doel van het verminderen of elimineren van de pijn geassocieerd met chirurgie uitgevoerd op proefdieren. Het gebruik van maskers maakt het relatief eenvoudig om uit te voeren van typische drug administration bij proefdieren onder inademing verdoving via de subcutane, intraperitoneaal en intraveneuze routes. In het geval van intranasale toediening moet het masker echter worden tijdelijk verwijderd uit de dieren voor drug administration. Met onderhoud onder 2% Isofluraan, dieren meestal ontwaken snel van inademing verdoving. Wanneer het volume van de administratie per dosis groot is, hierdoor kan de oplossing van de drug van de neusholte stromen naar de slokdarm, en dus een enkele grote dosis wellicht worden opgesplitst in meerdere kleinere doses voor intranasale toediening aan kleine dieren. Zoals intranasale toediening noodzakelijk masker verwijderen voor herhaalde toediening en voldoende tijd voor duurzame neusholte levering is, is er een grote kans dat muizen van verdoving tijdens de administratieve procedures ontwaken zou. Dit maakt het erg moeilijk om uit te voeren intranasale toediening onder een stabiele toestand van verdoving, en waarschijnlijk draagt bij tot de waargenomen interindividual variatie van de neus-naar-brain levering onder knaagdieren.
In deze studie ontwikkeld wij daarom twee nieuwe methodes van stabiele intranasale toediening onder inademing verdoving, die minimale fysieke belasting van de proefdieren opleggen. Voor de eerste methode gebruikten we een tijdelijk openable masker waarmee intranasale toediening tijdens inademing verdoving. Het openable gedeelte van het masker bevat een siliconen plug die om stabiele intranasale toediening met behulp van een precisiepipet overeenkomstig administratie timing kan worden gebruikt. Voor de tweede methode, een canule is operatief ingevoegd om het passeren van de slokdarm in de neusholte en een spuitpomp werd vervolgens gekoppeld aan dit zodat de drug oplossing kon worden direct en betrouwbaar bezorgd in de neusholte onder stabiele inademing anesthesie. Deze methode kan het verbeteren van de levering van drugs in de hersenen via de neus-naar-brain-route, omdat door het aanzienlijk het minimaliseren van de effecten van MC, drug retentively in de neusholte zou worden verbeterd. Daarnaast beschrijven we een methode voor het uitrekenen kwantitatief drug distributie niveaus (% voor de ingespoten dosis/g hersenen) in de hersenen met behulp van radio-geëtiketteerden [14C]-inuline [molecuulgewicht (MW): 5.000] als een model substraat van in water oplosbare macromoleculen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ddY mouse</td>
			<td>Japan SLC, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Male, 4-6 weeks, 20-30 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>v002139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane setup</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-OTAir, SN-489-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>For small rodents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask (Opneable type)</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Special orders</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Box</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-85-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-1</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-27H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-13H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-1</td>
			<td>FINE SCIENCE TOOLS Inc.</td>
			<td>11272-30</td>
			<td>Dumont #7 Dumoxel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>A-12-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (PE-50)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company.</td>
			<td>5069773</td>
			<td>I.D.: 0.58 mm, O.D.: 0.965 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (SP-10)</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>KN-392</td>
			<td>I.D.: 0.28 mm, O.D.: 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>MARUKAN, LTD.</td>
			<td>DC-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>SZ61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 27G 1/2 in 13 mm</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>NN-2738R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>SS-01T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>Neuro science</td>
			<td>NE-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellulose membrane</td>
			<td>Toyo Roshi Kaisya, Ltd.</td>
			<td>00011090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro spatula</td>
			<td>Shimizu Akira Inc.</td>
			<td>91-0088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette (0.5-10 uL)</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>Z368083</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette chip</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>0030 000.811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td>TimeMed Labeling System, Inc.</td>
			<td>T-534-R</td>
			<td>For fixing mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[14C]-Inulin</td>
			<td>American Radiolabeled Chemicals Inc.</td>
			<td>ARC0124A</td>
			<td>0.1 mCi/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EtOH</td>
			<td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td>
			<td>054-00461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid scintillation counter</td>
			<td>Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, Inc</td>
			<td>Tri-Carb 4810TR</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery

Intranasale toediening is gemeld als een mogelijke weg voor de neus-naar-brain levering van therapeutische agenten die de bloed - hersenbarrière omzeilt. Echter zijn er enkele verslagen met betrekking tot niet alleen de kwantitatieve analyse, maar ook het beheer van de optimale voorwaarden en dosering van regimes voor onderzoek van de neus-naar-brain levering. De beperkte vooruitgang in onderzoek naar mechanismen van de neus-naar-brain traject met behulp van knaagdieren vertegenwoordigt een aanzienlijke belemmering op het gebied van het ontwerpen van de neus-naar-brain afgiftesystemen voor kandidaat-drugs.
Om te krijgen wat vooruitgang in dit opzicht, wij ontwikkeld en geëvalueerd van twee nieuwe methoden van stabiele intranasale toediening onder inademing verdoving voor proefdieren. Ook beschrijven we een methode voor de beoordeling van de drug distributie niveaus in de hersenen via de neus-aan-hersenen pathway met behulp van radio-geëtiketteerden [14C]-inuline (moleculair gewicht: 5.000) als substraat model van in water oplosbare macromoleculen.
Aanvankelijk, ontwikkelden we een pipet gebaseerde intranasale administratie-protocol met behulp van tijdelijk openable maskers, waardoor ons voor het uitvoeren van betrouwbare toediening aan dieren onder stabiele verdoving. Met behulp van dit systeem, [14C]-inuline kon worden verstuurd naar de hersenen met weinig experimentele fout.
Later ontwikkelden we een intranasale toediening protocol inhoudt van omgekeerde cannulation van de kant van de luchtwegen door de slokdarm, die werd ontwikkeld om te minimaliseren van de effecten van mucociliary klaring (MC). Deze techniek heeft geleid tot aanzienlijk hogere niveaus van [14C]-inuline, die kwantitatief werd ontdekt in de bulbus olfactorius cerebrum en de medulla oblongata, dan de pipetteermethode. Dit lijkt te zijn omdat de handhaving van de drug-oplossing in de neusholte werd aanzienlijk verhoogd door actieve administratie met behulp van een injectiespuit pomp in een richting tegenovergesteld aan de MC in de neusholte.
Kortom, de twee methoden voor intranasale toediening ontwikkeld in deze studie kunnen worden verwacht dat uiterst nuttige technieken voor de beoordeling van de farmacokinetiek bij knaagdieren. De omgekeerde cannulation methode, in het bijzonder zou kunnen nuttig zijn voor de beoordeling van het volledige potentieel van de neus-naar-brain levering van drugkandidaten.

Figuur 3 toont de [14C]-inuline niveaus (ID % ⁄g hersenen) in de bulbus olfactorius (A) hersenen (B) en de medulla oblongata (C) verkregen met behulp van de twee soorten intranasale toediening beoordeeld in de huidige studie. Intranasale toediening met behulp van het pipet methode ingeschakeld levering van [14C]-inuline in de hersenen met behulp van openable inademing maskers (Figuur 1). Onder inademing ve...

Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

Hier beschrijven we twee nieuwe methoden van stabiele intranasale toediening onder inademing verdoving met minimale fysieke stress voor proefdieren. Ook beschrijven we een methode voor kwantitatieve beoordeling van drug distributie niveaus in de hersenen via de neus-aan-hersenen pathway met behulp van radiolabeled [14C]-inuline als model substraat van in water oplosbare macromoleculen.

Nieuwe methoden voor intranasale toediening onder inademing verdoving te evalueren van de neus-naar-Brain Drug Delivery

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...

Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van belangrijke vragen op het gebied van farmaceutische wetenschappen over intranasale administratie en farmacokinetiek en farmacologie van geneesmiddelen van belang. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het kan worden gebruikt voor de kwantitatieve evaluatie van neus-tot-hersenen levering medicijn kandidaten en inademing anesthesie met minimale stress voor de dieren. De implicaties van deze techniek strekt zich uit tot de therapie van ziekten van het centrale zenuwstelsel als het bijdraagt aan de ontwikkeling van drugs levering technologieën via de neus-naar-hersenen route.Het aantonen van de procedure zal Mitsuyoshi Fukuda, een promovendus uit mijn laboratorium. Voor intranasale levering via micropipet in een geïsoleerde radio-isotoopfaciliteit. Tape en verdoven de muis op een kurk bord in de supine positie, en het beheer van 25 microliters van koolstof-14 inuline oplossing in een tot twee microliter doses, als alternatief, in de rechter en linker neusgaten van het dier.Voor omgekeerde cannulation levering van de luchtwegen door de slokdarm, plaats de verdoofde muis onder een ontledenmicroscoop, en maak een 1,5 centimeter huid incisie over de keel. Gebruik tangen om de incisie uit te breiden tot de luchtpijp wordt blootgesteld, en maak een een millimeter incisie in de blootgestelde luchtpijp. Plaats een canule van 1,2 centimeter in de voorgetekende positie in de incisie en bevestig het andere uiteinde van de canule aan de binnenkant van een inademingsmasker.Gebruik hierna tangen om de slokdarm onder de luchtpijp bloot te leggen. Gebruik een schaar om een incisie van een millimeter in de slokdarm te maken en steek een tweede canule van 1,4 centimeter in de voorgetekende positie naar het achterste uiteinde van de neusholte. Het is belangrijk om canule op een juiste lengte in te voegen op basis van het gewicht van het proefdier en de lengte van de canule in andere te passen.Ligate de slokdarm canule en bevestig een 27-gauge naald aan een een milliliter spuit gevuld met een administratie oplossing aangesloten op een programmeerbare microsuitpomp. Lever vervolgens 25 microliter koolstof-14 inuline met een constante snelheid van vijf microliter per minuut totdat het volledige volume van de oplossing is toegediend. Een langzame maar constante diffusiesnelheid is belangrijk voor het behoud van zoveel mogelijk geneesmiddelenoplossing in de neusholte.Om de hoeveelheid koolstof-14 inuline die de bloed-hersenbarrière 30 minuten na de inuline toediening gekruist kwantificeren, gebruik schaar om zorgvuldig open de schedel van elk experimenteel behandeld dier van de medulla oblongata kant, en gebruik een microspatula om zorgvuldig schep uit de hersenen. Plaats elke hersenen op een stuk zoutoplossing bevochtigd filterpapier in een petrischaal op ijs als het wordt geoogst. En gebruik een zoutwaterd wattenstaafje om bloed van het oppervlak van elke hersenen schoon te maken.Vervolgens, snel maar voorzichtig, ontleden de hersenen in reukbol, cerebrum, en medulla oblongata, plus pons secties. En plaats de hersenmonsters in weefselslijmbilator gedurende een uur op 50 graden Celsius, gevolgd door de toevoeging van 10 microliters vloeibare scintillatiecocktail. Om de radioactiviteit van de toegepaste oplossing te bepalen, breng je een 25 microliter aliquot van de toedieningsoplossing over, opgelost in de scintillatiecocktail, naar een scintillatiebrol, en meet je de desintegratie per minuut van de koolstof-14 radioactiviteit in het hersenmonster en de toegepaste oplossing in een vloeibare scintillatieteller.Bij inademingsverdoving wordt geen experimentele inter-individuele variatie waargenomen bij intranasaal geleverde dieren. Wanneer de slokdarm omgekeerde canule neusholte toedieningsmethode wordt gebruikt, aanzienlijk hogere niveaus van koolstof-14 inuline worden waargenomen in de olfactorische bol, cerebrum, en medulla oblongata, dan via micropipette levering. Bovendien wordt hogere koolstof-14 inuline gedetecteerd in de olfactorische bol en de medulla oblongata, die beide prominent zijn geëvolueerd in de neus-naar-hersenen pad, dan in de cerebrum.Na de ontwikkeling maakte deze techniek de weg vrij voor onderzoekers op het gebied van neus-naar-hersenlevering om de bioactiviteit van grote molecuultherapeutische middelen in het centrale zenuwstelsel te onderzoeken.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Novel Rescue Technique for Difficult Intubation and Difficult Ventilation

A Novel Rescue Techniek voor Moeilijke intubatie en Moeilijke Ventilatie

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which ...

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

Het gebruik van dierlijk model van Sepsis op nieuwe kruidentherapieën Evalueer

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Intranasal Administration of CNS Therapeutics to Awake Mice

Intranasale toediening van CNS Therapeutics naar Awake Muizen

Intranasal administration is a method of delivering  therapeutic agents to the central nervous system (CNS). It is  non-invasive and allows large ...

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Heterotope Mucosal engrafting Procedure voor Direct Drug Delivery naar de hersenen in Muizen

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Intraluminale Drug Delivery aan de Mouse fistel endotheel

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Intranasal Delivery of Therapeutic Stem Cells to Glioblastoma in a Mouse Model

Intranasale Levering van Therapeutische Stamcellen aan Glioblastoma in een Muis Model

The intrinsic tropism towards brain malignancies renders stem cells as promising carriers of therapeutic agents against malignant tumors. The delivery of ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

Geoptimaliseerde LC-MS/MS methode voor de analyse van de High-throughput van klinische monsters van Ivacaftor, de belangrijkste metabolieten daarvan en Lumacaftor in biologische vloeistoffen van Cystic Fibrosis patiënten

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Verbeterde methode voor de vaststelling van een In Vitro bloed - hersenbarrière Model gebaseerd op varkens Endothelial hersencellen

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

CO2-lasertonsillotomie onder lokale verdoving bij volwassenen

Tonsil-related complaints are very common among the adult population. Tonsillectomy under general anesthesia is currently the most performed surgical ...

Intratracheal Administration of Dry Powder Formulation in Mice

Intratracheale toediening van droge poederformulering bij muizen

In the development of inhalable dry powder formulations, it is essential to evaluate their biological activities in preclinical animal models. This paper ...