Name: novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery
Uploaded: 2018-11-14T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

מחקר זה נתמך בחלקה על ידי פרטיים אוניברסיטת מחקר מיתוג הפרויקט MEXT; מענק הסיוע עבור מדעי Research (C) (17 K 08249 [אל טי-קיי, ט. ס]) מן האגודה יפן לקידום המדע (JSPS); מענק למחקר קואופרטיב של הקרן אוסאצ'י לקידום של ביוכימיה [ל ט. ס], קרן המדע טקדה [אל טי-קיי]. אנו מודים מר הוא נקרא יויה ניטו, גב' אסאמי אקיקו על סיוע טכני חשוב שלהם בביצוע הניסויים.

מחקר בבעלי חיים (#AP17P004) בוצעה בהתאם להנחיות אושרה על ידי אכפת לי חיה אוניברסיטת ניהון שימוש הוועדה (בטוקיו, יפן). מחקר זה (#17-0001) אושרה על ידי מרכז הספר לרוקחות, האוניברסיטה ניהון Radioisotope.
1. בעלי החיים שבהם משתמשים עבור ניהול תוך-אפי בהרדמה אינהלציה
<ol><li>בית העכברים ניסיוני בכלו...

<ol>
	<li>Sakane, T., Yamashita, S., Yata, N., Sezaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transnasal+delivery+of+5-fluorouracil+to+the+brain+in+the+rat.">Transnasal delivery of 5-fluorouracil to the brain in the rat.</a> Journal of Drug Targeting. 7 (3), 233-240 (1999).</li><li>Illum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transport+of+drugs+from+the+nasal+cavity+to+the+central+nervous+system.">Transport of drugs from the nasal cavity to the central nervous system.</a> European Journal of Pharmaceutical Science. 11 (1), 1-18 (2000).</li><li>Hanson, L. R., Frey, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+bypasses+the+blood-brain+barrier+to+target+therapeutic+agents+to+the+central+nervous+system+and+treat+neurodegenerative+disease.">Intranasal delivery bypasses the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease.</a> BMC Neuroscience. 9 (Suppl 3), S5 (2008).</li><li>Chapman, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+treatment+of+central+nervous+system+dysfunction+in+humans.">Intranasal treatment of central nervous system dysfunction in humans.</a> Pharmaceutical Research. 30 (10), 2475-2484 (2012).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+non-invasive+drug+delivery+system+to+the+brain+for+brain+diseases+therapy.">Development of non-invasive drug delivery system to the brain for brain diseases therapy.</a> Yakugaku-Zasshi. 138 (4), 443-450 (2018).</li><li>Kozlovskaya, L., Abou-Kaoud, M., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+drug+delivery+to+the+brain+via+nasal+route.">Quantitative analysis of drug delivery to the brain via nasal route.</a> Journal of Controlled Release. 189, 133-140 (2014).</li><li>Hirai, S., Yashiki, T., Matsuzawa, T., Mima, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorption+of+drugs+from+the+nasal+mucosa+of+rat.">Absorption of drugs from the nasal mucosa of rat.</a> International Journal of Pharmaceutics. 7 (4), 317-325 (1981).</li><li>Lochhead, J. J., Thorne, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+of+biologics+to+the+central+nervous+system.">Intranasal delivery of biologics to the central nervous system.</a> Advances in Drug Delivery Reviews. 64 (7), 614-628 (2011).</li><li>Lalatsa, A., Schatzlein, A. G., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+deliver+peptide+drugs+to+the+brain.">Strategies to deliver peptide drugs to the brain.</a> Molecular Pharmaceutics. 11 (4), 1081-1093 (2014).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+delivery+of+small+interfering+ribonucleic+acid+and+drugs+through+intranasal+administration+with+nano-sized+polymer+micelles.">Brain delivery of small interfering ribonucleic acid and drugs through intranasal administration with nano-sized polymer micelles.</a> Medical Devices. 8, 57-64 (2015).</li><li>Kanazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+nose-to-brain+delivery+of+hydrophilic+macromolecules+with+stearate-+or+polyethylene+glycol-modified+arginine-rich+peptide.">Enhancement of nose-to-brain delivery of hydrophilic macromolecules with stearate- or polyethylene glycol-modified arginine-rich peptide.</a> International Journal of Pharmacology. 530 (1-2), 195-200 (2017).</li><li>Kamei, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+an+enhanced+nose-to-brain+delivery+of+insulin+on+mild+and+progressive+memory+loss+in+the+senescence-accelerated+mouse.">Effect of an enhanced nose-to-brain delivery of insulin on mild and progressive memory loss in the senescence-accelerated mouse.</a> Molecular Pharmaceutics. 14 (3), 916-927 (2017).</li><li>Suzuki, T., Oshimi, M., Tomono, K., Hanano, M., Watanabe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+transport+mechanism+of+pentazocine+across+the+blood-brain+barrier+using+the+in+situ+rat+brain+perfusion+technique.">Investigation of transport mechanism of pentazocine across the blood-brain barrier using the in situ rat brain perfusion technique.</a> Journal of Pharmaceutical Science. 91 (11), 2346-2353 (2002).</li></ol>

האף-אל-מוח מסירת תרופות צפויה להיות השפעה מובהקת על הפרעות במערכת העצבים המרכזית, כי מסלול זה מייצג את נתיב תחבורה ישירה עוקף BBB. שלושה מסלולים האף-אל-מוח שונים דווח תאריך8. הראשון הוא מסלול עצב הריח, אשר עובר מן רירית חוש הריח של רירית האף הקדמי דרך העצב הריח. השני הוא מסלול העצב...

Biomedicines כמו פפטידים, oligonucleotides נוגדנים נחשבים יש פוטנציאל היישום בתור הרומן סוכני טיפולית להפרעות במערכת העצבים המרכזית עקשן שיש כיום אין טיפול מרפא. אולם, מאחר שרוב biomedicines הם מקרומולקולות מסיסים במים, משלוח מהדם למוח באמצעות ניהול תוך ורידי או אוראלי הוא קשה מאוד בשל התנגדות של מחסום הדם - מוח (BBB).
בשנים האחרונות, ניהול תוך-אפי דווח כדי להיות שביל פוטנציאליים עבור משלוח האף-אל-מוח של סוכני טיפולית אשר ימנע BBB1,2,3,4,5. עם זאת, היו דיווחים מעטים יחסית לגבי ניתוח כמותי של האף-אל-מוח מסלול משלוח6. יתר על כן, היו כמעט אין דיווחים על ניהול אופטימלי ויצר ותנאים משטרי מינון, כגון עוצמת, פעמים, פרקי זמן, מהירות, החקירות של משלוח האף-אל-מוח. הליקויים הנ ל יכול להיות מיוחסות מהסיבות הבאות: (i) אופטימלי שיטה מינהל תוך-אפי עבור עכברים טרם שתוקם, והוא הניהול תוך-אפי (ii) מאת pipetting, המשמש בדרך כלל, מאופיין בדרך כלל מאת וריאציה interindividual בקרב חיות עקב סיווג בשחרור ליחה (MC), ובכך לעיתים קרובות המוביל underestimations של הפוטנציאל משלוח האף-אל-מוח בפועל של תרופה מסוימת.
שאיפת הרדמה באמצעות איזופלוריין (חניכה: 4%, תחזוקה: 2%) עם שאיפה מסכת מכרסמים צבר השימוש הנרחב, עם המטרה של צמצום או ביטול הכאב הקשורים לניתוח מתבצע על חיות ניסוי. השימוש של מסיכות הופכת פשוטה יחסית לביצוע טיפוסי והתרופות האמריקני בחיות ניסוי בהרדמה שאיפה דרך המסלולים תת עורית, בקרום הבטן, תוך ורידי. עם זאת, במקרה של הממשל תוך-אפי, המסכה צריך יוסרו באופן זמני מן החיות עבור והתרופות האמריקני. עם תחזוקה מתחת לגיל 2% איזופלוריין, בעלי חיים בדרך כלל לעורר במהירות מן ההרדמה אינהלציה. כאשר אמצעי האחסון המינהל לכל במינון גדול, זה יכול לגרום הפתרון סמים יזרום חלל האף לתוך הוושט, ולכן מנה גדולה אחת יכול ויהיה צורך ניתן לפרק מינונים קטנים מרובים עבור ניהול תוך-אפי קטן בעלי חיים. ניהול תוך-אפי מחייבת הסרת המסכה לניהול חוזרות ולא מספיק זמן לאספקה מתמשכת חלל האף, יש הסתברות גבוהה המעוררים עכברים מן ההרדמה במהלך ההליך המינהל. זה מקשה מאוד לבצע ניהול תוך-אפי תחת הרדמה מדינה יציבה, כנראה תורמת וריאציית interindividual נצפתה האף-אל-מוח המסירה בין מכרסמים.
במחקר זה, לכן פיתחנו שתי שיטות רומן מינהל תוך-אפי יציב תחת הרדמה אינהלציה, אשר לכפות לחץ פיזי על החיות ניסיוני. עבור השיטה הראשונה, השתמשנו מסיכה זמנית openable המאפשרת ניהול תוך-אפי במהלך הרדמה אינהלציה. החלק openable של המסכה משלבת פקק סיליקון יכול לשמש על פי תזמון ניהול כדי להקל על הניהול תוך-אפי יציבה באמצעות פיפטה. השיטה השנייה, בצינורית הוכנס בניתוח לעבור מהוושט אל תוך חלל האף, מזרק משאבה היה אז מצורף לזה כך הפתרון סמים יכול ישירות ובאמינות להישלח אל תוך חלל האף תחת שאיפת יציב הרדמה. בשיטה זו ניתן לשפר את המסירה של תרופות למוח באמצעות תוואי האף-אל-מוח, כי על-ידי מזעור באופן משמעותי את ההשפעות של MC, יהיה משופר סמים retentively בחלל האף. בנוסף, אנו מתארים שיטה להערכת באופן כמותי את רמות הפצת סמים (% למוח במינון שהוחדר/g) במוח באמצעות התווית על-ידי רדיו [14ג]-אינולין [משקל מולקולרי (MW): 5,000] כמו מצע מודל של מסיסים במים מקרומולקולות.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ddY mouse</td>
			<td>Japan SLC, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Male, 4-6 weeks, 20-30 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>v002139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane setup</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-OTAir, SN-489-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>For small rodents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask (Opneable type)</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Special orders</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Box</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-85-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-1</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-27H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-13H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-1</td>
			<td>FINE SCIENCE TOOLS Inc.</td>
			<td>11272-30</td>
			<td>Dumont #7 Dumoxel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>A-12-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (PE-50)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company.</td>
			<td>5069773</td>
			<td>I.D.: 0.58 mm, O.D.: 0.965 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (SP-10)</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>KN-392</td>
			<td>I.D.: 0.28 mm, O.D.: 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>MARUKAN, LTD.</td>
			<td>DC-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>SZ61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 27G 1/2 in 13 mm</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>NN-2738R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>SS-01T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>Neuro science</td>
			<td>NE-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellulose membrane</td>
			<td>Toyo Roshi Kaisya, Ltd.</td>
			<td>00011090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro spatula</td>
			<td>Shimizu Akira Inc.</td>
			<td>91-0088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette (0.5-10 uL)</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>Z368083</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette chip</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>0030 000.811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td>TimeMed Labeling System, Inc.</td>
			<td>T-534-R</td>
			<td>For fixing mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[14C]-Inulin</td>
			<td>American Radiolabeled Chemicals Inc.</td>
			<td>ARC0124A</td>
			<td>0.1 mCi/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EtOH</td>
			<td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td>
			<td>054-00461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid scintillation counter</td>
			<td>Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, Inc</td>
			<td>Tri-Carb 4810TR</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery

ניהול תוך-אפי דווח כדי להיות שביל פוטנציאליים עבור משלוח האף-אל-מוח של סוכני טיפולית העוקפות את מחסום הדם - מוח. עם זאת, היו כמה דיווחים בדבר לא רק ניתוח כמותי אלא גם תנאי ניהול אופטימלי של משטרי החקירות של משלוח האף-אל-מוח. התקדמות מוגבלת במחקר על מנגנונים מסלול האף-אל-מוח באמצעות מכרסמים מייצג של ליקוי משמעותי מבחינת תכנון מערכות אספקה האף-אל-מוח עבור תרופות.
כדי לקבל איזושהי התקדמות בהקשר זה, אנו פיתח, הערכה שתי שיטות רומן מינהל תוך-אפי יציב בהרדמה שאיפת חיות ניסוי. גם נתאר שיטת הערכת רמות הפצת סמים במוח דרך השביל האף-אל-מוח באמצעות התווית על-ידי רדיו [14ג]-אינולין (משקל מולקולרי: 5,000) כמו מצע מודל של מקרומולקולות מסיסים במים.
בתחילה, פיתחנו פרוטוקול ניהול תוך-אפי מבוסס פיפטה שימוש במסיכות באופן זמני openable, שאיפשר לנו לבצע ניהול אמין כלפי בעלי חיים תחת הרדמה יציב. באמצעות מערכת זו, [14ג]-אינולין היתה אפשרות להעביר את המוח עם שגיאה ניסוי קטן.
לאחר מכן פיתחנו פרוטוקול ניהול תוך-אפי פרוגרמה תעלות הפוכה מן הצד דרכי הנשימה דרך הוושט, אשר פותחה כדי למזער את ההשפעות של סיווג בשחרור ליחה (MC). טכניקה זו הובילה רמות גבוהות באופן משמעותי [14ג]-אינולין, אשר זוהה באופן כמותי הריח הנורה המוח הגדול, המוח המוארך, מאשר השיטה פיפטה. זה מופיע כי השמירה של הפתרון סמים בחלל האף היה גדל באופן משמעותי על ידי המינהל פעיל באמצעות מזרק משאבה בכיוון ההפוך המטאלקאמפ לתוך חלל האף.
לסיכום, שתי שיטות של ניהול תוך-אפי שפותחו במחקר זה צפוי להיות מאוד שימושי טכניקות להערכת פרמקוקינטיקה בחולדות. שיטת תעלות הפוכה, בפרט, עשוי להיות שימושי עבור הערכת הפוטנציאל המלא של האף-אל-מוח משלוח סמים מועמדים

איור 3 מראה את14ג]-אינולין רמות (מזהה % ⁄g המוח) הריח הנורה (א), המוח (B), לבין המוח המוארך (ג) שהושג באמצעות שני סוגים של המינהל תוך-אפי העריך במחקר הנוכחי. ניהול תוך-אפי באמצעות פיפטה מופעלת שיטת מסירת [14ג]-אינולין למוח באמצעות אינהלציה openable מסכות (<str...

Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

כאן, אנו מתארים שתי שיטות רומן מינהל תוך-אפי יציב בהרדמה אינהלציה עם לחץ פיזי חיות ניסוי. גם נתאר שיטת הערכה כמותית של סמים רמות הפצה במוח באמצעות מסלול האף-אל-מוח באמצעות radiolabeled14ג]-אינולין כמו מצע מודל של מקרומולקולות מסיסים במים.

הרומן שיטות לניהול תוך-אפי בהרדמה אינהלציה כדי להעריך את האף-אל-מוח תרופות

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי התרופות על ניהול תוך-רנסאלי ופרמקוקינטיקה ופרמקולוגיה של תרופות מעניינות. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן להשתמש בה להערכה כמותית של מועמדים לתרופה ללידה מאף למוח והרדמת שאיפה עם לחץ מינימלי לבעלי החיים. ההשלכות של טכניקה זו משתרעת לכיוון הטיפול במחלות של מערכת העצבים המרכזית כפי שהוא תורם לפיתוח טכנולוגיות אספקת תרופות דרך המסלול האף למוח.הדגמת ההליך תהיה מיצויושי פוקודה, דוקטורנט מהמעבדה שלי. למשלוח תוך-רנסאלי באמצעות מיקרופיגט במתקן איזוטופ רדיו מבודד. קלטת ועכבר הרדמה ללוח פקק במצב supine, ולנהל 25 microliters של פחמן-14 אינולין פתרון אחד עד שני מינונים microliter, לחילופין, לתוך הנחיריים הימני והשמאלי של החיה.עבור משלוח cannulation הפוך מצד דרכי הנשימה דרך הוושט, מניחים את העכבר הרדמה תחת מיקרוסקופ ניתוח, ולעשות חתך בעור 1.5 ס"מ על הגרון. השתמש במדחפים כדי להרחיב את החתך עד קנה הנשימה נחשף, ולעשות חתך מילימטר אחד קנה הנשימה חשוף. הכנס cannula 1.2 ס"מ למיקום המסומן מראש לתוך החתך, ולצרף את הקצה הנגדי של cannula לתוך מסכת שאיפה.לאחר מכן, השתמש במטסים כדי לחשוף את הוושט מתחת קנה הנשימה. השתמש במספריים כדי להפוך חתך מילימטר אחד בוושט ולהכניס קנולה שנייה 1.4 ס"מ למיקום המסומן מראש לכיוון הקצה האחורי של חלל האף. חשוב להכניס את ה cannula לאורך מתאים על פי המשקל של החיה הניסיונית ולהתאים את אורך cannula אלה אחרים.Ligate את ה cannula הוושט ולצרף מחט 27-מד מזרק מיליליטר אחד מלא פתרון ניהול מחובר משאבת microsyringe ניתנת לתיכנת. לאחר מכן לספק 25 microliters של פחמן-14 אינולין בקצב קבוע חמישה microliter לדקה עד נפח הפתרון כולו כבר מנוהל. קצב דיפוזיה איטי אך מתמיד חשוב לשמירה על פתרון תרופתי רב ככל האפשר בתוך חלל האף.כדי לכמת את כמות אינולין פחמן-14 שחצה את מחסום הדם - מוח 30 דקות לאחר הממשל אינולין, להשתמש במספריים כדי לפתוח בזהירות את הגולגולת של כל חיה שטופלו בניסויים מהצד medulla oblongata, ולהשתמש microspatula כדי לגרוף בזהירות את המוח. מניחים כל מוח על פיסת נייר מסנן מלוחים בצלחת פטרי על קרח כפי שהוא שנקטף. ולהשתמש ספוג כותנה ספוגה מלוחים כדי לנקות כל דם מפני השטח של כל מוח.לאחר מכן, במהירות אך בזהירות, לנתח את המוח לתוך נורת חוש הריח, cerebrum, ו medulla oblongata, בתוספת סעיפי פונס. ומ מניחים את דגימות המוח במתבודד רקמות במשך שעה אחת ב 50 מעלות צלזיוס, ואחריו תוספת של 10 microliters של קוקטייל חריץ נוזלי. כדי לקבוע את הרדיואקטיביות של הפתרון המיושם, להעביר aliquot 25 microliter של פתרון הממשל, מומס בקוקטייל scintillation, לבקבוקון scintillation, ולמדוד את ההתפוררויות לדקה של רדיואקטיביות פחמן-14 בתוך דגימת המוח ואת הפתרון להחיל בנטרל scintillation נוזלי.תחת הרדמה בשאיפה, לא נצפתה וריאציה בין-אינדיבידואלית ניסיונית בקרב בעלי חיים המועברים באמצעות סמים תוך-nasally. כאשר נעשה שימוש בשיטת ניהול חלל האף ההפוכה הוושטית, רמות גבוהות משמעותית של אינולין פחמן-14 נצפו בנורה חוש הריח, המוח הגדול, ו medulla oblongata, מאשר באמצעות משלוח מיקרופיגט. יתר על כן, אינולין פחמן-14 גבוה יותר מזוהה בנורה חוש הריח ואת medulla oblongata, שניהם מפותחים באופן בולט במסלול האף למוח, מאשר במוח הרחם.לאחר התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום מסירת האף למוח כדי לחקור את הביואקטיביות של סוכנים טיפוליים מולקולה גדולה במערכת העצבים המרכזית.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Novel Rescue Technique for Difficult Intubation and Difficult Ventilation

הצלה רומן טכניקה אינטובציה קשה אוורור קשה

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which ...

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

שימוש במודל של בעלי חיים אלח דם להערכת טיפולים צמחים רומן

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Intranasal Administration of CNS Therapeutics to Awake Mice

מנהל אפי של Therapeutics CNS לעכברי Awake

Intranasal administration is a method of delivering  therapeutic agents to the central nervous system (CNS). It is  non-invasive and allows large ...

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Heterotopic הרירי Engrafting נוהל העברת תרופות ישיר למוח בעכברים

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

החדרת תרופות Intraluminal אל האנדותל מורסה arteriovenous עכבר

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Intranasal Delivery of Therapeutic Stem Cells to Glioblastoma in a Mouse Model

אספקה ​​אינטראנסלית של תאים בתאי גזע כדי גליובלסטומה במודל עכבר

The intrinsic tropism towards brain malignancies renders stem cells as promising carriers of therapeutic agents against malignant tumors. The delivery of ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

שיטת אופטימיזציה LC-MS/MS לניתוח תפוקה גבוהה של דגימות קליניות של Ivacaftor, שלה מטבוליטים העיקריים Lumacaftor של נוזלים ביולוגיים של חולי סיסטיק פיברוזיס

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

שיפור שיטה להקמת במבחנה מחסום הדם - מוח מודל המבוסס על תאי אנדותל המוח חזירי

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

CO2-Lasertonsillotomy תחת הרדמה מקומית אצל מבוגרים

Tonsil-related complaints are very common among the adult population. Tonsillectomy under general anesthesia is currently the most performed surgical ...

Intratracheal Administration of Dry Powder Formulation in Mice

ניהול תוך-סחיר של ניסוח אבקה יבשה בעכברים

In the development of inhalable dry powder formulations, it is essential to evaluate their biological activities in preclinical animal models. This paper ...