Name: novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery
Uploaded: 2018-11-14T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

इस अध्ययन के हिस्से में MEXT से निजी विश्वविद्यालय अनुसंधान ब्रांडिंग परियोजना द्वारा समर्थित किया गया था; विज्ञान (JSPS) के संवर्धन के लिए जापान सोसाइटी से वैज्ञानिक अनुसंधान (सी) (17K08249 [to तपन and T.S.]) के लिए एक अनुदान-सहायता; जैव रसायन की उन्नति के लिए Hamaguchi फाउंडेशन से सहकारी अनुसंधान के लिए अनुदान [to T.S.], और टाकेडा विज्ञान फाउंडेशन [to तपन] । प्रयोगों को आयोजित करने में उनकी बहुमूल्य तकनीकी सहायता के लिए हम श्री यूया नीतो और सुश्री अकिको असामी का धन्यवाद करते हैं.

इस पशु अध्ययन (#AP17P004) Nihon विश्वविद्यालय पशु देखभाल और उपयोग समिति (टोक्यो, जापान) द्वारा अनुमोदित दिशा निर्देशों के अनुसार किया गया था । यह अध्ययन (#17-0001) स्कूल ऑफ फार्मेसी, Nihon विश्वविद्यालय के रेडियो आइसोटोप ?...

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	<li>Sakane, T., Yamashita, S., Yata, N., Sezaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transnasal+delivery+of+5-fluorouracil+to+the+brain+in+the+rat.">Transnasal delivery of 5-fluorouracil to the brain in the rat.</a> Journal of Drug Targeting. 7 (3), 233-240 (1999).</li><li>Illum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transport+of+drugs+from+the+nasal+cavity+to+the+central+nervous+system.">Transport of drugs from the nasal cavity to the central nervous system.</a> European Journal of Pharmaceutical Science. 11 (1), 1-18 (2000).</li><li>Hanson, L. R., Frey, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+bypasses+the+blood-brain+barrier+to+target+therapeutic+agents+to+the+central+nervous+system+and+treat+neurodegenerative+disease.">Intranasal delivery bypasses the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease.</a> BMC Neuroscience. 9 (Suppl 3), S5 (2008).</li><li>Chapman, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+treatment+of+central+nervous+system+dysfunction+in+humans.">Intranasal treatment of central nervous system dysfunction in humans.</a> Pharmaceutical Research. 30 (10), 2475-2484 (2012).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+non-invasive+drug+delivery+system+to+the+brain+for+brain+diseases+therapy.">Development of non-invasive drug delivery system to the brain for brain diseases therapy.</a> Yakugaku-Zasshi. 138 (4), 443-450 (2018).</li><li>Kozlovskaya, L., Abou-Kaoud, M., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+drug+delivery+to+the+brain+via+nasal+route.">Quantitative analysis of drug delivery to the brain via nasal route.</a> Journal of Controlled Release. 189, 133-140 (2014).</li><li>Hirai, S., Yashiki, T., Matsuzawa, T., Mima, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorption+of+drugs+from+the+nasal+mucosa+of+rat.">Absorption of drugs from the nasal mucosa of rat.</a> International Journal of Pharmaceutics. 7 (4), 317-325 (1981).</li><li>Lochhead, J. J., Thorne, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+of+biologics+to+the+central+nervous+system.">Intranasal delivery of biologics to the central nervous system.</a> Advances in Drug Delivery Reviews. 64 (7), 614-628 (2011).</li><li>Lalatsa, A., Schatzlein, A. G., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+deliver+peptide+drugs+to+the+brain.">Strategies to deliver peptide drugs to the brain.</a> Molecular Pharmaceutics. 11 (4), 1081-1093 (2014).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+delivery+of+small+interfering+ribonucleic+acid+and+drugs+through+intranasal+administration+with+nano-sized+polymer+micelles.">Brain delivery of small interfering ribonucleic acid and drugs through intranasal administration with nano-sized polymer micelles.</a> Medical Devices. 8, 57-64 (2015).</li><li>Kanazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+nose-to-brain+delivery+of+hydrophilic+macromolecules+with+stearate-+or+polyethylene+glycol-modified+arginine-rich+peptide.">Enhancement of nose-to-brain delivery of hydrophilic macromolecules with stearate- or polyethylene glycol-modified arginine-rich peptide.</a> International Journal of Pharmacology. 530 (1-2), 195-200 (2017).</li><li>Kamei, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+an+enhanced+nose-to-brain+delivery+of+insulin+on+mild+and+progressive+memory+loss+in+the+senescence-accelerated+mouse.">Effect of an enhanced nose-to-brain delivery of insulin on mild and progressive memory loss in the senescence-accelerated mouse.</a> Molecular Pharmaceutics. 14 (3), 916-927 (2017).</li><li>Suzuki, T., Oshimi, M., Tomono, K., Hanano, M., Watanabe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+transport+mechanism+of+pentazocine+across+the+blood-brain+barrier+using+the+in+situ+rat+brain+perfusion+technique.">Investigation of transport mechanism of pentazocine across the blood-brain barrier using the in situ rat brain perfusion technique.</a> Journal of Pharmaceutical Science. 91 (11), 2346-2353 (2002).</li></ol>

दवाओं के नाक-मस्तिष्क वितरण केंद्रीय तंत्रिका तंत्र विकारों पर एक स्पष्ट प्रभाव है क्योंकि यह मार्ग एक सीधा परिवहन मार्ग है कि BBB बाईपास का प्रतिनिधित्व करता है की उंमीद है । तीन अलग नाक से मस्तिष्क मा?...

ऐसे पेप्टाइड्स, oligonucleotides, और एंटीबॉडी के रूप में ऐसी दवाओं दुर्दम्य केंद्रीय तंत्रिका तंत्र विकारों है कि वर्तमान में कोई उपचारात्मक चिकित्सा के लिए उपंयास चिकित्सकीय एजेंटों के रूप में संभावित आवेदन किया है माना जाता है । हालांकि, क्योंकि ज्यादातर दवाओं पानी में घुलनशील अणुओं, नसों या मौखिक प्रशासन के माध्यम से मस्तिष्क में रक्त से प्रसव बहुत मुश्किल रक्त मस्तिष्क बाधा (BBB) के प्रतिबाधा के कारण है ।
हाल के वर्षों में, intranasal प्रशासन के लिए एक संभावित मार्ग होने की सूचना दी गई है नाक के लिए चिकित्सकीय एजेंटों के मस्तिष्क वितरण कि BBB1,2,3,4,5से बचा जाता है । हालांकि, वहां गया है अपेक्षाकृत कुछ नाक-मस्तिष्क मार्ग प्रसव6के मात्रात्मक विश्लेषण के बारे में रिपोर्ट । इसके अलावा, वहां लगभग स्थापित इष्टतम प्रशासन की स्थिति पर कोई रिपोर्ट किया गया है और इस तरह की मात्रा, समय, समय के रूप में आहार खुराक,, और गति, नाक से मस्तिष्क वितरण की जांच के लिए । aforementioned कमियों को निंनलिखित कारणों से जिंमेदार माना जा सकता है: (i) चूहों के लिए intranasal प्रशासन की एक इष्टतम विधि अभी तक स्थापित किया जाना है, और (ii) pipetting द्वारा intranasal प्रशासन, जो आम तौर पर इस्तेमाल किया जाता है, आम तौर पर विशेषता है mucociliary मंजूरी (एम सी) के कारण जानवरों के बीच व्यक्तिगत भिंनता के द्वारा, जिससे अक्सर एक विशेष दवा के वास्तविक नाक से मस्तिष्क प्रसव की क्षमता के अनुमान के लिए अग्रणी ।
साँस लेना संज्ञाहरण का उपयोग isoflurane (दीक्षा: 4%, रखरखाव: 2%) कुतर के लिए एक साँस लेना मुखौटा के साथ व्यापक उपयोग प्राप्त की है, को कम करने या सर्जरी के साथ जुड़े दर्द को दूर करने के उद्देश्य के साथ प्रयोगात्मक पशुओं पर प्रदर्शन किया । मास्क का उपयोग यह अपेक्षाकृत चमड़े के नीचे, intraperitoneal के माध्यम से सांस लेना संज्ञाहरण के तहत प्रयोगात्मक पशुओं में ठेठ दवा प्रशासन प्रदर्शन करने के लिए सरल बनाता है, और नसों में मार्गों । हालांकि, intranasal प्रशासन के मामले में, मुखौटा दवा प्रशासन के लिए पशुओं से अस्थाई रूप से हटाने की जरूरत है । 2% isoflurane के तहत रखरखाव के साथ, जानवरों आमतौर पर साँस लेना संज्ञाहरण से तेजी से जगाने. जब खुराक प्रति प्रशासन मात्रा बड़ा है, यह दवा समाधान के लिए नाक गुहा से घेघा में प्रवाह करने के लिए कारण हो सकता है, और इसलिए एक भी बड़ी खुराक छोटे करने के लिए intranasal प्रशासन के लिए कई छोटी खुराक में टूट करने की आवश्यकता हो सकती है जानवरों. के रूप में intranasal प्रशासन दोहराया प्रशासन और निरंतर नाक गुहा प्रसव के लिए पर्याप्त समय के लिए मुखौटा हटाने आवश्यक, वहां एक उच्च संभावना है कि चूहों संज्ञाहरण से प्रशासन की प्रक्रिया के दौरान जगाने होता है । यह यह बहुत मुश्किल एक स्थिर संवेदनाहारी राज्य के तहत intranasal प्रशासन प्रदर्शन करने के लिए बनाता है, और शायद को कुतर के बीच नाक से मस्तिष्क वितरण के एक अलग भिन्नता मनाया करने के लिए योगदान देता है ।
इस अध्ययन में, हम इसलिए सांस लेना संज्ञाहरण के तहत स्थिर intranasal प्रशासन के दो उपंयास तरीके विकसित किया है, जो प्रयोगात्मक पशुओं पर ंयूनतम शारीरिक तनाव लागू । पहली विधि के लिए, हम एक अस्थाई रूप से खुला मुखौटा है कि सांस लेना संज्ञाहरण के दौरान intranasal प्रशासन सक्षम बनाता था । मुखौटा का खुला हिस्सा एक सिलिकॉन प्लग है कि प्रशासन के समय के अनुसार एक पिपेट का उपयोग कर स्थिर intranasal प्रशासन की सुविधा के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है शामिल हैं । दूसरी विधि के लिए, एक प्रवेशनी शल्य चिकित्सा के लिए नाक गुहा में घेघा से गुजारें डाला गया था, और एक सिरिंज पंप तो इस से जुड़ा था ताकि दवा समाधान सीधे और मज़बूती से स्थिर साँस लेना के तहत नाक गुहा में दिया जा सकता है संज्ञाहरण. इस विधि नाक से मस्तिष्क मार्ग के माध्यम से मस्तिष्क में दवाओं के वितरण में वृद्धि कर सकते हैं, क्योंकि काफी हद तक एम सी के प्रभाव को कम करने, नाक गुहा में दवा retentively में सुधार किया जाएगा. इसके अलावा, हम मात्रात्मक दवा वितरण के स्तर का मूल्यांकन के लिए एक विधि का वर्णन (% इंजेक्शन खुराक के लिए/मस्तिष्क में) रेडियो-लेबल का उपयोग कर [14C]-inulin [आणविक भार (मेगावाट): ५,०००] के रूप में पानी की एक मॉडल सब्सट्रेट-घुलनशील अणुओं.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ddY mouse</td>
			<td>Japan SLC, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Male, 4-6 weeks, 20-30 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>v002139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane setup</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-OTAir, SN-489-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>For small rodents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask (Opneable type)</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Special orders</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Box</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-85-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-1</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-27H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-13H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-1</td>
			<td>FINE SCIENCE TOOLS Inc.</td>
			<td>11272-30</td>
			<td>Dumont #7 Dumoxel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>A-12-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (PE-50)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company.</td>
			<td>5069773</td>
			<td>I.D.: 0.58 mm, O.D.: 0.965 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (SP-10)</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>KN-392</td>
			<td>I.D.: 0.28 mm, O.D.: 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>MARUKAN, LTD.</td>
			<td>DC-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>SZ61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 27G 1/2 in 13 mm</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>NN-2738R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>SS-01T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>Neuro science</td>
			<td>NE-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellulose membrane</td>
			<td>Toyo Roshi Kaisya, Ltd.</td>
			<td>00011090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro spatula</td>
			<td>Shimizu Akira Inc.</td>
			<td>91-0088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette (0.5-10 uL)</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>Z368083</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette chip</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>0030 000.811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td>TimeMed Labeling System, Inc.</td>
			<td>T-534-R</td>
			<td>For fixing mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[14C]-Inulin</td>
			<td>American Radiolabeled Chemicals Inc.</td>
			<td>ARC0124A</td>
			<td>0.1 mCi/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EtOH</td>
			<td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td>
			<td>054-00461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid scintillation counter</td>
			<td>Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, Inc</td>
			<td>Tri-Carb 4810TR</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery

Intranasal प्रशासन को नाक के लिए एक संभावित मार्ग के लिए चिकित्सकीय एजेंटों की मस्तिष्क वितरण कि रक्त मस्तिष्क बाधा को दरकिनार होना बताया गया है । हालांकि, वहां कुछ ही नहीं मात्रात्मक विश्लेषण पर भी इष्टतम प्रशासन की स्थिति और नाक की जांच के लिए परहेजों खुराक-मस्तिष्क वितरण के बारे में रिपोर्ट किया गया है । नाक पर अनुसंधान में सीमित प्रगति-मस्तिष्क मार्ग तंत्र कुतर का उपयोग करने के लिए उंमीदवार दवाओं के लिए नाक से मस्तिष्क वितरण प्रणाली डिजाइन करने के मामले में एक महत्वपूर्ण बाधा का प्रतिनिधित्व करता है ।
इस संबंध में कुछ प्रगति हासिल करने के लिए, हम विकसित और प्रयोगात्मक पशुओं के लिए सांस लेना संज्ञाहरण के तहत स्थिर intranasal प्रशासन के दो उपंयास तरीकों का मूल्यांकन किया । हम भी नाक के माध्यम से मस्तिष्क में दवा वितरण के स्तर के मूल्यांकन के लिए एक विधि का वर्णन करने के लिए मस्तिष्क मार्ग रेडियो का उपयोग-लेबल [14C]-inulin (आणविक वजन: ५,०००) पानी की एक मॉडल सब्सट्रेट के रूप में घुलनशील अणुओं.
शुरू में, हम एक पिपेट आधारित intranasal प्रशासन अस्थाई रूप से खुला मास्क, जो हमें स्थिर संज्ञाहरण के तहत पशुओं के लिए विश्वसनीय प्रशासन प्रदर्शन करने के लिए सक्षम प्रोटोकॉल का उपयोग कर विकसित की है । इस प्रणाली का प्रयोग, [14सी]-inulin थोड़ा प्रयोगात्मक त्रुटि के साथ मस्तिष्क को दिया जा सकता है ।
हम बाद में घेघा, जो mucociliary क्लीयरेंस (एम सी) के प्रभाव को कम करने के लिए विकसित किया गया था के माध्यम से airway पक्ष से रिवर्स cannulation पर जोर देकर एक intranasal प्रशासन प्रोटोकॉल विकसित की है । इस तकनीक के काफी उच्च स्तर के लिए नेतृत्व [14सी]-inulin, जो मात्रात्मक घ्राण बल्ब, मस्तिष्क में पाया गया था, और मज्जा oblongata, पिपेट विधि से । यह प्रतीत होता है क्योंकि नाक गुहा में दवा समाधान की अवधारण काफी सक्रिय प्रशासन द्वारा वृद्धि की गई थी एक सिरिंज के विपरीत दिशा में एक निर्देश में एम सी नाक गुहा में एक पंप का उपयोग कर ।
अंत में, इस अध्ययन में विकसित intranasal प्रशासन की दो पद्धतियों को कुतर में फार्माकोकाइनेटिक्स के मूल्यांकन के लिए अत्यंत उपयोगी तकनीक की अपेक्षा की जा सकती है. रिवर्स cannulation विधि, विशेष रूप से, दवा उंमीदवारों की नाक से मस्तिष्क के वितरण की पूरी क्षमता का मूल्यांकन करने के लिए उपयोगी हो सकता है ।

चित्रा 3 से पता चलता है [14C]-inulin स्तर (ID% ⁄ g मस्तिष्क) में घ्राण बल्ब (क), मस्तिष्क (ख), और मज्जा oblongata (ग) वर्तमान अध्ययन में मूल्यांकन intranasal प्रशासन के दो प्रकार के उपयोग से प्राप्त की । Intran...

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Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

यहां, हम प्रयोगात्मक पशुओं के लिए ंयूनतम शारीरिक तनाव के साथ सांस लेना संज्ञाहरण के तहत स्थिर intranasal प्रशासन के दो उपंयास तरीकों का वर्णन । हम भी नाक के माध्यम से मस्तिष्क में दवा वितरण के स्तर के मात्रात्मक मूल्यांकन के लिए एक विधि का वर्णन करने के लिए मस्तिष्क मार्ग radiolabeled का उपयोग [14C]-पानी में घुलनशील अणुओं के एक मॉडल सब्सट्रेट के रूप में inulin.

Intranasal प्रशासन के लिए उपंयास तरीकों साँस लेना संज्ञाहरण के तहत नाक से मस्तिष्क दवा वितरण का मूल्यांकन करने के लिए

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...

इस विधि इंट्रानासल प्रशासन और फार्माकोकिनेटिक्स और ब्याज की दवाओं की औषध विज्ञान के बारे में दवा विज्ञान क्षेत्र में महत्वपूर्ण सवालों के जवाब में मदद कर सकते हैं । इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि इसका उपयोग नाक से मस्तिष्क वितरण दवा उम्मीदवारों के मात्रात्मक मूल्यांकन और जानवरों को न्यूनतम तनाव के साथ साँस लेना एनेस्थीसिया के लिए किया जा सकता है। इस तकनीक के निहितार्थ केंद्रीय तंत्रिका तंत्र रोगों की चिकित्सा की ओर फैली हुई है क्योंकि यह नाक से मस्तिष्क मार्ग के माध्यम से दवा वितरण प्रौद्योगिकियों के विकास में योगदान देता है।प्रक्रिया का प्रदर्शन मित्सुयोशी फुकूदा, मेरी प्रयोगशाला से पीएचडी के छात्र होंगे। एक अलग रेडियो आइसोटोप सुविधा में माइक्रोपिपेट के माध्यम से इंट्रानासल डिलीवरी के लिए। टेप और रीढ़ की स्थिति में एक कॉर्क बोर्ड के लिए माउस एनेस्थेटाइज, और एक से दो माइक्रोलीटर खुराक में कार्बन-14 inulin समाधान के 25 माइक्रोलीटर प्रशासन, वैकल्पिक रूप से, सही और जानवर के बाएं नथुने में ।घेघा के माध्यम से वायुमार्ग की ओर से रिवर्स कैनुलेशन डिलीवरी के लिए, एनेस्थेटाइज्ड माउस को विच्छेदन माइक्रोस्कोप के नीचे रखें, और गले पर 1.5 सेंटीमीटर त्वचा चीरा दें। जब तक श्वासनली उजागर न हो जाए तब तक चीरा का विस्तार करने के लिए संदंश का उपयोग करें, और उजागर श्वासनली में एक मिलीमीटर चीरा बनाएं। चीरा में पूर्व-चिह्नित स्थिति में कैनुला 1.2 सेंटीमीटर डालें, और कैनुला के विपरीत छोर को साँस लेने के मुखौटे के अंदर संलग्न करें।इसके बाद, श्वासनली के नीचे से घेघा को बेनकाब करने के लिए संदंश का उपयोग करें। घेघा में एक मिलीमीटर चीरा बनाने के लिए कैंची का उपयोग करें और नाक गुहा के पीछे के अंत की ओर पूर्व-चिह्नित स्थिति में एक दूसरे कैनुला 1.4 सेंटीमीटर डालें। प्रयोगात्मक जानवर के वजन के अनुसार उचित लंबाई में कैनुला डालने और अन्य लोगों में कैनुला की लंबाई को समायोजित करना महत्वपूर्ण है।एसोफेगल कैनुला को लिगेट करें और एक प्रोग्रामेबल माइक्रोसिरिंग पंप से जुड़े प्रशासन समाधान से भरे एक मिलीलीटर सिरिंज को 27 गेज की सुई देते हैं। फिर कार्बन के 25 माइक्रोलीटर-14 इनुलिन को लगातार पांच माइक्रोलीटर प्रति मिनट की दर से वितरित करें जब तक कि समाधान की पूरी मात्रा प्रशासित नहीं की जाती है। नाक गुहा के भीतर जितना संभव हो उतना दवा समाधान की अवधारण के लिए एक धीमी लेकिन निरंतर प्रसार दर महत्वपूर्ण है।इनुलिन प्रशासन के 30 मिनट बाद रक्त-मस्तिष्क बाधा को पार करने वाले कार्बन-14 इनुलिन की मात्रा को निर्धारित करने के लिए, मेडुला ओब्लोंगा पक्ष से प्रत्येक प्रयोगात्मक रूप से इलाज किए गए जानवर के कपाल को ध्यान से खोलने के लिए कैंची का उपयोग करें, और दिमाग को सावधानीपूर्वक स्कूप करने के लिए एक माइक्रोस्पातुला का उपयोग करें। प्रत्येक मस्तिष्क को बर्फ पर पेट्री डिश में खारा-गीला फिल्टर पेपर के एक टुकड़े पर रखें क्योंकि इसे काटा जाता है। और प्रत्येक मस्तिष्क की सतह से किसी भी रक्त को साफ करने के लिए एक खारा लथपथ कपास झाड़ू का उपयोग करें।इसके बाद, जल्दी से लेकिन ध्यान से, दिमाग को घ्राण बल्ब, सेरेब्रम और मेडुला ओब्लोंगटा, प्लस पोन वर्गों में विच्छेदन करें। और मस्तिष्क के नमूनों को ऊतक घुलनशील में 50 डिग्री सेल्सियस पर एक घंटे के लिए रखें, इसके बाद तरल प्रस्फुटन कॉकटेल के 10 माइक्रोलीटर को जोड़ा जाए। लागू समाधान की रेडियोधर्मिता निर्धारित करने के लिए, प्रशासन समाधान के एक 25 माइक्रोलीटर aliquot हस्तांतरण, प्रस्फुटन कॉकटेल में भंग, एक प्रस्फुटन शीशी के लिए, और मस्तिष्क के नमूने के भीतर कार्बन-14 रेडियोधर्मिता के प्रति मिनट विघटन को मापने और एक तरल प्रस्फुटन काउंटर में लागू समाधान ।साँस लेना संज्ञाहरण के तहत, इंट्रानासैली-दवा वितरित जानवरों के बीच कोई प्रयोगात्मक अंतर-व्यक्तिगत भिन्नता नहीं देखी जाती है। जब एसोफेगल रिवर्स कैनुला नाक गुहा प्रशासन विधि का उपयोग किया जाता है, तो माइक्रोपिटेट डिलीवरी की तुलना में घ्राण बल्ब, सेरेब्रम और मेडुला ओब्लोन्टा में कार्बन-14 इनुलिन का काफी उच्च स्तर मनाया जाता है। इसके अलावा, घ्राण बल्ब और मेडुला ओब्लोंगटा में उच्च कार्बन-14 इनुलिन का पता लगाया जाता है, जिनमें से दोनों को सेरेब्रम की तुलना में नाक से मस्तिष्क मार्ग में प्रमुखता से विकसित किया जाता है।इसके विकास के बाद, इस तकनीक ने केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में बड़े अणु चिकित्सीय एजेंटों की जैव सक्रियता का पता लगाने के लिए नाक से मस्तिष्क वितरण के क्षेत्र में शोधकर्ताओं के लिए मार्ग प्रशस्त किया।

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The intrinsic tropism towards brain malignancies renders stem cells as promising carriers of therapeutic agents against malignant tumors. The delivery of ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

Ivacaftor, इसके प्रमुख चयापचयों, और सिस्टिक फाइब्रोसिस रोगियों के जैविक तरल पदार्थ में Lumacaftor के नैदानिक नमूनों के उच्च प्रवाह विश्लेषण के लिए अनुकूलित LC-ms/

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

एक इन विट्रो रक्त मस्तिष्क बैरियर मॉडल सुअर मस्तिष्क Endothelial कोशिकाओं पर आधारित की स्थापना के लिए बेहतर विधि

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

वयस्कों में स्थानीय संज्ञाहरण के तहत सीओ 2-Lasertonsillotomy

Tonsil-related complaints are very common among the adult population. Tonsillectomy under general anesthesia is currently the most performed surgical ...

Intratracheal Administration of Dry Powder Formulation in Mice

चूहों में ड्राई पाउडर फॉर्मूलेशन का इंट्राचेल एडमिनिस्ट्रेशन

In the development of inhalable dry powder formulations, it is essential to evaluate their biological activities in preclinical animal models. This paper ...