Name: novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery
Uploaded: 2018-11-14T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

Bu çalışmada kısmen özel üniversite araştırma marka projeden MEXT tarafından desteklenen; bir Grant-in-Aid bilim (JSP'ler); tanıtımı için Japonya toplumdan bilimsel Research (C) (17 K 08249 [için T.K. ve TS]) için bir hibe için [için T.K.] [için T.S.] Biyokimya ilerleme ve Takeda Bilim Vakfı için Hamaguchi temelden kooperatif araştırma. Biz Bay Yuya Nito ve Bayan Akiko Asami deneyler onların değerli teknik yardım için teşekkür ederiz.

Bu hayvan çalışma (#AP17P004) Nihon Üniversitesi hayvan bakım ve kullanım Komitesi (Tokyo, Japonya) tarafından onaylanmış yönergelere uygun olarak gerçekleştirildi. Bu çalışmada (#17-0001) Nihon Üniversitesi Eczacılık Okulu radyoizotop Merkezi tarafından kabul edildi.
1. hayvanlar inhalasyon anestezi altında burunici yönetim için kullanılan
<ol><li>Deneysel fareler altında 12-h açık/koyu döngüsü (ışık üzerinde saat 8 ' de – 8:00 arası), paslanmaz çelik ka...

<ol>
	<li>Sakane, T., Yamashita, S., Yata, N., Sezaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transnasal+delivery+of+5-fluorouracil+to+the+brain+in+the+rat.">Transnasal delivery of 5-fluorouracil to the brain in the rat.</a> Journal of Drug Targeting. 7 (3), 233-240 (1999).</li><li>Illum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transport+of+drugs+from+the+nasal+cavity+to+the+central+nervous+system.">Transport of drugs from the nasal cavity to the central nervous system.</a> European Journal of Pharmaceutical Science. 11 (1), 1-18 (2000).</li><li>Hanson, L. R., Frey, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+bypasses+the+blood-brain+barrier+to+target+therapeutic+agents+to+the+central+nervous+system+and+treat+neurodegenerative+disease.">Intranasal delivery bypasses the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease.</a> BMC Neuroscience. 9 (Suppl 3), S5 (2008).</li><li>Chapman, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+treatment+of+central+nervous+system+dysfunction+in+humans.">Intranasal treatment of central nervous system dysfunction in humans.</a> Pharmaceutical Research. 30 (10), 2475-2484 (2012).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+non-invasive+drug+delivery+system+to+the+brain+for+brain+diseases+therapy.">Development of non-invasive drug delivery system to the brain for brain diseases therapy.</a> Yakugaku-Zasshi. 138 (4), 443-450 (2018).</li><li>Kozlovskaya, L., Abou-Kaoud, M., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+drug+delivery+to+the+brain+via+nasal+route.">Quantitative analysis of drug delivery to the brain via nasal route.</a> Journal of Controlled Release. 189, 133-140 (2014).</li><li>Hirai, S., Yashiki, T., Matsuzawa, T., Mima, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorption+of+drugs+from+the+nasal+mucosa+of+rat.">Absorption of drugs from the nasal mucosa of rat.</a> International Journal of Pharmaceutics. 7 (4), 317-325 (1981).</li><li>Lochhead, J. J., Thorne, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+of+biologics+to+the+central+nervous+system.">Intranasal delivery of biologics to the central nervous system.</a> Advances in Drug Delivery Reviews. 64 (7), 614-628 (2011).</li><li>Lalatsa, A., Schatzlein, A. G., Stepensky, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+to+deliver+peptide+drugs+to+the+brain.">Strategies to deliver peptide drugs to the brain.</a> Molecular Pharmaceutics. 11 (4), 1081-1093 (2014).</li><li>Kanazawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+delivery+of+small+interfering+ribonucleic+acid+and+drugs+through+intranasal+administration+with+nano-sized+polymer+micelles.">Brain delivery of small interfering ribonucleic acid and drugs through intranasal administration with nano-sized polymer micelles.</a> Medical Devices. 8, 57-64 (2015).</li><li>Kanazawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+nose-to-brain+delivery+of+hydrophilic+macromolecules+with+stearate-+or+polyethylene+glycol-modified+arginine-rich+peptide.">Enhancement of nose-to-brain delivery of hydrophilic macromolecules with stearate- or polyethylene glycol-modified arginine-rich peptide.</a> International Journal of Pharmacology. 530 (1-2), 195-200 (2017).</li><li>Kamei, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+an+enhanced+nose-to-brain+delivery+of+insulin+on+mild+and+progressive+memory+loss+in+the+senescence-accelerated+mouse.">Effect of an enhanced nose-to-brain delivery of insulin on mild and progressive memory loss in the senescence-accelerated mouse.</a> Molecular Pharmaceutics. 14 (3), 916-927 (2017).</li><li>Suzuki, T., Oshimi, M., Tomono, K., Hanano, M., Watanabe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+transport+mechanism+of+pentazocine+across+the+blood-brain+barrier+using+the+in+situ+rat+brain+perfusion+technique.">Investigation of transport mechanism of pentazocine across the blood-brain barrier using the in situ rat brain perfusion technique.</a> Journal of Pharmaceutical Science. 91 (11), 2346-2353 (2002).</li></ol>

İlaçlar burun beyin teslimini bu yolu BBB atlar bir doğrudan ulaşım yol gösterdiği için merkezi sinir sistemi bozuklukları üzerinde belirgin bir etkisi olması bekleniyor. Üç farklı burun beyin yolları tarihi8' e rapor edilmiştir. İlk Olfaktör mukoza burun mukozasında üzerinden ön için Olfaktör sinir geçer Olfaktör sinir yoludur. Ikinci solunum mukoza burun mukozasında üzerinden arka beyin, beyin sapı ile trigeminal sinir geçirir trigeminal sinir yoludur. Üçüncü Bey...

Peptidler, oligonucleotides ve antikorlar gibi biomedicines Şu anda hiçbir iyileştirici tedavi var ateşe dayanıklı merkezi sinir sistemi bozuklukları için yeni tedavi ajanı olarak potansiyel uygulama için kabul edilir. Ancak, çoğu biomedicines suda çözünen oluştururlar olduğundan, intravenöz veya sözlü yönetimi ile beyin içine kandan teslimat kan - beyin bariyerini (BBB) empedans nedeniyle son derece zor olur.
Son yıllarda, burunici yönetim BBB1,2,3,4,5önler terapötik ajanlar, burun beyin teslimi için olası bir yol olarak bildirilmiştir. Ancak, kantitatif analiz burun beyin yolu teslim6ile ilgili görece az sayıda rapor edilmiştir. Ayrıca, hemen hemen hiçbir rapor kurulan en uygun yönetim koşulları ve birimi gibi dozaj rejimleri edilmiştir kez, zaman dönemleri ve hız, burun beyin teslim araştırmalar için. Yukarıda belirtilen eksiklikleri için aşağıdaki nedenlerden atfedilen: etkilerinin Yönetim (i) bir en iyi yöntem fareler için kurulacak henüz ve (ii) etkilerinin yönetim pipetting tarafından genel olarak kullanılan, genellikle karakterize mucociliary izni (MC) nedeniyle hayvanlar arasında görülmemelidir varyasyon tarafından böylece sık sık belirli bir ilacın gerçek burun beyin teslim potansiyel underestimations için önde gelen.
İnhalasyon anestezi isoflurane kullanarak (başlatma: %4, bakım: % 2) ile bir inhalasyon kemirgen için maske azaltılması amacı ile yaygın kullanımı kazanmıştır veya cerrahi ile ilişkili ağrı ortadan kaldırarak gerçekleştirilen deneysel hayvanlar üzerinde. Maskelerinin kullanımı nispeten basit tipik ilaç idaresi deneysel hayvan subkutan, mayi ve intravenöz yolları üzerinden inhalasyon anestezi altında gerçekleştirmek yapar. Ancak, burunici yönetimi söz konusu olduğunda, maskeyi geçici olarak ilaç idaresi için hayvanlardan kaldırılması gerekir. Bakım altında %2 ile isoflurane, hayvanlar genellikle uyandırmak hızla inhalasyon anestezi. Yönetim birim doz başına büyük olduğunda, bu yemek borusu içine burun boşluğundan akmaya uyuşturucu çözüm neden olabilir ve bu nedenle tek bir büyük doz küçük burunici yönetim için birden çok daha küçük dozlarda içine bozuk aşağı gerekebilir hayvanlar. Yinelenen yönetim için maske kaldırma ve sürekli burun boşluğuna teslimat için yeterli süre burunici yönetim gerektirir olduğu fareler anesteziden yönetim işlemi sırasında uyandırmak yüksek bir olasılık. Bu çok zor burunici Yönetimi'nin altında istikrarlı bir anestezik durumu gerçekleştirmek yapar ve muhtemelen burun beyin teslimat kemirgenler arasında gözlenen görülmemelidir değişimine katkıda bulunur.
Bu çalışmada, bu nedenle en az fiziksel stres deneysel hayvanlar üzerinde empoze iki roman yöntemi, istikrarlı burunici Yönetimi'nin altında inhalasyon anestezi, geliştirdi. Birinci yontem için biz burunici yönetimi inhalasyon anestezi sırasında sağlayan geçici olarak açılabilir maske kullanılır. Maskeyi açılabilir parçası yönetim zamanlama uyarınca bir pipet kullanarak kararlı burunici yönetimini kolaylaştırmak için kullanılan bir silikon tak içermektedir. İkinci yöntem için bir kanül cerrahi burun boşluğuna yemek borusu geçmek eklenmiş ve böylece ilaç çözüm doğrudan ve güvenli bir biçimde istikrarlı inhalasyon altında nazal kavite içine teslim bir şırınga pompa sonra buna bağlıydı anestezi. Önemli ölçüde MC etkilerini en aza indirerek, uyuşturucu retentively burun boşluğunda geliştirilmiş olacaktır çünkü bu yöntem uyuşturucu teslim burun beyin rota üzerinden beyin içine geliştirebilirsiniz. Buna ek olarak, uyuşturucu dağıtım düzeyleri (% enjekte doz/g beyin için) radyo etiketli [14C] kullanarak beyin kantitatif değerlendirilmesi için bir yöntemi açıklamak-inulin [molekül ağırlığı (MW): 5.000], suda çözünen bir modeli substrat olarak oluştururlar.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ddY mouse</td>
			<td>Japan SLC, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Male, 4-6 weeks, 20-30 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>v002139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane setup</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-OTAir, SN-489-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>For small rodents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane mask (Opneable type)</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td></td>
			<td>Special orders</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia Box</td>
			<td>SHINANO manufacturing CO. LTD.</td>
			<td>SN-487-85-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-1</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-27H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal experiments scissors-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>B-13H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-1</td>
			<td>FINE SCIENCE TOOLS Inc.</td>
			<td>11272-30</td>
			<td>Dumont #7 Dumoxel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers-2</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>A-12-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (PE-50)</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company.</td>
			<td>5069773</td>
			<td>I.D.: 0.58 mm, O.D.: 0.965 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula tube (SP-10)</td>
			<td>NATSUME SEISAKUSHO CO., LTD.</td>
			<td>KN-392</td>
			<td>I.D.: 0.28 mm, O.D.: 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>MARUKAN, LTD.</td>
			<td>DC-381</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>SZ61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle 27G 1/2 in 13 mm</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>NN-2738R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>TERUMO CORPORATION</td>
			<td>SS-01T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>Neuro science</td>
			<td>NE-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellulose membrane</td>
			<td>Toyo Roshi Kaisya, Ltd.</td>
			<td>00011090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro spatula</td>
			<td>Shimizu Akira Inc.</td>
			<td>91-0088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette (0.5-10 uL)</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>Z368083</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette chip</td>
			<td>Eppendorf AG</td>
			<td>0030 000.811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td>TimeMed Labeling System, Inc.</td>
			<td>T-534-R</td>
			<td>For fixing mouse</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[14C]-Inulin</td>
			<td>American Radiolabeled Chemicals Inc.</td>
			<td>ARC0124A</td>
			<td>0.1 mCi/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EtOH</td>
			<td>Wako Pure Chemical Industries, Ltd.</td>
			<td>054-00461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid scintillation counter</td>
			<td>Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, Inc</td>
			<td>Tri-Carb 4810TR</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

novel methods for intranasal administration under inhalation anesthesia to evaluate nose-to-brain drug delivery

Etkilerinin yönetim terapötik ajanlar, kan - beyin bariyerini circumvents burun beyin teslimi için olası bir yol olarak bildirilmiştir. Ancak, kantitatif analiz hem de en iyi yönetim koşulları ile ilgili olarak ve rejimleri araştırmalar burun beyin teslimat için dozaj kaç rapor edilmiştir. Kemirgenler kullanarak burun beyin yolu mekanizmaları üzerinde araştırma sınırlı sürüyor burun beyin vasıtalarının aday ilaçlar için tasarlama açısından önemli bir engeli temsil eder.
Bu konuda biraz ilerleme kazanmak için geliştirilen ve istikrarlı burunici yönetim inhalasyon anestezi altında iki yeni yöntem için deneysel hayvan değerlendirilir. Biz aynı zamanda radyo etiketli [14C] kullanarak burun beyin yolu üzerinden beyin ilaç dağıtım seviyelerinde değerlendirilmesi için bir yöntem tarif-inulin (Moleküler ağırlığı: 5.000) suda çözünen oluştururlar, bir modeli substrat olarak.
Başlangıçta, biz hayvanlara istikrarlı anestezi altında güvenilir yönetim gerçekleştirmek için bize etkin geçici olarak açılabilir maske kullanan bir pipet-tabanlı burunici Yönetim Protokolü geliştirilmiştir. Bu sistemle, [14C]-inulin beyne az deneysel hata ile teslim.
Daha sonra mucociliary izni (MC) etkilerini en aza indirmek için geliştirilmiştir yemek borusu yoluyla hava yolu taraftan ters cannulation gerektiren bir burunici Yönetim Protokolü geliştirdik. Bu teknik yol açtı [14C] anlamlı olarak daha yüksek düzeylere-inulin, kantitatif olfaktör ampul, cerebrum ve soğanı, pipet yöntemi daha tespit edildi. Bu saklama burun boşluğunda uyuşturucu çözümün önemli ölçüde MC bir yönün nazal kavite içine şırınga pompa kullanarak etkin yönetim tarafından artış olmuştur çünkü gibi görünüyor.
Sonuç olarak, bu çalışmada geliştirilen burunici yönetiminin iki yöntem farmakokinetik Rodents değerlendirmek için son derece yararlı teknikleri beklenebilir. Ters cannulation yöntemi, özellikle burun beyin teslim ilaç adaylarının tam potansiyelini değerlendirmek için yararlı olabilir.

Şekil 3 gösterir [14C]-inulin düzeyleri (kimlik % ⁄g beyin) olfaktör ampul (A), cerebrum (B) ve (C) mevcut çalışmada değerlendirildi burunici yönetim iki tür kullanılarak elde soğanı. Pipet etkin yöntem teslim [14C] kullanarak burunici yönetim-inulin açılabilir solunum maskeleri (Şekil 1) kullanarak beyin içine. İnhalasyon anestezi altında nicel sonuçlar deneysel görülmemelidir vary...

Watch this Scientific Journal Video about Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery at JoVE.com

Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

Burada, deneysel hayvan için kararlı burunici Yönetimi'nin altında inhalasyon anestezi en az fiziksel stres ile iki roman yöntemleri açıklanmaktadır. Biz de beyin radiolabeled [14C] kullanarak burun beyin yolu üzerinden ilaç dağıtım seviyelerinde kantitatif değerlendirilmesi için bir yöntem tarif-suda çözünen oluştururlar, bir modeli substrat olarak inulin.

Burun beyin ilaç dağıtım değerlendirmek için inhalasyon anestezi altında burunici yönetim için yeni Yöntemler

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...

Bu yöntem, farmasötik bilimler alanında intranazal yönetim, farmakokinetik ve ilgili ilaçların farmakolojisi ile ilgili anahtar soruların cevapverilmesine yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, burun-to-beyne doğum ilaç adaylarının kantitatif değerlendirilmesi ve hayvanlara en az stres ile inhalasyon anestezisi için kullanılabilir olmasıdır. Bu tekniğin etkileri, burundan beyne yol ile ilaç dağıtım teknolojilerinin gelişmesine katkıda olarak merkezi sinir sistemi hastalıklarının tedavisine kadar uzanır.Prosedürü gösteren Mitsuyoshi Fukuda, benim laboratuvar bir doktora öğrencisi olacaktır. İzole radyo izotop tesisinde mikropipet ile intranazal doğum için. Bant ve supine pozisyonda bir mantar tahtası fare anestezik ve karbon-14 inulin çözeltisi 25 mikrolitre bir ila iki mikrolitre dozda, alternatif olarak, hayvanın sağ ve sol burun delikleri içine uygulayın.Yemek borusundan hava yolu kenarından ters kanülasyon iletimi için, anestezili fareyi bir diseksiyon mikroskobunun altına yerleştirin ve boğaz üzerinde 1,5 santimetrelik deri kesisi yapın. Trakea açığa çıkana kadar kesiği genişletmek için forceps kullanın ve maruz kalan trakeada bir milimetrelik kesi yapın. Kesiye önceden işaretlenmiş konuma 1,2 santimetre lik bir kanül yerleştirin ve kanülün ters ucunu bir teneffüs maskesinin içine takın.Bundan sonra, nefes borusu altından yemek borusu ortaya çıkarmak için forceps kullanın. Yemek borusunda bir milimetrelik kesi yapmak için makas kullanın ve burun boşluğunun arka ucuna doğru önceden işaretlenmiş pozisyona 1.4 santimetre ikinci bir kanül yerleştirin. Deney hayvanının ağırlığına göre kanülün uygun bir uzunluğa yerleştirilmesi ve diğer hayvanların kanül uzunluğunun ayarlanması önemlidir.Özofagus kanüllerini inşekle ve programlanabilir bir mikroşite pompasına bağlı bir uygulama çözeltisi ile dolu bir mililitrelik şırınga27-gauge iğne takın. Daha sonra tüm çözelti hacmi uygulanana kadar dakikada sabit beş mikrolitre hızda 25 mikrolitre karbon-14 inülin sunun. Yavaş ama sürekli difüzyon hızı burun boşluğu içinde mümkün olduğunca çok ilaç çözeltisi tutulması için önemlidir.Inulin uygulamasından 30 dakika sonra kan-beyin bariyerini geçen karbon-14 inülin miktarını ölçmek için, medulla oblongata tarafından deneysel olarak tedavi edilen her hayvanın kafatasını dikkatlice açmak için makas kullanın ve beyni dikkatlice çıkarmak için bir mikrospatula kullanın. Her beyni, hasat edilirken buz üzerinde bir Petri kabına tuzlu nemlendirilmiş filtre kağıdının üzerine yerleştirin. Ve her beynin yüzeyindeki kanı temizlemek için tuzlu suyla ıslatılmış pamuklu bir bez kullanın.Sonra, hızlı ama dikkatli, koku ampul içine beyin incelemek, serebrum, ve medulla oblongata, artı pons bölümleri. Ve beyin örneklerini 50 santigrat derecede bir saat boyunca doku solubilizerine yerleştirin ve ardından 10 mikrolitre sıvı sintilasyon kokteyli ilave edin. Uygulanan çözeltinin radyoaktivitesini belirlemek için, sintillasyon kokteylinde çözünmüş 25 mikrolitrelik bir uygulama çözeltisini bir sintillasyon vialine aktarın ve beyin numunesi içindeki karbon-14 radyoaktivitesinin dakika başına parçalanmasını ve uygulanan çözeltiyi sıvı bir sintillasyon sayacına aktarın.İnhalasyon anestezisi altında intranasally-ilaç ile doğum eden hayvanlar arasında deneysel bir varyasyon gözlenmez. Özofagus ters kanül burun kavitesi uygulama yöntemi kullanıldığında, koku ampulü, serebrum ve medulla oblongata'da mikropipet teslimine göre önemli ölçüde daha yüksek karbon-14 inülin düzeyleri gözlenir. Ayrıca, yüksek karbon-14 inulin koku ampul ve medulla oblongata tespit edilir, her ikisi de belirgin burun-beyin yolu gelişmiş, beyin daha.Bu teknik, geliştirilmesinden sonra, merkezi sinir sisteminde ki büyük molekül terapötik ajanların biyoaktivitesini araştırmak için burundan beyne doğum alanında araştırmacıların önünü açtı.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Novel Rescue Technique for Difficult Intubation and Difficult Ventilation

Zor entübasyon ve zor Havalandırma için Roman Kurtarma Tekniği

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which ...

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

Roman Bitkisel Tedaviler Değerlendirmek için Sepsis Hayvan Modeli kullanımı

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Intranasal Administration of CNS Therapeutics to Awake Mice

Uyanık Fare CNS Therapeutics İntranazal İdaresi

Intranasal administration is a method of delivering  therapeutic agents to the central nervous system (CNS). It is  non-invasive and allows large ...

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Farelerde Beyin Doğrudan İlaç Teslim heterotopik mukozal aşılanması Prosedürü

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Fare Arteriovenöz Fistül Endotelyumunun için intraluminal Drug Delivery

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Intranasal Delivery of Therapeutic Stem Cells to Glioblastoma in a Mouse Model

Bir Fare Modelinde Tedavi Edici Kök Hücrelerin Glioblastomaya İntranazal Dağıtımı

The intrinsic tropism towards brain malignancies renders stem cells as promising carriers of therapeutic agents against malignant tumors. The delivery of ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

Ivacaftor, büyük metabolitleri ve Lumacaftor Kistik fibrozis hastalarının biyolojik sıvı içinde klinik örnekler yüksek üretilen iş analizi için en iyi duruma getirilmiş LC-MS/MS yöntemi

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Yöntem bir Vitro kan - beyin bariyerini modeli domuz beyin endotel hücreleri temel alan kurulması için geliştirilmiş

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

CO2-Lasertonsillotomy Under Local Anesthesia in Adults

CO2-Erişkinlerde Lokal Anestezi Altında Lasertonsillotomi

Tonsil-related complaints are very common among the adult population. Tonsillectomy under general anesthesia is currently the most performed surgical ...

Intratracheal Administration of Dry Powder Formulation in Mice

Farelerde Kuru Toz Formülasyonunun Intratrakial Yönetimi

In the development of inhalable dry powder formulations, it is essential to evaluate their biological activities in preclinical animal models. This paper ...