Name: subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats
Uploaded: 2018-11-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Geen verklaard.

Deze studie werd goedgekeurd door de centrale Zuid-Universiteit ethisch comité voor onderzoek van het dier uit het tweede Xiangya ziekenhuis (Changsha, China). Het manuscript werd voorbereid volgens aankomen (dier onderzoek: rapportage van In Vivo experimenten) richtsnoeren9.
1. materiaal en dier voorbereiding
<ol><li>Voorbereiden van benodigde materialen: epileren agent, 75% ethanol, plakband, bloed collectie buis, 2,5 mL spuit verbonden met naald (24 G, 0.6 mm x 25...

<ol>
	<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Korfmacher, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+capillary+microsampling+for+rat+pharmacokinetic+studies:+Comparison+of+tail-vein+bleed+to+jugular+vein+cannula+sampling.">Utility of capillary microsampling for rat pharmacokinetic studies: Comparison of tail-vein bleed to jugular vein cannula sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 76, 7-14 (2015).</li><li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures,+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model.">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments. (95), (2015).</li><li>Wickremsinhe, E. R., Renninger, M., Paulman, A., Pritt, M., Schultze, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Repeated+Tail+Clip+and+Saphenous+Vein+Phlebotomy+on+Rats+Used+in+Toxicology+Studies.">Impact of Repeated Tail Clip and Saphenous Vein Phlebotomy on Rats Used in Toxicology Studies.</a> Toxicologic Pathology. 44 (7), 1013-1020 (2016).</li><li>Takahashi, M., Makino, S., Kikkawa, T., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+rat+serum+suitable+for+mammalian+whole+embryo+culture.">Preparation of rat serum suitable for mammalian whole embryo culture.</a> Journal of Visualized Experiments. (90), e51969 (2014).</li><li>Cochran, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+Glucose+Metabolism+Kinetics+Using+18F-FDG+Micro-PET/CT.">Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT.</a> Journal of Visualized Experiments. (123), (2017).</li><li>Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drawing+blood+from+rats+through+the+saphenous+vein+and+by+cardiac+puncture.">Drawing blood from rats through the saphenous vein and by cardiac puncture.</a> Journal of Visualized Experiments. (7), 266 (2007).</li><li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System.">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>National Institute of Health. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).</li><li>Antonelli, D., Feldman, A., Freedberg, N. A., Turgeman, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axillary+vein+puncture+without+contrast+venography+for+pacemaker+and+defibrillator+leads+implantation.">Axillary vein puncture without contrast venography for pacemaker and defibrillator leads implantation.</a> Pacing and Clinical Electrophysiology. 36 (9), 1107-1110 (2013).</li><li>Luis, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+magnetic+resonance+imaging+of+the+thoracic+venous+system+in+rats+with+congenital+diaphragmatic+hernia.">Microscopic magnetic resonance imaging of the thoracic venous system in rats with congenital diaphragmatic hernia.</a> Pediatric Surgery International. 27 (2), 175-180 (2011).</li><li>Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital+signs+monitoring+during+injectable+and+inhalant+anesthesia+in+mice.">Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice.</a> Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).</li></ol>

Hier introduceren we een alternatieve methode om bloed te onttrekken aan de subclavian ader en we laten zien dat deze methode is van toepassing, haalbaar en veilig voor bloedmonsters bij ratten. Deze methode is afgeleid van de pacemaker-implantatie van de voorsprong voor patiënten11lekke subclavian ader. De subclavian ader ligt gewoon posterior en caudal aan het sleutelbeen en is een voortzetting van de axillaire ader. Het loopt van de buitenste rand van de eerste rib naar de mediale rand van voo...

Bloedinzameling is essentieel in het dierlijke onderzoek. De aders van de doelgroep voor bloedinzameling omvatten de retro-orbitaal plexus, de halsslagader, de saphenous ader, staart bloedvaten en de halsslagader1,2,3,4. Soms kon bloed worden verkregen van de abdominale aorta, vena cava of zelfs het hart5,6,7. Bij dergelijke gelegenheden, de dieren moeten worden opgeofferd en kunnen niet worden gebruikt voor verdere observatie; Dus, deze methoden worden gebruikt minder in dagelijkse experimenteel werk. Bloedinzameling van de ader van de staart van ratten is populair en minder stressvol ten opzichte van de hierboven genoemde methoden8.
Echter is bloedinzameling van de ader van de staart soms beperkt door een onbevredigende slagingspercentage. Af en toe, is het ook moeilijk om genoeg bloed-volume door deze methode. Zoals de subclavian ader groot genoeg is en net onder het sleutelbeen bot ligt, kunnen subclavian ader punctie een alternatieve methode voor het bloed bemonstering als routine bloed vergaringsmethoden mislukt zijn. Hier introduceren we een methode van bloed collectie door middel van subclavian ader punctie bij ratten.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>rats</td>
			<td>Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd (Changsha, Hunan Province, China)&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stastical software</td>
			<td>SPSS Statistics 17</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epilating agent</td>
			<td>France Yi Sha Cosmetics Co.,Ltd(Guangzhou, Guangdong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.5 mL syringe</td>
			<td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co.,Ltd(Weihai,Shandong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair shaver</td>
			<td>Shanghai FLYCO Electric Co., Ltd(Shanghai,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>adhesive tape</td>
			<td>3M Deutschland GmbH(EdisonstraBe 6,59157 Kamen, Germany)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% ethanol</td>
			<td>Department of Pharmacy,The Second Xiangya Hospital of Central South Univesity</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>blood collection tube</td>
			<td>Hubei Jinxing Technology&#38;Development Co.,Ltd (Wuhan Hubei Province,China) (2ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electronic scale</td>
			<td>Dongguan Shengheng Electronics Co.,Ltd (Dongguan,Guangdng Province,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>canvas gloves</td>
			<td>for anethesia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hepain</td>
			<td>Nanjing Xinbai Pharmaceutical&#160; Co.,Limited (Nanjing, Jiangsu Province, China) (2mL, 12500 IU)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>physical saline</td>
			<td>Hunan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd(Yueyang ,Hunan Province,China) (100ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats

Bloedinzameling met genoeg bloed volume is essentieel in dierproeven. Bloedinzameling van de ader van de staart van ratten is populair en minder stressvol vergeleken met andere meer agressieve methoden zoals retro-orbitaal plexus monster collectie. Echter wordt deze bloed collectie methode soms beperkt door een onbevredigende slagingspercentage. Hier introduceren we een methode voor bloedinzameling via de subclavian ader punctie. De subclavian ader ligt net onder het sleutelbeen en deze ader is groot genoeg om te voldoen aan de eisen van het volume van bloed collectie. Onze resultaten tonen aan dat deze methode veilig en die van toepassing zijn voor bloedmonsters van de collectie met het bloed van de vereiste volume is. Bloedinzameling via de subclavian ader punctie kan dienen als een alternatieve bloed collectie methode in het geval van mislukte staart veneuze bloedmonsters bij ratten.

Een totaal van 20 SD ratten (mannelijke n = 10, vrouwelijke n = 10) hier werden gebruikt. Bloed collectionwas uitgevoerd door ervaren ondernemers, die hebben meer dan 20 bloed bemonsteringen uitgevoerd vanaf de subclavian ader bij ratten, en de exploitanten van de beginner, die hebben geen subclavian ader punctie ervaring in ratten of andere dieren. Voor activiteiten keek beginners ten minste 3 procedures gedaan door bekwame operatoren.
<p class="jove_content" fo:keep-together.within...

Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Hier presenteren we een protocol voor het verzamelen van bloedmonsters van de rat subclavian ader.

Subclavian ader punctie als een alternatieve methode van bloed monster collectie bij ratten

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Subclavian Vein Punctie als alternatieve methode van bloedmonsterverzameling bij ratten. Na algemene anesthesie, plaats ratten in supine positie en steriliseren infraclaviculaire ruimte met 75%ethanol. Identificeer superieure sternale fossa voor punctie.Zoek de punctieplaats, caudal naar het buitenste een derde gebied van het sleutelbeen aan dezelfde kant. De richting van de naald werd geplaatst in de richting van de superieure sternale fossa en moet bijna parallel aan het sleutelbeen, net achterste aan. Na het afhouden van het bloed, druk op de punctie site voor een tot twee minuten, om te stoppen met bloeden.Bloedafname met voldoende volume is altijd nodig in dierproeven. Bloedafname van ratten staart ader is populair en minder stressvol dan sommige agressieve methoden, zoals retro orbitale plexus monster collectie. Deze methode wordt echter beperkt door het slagingspercentage.Hier introduceren we onze methode voor bloedafname met het gewenste bloedvolume van de subclavian ader. Onze resultaten tonen aan dat deze methode veilig en praktisch is, en kan worden overwogen in het geval bloedafname van staartader is mislukt. Om te beginnen, bereiden plakband, epilating agent, 75%ethanol, bloedafname buis, twee punt vijf milliliter spuit, haar scheerapparaat, elektronische schaal, heparine, en fysiologische zoutoplossing.Huis ratten onder standaard omstandigheden, met vrije toegang tot voedsel en drinkwater, bewaard in 530 vierkante centimeter kooien met hout scheren beddengoed. Induceer algemene anesthesie bij alle dieren via intraperitoneale injectie vóór punctie. Plaats de rat in supine positie, bevestig de achterste ledematen in een comfortabele positie, en bevestig de bovenste ledematen parallel aan het lichaam, net naast de romp.Reinig beide zijden van de infraclaviculaire ruimte om de vacht en zichtbaar vuil te verwijderen. Veeg de nek en thoracale huid af met 75% ethanol en houd het gebied schoon en droog met gaas. Beide zijden van de subclavian ader zijn geschikt voor punctie, en hier kiezen we de rechterkant voor punctie.Identificeer de locatie en de richting van het rechtersleutelbeen met de linkerduim van de operator en lokaliseer de superieure sternale fossa voorzichtig met de wijsvinger. Spoel onze spuit af met 10 unit-per-milliliter heparine oplossing. Zoek de punctieplaats, punt vijf millimeter caudal aan het buitenste een derde gebied van het rechter sleutelbeen.Beweeg de spuit voorzichtig in de huid van de punctieplaats. Zodra de naald in de infraclaviculaire huid komt, voert u een actieve druk aan via de rechterhand van de operator. De richting van de naald is gepositioneerd in de richting van de superieure sternale fossa, en moet bijna parallel aan het sleutelbeen, net achterste aan.Meestal kan de subclavian ader worden bereikt door het inbrengen van de naald voor ongeveer twee millimeter in deze richting. Zodra de naald in de ader komt, komt het bloed onder actieve druk in de spuit terecht. Dan moet de actieve druk worden gehandhaafd totdat de juiste hoeveelheid bloed wordt getrokken.Na het afhouden van het bloed, verwijder de punctie naald, en druk op de punctie site voor een tot twee minuten om te stoppen met bloeden. Let op: de druk moet zeer zacht zijn om choke te voorkomen. Breng het bloedmonster in een anti-gestolde vacuümbuis met EDTA en centrifuge op 1600G gedurende 10 minuten om plasma te verzamelen.Aspirate de supernatent om opnieuw schoon buis en op te slaan bij min 18 Celsius graden. Om het slagingspercentage tussen de ervaren operators en de beginners te vergelijken, werden 20 SD-ratten willekeurig verdeeld in twee groepen. De resultaten tonen aan dat door de juiste subclavian ader, negen ratten in de geschoolde groep en acht ratten in de beginnersgroep geslaagd, respectievelijk.Dan is de bloedafname van de resterende drie ratten geslaagd via de linkerkant. Het slagingspercentage had geen significant verschil tussen deze twee groepen. De tijdskoers was in deze twee groepen iets anders.Geen ernstige complicaties, zoals pneumothorax, hemopneumothorax, en bloeding opgetreden tijdens of na de operatie. Alle dieren overleefden na de bloedafname. Om de moeilijkheden van het leren van de punctieprocedure aan te tonen, hebben we het aantal opnames tussen de geschoolde en de beginnersgroepen verder vergeleken.Zoals blijkt uit tabel twee is het gemiddelde aantal opnames in geschoolde groepen iets lager dan de beginners, maar er is geen statistische significantie. Tot slot tonen onze resultaten aan dat de subclavian ader punctiestrategie voor bloedafname veilig en haalbaar is bij ratten. Deze methode is waardevol, vooral bij gelegenheden waarin grote hoeveelheid bloed nodig is.Deze methode kan een optimaal alternatief zijn als de conventionele bloedafname mislukt.

Research

JoVE Journal

Medicine

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

Sublinguale immunotherapie als een alternatief voor bescherming tegen acute luchtwegeninfecties Induce

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Herhaald bloedinzameling van staart ader van niet-verdoofd ratten met een systeem voor het verzamelen van vacuüm bloed

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Routine Screening Method voor microdeeltjes in bloedplaatjes transfusies

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

Punctie-geïnduceerde Iris Neovascularization als een muismodel van Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Bloedafname door Subclavia ader punctie bij muizen

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

The Rigid Tube as an Alternative in Controlling the Problematic Airway

De starre buis als alternatief voor het regelen van de problematische luchtwegen

The unexpected problematic airway represents a large proportion of anesthesia-related morbidity and mortality. The retromolar or paraglossal approach is ...

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

Microchirurgische vaardigheden voor het vaststellen van permanente jugulaire ader cannulatie bij ratten voor seriële bloedafname van oraal toegediend geneesmiddel

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Repetitieve bloedafname uit de subclavia-ader van bewuste rat

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

Gemodificeerde staartader en penisaderpunctie voor bloedafname in het rattenmodel

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...