Name: subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats
Uploaded: 2018-11-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

אף אחד לא הכריז.

מחקר זה אושרה על ידי ועדת האתיקה המרכזית של אוניברסיטת דרום לחקר בעלי חיים מבית החולים Xiangya השני (צ'אנג-שא, סין). כתב היד הוכן לפי יגיעו (חיה מחקר: דיווח ב- Vivo ניסויים) הנחיות9.
1. החומר של בעלי חיים הכנה
<ol><li>להכין חומרים הדרושים: דבק, הסוכן epilating, 75% אתנול, דם אוסף שפו?...

<ol>
	<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Korfmacher, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+capillary+microsampling+for+rat+pharmacokinetic+studies:+Comparison+of+tail-vein+bleed+to+jugular+vein+cannula+sampling.">Utility of capillary microsampling for rat pharmacokinetic studies: Comparison of tail-vein bleed to jugular vein cannula sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 76, 7-14 (2015).</li><li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures,+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model.">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments. (95), (2015).</li><li>Wickremsinhe, E. R., Renninger, M., Paulman, A., Pritt, M., Schultze, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Repeated+Tail+Clip+and+Saphenous+Vein+Phlebotomy+on+Rats+Used+in+Toxicology+Studies.">Impact of Repeated Tail Clip and Saphenous Vein Phlebotomy on Rats Used in Toxicology Studies.</a> Toxicologic Pathology. 44 (7), 1013-1020 (2016).</li><li>Takahashi, M., Makino, S., Kikkawa, T., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+rat+serum+suitable+for+mammalian+whole+embryo+culture.">Preparation of rat serum suitable for mammalian whole embryo culture.</a> Journal of Visualized Experiments. (90), e51969 (2014).</li><li>Cochran, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+Glucose+Metabolism+Kinetics+Using+18F-FDG+Micro-PET/CT.">Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT.</a> Journal of Visualized Experiments. (123), (2017).</li><li>Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drawing+blood+from+rats+through+the+saphenous+vein+and+by+cardiac+puncture.">Drawing blood from rats through the saphenous vein and by cardiac puncture.</a> Journal of Visualized Experiments. (7), 266 (2007).</li><li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System.">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>National Institute of Health. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).</li><li>Antonelli, D., Feldman, A., Freedberg, N. A., Turgeman, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axillary+vein+puncture+without+contrast+venography+for+pacemaker+and+defibrillator+leads+implantation.">Axillary vein puncture without contrast venography for pacemaker and defibrillator leads implantation.</a> Pacing and Clinical Electrophysiology. 36 (9), 1107-1110 (2013).</li><li>Luis, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+magnetic+resonance+imaging+of+the+thoracic+venous+system+in+rats+with+congenital+diaphragmatic+hernia.">Microscopic magnetic resonance imaging of the thoracic venous system in rats with congenital diaphragmatic hernia.</a> Pediatric Surgery International. 27 (2), 175-180 (2011).</li><li>Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital+signs+monitoring+during+injectable+and+inhalant+anesthesia+in+mice.">Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice.</a> Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).</li></ol>

כאן, אנו מציגים את שיטה חלופית לחילוץ דם מן הווריד של הבריח, אנו מראים כי בשיטה זו הוא ריאלי, בטוח ו ישימים עבור דגימה דם בחולדות. שיטה זו נגזרת הניקוב בריחי וריד ב קוצב הלב הראשי השרשה עבור חולים11. הווריד בריחי ממוקם רק האחורי, סימטרית. יווארה לעצם הבריח, המשך הווריד בבית השחי. ה?...

איסוף דם חיוני בתחום המחקר בבעלי חיים. הורידים היעד עבור איסוף דם כוללים את מקלעת רטרו-מסלולית, ומוחלף על, וריד saphenous, כלי הדם הזנב את העורק הראשי1,2,3,4. לפעמים, דם יכולה להיות מושגת העורק הראשי, הנבוב או אפילו את הלב5,6,7. במקרים כאלה, בעלי החיים חייבים להיות מוקרבים ואין אפשרות להשתמש להשגחה הבאים; לכן, שיטות אלה משמשים פחות בעבודה היומיומית ניסיוני. איסוף דם מן הווריד של הזנב של חולדות הוא פופולרי ומלחיץ פחות לעומת שיטות8שהוזכרו לעיל.
עם זאת, איסוף דם מן הווריד של הזנב לפעמים מוגבל על ידי שיעור ההצלחה משביעת רצון. לפעמים, זה גם קשה להשיג מספיק נפח הדם בשיטה זו. כפי הווריד בריחי גדול מספיק והוא ממוקם בדיוק מתחת לעצם הבריח, ניקוב בריחי הווריד יכולה להיות שיטה חלופית עבור דגימה דם אם דם שגרתית אוסף שיטות נכשלות. כאן, אנחנו מציגים את שיטת איסוף דם דרך הווריד בריחי לנקב בחולדות.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>rats</td>
			<td>Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd (Changsha, Hunan Province, China)&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stastical software</td>
			<td>SPSS Statistics 17</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epilating agent</td>
			<td>France Yi Sha Cosmetics Co.,Ltd(Guangzhou, Guangdong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.5 mL syringe</td>
			<td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co.,Ltd(Weihai,Shandong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair shaver</td>
			<td>Shanghai FLYCO Electric Co., Ltd(Shanghai,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>adhesive tape</td>
			<td>3M Deutschland GmbH(EdisonstraBe 6,59157 Kamen, Germany)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% ethanol</td>
			<td>Department of Pharmacy,The Second Xiangya Hospital of Central South Univesity</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>blood collection tube</td>
			<td>Hubei Jinxing Technology&#38;Development Co.,Ltd (Wuhan Hubei Province,China) (2ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electronic scale</td>
			<td>Dongguan Shengheng Electronics Co.,Ltd (Dongguan,Guangdng Province,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>canvas gloves</td>
			<td>for anethesia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hepain</td>
			<td>Nanjing Xinbai Pharmaceutical&#160; Co.,Limited (Nanjing, Jiangsu Province, China) (2mL, 12500 IU)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>physical saline</td>
			<td>Hunan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd(Yueyang ,Hunan Province,China) (100ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats

איסוף דם עם מספיק נפח הדם חיונית בניסויים על בעלי חיים. איסוף דם מן הווריד של הזנב של חולדות הוא פופולרי פחות מלחיץ לעומת שיטות אחרות אגרסיבי יותר כמו רטרו-מסלולית מקלעת לטעום אוסף. עם זאת, שיטה זו של אוסף דם לפעמים מוגבל על ידי שיעור ההצלחה משביעת רצון. כאן, אנחנו מציגים את שיטת איסוף דם דרך הווריד בריחי הניקוב. תקחי את בריחי ממוקם בדיוק מתחת לעצם הבריח, הוריד הזה הוא מספיק גדול כדי למלא את דרישות האחסון של איסוף דם. התוצאות שלנו מראים כי בשיטה זו הוא בטוח וישימים לדיגום אוסף דם עם נפח הדם הנדרשת. איסוף דם דרך הווריד בריחי הניקוב יכול לשמש כמו שיטת איסוף דם חלופי במקרה של לקיחת דמים וריד הזנב שנכשלו בחולדות.

סכום כולל של 20 של חולדות SD (זכר n = 10, נקבה n = 10) שימשו כאן. Collectionwas דם המבוצעת על ידי מפעילי מיומן, אשר יש לבצע יותר מ-20 samplings דם הווריד בריחי בחולדות, ועל ידי האופרטורים מתחיל, שיש להם אין לנקב בריחי וריד ניסיון של חולדות או חיות אחרות. לפני פעולות, למתחילים צפו לפחות 3 הטיפולים ...

Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לאסוף דגימות דם מן הווריד בריחי של חולדה.

בריחי וריד לנקב כאמצעי חלופי של איסוף דגימת דם בחולדות

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

ניקור ורידים תת-סלאבי כשיטה חלופית לאיסוף דגימות דם בחולדות. לאחר הרדמה כללית, מניחים חולדות בתמונת סופין ומעקרים את המרחב התת-רקלבי עם 75% אתנול. זהה אופוסה חמורה מעולה לפני הנקב.אתר את אתר הניקוב, caudal לאזור החיצוני שליש של עצם הבריח באותו צד. כיוון המחט היה ממוקם לכיוון פוסה החזה מעולה צריך כמעט במקביל עצם הבריח, רק האחורי אליו. לאחר איסוף הדם, לחץ על אתר הדקירה למשך שעה עד שתי דקות, כדי להפסיק את הדימום.איסוף דם עם נפח מספיק נדרש תמיד בניסויים בבעלי חיים. איסוף דם מוריד הזנב של חולדות הוא פופולרי ופחות מלחיץ מכמה שיטות אגרסיביות כגון אוסף מדגם מקלעת מסלולית רטרו. עם זאת, שיטה זו מוגבלת על ידי שיעור ההצלחה.כאן, אנו מציגים את השיטה שלנו לאיסוף דם עם נפח הדם הרצוי מן הווריד התת-חלבי. התוצאות שלנו מראות כי שיטה זו היא בטוחה ומעשית, והוא עשוי להיחשב במקרה דגימת דם מוריד הזנב נכשל. כדי להתחיל, להכין סרט דבק, סוכן epilating, 75%אתנול, צינור איסוף דם, שתי נקודות חמש מזרק מיליליטר, מכונת גילוח שיער, קנה מידה אלקטרוני, הפרין, ותמיסת מלח פיזיולוגית.חולדות בית בתנאים סטנדרטיים, עם גישה חופשית למזון ומי שתייה, נשמרו בכלובים של 530 ס"מ רבועים עם מצעי גילוח עץ. לגרום הרדמה כללית בכל בעלי החיים באמצעות הזרקה תוך-חיים לפני הנקב. מניחים את החולדה בתנוחה על-חושית, מתקנים את הגפיים האחוריות בתנוחה נוחה, ומתקן את הגפיים העליונות במקביל לגוף, ממש ליד תא המטען.נקה את שני צידי החלל infraclavicular כדי להסיר את הפרווה וכל לכלוך גלוי. מנגבים את הצוואר ואת עור בית החזה עם 75% אתנול, ולשמור על האזור נקי ויבש עם גזה. שני הצדדים של וריד subclavian מתאימים לנקב, וכאן, אנו בוחרים את הצד הנכון לנקב.זהה את המיקום ואת הכיוון של עצם הבריח הימנית עם האגודל השמאלי של המפעיל, ואתר את פוסה עצם החזה מעולה בעדינות עם האצבע המורה. יש לשטוף את המזרק שלנו בתת פתרון הפרין של 10 יחידות למיליליטר. אתר את אתר הדקירה, הצבע חמישה מילימטרים caudal לאזור החיצוני שליש של עצם הבריח הימנית.מעבירים את המזרק בעדינות לתוך העור של אתר הדקירה. לאחר המחט נכנס לעור infraclavicular, להחיל לחץ פעיל דרך יד ימין של המפעיל. כיוון המחט ממוקם לכיוון פוסה החזה מעולה, וצריך כמעט במקביל עצם הבריח, רק האחורי אליו.בדרך כלל, וריד subclavian ניתן להגיע על ידי החדרת המחט במשך כשני מילימטרים בכיוון זה. ברגע המחט נכנסת לווריד, הדם ייכנס למזרק תחת לחץ פעיל. אז לחץ פעיל חייב להישמר עד נפח נכון של דם נמשך.לאחר איסוף הדם, להסיר את מחט לנקב, ולחץ על אתר לנקב במשך 1 עד 2 דקות כדי לעצור את הדימום. שימו לב: הלחץ חייב להיות עדין מאוד כדי למנוע חנק. להעביר את דגימת הדם לתוך שפופרת ואקום נגד קרישה עם EDTA וצנטריפוגה ב 1600G במשך 10 דקות כדי לאסוף פלזמה.שאף את העל-טבעי לנקות מחדש את הצינור ולאחסן במינוס 18 מעלות צלזיוס. כדי להשוות את שיעור ההצלחה בין המפעילים המיומנים למתחילים, 20 חולדות SD חולקו לשתי קבוצות באופן אקראי. התוצאות מראות כי באמצעות וריד subclavian הנכון, תשע חולדות בקבוצה מיומנת שמונה חולדות בקבוצה למתחילים הצליחו, בהתאמה.ואז איסוף הדם משלושת החולדות הנותרות הצליח דרך הצד השמאלי. שיעור ההצלחה לא היה הבדל משמעותי בין שתי הקבוצות הללו. מסלול הזמן היה שונה במקצת בשתי הקבוצות הללו.לא התרחשו סיבוכים חמורים, כגון pneumothorax, hemopneumothorax ודימום במהלך הניתוח או אחריו. כל החיות שרדו אחרי דגימת הדם. כדי להדגים את הקשיים של לימוד הליך הניקוב, השווינו עוד יותר את מספר המשיכות בין הקבוצות המיומנים למתחילים.כפי שמוצג בטבלה 2, מספר המשיכות הממוצע בקבוצה מיומנת נמוך במקצת מהמתחילים, אך אין מובהקות סטטיסטית. לסיכום, התוצאות שלנו מראות כי אסטרטגיית ניקור ורידים subclavian לאיסוף דם הוא בטוח וישים בחולדות. שיטה זו היא בעלת ערך, במיוחד במקרים שבהם יש צורך בכמות גדולה של דם.שיטה זו עשויה להיות חלופה אופטימלית אם דגימת הדם הקונבנציונלית נכשלת.

Research

JoVE Journal

Medicine

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

אימונותרפיה תת לשונית כחלופה ללהשרות הגנה מפני זיהומים בדרכי הנשימה חריפים

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

חזר על איסוף דם של וריד הזנב של חולדות שאינם מרדימים עם מערכת איסוף דם ואקום

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

השגרה הקרנת שיטה עבור Microparticles ב עירויי טסיות

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

ניקוב-Induced כורוידאלית איריס כמודל העכבר של Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

איסוף דם באמצעות ניקוב ורידים תת-מותני בעכברים

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

The Rigid Tube as an Alternative in Controlling the Problematic Airway

שפופרת נוקשה כחלופה בשליטה על נתיב אווירי בעייתי

The unexpected problematic airway represents a large proportion of anesthesia-related morbidity and mortality. The retromolar or paraglossal approach is ...

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

מיומנויות מיקרוכירורגיות של הקמת קנדול וריד הצוואר קבוע בחולדות עבור דגימת דם סדרתית של תרופה מנוהלת דרך הפה

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

דגימת דם חוזרת מהווריד הסובקלבי של חולדה מודעת

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

וריד זנב שונה וניקוב ורידים פין לדגימת דם במודל החולדה

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...