Name: subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats
Uploaded: 2018-11-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Ingen erklært.

Denne studien ble godkjent av den sentrale Sør University etikk for dyr forskning fra andre Xiangya sykehuset (Changsha, Kina). Manuskriptet ble utarbeidet etter ANKOMME (dyr forskning: rapportering av i Vivo eksperimenter) retningslinjer9.
1. materialet og dyr forberedelse
<ol><li>Forbered nødvendig materiale: teip, epileringen agent, 75% etanol, blod samling rør, 2,5 mL sprøyte med p (24 G, 0,6 x 25 mm), hår barbermaskin, elektronisk skala og måle (se ...

<ol>
	<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Korfmacher, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+capillary+microsampling+for+rat+pharmacokinetic+studies:+Comparison+of+tail-vein+bleed+to+jugular+vein+cannula+sampling.">Utility of capillary microsampling for rat pharmacokinetic studies: Comparison of tail-vein bleed to jugular vein cannula sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 76, 7-14 (2015).</li><li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures,+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model.">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments. (95), (2015).</li><li>Wickremsinhe, E. R., Renninger, M., Paulman, A., Pritt, M., Schultze, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Repeated+Tail+Clip+and+Saphenous+Vein+Phlebotomy+on+Rats+Used+in+Toxicology+Studies.">Impact of Repeated Tail Clip and Saphenous Vein Phlebotomy on Rats Used in Toxicology Studies.</a> Toxicologic Pathology. 44 (7), 1013-1020 (2016).</li><li>Takahashi, M., Makino, S., Kikkawa, T., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+rat+serum+suitable+for+mammalian+whole+embryo+culture.">Preparation of rat serum suitable for mammalian whole embryo culture.</a> Journal of Visualized Experiments. (90), e51969 (2014).</li><li>Cochran, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+Glucose+Metabolism+Kinetics+Using+18F-FDG+Micro-PET/CT.">Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT.</a> Journal of Visualized Experiments. (123), (2017).</li><li>Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drawing+blood+from+rats+through+the+saphenous+vein+and+by+cardiac+puncture.">Drawing blood from rats through the saphenous vein and by cardiac puncture.</a> Journal of Visualized Experiments. (7), 266 (2007).</li><li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System.">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>National Institute of Health. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).</li><li>Antonelli, D., Feldman, A., Freedberg, N. A., Turgeman, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axillary+vein+puncture+without+contrast+venography+for+pacemaker+and+defibrillator+leads+implantation.">Axillary vein puncture without contrast venography for pacemaker and defibrillator leads implantation.</a> Pacing and Clinical Electrophysiology. 36 (9), 1107-1110 (2013).</li><li>Luis, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+magnetic+resonance+imaging+of+the+thoracic+venous+system+in+rats+with+congenital+diaphragmatic+hernia.">Microscopic magnetic resonance imaging of the thoracic venous system in rats with congenital diaphragmatic hernia.</a> Pediatric Surgery International. 27 (2), 175-180 (2011).</li><li>Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital+signs+monitoring+during+injectable+and+inhalant+anesthesia+in+mice.">Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice.</a> Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).</li></ol>

Her introduserer vi en alternativ metode for blod utvinning fra vena subclavia og vi viser at denne metoden er mulig, sikker og gjelder for blod prøvetaking i rotter. Denne metoden er avledet fra vena subclavia punktering i pacemaker bly implantasjon for pasienter11. Vena subclavia ligger bare bakre og caudal til krageben og er en videreføring av axillaris venen. Den går fra den ytre kanten av det første ribbenet mediale grensen fremre scalene muskler12. Herfra det blir...

Blod samling er viktig i Forsøksdyrutvalget. Målet årer for blod samling inkluderer retro-orbital plexus, vena jugularis, saphenous fotsporene, hale blodkar og arteria carotis1,2,3,4. Noen ganger kan blod hentes fra abdominal aorta, vena cava eller selv hjertet5,6,7. I slike tilfeller dyrene må ofres og kan ikke brukes for påfølgende observasjon; dermed disse metodene brukes mindre i daglige eksperimentelt arbeid. Blod samling fra halen åre rotter er populære og mindre stressende forhold til nevnte metodene8.
Imidlertid begrenset blod samling fra halen venen noen ganger av en utilfredsstillende suksessrate. Noen ganger er det også vanskelig å skaffe nok blodvolum av denne metoden. Vena subclavia er stor nok og er plassert rett under krageben benet, kan vena subclavia punktering være en alternativ metode for blod prøvetaking hvis rutinemessig blodet samling metoder er mislykket. Her introduserer vi en metode for blod samling med vena subclavia punktering i rotter.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>rats</td>
			<td>Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd (Changsha, Hunan Province, China)&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stastical software</td>
			<td>SPSS Statistics 17</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epilating agent</td>
			<td>France Yi Sha Cosmetics Co.,Ltd(Guangzhou, Guangdong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.5 mL syringe</td>
			<td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co.,Ltd(Weihai,Shandong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair shaver</td>
			<td>Shanghai FLYCO Electric Co., Ltd(Shanghai,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>adhesive tape</td>
			<td>3M Deutschland GmbH(EdisonstraBe 6,59157 Kamen, Germany)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% ethanol</td>
			<td>Department of Pharmacy,The Second Xiangya Hospital of Central South Univesity</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>blood collection tube</td>
			<td>Hubei Jinxing Technology&#38;Development Co.,Ltd (Wuhan Hubei Province,China) (2ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electronic scale</td>
			<td>Dongguan Shengheng Electronics Co.,Ltd (Dongguan,Guangdng Province,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>canvas gloves</td>
			<td>for anethesia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hepain</td>
			<td>Nanjing Xinbai Pharmaceutical&#160; Co.,Limited (Nanjing, Jiangsu Province, China) (2mL, 12500 IU)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>physical saline</td>
			<td>Hunan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd(Yueyang ,Hunan Province,China) (100ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats

Blod samling med nok blodvolum er viktig i dyreforsøk. Blod samling fra halen åre rotter er populære og mindre stressende forhold til andre mer aggressive metoder som retro-orbital plexus prøve samling. Men er dette blod samling metoden noen ganger begrenset av en utilfredsstillende suksessrate. Her introduserer vi en metode for blodgivning gjennom vena subclavia punktering. Denne stemningen er stor nok til å oppfylle kravene volum av blod samling vena subclavia ligger like under krageben. Våre resultater viser at denne metoden er sikker og gjelder for blod samling prøvetaking med nødvendige blodvolum. Blodgivning gjennom vena subclavia punktering kunne tjene som en alternativ blod samling metoden ved mislykkede hale blodåre blod prøvetaking i rotter.

Totalt 20 SD rotter (mannlige n = 10 kvinnelige n = 10) ble brukt her. Blod collectionwas utført av dyktige operatører, som har utført mer enn 20 blod prøvetaking fra vena subclavia i rotter og av nybegynner operatører, som har ingen vena subclavia punktering erfaring i rotter eller andre dyr. Før operasjoner så nybegynnere minst 3 prosedyrer utført av dyktige operatører.
Blodprøve lyktes i 17 rotter gjennom høyre ve...

Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Her presenterer vi en protokoll for å samle blodprøver fra til rotte vena subclavia.

Vena subclavia punktering som en alternativ for eksempel blodgivning i rotter

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Subklaviske venepunktering som en alternativ metode for blodprøvesamling hos rotter. Etter generell anestesi, plasser rotter i liggende stilling og steriliser infraclavicular plass med 75% etanol. Identifiser overlegen sternal fossa før punktering.Finn punkteringsstedet, caudal til den ytre en tredjedel av kragebenet i samme side. Nålens retning ble plassert mot den overlegne sternale fossaen og bør nesten parallelt med kragebenet, bare bakre til den. Etter blodprøvetaking, trykk på punkteringsstedet i ett til to minutter, for å stoppe blødningen.Blodinnsamling med tilstrekkelig volum er alltid nødvendig i dyreforsøk. Blodsamling fra rotters hale vene er populær og mindre stressende enn noen aggressive metoder som retro orbital plexus prøve samling. Denne metoden er imidlertid begrenset av suksessraten.Her introduserer vi vår metode for blodinnsamling med ønsket blodvolum fra den subklaviske venen. Våre resultater viser at denne metoden er trygg og praktisk, og kan vurderes i tilfelle blodprøvetaking fra halevenen mislykkes. For å starte, forberede tape, epileringsmiddel, 75% etanol, blodoppsamlingsrør, to punkt fem milliliter sprøyte, hårbarbering, elektronisk skala, heparin og fysiologisk saltvann.Husrotter under standardforhold, med fri tilgang til mat og drikkevann, holdt i 530 kvadratcentimeter bur med trebarberingssengetøy. Induser generell anestesi hos alle dyr gjennom intraperitoneal injeksjon før punktering. Plasser rotten i liggende stilling, fest baklemmer i en komfortabel stilling, og fest de øvre lemmer parallelt med kroppen, like ved stammen.Rengjør begge sider av det infraclavicular plass for å fjerne pelsen og eventuell synlig smuss. Tørk halsen og thoraxhuden med 75% etanol, og hold området rent og tørt med gasbind. Begge sider av den subklaveven er egnet for punktering, og her velger vi høyre side for punktering.Identifiser plasseringen og retningen på høyre kragebein med operatørens venstre tommel, og finn den overlegne sternal fossa forsiktig med pekefingeren. Skyll sprøyten vår med 10 enhet per milliliter heparinoppløsning. Finn punkteringsstedet, pek fem millimeter caudal til den ytre en tredjedel av høyre kragebein.Flytt sprøyten forsiktig inn i huden på punkteringsstedet. Når nålen kommer inn i den infraclavicular huden, påfør et aktivt trykk gjennom operatørens høyre hånd. Nålens retning er plassert mot den overlegne sternal fossa, og bør nesten parallelt med kragebenet, bare bakre til den.Vanligvis kan den subklaviske venen nås ved å sette nålen i omtrent to millimeter i denne retningen. Når nålen kommer inn i venen, vil blodet komme inn i sprøyten under aktivt trykk. Deretter må aktivt trykk opprettholdes til riktig volum av blod er trukket.Etter blodprøvetaking, fjern punkteringsnålen, og trykk på punkteringsstedet i ett til to minutter for å stoppe blødningen. Vær oppmerksom: trykket må være svært skånsomt for å hindre choke. Overfør blodprøven til et antikoagulert vakuumrør med EDTA og sentrifuge ved 1600G i 10 minutter for å samle plasma.Aspirer supernatent for å re-rengjøre røret og lagre på minus 18 Celsius grader. For å sammenligne suksessraten mellom de dyktige operatørene og nybegynnere, ble 20 SD-rotter delt inn i to grupper tilfeldig. Resultatene viser at gjennom høyre subklavvene lyktes ni rotter i den dyktige gruppen og åtte rotter i nybegynnergruppen henholdsvis.Deretter lyktes blodsamling fra de resterende tre rotter gjennom venstre side. Suksessraten hadde ingen signifikant forskjell mellom disse to gruppene. Tidskurset var litt annerledes i disse to gruppene.Ingen alvorlige komplikasjoner, som pneumothorax, hemopneumothorax og blødning oppstod under eller etter operasjonen. Alle dyr overlevde etter blodprøvetakingen. For å demonstrere vanskelighetene med å lære punkteringsprosedyren, sammenlignet vi ytterligere antall uttak mellom de dyktige og nybegynnergruppene.Som vist i tabell to er gjennomsnittlig antall uttak i faggruppen litt mindre enn nybegynnere, men det er ingen statistisk signifikans. Til slutt viser våre resultater at den subklaviske venepunkteringsstrategien for blodinnsamling er trygg og mulig hos rotter. Denne metoden er verdifull, spesielt ved anledninger når det er behov for mye blod.Denne metoden kan være et optimalt alternativ hvis den konvensjonelle blodprøvetaking mislykkes.

Research

JoVE Journal

Medicine

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

Sublingual Immunterapi som et alternativ til å indusere beskyttelse mot akutte luftveisinfeksjoner

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Gjentatt blod samling fra halen fotsporene til ikke-Anesthetized rotter med vakuum blod samling System

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Rutine Screening metode for Microparticles i blodplater blodoverføringer

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

Punktering-indusert Iris Neovascularization som en musemodell av Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Blood Collection gjennom arteria vene punktering i mus

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

The Rigid Tube as an Alternative in Controlling the Problematic Airway

Det stive røret som et alternativ i å kontrollere den problematiske luftveien

The unexpected problematic airway represents a large proportion of anesthesia-related morbidity and mortality. The retromolar or paraglossal approach is ...

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

Mikrokirurgiske ferdigheter i å etablere permanent jugularvenekannasjon hos rotter for seriell blodprøvetaking av oralt administrert legemiddel

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Repeterende blodprøvetaking fra den subklaviske venen hos bevisst rotte

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

Modifisert punktering i halevene og penisvene for blodprøvetaking i rottemodellen

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...