Name: subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats
Uploaded: 2018-11-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Ingen förklarade.

Denna studie godkändes av Central South University etikkommitté för djur forskning från andra Xiangya sjukhuset (Changsha, Kina). Manuskriptet var beredd enligt ankomst (djur forskning: rapportering av i Vivo experiment) riktlinjer9.
1. material och djur förberedelse
<ol><li>Förbereda material behövs: tejp, epilering agent, 75% etanol, bloduppsamlingsrör, 2,5 mL spruta med nål (24 G, 0,6 x 25 mm), hår rakapparat, elektroniska skala och spårvidd (se ...

<ol>
	<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Korfmacher, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+capillary+microsampling+for+rat+pharmacokinetic+studies:+Comparison+of+tail-vein+bleed+to+jugular+vein+cannula+sampling.">Utility of capillary microsampling for rat pharmacokinetic studies: Comparison of tail-vein bleed to jugular vein cannula sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 76, 7-14 (2015).</li><li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures,+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model.">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments. (95), (2015).</li><li>Wickremsinhe, E. R., Renninger, M., Paulman, A., Pritt, M., Schultze, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Repeated+Tail+Clip+and+Saphenous+Vein+Phlebotomy+on+Rats+Used+in+Toxicology+Studies.">Impact of Repeated Tail Clip and Saphenous Vein Phlebotomy on Rats Used in Toxicology Studies.</a> Toxicologic Pathology. 44 (7), 1013-1020 (2016).</li><li>Takahashi, M., Makino, S., Kikkawa, T., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+rat+serum+suitable+for+mammalian+whole+embryo+culture.">Preparation of rat serum suitable for mammalian whole embryo culture.</a> Journal of Visualized Experiments. (90), e51969 (2014).</li><li>Cochran, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+Glucose+Metabolism+Kinetics+Using+18F-FDG+Micro-PET/CT.">Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT.</a> Journal of Visualized Experiments. (123), (2017).</li><li>Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drawing+blood+from+rats+through+the+saphenous+vein+and+by+cardiac+puncture.">Drawing blood from rats through the saphenous vein and by cardiac puncture.</a> Journal of Visualized Experiments. (7), 266 (2007).</li><li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System.">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>National Institute of Health. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).</li><li>Antonelli, D., Feldman, A., Freedberg, N. A., Turgeman, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axillary+vein+puncture+without+contrast+venography+for+pacemaker+and+defibrillator+leads+implantation.">Axillary vein puncture without contrast venography for pacemaker and defibrillator leads implantation.</a> Pacing and Clinical Electrophysiology. 36 (9), 1107-1110 (2013).</li><li>Luis, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+magnetic+resonance+imaging+of+the+thoracic+venous+system+in+rats+with+congenital+diaphragmatic+hernia.">Microscopic magnetic resonance imaging of the thoracic venous system in rats with congenital diaphragmatic hernia.</a> Pediatric Surgery International. 27 (2), 175-180 (2011).</li><li>Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital+signs+monitoring+during+injectable+and+inhalant+anesthesia+in+mice.">Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice.</a> Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).</li></ol>

Här presenterar vi en alternativ metod för blod från den subclavia ven och vi visar att denna metod är genomförbart, säker och tillämpliga för blodprovstagning hos råttor. Denna metod härstammar från att subclavia ven punktera i pacemaker bly implantation för patienter11. Den subclavia ven ligger bara bakre och stjärtfenan till nyckelbenet och är en fortsättning av axillär venen. Den går från den yttersta gränsen av det första revbenet till den mediala gränsen av främre scale...

Blodinsamling är viktigt i djurförsök. Målet venerna för blodinsamling inkluderar den retro-orbital plexus, halsvenen, den ytlig ven, svans blodkärl och halspulsådern1,2,3,4. Ibland kan kunde blod erhållas från bukaorta, vena cava eller ens hjärta5,6,7. Vid sådana tillfällen djuren måste offras och kan inte användas för efterföljande observationsperiodens längd. alltså, dessa metoder används mindre i dagliga experimentellt arbete. Blodinsamling från svans venen av råttor är populära och mindre stressigt jämfört med ovan nämnda metoder8.
Blodinsamling från svans venen begränsas dock ibland av en otillfredsställande framgång. Ibland är det också svårt att få tillräckligt blodvolym genom denna metod. Som den subclavia ven är tillräckligt stor och ligger precis under nyckelbenet benet, kan subclavia ven punktering vara en alternativ metod för blod provtagning om rutinmässig blod insamlingsmetoder misslyckas. Här, införa vi en metod för blodinsamling genom subclavia ven punktering på råttor.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>rats</td>
			<td>Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd (Changsha, Hunan Province, China)&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stastical software</td>
			<td>SPSS Statistics 17</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epilating agent</td>
			<td>France Yi Sha Cosmetics Co.,Ltd(Guangzhou, Guangdong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.5 mL syringe</td>
			<td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co.,Ltd(Weihai,Shandong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair shaver</td>
			<td>Shanghai FLYCO Electric Co., Ltd(Shanghai,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>adhesive tape</td>
			<td>3M Deutschland GmbH(EdisonstraBe 6,59157 Kamen, Germany)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% ethanol</td>
			<td>Department of Pharmacy,The Second Xiangya Hospital of Central South Univesity</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>blood collection tube</td>
			<td>Hubei Jinxing Technology&#38;Development Co.,Ltd (Wuhan Hubei Province,China) (2ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electronic scale</td>
			<td>Dongguan Shengheng Electronics Co.,Ltd (Dongguan,Guangdng Province,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>canvas gloves</td>
			<td>for anethesia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hepain</td>
			<td>Nanjing Xinbai Pharmaceutical&#160; Co.,Limited (Nanjing, Jiangsu Province, China) (2mL, 12500 IU)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>physical saline</td>
			<td>Hunan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd(Yueyang ,Hunan Province,China) (100ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats

Bloduppsamling med tillräckligt blodvolym är viktigt i djurförsök. Blodinsamling från svans venen av råttor är populära och mindre stressande jämfört med andra mer aggressiva metoder såsom retro-orbital plexus prova samling. Detta blod insamlingsmetod begränsas dock ibland av en otillfredsställande framgång. Här, införa vi en metod för blodinsamling genom subclavia ven punkteringen. Den subclavia ven ligger precis under nyckelbenet och denna anda är tillräckligt stor för att uppfylla volym blodinsamling. Våra resultat visar att denna metod är säker och tillämpliga för blodprovstagning samling med krävs blodvolymen. Blodinsamling genom subclavia ven punkteringen kunde fungera som en alternativ blod insamlingsmetod vid misslyckade svans ven blodprovstagning hos råttor.

Sammanlagt 20 SD råttor (män n = 10, kvinnliga n = 10) användes här. Blod collectionwas utförs av skickliga operatörer, som har utfört mer än 20 blod provtagningar från den subclavia ven hos råttor, och av de nybörjare operatörer, som har ingen subclavia ven punktering erfarenhet hos råttor eller andra djur. Före operationer såg nybörjare minst 3 ingrepp görs av duktiga förare.
Blodprovstagning lyckades 17 rå...

Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Här presenterar vi ett protokoll för att samla in blodprov från råtta subclavia venen.

Subclavia ven punktering som en alternativ metod för blod provtagning hos råttor

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Subclavian Vein Punktering som en alternativ metod för blodprovsinsamling i Råttor. Efter narkos, placera råttor i ryggläge och sterilisera infraclavicular utrymme med 75%etanol. Identifiera överlägsen sternal fossa före punktering.Lokalisera punktionsplatsen, caudal till den yttre en tredjedel regionen av nyckelbenet i samma sida. Nålens riktning var placerad mot den överlägsna sternala fossa och bör nästan parallellt med nyckelbenet, bara posteriort till den. Efter blodinsamling, tryck på punkteringsstället i en till två minuter, för att stoppa blödning.Blodinsamling med tillräcklig volym behövs alltid i djurförsök. Blodinsamling från rats'tail vein är populär och mindre stressande än vissa aggressiva metoder såsom retro orbital plexus prov insamling. Denna metod begränsas dock av andelen framgångsrika.Här introducerar vi vår metod för blodinsamling med önskad blodvolym från subclavian venen. Våra resultat visar att denna metod är säker och praktisk, och kan övervägas i fall blodprov från svansvenen misslyckades. För att starta, förbereda tejp, epileringsmedel, 75%etanol, bloduppsamlingsrör, två punkt fem milliliter spruta, hår rakapparat, elektronisk skala, heparin, och fysiologisk saltlösning.Husråttor under standardförhållanden, med fri tillgång till mat och dricksvatten, som hålls i 530 kvadratcentimeterburar med träs rakningskläder. Framkalla narkos hos alla djur genom intraperitoneal injektion före punktering. Placera råttan i ryggläge, fixera bakbenen i ett bekvämt läge och fixera de övre extremiteterna parallellt med kroppen, precis bredvid stammen.Rengör båda sidor av infraclavicular utrymme för att ta bort pälsen och eventuella synliga smuts. Torka av halsen och brösthuden med 75%etanol, och håll området rent och torrt med gasbinda. Båda sidor av subclavian ven är lämpliga för punktering, och här väljer vi rätt sida för punktering.Identifiera platsen och riktningen på höger nyckelbenet med operatörens vänstra tumme, och lokalisera den överlägsna sternala fossa försiktigt med pekfingret. Skölj vår spruta med 10 enhet per milliliter heparinlösning. Lokalisera punktpunkten, punkt fem millimeter caudal till den yttre en tredjedel regionen av den högra nyckelbenet.Flytta sprutan försiktigt in i huden på punkteringsstället. När nålen kommer in i infraklicular huden, tillämpa ett aktivt tryck genom operatörens högra hand. Nålens riktning är placerad mot den överlägsna sternala fossan, och bör nästan parallellt med nyckelbenet, bara posteriort till den.Vanligtvis kunde den subklaviära venen nås genom att nålen förs in i ungefär två millimeter i denna riktning. När nålen kommer in i venen kommer blod in i sprutan under ett aktivt tryck. Då måste aktivt tryck upprätthållas tills korrekt volym blod dras.Efter blodsamling, ta bort punkteringsnålen och tryck på punktionsstället i en till två minuter för att stoppa blödningen. Var uppmärksam:trycket måste vara mycket skonsamt för att förhindra choke. Överför blodprovet till ett antikoagulerat vakuumrör med EDTA och centrifug vid 1600G i 10 minuter för att samla in plasma.Aspirera supernatent att rengöra röret och lagra på minus 18 Celsius grader. För att jämföra andelen framgångsrika mellan de skickliga operatörerna och nybörjare, delades 20 SD-råttor in i två grupper slumpmässigt. Resultaten visar att genom rätt subclavian ven, nio råttor i den skickliga gruppen och åtta råttor i nybörjargruppen lyckades, respektive.Sedan lyckades blodinsamling från de återstående tre råttorna genom vänster sida. Andelen framgångsrika hade ingen signifikant skillnad mellan dessa två grupper. Tidskursen var något annorlunda i dessa två grupper.Inga allvarliga komplikationer, såsom pneumothorax, hemopneumothorax och blödning inträffade under eller efter operationen. Alla djur överlevde efter blodprovstagningen. För att demonstrera svårigheterna att lära sig punktionsproceduren jämförde vi ytterligare antalet uttag mellan de skickliga och nybörjargrupperna.Som framgår av tabell två är det genomsnittliga antalet uttag i kvalificerad grupp något mindre än nybörjare, men det finns ingen statistisk signifikans. Sammanfattningsvis visar våra resultat att den subclavian vein punktering strategi för blodinsamling är säker och genomförbar hos råttor. Denna metod är värdefull, särskilt vid tillfällen då stor mängd blod behövs.Denna metod kan vara ett optimalt alternativ om den konventionella blodprovstagningen misslyckas.

Research

JoVE Journal

Medicine

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

Sublingual immunterapi som ett alternativ att inducera skydd mot akuta luftvägsinfektioner

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Upprepade blodinsamling från svans åder av icke-sövda råttor med ett System för insamling av vakuum blod

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Rutinmässig Screening metod för mikropartiklar i trombocyttransfusioner

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

Punktering-inducerad Iris kärlnybildning som en musmodell av Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Blod insamling genom subclavia vein punktering hos möss

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

The Rigid Tube as an Alternative in Controlling the Problematic Airway

Den styva röret som ett alternativ för att kontrollera den problematiska Airway

The unexpected problematic airway represents a large proportion of anesthesia-related morbidity and mortality. The retromolar or paraglossal approach is ...

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

Mikrokirurgiska färdigheter för att etablera permanent jugulär venkanylering hos råttor för seriell blodprovtagning av oralt administrerat läkemedel

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Repetitiv blodprovtagning från den subklaviska venen hos medveten råtta

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

Modifierad svansven- och penisvenpunktion för blodprovtagning i råttmodellen

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...