Name: subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats
Uploaded: 2018-11-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Hiçbiri ilan etti.

Bu çalışmada ikinci Xiangya Hospital (Changsha, Çin) hayvan araştırma merkezi Güney Üniversitesi Etik Komitesi tarafından kabul edildi. El yazması varış göre hazırlanmıştır (hayvan araştırma: deneyler In Vivo Reporting in) yönergeleri9.
1. malzeme ve hayvan hazırlık
<ol><li>Gerekli malzemeler hazırlamak: yapışkan bant, epilasyon Ajan, % 75 etanol, kan toplama Tüp, 2.5 mL şırınga iğne (24 G, 0.6 mm x 25 mm), saç tıraş makinesi, elektron...

<ol>
	<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Korfmacher, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+capillary+microsampling+for+rat+pharmacokinetic+studies:+Comparison+of+tail-vein+bleed+to+jugular+vein+cannula+sampling.">Utility of capillary microsampling for rat pharmacokinetic studies: Comparison of tail-vein bleed to jugular vein cannula sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 76, 7-14 (2015).</li><li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures,+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model.">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments. (95), (2015).</li><li>Wickremsinhe, E. R., Renninger, M., Paulman, A., Pritt, M., Schultze, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+Repeated+Tail+Clip+and+Saphenous+Vein+Phlebotomy+on+Rats+Used+in+Toxicology+Studies.">Impact of Repeated Tail Clip and Saphenous Vein Phlebotomy on Rats Used in Toxicology Studies.</a> Toxicologic Pathology. 44 (7), 1013-1020 (2016).</li><li>Takahashi, M., Makino, S., Kikkawa, T., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+rat+serum+suitable+for+mammalian+whole+embryo+culture.">Preparation of rat serum suitable for mammalian whole embryo culture.</a> Journal of Visualized Experiments. (90), e51969 (2014).</li><li>Cochran, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+Glucose+Metabolism+Kinetics+Using+18F-FDG+Micro-PET/CT.">Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT.</a> Journal of Visualized Experiments. (123), (2017).</li><li>Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drawing+blood+from+rats+through+the+saphenous+vein+and+by+cardiac+puncture.">Drawing blood from rats through the saphenous vein and by cardiac puncture.</a> Journal of Visualized Experiments. (7), 266 (2007).</li><li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System.">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>National Institute of Health. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).</li><li>Antonelli, D., Feldman, A., Freedberg, N. A., Turgeman, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axillary+vein+puncture+without+contrast+venography+for+pacemaker+and+defibrillator+leads+implantation.">Axillary vein puncture without contrast venography for pacemaker and defibrillator leads implantation.</a> Pacing and Clinical Electrophysiology. 36 (9), 1107-1110 (2013).</li><li>Luis, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+magnetic+resonance+imaging+of+the+thoracic+venous+system+in+rats+with+congenital+diaphragmatic+hernia.">Microscopic magnetic resonance imaging of the thoracic venous system in rats with congenital diaphragmatic hernia.</a> Pediatric Surgery International. 27 (2), 175-180 (2011).</li><li>Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital+signs+monitoring+during+injectable+and+inhalant+anesthesia+in+mice.">Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice.</a> Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).</li></ol>

Burada, subklaviyan ven kan çıkarılması için alternatif bir yöntem tanıtmak ve bu yöntem için kan örnekleme sıçanlarda mümkün, güvenli ve uygulanabilir olduğunu göstereceğiz. Bu yöntem kalp pili kurşun implantasyon hastalar11subklaviyan ven ponksiyon türetilir. Subklaviyan ven sadece arka ve köprücük kemiği kaudal bulunur ve aksiler ven bir devamıdır. Anterior scalene kas12medial kenarlığına ilk kaburga dış kenarlığı çalışır. Buradan, ...

Kan toplama hayvan araştırma esastır. Hedef damarlar kan koleksiyonu için retro-orbital pleksus, juguler ven, safen ven, kuyruk kan damarları ve karotid arter1,2,3,4içerir. Bazen, kan abdominal aort, vena cava veya bile kalp5,6,7elde edilebilir. Böyle durumlarda, hayvanlar kurban edilmeli ve sonraki gözlem için kullanılamaz; Böylece, bu yöntemler kullanılır günlük deneysel çalışmalarında daha az. Sıçan kuyruğu damardan kan toplama popüler ve daha az stresli göre yukarıda belirtilen yöntemleri8.
Ancak, kuyruk damardan kan toplama bazen yetersiz başarı oranı ile sınırlıdır. Bazen, bu yöntemle yeterli kan hacmi elde etmek zordur. Subklaviyan ven yeterli büyüklükte ve sadece köprücük kemiği altında yer alan, subklaviyan ven ponksiyon rutin kan toplama yöntemleri başarısız varsa kan örnekleme için alternatif bir yöntem olabilir. Burada, sıçanlarda subklaviyan ven ponksiyon yoluyla kan koleksiyonunun bir yöntemini tanıtmak.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>rats</td>
			<td>Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd (Changsha, Hunan Province, China)&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stastical software</td>
			<td>SPSS Statistics 17</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epilating agent</td>
			<td>France Yi Sha Cosmetics Co.,Ltd(Guangzhou, Guangdong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.5 mL syringe</td>
			<td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co.,Ltd(Weihai,Shandong Province ,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hair shaver</td>
			<td>Shanghai FLYCO Electric Co., Ltd(Shanghai,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>adhesive tape</td>
			<td>3M Deutschland GmbH(EdisonstraBe 6,59157 Kamen, Germany)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% ethanol</td>
			<td>Department of Pharmacy,The Second Xiangya Hospital of Central South Univesity</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>blood collection tube</td>
			<td>Hubei Jinxing Technology&#38;Development Co.,Ltd (Wuhan Hubei Province,China) (2ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electronic scale</td>
			<td>Dongguan Shengheng Electronics Co.,Ltd (Dongguan,Guangdng Province,China)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>canvas gloves</td>
			<td>for anethesia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hepain</td>
			<td>Nanjing Xinbai Pharmaceutical&#160; Co.,Limited (Nanjing, Jiangsu Province, China) (2mL, 12500 IU)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>physical saline</td>
			<td>Hunan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd(Yueyang ,Hunan Province,China) (100ml)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

subclavian vein puncture as an alternative method of blood sample collection in rats

Kan toplama yeterli kan hacmi ile hayvan deneylerinde esastır. Sıçan kuyruğu damardan kan toplama koleksiyonu retro-orbital pleksus örnek gibi diğer daha Agresif yöntemlerine göre popüler ve daha az stresli. Ancak, bu kan toplama yöntemi bazen yetersiz başarı oranı ile sınırlıdır. Burada, kan derlemesinin subklaviyan ven ponksiyon yoluyla bir yöntemi tanıtmak. Subklaviyan ven sadece köprücük kemiği altında bulunur ve bu damar kan toplama hacim gereksinimleri yerine getirmek için yeterli büyüklükte. Sonuçlarımız bu yöntem kan toplama örnekleme gerekli kan hacmi için güvenli ve uygun olduğunu göstermektedir. Kan toplama subklaviyan ven ponksiyon yoluyla bir alternatif kan toplama yöntemi başarısız kuyruk damar kan örnekleme sıçanlarda durumunda olarak hizmet verebilir.

Toplam 20 SD sıçan (erkek n = 10, kadın n = 10) burada kullanılmıştır. Sıçanlarda subklaviyan ven üzerinden 20'den fazla kan dağıtımları gerçekleştiren vasıflı operatörler tarafından ve kim yok subklaviyan ven delik açıldı acemi operatörler tarafından yapılacak kan collectionwas fareler veya diğer hayvanların deneyim. Operasyon öncesi, en az 3 yordamlar vasıflı operatörler tarafından yapılan yeni başlayanlar izledim.
<p class="jove_content" fo:keep-...

Watch this Scientific Journal Video about Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats at JoVE.com

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Burada, sıçan subklaviyan ven kan örnekleri toplamak için bir protokol mevcut.

Subklaviyan ven ponksiyon kan örnek fareleri koleksiyonunda alternatif bir yöntem olarak

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Sıçanlarda Alternatif Kan Örneği Toplama Yöntemi Olarak Subklavian Ven Delinme. Genel anesteziden sonra sıçanları supine pozisyona yerleştirin ve %75 etanol ile infraklaviküler alanı sterilize edin. Delinmeden önce üstün sternal fossa tanımlayın.Aynı tarafta köprücük dış üçte bir bölgeye kaudal, delinme alanı bulun. İğnenin yönü üstün sternal fossa doğru konumlandırılmış ve neredeyse köprücük kemiği paralel olmalıdır, sadece posterior. Kan topladıktan sonra kanamayı durdurmak için delinme bölgesine 1-2 dakika basın.Hayvan deneylerinde her zaman yeterli hacimde kan toplanması gerekmektedir. Sıçan kuyruk ven kan toplama retro orbital pleksus örnek toplama gibi bazı agresif yöntemlere göre popüler ve daha az stresli. Ancak, bu yöntem başarı oranı ile sınırlıdır.Burada subklavian ven istenilen kan hacmi ile kan toplama yöntemimizi sıyoruz. Sonuçlarımız bu yöntemin güvenli ve pratik olduğunu ve kuyruk damarından kan örneklemesi başarısız olması durumunda düşünülebileceğini göstermektedir. Başlamak için, yapışkan bant hazırlamak, epilasyon ajan, 75%etanol, kan toplama tüpü, iki nokta beş mililitre şırınga, saç tıraş makinesi, elektronik ölçek, heparin, ve fizyolojik salin.Standart koşullar altında ev fareler, yiyecek ve içme suyuna ücretsiz erişim ile, ahşap tıraş yatak ile 530 santimetre kare kafeslerde tutulur. Delinmeden önce intraperitoneal enjeksiyon yoluyla tüm hayvanlarda genel anestezi indüklemek. Supine pozisyonda sıçan yerleştirin, rahat bir pozisyonda arka ekstremitedüzeltmek, ve gövde hemen yanında, vücuda paralel üst ekstremite düzeltmek.Kürk ve görünür kir kaldırmak için infraclavicular alanın her iki tarafını temizleyin. Boyun ve göğüs derisi %75 etanol ile silin ve bölgeyi gazlı bezle temiz ve kuru tutun. Subklavian ven her iki tarafı delinme için uygundur, ve burada, biz delinme için sağ tarafı seçin.Operatörün sol başparmağıyla sağ köprücük kemiğinin konumunu ve yönünü belirleyin ve işaret parmağıyla üstün sternal fossa'yı yavaşça bulun. Şırıngamızı mililitre başına 10 birim heparin çözeltisi ile durulayın. Delinme bölgesini bulun, sağ köprücük kemiğinin dış üçte biri bölgesine beş milimetre kaudal nokta.Şırıngayı hafifçe delinme bölgesinin derisine taşıyın. İğne infraklaviküler deriye girdikten sonra operatörün sağ eline aktif bir basınç uygulayın. İğnenin yönü superior sternal fossa doğru konumlandırılmış, ve neredeyse köprücük kemiği paralel olmalıdır, sadece posterior.Genellikle, subklavian ven bu yönde yaklaşık iki milimetre için iğne takArak ulaşılabilir. İğne damara girdikten sonra, kan aktif bir basınç altında şırıngaya girer. Daha sonra kan uygun hacim çizilninceye kadar aktif basınç korunmalıdır.Kan toplama sonra, delinme iğnesi çıkarın ve kanamayı durdurmak için bir ila iki dakika delinme bölgesine basın. Dikkat edin:boğulmayı önlemek için basınç çok nazik olmalıdır. Plazma toplamak için 1600G'de 1600G'de EDTA ve santrifüj lüzuile pıhtılaşmış bir vakum tüpüne kan örneğini aktarın.Tüpü yeniden temizlemek ve eksi 18 santigrat derecede saklamak için süpernatenti aspire edin. Yetenekli operatörler ve yeni başlayanlar arasındaki başarı oranını karşılaştırmak için, 20 SD sıçan rastgele iki gruba ayrıldı. Sonuçlar, sağ subklavian ven yoluyla, yetenekli grupta dokuz sıçan ve acemi grupta sekiz sıçan, sırasıyla başarılı olduğunu göstermektedir.Sonra kalan üç sıçandan kan toplanması sol taraftan başarılı oldu. Başarı oranı bu iki grup arasında anlamlı bir fark yoktu. Zaman kursu bu iki grupta biraz farklıydı.Pnömotoraks, hemopneumothoraks gibi ciddi komplikasyonlar ve kanama operasyon sırasında veya sonrasında meydana gelmedi. Kan örneği aldıktan sonra tüm hayvanlar hayatta kaldı. Delinme prosedürünü öğrenmenin zorluklarını göstermek için, yetenekli ve acemi gruplar arasındaki para çekme sayısını daha da karşılaştırdık.Tablo İki'de gösterildiği gibi, yetenekli gruptaki ortalama para çekme sayısı yeni başlayanlardan biraz daha azdır, ancak istatistiksel bir anlamlılık yoktur. Sonuç olarak, sonuçlarımız kan toplama için subklavian ven delinme stratejisinin farelerde güvenli ve uygulanabilir olduğunu göstermektedir. Bu yöntem, özellikle büyük miktarda kan gerekli olduğu durumlarda, değerlidir.Konvansiyonel kan örnekleme başarısız olursa bu yöntem optimal bir alternatif olabilir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

Alternatifi olarak dilaltı immünoterapi Akut Solunum Enfeksiyonları Karşı Koruma tetikleyebilecek

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Kuyruk damar anestezi sıçan bir vakum kan toplama sistemi ile kan koleksiyonundan tekrarlanan

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Trombosit transfüzyonları Microparticles için yöntem eleme rutin

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

Delici cisim kaynaklı Iris neovaskülarizasyon Rubeosis Iridis bir fare modeli olarak

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Farelerde subclavian ven delinme yoluyla kan toplama

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

The Rigid Tube as an Alternative in Controlling the Problematic Airway

Sorunlu Hava YolunuN Kontrolünde Alternatif Olarak Rijit Tüp

The unexpected problematic airway represents a large proportion of anesthesia-related morbidity and mortality. The retromolar or paraglossal approach is ...

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

Oral Yoldan Verilen İlacın Seri Kan Örneklemesi için Sıçanlarda Kalıcı Juguler Ven Kanülasyonu Oluşturma Mikrocerrahi Becerileri

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Bilinçli Sıçan Subklaviyen Veninden Tekrarlayan Kan Örneklemesi

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

Sıçan Modelinde Kan Örneklemesi için Modifiye Kuyruk Veni ve Penil Ven Delinmesi

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...