Name: simultaneous cryosectioning of multiple rodent brains
Uploaded: 2018-09-18T15:00:00
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PCH मिशन सहायता कोष इस पांडुलिपि में रिपोर्ट अनुसंधान का समर्थन किया । लेखकों के आंकड़े में इस्तेमाल किया छवियों को लेने के लिए डैनियल ग्रीफिथ शुक्रिया अदा करना चाहूंगा ।

Megabrain तकनीक पुरुष वयस्क C57Bl6 चूहों5, किशोर Sprague-Dawley चूहों से पूरे और hemisected दिमाग का उपयोग कर अनुकूलित किया गया है, और वयस्क Sprague-Dawley चूहों कि 1x फॉस्फेट के साथ transcardially perfused थे बफर खारा (पंजाब) ने इसके बाद बाय 4% paraformaldehy...

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	<li>Lyck, L., Dalmau, I., Chemnitz, J., Finsen, B., Schroder, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+markers+for+quantitative+studies+of+neurons+and+glia+in+human+neocortex.">Immunohistochemical markers for quantitative studies of neurons and glia in human neocortex.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 56 (3), 201-221 (2008).</li><li>Fritz, P., Wu, X., Tuczek, H., Multhaupt, H., Schwarzmann, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitation+in+immunohistochemistry.+A+research+method+or+a+diagnostic+tool+in+surgical+pathology?.">Quantitation in immunohistochemistry. A research method or a diagnostic tool in surgical pathology?.</a> Pathologica. 87 (3), 300-309 (1995).</li><li>Walker, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+immunohistochemistry--issues+concerning+methods,+utility+and+semiquantitative+assessment+I.">Quantification of immunohistochemistry--issues concerning methods, utility and semiquantitative assessment I.</a> Histopathology. 49 (4), 406-410 (2006).</li><li>Evilsizor, M. N., Ray-Jones, H. F., Lifshitz, J., Ziebell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primer+for+immunohistochemistry+on+cryosectioned+rat+brain+tissue:+example+staining+for+microglia+and+neurons.">Primer for immunohistochemistry on cryosectioned rat brain tissue: example staining for microglia and neurons.</a> Journal of Visualized Experiments. (99), (2015).</li><li>Harrison, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolvins+AT-D1+and+E1+differentially+impact+functional+outcome,+post-traumatic+sleep,+and+microglial+activation+following+diffuse+brain+injury+in+the+mouse.">Resolvins AT-D1 and E1 differentially impact functional outcome, post-traumatic sleep, and microglial activation following diffuse brain injury in the mouse.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 47, 131-140 (2015).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), (2012).</li><li>Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+the+ARRIVE+guidelines+for+reporting+animal+research.">Improving bioscience research reporting: the ARRIVE guidelines for reporting animal research.</a> PLoS Biology. 8 (6), e1000412 (2010).</li><li>Kennedy, H. S., Puth, F., Van Hoy, M., Le Pichon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+removing+the+brain+and+spinal+cord+as+one+unit+from+adult+mice+and+rats.">A method for removing the brain and spinal cord as one unit from adult mice and rats.</a> Lab Animal (NY). 40 (2), 53-57 (2011).</li><li>Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematoxylin+and+eosin+staining+of+tissue+and+cell+sections.">Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections.</a> CSH Protocols. 2008, (2008).</li><li>Ji, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Impact+of+Repeated+Freeze-Thaw+Cycles+on+the+Quality+of+Biomolecules+in+Four+Different+Tissues.">The Impact of Repeated Freeze-Thaw Cycles on the Quality of Biomolecules in Four Different Tissues.</a> Biopreservation and Biobanking. 15 (5), 475-483 (2017).</li><li>Pegg, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+history+and+principles+of+cryopreservation.">The history and principles of cryopreservation.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 20 (1), 5-13 (2002).</li></ol>

यह इस प्रक्रिया के दौरान विचार किया जाना चाहिए कि Megabrain और उसके आसपास के तापमान को लगातार और ऊतक के फिर से ठंड को रोकने के लिए निगरानी की जानी चाहिए । मस्तिष्क केवल से हटाया जा सकता है-20 ° c फ्रीजर करने के लिए ...

यहां, हम एक उपंयास विधि है, जो हम Megabrain कॉल के लिए प्रोटोकॉल वर्तमान, बहाव immunohistochemical प्रक्रियाओं के लिए एक साथ कई कुतर दिमाग cryosection विकसित । एक Megabrain कई जानवरों से ऊतक युक्त एकल स्लाइड के उत्पादन के लिए अनुमति देता है. इस तकनीक को 9 वयस्क चूहे गोलार्द्धों, या 5 वयस्क पूर्ण दिमाग से राज्याभिषेक वर्गों में कटौती करने के लिए अनुकूलित किया गया है, एक साथ । इसलिए, तकनीक जानवरों के एक बड़े पलटन से स्लाइड पर घुड़सवार मस्तिष्क ऊतक पर किया बड़े immunohistochemical अध्ययन या अन्य विश्लेषण में सबसे अधिक लागू है ।
Immunohistochemistry विशिष्ट एंटीबॉडी के हित के प्रोटीन के खिलाफ निर्देश को समझते है और विशिष्ट ऊतक1,2,3में उनकी अभिव्यक्ति और सेलुलर परिवर्तन विशेषताएं के उपयोग शामिल है । immunohistochemistry का उपयोग तंत्रिका विज्ञान अनुसंधान में प्रचलित है, अंय वैज्ञानिक विषयों के बीच, सेलुलर और4मस्तिष्क की आणविक समझ में सहायता । बड़े पैमाने पर कई जानवरों और मस्तिष्क वर्गों को शामिल अध्ययन संसाधन और गहन समय दोनों हो सकता है । इस तरह के रूप में, वहां Megabrain के विकास के पीछे एक बहुमुखी तर्क है: समय को कम cryosectioning खर्च, बढ़ते, और धुंधला ऊतक, जबकि फलस्वरूप कम एजेंट का उपयोग कर । इसके अलावा, इस प्रक्रिया को कारगर बनाने की क्षमता और एक ही दौर में कई दिमाग दाग को धुंधला बैचों,3immunohistochemistry की एक सीमा के बीच परिवर्तनशीलता के कुछ कम करने में मदद करता है । इसके अलावा, एक Megabrain खोदी एक समय व्यक्तिगत जमे हुए कुतर दिमाग अनुभाग के लिए विकल्प की बचत है और सूक्ष्म तकनीकों द्वारा पशुओं या यहां तक कि उपचार समूहों के बीच ऊतक की तेजी से तुलना के लिए अनुमति देता है ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Andwin scientific tissue-tek CRYO-OCT compound (case of 12)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-373-65</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific Shandon Peel-A-Way Disposable Embedding Molds</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>18-41</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand High Precision Straight Broad Strong Point Tweezers/Forceps</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-000-128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand 20mL HDPE Scintillation Vials with Polypropylene Cap</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>03-337-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose, poly bottle 2.5 kg</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S2-212</td>
			<td>Both 15% and 30% sucrose concentrations need to be made up.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Methylbutane (Certified), Fisher Chemical</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>O3551-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PYREX Tall-Form Beakers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>02-546E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand General Purpose Liquid-in-Glass Partial Immersion Thermometers (-50&#176; to +50&#176;C)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-201-642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand&#160;Scoopula Spatula</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-357Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>STANLEY Razor Blade</td>
			<td>Grainger</td>
			<td>4A807</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Edge-Rite Microtome blades</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-070-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides (1&#34; frost) - white</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-034-979</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gibco&#160;PBS (Phosphate Buffered Saline) 10X, pH 7.2</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>70-013-032</td>
			<td>Dilute to 1X&#160; before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 piece fine paint brushes</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B079J12ZRV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PAP pen</td>
			<td>abcam</td>
			<td>ab2601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chuck Shown in Figure 4 was custom made by a lab technician, however similar sizes are available to order from other companies commercially.</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>EMS065</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simultaneous cryosectioning of multiple rodent brains

प्रोटोकॉल और immunohistochemistry सूक्ष्म शरीर रचना और जैविक ऊतक के भीतर स्थानीयकरण प्रोटीन कल्पना करने के लिए विश्लेषण के नियमित तरीके हैं । तंत्रिका विज्ञान में, साथ ही अंय वैज्ञानिक क्षेत्रों के ढेर सारे, इन तकनीकों का इस्तेमाल कर रहे हैं । Immunohistochemistry स्लाइड घुड़सवार ऊतक या मुक्त अस्थायी वर्गों पर किया जा सकता है । स्लाइड-माउंटेड नमूनों को तैयार करना एक समय गहन प्रक्रिया है । एक तकनीक के लिए निंनलिखित प्रोटोकॉल, Megabrain कहा जाता है, cryosection और माउंट मस्तिष्क ऊतक के लिए लिया समय कम से ९०% तक एक जमे हुए ब्लॉक में कई दिमाग के संयोजन से । इसके अलावा, इस तकनीक को धुंधला दौर के बीच देखा परिवर्तनशीलता कम, एक बड़े histochemical अध्ययन में । वर्तमान तकनीक बहाव immunohistochemical विश्लेषण में कुतर मस्तिष्क ऊतक का उपयोग करने के लिए अनुकूलित किया गया है; हालांकि, यह विभिंन वैज्ञानिक क्षेत्रों है कि cryosectioning का उपयोग करने के लिए लागू किया जा सकता है ।

इस प्रक्रिया के लिए एक सकारात्मक अंत परिणाम ऊतक है कि स्लाइड पर फ्लैट है, कोई बुलबुले या आंसू के साथ, अभिविंयास जिसमें वे जमे हुए थे में है । ऊतक वर्गों समान रूप से स्थान पर है और आसानी से पहचा...

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Simultaneous Cryosectioning of Multiple Rodent Brains

यहाँ, हम एक timesaving एक दिमाग प्रसंस्करण के लिए विकल्प के रूप में कई जानवरों से फ्रीज और अनुभाग मस्तिष्क ऊतक के लिए एक प्रोटोकॉल मौजूद. यह immunohistochemistry के दौरान धुंधला परिवर्तनशीलता कम कर देता है और समय cryosectioning और इमेजिंग कम कर देता है ।

मल्टीपल कुतर दिमाग का एक साथ Cryosectioning

Histology and immunohistochemistry are routine methods of analysis to visualize microscopic anatomy and localize proteins within biological tissue. In ...

इस समय की बचत विधि एनाटॉमी और स्थानीय प्रोटीन और ऊतक के दृश्य को अनुकूलित करने के लिए तंत्रिका विज्ञान अध्ययन में इम्यूनोहिस्टोकेमिकल प्रक्रियाओं के दौर के बीच परिवर्तनशीलता को कम करती है। इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि यह एक ही जमे हुए ब्लॉक में कई दिमाग के संयोजन से क्रायोसेक्शन और माउंट मस्तिष्क ऊतक के लिए लगने वाले समय को कम कर देता है। हालांकि इस तकनीक को कृंतक दिमाग के कोरोनल वर्गों के लिए अनुकूलित किया जाता है, इसे धनु या ट्रांसवर्स वर्गों या विभिन्न प्रकार के ऊतकों जैसे मांसपेशियों या यकृत के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।सफल ट्रांसकार्डियल परफ्यूजन के बाद, पीबीएस में 4% पैराफॉर्मलडिहाइड की 25 मिलीलीटर शीशी में जानवरों से दिमाग को 24 घंटे के लिए ठीक करने के बाद। इसके बाद, पैराफॉर्मलडिहाइड से दिमाग को हटाने के लिए कुंद इत्तला दी गई संदंश का उपयोग करें। टीबीएस में 30% सुक्रोज समाधान के लगभग 20 मिलीलीटर के साथ एक शीशी के लिए दिमाग स्थानांतरित करें।दिमाग और समाधान तब तक रखें जब तक कि वे शीशी के नीचे तक न डूब जाएं। इसके बाद, एक बर्फ बाल्टी में सूखी बर्फ के एक बिस्तर पर एक 500 मिलीलीटर ग्लास बीकर रखें। इसके बाद बीकर में 300 से 400 मिलीलीटर आइसोपेन्टेन डालें।नकारात्मक 45 और नकारात्मक 50 डिग्री सेल्सियस के बीच आइसोपेन बनाए रखें। बेंच टॉप पर, इष्टतम कटिंग तापमान या OCT यौगिक के साथ लगभग आधे रास्ते से भरा एक डिस्पोजेबल एम्बेडिंग मोल्ड भरें। मोल्ड से किसी भी हवा के बुलबुले को हटाने के लिए सुई का उपयोग करें।सुक्रोज समाधान से पहले मस्तिष्क को हटाने के लिए कुंद इत्तला दी संदंश का प्रयोग करें। फिर गोलार्धों को अलग करने से पहले सेरिबैलम और घ्राण बल्ब को हटाने के लिए एक नए रेजर ब्लेड का उपयोग करें। इसके बाद, दिमाग को संख्यात्मक नामकरण प्रणाली दें।कुंद संदंश का प्रयोग करें, मस्तिष्क को लेने के लिए दो स्थिति में रखा जाएगा, और यह पक्ष के साथ उन्मुख करने के लिए पहले ऊपर की ओर का सामना करना पड़ काट दिया जाएगा । अक्टूबर में मस्तिष्क कम और चिमटी का उपयोग करने के लिए अपनी स्थिति को समायोजित जब तक यह स्वतंत्र रूप से खड़ा है । इस तकनीक का एक महत्वपूर्ण संशोधन स्थिति में खाली स्थान है।इस स्थान को मेगाब्रेन अभिविन्यास की आसान पहचान की अनुमति देने के लिए नामित किया गया है और इसलिए प्रत्येक मस्तिष्क से जुड़े जानवर की पहचान करें। सभी दिमाग मोल्ड में तैनात होने के बाद, दिमाग के सबसे ऊपर को कवर करने के लिए पर्याप्त OCT जोड़ें, फिर किसी भी हवा के बुलबुले को हटाने के लिए सुई का उपयोग करें। संदंश सुनिश्चित करने के लिए संदंश के साथ मोल्ड के कोने पकड़ो आंशिक रूप से अक्टूबर में जलमग्न नहीं हो जाते हैं ।फिर, मोल्ड को आइसोपेनटेन में कम करें ताकि मोल्ड का निचला तीसरा जलमग्न हो जाए। 30 सेकंड के बाद, पूरे मोल्ड को आइसोपेंटेन में कम करें और इसे संदंश से छोड़ दें। तीन मिनट के बाद आइसोपेंटेन से मोल्ड हटाने के लिए संदंश का प्रयोग करें।तुरंत मोल्ड और एल्यूमीनियम पन्नी में अपनी सामग्री लपेटें और यह उचित लेबल । मेगाब्रेन को न्यूनतम 24 घंटे के लिए नकारात्मक 20 डिग्री सेल्सियस फ्रीजर में स्थानांतरित करें। सबसे पहले, क्रायोस्टेट कैबिनेट के तापमान को नकारात्मक 19 डिग्री सेल्सियस तक सेट करें।मेगाब्रेन को फ्रीजर से निकालकर क्रायोस्टेट में रखें। इसके बाद क्रायोस्टेट में एक चक और दो पतली इत्तला वाले तूलिका रखें। इसके बाद स्लाइड्स को मेगाब्रेन आइडेंटिफिकेशन नंबर और स्लाइड नंबर के साथ लेबल करें और स्लाइड वार्मर पर स्लाइड बिछाएं ।इसके बाद, मेगाब्रेन को खोलें और मोल्ड के कोनों को काटने के लिए रेजर ब्लेड का उपयोग करें। चक पर अक्टूबर की एक पतली परत बांटना । फिर जल्दी से चक पर मेगाब्रेन रखें।अक्टूबर के बाद पूरी तरह से जमे हुए है, मेगाब्रेन के पक्षों के आसपास अक्टूबर की एक दो मिलीमीटर परत लागू होते है और यह नीचे चक पर पक्षों को चलाने के लिए अनुमति देते हैं । चक के किनारों और नीचे से किसी भी अतिरिक्त OCT को हटाने के लिए एक रेजर ब्लेड का उपयोग करें। सबसे पहले, क्रायोस्टेट के चक सिर पर मेगाब्रेन के साथ घुड़सवार चक की स्थिति।इसके बाद क्रायोस्टेट को मनचाही मोटाई में सेट करें। ऊतक संग्रह के लिए वांछित मस्तिष्क क्षेत्र तक पहुंचने के लिए आवश्यक के रूप में अक्टूबर और ऊतक ट्रिम करें। फिर एंटी-रोल प्लेट को तब तक कम करें जब तक कि यह मंच पर टिकी न हो और एक ही अनुभाग लेने के लिए क्रायोस्टेट हैंडल चालू न करें।धीरे-धीरे एंटी-रोल प्लेट को उठाएं, सावधान रहें कि ऊतक अनुभाग को छुआ नहीं गया है। धीरे-धीरे टिंब्रश का उपयोग टिश्यू सेक्शन को अनरोल करने के लिए करें जब तक कि यह फ्लैट नहीं पड़ा हो। यदि आवश्यक हो, तो रोलिंग को रोकने के लिए पेंटब्रश का उपयोग करके अक्टूबर फ्लैट को पकड़ें।फिर स्लाइड वार्मर से स्लाइड निकालें और स्लाइड लेबल साइड को मेगाब्रेन सेक्शन पर नीचे मंडराएं और इसे स्लाइड से चिपके रहने दें। जल्दी से ऊतक अनुभाग के लिए पीबीएस की एक बूंद लागू होते हैं। पीबीएस में डूबा एक ठीक इत्तला दे दी तूलिका का उपयोग करना, ऊतक अनुभाग में किसी भी बुलबुले ब्रश और ऊतक प्रकट करना तो यह स्लाइड पर फ्लैट झूठ बोल रही है ।अंत में, स्लाइड गर्म पर स्लाइड 45 मिनट के लिए सूखने के लिए रखें और नकारात्मक 80 डिग्री सेल्सियस पर स्लाइड स्टोर करें। इस प्रोटोकॉल में नौ जानवरों से ब्रेन टिश्यू तैयार किए गए और एक साथ क्रायोसेक्शन किया गया। क्रायोसेक्शनिंग के बाद, क्रायोप्रोटेक्शन गुणवत्ता का आकलन करने के लिए एच एंड ई धुंधला किया जा सकता है।आयनीकृत कैल्शियम बाध्यकारी एडाप्टर अणु के प्रतिनिधि परिणाम एक या Iba1 माइक्रोग्लिया के धुंधला एक मेगाब्रेन पर प्रत्येक अध्ययन मस्तिष्क के बीच लगातार धुंधला दिखा । इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय, क्रैकिंग या विगलन को रोकने के लिए मेगाब्रेन को ठंडा करते समय तापमान की लगातार निगरानी करना याद रखना महत्वपूर्ण है और फिर ऊतक को फिर से फ्रीज करना जो असामान्य ऊतक अखंडता की ओर जाता है। अलग-अलग मेगाब्रेन में विभिन्न उपचार समूहों को अलग करने की सलाह नहीं दी जाती है क्योंकि यह धुंधला के दौरान समूहों के बीच भिन्नता पैदा कर सकता है और इमेजिंग और विश्लेषण के दौरान पूर्वाग्रह और व्यक्तिपरकता को कम कर सकता है।यह न भूलें कि पैराफॉर्मलडिहाइड के साथ काम करना बेहद खतरनाक हो सकता है और इस प्रक्रिया को निष्पादित करते समय पीबीई पहनना और हुड में काम करना हमेशा लिया जाना चाहिए।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Simultaneous fMRI and Electrophysiology in the Rodent Brain

एक साथ और कृंतक मस्तिष्क में fMRI इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी

To examine the neural basis of the blood oxygenation level dependent (BOLD) magnetic resonance imaging (MRI) signal, we have developed a rodent model in ...

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

पूर्व पूरे के vivo संवर्धन, विकास ड्रोसोफिला दिमाग

We describe a method for ex vivo culturing of whole Drosophila brains. This can be used as a counterpoint to chronic genetic manipulations for ...

Simultaneous Electroencephalography, Real-time Measurement of Lactate Concentration and Optogenetic Manipulation of Neuronal Activity in the Rodent Cerebral Cortex

युगपत Electroencephalography, लैक्टेट एकाग्रता और neuronal गतिविधि के Optogenetic हेरफेर के कृंतक प्रमस्तिष्क प्रांतस्था में वास्तविक समय मापन

Although the brain represents less than 5% of the body  by mass, it utilizes approximately one quarter of the glucose used by the body  at rest1. The ...

Simultaneous Electrophysiological Recording and Micro-injections of Inhibitory Agents in the Rodent Brain

एक साथ electrophysiological रिकॉर्डिंग और कृंतक मस्तिष्क में निरोधात्मक एजेंटों के सूक्ष्म इंजेक्शन

Here we describe a method for the construction of a single-use &#8220;injectrode&#8221; using commercially accessible and affordable parts. A probing ...

Isolation, Culture and Long-Term Maintenance of Primary Mesencephalic Dopaminergic Neurons From Embryonic Rodent Brains

भ्रूण कृंतक दिमाग से प्राथमिक Mesencephalic डोपामिनर्जिक न्यूरॉन्स के अलगाव, संस्कृति और लंबी अवधि के रखरखाव

Degeneration of mesencephalic dopaminergic (mesDA) neurons is the pathological hallmark of Parkinson&#8217;s diseae. Study of the biological processes ...

Homochronic Transplantation of Interneuron Precursors into Early Postnatal Mouse Brains

जल्दी जन्मोत्तर माउस दिमाग में न्यूरॉन अग्रदूतों के Homochronic ट्रांसप्लांटेशन

Neuronal fate determination and maturation requires an intricate interplay between genetic programs and environmental signals. However, disentangling the ...

Metabolic Analysis of Drosophila melanogaster Larval and Adult Brains

Metabolic Analysis of Drosophila melanogaster Larval and Adult Brains

Drosophila melanogaster लार्वा और वयस्क दिमाग का चयापचय विश्लेषण

This protocol describes a method for measuring the metabolism in Drosophila melanogaster larval and adult brains. Quantifying metabolism in whole organs ...

Abbiategrasso Brain Bank Protocol for Collecting, Processing and Characterizing Aging Brains

उम्र बढ़ने वाले दिमाग को इकट्ठा करने, संसाधित करने और विशेषता के लिए Abbiategrasso ब्रेन बैंक प्रोटोकॉल

In a constantly aging population, the prevalence of neurodegenerative disorders is expected to rise. Understanding disease mechanisms is the key to find ...

Free-floating Immunostaining of Mouse Brains

माउस दिमाग के मुक्त फ्लोटिंग Immunostaining

Immunohistochemical staining of mouse brains is a routine technique commonly used in neuroscience to investigate central mechanisms underlying the ...

Automated Multimodal Stimulation and Simultaneous Neuronal Recording from Multiple Small Organisms

कई छोटे जीवों से स्वचालित मल्टीमॉडल उत्तेजना और एक साथ न्यूरोनल रिकॉर्डिंग

Fluorescent genetically encoded calcium indicators have contributed greatly to our understanding of neural dynamics from the level of individual neurons ...