Name: transcranial direct current stimulation (tdcs) in mice
Uploaded: 2018-09-23T15:00:00
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Agradecemos al Sr. Rodrigo de Souza para asistencia en el mantenimiento de colonias de ratón. L.A.V.M es un becario postdoctoral de la CAPES. Este trabajo fue financiado por la beca PRONEX (FAPEMIG: APQ-00476-14).

Alojados individualmente macho adulto (8-12 semanas) los ratones C57BL/6 fueron utilizados en este experimento. Animales recibieron atención adecuada antes, durante y después de procedimientos experimentales con alimentos y agua ad libitum. Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité de ética animal de la Universidad Federal de Minas Gerais (protocolo número 59/2014).
1. colocación del electrodo
<ol><li>
Sedación y fijación del animal sobre el ap...

<ol>
	<li>Filmer, H. L., Dux, P. E., Mattingley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+transcranial+direct+current+stimulation+for+understanding+brain+function.">Applications of transcranial direct current stimulation for understanding brain function.</a> Trends in Neurosciences. 37 (12), 742-753 (2014).</li><li>Nitsche, M. A., Paulus, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+excitability+elevations+induced+by+transcranial+DC+motor+cortex+stimulation+in+humans.">Sustained excitability elevations induced by transcranial DC motor cortex stimulation in humans.</a> Neurology. 57 (10), 1899-1901 (2001).</li><li>Kronberg, G., Bridi, M., Abel, T., Bikson, M., Parra, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Current+Stimulation+Modulates+LTP+and+LTD:+Activity+Dependence+and+Dendritic+Effects.">Direct Current Stimulation Modulates LTP and LTD: Activity Dependence and Dendritic Effects.</a> Brain Stimulation. 10 (1), 51-58 (2017).</li><li>Pelletier, S. J., Cicchetti, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+Molecular+Mechanisms+of+Action+of+Transcranial+Direct+Current+Stimulation:+Evidence+from+In+Vitro+and+In+Vivo+Models.">Cellular and Molecular Mechanisms of Action of Transcranial Direct Current Stimulation: Evidence from In Vitro and In Vivo Models.</a> International Journal of Neuropsychopharmacology. 18 (2), pyu047 (2015).</li><li>Chang, M. C., Kim, D. Y., Park, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+cortical+excitability+and+lower+limb+motor+function+in+patients+with+stroke+by+transcranial+direct+current+stimulation.">Enhancement of cortical excitability and lower limb motor function in patients with stroke by transcranial direct current stimulation.</a> Brain Stimulation. 8 (3), 561-566 (2015).</li><li>Lefaucheur, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence-based+guidelines+on+the+therapeutic+use+of+transcranial+direct+current+stimulation+(tDCS).">Evidence-based guidelines on the therapeutic use of transcranial direct current stimulation (tDCS).</a> Clinical Neurophysiology. 128 (1), 56-92 (2017).</li><li>Monai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+imaging+reveals+glial+involvement+in+transcranial+direct+current+stimulation-induced+plasticity+in+mouse+brain.">Calcium imaging reveals glial involvement in transcranial direct current stimulation-induced plasticity in mouse brain.</a> Nature Communications. 7, 11100 (2016).</li><li>Marquez-Ruiz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcranial+direct-current+stimulation+modulates+synaptic+mechanisms+involved+in+associative+learning+in+behaving+rabbits.">Transcranial direct-current stimulation modulates synaptic mechanisms involved in associative learning in behaving rabbits.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 109, 6710-6715 (2012).</li><li>Jackson, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+transcranial+direct+current+stimulation:+Methods+and+mechanisms.">Animal models of transcranial direct current stimulation: Methods and mechanisms.</a> Clinical Neurophysiology. 127 (11), 3425-3454 (2016).</li><li>Cambiaghi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+transcranial+direct+current+stimulation+modulates+motor+excitability+in+mice.">Brain transcranial direct current stimulation modulates motor excitability in mice.</a> The European journal of neuroscience. 31 (4), 704-709 (2010).</li><li>Monte-Silva, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+late+LTP-like+plasticity+in+the+human+motor+cortex+by+repeated+non-invasive+brain+stimulation.">Induction of late LTP-like plasticity in the human motor cortex by repeated non-invasive brain stimulation.</a> Brain Stimulation. 6 (3), 424-432 (2013).</li><li>San-Juan, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcranial+Direct+Current+Stimulation+in+Mesial+Temporal+Lobe+Epilepsy+and+Hippocampal+Sclerosis.">Transcranial Direct Current Stimulation in Mesial Temporal Lobe Epilepsy and Hippocampal Sclerosis.</a> Brain Stimulation. 10 (1), 28-35 (2017).</li><li>Brunoni, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcranial+direct+current+stimulation+(tDCS)+in+unipolar+vs.+bipolar+depressive+disorder.">Transcranial direct current stimulation (tDCS) in unipolar vs. bipolar depressive disorder.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 35 (1), 96-101 (2011).</li><li>Brunoni, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trial+of+Electrical+Direct-Current+Therapy+versus+Escitalopram+for+Depression.">Trial of Electrical Direct-Current Therapy versus Escitalopram for Depression.</a> New England Journal of Medicine. 376 (26), 2523-2533 (2017).</li><li>Boggio, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+visual+memory+enhancement+after+direct+current+stimulation+in+Alzheimer's+disease.">Prolonged visual memory enhancement after direct current stimulation in Alzheimer's disease.</a> Brain Stimulation. 5 (3), 223-230 (2012).</li><li>Cosentino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anodal+tDCS+of+the+swallowing+motor+cortex+for+treatment+of+dysphagia+in+multiple+sclerosis:+a+pilot+open-label+study.">Anodal tDCS of the swallowing motor cortex for treatment of dysphagia in multiple sclerosis: a pilot open-label study.</a> Neurological Sciences. , 7-9 (2018).</li><li>Kaski, D., Dominguez, R. O., Allum, J. H., Islam, A. F., Bronstein, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+physical+training+with+transcranial+direct+current+stimulation+to+improve+gait+in+Parkinson's+disease:+A+pilot+randomized+controlled+study.">Combining physical training with transcranial direct current stimulation to improve gait in Parkinson's disease: A pilot randomized controlled study.</a> Clinical Rehabilitation. 28 (11), 1115-1124 (2014).</li><li>Monai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+imaging+reveals+glial+involvement+in+transcranial+direct+current+stimulation-induced+plasticity+in+mouse+brain.">Calcium imaging reveals glial involvement in transcranial direct current stimulation-induced plasticity in mouse brain.</a> Nature Communications. 7, 11100 (2016).</li><li>Fritsch, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+current+stimulation+promotes+BDNF-dependent+synaptic+plasticity:+potential+implications+for+motor+learning.">Direct current stimulation promotes BDNF-dependent synaptic plasticity: potential implications for motor learning.</a> Neuron. 66 (2), 198-204 (2010).</li><li>Winkler, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensory+and+Motor+Systems+Anodal+Transcranial+Direct+Current+Stimulation+Enhances+Survival+and+Integration+of+Dopaminergic+Cell+Transplants+in+a+Rat+Parkinson+Model.">Sensory and Motor Systems Anodal Transcranial Direct Current Stimulation Enhances Survival and Integration of Dopaminergic Cell Transplants in a Rat Parkinson Model.</a> New Research. 4 (5), 17-63 (2017).</li><li>Nasehi, M., Khani-Abyaneh, M., Ebrahimi-Ghiri, M., Zarrindast, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+left+frontal+transcranial+direct-current+stimulation+on+propranolol-induced+fear+memory+acquisition+and+consolidation+deficits.">The effect of left frontal transcranial direct-current stimulation on propranolol-induced fear memory acquisition and consolidation deficits.</a> Behavioural Brain Research. 331 (May), 76-83 (2017).</li><li>Souza, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobiological+mechanisms+of+antiallodynic+effect+of+transcranial+direct+current+stimulation+(tDCS)+in+a+mice+model+of+neuropathic+pain.">Neurobiological mechanisms of antiallodynic effect of transcranial direct current stimulation (tDCS) in a mice model of neuropathic pain.</a> Brain Research. 1682 (14-23), (2018).</li><li>Woods, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technical+guide+to+tDCS,+and+related+non-invasive+brain+stimulation+tools.">A technical guide to tDCS, and related non-invasive brain stimulation tools.</a> Clinical Neurophysiology. 127 (2), 1031-1048 (2016).</li><li>Cogan, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+damage+thresholds+during+therapeutic+electrical+stimulation.">Tissue damage thresholds during therapeutic electrical stimulation.</a> Journal of Neural Engineering. 13, 2 (2017).</li><li>Podda, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anodal+transcranial+direct+current+stimulation+boosts+synaptic+plasticity+and+memory+in+mice+via+epigenetic+regulation+of+Bdnf+expression.">Anodal transcranial direct current stimulation boosts synaptic plasticity and memory in mice via epigenetic regulation of Bdnf expression.</a> Scientific reports. 6 (October 2015), 22180 (2015).</li></ol>

En los últimos años, técnicas de neuroestimulación han entrando práctica clínica como un procedimiento prometedor para el tratamiento de desordenes neuropsiquiátricos23. Para reducir la restricción impuesta por la falta de conocimiento de los mecanismos de la neuroestimulación, presentamos aquí un modelo de ratón de tDCS lleva un electrodo que puede dirigirse a las regiones del cerebro. Ya que el electrodo es crónico implantable, este modelo animal permite la investigación de efectos ...

Estimulación por corriente directa transcraneal (tDCS) es una técnica no invasiva, de bajo costo y terapéutica, que se centra en la modulación neuronal mediante el uso de corriente continua de baja intensidad1. Actualmente hay dos configuraciones (anódicas y cathodal) para tDCS. Mientras que la estimulación anódicas ejerce un campo eléctrico actual demasiado débil para desencadenar potenciales de acción, estudios de electrofisiología han demostrado que este método produce cambios en la plasticidad sináptica2. Por ejemplo, hay evidencia que tDCS induce efectos a largo plazo (LTP) la potenciación como el pico de mayor amplitud de los potenciales postsinápticos excitatorios3,4 y modulación de la excitabilidad cortical5.
Por el contrario, cathodal estimulación induce inhibición, dando por resultado la hiperpolarización de la membrana6. Una hipótesis para este mecanismo se basa en los hallazgos fisiológicos donde se describe la tDCS para modular la frecuencia del potencial de acción y duración en el cuerpo neuronal3. En particular, este efecto no directamente evocar potenciales de acción, aunque se puede cambiar el umbral de despolarización y facilitar u obstaculizar el disparo neuronal7. Estos efectos de contraste han demostrado previamente. Por ejemplo, anódicas y cathodal estimulación produce efectos opuestos en condicionado respuestas registradas mediante electromiografía actividad en conejos8. Sin embargo, los estudios también han demostrado que sesiones de estimulación anódicas prolongada pueden disminuir excitabilidad mientras aumento cathodal corrientes puede conducir a la excitabilidad, que presenta efectos auto contraste3.
Estímulos tanto anódicas como cathodal agregan el uso de pares de electrodos. Por ejemplo, en estimulación anódicas, el "activo" o "ánodo" electrodo se coloca sobre la región del cerebro a ser modulada mientras que el electrodo de "referencia" o el "cátodo" está situado en una región donde el efecto de la corriente se supone que es insignificante9. En la estimulación cathodal, disposición de electrodos se invierte. La intensidad de estimulación para pinza eficaz depende de la intensidad de corriente y dimensiones del electrodo, que afectan el eléctrico campo diferente de10. En estudios más publicados, la intensidad de corriente promedio es entre 0.10 a 2.0 mA y 0.1 mA a 0,8 mA de humanos y ratones, respectivamente6,11. Aunque el tamaño de electrodo de 35 cm2 se utiliza normalmente en los seres humanos, no hay adecuada comprensión en cuanto a dimensiones de electrodos para los roedores y una investigación más exhaustiva es necesario6.
Pinza se ha propuesto en los estudios clínicos con la tentativa de ofrecer un tratamiento alternativo o complementario para varios trastornos neurológicos y neuropsiquiátricos11 como epilepsia12, trastorno bipolar13, carrera5 , mayor depresión14, enfermedad de Alzheimer15, esclerosis múltiple16 y17de la enfermedad de Parkinson. A pesar del creciente interés en pinza y su uso en ensayos clínicos, detalle celular y alteraciones moleculares evocados en el tejido cerebral, corto y efectos de larga duración, así como medidas de resultado conductuales, son sin embargo ser más profundamente investigado18, 19. desde un enfoque humano directo estudiar a fondo tDCS no es viable, el uso de un modelo animal de tDCS puede ofrecer información valiosa sobre los acontecimientos celulares y moleculares subyacentes a los mecanismos terapéuticos de la tDCS debido a la accesibilidad a la tejido fino del cerebro del animal.
Evidencia disponible es limitada con respecto a modelos de tDCS en ratones. La mayoría de los modelos reportados utiliza diferentes diseños de implantación, electrodo de dimensiones y materiales. Por ejemplo, Winkler et al. (2017) implantado el electrodo principal (Ag/AgCl, 4 mm de diámetro) llenado de solución salina y se fija al cráneo con tornillos y cemento acrílico20. A diferencia de nuestro enfoque, los electrodos del pecho fue implantado (platino, 20 x 1.5 mm). Nasehi et al. (2017) utilizan un procedimiento muy similar al nuestro, aunque el electrodo torácico fue hecho de una esponja empapada en solución salina (carbón lleno, 9.5 cm2)21. Otro estudio implanta dos electrodos en la cabeza del animal, que fue alcanzada usando las placas fijas y cubriendo la cabeza del animal con un hidrogel conductor22. Aquí, describimos un modelo de ratón de pinza que usa un electrodo crónicamente implantado a través de la simple instalación quirúrgica procedimientos y pinza (figura 1).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1152px;" width="1152">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">BD Ultra-Fine 50U Syringe</td>
			<td style="width:175px;">BD</td>
			<td style="width:101px;">10033430026</td>
			<td style="width:419px;">For intraperitonially injection.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Shaver (Philips Multigroom)</td>
			<td>Philips (Brazil)</td>
			<td>QG3340/16</td>
			<td style="width:419px;">For surgical site trimming.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td style="width:419px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Model 940 Small Animal Stereotaxic Instrument with Digital Display Console</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>940</td>
			<td style="width:419px;">For animal surgical restriction and positioning.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Model 922 Non-Rupture 60 Degree Tip Ear Bars</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>922</td>
			<td style="width:419px;">For animal surgical restriction and positioning.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cannula Holder</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>1766-AP</td>
			<td style="width:419px;">For implant positioning.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Precision Stereo Zoom Binocular Microscope (III) on Boom Stand</td>
			<td>WPI</td>
			<td>PZMIII-BS</td>
			<td style="width:419px;">For bregma localization and implant positioning.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Temperature Control System Model&#160;</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>TCAT-2LV</td>
			<td style="width:419px;">For animal thermal control.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cold Light Source&#160;</td>
			<td>WPI</td>
			<td>WA-12633</td>
			<td style="width:419px;">For focal brightness</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tabletop Laboratory Animal Anesthesia System with Scavenging</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>901820</td>
			<td style="width:419px;">For isoflurane delivery and safety.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">VaporGuard Activated Charcoal Adsorption Filter</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>931401</td>
			<td style="width:419px;">Delivery system safety measures.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Model 923-B Mouse Gas Anesthesia Head Holder</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>923-B</td>
			<td style="width:419px;">For animal restriction and O2 and isoflurane delivery.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxygen regulator, E-cylinder&#160;</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>901305</td>
			<td style="width:419px;">For O2 regulation and delivery.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxygen hose &#8211; green&#160;</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>931503</td>
			<td style="width:419px;">For O2 and isoflurane delivery.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Infrared Sterilizer 800 &#186;C</td>
			<td>Marconi</td>
			<td>MA1201</td>
			<td style="width:419px;">For instrument sterilization.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td style="width:419px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fine Scissors - ToughCut</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14058-11</td>
			<td style="width:419px;">For incision.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical Hooks</td>
			<td>INJEX</td>
			<td>1636</td>
			<td style="width:419px;">In House Fabricated - Used to clear the surgical site from skin and fur.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Standard Tweezers or Forceps</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td style="width:419px;">For skin grasping.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td style="width:419px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>SC-361931</td>
			<td style="width:419px;">For incision closing.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cement and Catalyzer KIT (Duralay)</td>
			<td>Reliance</td>
			<td>2OZ</td>
			<td style="width:419px;">For implant fixation.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile Cotton Swabs (Autoclaved)</td>
			<td>JnJ</td>
			<td>75U</td>
			<td style="width:419px;">For surgical site antisepsis.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">24 Well Plate (Tissue Culture Plate)</td>
			<td>SARSTEDT</td>
			<td>831,836</td>
			<td style="width:419px;">For cement preparation.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Application Brush</td>
			<td>parkell</td>
			<td>S286</td>
			<td style="width:419px;">For cement mixing and application.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pharmaceutics</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td style="width:419px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylazin (ANASEDAN 2%)</td>
			<td>Ceva Pharmaceutical (Brazil)</td>
			<td>P10160</td>
			<td style="width:419px;">For anesthesia induction.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ketamine (DOPALEN 10%)</td>
			<td>Ceva Pharmaceutical (Brazil)</td>
			<td>P30101</td>
			<td style="width:419px;">For anesthesia induction.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane (100%)</td>
			<td>Crist&#225;lia (Brazil)</td>
			<td>100ML</td>
			<td style="width:419px;">For anesthesia maintenance.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lidocaine (XYLESTESIN 5%)</td>
			<td>Cristal Pharma</td>
			<td>-</td>
			<td style="width:419px;">For post-surgical care.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ketoprofen (PROFENID 100 mg)</td>
			<td>Sanofi Aventis</td>
			<td>20ML</td>
			<td style="width:419px;">For post-surgical care.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ringer&#39;s Lactate Solution</td>
			<td>SANOBIOL LAB</td>
			<td>############</td>
			<td style="width:419px;">For post-surgical care.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TobraDex (Dexamethasone 1 mg/g)</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>631</td>
			<td style="width:419px;">For eye lubrification and protection.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Stimulation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td style="width:419px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Animal Transcranial Stimulator</td>
			<td>Soterix Medical</td>
			<td>2100</td>
			<td style="width:419px;">For current generation.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pin-type electrode Holder (Cylindrical Holder Base)</td>
			<td>Soterix Medical</td>
			<td>2100</td>
			<td style="width:419px;">Electrode support (Implant).</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pin-type electrode (Ag/AgCl)</td>
			<td>Soterix Medical</td>
			<td>2100</td>
			<td style="width:419px;">For current delivery (electrode).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;">Pin-type electrode cap</td>
			<td>Soterix Medical</td>
			<td>2100</td>
			<td style="width:419px;">For implant protection.</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;">Body Electrode (Ag/AgCl Coated)</td>
			<td>Soterix Medical</td>
			<td>2100</td>
			<td style="width:419px;">For current delivery (electrode).&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Saline Solution (0.9%)</td>
			<td>FarmaX</td>
			<td>############</td>
			<td style="width:419px;">Conducting medium for current delivery.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Standard Tweezers or Forceps</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td style="width:419px;">For tDCS setup.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Real Time Polymerase Chain Reaction</td>
			<td style="width:175px;"></td>
			<td style="width:101px;"></td>
			<td style="width:419px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">BioRad CFX96 Real Time System</td>
			<td style="width:175px;">BioRad</td>
			<td style="width:101px;">C1000</td>
			<td style="width:419px;">For qPCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SsoAdvancedTM Universal SYBR Green Supermix (5 X 1mL)</td>
			<td style="width:175px;">BioRad</td>
			<td>1725271</td>
			<td style="width:419px;">For qPCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hard Shell PCR Plates PCT COM 50 p/ CFX96</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>HSP9601</td>
			<td style="width:419px;">For qPCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microseal &#34;B&#34; seal pct c/ 100</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>MSB1001</td>
			<td style="width:419px;">For qPCR</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

transcranial direct current stimulation (tdcs) in mice

Estimulación por corriente directa transcraneal (tDCS) es una técnica no invasiva de la neuromodulación propuesta como un tratamiento alternativo o complementario para algunas enfermedades neuropsiquiátricas. Los efectos biológicos de tDCS no son entiende completamente, que se explica en parte debido a la dificultad de obtener tejido cerebral humano. Este protocolo describe un modelo de ratón de pinza que usa un electrodo implantado crónico permitiendo el estudio de los efectos biológicos de la larga duración de tDCS. En este modelo experimental, tDCS cambia la expresión génica cortical y ofrece una destacada contribución a la comprensión de las razones para su uso terapéutico.

El protocolo quirúrgico presenta estabilidad del implante a largo plazo durante al menos un mes, no las señales inflamatorias en el sitio estimulado ni cualquier otro efecto no deseado. Todos los animales sobrevivieron a las sesiones de procedimiento y pinza quirúrgicas (n = 8). En este experimento, tDCS implantes fueron colocados sobre las cortezas de M1 y M2 (mm +1,0 antero-posterior y lateral de 0.0 mm a bregma). Una semana más tarde, tDCS (n = 3-4) y simulada (n = 3) ratones fuero...

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Transcranial Direct Current Stimulation tDCS in Mice

Estimulación por corriente directa transcraneal (tDCS) es una técnica terapéutica que se propone para el tratamiento de enfermedades psiquiátricas. Un modelo animal es esencial para la comprensión de las alteraciones biológicas específicas evocadas por pinza. Este protocolo describe un modelo de ratón de pinza que usa un electrodo implantado crónico.

Estimulación por corriente directa transcraneal (tDCS) en ratones

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a non-invasive neuromodulation technique proposed as an alternative or complementary treatment for ...

El Procedimiento Alvar Gaaud es aplicar estimulación de corriente directa transcraneal en ratones. Esto se logra mediante la generación de corrientes intensas bajas a partir de un generador de corriente directa, y enviarlo directamente al animal a través de electrodos. tDCS se ha investigado como una alternativa terapéutica no farmacológica para los principales trastornos psiquiátricos en los seres humanos, como depresión, esquizofrenia, enfermedad de Alzheimer, AHDH, y autismo.Además, tDCS es una técnica única debido a su bajo costo, facilidad de uso y perfil no invasivo. Sin embargo, los efectos biológicos de tDCS no se entienden del todo, y no hay consenso con respecto a los parámetros de estimulación, como la intensidad actual, la duración y el azulejo de las áreas cerebrales. Por lo tanto, el uso de órdenes mínimas es esencial para un estudio exhaustivo de tales mecanismos, lo que conducirá a una mejor comprensión de la eficacia clínica de tDCS a través de la adquisición y análisis de datos celulares y moleculares del comportamiento.Actualmente hay dos configuraciones de electrodos para tDCS, denominadas estimulación anodal y cathodal. En la estimulación anodal, las corrientes se entregan directamente a la cabeza del animal, a través del cuerpo del animal, y en el cátodo colocado en el tórax del animal. Mientras que en la estimulación catódica la corriente entra a través del tórax del animal, viaja hasta su cabeza y hacia el cátodo.En ambas situaciones, un generador de corriente controla la intensidad actual y la duración de la estimulación. Mientras se produce una calidad de contacto e inferir comentarios. Hay muchas configuraciones diferentes para el posicionamiento activo.Por lo tanto, todo el eje tridimensional debe tenerse en cuenta. En este protocolo se implantó un electrodo de cabeza de un milímetro en bregma enraado, en la línea lateral a media del cráneo, y el electrodo del cuerpo se posicionó en el pecho del animal. Debido a una simulación de corto período, se recomendó utilizar una acción rápida y anestesia a corto plazo, como isoflurano vaporizado.Este procedimiento se compone de dos pasos críticos. Colocación de electrodos y estimulación de corriente directa transcraneal. Los instrumentos quirúrgicos fueron esterilizados con pre-mantenimiento a 440 grados Celsius.Los hisopos de algodón se autoclavieron a 20 libras por pulgada cuadrada a 121 grados centígrados durante 20 minutos. Gire el controlador de plataforma térmica a 37 grados centígrados. Pesar el animal, y calcular la dosis adecuada para la inducción de la anestesia.Utilice una mezcla de ketamina y xilazina a una dosis de 100 miligramos por kilogramo de ketamina, y 8 miligramos por kilogramo de xilazina. Tamaño de la aguja 31G. El animal debe dormirse en un plazo de 2 a 3 minutos.Use una afeitadora eléctrica o una maquinilla de afeitar para afeitar el sitio quirúrgico. Coloque el animal en el aparato estereotaxico sobre la placa calefactora precalentada. Sostenga la cabeza del animal e inserte las barras de la oreja de la punta en cada una de las orejas del animal, para fijarla a la plataforma esteterotaxica.Verifique que no haya desplazamiento lateral de la cabeza, y poco movimiento vertical cambiando lentamente la cabeza del animal. Deslice suavemente la máscara de anestesia sobre la nariz del ratón y fíjelo en su lugar apretando el tornillo. Aplique pomada ocular en los ojos del animal para evitar el secado de la córnea durante la cirugía.Utilice un hisopo de algodón para preparar el sitio quirúrgico con tres exfoliantes alternos de yodo de povidona, o 2%clorohexidina y 70%ethinol. Utilice un par de pinzas para verificar la adopción de la anestesia apretando ligeramente los dedos de los dedos del animal, y verificando las leyes del reflejo de pellizcar general de la abstinencia de animal. Haga una incisión unos tres milímetros después de la oreja del animal, y deténgase en la línea del ojo.El sitio de la incisión debe tener aproximadamente un centímetro de longitud para ser lo suficientemente grande como para recibir el implante. Raspa suavemente el cráneo con un rascador óseo para mejorar la adherencia del pegamento y el cemento. Esto debe hacerse a mano ligera con la intención de crear micro-arañazos.Coloque cuidadosamente los ganchos quirúrgicos en la piel suelta para mantener un campo quirúrgico abierto y liberarlo de obstrucciones, como la piel y el pelaje. Use un hisopo de algodón estéril para secar suavemente el cuero cabelludo del animal. Utilice un microscopio de disección para visualizar la parte superior del cráneo del animal.Coloque una aguja en el soporte esterotaxico y localice el bregma. Coloque la aguja directamente sobre la cabeza del animal tocando ligeramente el bregma. Utilice el bregma como referencia para ajustar las coordenadas del área de interés.Fije el implante en el soporte estereotaxico. Coloque el implante sobre la cabeza del animal y óselo lentamente sobre la región de interés. Utilice una aguja para esparcir una gota, aproximadamente 35 microlitros, de superpegamento en el espacio del implante.Mueva lentamente el soporte hacia abajo hasta que toque el cráneo. Asegúrese de que el espacio del implante esté completamente en contacto con la superficie. Preparar el cemento quirúrgico de acuerdo con las instrucciones del fabricante.Después de un posicionamiento preciso, aplique tres capas delgadas y uniformes de cemento a través del cráneo, y en la parte inferior del implante. Aplique drop per drop mediante un pincel de aplicación. Las capas deben formar una estructura en forma de U para un mayor soporte estructural del implante.Deje la rosca de tornillo del implante limpia de cemento para permitir una conexión suave y sin obstáculos. Deje que cada capa se seque durante aproximadamente cuatro minutos. Después del secado, retire cuidadosamente el soporte hasta que se desprenda completamente del implante.Tenga siempre mucho cuidado al manipular el implante, ya que podría ser destruido accidentalmente del cráneo del animal. Hidrata la piel y el lugar de la incisión del animal con un hisopo de algodón empapado en solución salina. Corte la piel sobre la base del implante.Utilice un par de pinzas para unir el tejido y cierre la incisión con una gota de pegamento quirúrgico de tejido por punto 2 centímetros de tejido. Infiltrar de 1 a 2%lidocaína en el lugar de la incisión y los tejidos subyacentes. Hidratar al animal con 500 microlitros de anillo de lactato simultáneamente.Coloque el ratón en una jaula de una sola casa precalentada de 37 grados Celsius. Construir un pequeño plato de pellets de alimentos húmedos en la jaula, para un fácil acceso a los alimentos en las siguientes horas. Registre el peso post quirúrgico del animal.El animal debe administrarse con ketoprofeno. 5 miligramos por kilogramo simultáneamente después de la cirugía y durante los próximos dos días. Asegúrese de que el estimulador tDCS esté completamente cargado.Conecte los cables de ánodo y cátodo al estimulador tDCS y hágalos disponibles cerca del sitio de simulación. Fije el electrodo de tipo pin al soporte esteterotaxico. Ajuste la plataforma térmica a 37 grados centígrados.Encienda el caudalímetro de oxígeno en el sistema de anestesia por inhalación a 1 litro por minuto. Coloque el ratón en la cámara de inducción de anestesia. Encienda el vaporizador de isoflurano al 3%Permitir que el animal se someta a efectos de isoflurano durante cuatro minutos.Mientras el animal está en la cámara de inducción, utilice una jeringa estéril para llenar el electrodo del cuerpo con una solución salina del 0,9%. Retire al animal de la cámara de inducción y coloque su pecho sobre el electrodo del cuerpo. Deslice suavemente la máscara de anestesia sobre la nariz del ratón y fíjelo en su lugar.Bajar la salida de isoflurano a 1.5%Llenar el implante y el electrodo tipo pin con solución salina. Adjúntalos cuidadosamente. Ajuste el tiempo de estimulación y la intensidad actual de acuerdo con su protocolo.Verifique la calidad del contacto en el sistema tDCS más adelante. Inicie la estimulación. Observe la rampa actual durante 20 segundos hasta el valor seleccionado.Y mantenerse en su lugar por el tiempo establecido. Luego, al final de la sección bajando de nuevo. Active el botón de espinilla para controlarlo.Observe la rampa actual durante 20 segundos hasta el valor seleccionado. Y luego abajo uno por el resto del período de estimulación, con una rampa final al valor seleccionado, al final, con un aumento consecutivo hacia abajo. Una de las secciones de estimulación está completa, transfiera cuidadosamente al animal a una jaula precale calentada de 37 grados Celsius durante 10 minutos.Este protocolo utiliza tDCS para estimular la corteza cerebral del ratón un milímetro antes del bregma. Este gráfico muestra la expresión estadística y génica después del protocolo de estimulación tDCS. Usando una intensidad de corriente de 0,35 miliamperios durante 10 minutos por día.El implante tCDS presentó auto viable desde el primer día hasta el quinto sin diferencia significativa entre los días en calidad de contacto. Hay una variedad de protocolos de estimulación tCDS en cerebros modelo. Los protocolos deben elegirse de acuerdo con las particularidades de su experimento se basa en.Zona de estimulación, intensidad actual, duración de la sesión y posicionamiento de electrodos. En este protocolo en particular, nuestro objetivo era modular la corteza motora a través de nuestro conocido tDCS con la corriente de 350 microamperios durante 10 minutos. Después de ver este video usted será capaz de realizar tDCS en ratones.Cuando alguien practica la cirugía puede tomar hasta cuatro minutos por animal. Es esencial tener en cuenta las pautas de cuidado animal al utilizar los ratones durante la operación y seguir el cuidado postquirúrgico a los animales para que los animales se mantengan saludables durante el estudio. También recomendamos esperar de cinco a siete días después de la colocación del implante para realizar los experimentos, ya que la respuesta fisiológica del animal al trauma puede interferir con los resultados biológicos.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Transcranial Direct Current Stimulation (tDCS) in Mice

Electrode Positioning and Montage in Transcranial Direct Current Stimulation

Colocación de los electrodos y montaje en estimulación transcraneal corriente continua

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a technique that has been intensively investigated in the past decade as this method offers a ...

Investigación

Neurociencias

Direct-current Stimulation and Multi-electrode Array Recording of Seizure-like Activity in Mice Brain Slice Preparation

La estimulación de corriente directa y multi-electrodo matriz de registro de la actividad convulsiva en ratones cerebro rebanada preparación

Cathodal transcranial direct-current stimulation (tDCS) induces suppressive effects on drug-resistant seizures. To perform effective actions, the ...

Effects of Transcranial Alternating Current Stimulation on the Primary Motor Cortex by Online Combined Approach with Transcranial Magnetic Stimulation

Efectos de la corriente alterna la estimulación transcraneal en la corteza de Motor primaria por Online enfoque combinado con la estimulación magnética transcraneal

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) is a neuromodulatory technique able to act through sinusoidal electrical waveforms in a specific ...

Remotely Supervised Transcranial Direct Current Stimulation: An Update on Safety and Tolerability

Remotamente bajo supervisión directa de Transcranial estímulo actual: Una actualización sobre la seguridad y tolerabilidad

The remotely supervised tDCS (RS-tDCS) protocol enables participation from home through guided and monitored self-administration of tDCS treatment while ...

Transcranial Electrical Brain Stimulation in Alert Rodents

Estimulación eléctrica cerebral transcraneal en roedores alerta

Transcranial electrical brain stimulation can modulate cortical excitability and plasticity in humans and rodents. The most common form of stimulation in ...

Chronic Transcranial Electrical Stimulation and Intracortical Recording in Rats

Estimulación eléctrica transcraneal crónica y grabación Intracortical en ratas

Transcranial electrical stimulation (TES) is a powerful and relatively simple approach to diffusely influence brain activity either randomly or in a ...

The Combined Use of Transcranial Direct Current Stimulation and Robotic Therapy for the Upper Limb

El uso combinado de terapia robótica y estimulación de corriente directa de Transcranial para el miembro superior

Neurologic disorders such as stroke and cerebral palsy are leading causes of long-term disability and can lead to severe incapacity and restriction of ...

Stimulation Location Determination using a 3D Digitizer with High-Definition Transcranial Direct Current Stimulation

Determinación de la ubicación de estimulación mediante un digitalizador 3D con estimulación de corriente directa transcraneal de alta definición

The abundance of neuroimaging data and rapid development of machine learning has made it possible to investigate brain activation patterns. However, ...