Name: a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

Denne undersøgelse blev økonomisk støttet af biomedicinske materiale (BMM) programmet IBIZA projekt og medfi nansieret af den hollandske økonomiministerium. Forfatterne vil gerne takke Prof. Dr. Graham Lieschke fra Monash Universitet i Australien for at give zebrafisk transgene linje (mpeg1:Gal4 / UAS:Kaede).

I denne protokol er vedligeholdelse af voksen zebrafisk i overensstemmelse med de lokale dyrevelfærd forordninger som godkendt af den lokale dyrevelfærd. Eksperimenter med embryoer blev udført efter 2010/63/EU-direktiv.
1. forberedelse af "Bakterier-only" og bakterier-mikrokugler suspensioner
Bemærk: S. aureus RN4220 stamme at udtrykke mCherry fluorescerende proteiner (S. aureus- mCherry) bruges. S. aureus RN4220 stamme ...

Biomateriale-associerede infektion (BAI) er en alvorlig klinisk komplikation. Forståelsen af patogenesen af BAI in vivo ville give ny indsigt for at forbedre forebyggelse og behandling af BAI. Dog aktuelle eksperimentelle BAI dyremodeller såsom murine modeller er dyre, arbejdskrævende og kræver specialiseret personale uddannet i komplekse kirurgiske teknikker. Disse modeller er derfor ikke egnet til høj overførselshastighed analyse. Da kravene for zebrafisk embryo modeller er mindre komplekse og omkostninger genere...

En bred vifte af medicinsk udstyr (benævnt "biomaterialer") bruges i stigende i moderne medicin til at genoprette eller erstatte menneskelige legeme dele1. Dog disponerer implantation af biomaterialer en patient til infektion, kaldet en biomateriale-associerede infektion (BAI), som er en væsentlig komplikation af implantater i kirurgi. Staphylococcus aureus og Staphylococcus epidermidis er to mest udbredte bakteriearter, der er ansvarlig for BAI2,3,4,5,6. Implanteret biomaterialer form en overflade, der er modtagelige for bakterielle Biofilmdannelse. Desuden kan lokale immunrespons gale af de implanterede biomaterialer, forårsager reduceret effektiviteten af bakteriel clearance. Indledende regnskabsafslutning inficerer bakterier udføres hovedsagelig af infiltrerer neutrofiler, som kraftigt har reduceret baktericide kapacitet i overværelse af en indsat eller implanteret biomateriale7. Derudover dræbe makrofager infiltrerer vævet, efter den indledende tilstrømning af neutrofiler vil phagocytosis de resterende bakterier men ikke kan effektivt dem intracellulært, på grund af sindssyge immun signalering, som er en konsekvens af den kombinerede tilstedeværelsen af den biomateriale og bakterier8. Således er kan tilstedeværelsen af biomaterialer lette intracellulære overlevelse af bakterier9,10,11,12,13 og biofilm dannelse på den indopererede biomaterialer4,14. Derfor kan BAI føre til fiasko og behovet for udskiftning af implanterede biomaterialer, forårsager øget sygelighed og dødelighed og langvarig indlæggelse med meromkostninger2,15.
Et stigende antal anti-BAI strategier er ved at blive udviklet2,16,17. In vivo evaluering af effekten af disse strategier i relevante dyremodeller er afgørende. Traditionelle eksperimentelle BAI dyremodeller (f.eks., musemodeller) er dog normalt dyrt, tidskrævende og derfor ikke velegnet til høje overførselshastighed afprøvning af flere strategier18. Seneste udvikling af bio-optiske billeddannelse teknikker baseret på en bioluminescerende/fluorescerende mærkning af værtsceller og bakterier kan tillade til kontinuerlig overvågning af BAI progression og vært-patogen/host-materiale interaktioner i enkelt lille dyr f.eks mus18,19,20,21. Dog, denne teknik er relativt komplekse og stadig i sin vorden, og flere problemer skal løses til kvantitativ analyse af BAI18. For eksempel, er en høj udfordring dosis forpligtet til at visualisere bakteriel kolonisering. Derudover lys spredning og adsorptionen af bioluminescens/fluorescens signaler i væv af pattedyr test dyr skal også være rettet18,19,21. Derfor, roman, omkostningseffektive dyremodeller giver mulighed for intravital visualisering og kvantitativ analyse over tid er værdifuld supplerende systemer for at studere BAI in vivo.
Zebrafisk (embryoner) har været brugt som en alsidig in vivo redskab til dissekere vært-patogen interaktioner og infektion patogenesen af flere bakteriearter mykobakterier22, Pseudomonas aeruginosa23, Escherichia coli24, Enterococcus faecalis25og stafylokokker26,27. Zebrafisk embryoner har mange fordele som optisk gennemsigtighed, en relativt lav vedligeholdelsesomkostninger og besiddelse af en immun ordning meget lig den i pattedyr28,29. Dette gør zebrafisk embryoner en meget økonomisk, levende model organisme for intravital visualisering og analyse af infektion progression og tilknyttede vært svar28,29. At tillade visualisering af celle behavior in vivo, transgene zebrafisk linjer med forskellige typer af immunceller (f.eks., makrofager og neutrofiler) og endda med fluorescently mærket subcellulært strukturer har været udviklet28 ,29. Desuden giver høj reproduktion sats af zebrafisk mulighed for at udvikle høj overførselshastighed testsystemer byder automatiseret robot injektion, automatiseret fluorescens kvantificering og RNA sekvens analyse27, 30.
I den foreliggende undersøgelse, vi har til formål at udvikle en zebrafisk embryo model for biomateriale-associerede infektion ved hjælp af fluorescens Billeddannende teknikker. Med henblik herpå udviklet vi en procedure for at injicere bakterier (S. aureus) i nærværelse af biomateriale mikrokugler ind i muskelvævet zebrafisk embryoner. Vi brugte S. aureus RN4220 udtrykker mCherry fluorescerende proteiner (S. aureus- mCherry), som blev bygget som beskrevet andetsteds for en anden S. aureus stamme10,31. Linjen transgene zebrafisk (mpeg1: UAS/Kaede) udtrykker Kaede grøn fluorescerende proteiner i den makrofager32 og blå fluorescerende polystyren mikrokugler blev brugt. I en tidligere undersøgelse, har vi vist, at intramuskulær injektion af mikrokugler i zebrafisk embryoner til at efterligne biomateriale implantation er muligt33. For at analysere kvantitativt progression af BAI og tilknyttede celle infiltration i enkelt embryoner over tid, brugte vi projektfilen "Zebrafisk-Immunotest", der drives inden for "ObjectJ" (et plug-in for ImageJ) at kvantificere fluorescens-intensiteten af bakterier har bopæl og makrofager infiltrerer omkring injektionsstedet mikrokugler33. Derudover vi bestemmes antallet af kolonidannende enheder (CFU) af bakterier i tilstedeværelse og fravær af mikrokugler i embryoner til at studere potentielle effekter af biomaterialer på infektion. Vores nuværende undersøgelse viser, at med de metoder, der udvikles her, zebrafisk embryoet er en lovende, Roman hvirveldyr dyremodeller for at studere biomateriale-associerede infektioner in vivo.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tryptic soya agar</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>236950</td>
			<td>Media preparation unit at AMC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic soya broth</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>211825</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinylpyrrolidone40</td>
			<td>Applichem</td>
			<td>A2259.0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;m diameter polystyrene microspheres (blue fluorescent)</td>
			<td>Life technology/ThemoFisher</td>
			<td>F8829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microcapilary (1 mm O.D. x 0.78 mm I.D.)</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>30-0038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller instrument</td>
			<td>Sutter Instrument Inc</td>
			<td>Flaming p-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope LM 20</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG33 10450123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-aminobenzoic acid (Tricaine)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E10521-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose MP</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11388991001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo fluorescent microscope LM80</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG3610450126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microloader pipette tips</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5242956.003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator M3301 with M10 stand</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>00-42-101-0000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FemtoJet express micro-injector</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5248ZO100329</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtrube 2ml pp</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>72.693.005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zirconia beads</td>
			<td>Bio-connect</td>
			<td>11079124ZX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MagNA lyser</td>
			<td>Roche</td>
			<td>41416401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MSA-2 plates (Mannitol Salt Agar-2)</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>43671</td>
			<td>Chapmon 2 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl cellulose 4000cp</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>MO512-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C0378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gyrotory shaker (for bacterial growth)</td>
			<td>New Brunswick Scientific</td>
			<td>G10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zebrafish incubator</td>
			<td>VWR</td>
			<td>Incu-line</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuvettes</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>759015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Hettich-Zentrifugen</td>
			<td>ROTANTA 460R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrometer</td>
			<td>Pharmacia biotech</td>
			<td>Ultrospec&#174;2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>677180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>655161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>NL-132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>link: https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad 7.0</td>
			<td>Prism</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection

Biomateriale-associerede infektion (BAI) er en væsentlig årsag til svigt af biomaterialer/medicinsk udstyr. Staphylococcus aureus er en af de store patogener i BAI. Nuværende eksperimentelle BAI pattedyr dyre modeller såsom musemodeller er dyrt og tidskrævende, og derfor ikke velegnet til høje overførselshastighed analyse. Således er er romanen dyremodeller som komplementære systemer for at undersøge BAI in vivo ønsket. I nuværende undersøgelse, vi har til formål at udvikle en zebrafisk embryo model for in vivo visualisering og intravital analyse af bakteriel infektion i overværelse af biomaterialer baseret på Fluorescens mikroskopi. Derudover blev provokeret makrofag svar studeret. Til dette formål, vi anvendte fluorescerende proteiner-udtrykker S. aureus og transgene zebrafisk embryoner udtrykker fluorescerende proteiner i deres makrofager og udviklet en procedure for at injicere bakterier alene eller sammen med mikrokugler i musklen væv af embryoner. For at overvåge bakterieinfektion progression i levende embryoner over tid, udtænkt vi en enkel, men pålidelig metode til mikroskopiske scoring af fluorescerende bakterier. Resultater fra mikroskopiske scoring viste, at alle embryoner med mere end 20 kolonidannende enheder (CFU) af bakterier viste en positiv fluorescerende signal af bakterier. For at undersøge de potentielle virkninger af biomaterialer på infektion, besluttet vi CFU numre af S. aureus med og uden 10 µm polystyren mikrokugler (PS10) som model biomaterialer i embryoner. Desuden brugte vi ObjectJ-projektfil "Zebrafisk-Immunotest" opererer i ImageJ for at kvantificere fluorescens-intensiteten af S. aureus infektion med og uden PS10 over tid. Resultaterne fra begge metoder viste højere numre af S. aureus i smittede fostre med mikrokugler end i embryoner uden mikrokugler, som angiver en øget infektion modtagelighed i nærværelse af biomateriale. Således, den nuværende undersøgelse viser potentiale af zebrafisk embryo model til at studere BAI med de metoder, der er udviklet her.

Den nuværende undersøgelse vurderes anvendeligheden af zebrafisk embryoner som en roman hvirveldyr dyremodeller for at undersøge biomateriale-associerede infektion. Mikroinjektion teknik har været almindeligt brugt at tilføre zebrafisk embryoner til at forårsage infektion22,26,27,30,36forskellige bakteriearter. Ved hjælp...

Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Zebrafisk Embryo Model for In Vivo visualisering og Intravital analyse af biomateriale-associerede Staphylococcus aureus infektion

Den nuværende undersøgelse beskriver en zebrafisk embryo model for in vivo visualisering og intravital analyse af biomateriale-associerede infektion over tid baseret på Fluorescens mikroskopi. Denne model er en lovende system som supplement til pattedyr dyremodeller såsom musemodeller for at studere biomateriale-associerede infektioner in vivo.

Biomaterial-associated infection (BAI) is a major cause of the failure of biomaterials/medical devices. Staphylococcus aureus is one of the major ...

Denne metode kan hjælpe med at besvare centrale spørgsmål om, hvordan biomaterialer påvirker modtagelighed for infektion, hvordan de påvirker udviklingen af sådanne infektioner, og hvordan de påvirker immuncelleadfærd omkring sådanne biomaterialer in vivo. Den største fordel ved denne teknik er, at det giver en ny dyremodel, der giver in vivo visualisering og intravital analyse af biomateriale-associerede infektioner. Visuel demonstration af denne metode er afgørende, da injektion af biomateriale mikrosfærer er en meget delikat procedure.For at generere en bakterie-only suspension, første overførsel fire til fem kolonier af fluorescerende Staph aureus mCherry stamme, dyrket på tryptiske soy landbrug plader suppleret med 10 mikrogram per milliliter chloramphenicol i 10 milliliter tryptisk sod bouillon suppleret med chlorhenampicol, for vækst i midten af logaritmiske vækstfase ved 37 grader Celsius med rysten. Når kulturen når en optisk massetæthedsmåling ved 620 nanometer på 0,4 til 0,8, indsamles bakterierne ved centrifugering, og cellerne vaskes to gange med en milliliter steril PBS pr. vask. Efter den anden vask, resuspend pellet i 1,1 milliliter PVP, og vortex den bakterielle suspension, før måling af den optiske tæthed igen.Juster derefter koncentrationen af bakteriesuspensionen med PVP i henhold til de eksperimentelle krav for at generere den bakterieløse suspension. At generere en bakterier microsphere suspension, centrifuge kommercielle polystyren mikrosfærer, PS-10, og resuspendre microsphere pellet i bakterier-only suspension. Fortynd bakterierne microsphere suspension med en 1/ 2 volumen af PVP at nå en passende koncentration af bakterier i suspensionen, der er ca 2 / 3 af, at der i bakterier-only suspension.Bland suspensionen ved at hvirvle. For at kontrollere koncentrationen af bakterier-only og bakterier microsphere suspension, tilføje 100 mikroliter af hver suspension til individuelle brønde af en 96-brønd plade. Serielt fortyndet 10 mikroliter aliquots af suspensioner i 90 mikroliter af sterile PBS i efterfølgende brønde, ved hjælp af friske spidser for hver fortynding trin.Påfør duplikerede 10-mikroliter aliquots af ufortyndet og fortyndet bakterielle suspensioner på agar plader, og inkubere pladerne natten over ved 37 grader Celsius. Den næste morgen, tælle kolonierne til at beregne antallet af bakterier inden for de forberedte bakterier-only og bakterier microsphere suspensioner. Efter indsamling af zebrafiskembryoner kasseres alle uigennemsigtige ikke-levedygtige embryoner, og der inkuberes ca. 60 embryoner pr. 100 milliliter petriskål ved 28 grader Celsius i frisk E3-medium.Efter anæstesi, sequester GFP-positive embryoner for fluorescens mikroskopi. Overfør dem til en 100-milliliter Petri skål af E3 medium. For at skabe en sprøjtestøbe, fylde en 100-milliliter Petri skål med en til 1,5% flydende agarose.Brug en plast skimmel skabelon til at skabe riller i agarose. Når agarose har størknet, fjerne formen, og dække agar med E3 medium suppleret med 0,02% tricain. En dag tre post-befrugtning, bruge kraftang til at bryde spidsen af en trukket glas mikrokapøjen for at opnå tips med en ca 20 mikrometer ydre diameter under et lys mikroskop med en skala bar i okulær.Justering af åbningen af nålespidsen er praktisk til injektion af mikrosfærer. Åbningens diameter skal justeres for mikrosfærer i forskellige størrelser. Brug derefter en Microloader pipettespids til at indlæse nålen med ca. 20 mikroliter af bakterierne microsphere eller bakterier-only suspension, og montere nålen på en mikromanipulator forbundet til en mikroinjektor.Overfør nu de valgte embryoner til den rillede agaroseplade. Efter at have ventet fem minutter på, at embryonerne bedøves, justeres embryonerne i rillerne i en enkelt retning for injektionen. Indstil mikroinjektoren til de relevante injektionsindstillinger, og sæt nålen ind i muskelvævet i det første foster i en 45 til 60-graders vinkel under et stereomikroskop.Flyt forsigtigt nålen frem og tilbage for at justere positionen i vævet efter behov, og brug mikroinjektorfodalpedalen til at injicere den indlæste affjedring. Når du injicerer en bakterie microsphere suspension i vævet af zebrafisk embryoner, skal nålen indsættes forsigtigt, men med en rolig hånd. Efter en vellykket indsættelse, bør der skabes et mellemrum for materialerne før injektion.Når alle embryoner er blevet injiceret, score embryoner for en vellykket injektion under et stereo fluorescens mikroskop, og vedligeholde embryoner i E3 medium uden tricain i individuelle brønde af 48-brønd plader med daglige medium ændringer. For at overvåge infektionsprovantificeringen ved hjælp af blokdannende enheds kvantificering overføres fem til seks levedygtige inficerede embryoner til individuelle to millilitermikrorør kort efter injektionen, og embryonerne vaskes forsigtigt med sterile PBS. Efter udsmid af vaske, tilsættes 100 mikroliter af sterile PBS til hvert rør, efterfulgt af to til tre sterile to-millimeter diameter zirkonia perler.Derefter knuses embryonerne i en homogenisator ved 3,500 omdr./min. i 30 sekunder, og homogenatet som påvist. Placer en 100-millimeter petriskål, der indeholder E3 medium suppleret med 0,02% tricain på et stereo fluorescens mikroskop fase, og tilsæt 500 mikroliter af 2% methylcellulose i Petriskålen. For at overvåge infektionen fremskridt ved fluorescens mikroskopi, udstyre de relevante lyse felt og fluorescerende filtre, tilpasse bedøvet inficerede embryoner vandret i en plet af methylcellulose i en petriskål.Brug det lyse feltfilter til at bringe det beskadigede injicerede væv i fokus ved en 160x forstørrelse. Indstil Z-stack-dybden til 10 mikrometer og trinstørrelsen på fem mikrometer for at tillade optagelse af tre på hinanden følgende billeder. Derefter billede de enkelte embryoner under identiske optimerede indstillinger på en 160x forstørrelse.Brug ObjectJ-plugin'en i ImageJ til at analysere billederne. Intramuskulær injektion af Staph aureus initiere en dosisafhængig infektion i embryoner, med levedygtig infektion progression observeret i embryoner administreret høj udfordring doser på dag et og to efter injektion. Som påvist, er det muligt at injicere et tilsvarende antal bakterier i nærvær eller fravær af mikrosfærer.Typisk er alle embryoner med mere end 20 kolonidannende enheder af Staph aureus mCherry positive for fluorescens under mikroskopisk scoring, selv om tilstedeværelsen af mikrosfærer synes ikke at påvirke infektionen progression i lav-dosis udfordret embryoner. I høj-dosed udfordrede embryoner, mikroskopisk scoring viser ikke nogen forskelle i inficerede embryo frekvens med eller uden mikrosfærer, men kvantitative kultur afslører højere kolonidannende enhed numre hentet fra embryoner i Staph aureus plus microsphere gruppe sammenlignet med dem høstet fra Staph aureus-only gruppe på to dage efter injektion. Tilstedeværelsen af et biomateriale påvirker både immuncelleresponsen og den oprindelige modtagelighed for infektion.For eksempel, ved fem timer efter injektion, makrofag infiltration som reaktion på en Staph aureus-only injektion er betydeligt højere end som reaktion på en Staph aureus plus mikrosfærer injektion, mens der på en dag efter injektion, embryoner med mikrosfærer udviser betydeligt højere niveauer af Staph aureus infektion end embryoner uden mikrosfærer. Det er vigtigt at huske altid at justere åbningen af nålespidsen til størrelsen af biomaterialerne og justere forholdet mellem bakteriekoncentrationen i bakterieaffjedringen og bakterienes suspension. Denne zebrafisk embryo model tillader in vivo visualisering og intravital analyse af infektionen progression og provokerede immuncellereaktioner i nærvær og fravær af biomaterialer.Denne teknik giver en ny helt dyr model for udvikling af antimikrobielle biomaterialer og behandlingsstrategier for sikkert medicinsk udstyr.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

Cellular Lipid Extraction for Targeted Stable Isotope Dilution Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Analysis

Cellular Lipid Ekstraktion for målrettet stabile isotoper Fortynding Liquid Chromatography-massespektrometri Analyse

The metabolism of fatty acids, such as arachidonic acid (AA) and linoleic acid (LA), results in the formation of oxidized bioactive lipids, including ...

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Simple mikrofluidenheder for<em&gt; In vivo</em&gt; Scanning af<em&gt; C. elegans</em&gt;,<em&gt; Drosophila</em&gt; Og zebrafisk

Micro fabricated fluidic devices provide an accessible micro-environment for in vivo studies on small organisms. Simple fabrication processes are ...

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Virale Nanopartikler for<em&gt; In vivo</em&gt; Tumor Imaging

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being ...

Mass Cytometry: Protocol for Daily Tuning and Running Cell Samples on a CyTOF Mass Cytometer

Mass Cytometry: Protokol for Daily Tuning og Running celleprøver på en CyTOF Mass Cytometer

In recent years, the rapid analysis of single cells has commonly been performed using flow cytometry and fluorescently-labeled antibodies. However, the ...

Biosensor for Detection of Antibiotic Resistant Staphylococcus Bacteria

Biosensor til detektion af antibiotikaresistente Staphylococcus Bakterier

A structurally transformed lytic bacteriophage having a broad host range of Staphylococcus aureus strains and a penicillin-binding protein (PBP 2a) ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

En fuld huddefekten model til evaluering Vaskularisering biomaterialer<em&gt; In Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Tilpasning af Electrospinning proces med at give tre unikke miljøer for en Tri-lags<em&gt; In vitro</em&gt; Model af Airway Wall

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Rigid Embedding of Fixed and Stained, Whole, Millimeter-Scale Specimens for Section-free 3D Histology by Micro-Computed Tomography

Stive indlejring af faste og plettet, hele, Millimeter-skala prøver for sektion-gratis 3D histologi ved mikro-beregnet tomografi

For over a hundred years, the histological study of tissues has been the gold standard for medical diagnosis because histology allows all cell types in ...

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Kolorimetrisk analyse af basisk fosfataseaktivitet i S. aureus Biofilm

Alkaline phosphatase (ALP) is a common enzyme expressed in both prokaryotic and eukaryotic cells. It catalyzes the hydrolysis of phosphate monoesters from ...