Name: a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

이 연구 재정적으로 생물 소재 (BMM) 프로그램의이 비자 프로젝트에 의해 지원 되었고 네덜란드 경제부의 공동 자금. 저자 교수 박사 그레이엄 Lieschke 모나 쉬 대학, 호주에서 zebrafish 유전자 변형 라인을 제공 하는 것을 감사 하 고 싶습니다 (mpeg1:Gal4 / UAS:Kaede).

이 프로토콜에서 로컬 동물 복지 위원회에 의해 승인 된 성인 zebrafish의 유지 보수 로컬 동물 복지 규정입니다. 배아 실험 2010/63/EU 지침에 따라 수행 했다.
1. "박테리아 전용" 및 박테리아 스피어 정지의 준비
참고: MCherry 형광 성 단백질 (S. 구 균-mCherry)를 표현 하는 S. 구 균 RN4220 스트레인 사용 됩니다. S. 구 균 RN4220 긴장 독성...

소재 관련 감염 (바이) 심각한 임상 합병증 이다. Vivo에서 바이의 pathogenesis의 이해 바이의 치료와 예방을 개선 하기 위해 새로운 통찰력을 제공할 것 이다. 그러나, murine 모델 현재 바이 동물 모델 실험 비용, 노동 집약적인, 그리고 복잡 한 수술 기술 전문된 인력 훈련 필요. 따라서, 이러한 모델 높은 처리량 분석에 적합 하지 않습니다. 현재 연구 평가 여부 zebrafish 태아 바이 vivo에서, 보완 조사 소?...

다양 한 의료 기기 ("바이오" 라고도 함) 점점을 복원 하거나 인체 부품1현대 의학에서 사용 하 고 있습니다. 그러나, 생체 이식 감염, 불리는 소재 관련 감염 (바이), 임 플 란 트 수술에서의 주요 합병증에 환자를 걸리기. 포도 상 구 균 그리고 포도 상 구 균 epidermidis 두 개의 가장 널리 퍼진 세균 종 바이2,,34,,56에 대 한 책임입니다. 이식 생체 재료 형태 표면 세균의 biofilm 형성에 취약 합니다. 또한, 로컬 면역 반응은 일으키는 세균성 클리어런스의 감소 효과 이식된 생체 재료에 의해 미친 수 있습니다. 박테리아 감염의 초기 허가 강하게 존재는 삽입 된 살 균 용량 감소 또는 이식 소재7호 중구 침투에 의해 주로 수행 됩니다. 또한, 후에 호 중구의 초기 유입 나머지 박테리아 phagocytose 것 있지만 수 없습니다 효과적으로 조직에 침투 하는 세포 그들을 죽 일 침,의 결합 된 존재의 결과 이다 미친된 면역 신호 때문 소재 및 박테리아8. 따라서, 생체 재료의 존재는 박테리아9,10,11,12,13 , biofilm 형성에는 이식의 세포내 생존을 촉진할 수 있다 바이오4,14. 따라서, 바이 실패 이어질 수 있으며 추가 비용2,15증가 병 적 상태와 사망률과 장기 입원을 일으키는 이식된 생체 재료의 교체에 대 한 필요.
개발된2,,1617안티 바이 전략의 수가 증가 되. 이러한 전략 관련 동물 모델에서의 효능의 vivo에서 평가 필수적 이다. 그러나, 전통적인 실험적인 바이 동물 모델 (예:, 마우스 모델)은 일반적으로 비용이 많이 드는, 어렵고, 따라서 여러 전략18의 높은 처리량 테스트에 적합 하지 않은. 발광/형광 호스트 세포와 박테리아의 라벨에 따라 바이오 광 이미징 기술의 최근 발전 한 작은 동물에서 바이 진행 및 호스트 재료 호스트 병원 체 상호 작용의 지속적인 모니터링에 대 한 수 있습니다. 같은 쥐18,19,,2021. 그러나,이 기술은 상대적으로 복잡 하 고, 그것의 초기 단계에 아직도 이며 바이18의 정량 분석에 대 한 몇 가지 문제를 해결 해야 합니다. 예를 들어, 높은 도전 복용량은 세균성 식민지를 시각화 해야 합니다. 또한, 비 산 빛을 생물 발광/형광 신호 포유류 테스트 또한 있어야 동물의 조직에의 흡착 처리18,,1921. 따라서, 소설, 시간이 지남에 intravital 시각화 및 정량 분석에 허용 된 동물 모델에는 바이 vivo에서 공부에 대 한 귀중 한 보완 시스템입니다.
Zebrafish (배아) 호스트 병원 체 상호 작용 및 mycobacteria22, 녹 농 균23, 등 여러 가지 세균의 감염 병 인을 해 부에 대 한 다양 한 생체 조건 도구로 사용 되었습니다. 대장균24, Enterococcus faecalis25, 그리고 포도 상 구 균,2627. Zebrafish 태아 광학 투명도, 상대적으로 낮은 유지 보수 비용, 및 포유류28,29에 매우 비슷한 면역 시스템의 같은 많은 이점이 있다. 이로써 zebrafish 태아 intravital 시각화 및 감염 진행과 관련 된 호스트 응답28,29의 분석에 매우 경제, 생활 모형 유기 체. 셀 동작의 시각화 vivo에서, 유전자 변형 zebrafish 라인 (예:, 대 식 세포와 호 중구) 면역 세포의 종류와 고도 붙일 태그가 subcellular 구조 되었습니다28 개발 29. 또한, zebrafish의 높은 복제 율 높은 처리량 테스트 시스템 자동화 로봇 주입, 자동된 형광 정량화, 그리고 RNA 순서 분석27, 을 개발의 가능성을 제공 30.
현재 연구에 우리 형광 이미징 기술을 사용 하 여 소재 관련 감염을 위한 zebrafish 태아 모델 개발을 목적으로. 이 위해, 우리 zebrafish 태아의 근육 조직으로 소재 스피어의 박테리아 (S. 구 균)을 주입 하는 절차를 개발. S. 구 균 RN4220 표현 mCherry 형광 단백질 (균 S.-mCherry), 다른 미 균 스트레인10,31에 대 한 설명 되어 있는 대로 만들어진 사용 했습니다. 유전자 변형 zebrafish 라인 (mpeg1: UAS/단풍나무) 표현 하는 데 녹색 형광 단백질은 세포32 와 파란색 형광 폴리스 티 렌 스피어에 사용 되었다. 이전 연구에서 우리가 모방 소재 이식 zebrafish 태아에 스피어의 근육 주사 가능33는 것으로 나타났습니다. 바이의 진행과 시간이 지남에 단일 배아에 관련 된 세포 침투 양적 분석을 사용 하는 척도의 형광 강도를 "ObjectJ" (플러그인 ImageJ) 내에서 운영 되는 "제 브라-Immunotest" 프로젝트 파일 있는 박테리아 그리고 세포 침투 하는 스피어33의 사출 사이트 주변. 또한, 우리는 식민지 형성의 숫자를 결정 단위의 (CFU) 존재와 배아에 스피어의 부재에 박테리아 감염에 생체의 잠재적인 효과 공부 하. 우리의 현재 연구는 여기 개발 방법, zebrafish 태아는 소재 관련 감염 vivo에서 공부에 대 한 약속, 소설 척추 동물 모델을 보여 줍니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tryptic soya agar</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>236950</td>
			<td>Media preparation unit at AMC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic soya broth</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>211825</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinylpyrrolidone40</td>
			<td>Applichem</td>
			<td>A2259.0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;m diameter polystyrene microspheres (blue fluorescent)</td>
			<td>Life technology/ThemoFisher</td>
			<td>F8829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microcapilary (1 mm O.D. x 0.78 mm I.D.)</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>30-0038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller instrument</td>
			<td>Sutter Instrument Inc</td>
			<td>Flaming p-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope LM 20</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG33 10450123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-aminobenzoic acid (Tricaine)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E10521-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose MP</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11388991001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo fluorescent microscope LM80</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG3610450126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microloader pipette tips</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5242956.003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator M3301 with M10 stand</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>00-42-101-0000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FemtoJet express micro-injector</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5248ZO100329</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtrube 2ml pp</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>72.693.005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zirconia beads</td>
			<td>Bio-connect</td>
			<td>11079124ZX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MagNA lyser</td>
			<td>Roche</td>
			<td>41416401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MSA-2 plates (Mannitol Salt Agar-2)</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>43671</td>
			<td>Chapmon 2 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl cellulose 4000cp</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>MO512-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C0378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gyrotory shaker (for bacterial growth)</td>
			<td>New Brunswick Scientific</td>
			<td>G10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zebrafish incubator</td>
			<td>VWR</td>
			<td>Incu-line</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuvettes</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>759015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Hettich-Zentrifugen</td>
			<td>ROTANTA 460R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrometer</td>
			<td>Pharmacia biotech</td>
			<td>Ultrospec&#174;2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>677180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>655161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>NL-132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>link: https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad 7.0</td>
			<td>Prism</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection

소재 관련 감염 (바이) 바이오/의료 장치 실패의 주요 원인입니다. 황색 포도상구균 바이에 주요 병원 중 하나입니다. 현재 실험 바이 포유류 동물 모델 같은 마우스 모델은 비용이 많이 드는 고 어렵고, 따라서 높은 처리량 분석에 적합 하지 않은. 따라서, 바이 vivo에서 조사에 대 한 보완 시스템으로 새로운 동물 모델 원하는 됩니다. 현재의에서 연구, vivo에서 시각화 및 형광 현미경 검사 법에 따라 생체의 세균성 감염의 intravital 분석을 위한 zebrafish 태아 모델을 개발 하는 목적으로 우리. 또한, 만들었다 대 식 세포 반응 연구 했다. 이 위해, 우리는 형광 단백질을 표현 S. 구 균 및 그들의 세포에서 형광 단백질을 표현 하는 유전자 변형 zebrafish 태아를 사용 하 고 근육에 혼자 또는 스피어 함께 박테리아를 주입 하는 절차를 개발 태아 조직 시간이 지남에 라이브 배아에서 세균 감염 진행을 모니터링 하려면 우리는 형광 박테리아의 미세한 득점의 간단 하지만 신뢰할 수 있는 방법을 고안. 미세한 점수에서 결과 20 이상 식민지 형성 단위 (CFU) 박테리아의 모든 배아 박테리아의 긍정적인 형광 신호를 굴복 했다. 감염에 생체의 잠재적인 효과 연구, 우리는 결정 S. 구 균 의 CFU 숫자와 10 μ m의 폴리스 티 렌 스피어 (PS10) 없이 배아 생체 재료 모델. 또한, 우리 시간이 지남에 PS10 없이 S. 구 균 감염의 형광 강도 계량 ObjectJ 프로젝트 파일 "제 브라-Immunotest" ImageJ에서 사용. 두 방법의 결과 보다는 소재에 존재 증가 감염 민감성을 나타내는 스피어 없이 배아에 스피어와 감염 된 태아 S. 구 균 수가 보였다. 따라서, 현재 연구 여기 개발 방법으로 바이 공부 zebrafish 태아 모델의 잠재력을 보여줍니다.

현재 연구 소재 관련 감염 조사에 대 한 새로운 척추 동물 모델 zebrafish 태아의 적용 평가. Microinjection 기술은 zebrafish 태아 감염22,,2627,30,36원인 세균성 종 주입 하 일반적으로 사용 되었습니다. 그림 1에 표시 된 절차를 사용 하 ?...

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A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Zebrafish 태아 모델 Vivo 시각화 및 Intravital 소재 분석 관련 된 황색 포도상구균 에 감염

현재 학문 vivo에서 시각화 및 형광 현미경 검사 법에 따라 시간이 지나면 소재 관련 감염의 intravital 분석을 위한 zebrafish 태아 모델을 설명 합니다. 이 모델은 소재 관련 감염 vivo에서 공부에 대 한 마우스 모델 같은 포유류 동물 모델을 보완 하는 유망한 시스템.

Biomaterial-associated infection (BAI) is a major cause of the failure of biomaterials/medical devices. Staphylococcus aureus is one of the major ...

이 방법은 생체 재료가 감염에 대한 감수성에 미치는 영향, 그러한 감염의 진행에 미치는 영향 및 생체 내 생체 재료 주변의 면역 세포 행동에 미치는 영향에 대한 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 생체 재료 관련 감염의 생체 시각화 및 인트라테생 분석을 허용하는 새로운 동물 모델을 제공한다는 것입니다. 이 방법의 시각적 데모는 생물 물질 미세 구의 주입이 매우 섬세한 절차이기 때문에 중요합니다.박테리아 전용 현탁액을 생성하기 위해, 먼저 형광 Staph aureus mCherry 균주의 4 ~ 5 개의 식민지를 전송, 클로람페니콜의 밀리리터 당 10 마이크로 그램으로 보충 트립틱 콩 농업 플레이트에 배양 10 트립틱 콩 국물의 밀리리터, 클로람페니콜으로 보충, 중반 로그증 에서 성장을 위해 37. 배양시 0.4 내지 0.8의 620 나노미터에서 광학 밀도 측정에 도달하면 원심분리에 의해 박테리아를 수집하고 세척당 멸균 PBS 1밀리리터로 세포를 두 번 세척한다. 두 번째 세척 후, PVP의 1.1 밀리리터에서 펠릿을 다시 중단하고, 다시 광학 밀도를 측정하기 전에 세균 현탁액을 소용돌이.그런 다음 박테리아 전용 현탁액을 생성하는 실험 적 요구 사항에 따라 PVP로 세균 현탁액의 농도를 조정합니다. 박테리아 마이크로스피어 서스펜션을 생성하기 위해, 원심분리기 상용 폴리스티렌 마이크로스피어, PS-10, 세균 전용 현탁액에서 마이크로스피어 펠릿을 재일시 중단한다. 박테리아 마이크로스피어 현탁액을 1/2 부피의 PVP로 희석하여 박테리아 전용 현탁액에서 약 2/3인 현탁액내의 적절한 박테리아 농도에 도달한다.소용돌이에 의해 서스펜션을 혼합합니다. 박테리아 전용 및 박테리아 마이크로스피어 서스펜션의 농도를 확인하려면 각 현탁액의 100 마이크로리터를 96웰 플레이트의 개별 우물에 추가합니다. 각 희석 단계에 대한 신선한 팁을 사용하여 연속적으로 90 마이크로 리터의 멸균 PBS의 90 마이크로 리터에 서스펜션의 10 마이크로 리터 알리쿼트희석.희석되지 않은 희석된 세균 현탁액의 복제된 10 마이크로리터 알리쿼트를 한천 접시에 바르고 밤새 플레이트를 섭씨 37도에서 배양합니다. 다음 아침, 식민지를 계산하여 준비된 박테리아 전용 및 박테리아 마이크로스피어 현탁액 내에서 박테리아의 수를 계산합니다. 제브라피쉬 배아를 수집한 후, 투명하지 않은 태아를 버리고 신선한 E3 배지에서 섭씨 28도에서 100밀리리터 페트리 접시당 약 60개의 배아를 배양합니다.마취 후 형광 현미경 검사법을 위한 GFP 양성 배아를 격리합니다. E3 매체의 100밀리리터 페트리 디쉬로 옮기. 사출 금형을 만들려면 100 밀리리터 페트리 접시를 1~1.5%의 액체 아가로즈로 채웁니다.플라스틱 금형 템플릿을 사용하여 아가로즈에 홈을 만듭니다. 아가로즈가 고화되면 금형을 제거하고 0.02%의 트리카인으로 보충된 E3 배지로 한고를 덮습니다. 어느 날 3 후 수정, 안구에 스케일 바가있는 가벼운 현미경으로 약 20 마이크로 미터 외부 직경으로 팁을 달성하기 위해 당겨진 유리 미세 모세관 바늘의 끝을 깰 집게를 사용합니다.바늘 끝의 개구를 조정하는 것은 마이크로스피어의 주입에 용이합니다. 개구의 직경은 다른 크기의 미세 구체에 대해 조정되어야합니다. 그런 다음 마이크로로더 파이펫 팁을 사용하여 박테리아 마이크로스피어 또는 박테리아 전용 현탁액의 약 20 마이크로리터로 바늘을 적재하고 마이크로 인젝터에 연결된 미세 조작기에 바늘을 장착합니다.이제 선택한 배아를 홈아가로즈 플레이트로 옮겨놓습니다. 태아가 마취될 때까지 5분을 기다린 후, 주사를 위한 단일 방향으로 홈 내의 배아를 정렬합니다. 미세 인젝터를 적절한 주입 설정으로 설정하고 스테레오 현미경하에서 45 ~ 60도 각도로 첫 번째 배아의 근육 조직에 바늘을 삽입합니다.바늘을 앞뒤로 부드럽게 움직여 필요에 따라 조직 내의 위치를 조정하고 마이크로인젝터 풋 페달을 사용하여 로드된 서스펜션을 주입합니다. 제브라피시 배아 의 조직에 박테리아 마이크로 스피어 현탁액을 주입 할 때, 바늘은 부드럽게 삽입하지만 꾸준한 손으로 삽입해야합니다. 성공적인 삽입 후 주입 전에 재료에 대한 공간을 만들어야 합니다.모든 배아가 주입되었을 때, 스테레오 형광 현미경의 밑에 성공적인 주입을 위한 배아를 득점하고, 매일 매체 변경을 가진 48웰 플레이트의 개별 우물에서 트리카인 없이 E3 배지에 있는 배아를 유지합니다. 식민지 형성 단위 정량화에 의한 감염 진행을 감시하기 위하여는, 주사 직후 개별 2 밀리리터 마이크로튜브로 5-6개의 실행 가능한 감염된 태아를 무작위로 전송하고, 멸균 PBS로 태아를 부드럽게 세척합니다. 세차장을 폐기한 후 각 튜브에 멸균 PBS 100마이크로리터를 넣고 2~3개의 멸균 2mm 직경지르코니아 구슬을 넣습니다.그런 다음 30초 동안 3, 500 rpm에서 균질화로 배아를 분쇄하고, 입증된 바와 같이 균주를 배양한다. 스테레오 형광 현미경 단계에 0.02%트리카인으로 보충된 E3 배지를 함유한 100mm 페트리 접시를 넣고, 페트리 접시에 2%메틸셀룰로오스500마이크로리터를 넣습니다. 형광 현미경 검사법에 의한 감염 진행 상황을 모니터링하려면 적절한 밝은 필드 및 형광 필터를 장착하고, 페트리 접시에 메틸 셀룰로오스의 자리에 마취 감염 배아를 수평으로 정렬합니다.밝은 필드 필터를 사용하여 손상된 주입 된 조직을 160 배율로 초점으로 가져옵니다. Z 스택 깊이를 10 마이크로미터로 설정하고 단계 크기를 5 마이크로미터로 설정하여 3개의 연속 이미지를 기록할 수 있습니다. 그런 다음 160배율로 동일한 최적화된 설정으로 개별 배아를 이미지합니다.ImageJ에서 ObjectJ 플러그인을 사용하여 이미지를 분석합니다. Staph aureus의 근육 주사는 배아에 있는 복용량 의존적인 감염을 개시합니다, 태아에서 관찰된 실행 가능한 감염 진행과 일 1 및 2 후에 주사 후에 고도전 복용량을 관리합니다. 입증 된 바와 같이, 마이크로 스피어의 존재 또는 부재에서 박테리아의 유사한 수를 주입 할 수있다.전형적으로, Staph aureus mCherry의 20개 이상의 콜로니 형성 단위를 가진 모든 배아는 현미경 점수하에서 형광에 대해 양성이지만, 마이크로스피어의 존재는 저용량 도전 배아의 감염 진행에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 보인다. 고양 된 도전 배아에서, 현미경 점수는 마이크로 스피어의 유무에 관계없이 감염된 배아 주파수에 있는 어떤 다름도 보여주지 않습니다, 그러나 정량적인 배양은 Staph aureus 플러스 마이크로 스피어 단에 있는 배아에서 회수된 더 높은 식민지 형성 단위 수를 제시합니다 2 일 후에 Staph aureus 전용 단에서 수확한 것과 비교됩니다. 생체 물질의 존재는 면역 세포 반응과 감염에 대한 초기 감수성에 영향을 미칩니다.예를 들어, 주사 후 5시간 에서, 포도상 구레나기 전용 주사에 대한 반응에서 대식세포 침광은 Staph 아우레우스 플러스 마이크로스피어 주입에 대한 반응보다 현저히 높으며, 1일 후 주사시, 마이크로스피어를 가진 배아는 마이크로스피어가 없는 배아보다 훨씬 높은 수준의 Staph aureus 감염을 나타낸다. 항상 바늘 팁의 개구부를 생체 재료의 크기로 조정하고 박테리아 전용 현탁액 및 박테리아 미세구 현탁액에서 박테리아 농도의 비율을 조정하는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 이러한 제브라피쉬 배아 모델은 생체 재료의 존재 와 부재에서 감염 진행 및 유발 된 면역 세포 반응의 생체 내 시각화 및 인트라비티 분석을 허용합니다.이 기술은 안전한 의료 기기를 위한 항균 생체 재료 및 치료 전략개발을 위한 새로운 전체 동물 모델을 제공합니다.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

단백질과 세포 교도소에 대한 2 차원 문양의 기판 만들기

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

연구

생체공학

Cellular Lipid Extraction for Targeted Stable Isotope Dilution Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Analysis

타겟 안정 동위 원소 희석 액체 크로마 토그래피 - 질량 분광법 분석을위한 세포 지질 추출

The metabolism of fatty acids, such as arachidonic acid (AA) and linoleic acid (LA), results in the formation of oxidized bioactive lipids, including ...

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

에 대한 간단한 마이크로 유체 장치<em&gt; 생체 내</em의&gt; 이미징<em&gt; C. elegans</em&gt;<em&gt; Drosophila</em&gt;와 Zebrafish

Micro fabricated fluidic devices provide an accessible micro-environment for in vivo studies on small organisms. Simple fabrication processes are ...

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

에 대한 바이러스 나노 입자<em&gt; 생체에</em&gt; 종양 이미징

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being ...

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