Name: a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

Denne studien ble økonomisk støttet av IBIZA prosjektet av programmet biomedisinsk materiale (BMM) og delfinansiert av nederlandsk Ministry of Economic Affairs. Forfatterne gjerne takke Prof. Dr. Graham Lieschke fra Monash University, Australia for å gi sebrafisk transgene linjen (mpeg1:Gal4 / UAS:Kaede).

I denne protokollen er vedlikehold av voksen sebrafisk fastsatt av lokale dyrevelferd forskriftene som er godkjent av lokale dyrevelferd komiteen. Eksperimenter med embryo ble utført i henhold til 2010/63/EU-direktivet.
1. utarbeidelsen av "Bare bakterier" og bakterier-mikrosfærer suspensjon
Merk: S. aureus RN4220 belastningen uttrykke mCherry fluorescerende protein (S. aureus- mCherry) brukes. S. aureus RN4220 belastning ...

Biomateriale-assosiert infeksjoner (BAI) er en alvorlig klinisk komplikasjon. En bedre forståelse av patogenesen av BAI i vivo ville gi ny innsikt for å forbedre forebygging og behandling av BAI. Imidlertid gjeldende eksperimentelle BAI dyr modeller som murine modeller er kostbar, arbeidskrevende, og krever spesialisert personell opplært i komplekse kirurgiske teknikker. Derfor er disse modellene ikke egnet for høy gjennomstrømning analyse. Siden kravene for sebrafisk embryoet modeller er mindre komplekse og kostnad...

En rekke medisinske enheter (referert til som "biologisk materiale") brukes stadig mer i moderne medisin gjenopprette eller erstatte menneskekropp del1. Implantering av biologisk materiale predisponerer imidlertid en pasient til infeksjon, kalt en biomateriale-assosiert infeksjon (BAI), som er en stor komplikasjon av implantater i kirurgi. Gule stafylokokker og gule epidermidis er to vanligste bakterielle arter ansvarlig for BAI2,3,4,5,6. Implantert biologisk materiale form en overflate som er utsatt for bakteriell biofilm formasjon. Videre kan lokale immunrespons være sinnsforvirret av de implanterte biologisk materiale, forårsaker redusert effektivitet bakteriell klaring. Den første klarering av infisere bakterier utføres av infiltrere nøytrofile, som har sterkt redusert bakteriedrepende kapasitet i nærvær av et innsatt eller implantert biomateriale7. Videre drepe makrofager infiltrere vevet etter første tilstrømningen av nøytrofile vil phagocytose gjenværende bakterier, men ikke kan effektivt dem intracellulært, på grunn av vanvittig immun signalering som følge av kombinerte tilstedeværelsen av den biomateriale og bakterier8. Dermed, tilstedeværelse av biologisk materiale kan forenkle intracellulær overlevelse av bakterier9,10,11,12,13 og biofilm formasjon på den implanterte biologisk materiale4,14. BAI kan derfor føre til feil og behov for utskifting av implantert biologisk materiale, forårsaker økt sykelighet og dødelighet og langvarig sykehusinnleggelse med ekstra kostnader2,15.
Et økende antall anti-BAI strategier blir utviklet2,16,17. In vivo evaluering av effekten av disse strategiene i relevante dyremodeller er viktig. Men er tradisjonelle eksperimentelle BAI dyr modeller (f.eks, musen modeller) vanligvis dyrt, tidkrevende og derfor ikke egnet for høy gjennomstrømning testing av flere strategier18. Siste utviklingen av bio-optiske Bildeteknikker basert på bioluminescent/fluorescerende merking av vertsceller og bakterier kan for kontinuerlig overvåking av BAI progresjon og vert-patogen/host-materiale interaksjoner i én liten dyrene som mus18,19,20,21. Men denne teknikken er relativt komplisert og fortsatt i sin barndom, og flere problemer må løses for kvantitativ analyse BAI18. For eksempel kreves en høy utfordring dose å visualisere bakteriell kolonisering. I tillegg lys spredning og adsorpsjon bioluminescens/fluorescens signaler i vev av pattedyr test dyr må også være adressert18,19,21. Derfor er romanen, kostnadseffektiv dyremodeller muliggjør intravital visualisering og kvantitativ analyse over tid verdifull komplementære systemer for å studere BAI i vivo.
Sebrafisk (embryo) har blitt brukt som et allsidig i vivo verktøy for dissekere vert-patogen interaksjoner og infeksjon patogenesen ved flere bakteriell arter som mykobakterier22, Pseudomonas aeruginosa23, Escherichia coli24, Enterococcus faecalis25og stafylokokker26,27. Sebrafisk embryoer har mange fordeler som optisk åpenhet, relativt lave vedlikeholdskostnader og besittelse av et immunforsvar som er svært lik som i pattedyr28,29. Dette gjør sebrafisk embryo en svært økonomisk modell levende organisme for intravital visualisering og analyse av infeksjon progresjon og tilknyttede vert svar28,29. Å tillate visualisering av cellen atferd i vivo, transgene sebrafisk linjer med ulike immunceller (, makrofager og nøytrofile) og selv med fluorescently merket subcellular strukturer har vært utviklet28 ,29. I tillegg gir høy reproduksjon rate av sebrafisk mulighet til å utvikle høy gjennomstrømning testsystemer med automatisert robot injeksjon, automatisert fluorescens kvantifisering og RNA sekvens analyse27, 30.
Studien, har vi som mål å utvikle en sebrafisk embryoet modell for biomateriale-assosiert infeksjoner med fluorescens imaging teknikker. Dette utviklet vi en prosedyre for å injisere bakterier (S. aureus) i nærvær av biomateriale mikrosfærer inn i muskelvev av sebrafisk embryo. Vi brukte S. aureus RN4220 uttrykke mCherry fluorescerende protein (S. aureus- mCherry), som ble bygget som beskrevet andre steder for en annen S. aureus belastning10,31. Transgene sebrafisk linjen (mpeg1: UAS/Kaede) uttrykker Kaede grønne fluorescerende protein i de makrofager32 og blå fluorescerende polystyren mikrosfærer ble brukt. I en tidligere studie, har vi vist at intramuskulær injeksjon av mikrosfærer i sebrafisk embryo å etterligne biomateriale implantasjon er mulig33. Kvantitativt analysere utviklingen av BAI og tilknyttede cellen infiltrasjon i enkelt embryoer over tid, brukte vi "Sebrafisk-Immunotest" prosjektfilen som drives i "ObjectJ" (en plug-in for ImageJ) å kvantifisere fluorescens intensitet bakterier bosatt og makrofager infiltrert i injeksjonsstedet mikrosfærer33. I tillegg vi bestemt antall colony-forming enheter (CFU) av bakterier i tilstedeværelse og fravær av mikrosfærer i embryoene å studere mulige effekter av biologisk materiale på infeksjon. Vår nåværende studien viser at med metodene utviklet her, sebrafisk embryoet er en lovende, romanen vertebrate dyr modell for å studere biomateriale-assosiert infeksjoner i vivo.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tryptic soya agar</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>236950</td>
			<td>Media preparation unit at AMC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic soya broth</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>211825</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinylpyrrolidone40</td>
			<td>Applichem</td>
			<td>A2259.0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;m diameter polystyrene microspheres (blue fluorescent)</td>
			<td>Life technology/ThemoFisher</td>
			<td>F8829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microcapilary (1 mm O.D. x 0.78 mm I.D.)</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>30-0038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller instrument</td>
			<td>Sutter Instrument Inc</td>
			<td>Flaming p-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope LM 20</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG33 10450123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-aminobenzoic acid (Tricaine)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E10521-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose MP</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11388991001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo fluorescent microscope LM80</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG3610450126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microloader pipette tips</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5242956.003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator M3301 with M10 stand</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>00-42-101-0000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FemtoJet express micro-injector</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5248ZO100329</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtrube 2ml pp</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>72.693.005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zirconia beads</td>
			<td>Bio-connect</td>
			<td>11079124ZX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MagNA lyser</td>
			<td>Roche</td>
			<td>41416401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MSA-2 plates (Mannitol Salt Agar-2)</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>43671</td>
			<td>Chapmon 2 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl cellulose 4000cp</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>MO512-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C0378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gyrotory shaker (for bacterial growth)</td>
			<td>New Brunswick Scientific</td>
			<td>G10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zebrafish incubator</td>
			<td>VWR</td>
			<td>Incu-line</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuvettes</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>759015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Hettich-Zentrifugen</td>
			<td>ROTANTA 460R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrometer</td>
			<td>Pharmacia biotech</td>
			<td>Ultrospec&#174;2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>677180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>655161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>NL-132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>link: https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad 7.0</td>
			<td>Prism</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection

Biomateriale-assosiert infeksjoner (BAI) er en viktig årsak til svikt i biologisk materiale/medisinske enheter. Staphylococcus aureus er en av de store patogener i BAI. Aktuelle eksperimentelle BAI pattedyr dyr modeller som musen modeller er kostbare og tidkrevende, og derfor ikke egnet for høy gjennomstrømning analyse. Dermed er romanen dyremodeller som komplementære systemer for å undersøke BAI i vivo ønsket. I denne studien, vi som mål å utvikle en sebrafisk embryoet modell for i vivo visualisering og intravital analyse av bakteriell infeksjon i nærvær av biologisk materiale basert på fluorescens mikroskopi. I tillegg ble provosert macrophage svaret studert. Dette vi brukte lysstoffrør protein-uttrykke S. aureus og transgene sebrafisk embryo uttrykke fluorescerende proteiner i deres makrofager og utviklet en prosedyre for å injisere bakterier alene eller sammen med mikrosfærer i muskelen vev av embryo. For å overvåke bakteriell infeksjon progresjon i live embryoer over tid, utviklet vi en enkel men pålitelig metode for mikroskopiske scoring av fluorescerende bakterier. Resultatene fra mikroskopiske scoring viste at alle embryoer med mer enn 20 colony-forming enheter (CFU) av bakterier gitt et positivt fluorescerende signal av bakterier. For å studere mulige effekter av biologisk materiale på infeksjon, bestemt vi CFU tallene av S. aureus med og uten 10 µm mikrosfærer polystyren (PS10) som modell biologisk materiale i embryoene. Dessuten, vi brukte ObjectJ prosjektfilen "Sebrafisk-Immunotest" i ImageJ for å kvantifisere fluorescens intensiteten av S. aureus infeksjoner med og uten PS10 over tid. Resultatene fra begge metoder viste høyere antall S. aureus i infiserte embryoer med mikrosfærer enn i embryoer uten mikrosfærer, som indikerer en økt infeksjon mottakelighet i nærvær av biomateriale. Derfor viser studien potensialet i sebrafisk embryoet modellen å studere BAI metoder utviklet her.

Studien vurdert anvendelse av sebrafisk embryo som roman vertebrate dyr modell for å undersøke biomateriale-assosiert infeksjoner. Microinjection teknikken er vanligvis brukt til å injisere ulike bakterie-art i sebrafisk embryo å forårsake infeksjon,22,,26,,27,,30,,36. Bruke fremgangsmåten avbildet i ...

Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

En sebrafisk Embryo modell for In Vivo visualisering og Intravital analyse av biomateriale-assosiert Staphylococcus aureus infeksjoner

Studien beskriver en sebrafisk embryoet modell for i vivo visualisering og intravital analyse av biomateriale-assosiert infeksjoner over tid basert på fluorescens mikroskopi. Denne modellen er en lovende utfyller pattedyr dyr modeller som musen modeller for å studere biomateriale-assosiert infeksjoner i vivo.

Biomaterial-associated infection (BAI) is a major cause of the failure of biomaterials/medical devices. Staphylococcus aureus is one of the major ...

Denne metoden kan bidra til å svare på viktige spørsmål om hvordan biomaterialer påvirker mottakelighet for infeksjon, hvordan de påvirker utviklingen av slike infeksjoner, og hvordan de påvirker immuncelleatferd rundt slike biomaterialer in vivo. Den største fordelen med denne teknikken er at den gir en ny dyremodell som tillater in vivo visualisering og intravital analyse av biomateriale-assosierte infeksjoner. Visuell demonstrasjon av denne metoden er kritisk da injeksjon av biomateriale mikrosfærer er en svært delikat prosedyre.For å generere en suspensjon kun for bakterier, første overføring fire til fem kolonier av fluorescerende Staph aureus mCherry belastning, kultivert på tryptisk soy landbruk plater supplert med 10 mikrogram per milliliter kloramfenikol i 10 milliliter tryptisk soy kjøttkraft supplert med kloramfenikol, for vekst i midten logaritmisk vekstfase på 37 grader Celsius med risting. Når kulturen når en optisk tetthetsmåling på 620 nanometer på 0,4 til 0,8, samle bakteriene ved sentrifugering, og vask cellene to ganger med en milliliter steril PBS per vask. Etter den andre vasken, resuspend pellet i 1,1 milliliter PVP, og vortex bakteriell suspensjon før måling av optisk tetthet igjen.Juster deretter konsentrasjonen av bakteriell suspensjon med PVP i henhold til de eksperimentelle kravene for å generere bakterie-bare suspensjon. For å generere en bakteriemikrosfæresuspensjon, sentrifuge kommersielle polystyren mikrosfærer, PS-10, og resuspend mikrosfærepellet i bakterier-bare suspensjon. Fortynn bakteriemikrosfærens suspensjon med et 1/2-volum PVP for å oppnå en passende konsentrasjon av bakterier i suspensjonen som er omtrent 2/3 av det i suspensjonen kun for bakterier.Bland suspensjonen ved å virvle. For å kontrollere konsentrasjonen av bakterie-bare og bakterier mikrosfære suspensjon, tilsett 100 mikroliter av hver suspensjon til individuelle brønner av en 96-brønns plate. Serially fortynne 10 mikroliter aliquots av suspensjoner i 90 mikroliter sterile PBS i etterfølgende brønner, ved hjelp av friske tips for hvert fortynning trinn.Påfør dupliserte 10-mikroliter aliquots av de ufortynnede og fortynnede bakterielle suspensjoner på agarplater, og inkuber platene over natten ved 37 grader Celsius. Neste morgen teller koloniene for å beregne antall bakterier innenfor de tilberedte bakterie-bare og bakterier mikrosfære suspensjoner. Etter å ha samlet sebrafiskembryoene, kast eventuelle ikke-gjennomsiktige uvekelige embryoer og inkuber ca. 60 embryoer per 100 milliliter petriskål ved 28 grader Celsius i friskt E3-medium.Etter anestesi, sequester GFP-positive embryoer for fluorescens mikroskopi. Overfør dem til en 100-milliliter petriskål av E3 medium. For å lage en injeksjon mold, fyll en 100-milliliter Petri skål med en til 1,5% flytende agarose.Bruk en plastformmal til å lage spor i agarose. Når agarose har størknet, fjern formen, og dekk agaren med E3 medium supplert med 0,02% trikain. En dag tre etter befruktning, bruk tang for å bryte spissen av en trukket glass mikrokapillær nål for å oppnå tips med en ca 20 mikrometer ytre diameter under et lett mikroskop med en skala bar i okulær.Justeringen av åpningen av nålespissen er praktisk for injeksjon av mikrosfærer. Åpningens diameter må justeres for mikrosfærer av forskjellige størrelser. Bruk deretter en mikrolasterpipettespiss til å laste nålen med ca. 20 mikroliter av bakteriemikrosfæren eller suspensjonen kun for bakterier, og monter nålen på en mikromanipulator koblet til en mikroinjektor.Overfør nå de valgte embryoene til den riflede agaroseplaten. Etter å ha ventet fem minutter på at embryoene skal bedøves, justerer du embryoene i sporene i en enkelt orientering for injeksjonen. Sett mikroinjektoren til de riktige injeksjonsinnstillingene, og sett nålen inn i muskelvevet til det første embryoet i en 45 til 60-graders vinkel under et stereomikroskop.Beveg forsiktig kanylen frem og tilbake for å justere posisjonen i vevet etter behov, og bruk mikroinjektorfotpedalen til å injisere den lastede suspensjonen. Ved injeksjon av bakterier mikrosfære suspensjon i vevet av sebrafisk embryoer, nålen skal settes forsiktig, men med en stødig hånd. Etter en vellykket innsetting bør det opprettes et mellomrom for materialene før injeksjon.Når alle embryoene er injisert, score embryoene for en vellykket injeksjon under et stereofluorescensmikroskop, og opprettholde embryoene i E3 medium uten trikain i individuelle brønner av 48-brønnplater med daglige middels endringer. For å overvåke infeksjonsprogresjonen ved kvantifisering av kolonidannende enhet, overfør tilfeldig fem til seks levedyktige infiserte embryoer til individuelle to milliliter mikrorør kort tid etter injeksjon, og vask forsiktig embryoene med steril PBS. Etter å ha kastet vaskene, tilsett 100 mikroliter sterile PBS til hvert rør, etterfulgt av to til tre sterile to millimeter diameter zirkonia perler.Deretter knuse embryoene i en homogenisator ved 3, 500 rpm i 30 sekunder, og kultur homogenatet som demonstrert. Plasser en 100-millimeter petriskål som inneholder E3 medium supplert med 0,02% trikain på et stereofluorescensmikroskopstadium, og legg til 500 mikroliter på 2% metylcellulose i petriskålen. For å overvåke infeksjonsfremdriften ved fluorescensmikroskopi, utstyre de riktige lysfelt og fluorescerende filtre, justere bedøvet infiserte embryoer horisontalt på et sted av metylcellulose i en petriskål.Bruk det lyse feltfilteret til å sette det skadede injiserte vevet i fokus på en 160x forstørrelse. Sett Z-stack-dybden på 10 mikrometer og trinnstørrelsen på fem mikrometer for å tillate opptak av tre påfølgende bilder. Deretter bilde de enkelte embryoene under identiske optimaliserte innstillinger på en 160x forstørrelse.Bruk ObjectJ plugin i ImageJ for å analysere bildene. Intramuskulær injeksjon av Staph aureus initierer en doseavhengig infeksjon hos embryoer, med levedyktig infeksjonsprogresjon observert hos embryoer administrerte høyutfordringsdoser på dag én og to etter injeksjon. Som vist er det mulig å injisere lignende antall bakterier i nærvær eller fravær av mikrosfærer.Vanligvis er alle embryoer med mer enn 20 kolonidannende enheter av Staph aureus mCherry positive for fluorescens under mikroskopisk scoring, selv om tilstedeværelsen av mikrosfærer synes å ikke signifikant påvirke infeksjonsprogresjonen i lavdose utfordrede embryoer. I høy-dosed utfordrede embryoer viser mikroskopisk scoring ingen forskjeller i infisert embryofrekvens med eller uten mikrosfærer, men kvantitativ kultur avslører høyere kolonidannende enhetsnumre hentet fra embryoer i Staph aureus pluss mikrosfæregruppen sammenlignet med de som høstes fra Staph aureus-bare-gruppen ved to dager etter injeksjon. Tilstedeværelsen av et biomateriale påvirker både immuncelleresponsen og den første mottakeligheten for infeksjon.For eksempel, ved fem timer etter injeksjon, makrofag infiltrasjon som svar på en Staph aureus-bare injeksjon er betydelig høyere enn som svar på en Staph aureus pluss mikrosfærer injeksjon, mens på en dag etter injeksjon, embryoer med mikrosfærer viser betydelig høyere nivåer av Staph aureus infeksjon enn embryoer uten mikrosfærer. Det er viktig å huske å alltid justere åpningen av nålespissen til størrelsen på biomaterialene og justere forholdet mellom bakteriekonsentrasjonen i bakterie-bare suspensjon og bakteriene mikrosfære suspensjon. Denne sebrafisk embryomodellen tillater in vivo visualisering og intravital analyse av infeksjonsprogresjonen og de provoserte immuncelleresponsene i nærvær og fravær av biomaterialer.Denne teknikken gir en ny heldyrmodell for utvikling av antimikrobielle biomaterialer og behandlingsstrategier for trygt medisinsk utstyr.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

Cellular Lipid Extraction for Targeted Stable Isotope Dilution Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Analysis

Cellular Lipid Uttak for Målrettet Stabil isotopfortynning Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Analysis

The metabolism of fatty acids, such as arachidonic acid (AA) and linoleic acid (LA), results in the formation of oxidized bioactive lipids, including ...

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Enkle Microfluidic enheter for<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging av<em&gt; C. elegans</em&gt;,<em&gt; Drosophila</em&gt; Og Sebrafisk

Micro fabricated fluidic devices provide an accessible micro-environment for in vivo studies on small organisms. Simple fabrication processes are ...

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Viral Nanopartikler for<em&gt; In vivo</em&gt; Tumor Imaging

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being ...

Mass Cytometry: Protocol for Daily Tuning and Running Cell Samples on a CyTOF Mass Cytometer

Mass cytometri: Protokoll for Daily Tuning og kjører celleprøver på en CyTOF Mass cytometer

In recent years, the rapid analysis of single cells has commonly been performed using flow cytometry and fluorescently-labeled antibodies. However, the ...

Biosensor for Detection of Antibiotic Resistant Staphylococcus Bacteria

Biosensor for påvisning av antibiotikaresistens resistente Staphylococcus bakterier

A structurally transformed lytic bacteriophage having a broad host range of Staphylococcus aureus strains and a penicillin-binding protein (PBP 2a) ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

En Full huddefekt modell for å evaluere vaskularisering av biomaterialer<em&gt; In Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Tilpasning av electro prosess for å gi tre unike miljøer for en Tri-lag<em&gt; In Vitro</em&gt; Modell av Airway Wall

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Rigid Embedding of Fixed and Stained, Whole, Millimeter-Scale Specimens for Section-free 3D Histology by Micro-Computed Tomography

Stive innebygging av fast og farget, hele, Millimeter skala prøver for delen-gratis 3D Histology av mikro-beregnet tomografi

For over a hundred years, the histological study of tissues has been the gold standard for medical diagnosis because histology allows all cell types in ...

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Kolorimetrisk analyse av alkalisk fosfatase aktivitet i S. aureus Biofilm

Alkaline phosphatase (ALP) is a common enzyme expressed in both prokaryotic and eukaryotic cells. It catalyzes the hydrolysis of phosphate monoesters from ...