Name: a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

Это исследование было финансовой поддержке проекта Ибица биомедицинских материалов (BMM) программы и совместно финансируется министерства экономических дел Нидерландов. Авторы хотели бы поблагодарить Проф д-р Грэм Lieschke из университета Монаш, Австралия за предоставление трансгенные линии данио рерио (mpeg1:Gal4 / UAS:Kaede).

В этом протоколе взрослых рыбок данио является поддержание в соответствии с положениями местных животных, утвержденным Комитетом местных животных. Согласно директиве 2010/63/ЕС были проведены эксперименты с эмбрионами.
1. Подготовка «Только для бактерий» и бактерий микросф...

Биоматериал ассоциированной инфекции (бай) является серьезным осложнением клинических. Лучшего понимания патогенеза бай в естественных условиях обеспечит новые идеи для улучшения профилактики и лечения бай. Однако текущие экспериментальные бай Животные модели таких мышиных моделях...

Целый ряд медицинских приборов (упоминаемые как «биоматериалов») все чаще используются в современной медицине для восстановления или замены частей человеческого тела1. Однако имплантации биоматериалов предрасполагает пациента к инфекции, называется биоматериал ассоциированной инфекции (бай), которая является серьезным осложнением имплантатов в хирургии. Золотистый стафилококк и стафилококк являются два наиболее распространенных видов бактериальных ответственных за бай2,3,4,5,6. Имплантированные биоматериалов формы поверхности подвержены бактериальные биопленки. Кроме того местный иммунный ответ может быть нарушенный имплантированных биоматериалов, вызывая снижение эффективности бактериальных распродажа. Первоначальный Распродажа заражения бактериями осуществляется главным образом путем проникновения нейтрофилов, которые сильно сократили бактерицидной потенциала при наличии вставленных или имплантированные биоматериала7. Кроме того макрофаги, проникают в ткани после того, как первоначальный приток нейтрофилов будет фагоцитировать оставшиеся бактерии, но не может эффективно убить их внутриклеточно, из-за ненормальный иммунной сигнализации, что является следствием комбинированного присутствия биоматериала и бактерии8. Таким образом присутствие биоматериалов могут облегчить внутриклеточных выживания бактерий9,10,11,12,13 и биопленки формирования на имплантированный биоматериалов4,14. Следовательно бай может привести к провалу и необходимость замены биоматериалов имплантированных, вызывая увеличение заболеваемости и смертности и длительной госпитализации с2,дополнительные расходы15.
В настоящее время все большее количество анти бай стратегий развитых2,16,17. В естественных условиях оценки эффективности этих стратегий в соответствующих моделях животных имеет важное значение. Однако традиционные экспериментальных животных модели бай (например, модели мыши) обычно дорого, много времени и поэтому не подходят для высокой пропускной способности тестирования нескольких стратегий18. Последние разработки био оптических изображений методы, основанные на биолюминесцентных/люминесцентные маркировки клеток хозяина и бактерий может позволить для непрерывного мониторинга бай прогрессии и хост возбудитель/хост материал взаимодействия в единый зверюшек Например, мышей18,19,,2021. Однако этот метод является довольно сложной и все еще в зачаточном состоянии, и некоторые вопросы должны быть решены для количественного анализа бай18. Например высокая задача дозы требуется визуализировать бактериальной колонизации. Кроме того, свет рассеяния и адсорбции биолюминесценции/флюоресценцию сигналов в тканях млекопитающих теста, который животные также должны быть рассмотрены18,19,21. Таким образом роман, экономически Животные модели, позволяя для прижизненной визуализации и количественного анализа с течением времени являются ценные дополнительные системы для изучения бай в естественных условиях.
Данио рерио (зародышей) были использованы как универсальный инструмент в естественных условиях для рассечения хост возбудитель взаимодействий и инфекции патогенез ряда бактериальных видов, таких как микобактерий22, Pseudomonas aeruginosa23, Кишечная палочка24, Enterococcus faecalis25и стафилококки26,27. Данио рерио эмбрионы имеют много преимуществ, таких как Оптическая прозрачность, относительно низкая стоимость обслуживания и владение иммунной системы, весьма аналогичны в млекопитающих28,29. Это делает zebrafish эмбриона высоко экономических, Жилая модельный организм для прижизненной визуализации и анализа прогрессирования инфекции и связанный с ним ведущий ответы28,29. Чтобы разрешить визуализации ячейки поведения в естественных условиях, трансгенных данио рерио линий с различными типами иммунных клеток (например,, макрофагов и нейтрофилов) и даже с тегами, дневно внутриклеточных структур были разработаны28 ,29. Кроме того уровень высоких репродукций данио рерио обеспечивает возможность разработки тестовых систем высокой пропускной способности показывая автоматизированный робот инъекции, автоматизированных флуоресценции количественной оценки и РНК последовательности анализа27, 30.
В настоящем исследовании мы стремились разработать модель zebrafish эмбриона биоматериал ассоциированной инфекции, используя методы визуализации флуоресценции. С этой целью мы разработали процедуру придать бактерий (S. aureus) в присутствии биоматериала микросферы в мышечную ткань zebrafish эмбриона. Мы использовали S. aureus RN4220 выражая mCherry флуоресцентный белок (S. aureus- mCherry), который был построен как описано для другой S. aureus штамм10,-31. Данио рерио трансгенные линии (mpeg1: бас/Каэдэ) выражая Каэдэ Зеленый флуоресцирующий белок в макрофаги32 и синий флуоресцентный Полистирольные микросферы были использованы. В предыдущем исследовании мы показали, что внутримышечной инъекции в zebrafish эмбриона имитировать имплантация биоматериала микросфер является осуществимым33. Чтобы количественно анализировать прогрессирование бай и связанные ячейки проникновение в одном эмбрионов с течением времени, мы использовали файл проекта «Данио рерио-Immunotest», который функционирует в рамках «ObjectJ» (плагин для ImageJ) для количественного определения интенсивности флуоресценции бактерии проживающих и макрофагов, внедряясь в непосредственной близости от укола микросферы33. Кроме того, мы определили число колонии формирование единиц (CFU) бактерий в присутствии и отсутствии микросфер в эмбрионы для изучения потенциальных последствий биоматериалов на инфекции. Наше настоящее исследование демонстрирует, что с помощью методов, разработанных здесь, zebrafish эмбриона является многообещающим, Роман позвоночных животных модель для изучения биоматериал ассоциированных инфекций в естественных условиях.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tryptic soya agar</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>236950</td>
			<td>Media preparation unit at AMC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic soya broth</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>211825</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinylpyrrolidone40</td>
			<td>Applichem</td>
			<td>A2259.0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;m diameter polystyrene microspheres (blue fluorescent)</td>
			<td>Life technology/ThemoFisher</td>
			<td>F8829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microcapilary (1 mm O.D. x 0.78 mm I.D.)</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>30-0038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller instrument</td>
			<td>Sutter Instrument Inc</td>
			<td>Flaming p-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope LM 20</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG33 10450123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-aminobenzoic acid (Tricaine)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E10521-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose MP</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11388991001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo fluorescent microscope LM80</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG3610450126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microloader pipette tips</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5242956.003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator M3301 with M10 stand</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>00-42-101-0000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FemtoJet express micro-injector</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5248ZO100329</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtrube 2ml pp</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>72.693.005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zirconia beads</td>
			<td>Bio-connect</td>
			<td>11079124ZX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MagNA lyser</td>
			<td>Roche</td>
			<td>41416401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MSA-2 plates (Mannitol Salt Agar-2)</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>43671</td>
			<td>Chapmon 2 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl cellulose 4000cp</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>MO512-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C0378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gyrotory shaker (for bacterial growth)</td>
			<td>New Brunswick Scientific</td>
			<td>G10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zebrafish incubator</td>
			<td>VWR</td>
			<td>Incu-line</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuvettes</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>759015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Hettich-Zentrifugen</td>
			<td>ROTANTA 460R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrometer</td>
			<td>Pharmacia biotech</td>
			<td>Ultrospec&#174;2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>677180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>655161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>NL-132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>link: https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad 7.0</td>
			<td>Prism</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection

Биоматериал ассоциированной инфекции (бай) является одной из основных причин отказа биоматериалов/медицинских устройств. Золотистого стафилококка является одним из основных возбудителей в бай. Текущие экспериментальные бай млекопитающих животных моделей, такие, как мыши модели являются дорогостоящим и трудоемким и поэтому не подходят для высокой пропускной способности анализа. Таким образом желательны Роман животных моделей как дополнительных систем для расследования бай в естественных условиях. В настоящем исследовании, мы стремились разработать модель zebrafish эмбриона в естественных условиях визуализации и прижизненной анализа бактериальной инфекции при наличии биоматериалов, основанный на микроскопии флуоресцирования. Кроме того был изучен ответ спровоцировали макрофагов. С этой целью мы использовали флуоресцентный белок выражая S. aureus и трансгенных данио рерио эмбрионов, выражая флуоресцентных белков в их макрофагов и разработала процедуру впрыснуть бактерий в одиночку или вместе с микросфер в мышцы ткани эмбрионов. Чтобы контролировать прогрессирование бактериальной инфекции в прямом эмбрионов с течением времени, мы разработали простой, но надежный метод микроскопических скоринга флуоресцентные бактерий. Результаты от микроскопических скоринга показали, что все эмбрионы с более чем 20 образуя колонии единиц (CFU) бактерий принесло положительный сигнал флуоресцентные бактерий. Для изучения потенциального воздействия биоматериалов на инфекции, мы определили CFU количество S. aureus с и без 10 мкм Полистирольные микросферы (10Л.С.) как модель биоматериалов в эмбрионы. Кроме того мы использовали файл проекта ObjectJ «У рыбок данио-Immunotest» работает в ImageJ для количественного определения интенсивности флуоресценции S. aureus инфекции с и без PS10 с течением времени. Результаты обоих методов показали выше числа S. aureus в зараженных эмбрионов с микросферы чем эмбрионов без микросферы, показывающее увеличение инфекции, чувствительности возбудителя в присутствии биоматериала. Таким образом настоящее исследование показывает потенциал в zebrafish эмбриона модели для изучения бай с методов, разработанных здесь.

Настоящее исследование оценку применимости zebrafish эмбриона как модель Роман позвоночных животных для расследования биоматериал ассоциированной инфекции. Микроинъекции техника широко используется для вставки различных видов бактерий в данио рерио эмбрионов вызываю...

Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Данио рерио эмбриона модель визуализации Vivo и связанные прижизненной анализ биоматериала стафилококк инфекций

Настоящее исследование описывает модель zebrafish эмбриона для визуализации в естественных условиях и прижизненной анализа биоматериал ассоциированной инфекции с течением времени на основе микроскопии флуоресцирования. Эта модель является многообещающей системой, дополняя млекопитающих животных моделей, таких как мыши модели для изучения биоматериал ассоциированных инфекций в естественных условиях.

Biomaterial-associated infection (BAI) is a major cause of the failure of biomaterials/medical devices. Staphylococcus aureus is one of the major ...

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы о том, как биоматериалы влияют на восприимчивость к инфекции, как они влияют на прогрессирование таких инфекций, и как они влияют на поведение иммунных клеток вокруг таких биоматериалов in vivo. Основным преимуществом этого метода является то, что он обеспечивает новую модель животных, которая позволяет визуализации in vivo и интравитального анализа биоматериала связанных инфекций. Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение, поскольку инъекция биоматериальных микросфер является очень деликатной процедурой.Для генерации бактерий только подвеска, сначала передать четыре-пять колоний флуоресцентного золотистого стафилококка mCherry штамма, культурный на триптических сое сельскохозяйственных пластин, дополненных 10 микрограммов на миллилитр хлорамфеникол в 10 миллилитров триптического соевого бульона, дополненного хлорамфеникол, для роста в середине фазы роста в 37 градусов по Цельсию. Когда культура достигает оптического измерения плотности на 620 нанометров от 0,4 до 0,8, собирать бактерии центрифугации, и мыть клетки в два раза с одним миллилитр стерильных PBS за стирку. После второй стирки, повторно гранулы в 1,1 миллилитров PVP, и вихрь бактериальной суспензии перед измерением оптической плотности снова.Затем отрегулируйте концентрацию бактериальной суспензии с PVP в соответствии с экспериментальными требованиями для генерации бактерий только подвески. Для генерации бактерий микросферы подвески, центрифуга коммерческих микросфер полистирола, PS-10, и повторно микросферы гранулы в бактериях только подвески. Разбавить бактерии микросферы подвески с 1 / 2 объема PVP для достижения соответствующей концентрации бактерий в подвеске, что составляет примерно 2/3, что в бактериях только подвески.Смешайте подвеску вихрем. Чтобы проверить концентрацию бактерий только и бактерий микросферы подвески, добавить 100 микролитров каждой подвески в отдельных скважин 96-хорошо пластины. Серийно разбавляют 10 микролитровых алицитов суспензий в 90 микролитров стерильных PBS в последующих скважинах, используя свежие наконечники для каждого шага разбавления.Нанесите дубликаты 10-микролитровых алицитов неразбавленных и разбавленных бактериальных суспензий на агаровые пластины и инкубируйте пластины на ночь при 37 градусах Цельсия. На следующее утро подсчитайте колонии, чтобы вычислить количество бактерий в подготовленных бактерий только и бактерий микросферы суспензий. После сбора эмбрионов зебры, отбросить любые непрозрачные неприкосновенные эмбрионы, и инкубировать около 60 эмбрионов на 100-миллилитровую чашку Петри при 28 градусах по Цельсию в свежем E3 среде.После анестезии, секвестр GFP-положительных эмбрионов для флуоресценции микроскопии. Перенесите их в 100-миллилитровую чашку Петри E3 среды. Чтобы создать форму для инъекций, заполните 100-миллилитровую чашку Петри с 1 до 1,5% жидкой агарозы.Используйте пластиковый шаблон формы для создания канавки в агарозе. Когда агароза затвердеет, удалить плесень, и покрыть агар с E3 среды дополняется 0,02% tricaine. Один день три после оплодотворения, использовать типсы, чтобы сломать кончик вытащил стекла микрокапильярии иглы для достижения советы с примерно 20 микрометров внешнего диаметра под световым микроскопом с шкалой бар в глазу.Корректировка отверстия кончика иглы практична для инъекций микросфер. Диаметр отверстия необходимо регулировать для микросфер разного размера. Затем используйте наконечник пипетки Microloader для загрузки иглы с приблизительно 20 микролитров бактерий микросферы или бактерий только подвески, и смонтировать иглу на микроманипулятор подключен к микроинжектору.Теперь перенесите отобранные эмбрионы на рифленую агарозную пластину. После ожидания пять минут для эмбрионов, чтобы быть анестезированной, выровнять эмбрионы в канавки в одной ориентации для их инъекции. Установите микроинъектор в соответствующие настройки инъекции, и вставьте иглу в мышечную ткань первого эмбриона под углом от 45 до 60 градусов под стерео микроскопом.Аккуратно переместите иглу вперед и назад, чтобы регулировать положение в ткани по мере необходимости, и используйте педаль ноги микроинжектора для введения загруженной подвески. При введении бактерии микросферы подвески в ткани эмбрионов зебры, игла должна быть вставлена мягко, но с устойчивой рукой. После успешной вставки, пространство должно быть создано для материалов перед инъекцией.Когда все эмбрионы были введены, оценка эмбрионов для успешной инъекции под стерео флуоресценции микроскопа, и поддерживать эмбрионы в E3 среды без трикаина в отдельных скважин 48-хорошо пластин с ежедневными средними изменениями. Чтобы контролировать прогрессирование инфекции путем количественной оценки единицы колонии, случайным образом переносите пять-шесть жизнеспособных инфицированных эмбрионов в отдельные двухми миллилитровые микротрубки вскоре после инъекции и аккуратно моете эмбрионы стерильным PBS. После отбрасывания моет, добавить 100 микролитров стерильных PBS к каждой трубке, а затем два-три стерильных двухмиллиметрового диаметра zirconia бисером.Затем раздавить эмбрионы в гомогенизатор на 3500 об / мин в течение 30 секунд, и культуры гомогената, как попродемонстрировано. Поместите 100-миллиметровую чашку Петри, содержащую E3 medium, дополненную 0,02%tricaine на стадии стерео флуоресценции микроскопа, и добавьте 500 микролитров 2%метилцеллюлозы в чашку Петри. Для мониторинга прогресса инфекции с помощью микроскопии флуоресценции, оборудовать соответствующие ярко-полевые и флуоресцентные фильтры, выровнять анестезированы инфицированных эмбрионов горизонтально в месте метилцеллюлозы в чашке Петри.Используйте фильтр яркого поля, чтобы привести поврежденные инъекционные ткани в фокусе при 160-х увеличении. Установите глубину стека в 10 микрометров и размер шага на пять микрометров, чтобы обеспечить запись трех последовательных изображений. Затем изображение отдельных эмбрионов при идентичных оптимизированных настройках при увеличении в 160 раз.Для анализа изображений используйте плагин ObjectJ в ImageJ. Внутримышечная инъекция золотистого стафилококка инициирует дозозависимых инфекций в эмбрионах, с жизнеспособной прогрессирование инфекции наблюдается в эмбрионах вводят высокие дозы вызов в дни один и два после инъекции. Как было продемонстрировано, можно вводить такое же количество бактерий в присутствии или отсутствии микросфер.Как правило, все эмбрионы с более чем 20 колоний формирования единиц стафилококка золотистого мчерри являются положительными для флуоресценции под микроскопическим скоринга, хотя наличие микросфер, кажется, не существенно влияет на прогрессирование инфекции в низкой дозе оспаривается эмбрионов. В высокодоусенные оспаривается эмбрионов, микроскопические скоринга не демонстрирует каких-либо различий в частоте инфицированных эмбрионов с или без микросфер, но количественная культура показывает более высокие колонии формирования единицы номера, извлеченные из эмбрионов в золотистый стафилококк плюс микросферы группы по сравнению с теми, собранные из стафилококка аурея только группы в два дня после инъекции. Наличие биоматериала влияет как на иммунный клеточный ответ, так и на первоначальную восприимчивость к инфекции.Например, в течение пяти часов после инъекций инфильтрация макрофагов в ответ на инъекцию только золотистого стафилококка значительно выше, чем в ответ на инъекцию золотистого стафилококка плюс микросферы, в то время как в один прекрасный день после инъекции эмбрионы с микросферами демонстрируют значительно более высокий уровень стафилококковой инфекции, чем эмбрионы без микросфер. Важно помнить, чтобы всегда корректировать открытие кончика иглы до размера биоматериалов и корректировать соотношение концентрации бактерий в бактериях только подвески и бактерий микросферы подвески. Эта модель эмбриона зебры позволяет визуализации in vivo и интравитального анализа прогрессирования инфекции и спровоцированных иммунных клеточных реакций в присутствии и отсутствии биоматериалов.Этот метод предоставляет новую модель всего животного для разработки противомикробных биоматериалов и стратегий лечения безопасных медицинских устройств.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Создание двумерных рисунком Подложки для конфайнмента белков и клеточных

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

Cellular Lipid Extraction for Targeted Stable Isotope Dilution Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Analysis

Сотовая Добыча липидов для целевой Стабильный изотопного разбавления жидкостной хроматографии-масс-спектрометрического анализа

The metabolism of fatty acids, such as arachidonic acid (AA) and linoleic acid (LA), results in the formation of oxidized bioactive lipids, including ...

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Простой микрофлюидных устройства для<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Визуализация<em&gt; C. Элеганс</em&gt;<em&gt; Drosophila</em&gt; И данио рерио

Micro fabricated fluidic devices provide an accessible micro-environment for in vivo studies on small organisms. Simple fabrication processes are ...

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Вирусный наночастиц для<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Изображения опухоли

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being ...

Mass Cytometry: Protocol for Daily Tuning and Running Cell Samples on a CyTOF Mass Cytometer

Массовые цитометрии: Протокол для ежедневного настройка и запуск образцы клеток на Цитометр массовой CyTOF

In recent years, the rapid analysis of single cells has commonly been performed using flow cytometry and fluorescently-labeled antibodies. However, the ...

Biosensor for Detection of Antibiotic Resistant Staphylococcus Bacteria

Биосенсоров для обнаружения устойчивых к антибиотикам бактерий Staphylococcus

A structurally transformed lytic bacteriophage having a broad host range of Staphylococcus aureus strains and a penicillin-binding protein (PBP 2a) ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

Полный кожи Дефект Модель для оценки васкуляризации биоматериалов<em&gt; В Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Адаптация процесса электропрядения чтобы обеспечить три уникальных условиях для Tri-слоистые<em&gt; In Vitro</em&gt; Модель дыхательных путях стены

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Rigid Embedding of Fixed and Stained, Whole, Millimeter-Scale Specimens for Section-free 3D Histology by Micro-Computed Tomography

Жесткая встраивание фиксированной и витражи, в целом, миллиметр масштаб образцов для секции Бесплатные 3D гистологии, Микро Компьютерная томография

For over a hundred years, the histological study of tissues has been the gold standard for medical diagnosis because histology allows all cell types in ...

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Колориметрического анализа щелочной фосфатазы деятельность S. aureus биопленки

Alkaline phosphatase (ALP) is a common enzyme expressed in both prokaryotic and eukaryotic cells. It catalyzes the hydrolysis of phosphate monoesters from ...