Name: a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

Denna studie var ekonomiskt stöd av IBIZA projektet av biomedicinska Material (BMM) programmet och medfinansieras av det nederländska ekonomiministeriet. Författarna vill tacka Prof. Dr. Graham Lieschke från Monash University, Australien för att tillhandahålla zebrafiskar transgena linjen (mpeg1:Gal4 / UAS:Kaede).

I detta protokoll är underhåll av vuxen zebrafiskar i överensstämmelse med de lokala djurskyddsbestämmelserna som godkänts av utskottet för lokala djurens välbefinnande. Experiment med embryon utfördes enligt direktiv 2010/63/EU.
1. beredning ”endast bakterier” och bakterier-mikrosfärer suspensioner
Obs: S. aureus RN4220 stammen uttrycker mCherry fluorescerande protein (S. aureus- mCherry) används. S. aureus R...

Biomaterial-associerad infektion (BAI) är en allvarlig klinisk komplikation. En bättre förståelse för patogenesen av BAI invivo skulle ge nya insikter för att förbättra förebyggande och behandling av BAI. Men nuvarande experimentella djurmodeller BAI såsom murina modeller är kostsamma, arbetsintensiva och kräver specialiserad personal utbildad i komplexa kirurgiska tekniker. Dessa modeller är därför inte lämpliga för hög genomströmning analys. Eftersom kraven för zebrafiskar embryo modeller är mindre...

En mängd medicinska enheter (kallad ”biomaterial”) används alltmer inom den moderna medicinen att återställa eller ersätta mänskliga kroppen delar1. Dock predisposes implantation av biomaterial en patient infektion, kallas en biomaterial-associerad infektion (BAI), vilket är en betydande komplikation av implantat i kirurgi. Staphylococcus aureus och Staphylococcus epidermidis är två vanligaste bakteriearter som ansvarig för BAI2,3,4,5,6. Implanteras biomaterial bildar en yta som är mottagliga för bakteriell biofilm bildning. Dessutom kan lokala immunsvaret vara rubbad av de implanterade biomaterial, orsakar minskad effektivitet av bakteriell clearance. Initial clearance av infekterar bakterier utförs främst genom att infiltrera neutrofiler, som har starkt minskad bakteriedödande kapacitet i närvaro av en insatt eller implanteras biomaterial7. Dessutom döda makrofager infiltrerar vävnaden efter den inledande tillströmningen av neutrofiler kommer phagocytose de kvarvarande bakterierna men inte effektivt dem intracellulärt, på grund av rubbad immun signalering som är en följd av den kombinerade förekomsten av biomaterial och bakterier8. Således, förekomsten av biomaterial kan underlätta intracellulär överlevnad av bakterier9,10,11,12,13 och biofilm bildas på den implanterade biomaterial4,14. Följaktligen, BAI kan leda till fel och behöva för byte av implanterade biomaterial, orsakar ökad sjuklighet och dödlighet och förlängd sjukhusvistelse med ytterligare kostnader2,15.
Ett ökande antal anti-BAI strategier håller utvecklade2,16,17. In vivo utvärdering av effekten av dessa strategier i relevanta djurmodeller är nödvändig. Traditionella experimentella BAI djurmodeller (t.ex., musmodeller) är dock oftast dyrt, tidskrävande och därför inte lämplig för hög genomströmning tester av flera strategier18. Senaste utvecklingen av bio-optiska bildteknik baserat på självlysande/fluorescerande märkning av värdceller och bakterier kan möjliggöra kontinuerlig övervakning av BAI progression och värd-patogen/värd-material interaktioner i enstaka små djur såsom möss18,19,20,21. Men denna teknik är relativt komplexa och fortfarande i sin linda och flera problem måste åtgärdas för kvantitativ analys av BAI18. Exempelvis krävs en hög utmaning dos att visualisera bakteriell kolonisation. Dessutom ljus spridning och adsorption av Mareld/fluorescens signaler i vävnader hos däggdjur test djur måste också åtgärdas18,19,21. Roman, kostnadseffektiv djurmodeller som möjliggör intravital visualisering och kvantitativ analys över tid är därför värdefull kompletterande system för att studera BAI invivo.
Sebrafisken (embryon) har använts som ett mångsidigt invivo verktyg för dissekera värd-patogen interaktioner och infektion patogenesen av flera bakteriearter som mykobakterier22, Pseudomonas aeruginosa23, Escherichia coli24, Enterococcus faecalis25och stafylokocker26,27. Zebrafiskar embryon har många fördelar såsom optisk transparens, relativt låga underhållskostnader och innehav av ett immunsystem som är mycket lik den i däggdjur28,29. Detta gör zebrafiskar embryon mycket ekonomiska, levande modellorganism för intravital visualisering och analys av infektion progression och associerade värd Svaren28,29. Att tillåta visualisering av cell beteende i vivo, transgena zebrafiskar linjer med olika typer av immunceller (t.ex., makrofager och neutrofiler) och även med fluorescently märkta subcellulära strukturer har utvecklat28 ,29. Dessutom, ger hög reproduktion andelen zebrafiskar möjligheten att utveckla hög genomströmning testsystem med automatisk robotic injektion, automatiserade fluorescens kvantifiering och RNA-sekvens analys27, 30.
I den aktuella studien, syftar vi till att utveckla en zebrafiskar embryo modell för biomaterial-associerad infektion med hjälp av fluorescens avbildningstekniker. För detta ändamål har vi utvecklat ett förfarande för att injicera bakterier (S. aureus) i närvaro av biomaterial mikrosfärer in i muskelvävnaden zebrafiskar embryon. Vi använde S. aureus RN4220 uttrycker mCherry fluorescerande protein (S. aureus- mCherry), som konstruerades enligt någon annanstans för en annan S. aureus -stam10,31. Transgena zebrafiskar linjen (mpeg1: UAS/Kaede) uttrycker Kaede grönt fluorescerande protein i makrofager32 och blå fluorescerande polystyren mikrosfärerna användes. I en tidigare studie har vi visat att intramuskulär injektion av mikrosfärer i zebrafiskar embryon att efterlikna biomaterial implantation är genomförbart33. För att kvantitativt analysera utvecklingen av BAI och associerade cell infiltration i enda embryon över tiden, använde vi filen ”zebrafisk-Immunotest”-projekt som drivs inom ”ObjectJ” (en plug-in för ImageJ) att kvantifiera fluorescensintensiteten hos bakterier som är bosatta och makrofager infiltrerar i närheten av injektionsstället mikrosfärer33. Dessutom vi bestäms antalet kolonibildande enheter (CFU) av bakterier i närvaro och frånvaro av mikrosfärer i embryon att studera potentiella effekter av biomaterial på infektion. Våra aktuella studien visar att zebrafiskar embryot med de metoder som utvecklats här, är en lovande, roman ryggradsdjur djurmodell för att studera biomaterial-infektioner i vivo.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tryptic soya agar</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>236950</td>
			<td>Media preparation unit at AMC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic soya broth</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>211825</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinylpyrrolidone40</td>
			<td>Applichem</td>
			<td>A2259.0250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;m diameter polystyrene microspheres (blue fluorescent)</td>
			<td>Life technology/ThemoFisher</td>
			<td>F8829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microcapilary (1 mm O.D. x 0.78 mm I.D.)</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>30-0038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller instrument</td>
			<td>Sutter Instrument Inc</td>
			<td>Flaming p-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope LM 20</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG33 10450123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-aminobenzoic acid (Tricaine)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E10521-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose MP</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11388991001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo fluorescent microscope LM80</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MDG3610450126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microloader pipette tips</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5242956.003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator M3301 with M10 stand</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>00-42-101-0000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FemtoJet express micro-injector</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5248ZO100329</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtrube 2ml pp</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>72.693.005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zirconia beads</td>
			<td>Bio-connect</td>
			<td>11079124ZX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MagNA lyser</td>
			<td>Roche</td>
			<td>41416401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MSA-2 plates (Mannitol Salt Agar-2)</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>43671</td>
			<td>Chapmon 2 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl cellulose 4000cp</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>MO512-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C0378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gyrotory shaker (for bacterial growth)</td>
			<td>New Brunswick Scientific</td>
			<td>G10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zebrafish incubator</td>
			<td>VWR</td>
			<td>Incu-line</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuvettes</td>
			<td>BRAND</td>
			<td>759015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Hettich-Zentrifugen</td>
			<td>ROTANTA 460R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrometer</td>
			<td>Pharmacia biotech</td>
			<td>Ultrospec&#174;2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F6521-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>48 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>677180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well-plates</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>655161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri-dish</td>
			<td>Biomerieux</td>
			<td>NL-132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td>link: https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad 7.0</td>
			<td>Prism</td>
			<td>Not applicable</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated staphylococcus aureus infection

Biomaterial-associerad infektion (BAI) är en viktig orsak till felet av biomaterial/medicintekniska produkter. Staphylococcus aureus är en av de stora patogenerna i BAI. Aktuella experimentella BAI däggdjur djur modeller såsom musmodeller är kostsamma och tidskrävande och därför inte lämplig för hög genomströmning analys. Således önskas nya djurmodeller som kompletterande system för att undersöka BAI invivo. I denna studie, vi syftar till att utveckla en zebrafiskar embryo modell för Invivo visualisering och intravital analys av bakteriell infektion i närvaro av biomaterial baserat på fluorescensmikroskopi. Dessutom studerades provocerade makrofag svaret. I detta syfte vi använt fluorescerande protein-uttryckande S. aureus och transgena zebrafiskar embryon uttrycker fluorescerande proteiner i deras makrofager och utvecklat ett förfarande för att injicera bakterier ensam eller tillsammans med mikrosfärer i muskeln vävnad av embryon. För att övervaka bakterieinfektion progression i levande embryon över tiden, utarbetade vi en enkel men pålitlig metod av mikroskopiska poängsättning av fluorescerande bakterier. Resultaten från mikroskopiska scoring visade att alla embryon med mer än 20 kolonibildande enheter (CFU) av bakterier gav en positiv fluorescerande signal av bakterier. För att studera de potentiella effekterna av biomaterial på infektion, beslutsamt vi CFU numrerar av S. aureus med och utan 10 µm polystyren mikrosfärer (PS10) som modell biomaterial i embryon. Dessutom använde vi ObjectJ projektfilen ”zebrafisk-Immunotest” i ImageJ för att kvantifiera fluorescensintensiteten hos S. aureus infektion med och utan PS10 över tid. Resultaten från båda metoderna visade högre numrerar av S. aureus i infekterade embryon med mikrosfärer än i embryon utan mikrosfärer, som visar en ökande infektion mottaglighet i närvaro av biomaterial. Den aktuella studien visar således potentialen hos zebrafiskar embryo modellen att studera BAI med de metoder som utvecklats här.

Den föreliggande studien bedömde tillämpligheten av zebrafisk embryon som romanen vertebrate djur modell för att utreda biomaterial-associerad infektion. Mikroskop teknik har vanligen använts att injicera zebrafiskar embryon att orsaka infektion22,26,27,30,36olika bakteriearter. Med hjälp av proceduren som avbildas i <str...

Watch this Scientific Journal Video about A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection at JoVE.com

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Zebrafiskar Embryo modell för In Vivo visualisering och Intravital analys av Biomaterial-associerade Staphylococcus aureus infektion

Föreliggande studie beskriver en zebrafiskar embryo modell för Invivo visualisering och intravital analys av biomaterial-associerad infektion över tid baserat på fluorescensmikroskopi. Denna modell är ett lovande system kompletterar däggdjur djurmodeller såsom musmodeller för att studera biomaterial-infektioner i vivo.

Biomaterial-associated infection (BAI) is a major cause of the failure of biomaterials/medical devices. Staphylococcus aureus is one of the major ...

Denna metod kan hjälpa till att svara på viktiga frågor om hur biomaterial påverkar mottagligheten för infektion, hur de påverkar utvecklingen av sådana infektioner, och hur de påverkar immuncellens beteende runt sådana biomaterial in vivo. Den största fördelen med denna teknik är att det ger en ny djurmodell som tillåter in vivo visualisering och intravital analys av biomaterial-associerade infektioner. Visuell demonstration av denna metod är kritisk som injektion av biomaterial mikrosfärer är en mycket känslig förfarande.För att generera en bakterie-bara suspension, först överföra fyra till fem kolonier av fluorescerande Staph aureus mCherry stam, odlade på tryptic soja jordbruk plattor kompletteras med 10 mikrogram per milliliter kloramfenikol i 10 milliliter av tryptic soja buljong kompletteras med kloramfenikol, för tillväxt i mitten logaritmi tillväxt fas vid 37 grader Celsius med skakning. När kulturen når en optisk densitet mätning på 620 nanometer på 0,4 till 0,8, samla bakterierna genom centrifugation, och tvätta cellerna två gånger med en milliliter steril PBS per tvätt. Efter den andra tvätten, resuspend pelleten i 1,1 milliliter PVP, och virvel bakteriell suspension innan mätning av den optiska densiteten igen.Justera sedan bakterieupphängningens koncentration med PVP enligt de experimentella kraven för att generera den endast bakterieförst iga suspensionen. För att generera en bakterie mikrosfär suspension, centrifugera kommersiella polystyren mikrosfärer, PS-10, och resuspend mikrosfären pelleten i bakterier-bara suspension. Späd bakterierna mikrosfär suspension med en 1/2 volym PVP för att nå en lämplig koncentration av bakterier i suspensionen som är ungefär 2/3 av det i de bakterier-bara suspension.Blanda suspensionen genom att vortexa. För att kontrollera koncentrationen av bakterier-bara och bakterier mikrosfär suspension, tillsätt 100 mikroliter av varje suspension till enskilda brunnar av en 96-brunnsplatta. Seriellt späd 10 mikroliter alikvoter av suspensionerna i 90 mikroliter av steril PBS i efterföljande brunnar, med hjälp av färska tips för varje spädningssteg.Applicera dubbla 10-mikroliter alikvoter av outspädda och utspädda bakterie suspensioner på agar plattor, och inkubera plattorna över natten vid 37 grader Celsius. Nästa morgon, räkna kolonierna för att beräkna antalet bakterier inom de beredda bakterierna och bakterier mikrosfär suspensioner. Efter att ha samlat in zebrafiskembryonen, kassera alla icke-transparenta olönsamma embryon och ruva in cirka 60 embryon per 100 milliliter petriskål i 28 grader Celsius i färskt E3-medium.Efter anestesi, sequester de GFP-positiva embryon för fluorescensmikroskopi. Överför dem till en 100-milliliter Petriskål av E3 medium. För att skapa en formspruta fyller du en petriskål på 100 milliliter med en till 1,5 %flytande agaros.Använd en plast mögel mall för att skapa spår i agaros. När agaros har stelnat, ta bort mögel, och täcka agar med E3 medium kompletteras med 0,02%trikain. En dag tre efter befruktning, använd forceps för att bryta spetsen på en pulled glass mikrokapillär nål för att uppnå tips med en cirka 20 mikrometers ytterdiameter under ett ljus mikroskop med en skala bar i okulär.Justeringen av nålspetsens öppning är praktisk för injektion av mikrosfärer. Öppningens diameter behöver justeras för mikrosfärer av olika storlek. Använd sedan en Microloader pipettspets för att ladda nålen med cirka 20 mikroliter av bakterien mikrosfär eller bakterier-bara suspension, och montera nålen på en micromanipulator ansluten till en microinjector.Överför nu de valda embryona till den räfflade agarosplattan. Efter att ha väntat fem minuter på att embryona ska sövas, anpassa embryona i spåren i en enda orientering för deras injektion. Ställ in mikroinjektorn på lämpliga injektionsinställningar, och stick in nålen i det första embryots muskelvävnad i 45 till 60 graders vinkel i ett stereomikroskop.Flytta nålen försiktigt fram och tillbaka för att justera positionen inom vävnaden vid behov, och använd microinjector fotpedalen för att injicera den belastade suspensionen. Vid injicering av en bakterie mikrosfär suspension i vävnaden av zebrafisk embryon, nålen bör införas försiktigt men med en stadig hand. Efter en lyckad insättning, bör ett utrymme skapas för materialen före injektion.När alla embryon har injicerats, poängt embryona för en lyckad injektion under en stereo fluorescens mikroskop, och underhålla embryon i E3 medium utan trikain i enskilda brunnar av 48-brunn plattor med dagliga medium förändringar. För att övervaka infektionsprogressionen genom kvantifiering av kolonibildande enheter överför du slumpmässigt fem till sex livskraftiga infekterade embryon till enskilda två milliliter mikrorör strax efter injektionen och tvättar försiktigt embryona med steril PBS. Efter att tvättarna kasserats, tillsätt 100 mikroliter sterila PBS till varje rör, följt av två till tre sterila två millimeter-diameter zirkonia pärlor.Krossa sedan embryona i en homogenisator vid 3, 500 rpm i 30 sekunder och odla homogenatet som visats. Placera en 100-millimeters Petriskål som innehåller E3 medium kompletterat med 0,02%trikain på en stereofluorescensmikroskopstadium, och tillsätt 500 mikroliter av 2%metylcellulosa i Petriskålen. För att övervaka infektionen framsteg genom fluorescens mikroskopi, utrusta lämpliga ljusa fält och fluorescerande filter, anpassa de sövda infekterade embryon horisontellt på en plats av metylcellulosa i en Petriskål.Använd ljusfältsfiltret för att få den skadade injicerade vävnaden i fokus vid en 160x-förstoring. Ställ in Z-stackdjupet på 10 mikrometer och stegstorleken vid fem mikrometer för att möjliggöra inspelning av tre på varandra följande bilder. Sedan bild de enskilda embryon under identiska optimerade inställningar vid en 160x förstoring.Använd ObjectJ plugin i ImageJ för att analysera bilderna. Intramuskulär injektion av Staph aureus initierar en dosberoende infektion hos embryon, med livskraftig infektionsprogression som observerats hos embryon som administreras högutmaningsdoser vid dag ett och två efter injektionen. Som visat, är det möjligt att injicera liknande antal bakterier i närvaro eller frånvaro av mikrosfärer.Typiskt, alla embryon med mer än 20 kolonibildande enheter av Staph aureus mCherry är positiva för fluorescens under mikroskopisk scoring, även om förekomsten av mikrosfärer verkar inte signifikant påverka infektionen progression i låg dos utmanas embryon. I hög doserade ifrågasatta embryon, mikroskopiska scoring visar inte några skillnader i infekterade embryo frekvens med eller utan mikrosfärer, men kvantitativ kultur avslöjar högre koloni-formning enhet nummer hämtas från embryon i Staph aureus plus mikrosfär grupp jämfört med dem som skördas från Staph aureus-only grupp på två dagar post-injection. Förekomsten av ett biomaterial påverkar både immuncellsvaret och den initiala mottagligheten för infektion.Till exempel, vid fem timmar efter injektion, makrofag infiltration som svar på en Staph aureus-bara injektion är betydligt högre än som svar på en Staph aureus plus mikrosfärer injektion, medan en dag efter injektion, embryon med mikrosfärer uppvisar betydligt högre nivåer av Staph aureus infektion än embryon utan mikrosfärer. Det är viktigt att komma ihåg att alltid justera nålspetsens öppning till biomaterialens storlek och justera förhållandet mellan bakteriekoncentrationen i bakterie-bara suspensionen och bakterierna mikrosfär suspension. Denna zebrafisk embryomodell möjliggör visualisering in vivo och den intravitala analysen av infektionsprogressionen och de provocerade immuncellsvaren i närvaro och frånvaro av biomaterial.Denna teknik ger en ny helhetsdjursmodell för utveckling av antimikrobiella biomaterial och behandlingsstrategier för säkra medicintekniska produkter.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Att skapa två-dimensionell Mönstrad substrat för Protein och Cell inneslutning

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

Cellular Lipid Extraction for Targeted Stable Isotope Dilution Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Analysis

Cellular Lipid Extraction för riktade Stabil isotoputspädning Vätskekromatografi-masspektrometri Analys

The metabolism of fatty acids, such as arachidonic acid (AA) and linoleic acid (LA), results in the formation of oxidized bioactive lipids, including ...

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Simple Microfluidic Devices for in vivo Imaging of C. elegans, Drosophila and Zebrafish

Enkla mikroflödessystem enheter för<em&gt; In vivo</em&gt; Avbildning av<em&gt; C. elegans</em&gt;,<em&gt; Drosophila</em&gt; Och zebrafisk

Micro fabricated fluidic devices provide an accessible micro-environment for in vivo studies on small organisms. Simple fabrication processes are ...

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Virala Nanopartiklar för<em&gt; In vivo</em&gt; Tumöravbildning

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being ...

Mass Cytometry: Protocol for Daily Tuning and Running Cell Samples on a CyTOF Mass Cytometer

Mass Cytometry: Protokoll för Daily Tuning och kör prover cell på en CyTOF Mass Cytometer

In recent years, the rapid analysis of single cells has commonly been performed using flow cytometry and fluorescently-labeled antibodies. However, the ...

Biosensor for Detection of Antibiotic Resistant Staphylococcus Bacteria

Biosensor för detektion av antibiotikaresistenta stafylokocker

A structurally transformed lytic bacteriophage having a broad host range of Staphylococcus aureus strains and a penicillin-binding protein (PBP 2a) ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

En Full Skin Defect modell för att utvärdera Vaskularisering av biomaterial<em&gt; In Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Anpassning av Electro processen med att ge tre unika miljöer för en Tri-lager<em&gt; In Vitro</em&gt; Modell av Airway Wall

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Rigid Embedding of Fixed and Stained, Whole, Millimeter-Scale Specimens for Section-free 3D Histology by Micro-Computed Tomography

Styv inbäddning av fixeras och färgas, hela Millimeter-skala prover för avsnitt-gratis 3D histologi av mikro-datortomografi

For over a hundred years, the histological study of tissues has been the gold standard for medical diagnosis because histology allows all cell types in ...

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Kolorimetriska analys av alkaliskt fosfatasaktiviteten i S. aureus Biofilm

Alkaline phosphatase (ALP) is a common enzyme expressed in both prokaryotic and eukaryotic cells. It catalyzes the hydrolysis of phosphate monoesters from ...