Name: methionine functionalized biocompatible block copolymers for targeted plasmid dna delivery
Uploaded: 2019-08-06T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methionine Functionalized Biocompatible Block Copolymers for Targeted Plasmid DNA Delivery at JoVE.com

この研究は、中国国家主要研究開発プログラム(No. 2016YFC0905900)、中国国家自然科学財団(No.81801827、81872365)、江蘇省基礎研究プログラム(自然科学財団、No.BK20181086)、江蘇癌病院科学研究基金(いいえ。ZK201605)。

1. BNHEMAポリマーの合成(PBNHEMA)
<ol><li>N、N-ビス(2-ヒドロキシアル)メタクリラム化(BNHEMA)の1.87gを重合ボトル中の蒸留水の1mLに溶解する。 注:重合ボトルは、ゴムストッパーと磁気攪拌機を備えた丸底フラスコです。</li>
	<li>4-シアンペンタニン酸ジチオベンゾア酸(CTP)の0.03gと4,4'-アゾビス(4-シアナバレリ酸)(ACVA)の0.02gを5mLビーカーで1,4-ダイオキシンの0.5mLで溶解する。次に、ステ...

<ol>
	<li>Flotte, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+and+Cell+Therapy+in+2018:+A+Look+Ahead.">Gene and Cell Therapy in 2018: A Look Ahead.</a> Human Gene Therapy. 29, 1-1 (2018).</li><li>Huang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanomedicine-based+combination+anticancer+therapy+between+nucleic+acids+and+small-molecular+drugs.">Nanomedicine-based combination anticancer therapy between nucleic acids and small-molecular drugs.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 115, 82-97 (2017).</li><li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversing+of+multidrug+resistance+breast+cancer+by+co-delivery+of+P-gp+siRNA+and+doxorubicin+via+folic+acid-modified+core-shell+nanomicelles.">Reversing of multidrug resistance breast cancer by co-delivery of P-gp siRNA and doxorubicin via folic acid-modified core-shell nanomicelles.</a> Colloids &amp; Surfaces B Biointerfaces. 138, 60-69 (2016).</li><li>Quader, S., Kataoka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanomaterial-Enabled+Cancer+Therapy.">Nanomaterial-Enabled Cancer Therapy.</a> Molecular Therapy. 25, 1501-1513 (2017).</li><li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multivalent+methionine-functionalized+biocompatible+block+copolymers+for+targeted+siRNA+delivery+and+subsequent+reversal+effect+on+adriamycin+resistance+in+human+breast+cancer+cell+line+MCF-7/ADR.">Multivalent methionine-functionalized biocompatible block copolymers for targeted siRNA delivery and subsequent reversal effect on adriamycin resistance in human breast cancer cell line MCF-7/ADR.</a> Journal of Gene Medicine. 19, e2969 (2017).</li><li>Szwarc, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=‘Living’+Polymers.">‘Living’ Polymers.</a> Nature. 178, 168-169 (1956).</li><li>Szwarc, M., Rembaum, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymerization+of+methyl+methacrylate+initiated+by+an+electron+transfer+to+the+monomer.">Polymerization of methyl methacrylate initiated by an electron transfer to the monomer.</a> Journal of Polymer Science. 22 (100), 189-191 (1956).</li><li>Mukhopadhyay, R. D., Ajayaghosh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Living+supramolecular+polymerization.">Living supramolecular polymerization.</a> Science. 349, 241 (2015).</li><li>Ozkose, U. U., Altinkok, C., Yilmaz, O., Alpturk, O., Tasdelen, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-situ+preparation+of+poly(2-ethyl-2-oxazoline)/clay+nanocomposites+via+living+cationic+ring-opening+polymerization.">In-situ preparation of poly(2-ethyl-2-oxazoline)/clay nanocomposites via living cationic ring-opening polymerization.</a> European Polymer Journal. 88, 586-593 (2017).</li><li>Wu, W., Wang, W., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Star+polymers:+Advances+in+biomedical+applications.">Star polymers: Advances in biomedical applications.</a> Progress in Polymer Science. 46, 55-85 (2015).</li><li>Boyer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Copper-Mediated+Living+Radical+Polymerization+(Atom+Transfer+Radical+Polymerization+and+Copper(0)+Mediated+Polymerization):+From+Fundamentals+to+Bioapplications.">Copper-Mediated Living Radical Polymerization (Atom Transfer Radical Polymerization and Copper(0) Mediated Polymerization): From Fundamentals to Bioapplications.</a> Chemical Reviews. 116, 1803-1949 (2016).</li><li>Keddie, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+guide+to+the+synthesis+of+block+copolymers+using+reversible-addition+fragmentation+chain+transfer+(RAFT)+polymerization.">A guide to the synthesis of block copolymers using reversible-addition fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization.</a> Chemical Society Reviews. 43, 496-505 (2014).</li><li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guanidinylated+3-gluconamidopropyl+methacrylamide-s-3-aminopropyl+methacrylamide+copolymer+as+siRNA+carriers+for+inhibiting+human+telomerase+reverse+transcriptase+expression.">Guanidinylated 3-gluconamidopropyl methacrylamide-s-3-aminopropyl methacrylamide copolymer as siRNA carriers for inhibiting human telomerase reverse transcriptase expression.</a> Drug Delivery. 20, 296-305 (2013).</li><li>Qin, Z., Liu, W., Guo, L., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+Guanidinated+N-3-Aminopropyl+Methacrylamide-N-2-Hydroxypropyl+Methacrylamide+Co-polymers+as+Gene+Delivery+Carrier.">Studies on Guanidinated N-3-Aminopropyl Methacrylamide-N-2-Hydroxypropyl Methacrylamide Co-polymers as Gene Delivery Carrier.</a> Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition. 23, 1-4 (2012).</li><li>Friedman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+the+Ninhydrin+Reaction+for+Analysis+of+Amino+Acids,+Peptides,+and+Proteins+to+Agricultural+and+Biomedical+Sciences.">Applications of the Ninhydrin Reaction for Analysis of Amino Acids, Peptides, and Proteins to Agricultural and Biomedical Sciences.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 52, 385-406 (2004).</li><li>Habuchi, S., Yamamoto, T., Tezuka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+Cyclic+Polymers+and+Characterization+of+Their+Diffusive+Motion+in+the+Melt+State+at+the+Single+Molecule+Level.">Synthesis of Cyclic Polymers and Characterization of Their Diffusive Motion in the Melt State at the Single Molecule Level.</a> Journal of Visualized Experiments. (115), 1-9 (2016).</li><li>Rao, D. A., Nguyen, D. X., Mishra, G. P., Doddapaneni, B. S., Alani, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+Characterization+of+Individual+and+Multi-drug+Loaded+Physically+Entrapped+Polymeric+Micelles.">Preparation and Characterization of Individual and Multi-drug Loaded Physically Entrapped Polymeric Micelles.</a> Journal of Visualized Experiments. 102, 1-5 (2015).</li></ol>

本研究では、一連のBNHEMA-b-APMAブロックポリマーカチオン性遺伝子キャリアを導入した。これらのブロックポリマーは、リバーシブル添加断片化鎖伝達(RAFT)法を介して合成した。親水性セグメントBNHEMAは、溶解性を向上させるために導入された。メチオニンおよびグアニジン基は、標的能力およびトランスフェクション効率5を改善するために改変された。MBG共重合体におけ?...

近年、あらゆる種類の疾患を治療する薬剤としての核酸の治療的送達に対する遺伝子治療が出現している1.プラスミドDNA(pDNA)および小さな干渉RNA(siRNA)を含む遺伝子薬剤の開発は、薬物送達システム(DDS)2の安定性および効率に依存する。すべてのDDSの中で、カチオン性ポリマーキャリアは、良好な安定性、低免疫原性、および顔の調製および修飾の利点を有し、これはカチオン性ポリマーキャリアに広範な応用見通し3、4を与える。生物医学の実用的な適用のために、研究者は高効率、低毒性およびよいターゲティング能力5のカチオン性ポリマーキャリアを見つける必要がある。すべてのポリマーキャリアの中で、ブロック共重合体は、最も広く使用されている薬物送達システムの1つである。ブロック共重合体は、薬物送達5においてミセル、微小球、およびナノ粒子を形成する自己組織化特性および能力について集中的に研究される。ブロック共重合体は、生体重合またはクリック化学法を介して合成することができる。
1956年、Szwarcらは生きている重合の話題を提起し、鎖破断反応なしの反応として定義した6,7.それ以来、この方法を使用してポリマーを合成するための複数の技術が開発されました。したがって、生きている重合はポリマー科学8のマイルストーンと見なされる。生きている重合は生きているアニオンの重合、生きているカチオン性重合、および可逆的な不活性化ラジカル重合(RDRP)9に分類することができる。生きているアニオン/カチオン性重合は、その厳しい反応条件10に起因する適用の限られた範囲を有する。制御/生きているラジカル重合(CRP)は、軽度の反応条件、便利な性質、および良好な収率を有し、したがって、近年11の主要な研究の焦点となっている。CRPでは、活性伝播鎖は、フリーラジカルの濃度を低下させ、連鎖ラジカルの二分子反応を回避するために休眠状態のものに可逆的に受動する。添加重合は、不活性休眠伝播鎖がチェーンラジカルに可逆的にアニメーション化された場合にのみ継続できます。生きているラジカル重合の最も有望な形態の一つとして、可逆的な加断片化鎖伝達(RAFT)重合は、制御された分子量および構造を有するブロックポリマーを得るために適用可能な方法であり、分子量が狭い配布、および機能グループ12を運ぶ。RAFT重ね合いを成功させる鍵は、非常に高い鎖転写定数を有する鎖転写剤、通常はジチオエステルの効果である。
本論文では、BNHEMA-b-APMAブロックポリマーを調製するRAFT重合法を設計し、開始剤として4,4'-アゾビス(4-シアナバレリン酸)(ACVA)を、鎖転写剤として4-シアネアタノイン酸ジチオベンゾエート(CTP)を用いた。RAFT重合は、カチオン性ポリマーキャリアにBNHEMAを導入するために2回使用した。続いて、APMA鎖中のアミン基を、メチオニンおよびグアニジニイリン化試薬1-アミドアミノピラゾール塩酸塩で修飾した。グアニジニル化試薬およびメタクリラム化ポリマー骨格構造の陽性料金を利用して、得られたブロックポリマー担体の細胞取り込み効率が向上した。

<table>
<tbody>
<tr>
<td>1-hydroxybenzotriazole</td>
<td>Macklin Biochemical Co., Ltd,China</td>
<td>H810970</td>
<td>&ge;97.0%</td>
</tr>
<tr>
<td>1,4-dioxane</td>
<td>Sinopharm chemical reagent Co., Ltd, China</td>
<td>10008918</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>1-amidinopyrazole Hydrochloride</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>A107935</td>
<td>98%</td>
</tr>
<tr>
<td>1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>E106172</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>4,4&#x2019;-azobis(4-cyanovaleric acid)</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>A106307</td>
<td>Analytical reagent (AR)</td>
</tr>
<tr>
<td>4-cyano-4-(phenylcarbonothioylthio)pentanoic Acid</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>C132316</td>
<td>&#x003E;97%(HPLC)</td>
</tr>
<tr>
<td>Acetate</td>
<td>Sinopharm chemical reagent Co., Ltd, China</td>
<td>81014818</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>Acetone</td>
<td>Sinopharm chemical reagent Co., Ltd, China</td>
<td>10000418</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>Agarose</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>A118881</td>
<td>High resolution</td>
</tr>
<tr>
<td>Ascorbic acid</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>A103533</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>DMSO</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>D103272</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>Ethylene glycol</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>E103319</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>N-(3-aminopropyl)methacrylamide hydrochloride</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>N129096</td>
<td>&ge;98.0%(HPLC)</td>
</tr>
<tr>
<td>N,N-bis(2-hydroxyethyl)methacrylamide</td>
<td>ZaiQi Bio-Tech Co.,Ltd, China</td>
<td>CF259748</td>
<td>&ge;98.0%(HPLC)</td>
</tr>
<tr>
<td>Ninhydrin</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>N105629</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>PBS buffer</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>P196986</td>
<td>pH 7.4</td>
</tr>
<tr>
<td>Plasmid DNA</td>
<td>BIOGOT Co., Ltd, China</td>
<td>pDNA-EGFP</td>
<td>pDNA-EGFP</td>
</tr>
<tr>
<td>Plasmid DNA</td>
<td>BIOGOT Co., Ltd, China</td>
<td>Pdna</td>
<td>pDNA</td>
</tr>
<tr>
<td>Sodium carbonate decahydrate</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>S112589</td>
<td>AR</td>
</tr>
<tr>
<td>Trimethylamine</td>
<td>Aladdin Co., Ltd., China</td>
<td>T103285</td>
<td>AR</td>
</tr>
</tbody>
</table>

methionine functionalized biocompatible block copolymers for targeted plasmid dna delivery

可逆的な付加断片化鎖伝達(RAFT)重合はラジカル重合および生きている重合の利点を統合する。本研究では、RAFT重合によるメチオニン機能性生体適合性共重合体の調製を提示する。まず、N,N-ビス(2-ヒドロキエチエル)メタクリラム化-b-N-(3-アミノプロピル)メタクリラム化物(BNHEMA-b-APMA,BA)を用いてRAFT重合を介して合成した4,4'-azobis(4-チアノバリン酸)(ACVA) 連鎖伝達剤として開始剤および4-シアンペンタノイン酸ジチオベンゾエート(CTP)を開始する。続いて、N、N-ビス(2-ヒドロキセチル)メタクリラム化-b-N-(3-グアニジノプロピル)メタクリラム化物(メチオニン移植BNHEMA-b-GPMA、mBG)は、メチオニンおよびグアニジンでAPMAのアミン基を修飾することによって調製した。グループ。mBG1、mBG2、およびmBG3の3種類のブロックポリマーを比較するために合成した。Ninhydrin反応は、APMA含有量を定量するために使用された。mBG1、mBG2、およびmBG3はそれぞれ21%、37%、および52%のAPMAを持っていた。ゲル透過クロマトグラフィー(GPC)の結果は、BA共重合体が16,200(BA1)、20,900(BA2)、および27,200(BA3)g/molの分子量を有することを示した。得られたブロック共重合遺伝子キャリアのプラスミドDNA(pDNA)複合能も調べた。pDNAがmBG1、mBG2、mBG3と完全に複合化した場合、電荷比(N/P)は8、16、4であった。mBG/pDNAポリプレックスのN/P比が1より高い場合、mBGのゼータ電位は陽性であった。16と32の間のN/P比では、mBG/pDNAポリプレックスの平均粒径は100〜200nmであった。全体的に、この研究は、ブロック共重合体キャリア合成のためのシンプルで便利なプロトコルを示しています。

BNHEMAは、表1に示す重合の客観的な程度に従って供給された。mBGの合成手順を図1に示す。まず、BNHEMAホモポリマーを水-ダイオキシザン系における可逆添加断片化鎖伝達(RAFT)法を介して調製し、鎖転写剤として4-シアンペンタニン酸ジチオベンゾエートを用いた。第二に、PBNHEMAを鎖転写剤として用いてBNHEMA-b-APMAブロックポリマーを調製した。APMAモノマ...

Watch this Scientific Journal Video about Methionine Functionalized Biocompatible Block Copolymers for Targeted Plasmid DNA Delivery at JoVE.com

Methionine Functionalized Biocompatible Block Copolymers for Targeted Plasmid DNA Delivery

本研究では、可逆添加断片化鎖伝達(RAFT)法を介したメチオニン機能性生体適合性共重合体(mBG)の調製を提示する。得られたmBGとそのトランスフェクション効率のプラスミドDNA複合能も調べられた。RAFT法は、特殊な官能基を含むモノマーを重合するために非常に有益である。

標的プラスミドDNA送達に対するメチオニン機能性生体適合性共重合体

Reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization integrates the advantages of radical polymerization and living polymerization. This ...

カチオンポリマー薬物キャリアは、良好な安定性、低免疫原性、およびファシリティ調製および修飾の利点を有する。ここでは、その合成のための迅速かつ簡単な方法を提供します。可逆的な付加フラグメンテーション連鎖移動重合法は、制御された分子量および構造および担持官能基を有するブロックポリマーを降伏させるために適用可能な方法である。これらの薬剤運搬船は、同時に癌、炎症、および他の疾患の協調治療を達成するために異なる薬物を運ぶことができます。IFT重合は古典的な方法であり、このプロトコルは遺伝子治療におけるその応用の例を示す。このポリマーの合成の成功の鍵は、正確に反応温度を制御することです。水風呂よりもオイルバスを使用することをお勧めします。この手順を開始するには、ゴム栓と磁性攪拌機を用いたラウンドボトムフラスコを得て、重合ボトルとして使用します。重合ボトルの蒸留水1ミリリットルにビスヒドロキシHEMAの1.87グラムを溶解します。5ミリリットルビーカーで、0.03グラムのCTPと0.02グラムのACVAを0.5ミリリットルの1、4-ジオキサンに溶解する。この混合物を重合ボトルに加えます。次いで、凝縮液トラップを用いて、溶液を重合ボトルに凍結する。ボトルを鉄の支持体に固定し、針でつまずいた導管を使用して、反応混合物に窒素を真空し、注入します。次いで、重合ボトルを密封し、室温で溶液を30分間解凍した。このフリーズポンプ解凍サイクルを3回繰り返します。この後、ボトルを摂氏70度のオイルバスに入れ、窒素雰囲気下で24時間反応させます。翌日、重合ボトルを摂氏0度で冷やし、ゴム栓を開けて重合反応を終了します。次に、マイナス20°Cの冷蔵庫で2時間予冷し、50対1の比で重合ボトル中の反応液と混合する。この混合物を8、200回gで遠心分離し、アセトンを取り除き、沈殿物を回収した。合成したポリビスヒドロキシHEMAを精製するために、集めた沈殿物を2ミリリットルの純水に溶解する。次に、1~50の比率で100ミリリットルの予冷アセトンと混ぜます。8、200回gで溶液を遠心分離し、沈殿物を回収した。この精製プロセスを繰り返して、沈殿物を溶解、混合、遠心分離します。まず、精製されたポリビスヒドロキシHEMAの0.96グラムと精製ポリビスヒドロキシHEMAの0.93グラムを10ミリリットルのビーカーに5ミリリットルの蒸留水で溶解します。0.01グラムのACVAを0.5ミリリットルの4-ジオキサンに溶解し、これをAPMAおよびポリビスヒドロキシHEMA溶液に加えます。この混合物を重合ボトルに移し、乾燥窒素で1時間換気する。次いで、重合瓶を70°Cのオイルバスに入れ、窒素雰囲気下で24時間反応させた。翌日、重合ボトルを摂氏0度で冷やし、ゴム栓を開けて重合プロセス溶液を終了します。まず、MCF-7細胞を6ウェルプレートのウェルに播種し、密度は20,000個の細胞をウェルあたり20,000個とします。加湿インキュベーターで細胞を摂氏37度で5%の二酸化炭素で12時間培養します。この後、窒素対リン比の異なる比率のカチオン性ポリマーおよびpDNAポリプレックスポリプレックスを含む新鮮な培養培地と培地を置換する。細胞を6時間培養し、次いで培地を2ミリリットルの新鮮なRPMI 1640培地に置き換えた。48時間培養を続けます。次いで、細胞を採取し、フローサイトメーターを用いて緑色蛍光を検出する。本研究では、可逆的付加断片化連鎖伝達法を介してメチオニン機能性生体適合性ブロックコポリマーを調製し、得られたmBGのプラスミドDNA錯体化能とそのトランスフェクション効率を調べた。mBG/pDNAポリプレックスの平均粒子径とゼータ電位は、それぞれ124ナノメートルとプラス15.7ミリボルトで、N対P比は16です。電気泳動遅滞は、ゼロのN対P比を有するpDNAがアガロースゲルで拘束されずに動き、ゲルイメージャーでストライプとして観察されることを明らかにする。pDNAがmBGと複合化すると、pDNAの動きが遅くなり、その後、バンドの明るさが低下します。これは、N~Pが4より高い場合に、mBGがpDNAを完全に複雑にする可能性があることを示しています。mBG/pDNAポリプレックスの細胞毒性は、標準的なMTTアッセイを用いて測定されるこれらの結果は、mBG/pDNAポリプレックスが4、8、16、および32のN-P比でPEI/pDNAポリプレックスよりも細胞毒性を有することを示している。また、見られるように、mBG/pDNAポリプレックスの細胞毒性は、N対P比の増加とともに増加する。この増加した細胞毒性は、正に帯電したGPMA成分の結果である。pDNAトランスフェクション実験で使用されるN対P比は、細胞毒性結果に従って選択される。mBG1、mBG2、およびmBG3のトランスフェクション能力をGFP蛍光強度を測定して比較し、mBG3が最適な遺伝子キャリアであることを示した。シルト丸底フラスコから空気を排出し、反応温度を維持することが重要です。得られたポリマー薬物担体は、薬剤耐性癌を相乗的に治療するために化学療法薬および遺伝子薬剤の共送に適用することができる。遺伝子薬と化学療法薬の組み合わせの分子機構は、薬剤耐性腫瘍の治療のためにさらに探求することができる。アセトンは、その急性毒性のために毒性が低いと評価されています。キー、吸入、または目や皮膚との接触は避けるべきです。加熱手順中に、スケーリングのリスクを避けてください。

Research

JoVE Journal

Chemistry

Microwave-assisted Intramolecular Dehydrogenative Diels-Alder Reactions for the Synthesis of Functionalized Naphthalenes/Solvatochromic Dyes

官能ナフタレン/ソルバトクロミック色素の合成のためのマイクロ波支援分子内脱水素Diels-Alder反応

Functionalized naphthalenes have applications in a variety of research fields ranging from the synthesis of natural or biologically active molecules to ...

Synthesis and Characterization of Functionalized Metal-organic Frameworks

官能化有機金属構造体の合成とキャラクタリゼーション

Metal-organic frameworks have attracted extraordinary amounts of research attention, as they are attractive candidates for numerous industrial and ...

Preparation and Characterization of SDF-1&#945;-Chitosan-Dextran Sulfate Nanoparticles

Preparation and Characterization of SDF-1ÃƒÅ½Ã‚Â±-Chitosan-Dextran Sulfate Nanoparticles

SDF-1α-キトサン硫酸デキストランナノ粒子の調製とキャラクタリゼーション

Chitosan (CS) and dextran sulfate (DS) are charged polysaccharides (glycans), which form polyelectrolyte complex-based nanoparticles when mixed under ...

Functionalization of Single-walled Carbon Nanotubes with Thermo-reversible Block Copolymers and Characterization by Small-angle Neutron Scattering

小角中性子散乱による熱可逆性ブロック共重合体と特性を持つ単層カーボンナノチューブの機能化

We demonstrate a protocol for single-walled carbon nanotube functionalization using thermo-sensitive PEO-PPO-PEO triblock copolymers in an aqueous ...

Self-assembling Morphologies Obtained from Helical Polycarbodiimide Copolymers and Their Triazole Derivatives

ヘリカルポリカルボジイミド共重合体およびそれらのトリアゾール誘導体から得られた自己組み立てモルフォロジー

A facile method for the preparation of polycarbodiimide-based secondary structures (e.g., nano-rings, &#34;craters,&#34; fibers, looped fibers, fibrous ...

Synthesis of a Thiol Building Block for the Crystallization of a Semiconducting Gyroidal Metal-sulfur Framework

半導体 Gyroidal 金属硫黄フレームワークの結晶化に対するチオール ビルディング ブロックの合成

We present a method for preparing thioester molecules as the masked form of the thiol linkers and their utilization for accessing a semiconducting and ...

Preparation of Poly(pentafluorophenyl acrylate) Functionalized SiO2 Beads for Protein Purification

Preparation of Polypentafluorophenyl acrylate Functionalized SiO2 Beads for Protein Purification

蛋白質の浄化のため Poly(pentafluorophenyl acrylate) 機能 SiO2ビーズの準備

We demonstrate a simple method to prepare poly(pentafluorophenyl acrylate) (poly(PFPA)) grafted silica beads for antibody immobilization and subsequent ...

Synthesis of Monodisperse Cylindrical Nanoparticles via Crystallization-driven Self-assembly of Biodegradable Block Copolymers

生分解性ブロック共重合体の結晶化駆動自己組織化による単分散円筒ナノ粒子の合成

The production of monodisperse cylindrical micelles is a significant challenge in polymer chemistry. Most cylindrical constructs formed from diblock ...

Efficient Synthesis of All-Carbon Quaternary Centers via the Conjugate Addition of Functionalized Monoorganozinc Bromides

官能化 Monoorganozinc 臭化物の共役添加による全炭素4級センターの効率的な合成

The conjugate addition of organometallic reagents to &#945;,&#946;-unsaturated carbonyls represents an important method to generate C&#8211;C bonds in the ...