Name: automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant
Uploaded: 2019-11-27T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

وتم تمويل العمل من قبل مؤسسه كرافورد (TM و PN) ، ومنحه البحوث الحكومية السويدية (PN ، TM) ، ومجلس البحوث السويدي (PN) ومؤسسه غروشنسكي (TM ، PN).

وافقت لجنه الأخلاق في جامعه لوند علي جمع الدم الوريدي من المتطوعين الأصحاء وفقا لإعلان هلسنكي (2013/728). وقدم جميع المتطوعين موافقتهم الكتابية المستنيرة.
1. عزل العدلات الدم المحيطي باستخدام الكثافة-التدرج طرد
<ol><li>جمع الدم الوريدي البشري في أنابيب تحتوي علي الهيبارين والسما?...

<ol>
	<li>Nauseef, W. M., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+at+work.">Neutrophils at work.</a> Nature Immunology. 15 (7), 602-611 (2014).</li><li>Borregaard, N., Cowland, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granules+of+the+human+neutrophilic+polymorphonuclear+leukocyte.">Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte.</a> Blood. 89 (10), 3503-3521 (1997).</li><li>Nordenfelt, P., Tapper, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phagosome+dynamics+during+phagocytosis+by+neutrophils.">Phagosome dynamics during phagocytosis by neutrophils.</a> Journal of Leukocyte Biology. 90 (2), 271-284 (2011).</li><li>Brinkmann, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+kill+bacteria.">Neutrophil extracellular traps kill bacteria.</a> Science. 303 (5663), 1532-1535 (2004).</li><li>Sorensen, O. E., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+-+the+dark+side+of+neutrophils.">Neutrophil extracellular traps - the dark side of neutrophils.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (5), 1612-1620 (2016).</li><li>Yipp, B. G., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETosis:+how+vital+is+it?.">NETosis: how vital is it?.</a> Blood. 122 (16), 2784-2794 (2013).</li><li>Jorch, S. K., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+role+for+neutrophil+extracellular+traps+in+noninfectious+disease.">An emerging role for neutrophil extracellular traps in noninfectious disease.</a> Nature Medicine. 23 (3), 279-287 (2017).</li><li>Fuchs, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+cell+death+program+leads+to+neutrophil+extracellular+traps.">Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps.</a> J Cell Biol. 176 (2), 231-241 (2007).</li><li>Mohanty, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mechanism+for+NETosis+provides+antimicrobial+defense+at+the+oral+mucosa.">A novel mechanism for NETosis provides antimicrobial defense at the oral mucosa.</a> Blood. 126 (18), 2128-2137 (2015).</li><li>Hakkim, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+Raf-MEK-ERK+pathway+is+required+for+neutrophil+extracellular+trap+formation.">Activation of the Raf-MEK-ERK pathway is required for neutrophil extracellular trap formation.</a> Nature Chemical Biology. 7 (2), 75-77 (2011).</li><li>Brinkmann, V., Goosmann, C., Kuhn, L. I., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+quantification+of+in+vitro+NET+formation.">Automatic quantification of in vitro NET formation.</a> Frontiers in Immunology. 3, 413 (2012).</li><li>Coelho, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+determination+of+NET+(neutrophil+extracellular+traps)+coverage+in+fluorescent+microscopy+images.">Automatic determination of NET (neutrophil extracellular traps) coverage in fluorescent microscopy images.</a> Bioinformatics. 31 (14), 2364-2370 (2015).</li><li>Mohanty, T., Sorensen, O. E., Nordenfelt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETQUANT:+Automated+Quantification+of+Neutrophil+Extracellular+Traps.">NETQUANT: Automated Quantification of Neutrophil Extracellular Traps.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1999 (2017).</li><li>Kaplan, M. J., Radic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps:+double-edged+swords+of+innate+immunity.">Neutrophil extracellular traps: double-edged swords of innate immunity.</a> Journal of Immunology. 189 (6), 2689-2695 (2012).</li><li>Cedervall, J., Olsson, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+Gone+Astray+-+NETs+in+Cancer.">Immunity Gone Astray - NETs in Cancer.</a> Trends in Cancer. 2 (11), 633-634 (2016).</li><li>Ginley, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computational+detection+and+quantification+of+human+and+mouse+neutrophil+extracellular+traps+in+flow+cytometry+and+confocal+microscopy.">Computational detection and quantification of human and mouse neutrophil extracellular traps in flow cytometry and confocal microscopy.</a> Scientific Reports. 7 (1), 17755 (2017).</li></ol>

التشكيل الصافي هو أضافه حديثه نسبيا إلى المتنوعة العدلات ارمينتماريوم4 وكان هناك طفرة ملحوظة من الفائدة لدراسة اثار الشباك في مجموعه واسعه من مجالات البحث5,7,14,15. اقتناء الصور باستخدام المجهر المناعي والكم...

العدلات هي وسطاء حاسمه من الاستجابات الدفاع المضيف الفطرية ضد مجموعه واسعه من مسببات الامراض الميكروبية1. يقومون بتنفيذ وظائفهم المضادة للميكروبات عن طريق الإفراج عن حبيباتهم التي تحتوي علي مجموعه واسعه من البروتينات المضادة للميكروبات2، وإنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) و هيبوكلويد1، ومن خلال كثرة الكريات3. الاضافه إلى ذلك ، برينجمان وآخرون. 4 وصفت الفخاخ العدلات خارج الخلية (الشباك) كاليه جديده من قبل التي العدلات فخ والقضاء علي مسببات الامراض الغازية. منذ اكتشافها ما يزيد قليلا علي عقد من الزمان4, وقد تورطت الناموسيات في مجموعه واسعه من المعدية5,6 وغير المعدية7 الاعتلالات. تكوين NET هو عمليه نشطه والنتائج في قذف الحمض النووي الكروماتين المغلفة مع الحبيبية المشتقة من البروتينات المضادة للميكروبات8. وتشمل بعض التغييرات الرئيسية في المورفولوجية الخلوية والنووية المرتبطة بالتشكيل الصافي فقدان المورفولوجية النووية ، وتفكيك الكروماتين ، وتعبئة البروتينات الحبيبية من السيتوبلاسما إلى النواة وزيادة في القطر النووي والخلوي8،9.
الشبكة مثل شبك, اي يمكن ظهرت كبنيه منتشرة قليلا كبيره من الخلية أو بما ان بني عده أوقات كبيره من [العدلات] وحيده اعتبرت كمؤشرات من [نيسس]5,10. باستخدام المجهر الفلوري ، يمكن الكشف عن الناموسيات عن طريق التحقق من الحمض النووي مع مسبار الفلورسنت مثل 4 ' ، 6-diamidino-2-فينيلانديول (DAPI) وتلطيخ المناعي ضد البروتينات صافيه ملزمه مثل اللدائن المرنة. يحدد القياس الكمي للمناطق المتداخلة من تلطيخ الحمض النووي والبروتينات المربوطة بالناموسيات المساحة الاجماليه تحت الشباك في صوره11.
وهناك عدد من خيارات تحليل الصور المتاحة لأداء القياس الكمي القائم علي الصورة من الشباك11,12. ولكن هذه الخيارات البرمجيات الحالية القيود في عدم ان تكون سهله الاستخدام و/أو مؤتمتة بالبالكامل. في هذه المقالة ، ونحن نظهر تشغيل NETQUANT13، وهو التطبيق المتاحة بحريه التي يمكن ان تؤدي غير متحيزة بالبالكامل المجهرية المناعية صوره المجهر القائم علي الصور NET. التطبيق لديه واجهه رسوميه سهله الاستخدام (GUI) ويمكن اجراء تحليل خليه واحده. البرنامج ثبت قيمه netosis في صوره عن طريق الكشف عن التغييرات المورفولوجية في منطقه الحمض النووي-صافي-ملزمه علامة ، الكروماتين تفكيك المرتبطة تشوه النواة وزيادة في الحمض النووي: صافي-نسبه البروتين. ومعا ، تسمح معايير التعريف المتعددة NET بالتحديد الكمي الصارم لصافي المعلومات عبر عده مجموعات من البيانات بطريقه غير متحيزة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Heparinised plastic tubes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>367885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lymphoprep</td>
			<td>Axis-Shield</td>
			<td>114547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 with L-Glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11835-030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.547.004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-well Tissue culture plates</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10626491</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>#1 Coverslips 10mm</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>CS10100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>631-0098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary anti-human elastase</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>DAKO rabbit 1373, contract immunization</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary fluorophore conjugated goat anti-rabbit</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>A-11072, A-11070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PROLONG-Gold Antifade reagent with DAPI</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>P36930</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G9023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>79346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Ti-E Epifluorescence microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCD camera</td>
			<td>Andor Zyla</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plan Apochromat 20x, 40x objectives</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windows 10</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>macOS Sierra 10.12</td>
			<td>Apple</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant

الفخاخ خارج الخلية العدلات (الناموسيات) هي علي شبكه الإنترنت مثل الهياكل المضادة للميكروبات التي تتكون من الحمض النووي والحبيبية البروتينات المضادة للميكروبات. المجهر المناعي وطرق التحديد الكمي المستندة إلى الصورة لا تزال أدوات هامه لتكميم الخلايا العدلات تشكيل فخ. ومع ذلك ، هناك قيود رئيسيه علي الأساليب القائمة علي المناعي المتاحة حاليا لقياس الشبكات. الطرق اليدوية للقياس الكمي NET المستندة إلى الصورة غالبا ما تكون ذاتية ، عرضه للخطا ومملة للمستخدمين ، وخاصه المستخدمين غير المتمرسين. كما ان خيارات البرمجيات المتاحة حاليا للقياس الكمي هي اما شبه تلقائية أو تتطلب تدريبا قبل التشغيل. هنا ، ونحن نظهر تنفيذ طريقه القياس التلقائي القائم علي المناعي الصورة لتقييم تشكيل NET تسمي NETQUANT. البرنامج هو سهل الاستخدام ولها واجهه مستخدم رسوميه صديقه للمستخدم (GUI). وهي تعتبر المعلمات ذات الصلة بيولوجيا مثل زيادة في المساحة السطحية والحمض النووي: صافي نسبه البروتين علامة ، وتشوه الذرية لتحديد تشكيل NET. وعلاوة علي ذلك ، تم بناء هذه الاداه باعتبارها التطبيق المتاحة بحريه ، ويسمح للقياس الكمي دقه الخلية الواحدة والتحليل.

5 × 105 العدلات/مل تم المصنفة علي الشفتين وضعت في لوحه 12 بئر وحفز مع اما 20 نانومتر النقد الأبيض أو اليسار غير المحفزة لمده 150 دقيقه. وكانت العينات ثم الملطخة باستخدام الرئيسية الأرانب المضادة للإنسان الأضداد اللدائن المرنة ، والماعز الثانوية المضادة لأرنب فلوكوفيري م...

Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT

هنا ، نقدم بروتوكولا لتوليد الفخاخ العدلات خارج الخلية (الناموسيات) وتشغيل NETQUANT ، وهو خيار البرمجيات التلقائي بالبالكامل للقياس الكمي من الناموسيات في الصور المناعية.

التلقائي القائم علي الصورة الكمية من الفخاخ العدلات خارج الخلية باستخدام NETQUANT

Neutrophil extracellular traps (NETs) are web-like antimicrobial structures consisting of DNA and granule derived antimicrobial proteins. ...

هنا نقدم NETQUANT ، وهو نهج مؤتمتة بالكامل لقياس ناموسيات وصور المناعة. وهذا من شأنه أن يساعد الباحثين في إجراء تحليل صور قابلة للمقارنة من البيانات التي تم إنشاؤها من قبل العديد من المستخدمين والظروف. مزايا هذه التقنية هي سهولة الاستخدام ، وتحليل البيانات أحادي الخلية ، ومعايير متعددة لتقييم تشكيل الشبكة ، وتحليل غير متحيز لصور متعددة.تثبيت برنامج التحليل وفتحه. يمكن العثور على نسخة محدثة على أرشيف زينودو جيثب، أو موقع مختبر نوردونفلت. في علامة التبويب الإعداد، اختر مجلد مصدر للتحليل بالنقر فوق خيار الحصول على مسار في القائمة المصدر.حدد المجلد الذي يحتوي على تسلسلات الصور ليتم تحليلها. مرة أخرى، انقر فوق خيار الحصول على مسار في القائمة الهدف، وحدد المجلد الهدف لحفظ البيانات التالية تحليل الصورة. بعد ذلك، عند استخدام صور قناة منفصلة، قم بتسمية مجلدات القناة بحيث تتوافق قناة الحمض النووي مع وصمة الحمض النووي، وتصور قناة NET وصمة العدلات في الصور.أيضاً، اسم المجلد الذي يحتوي على ملفات صورة عنصر التحكم كـ عنصر تحكم. بعد ذلك، انقر فوق زر معلومات تحميل الصورة وتحميل البيانات الوصفية للصورة في البرنامج. ثم في القائمة الفرعية لترتيب القناة، حدد ترتيب القناة الصحيح الوارد في الصور.يساعد هذا على منع عدم التطابق العرضي. الآن انقر على زر إعداد البيانات للحصول على خصائص الصورة الأساسية من البيانات الخام وتحويل الصور. ثم تظهر الصور المحولة في القائمة الفرعية لأنواع العينات.انقر على قائمة نوع العينة، وحدد صورة من القائمة الفرعية وانقر على بيانات صورة العرض لعرض الصور انقسمت إلى الحمض النووي و العدلات خارج الخلية، أو قناة NET، على التوالي. لتقسيم الخلايا في قنواتها الخاصة، حدد علامة التبويب طريقة التجزئة، وحدد أسلوب في القائمة الفرعية للأسلوب لكل من قنوات الـ DNA و NET. يتم تعيين الأسلوب الافتراضي للتجزئة إلى التكيفية وهو الإعداد المستحسن.خيارات أخرى متاحة في البرنامج بما في ذلك حافة العالمية وsys.s. كما تم إدراج خيار مستجمعات المياه للمساعدة في التمييز بين الخلايا الموجودة بشكل وثيق أو الخلايا NETs. أيضا في علامة التبويب تجزئة، انقر على عينة عنصر تحكم المقطع الخيار.ثم حدد PMA من نوع القائمة الفرعية للنموذج وانقر على خيار الدفعة لبدء تجزئة جميع الصور المدرجة في مجموعة البيانات. بعد ذلك ، حدد الصور في قائمة نوع العينة وانقر على زر بيانات صورة العرض لتصور والتحقق من صحة أقنعة الصور الثنائية لكل من أقنعة الحمض النووي وNET التي تم إنشاؤها بعد التجزئة. الآن، في علامة التبويب التحليل، انقر على زر تحديد عتبة لتحليل عينات التحكم.ثم، على الجانب الأيمن، تغيير نوع العينة إلى PMA وانقر فوق الزر الحصول على خصائص الخلية لإكمال تحليل العينات حفز. بعد ذلك، حدد صورة من القائمة الفرعية لنوع العينة وانقر على زر بيانات صورة العرض لعرض التراكب وعدد الخلايا والخلايا تشكيل الشبكة في الصورة. تبدأ بتحديد العينة من القائمة الفرعية لنوع العينة.يمكن اختيار الصور الفردية من القائمة الفرعية لنوع العينة للتحليل أو يمكن تحليل مجموعة كاملة من الصور عن طريق تحديد خيار الدفعة. بمجرد تحديد، انقر على زر تحليل NETs لإكمال التحليل. ضبط معايير NET يدويًا للحصول على نتائج مثالية لعينة معينة.قارن بين NETs المحددة مع الصور الأصلية لتقييم جودة التعريف. بمجرد الانتهاء من هذه الخطوة، يمكن تطبيق معايير NET عبر كافة الصور في مجموعة البيانات. يتم أيضاً تطبيق أية تغييرات يتم إجراؤها على معايير NET في نفس الوقت على كافة نماذج التحكم.فحص ملخص البيانات في القائمة الفرعية لبيانات الخلية، حيث يتم عرض عدد الصور وعدد الخلايا لكل صورة والنسبة المئوية لـ NETs لكل صورة. أدخل علامة التبويب الإخراج لتحديد مخرجات النتائج وعرضها. استكشاف ومقارنة مختلف مخرجات البيانات الناتجة عن تحليل السيطرة وعينات PMA المعالجة عن طريق اختيار شكل الإخراج والنقر على زر نتائج المخرجات.بعد ذلك، قم بتشغيل ملف جدول بيانات النتائج CSV لاستكشاف بيانات الخلية الواحدة وانقر على ملفات PDF النتائج لتصور توزيع منطقة NET ونسبة الحمض النووي إلى NET في العينات. يشير الخط الأحمر إلى قيمة العتبة في الرسومات البيانية. وأخيرا، انقر على نتائج ملف توزيع ثنائي المتغيرات لتحديد منطقة NET مقابل شكل الحمض النووي.هنا، تم تحليل 15 صورة من العدلات التحكم و 15 صورة من العدلات حفز PMA في أقل من عشر دقائق. تم حساب العدد الإجمالي للخلايا وتم تحديد النسبة المئوية للخلايا ذات الفخاخ العدلية خارج الخلية باستخدام طريقة القياس الكمي الآلي الموضحة في هذه المقالة. وتبين هذه النتائج أن العدلات التي تحفزها PMA لديها مساحة أكبر، وزيادة في التشوه النووي، ونسبة أعلى من الحمض النووي إلى الشبكة من عينات التحكم.عندما يتم دمجها في رسم بياني ثلاثي الأبعاد، تميل العينات المحفزة لـ PMA إلى إظهار مناطق التجمعات المُحكمة من عينات التحكم. أثناء محاولة الإجراء، من المهم أن نتذكر أنه على الرغم من أن تم اختبار سير العمل باستخدام جهات مانحة متعددة، فمن المستحسن أن يقرر المستخدم على معلمات البرنامج بشكل مناسب استناداً إلى مجموعة البيانات الفردية.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Neutrophil Extracellular Traps: How to Generate and Visualize Them

الفخاخ خارج الخلية العدلات : كيفية إنشاء وتصور لهم

Neutrophil granulocytes are the most abundant group of leukocytes in the peripheral blood. As professional phagocytes, they engulf bacteria and kill them ...

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps (NETs) Isolation and Handling

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps NETs Isolation and Handling

المبسطة الإنسان الفخاخ خارج الخلية العدلات (المستجدة) عزل والمناولة

Neutrophil Extracellular Traps (NETs) have been recently identified as part of the neutrophil&#8217;s antimicrobial armamentarium. Apart from their role ...

Methods to Study Lipid Alterations in Neutrophils and the Subsequent Formation of Neutrophil Extracellular Traps

طرق لدراسة الدهون التعديلات في العدلات وتشكيل لاحقة من الفخاخ خارج الخلية العدلات

Lipid analysis performed by high performance thin layer chromatography (HPTLC) is a relatively simple, cost-effective method of analyzing a broad range of ...

A Simple Fluorescence Assay for Quantification of Canine Neutrophil Extracellular Trap Release

والإسفار الفحص بسيطة لالكمي من الكلاب خارج الخلية العدلات فخ الإصدار

Neutrophil extracellular traps are networks of DNA, histones and neutrophil proteins released in response to infectious and inflammatory stimuli. Although ...

Visualizing Macrophage Extracellular Traps Using Confocal Microscopy

تصور بلعم الفخاخ خارج الخلية باستخدام المجهر [كنفوكل]

A primary method used to define the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) is confocal microscopy. We have modified established confocal ...

Identification of Neutrophil Extracellular Traps in Paraffin-Embedded Feline Arterial Thrombi using Immunofluorescence Microscopy

تحديد الفخاخ نيوتروفيل خارج الخلية في البارافين جزءا لا يتجزأ من الخيط الشرياني Thrombi باستخدام المجهر Immunofluorescence

Neutrophil extracellular traps (NETs), composed of cell-free DNA (cfDNA) and proteins like histones and neutrophil elastase (NE), are released by ...

Morphological and Compositional Analysis of Neutrophil Extracellular Traps Induced by Microbial and Chemical Stimuli

التحليل المورفولوجي والتركيبي لمصائد العدلات خارج الخلية التي تسببها المحفزات الميكروبية والكيميائية

Neutrophils function as the first line of cellular defense in an innate immune response by employing diverse mechanisms, such as the formation of ...

Quantifying Myeloperoxidase-DNA and Neutrophil Elastase-DNA Complexes from Neutrophil Extracellular Traps by Using a Modified Sandwich ELISA

القياس الكمي لمعقدات الميلوبيروكسيديز - الحمض النووي و Neutrophil Elastase-DNA من مصائد العدلات خارج الخلية باستخدام شطيرة ELISA المعدلة

Certain stimuli, such as microorganisms, cause neutrophils to release neutrophil extracellular traps (NETs), which are basically web-like structures ...

Staining and Imaging to Visualize Neutrophil Extracellular Traps

Immunofluorescence Imaging of Neutrophil Extracellular Traps in Human and Mouse Tissues

Neutrophil Extracellular Traps Imaging in Human and Mouse Tissues (Video) | JoVE

التصوير المناعي لمصائد العدلات خارج الخلية في الأنسجة البشرية والفأر

Neutrophil extracellular traps (NETs) are released by neutrophils as a response to bacterial infection or traumatic tissue damage but also play a role in ...