Name: automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant
Uploaded: 2019-11-27T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

Arbejdet blev finansieret af Crafoord Foundation (TM og PN), den svenske regerings forskningsbevilling (PN, TM), det svenske Forskningsråd (PN) og Groschinsky Foundation (TM, PN).

Den etiske komité på Lunds Universitet godkendte indsamlingen af venøs blod fra raske frivillige i overensstemmelse med Helsingfors-erklæringen (2013/728). Alle frivillige meddelte deres skriftlige samtykke.
1. isolering af perifert blod neutrofiler ved hjælp af tæthed-gradient centrifugering
<ol><li>Indsamle humant venøs blod i rør, der indeholder heparin og tillade rørene at nå stuetemperatur. Bemærk: der kræves mindst 16 mL blod fra en sund donor for at give en tilstrækkel...

<ol>
	<li>Nauseef, W. M., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+at+work.">Neutrophils at work.</a> Nature Immunology. 15 (7), 602-611 (2014).</li><li>Borregaard, N., Cowland, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granules+of+the+human+neutrophilic+polymorphonuclear+leukocyte.">Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte.</a> Blood. 89 (10), 3503-3521 (1997).</li><li>Nordenfelt, P., Tapper, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phagosome+dynamics+during+phagocytosis+by+neutrophils.">Phagosome dynamics during phagocytosis by neutrophils.</a> Journal of Leukocyte Biology. 90 (2), 271-284 (2011).</li><li>Brinkmann, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+kill+bacteria.">Neutrophil extracellular traps kill bacteria.</a> Science. 303 (5663), 1532-1535 (2004).</li><li>Sorensen, O. E., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+-+the+dark+side+of+neutrophils.">Neutrophil extracellular traps - the dark side of neutrophils.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (5), 1612-1620 (2016).</li><li>Yipp, B. G., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETosis:+how+vital+is+it?.">NETosis: how vital is it?.</a> Blood. 122 (16), 2784-2794 (2013).</li><li>Jorch, S. K., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+role+for+neutrophil+extracellular+traps+in+noninfectious+disease.">An emerging role for neutrophil extracellular traps in noninfectious disease.</a> Nature Medicine. 23 (3), 279-287 (2017).</li><li>Fuchs, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+cell+death+program+leads+to+neutrophil+extracellular+traps.">Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps.</a> J Cell Biol. 176 (2), 231-241 (2007).</li><li>Mohanty, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mechanism+for+NETosis+provides+antimicrobial+defense+at+the+oral+mucosa.">A novel mechanism for NETosis provides antimicrobial defense at the oral mucosa.</a> Blood. 126 (18), 2128-2137 (2015).</li><li>Hakkim, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+Raf-MEK-ERK+pathway+is+required+for+neutrophil+extracellular+trap+formation.">Activation of the Raf-MEK-ERK pathway is required for neutrophil extracellular trap formation.</a> Nature Chemical Biology. 7 (2), 75-77 (2011).</li><li>Brinkmann, V., Goosmann, C., Kuhn, L. I., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+quantification+of+in+vitro+NET+formation.">Automatic quantification of in vitro NET formation.</a> Frontiers in Immunology. 3, 413 (2012).</li><li>Coelho, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+determination+of+NET+(neutrophil+extracellular+traps)+coverage+in+fluorescent+microscopy+images.">Automatic determination of NET (neutrophil extracellular traps) coverage in fluorescent microscopy images.</a> Bioinformatics. 31 (14), 2364-2370 (2015).</li><li>Mohanty, T., Sorensen, O. E., Nordenfelt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETQUANT:+Automated+Quantification+of+Neutrophil+Extracellular+Traps.">NETQUANT: Automated Quantification of Neutrophil Extracellular Traps.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1999 (2017).</li><li>Kaplan, M. J., Radic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps:+double-edged+swords+of+innate+immunity.">Neutrophil extracellular traps: double-edged swords of innate immunity.</a> Journal of Immunology. 189 (6), 2689-2695 (2012).</li><li>Cedervall, J., Olsson, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+Gone+Astray+-+NETs+in+Cancer.">Immunity Gone Astray - NETs in Cancer.</a> Trends in Cancer. 2 (11), 633-634 (2016).</li><li>Ginley, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computational+detection+and+quantification+of+human+and+mouse+neutrophil+extracellular+traps+in+flow+cytometry+and+confocal+microscopy.">Computational detection and quantification of human and mouse neutrophil extracellular traps in flow cytometry and confocal microscopy.</a> Scientific Reports. 7 (1), 17755 (2017).</li></ol>

Netto dannelsen er en relativt nylig tilføjelse til det mangfoldige neutrofiltal,4 og der har været en mærkbar bølge af interesse for at studere virkningen af NETs i en bred vifte af forskningsområder5,7,14,15. Erhvervelse af billeder ved hjælp af immunofluorescens mikroskopi og efterfølgende billedbaserede kvantificering er en meget anvendt metode til kvantificer...

Neutrofiler er afgørende mediatorer af medfødte vært forsvar svar mod en bred vifte af mikrobielle patogener1. De udfører deres antimikrobielle funktioner ved at frigive deres granulat, der indeholder en bred vifte af antimikrobielle proteiner2, producerer reaktive ilt arter (ros) og hypochlorit1, og gennem fagocytose3. Desuden er Brink Mann et al. 4 beskrev neutrofile ekstracellulære fælder (NETs) som en ny mekanisme, hvormed neutrofiler fælde og eliminere invaderende patogener. Siden deres opdagelse lidt over et årti siden4, har NETs været impliceret i en bred vifte af infektiøse5,6 og ikke-infektiøse7 morbiditeter. NETTO dannelse er en aktiv proces og resulterer i ekstrudering af kromatin DNA belagt med granulerede antimikrobielle proteiner8. Nogle af de vigtigste ændringer i cellulære og nukleare morfologi forbundet med netto dannelse omfatter tab af nuklear morfologi, kromatin dekoncentration, mobilisering af granulat proteiner fra cytoplasmaet til kernen og en stigning i den nukleare og cellulære diameter8,9.
De web-lignende net, som kan fremstå som diffuse strukturer lidt større end cellen eller som strukturer flere gange større end en enkelt neutrofile betragtes som indikatorer for netosis5,10. Ved hjælp af Fluorescens mikroskopi kan NETs påvises ved sondering af DNA med en fluorescerende sonde såsom 4 ', 6-diamidino-2-phenylindol (DAPI) og ved immunofluorescens farvning mod NET-bundne proteiner såsom neutrofilelastase. Kvantificering af overlappende områder for farvning af DNA og NETBUNDNE proteiner bestemmer det samlede areal under garn i et billede11.
En række billedanalyse muligheder er tilgængelige til at udføre fluorescens billedbaserede kvantificering af NETs11,12. Men disse software muligheder nuværende begrænsninger i ikke at være brugervenlig og/eller fuldt automatiseret. I denne artikel demonstrerer vi driften af NETQUANT13, en frit tilgængelig app, der kan udføre upartisk fuldt automatiseret immunofluorescens mikroskopi billedbaseret netto kvantificering. Den app har en brugervenlig grafisk grænseflade (GUI) og kan udføre en enkelt celle analyse. Softwaren kvantificerer Netose i et billede ved at detektere de morfologiske ændringer i området af DNA-NET-bundet markør, kromatin dekompensation forbundet deformation af kernen og stigning i DNA: netto-bundet protein ratio. Tilsammen giver de flere netto definitionskriterier mulighed for en stringent netto kvantificering på tværs af flere datasæt på en upartisk måde.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Heparinised plastic tubes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>367885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lymphoprep</td>
			<td>Axis-Shield</td>
			<td>114547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 with L-Glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11835-030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.547.004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-well Tissue culture plates</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10626491</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>#1 Coverslips 10mm</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>CS10100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>631-0098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary anti-human elastase</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>DAKO rabbit 1373, contract immunization</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary fluorophore conjugated goat anti-rabbit</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>A-11072, A-11070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PROLONG-Gold Antifade reagent with DAPI</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>P36930</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G9023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>79346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Ti-E Epifluorescence microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCD camera</td>
			<td>Andor Zyla</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plan Apochromat 20x, 40x objectives</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windows 10</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>macOS Sierra 10.12</td>
			<td>Apple</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant

Neutrofile ekstrellulære fælder (NETs) er web-lignende antimikrobielle strukturer bestående af DNA og granulat afledte antimikrobielle proteiner. Immunofluorescens mikroskopi og billedbaserede kvantificeringsmetoder er fortsat vigtige værktøjer til kvantificering af neutrofile ekstracellulær fælde dannelse. Der er imidlertid væsentlige begrænsninger for immunofluorescens baserede metoder, som i øjeblikket er tilgængelige for kvantificering af garn. Manuelle metoder til billedbaseret netto kvantificering er ofte subjektive, tilbøjelige til at fejl og kedelig for brugere, især ikke-erfarne brugere. Også, i øjeblikket tilgængelige software muligheder for kvantificering er enten semi-automatiske eller kræver uddannelse før drift. Her viser vi implementeringen af en automatiseret immunofluorescence-baseret billed kvantificerings metode til at evaluere netto dannelsen kaldet NETQUANT. Softwaren er nem at bruge og har en brugervenlig grafisk brugergrænseflade (GUI). Det betragter biologisk relevante parametre såsom en stigning i overfladearealet og DNA: netto markør protein ratio, og nuklear deformation at definere netto dannelse. Desuden er dette værktøj er bygget som en frit tilgængelig app, og giver mulighed for enkelt-celle opløsning kvantificering og analyse.

5 x 105 neutrofiler/ml blev seedet på dæksedler anbragt i en 12-brønd plade og stimuleret med enten 20 Nm PMA eller venstre ustimuleret i 150 min. Prøverne blev derefter plettet ved hjælp af primære kanin anti-humane neutrofile elastase antistoffer, sekundær ged anti-kanin fluoroforet konjugeret antistoffer og dapi-en fluorescently mærket farvestof, der pletter DNA (Se tabellen over materialer for detaljer). Mindst 5 billeder blev derefter erhvervet ved...

Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT

Her præsenterer vi en protokol til generering af neutrofile ekstracellulære fælder (NETs) og operativ NETQUANT, en fuldautomatisk software option til kvantificering af net i immunofluorescens billeder.

Automatiseret billedbaseret kvantificering af neutrofile ekstracellulære fælder med NETQUANT

Neutrophil extracellular traps (NETs) are web-like antimicrobial structures consisting of DNA and granule derived antimicrobial proteins. ...

Her præsenterer vi NETQUANT, en fuldautomatisk tilgang til kvantificering nets og immunofluorescens billeder. Dette vil hjælpe forskere med at foretage sammenlignelige billedanalyser fra data genereret af flere brugere og betingelser. Fordelene ved denne teknik er brugervenligheden, enkeltcelledataanalyse, flere kriterier for at evaluere NET-formation og en upartisk analyse af flere billeder.Installer og åbn analysesoftwaren. En opdateret version kan findes på Zenodo GitHub arkiv, eller Nordonfelt Lab hjemmeside. Vælg en kildemappe til analyse under fanen Opsætning ved at klikke på indstillingen hent sti i kildemenuen.Vælg den mappe, der indeholder de billedsekvenser, der skal analyseres. Igen skal du klikke på indstillingen hent sti i målmenuen, og vælg destinationsmappen for at gemme dataene efter billedanalyse. Dernæst, når du bruger separate kanal billeder, navn kanalen mapper, således at DNA-kanal svarer til den nukleare DNA-pletten, og NET-kanalen skildrer neutrofil elastase plet i billederne.Navnd også på den mappe, der indeholder kontrolfilerne, som kontrolelement. Klik derefter på knappen Indlæs billedoplysninger, og indlæs billedmetadataene i softwaren. Vælg derefter den korrekte kanalrækkefølge i kanalrækkefølgen i undermenuen.Dette hjælper med at forhindre utilsigtede uoverensstemmelser. Klik nu på knappen Forbered data for at hente primære billedegenskaber fra de rå data og konvertere billederne. De konverterede billeder vises derefter i undermenuen for eksempeltyper.Klik på eksempeltypemenuen, vælg et billede i undermenuen, og klik på vis billeddata for at få vist billederne opdelt i henholdsvis DNA og Neutrophil Extracellular Trap eller NET-kanalen. Hvis du vil segmentere cellerne i deres respektive kanaler, skal du vælge fanen segmenteringsmetode og vælge en metode i menuen metodeunder for både DNA- og NET-kanalerne. Standardsegmenteringsmetoden er indstillet til adaptiv og er den anbefalede indstilling.Andre muligheder er tilgængelige i softwaren, herunder global kant og chanverse. Der er også medtaget en vandskelindstilling for at hjælpe med at skelne mellem tæt placerede celler eller NET'er. Klik også på indstillingen for segmentering af kontroleksempler.Vælg derefter PMA fra eksempeltypeundermenuen, og klik på batchindstillingen for at begynde segmenteringen af alle billeder, der er inkluderet i datasættet. Vælg derefter billederne i eksempeltypemenuen, og klik på knappen vis billeddata for at visualisere og validere de binære billedmasker for både dna- og NET-masker, der er genereret efter segmentering. Klik nu på knappen af afgørende tærskel under analysefanen for at analysere kontroleksemplerne.Derefter, på højre side, ændre prøven type til PMA og klik på get celle egenskaber knappen for at fuldføre analysen af de stimulerede prøver. Vælg derefter et billede i undermenuen af eksempeltypen, og klik på knappen vis billeddata for at få vist overlejringen og antallet af celler og NET-dannende celler i billedet. Begynd med at vælge eksemplet i undermenuen for eksempeltypen.Individuelle billeder kan vælges fra prøvetypens undermenu til analyse, eller hele batchen af billeder kan analyseres ved at vælge batchindstillingen. Når du er valgt, skal du klikke på knappen Analysér NETs for at fuldføre analysen. Juster NET-kriterierne manuelt for at give optimale resultater for en given prøve.Sammenlign identificerede NET'er med de originale billeder for at vurdere kvaliteten af identifikationen. Når dette trin er fuldført, kan NET-kriterierne anvendes på tværs af alle billeder i datasættet. Eventuelle ændringer af NET-kriterierne anvendes også samtidig på alle kontroleksempler.Undersøg dataoversigten i undermenuen celledata, hvor antallet af billeder, celletal pr. billede og procentdelen af NET'er pr. billede vises. Angiv outputfanen for at vælge og få vist resultatudgangene. Udforsk og sammenlign de forskellige dataoutput, der genereres fra analysen af kontrol- og PMA-behandlede prøver, ved at vælge outputformen og klikke på outputresultatknappen.Start derefter resultatdatatabelen CSV-fil for at udforske enkeltcelledata og klikke på resultaterne af PDF-filerne for at visualisere NET-områdefordelingen og DNA-forholdet i prøverne. Den røde linje angiver tærskelværdien i graferne. Endelig skal du klikke på resultaterne bivariate distributionsfil for at bestemme NET-området versus form af DNA.Her blev 15 billeder af kontrol neutrofiler og 15 billeder af PMA-stimulerede neutrofiler analyseret på under ti minutter. Det samlede antal celler blev talt, og procentdelen af celler med Neutrofil ekstracellulære fælder blev bestemt ved hjælp af den automatiserede kvantificeringsmetode, der er beskrevet i denne artikel. Disse resultater viser, at PMA-stimulerede neutrofiler har et større område, en stigning i nuklear deformation, og en højere DNA til NET-forholdet end kontrol prøver.Når de kombineres i en 3D-graf, har de PMA-stimulerede prøver tendens til at vise områder med stramme grupper end kontrolprøverne. Mens du forsøger proceduren, er det vigtigt at huske, at selvom arbejdsprocessen blev testet ved hjælp af flere donorer, anbefales det, at brugeren skal beslutte, om softwareparametrene er korrekt baseret på det enkelte datasæt.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Neutrophil Extracellular Traps: How to Generate and Visualize Them

Neutrophil granulocytes are the most abundant group of leukocytes in the peripheral blood. As professional phagocytes, they engulf bacteria and kill them ...

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps (NETs) Isolation and Handling

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps NETs Isolation and Handling

Forenklet human neutrofil Ekstracellulære Fælder (NET) Isolering og Håndtering

Neutrophil Extracellular Traps (NETs) have been recently identified as part of the neutrophil&#8217;s antimicrobial armamentarium. Apart from their role ...

Methods to Study Lipid Alterations in Neutrophils and the Subsequent Formation of Neutrophil Extracellular Traps

Metoder til at studere Lipidforandringer i neutrofiler og den efterfølgende dannelse af neutrofile ekstracellulær fælder

Lipid analysis performed by high performance thin layer chromatography (HPTLC) is a relatively simple, cost-effective method of analyzing a broad range of ...

A Simple Fluorescence Assay for Quantification of Canine Neutrophil Extracellular Trap Release

A Simple Fluorescens Assay for Kvantificering af Canine Neutrofil Ekstracellulær Trap Frigivelse

Neutrophil extracellular traps are networks of DNA, histones and neutrophil proteins released in response to infectious and inflammatory stimuli. Although ...

Visualizing Macrophage Extracellular Traps Using Confocal Microscopy

Visualisere makrofag ekstracellulære fælder ved hjælp af konfokalmikroskopi

A primary method used to define the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) is confocal microscopy. We have modified established confocal ...

Identification of Neutrophil Extracellular Traps in Paraffin-Embedded Feline Arterial Thrombi using Immunofluorescence Microscopy

Identifikation af neutrofile ekstracellulære fælder i paraffin-embedded feline arteriel trombose ved hjælp af Immunofluorescence Mikroskopi

Neutrophil extracellular traps (NETs), composed of cell-free DNA (cfDNA) and proteins like histones and neutrophil elastase (NE), are released by ...

Morphological and Compositional Analysis of Neutrophil Extracellular Traps Induced by Microbial and Chemical Stimuli

Morfologisk og sammensætningsanalyse af neutrofile ekstracellulære fælder induceret af mikrobielle og kemiske stimuli

Neutrophils function as the first line of cellular defense in an innate immune response by employing diverse mechanisms, such as the formation of ...

Quantifying Myeloperoxidase-DNA and Neutrophil Elastase-DNA Complexes from Neutrophil Extracellular Traps by Using a Modified Sandwich ELISA

Kvantificering af myeloperoxidase-DNA og neutrofile elastase-DNA-komplekser fra neutrofile ekstracellulære fælder ved hjælp af en modificeret sandwich-ELISA

Certain stimuli, such as microorganisms, cause neutrophils to release neutrophil extracellular traps (NETs), which are basically web-like structures ...

Staining and Imaging to Visualize Neutrophil Extracellular Traps

Immunofluorescence Imaging of Neutrophil Extracellular Traps in Human and Mouse Tissues

Neutrophil Extracellular Traps Imaging in Human and Mouse Tissues (Video) | JoVE

Immunofluorescensbilleddannelse af neutrofile ekstracellulære fælder i væv fra mennesker og mus

Neutrophil extracellular traps (NETs) are released by neutrophils as a response to bacterial infection or traumatic tissue damage but also play a role in ...